生药实验指导
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实验一生药显微鉴定基本知识
实验目的:
掌握显微标本的制作方法(粉末制片法)
实验内容:
一、粉末制片法
粉末制片法是用于制备粉末状生药,以生药粉末制备的中成药及原料药材粉末的显微鉴定标本片的方法。
1.粉末制备
如样品为非粉末状生药,则先将其制成粉末。首先选取有代表性样品适量(约3-5g),切成或剪成约2mm的小段,置60摄氏度以下烘箱中干燥,用乳钵或微型粉碎机粉碎,过5-6号药筛,即得。
制备粉末时应注意:
(1)如样品为完整生药,而且只有一个,又必须留样,将样品从中心纵剖为二,取一半粉碎,以保证粉末的代表性,另一半留样。
(2)如生药含挥发油,则烘干温度不可超过40摄氏度,含淀粉的生药烘干温度也不宜过高(为什么?)。
(3)较难粉碎的粗粉,不可丢弃,应过筛后再粉碎,并充分混合。(为什么?)2.临时制片
用刮刀挑取粉末适量,置载玻片中偏左处,加封藏剂封藏。常用封藏剂有以下3种。
(1)斯氏液
专门用于观察淀粉粒的最佳封藏剂,可保持淀粉粒原状而不膨胀变形。(2)水合氯醛试液
滴加后不加热,立即观察,用于观察菊糖;滴加后加热,用于观察细胞、草酸钙结晶等后含物。
水合氯醛透化:
取生药粉末置于载玻片上,滴加水合氯醛溶液数滴,用解剖针边搅边在酒精
(为什么?)灯上以小火微微加热约2-3min,加热过程中,随时添加水合氯醛溶液。
加热后,待玻片稍冷,再加甘油酒精液一滴,用解剖针调匀,加盖玻片,并擦净盖玻片以外的溶液,供显微镜下观察。
(3)乙醇
用于观察陈皮苷结晶或菊糖团块。
装片时应注意:
1.如有较大的颗粒不可丢弃,应在湿润加热后用刮刀压碎,再继续透化至合格。
2.粉末封藏好后应是色泽均匀的一片,不可有明显的颗粒或深一块浅一块的现象,否则要重新装片,以免影响观察效果。
3.如粉末中色素太多,颜色太深,可先用过氧化氢浸渍处理,再用沸水及冷水洗涤,离心分离,然后装片。
二、徒手绘图
1.组织简图用线条表示各种组织的界限用符号表示某些组织或特征的分布情况,一般不绘出细胞的形状。
2.组织详图按照显微镜下观察到得组织特征,绘出细胞的形状、大小,各部分之间比例适中。
实验二生药鉴定
实验目的:
熟悉几种生药的主要鉴别特征。
实验材料:
薄荷叶、薄荷叶横切片、薄荷叶粉末、草麻黄、麻黄茎横切片、麻黄粉末、人参横切片、麦冬块根横切片、肉桂横切片
实验内容:
一、全草类生药
(一)薄荷
1.薄荷叶生药性状
茎呈方柱形,有对生分枝,长15-40cm,直径0.2-0.4cm;表面紫棕色或淡绿色,棱角处具茸毛,节间长2-5cm;质脆,断面白色,髓部中空叶对生,有短柄;叶片皱缩卷曲,完整者用水浸软展开后呈披针形,长椭圆形或卵形,长2-7cm,宽1-3cm;上表面深绿色,下表面灰绿色,稀被茸毛,有凹点状腺鳞。轮伞花序腋生,花萼钟状,先端5齿裂,花冠淡紫色。揉搓后有特殊清凉香气,味辛凉。
观察薄荷生药性状的注意点:
注意其茎的形态、叶序、叶片形态、叶脉、叶缘等特征,叶和茎毛茸的有无、质地,用手揉碎叶片,注意其气味。
2.薄荷叶横切片
取薄荷叶横切片进行镜检,观察其组织特征:
①表皮组织:上下表皮细胞各一列,上表皮细胞较大,排列疏松。下表皮细胞
较小,排列紧密,且表皮上具有腺毛、非腺毛及腺鳞,上下表皮内侧存在厚角组织。
②叶肉组织:栅栏细胞一列,异面型。
③主脉:维管束外韧型。
④橙皮苷结晶:广泛存在于叶肉组织及主脉薄壁细胞中。
3.薄荷粉末装片
取薄荷粉末以水合氯醛试液透化,装片镜检,注意下列显微特征:
(1)腺鳞头部8细胞,直径约至90微米,柄单细胞。
(2)小腺毛头部及柄部均为单细胞。
(3)非腺毛1-8细胞,常弯曲,壁厚。微具疣状突起。
(4)下表皮气孔多见,直轴式。此外尚含橙皮苷结晶、淀粉粒等。
(二)草麻黄
1.草麻黄生药形状特征
草质茎细长圆柱形,少分枝;直径1-2mm。有的带少量棕色木质茎。表面淡绿色至黄绿色,有细纵棱线,触之微有粗糙感。曲节明显,节间长2-6cm。节上有膜质鳞叶,长3-4mm,裂片2(3),锐三角形,先端灰白色,饭曲,基部联合成筒状,红棕色。体轻,质脆,易折断,断面呈纤维性,周边绿黄色,髓部红棕色,近圆形。起微香,味涩、微苦。
观察草麻黄生药性状的注意点
注意其膜质鳞叶的形态、数目、节间长短、表面具纵棱脊等特征,以及色泽和气味。用手抚触微粗糙感。将其折断,可见中心常呈棕红色。
2.草麻黄茎横切片
镜检麻黄茎横切片,自外向内观察其组织特征:
外形:类圆形,边缘有波状细棱脊18-20条,皮层细胞及纤维里可见草酸钙砂晶。
①表皮:细胞类方形,外被角质层,有棱脊18~20条。
②皮层:宽广,在棱脊下有下皮纤维存在,其它处散在皮层纤维。
③中柱:维管束外韧型,8-10个,木质部类三角形。韧皮部外侧有中柱鞘纤维存在。
④髓:含红棕色块。
⑤草酸钙砂晶:表皮细胞外壁、皮层细胞及纤维里广泛存在。
3.麻黄粉末装片
取麻黄粉末用水合氯醛试液透化后装片,进行镜检,注意下列显微特征:
①气孔:保卫细胞呈电话筒状或哑铃形,很多。
②嵌晶纤维:皮层纤维狭长,壁上布满草酸钙砂晶。
③导管:螺纹导管及具缘纹孔导管多见,两导管接触面倾斜,并且有穿孔,形成麻黄式穿孔板。
④表皮细胞:类长方形,外壁布满草酸钙砂晶,角质层厚。
二、根类生药
(一)人参横切片
镜检人参横切片,自外向内观察其组织特征:
①木栓层:数列扁平细胞,排列紧密。
②皮层:狭窄,由薄壁细胞组成。
③韧皮部:上侧有树脂道,径向排列成一行。
④形成层:环状排列。
⑤木质部:导管单列,径向排列。
(二)麦冬块根横切片
镜检麦冬块根横切片,自外向内观察其组织特征:
①表皮:一列,有的分化为表皮毛。
②根被:3~5列细胞切向排列,微木栓化。
③皮层:外皮层宽广,细胞类长方形,粘液细胞类圆形,含草酸钙针晶束。
④内皮层:外有一圈石细胞层,内壁及侧壁三面加厚,有通道细胞存在。
⑤中柱:中柱鞘1~2列,维管束辐射状。
三、皮类生药
肉桂横切片
镜检肉桂横切片,观察其组织特征:
①木栓层:数列扁平细胞,最内层细胞壁增厚木化。
②皮层:宽广,含有大量粘液细胞、油细胞及少量石细胞。
③中柱鞘部位:石细胞带,上侧有纤维束存在,石细胞外壁较薄。
④韧皮部:含大量粘液细胞、油细胞,射线明显。
【实验报告】
1.绘肉桂组织简图。
2. 绘人参组织详图
3. 绘麦冬组织详图和简图
4. 绘薄荷叶横切面详图和薄荷粉末图
5. 绘草麻黄茎横切面详图和草麻黄粉末图