Hela细胞简介
Hela细胞
Hela细胞在细胞死亡研究中的应用
• 利用Hela细胞模型研究细胞凋亡和自噬等细胞死亡途径
• 通过检测细胞内凋亡相关蛋白的表达和细胞死亡途径的激活,研究细胞死亡途径的
调控机制
Hela细胞在细胞信号传导与通路研究中的价值
Hela细胞在细胞信号传导研究中的应用
Hela细胞研究
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01
Hela细胞的基本介绍与应用领域
Hela细胞的来源与历史背景
Hela细胞来源于一位美国妇女的宫颈癌细胞
• 1951年,美国科学家George Gey和同事从一名宫颈癌患者的活体组
织中分离出Hela细胞
• Hela细胞具有无限增殖的能力,成为生物学研究中常用的细胞模型
敲除
敲入
• 通过基因敲除,研究细胞内基因的功能和调控机制
• 通过基因敲入,研究细胞内基因的功能和调控机制
Hela细胞在基因治疗研究中的潜在应用
Hela细胞在基因治疗研究中的应用
• 利用Hela细胞模型研究基因治疗的方法和效果
• 通过基因治疗,实现对肿瘤细胞的治疗和预防
Hela细胞在基因治疗研究中的潜在问题
Hela细胞在细胞器功能与蛋白质组学研究中的作用
Hela细胞在细胞器功能研究中的应用
• 利用Hela细胞模型研究细胞内细胞器的功能和调控机制
• 通过检测细胞内细胞器相关蛋白的表达和功能,研究细胞器的功能和调控机制
Hela细胞在蛋白质组学研究中的应用
• 利用Hela细胞模型研究细胞内蛋白质的表达和调控机制
Hela细胞转染实验报告
Hela细胞的传代培养及生长周期观察HE染色观察高学敏生36 2013012322一、实验背景(一)关于Hela细胞Hela细胞是源自美国妇女Henrietta Lacks的子宫颈癌细胞,取于1951年,属于增殖型表皮癌细胞。
在体外培养条件下,经过筛选,目前实验使用的Hela 细胞为无限细胞系,在适宜条件下可以无限分裂,不会衰退,可以连续传代。
经过六十多年,Hela细胞已经被培养出多个细胞系,它几乎成为细胞生物学中的一种“模式生物”。
似癌细胞的特征,其核型已非二倍体型,而是非整数倍体(aneuploid)。
2013年Andrew Adey等人在Nature发表的研究表明,Hela细胞的基因组相当稳定,可将不同细胞系区分开的点突变和基因拷贝数改变相当少1,这是Hela细胞的一大特点。
(二)原代培养、传代培养、衰退进行细胞体外培养前,最初需要从活体中获得细胞。
从体内获得细胞进行的首次培养为原代培养。
当原代培养细胞增殖达到一定密度后,需要做继代培养,被称为传代培养。
细胞在体外培养过程中的群体生存状况与在完整机体内的生存与衰老死亡基本一致;本次所做的Hela细胞实验为Hela细胞传代实验,即将已长到相当密度的原培养皿中的Hela细胞转移至新培养皿中培养。
在原代培养期,细胞增殖能力弱,第一次传代后,部分细胞可以重新贴壁,此时细胞增殖能力增强;另外亦是为了获得更多的细胞,因此进行传代操作。
培养的组织细胞在体外可以反复传代十几次左右,若传代十几次后细胞进入衰退阶段并死亡,则该细胞系称为有限细胞系;若在衰退阶段,部分细胞的遗传特性发生改变,可以无限传代,则该部分细胞将发展为无限细胞系。
Hela 细胞系即为无限细胞系,已历经六十多年的传代培养。
(三)贴附型细胞与悬浮型细胞在体外培养时,根据细胞能否贴附于支持物上分为贴附型细胞和悬浮型细胞两类。
大多数细胞系属于贴附型细胞,血液中的白细胞和某些癌细胞属于悬浮型细胞。
Hela细胞属于贴附型细胞,它需要贴附于支持物上才可能存活并增殖。
《HeLa细胞长期传代过程中基因组突变动态变化》范文
《HeLa细胞长期传代过程中基因组突变动态变化》篇一一、引言HeLa细胞,以其发现者和研究者Henrietta Lacks的名字命名,是生物学和医学研究中的关键模型。
该细胞最初来自Lacks女士的子宫颈癌细胞,由于具有持续分裂的特性,成为了细胞学、遗传学和药物研发等领域的研究工具。
然而,在长期传代过程中,这些细胞所发生的基因组突变却引发了人们对遗传不稳定性及其相关疾病的深刻思考。
本文将针对HeLa细胞在长期传代过程中的基因组突变动态变化进行详细分析。
二、HeLa细胞的起源与传代HeLa细胞最初由George Gey在1951年从Lacks女士的宫颈癌肿瘤中分离得到。
从最初的起始培养到今天的实验中,已经进行了大量的传代和筛选。
长期的细胞培养不仅改变了其生长环境,同时也影响了细胞的基因组结构。
三、基因组突变的类型与机制在长期传代过程中,HeLa细胞的基因组发生了多种类型的突变,包括点突变、插入/删除突变、染色体变异等。
这些突变主要由于DNA复制错误、DNA损伤修复机制异常、端粒功能异常等因素引起。
此外,环境因素如培养基的成分、温度、pH值等也可能影响基因组突变的类型和频率。
四、基因组突变的动态变化在HeLa细胞的长期传代过程中,基因组突变的发生率随传代次数的增加而增加。
这种动态变化主要表现在以下几个方面:1. 突变累积:随着传代次数的增加,HeLa细胞中发生的突变数量逐渐累积,形成各种突变类型。
2. 突变的种类:不同的基因突变可能具有不同的生物功能,影响细胞的生长、分裂和功能表达。
某些突变的累积可能导致细胞的生长异常和疾病发生。
3. 突变的选择性:在长期传代过程中,部分具有优势的突变可能被保留下来并继续传递下去,而其他不利的突变则可能被淘汰。
这种选择性的过程导致了基因组的动态变化。
五、基因组突变对HeLa细胞的影响基因组突变对HeLa细胞的影响是多方面的:1. 细胞生长:基因组突变可能影响细胞的生长速度和生长模式,导致细胞在传代过程中出现异常增殖或衰老等现象。
hct 116、hela、MEFs细胞参数介绍.doc
HELAHeLa (ATCC® CCL-2™)ATCC:Hela细胞,源于黑人31岁女性,子宫颈腺癌,是一种附着型上皮细胞,要求存于液氮中。
These cells are a suitable transfection host.This cell line can be used to screen for Escherichia coli strains with invasive potential.Biosafety Level:(2 [Cells contain human papilloma virus]Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.)Complete Growth Medium:The base medium for this cell line is ATCC-formulated Eagle's Minimum Essential Medium, Catalog No. 30-2003. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum to a final concentration of 10%.Subculturing(接种):Volumes used in this protocol are for a 75 cm2flask; proportionally reduce or increase amount of dissociation medium for culture vessels of other sizes. CorningT-75 flasks (catalog #430641) are recommended for subculturing this product.1.Remove and discard culture medium.2.Briefly rinse the cell layer with 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA solution to remove alltraces of serum which contains trypsin inhibitor.3.Add 2.0 to 3.0 mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an invertedmicroscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 15 minutes).Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting forthe cells to detach. Cells that are difficult to detach may be placed at 37C to facilitate dispersal.4.Add 6.0 to 8.0 mL of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting.5.Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels.6.Incubate cultures at 37C.Subcultivation Ratio:A subcultivation ratio of 1:2 to 1:6 is recommendedMedium Renewal:2 to 3 times per weekCryopreservation Freeze Medium: Complete growth medium supplemented with 5%(v/v) DMSOStorage Temperature: Liquid nitrogen vapor phaseCulture ConditionsAtmosphere: Air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%Temperature: 37°C论坛:贴壁生长,铺路石状,长得快,2-3天传代一次,传代不及时会造成老化的细胞堆积,看起来很脏。
Hela细胞
Hela细胞
Hela细胞,是来源于1951年一个非洲裔美国女性Henrietta Lacks的宫颈癌细胞。
这一种细胞被称为永生细胞,因为它具有不寻常的生长特性,能够无限制地分裂增殖。
Hela细胞的独特之处在于其快速繁殖速度和对各种研究的广泛应用。
Hela细胞的发现是细胞学领域的一个重大突破。
通过研究Hela细胞,科学家能够更深入地了解细胞的生长和分裂机制。
这些细胞已经被广泛用于医学研究、疾病治疗和药物开发等领域。
Hela细胞的广泛应用也引发了一些伦理和法律问题。
Henrietta Lacks的细胞在没有她本人或家人的知情同意的情况下被使用,引发了对个人隐私权和细胞样本所有权的讨论。
这些问题促使人们重新审视细胞样本的使用和保护,以确保公平和透明。
虽然Hela细胞在科学研究中发挥了重要作用,但人们也要意识到细胞样本的来源以及使用的伦理和法律问题。
通过更加谨慎和透明地处理细胞样本,可以确保科学研究的合理性和公正性。
总的来说,Hela细胞的发现对细胞生物学和医学研究产生了深远影响,但我们也必须关注其中涉及的伦理和法律问题,以建立更加公正和透明的科研体系。
hela细胞的名词解释
hela细胞的名词解释Hela细胞是一种人类细胞系,以原始组织样本提取的一种女性宫颈癌细胞为基础建立起来的。
这个细胞系的命名来源于宫颈癌的患者——Henrietta Lacks,因此得名为Hela细胞。
Hela细胞被广泛应用于医学研究、药物开发和生物技术等领域,其重要性不言而喻。
1. Hela细胞的历史Hela细胞的历史可以追溯到1951年。
当时,Henrietta Lacks作为宫颈癌患者,接受了一次细胞样本的提取。
她的癌细胞被送往约翰·霍普金斯医院(Johns Hopkins Hospital)的一个实验室进行研究。
令人惊讶的是,这些细胞没有遵循正常细胞分裂周期,而是继续快速增殖,形成了一条长时间存活的细胞系,这就是Hela细胞。
2. Hela细胞的特点Hela细胞的特点之一是其极强的增殖能力。
相比于正常细胞,Hela细胞分裂的速度更快,增殖的数量更大,可以在较短的时间内大量生产细胞。
这使得Hela细胞成为许多实验室研究的理想材料。
此外,Hela细胞被认为是无限制地增殖的恶性肿瘤细胞。
这个特点使得研究人员能够进行长期观察和实验,以更好地了解癌细胞的行为和生物学特性。
Hela细胞的多样性和可变性也使其成为医学研究的理想模型,因为它们可以代表不同的宫颈癌亚型。
3. Hela细胞在医学研究中的应用Hela细胞在医学研究中发挥了重要作用。
首先,Hela细胞可以在体外培养,这使得研究人员能够更好地理解细胞的行为和特性。
通过研究Hela细胞,科学家们可以研究癌细胞的增殖机制、抗癌药物的疗效以及病毒的感染途径等。
其次,Hela细胞在药物开发中也发挥了重要作用。
研究人员可以使用Hela细胞作为模型,在实验室条件下测试新型抗癌药物的疗效和毒副作用。
这种方法可以更好地理解药物在癌细胞上的作用机制,从而为药物的研发和治疗提供参考。
此外,Hela细胞还被用于生物技术研究中。
由于其不受限制的增殖能力,Hela细胞可用于大规模的细胞培养和生产。
Hela细胞的传代培养
利用Hela细胞进行药物筛选和毒性测试,评估药物对肿瘤细胞的抑 制作用和安全性。
肿瘤免疫治疗研究
利用Hela细胞研究肿瘤免疫应答机制,为肿瘤免疫治疗提供新的策 略和靶点。
基因治疗与细胞治疗
利用Hela细胞作为载体或靶细胞,开展基因治疗和细胞治疗的研究, 为遗传性疾病和肿瘤等疾病的治疗提供新途径。
Hela细胞的传代培养
目录
• 引言 • Hela细胞的传代培养过程 • Hela细胞传代培养的注意事项 • Hela细胞传代培养的应用 • 未来展望
01 引言
背景介绍
01
Hela细胞,也称为海拉细胞,是 一种源自子宫颈癌的细胞系,是 医学和生物学研究中广泛使用的 细胞模型。
02
Hela细胞的传代培养是维持其生 长和活性的重要手段,对于研究 癌症、病毒、药物筛选等领域具 有重要意义。
记录细胞生长曲线
通过绘制细胞生长曲线,了解细胞的生长规律和倍增时间。
观察异常情况
如发现细胞出现死亡、变形、颜色变化等异常情况,应及时采取 措施处理。
04 Hela细胞传代培养的应用
生物学研究
细胞生物学
Hela细胞是研究细胞增殖、分化、凋亡等基本生物学过程的良好模型,有助于深入了 解细胞生命活动的机制。
细胞培养环境的维持
温度
细胞生长需要稳定的温度环境,一般维持在37°C。
湿度
湿度过高会导致细菌滋生,湿度过低则会导致细胞干燥。
气体环境
细胞培养瓶内的气体环境需保持95%空气(细胞代谢必需的)和5% 的${CO}_{2}($维持培养基的酸碱度)。
细胞的观察与记录
观察细胞的生长状态
通过显微镜观察细胞的形态、密度和生长速度,判断细胞的生长 状态。
《HeLa细胞长期传代过程中基因组突变动态变化》范文
《HeLa细胞长期传代过程中基因组突变动态变化》篇一一、引言HeLa细胞,作为一种人类宫颈癌细胞系,自其发现以来就在生物学、医学以及生命科学研究领域扮演着重要的角色。
这些细胞具有无限的增殖能力,并且在实验室环境下能够持续传代。
然而,在长期的传代过程中,这些细胞的基因组会发生突变,这对研究细胞的生长、分化、疾病发生以及药物反应等具有深远的意义。
本文将详细探讨HeLa细胞在长期传代过程中基因组突变的动态变化。
二、传代过程与基因组突变HeLa细胞的传代过程是细胞增殖的过程,这个过程中伴随着基因组的复制和突变。
突变的产生可以由多种因素引起,包括复制错误、基因重组、环境因素等。
随着传代次数的增加,这些突变逐渐积累,导致细胞基因组的复杂性增加。
三、基因组突变的类型与特点在HeLa细胞的长期传代过程中,基因组突变主要表现为点突变、插入或删除突变以及染色体畸变等。
这些突变在传代过程中可能相互独立或相互作用,影响细胞的生物学行为。
具体而言,点突变可能改变单个碱基序列,导致基因功能改变;插入或删除突变可能改变基因的长度和结构;染色体畸变可能导致基因组不稳定和复杂的遗传重组。
四、基因组突变的动态变化随着传代次数的增加,HeLa细胞基因组的突变率逐渐增加。
早期传代过程中,突变的发生较为随机且频率较低;然而,随着传代的进行,某些特定类型的突变开始频繁出现,形成特定的突变谱。
这些突变可能影响细胞的生长速度、分化能力以及对外界环境的适应性。
此外,某些突变可能具有选择优势,使携带这些突变的细胞在竞争中获得优势地位,从而在传代过程中逐渐占据主导地位。
五、基因组突变对细胞行为的影响基因组突变对HeLa细胞的生物学行为产生深远影响。
一方面,某些突变可能导致细胞获得新的生物学特性或增强原有的生物学特性;另一方面,某些突变可能导致细胞失去原有的生物学特性或引发细胞的凋亡和死亡。
这些变化使得HeLa细胞在药物研究、肿瘤学和生命科学等领域具有广泛的应用价值。
源井生物 YC-A012 Hela 细胞使用说明书
Hela细胞使用说明书细胞基本信息产品货号YC-A012细胞名称Hela中文名称人宫颈癌细胞细胞形态上皮样,贴壁细胞传代比例1:3~1:690%DMEM+10%FBS培养体系源井细胞培养未加双抗,客户可视实际情况选择添加。
冻存液体系50%DMEM+40%FBS+10%DMSO特殊备注无STR鉴定细胞接收1)冻存细胞:如果是干冰运输的冻存细胞,收到后请立即转入液氮储存或短暂(24H)放至-80℃冰箱保存,或直接进行细胞复苏。
2)活细胞:如果是T25瓶活细胞运输,收到后用75%的酒精对T25瓶外表面进行消毒,之后放在5%CO2、37℃的细胞培养箱静置2h,静置后取出细胞瓶在显微镜下观察细胞贴壁情况和细胞汇合度,分别在200X和40X下各拍2个不同视野的细胞拍照记录。
如果汇合度达到80%以上的传代密度,可以进行传代操作,如果细胞汇合度没有达80%以上不够传代,可以将细胞瓶内的培养基吸出在50ml离心管中并标记该细胞专用培养基后备用,保留8-10ml继续培养至可传代。
注意:收到细胞后,活细胞首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否漏液、浑浊等现象。
冻存细胞若发现干冰已挥发完、冻存管瓶盖脱落、破损等异常情况,请务必拍照保留,并于收货24h内与我们联系(电话:400-688-9033;https://)。
细胞复苏1)准备工作:将完全培养液置37℃水浴锅预热30分钟,随后将冻存的细胞从液氮中取出,转移到-80℃冰箱,放置数分钟让残余液氮挥发;2)在超净台内用吸管吸取6-7mL完全培养液至15mL离心管中;3)将细胞从-80℃冰箱取出暂时放置于干冰里,复苏时稍稍甩动,去除残留的干冰和液氮,再迅速用镊子夹住盖子放入37℃水浴中快速晃动(注意:水不能没过盖子),使其在1分钟左右完全融化;4)在超净台内,用酒精棉球擦拭冻存管外壁消毒,稍稍晾干。
用单道移液器将所有融化的细胞悬液转至提前准备好的完全培养液中,盖上盖子,1100rpm室温离心4分钟收集细胞;5)超净台内小心吸弃上清,用单道移液器吸取1mL新鲜完全培养液重悬细胞至单细胞悬液,再转移至装有4mL完全培养液的T25cm2培养瓶中,写上细胞名称、复苏日期、代次,放置37℃、5%CO2饱和湿度培养箱内培养。
Hela细胞培养
Hela细胞(人工颈癌细胞)实验准备工作1、Hela细胞(人宫颈癌细胞)2、细胞培养试剂:DMEM培养基,胎牛血清,青霉素,链霉素,0.25%胰蛋白酶(含0.02%的EDTA),PBS等3、培养器具:培养瓶、烧杯、镊子、酒精棉、离心管、改良吸管、胶头吸管、细胞计数板、毛细管等。
4、实验设备:二氧化碳培养箱、光学显微镜、无菌操作台、恒温水浴锅、酒精灯。
5、细胞冻存和复苏的方法冻存液:含10%血清的完全培养基和5%-10% DMSO取对数生长期细胞,精胰酶消化后加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×106~5×106细胞/ml),加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记细胞名称和冷冻日期。
复苏细胞是从零下80℃冰箱或液氮罐中取出冻存管,迅速投入37℃水浴中,使其融化(1分钟左右),用培养集缓慢稀释至原体积的10倍以上,大部分细胞完全贴壁后(4~6小时),吸取含有冻存液的培养基,并换成完全培养基。
细胞复苏实验步骤1. 从零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷冻管,迅速投入37℃水浴中,使其融化(1分钟左右)。
2.培养基缓慢稀释至原体积的10倍以上。
3.1低速离心10分钟,吸去上清,加入新鲜的培养基培养刚复苏的细胞。
3.2六个小时细胞完全贴壁后吸去含有冻存液的培养基并换成完全培养基。
6、细胞传代实验步骤取密度80%左右的Hela细胞,吸去旧的培养基,用PBS或者Trypsin消化液润洗细胞以减少残留的血清对Trypsin的抑制作用。
吸去PBS或者Trypsin,加入Trypsin消化液,于37℃消化2~4分钟,于倒置显微镜下观察,当细胞之间出现间时或者变圆时,吸掉Trypsin消化液。
(也可以直接加入适量含血清的新鲜培养基终止Trypsin的消化作用并进行吹打分离细胞,消化细胞时应静置以避免漂浮的细胞滚动成团) 加入适量新鲜培养基,用移液器上下吹打数次打散细胞团块以尽可能形成单细胞悬液,吹打均匀后,按照稀释比例转移至新的培养瓶中,补充完全培养基并以正常培养条件培养。
Hela细胞的研究及对癌症研究的贡献
当初的难题是:那些癌细胞总是很快死掉,即使有少量的“幸存者”,它们也根本不会
生长无法满足研究的需要。
2
2、Hela cells的特点
Ⅰ、可以连续传代
Ⅱ、细胞株不会衰老致死,并可以无限分裂下去
Ⅲ、此细胞系跟其它癌细胞相比,增殖异常迅速
Ⅳ、感染性极强
Fig.3 衰老的问题
Hela细胞生长奇快,甚至超越一般癌细胞。Hela细胞经历细胞分裂时可维持端粒酶活 性以维持瑞粒长度,一般细胞的端粒会随着老化而变短,终至细胞死亡。海乐细胞利用此
In A State Strain Of Human Malignant Epithelial Cells (Strain Hela)Derived From An Epidermoid Carcinoma Of The
Cervix”.[J]Journal of Experimental Medicine . 1953 ,97 (5): 695–710.
4
4、克隆技术的奠基
Fig.5 A、Typical clones produced from single HeLa cells growing on glass slides above a feeder layer ( X 1.7). B、Photomicrograph
of a typical clone (X50).[2]
Fig.4 A Somaliboy is injected with inactivated poliovirus vaccine (Mogadishu, 1993)
当初的研究遇到的难题是,研究已使用外神经系组织与猴子做实验,无法用人体与其他动
物做实验, Jonas Salk首次将脊髓灰质炎疫苗的研究使用到人体体外第一个活细胞Hela用于研究
海拉细胞系
• 2. 贴壁期:
• • •
• 3. 潜伏期:
• 4. 对数生长期: •
• •
血清质量好坏是细胞培养的关键
• 常用血清有胎牛血清、新生牛血 清、小牛血清、兔血清、马血清 等 • 根据牛出生时间和血清采制分离 方法分为: • 1、胎牛血清:八月龄胎牛心脏穿 刺取血; • 2、新生牛血清:出生12-24小时 新生牛静脉采血; • 3.小牛血清:出生三月龄小牛动脉 采血分离血清; • 其中以胎牛血清质量最好。优质 血清的标准:透明,淡黄色,无 沉淀物,无细菌、支原体、病毒 污染。
细胞的培养
• 传代培养
细胞在培养器皿中生长一定时间后,被分开接种 到新的培养器皿中。培养细胞的“一代”,不表 示细胞分裂一次,而是指培养细胞从接种到再次 转移培养的过程。在一次传代培养中,细胞能倍 增3-6次。
• 原代培养
取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞 在传代之前称为原代培养。一旦进行传代培养,便 不再是原代培养,而改称为细胞系。
哈拉尔德· 楚尔· 豪森
HPV疫苗——救命的疫苗
近些年,去香港除了旅游和 购物外,又多了个理由,那 就是打“宫颈癌疫苗” (HPV疫苗)。HPV疫苗市场 空前火爆! 2016年7月18日, 希瑞适 (Cervarix,人乳头状瘤病毒 (HPV)疫苗[16型和18型])获 得中国食品药品监督管理总 局的上市许可,成为国内首 个获批的预防宫颈癌的HPV 疫苗,预计到2017年初才能 真正上市。
•
她的细胞,将永远造福于人类
• 1951年10月4日,由于癌症扩散 到了全身,拉克丝病逝于约翰· 霍 布金斯大学医院隔离病房。拉克 丝的遗体,被埋葬于自家的庭院, 连墓碑也没有树立。但是海拉的 细胞至今依然存活,继续为人类 健康发挥着积极作用。 • 2010年3月,帕蒂略教授捐款为 拉克丝树立了墓碑。墓碑上镌刻 着这样一行字:“她的细胞,将 永远造胞 (HeLa)的应用
《2024年HeLa细胞长期传代过程中基因组突变动态变化》范文
《HeLa细胞长期传代过程中基因组突变动态变化》篇一一、引言HeLa细胞,作为人类癌细胞系中最具有代表性的细胞之一,因其具有易于培养、生长迅速等特性而被广泛用于生物医学研究。
随着科研技术的不断进步,人们对HeLa细胞长期传代过程中基因组突变动态变化的研究也越来越深入。
本文将针对HeLa细胞在传代过程中的基因组突变特点及规律进行深入探讨,为后续相关研究提供理论基础。
二、HeLa细胞简介HeLa细胞,即海拉细胞,由一位名叫乔治·海拉的女性宫颈癌患者肿瘤组织中分离而来。
由于其具有稳定的遗传背景和生长特性,HeLa细胞被广泛用于生物学、医学和遗传学等多个领域的研究。
三、基因组突变概述在细胞传代过程中,基因组突变是不可避免的。
这些突变可能由多种因素引起,如DNA复制错误、环境因素、遗传因素等。
在HeLa细胞中,长期传代过程中基因组突变的类型和频率呈现出一定的规律性。
四、基因组突变动态变化在HeLa细胞的长期传代过程中,基因组突变表现为多种类型,包括点突变、插入/删除突变、染色体结构变异等。
这些突变在不同传代阶段呈现出不同的特点。
在早期传代阶段,基因组突变相对较少,主要为点突变和微小染色体变异。
随着传代次数的增加,基因组突变的频率和类型逐渐增多,出现较大规模的染色体变异和基因重组等现象。
这些突变可能导致细胞生长特性的改变,使细胞逐渐适应实验室环境并获得更强的生存能力。
五、基因组突变的影响基因组突变对HeLa细胞的生长、分化和功能具有重要影响。
一方面,这些突变可能导致细胞生长特性的改变,使细胞在实验室环境下更容易生存和繁殖;另一方面,这些突变也可能导致细胞失去原有的功能或发生恶性转化,成为肿瘤细胞的源头。
因此,研究HeLa细胞基因组突变的动态变化对于了解肿瘤发生、发展和治疗具有重要意义。
六、研究方法与展望为了深入了解HeLa细胞长期传代过程中基因组突变的动态变化,需要采用多种研究方法和技术手段。
例如,全基因组测序技术可以用于检测基因组突变的类型和频率;生物信息学分析可以用于分析突变数据并揭示其与细胞功能的关系;蛋白质组学和代谢组学等手段也可以用于研究这些突变对细胞生长和功能的影响。
Hela细胞的传代培养
教学目标
1.理解细胞传代培养的概念和原理 2.能按照操作规程进行细胞传代培养的操作
细胞传代培养的概念
概念:指细胞从一个培养瓶以1:2或其他比率转移,接 种到另外的培养瓶中的培养,也叫做继代培养。
HeLa细胞是一种贴壁生长的细胞,在进行传代时通 常是采用胰蛋白酶消化,把细胞分散成单细胞再传代。
培养细胞一代生长过程
实验前准备
1、材料: HeLa细胞
2、试剂: 0.25%胰蛋白酶、1640培养基〔含10% 小牛血清〕、PBS
实验前准备
3.仪器设备
超净工作台
CO2培养箱
倒置显微镜
实验前准备
3.仪器设备
离心机
恒温水浴锅
实验前准备
3.仪器设备
培养瓶,移液管,酒精灯,酒精棉球, 试管架,记号笔等。
Thankyou
分装
实验操作本卷须知
1.用电安全 2.操作仪器安全 3.及时标准记录
HeLa细胞传代培养实验原理
细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱 和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩 大,就必须进行传代〔再培养〕。
传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法 。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过 程。贴壁细胞需经消化后才能分瓶。
消化前细胞
消化后细胞 〔适度状态〕
吸除消化液
细胞传代操作
4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液。
吹打成细胞悬液
细胞传代操作
5、以1:2或1:3进行分装,补充新鲜培养基, 并在培养瓶上做好标记,注明代号、日期,轻轻 摇匀,置于37℃ CO2培养箱培养〔如果瓶盖不带 通气孔,则需将瓶盖旋开半圈〕。24h后即可对 细胞的生长情况进行观察记录。当细胞长成单层 后即可用于接种或冻存。
海拉细胞综述
海拉细胞简述摘要:海拉细胞源自一位名叫Henrietta Lacks美国妇女的子宫颈的癌细胞,。
此细胞跟其他癌细胞相比,增殖异常迅速。
和正常子宫颈细胞的主要不同点除了无限增殖繁殖速度极快外就是在体外极易培养。
进入21世纪以来,已经有5个基于海拉细胞的研究成果获得诺贝尔奖,在基础医学的研究领域,几乎每一篇重要的论文背后都包含着用海拉细胞所做的实验。
五十多年来,海拉细胞系被广泛用于医学和生物学领域的研究,对当代生命科学的发展屡建奇功,是名副其实的当代生物学研究的亲历践行者。
在医学研究中,无论是治疗疱疹、白血病、流感、血友病,或者帕金森氏病,还是研发小儿麻痹症的疫苗,都离不开基于海拉细胞的研究。
在生命科学领域,现代病毒学的创立、基因检测原理的发现、端粒酶的发现、克隆的成功、世界首个跨物种混合细胞的诞生等诸多重大科学成就均得益于它的参与。
关键词:海拉细胞、宫颈癌、永生、生命科学鲁迅先生曾经说过:“有的人死了但他还活着,有的人活着但他已经死了。
”先生之意在于一个人的精神永存及其影响力同时批判那些没有自己思想和主见的人。
而今把先生的话引用到生物学上我们可以说:“有的人死了但他的细胞还活着,有的人活着但他的细胞已经死了。
”这句话前半句可以理解为有的细胞做到了如先生口中一个人精神般的永存;后半句可以理解为人类和所有生物都在不停的进行新陈代谢,活细胞不断代替死细胞执行功能。
可能这两句话在一起理解有点矛盾。
事实上世上还真有细胞能做到“永生”,它就是“海拉细胞”。
海拉细胞(HeLa Cell)是生物学与医学研究中使用的源自一位名叫Henrietta Lacks美国妇女的子宫颈的癌细胞。
这名美国妇女在1951年死于子宫颈癌。
为了让Lacks保持匿名,此细胞原宣称是依“Helen Cell”命名,后来为了纪念这位美国妇女又改为用她的名字的缩写来命名,是为“Hell Cell”。
海拉细胞被视为“不死细胞”,也就是说此细胞不像其他的人类细胞一样会衰老致死,而是可以无限分裂下去,至今都被不间断的培养。
Hela细胞的研究及对癌症研究的贡献
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胰酶消化细胞,将细胞悬液收集至离心管中。800rpm离心5min,弃上清液。加两倍量培 养液悬浮细胞,平均分置于两个培养瓶中, 37℃,5%CO2及饱和湿度的CO2培养箱中。1224小时内观察细胞贴壁生长情况,取对数生长期细胞进行各项实验。
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3、冻存 胰酶消化细胞,将细胞悬液收集至离心管中。800rpm离心5min,弃上清液。沉淀加含保 护液的培养液,计数,调整细胞至5×106/ml左右。将悬液分至冻存管,每管1ml。将冻存管
性麻痹。好发于婴幼儿,故又称小儿麻痹症。本病可防难治,一旦引起肢体麻痹易成为终生残 疾,甚至危及生命。
Fig.4 A Somaliboy is injected with inactivated poliovirus vaccine (Mogadishu, 1993)
当初的研究遇到的难题是,研究已使用外神经系组织与猴子做实验,无法用人体与其他动 物做实验, Jonas Salk首次将脊髓灰质炎疫苗的研究使用到人体体外第一个活细胞Hela用于研究
Hela cells的故事以及细胞的传代培养
如何研究癌症?
有没有长生不老 的细胞? 如何培养人体细胞?
汇报人: 李海航
1、细胞之母——Hela cells
Fig.1 Hela cells
Fig.2 伟大的“Hela ”—Henrietta Lacks(左)
有的人死了,可细胞还活着。 1951年,当时约翰· 霍普金斯医院研究中心的乔治· 盖伊(George Gey)正在进行另外一 项研究:在人体外培养癌症细胞,以解释癌症产生的原因,从而找到治疗方法。 当初的难题是:那些癌细胞总是很快死掉,即使有少量的“幸存者”,它们也根本不会 生长无法满足研究的需要。
《HeLa细胞长期传代过程中基因组突变动态变化》范文
《HeLa细胞长期传代过程中基因组突变动态变化》篇一一、引言HeLa细胞,作为一种人类宫颈癌细胞系,自其发现以来便在生物学、医学和遗传学等多个领域中发挥着重要作用。
随着科研技术的不断进步,HeLa细胞因其易于培养、增殖迅速等特点,被广泛用于癌症研究、药物筛选、基因编辑等多个领域。
然而,在长期传代过程中,HeLa细胞的基因组会发生一系列的突变,这些突变不仅影响着细胞的生物学特性,还可能对相关研究产生深远的影响。
因此,研究HeLa细胞长期传代过程中基因组突变的动态变化具有重要意义。
二、HeLa细胞的传代与基因组突变HeLa细胞的传代是指将细胞在体外进行连续培养,使其不断分裂、增殖的过程。
在传代过程中,由于各种内外因素的影响,HeLa细胞的基因组会发生突变。
这些突变包括点突变、插入/删除突变、染色体变异等,它们会导致基因功能的改变、表达水平的改变以及蛋白质结构的改变等。
三、基因组突变的动态变化1. 突变类型与频率在HeLa细胞长期传代过程中,不同类型的基因组突变会发生。
点突变是最常见的突变类型之一,它可能导致基因编码区的氨基酸序列发生改变,从而影响蛋白质的功能。
此外,插入/删除突变、染色体变异等也会发生。
随着传代次数的增加,突变的频率也会逐渐增加。
2. 突变的时间与空间分布基因组突变的分布具有时间和空间上的特点。
在传代初期,由于细胞适应新的环境,突变的数量较少且多为适应性突变。
随着传代的进行,突变逐渐积累,并且可能会出现一些非适应性突变。
这些突变在细胞内的分布也会发生变化,有些突变可能发生在特定的基因区域或染色体区域。
3. 突变对细胞生物学特性的影响基因组突变会影响HeLa细胞的生物学特性。
例如,某些突变可能导致细胞增殖速度加快、侵袭性增强等。
这些改变可能会使HeLa细胞更适应体外培养环境,从而在传代过程中得以保留和传播。
四、研究方法与结果为了研究HeLa细胞长期传代过程中基因组突变的动态变化,可以采用多种方法。
hela细胞_电转_条件_解释说明以及概述
hela细胞电转条件解释说明以及概述1. 引言1.1 概述在生物学研究领域,细胞是一个重要的研究对象。
近年来,为了更深入地了解细胞的功能和特性,科学家们不断发展新的实验技术和方法。
其中,电转技术作为一种有效的基因转染手段,在细胞研究中得到了广泛应用。
本文将对Hela细胞进行电转实验条件进行解释说明,并介绍其概述、历史、特点、应用价值和争议等方面内容。
同时,还将对电转技术的原理、过程、条件要求及其在细胞研究中的应用和发展趋势进行简要介绍。
1.2 文章结构本文分为五个主要部分:引言、Hela细胞简介、电转技术简介、Hela细胞的电转实验条件解释说明以及结论与展望。
引言部分主要对文章进行概述,并介绍电转技术在生物学研究中的重要性。
Hela细胞简介部分将详细介绍Hela细胞的定义和历史,以及其特点和应用领域。
同时,还将探讨Hela细胞所带来的价值和争议。
电转技术简介部分将对电转技术的原理、背景及其在细胞研究中的过程、条件要求和发展趋势进行简要介绍。
这一部分将为后续Hela细胞的电转实验条件解释说明提供基础知识。
Hela细胞的电转实验条件解释说明部分将解析具体的实验操作和参数优化,包括转染基因的选择与构建、细胞培养条件及支持物质控制要点以及电转参数优化与影响因素分析等内容。
结论与展望部分将对全文进行总结,并提出未来研究的展望与建议。
通过本文的研究,我们可以更全面地理解Hela细胞的特性和应用,并为相关领域的进一步研究提供参考依据。
1.3 目的本文旨在详细介绍Hela细胞在电转实验中所需的条件,通过对电转技术原理和Hela细胞特点的阐述,提供实验操作指南,并为该领域未来研究方向提供展望和建议。
同时,希望通过本文使读者们能够更好地了解和应用电转技术在细胞研究中的意义和作用。
2. Hela细胞简介:2.1 定义和历史:Hela细胞是一种人类宫颈癌细胞系,最早由美国科学家乔治·格威普斯(George Gey)在1951年从艾尔中心查理医院的病患名叫海拉(Henrietta Lacks)的宫颈癌组织中分离出来。
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Hela细胞系(HeLa cell line)是生物学与医学研究中使用的源自一位名叫Henrietta Lacks美国妇女的子宫颈癌细胞的细胞系。
这名美国妇女在1951年死于该癌症。
为了让Lacks保持匿名,此细胞株原宣称是依「Helen Lane」命名。
海拉细胞系被视为「不死的」(即,不同于其他一般的人类细胞,此细胞株不会衰老致死,并可以无限分裂下去),至今都被不间断的培养。
此细胞系跟其他癌细胞相比,增殖异常迅速。
海拉细胞系被George Gey分送给众研究单位(并未通知Lacks本人也未得到她的许可),并用作癌症细胞模型(model cancer cells)研究。
海拉细胞系也被用作研究细胞信号传导(cellular signal transduction)。
海拉细胞系是被人类乳突状瘤病毒第18型(Human Papillomavirus 18)转化的,和正常子宫颈细胞有许多不同。
已证实海拉细胞系难以控制。
此细胞系有时会污染同一实验室的其他细胞培养物(cell culture),干扰生物学的研究。
污染程度难以估计,因为研究人员很少检定已确立细胞系的本质和纯度。
据说有相当数目的体外细胞系(in vitro cell lines)其实就是海拉细胞系,因为原先的细胞株已被快速增殖的海拉细胞系污染物取代了。
有学者认为此细胞系是一新的物种,因为此细胞株能自行繁殖和散布。
在1991年此细胞株被命名为Helacyton gartleri。
科学研究史
在Hela出现之前,科学家已经实现了某些动物细胞的人工培养,但尚未成功培养人类细胞;人类细胞由于分裂次数有限,难以实现长期留存。
肿瘤细胞HeLa以其顽强的生命力和繁殖力成为科学家获得的第一个人类细胞系。
据估计,全世界用于研究而繁育的Hela细胞的总数目已经远远超过了Lacks女士本人所有的细胞数,甚至有人认为可以将HeLa细胞看做一个新的物种。
截至2009年,全世界已经有超过60000篇科学论文是基于对HeLa细胞的研究,并且这一数字还以每月300篇的速度不断增长着。
而旨在揭开HeLa细胞永生秘密的科学探索更为治疗和预防夺去Lacks生命的病魔——宫颈癌指明了道路。
宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。
在全世界,宫颈癌每年夺去超过200000人的生命。
1976年,德国病毒学家Harald zur Hausen提出人乳头瘤病毒(HPV)可能在宫颈癌发病过程中起到重要作用,并相继于1983、1984年在宫颈癌活检标本和HeLa细胞中发现了HPV的两个重要亚型(HPV16和HPV18)。
到现在,已发现的HPV亚型
HPV
已多达100多个。
在HPV这个庞大的家族中,人们尤其关注某些与癌症相关的高危亚型,如HPV16、HPV18 、HPV31和HPV45等,这些HPV亚型已被证实与宫颈癌发病有着确定关系:人们利用分子生物学方法在绝大多数宫颈癌细胞中检测到了HPVDNA;HPV基因的表达产物能够使得人皮肤和宫颈细胞“永生化”——即成为HeLa细胞那样繁衍不止的细胞株。
换句话说,正是由于HPV的感染,才使得人体的正常宫颈上皮细胞转化成为宫颈癌细
胞。
此外,肛门癌、外阴癌、阴道癌和阴茎癌也与HPV感染密切相关,部分非常规性交途径还会导致口腔、咽喉等部位癌瘤的发生,从这个意义上说,HPV相关的癌症也可被认为是一种性传播疾病(STD)。
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