植物组织培养实验参考答案9

植物组织培养实验复习题

一、名词解释

1、大量元素:指含量占生物总重量万分之一以上的元素，包括C、H、O、N、P、S、K、C、Mg等。

2、微量元素:含量占生物总重量万分之一以下的元素。

3、植物生长调节剂:人工合成的对植物的生长发育有调节作用的化学物质。

4、外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官

5、细胞全能性：植物体的每个细胞都含有该植物全部的遗传信息。

6、基础培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配置的营养基质。

7、愈伤组织:人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁细胞。

8、褐变:植物组织中多酚氧化酶被激活，使酚类物被氧化成醌类物，可抑制其他酶活性，毒害外植体。

9、茎尖脱毒:茎尖分生区的病毒传播速度很慢，利用茎尖组培获得无病毒苗，来达到脱毒的目的。

10、不定芽：凡从叶、根或芽节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽。

11、污染率：污染数除以接种数，再乘以100%。

12、诱导率：愈伤数除以未污染数，再乘以100%。

13、成活率：成活数除以未污染数，再乘以100%。

14、接种：将表面消毒的外植体转接到无菌的培养基上的过程。

15、消毒：消灭材料上的病菌（不损伤植物材料）。

16、灭菌：利用物理或化学的方法，达到组织培养所学的无菌环境。

17、母液：欲配培养液的浓缩液。

18、无病毒苗：指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要危害病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。

19、植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，培养在无菌培养基上和人工控制的环境中，使其生长、分化、增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。

20快速繁殖：采取培养基配制，材料灭菌，无菌培养，幼苗转移到苗床，成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式

21、继代培养：继代培养是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上的培养方式。

22、生根培养：将长到一定长度的微枝（>10mm）转移到生根培养基上培养。

23、玻璃化现象：试管苗的茎叶变成透明水渍状，生长畸形，增殖系数明显下降，难以诱导生根，即使诱导生根，其根系质量极差，移栽成活率极低。

24、暗培养：

25、液体培养：将所需培养物的悬浮液在液体培养基中培养的方法。

26、脱分化：一个成熟细胞回复到分生状态或胚性细胞状态的现象。

27、分化：由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变或发育方式改变的过程。

28、热处理脱毒：利用高温下使植物组织中的病毒部分钝化或完全失去活性的方法。

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29、微尖嫁接技术：把极小（<0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生砧木上（无菌种子培养获无菌

苗，种子实生苗不带毒），然后将嫁接的砧木接种到新的培养基上培养。

30、胚抢救：是指对由于营养或生理原因造成的难以播种成苗或在发育早期阶段就败育、退化的胚进行早期分离培养。

二、问答题

1、简述植物生长调节物质在组织培养中的作用？并列举常见的种类。

（1）伸长和分裂，促进生根、抑制器官脱落、性别控制、延长休)丁酸2,4IBA()吲哚眠、顶端优势、单性结实-3-IAA（吲哚乙酸）NAA(萘乙酸—D(2,4—二氯苯氧乙酸)、NOA(萘氧乙酸) (26—BA(6苄基腺嘌呤)、Kt

( 激动素)、Zt (玉M素)

2、植物组织培养主要应用在哪些方面？

①植物快速繁殖②脱除病毒③培育新品种④种质资源的保存⑤人工种子的研究⑥次生代谢产物的生产

3、MS培养基的主要成分包括哪些？

大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素

4、简述一般组织培养的操作工序。

培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌；无菌操作——材料的表面灭菌和接种，培养；试管苗的驯化、移栽与初期管理

5、在我们实验室如何配制1L：MS+IAA 30g/L蔗糖+8g/L琼脂（pH 5.8）的培养基？

（1）配母液：MSI 20x MSII-MSV 200x 及IAA 贮备

（2）配培养基：1、取约750ml蒸馏水，琼脂8g煮沸溶解，加入30g蔗糖

2、取母液MSI 50ml，MSII-V 5ml，IAA于小烧杯，搅拌均匀

3、将2倒入1中，蒸馏水定容至1L ，调PH值(pH=5.8)

4、分装试管→封口→灭菌→存放。

6、简述高压灭菌锅对培养基进行灭菌的操作要点。

①首先将内层灭菌桶取出，在向外层锅加入与三脚架齐平的水。②放回灭菌桶，并装入灭菌物品。③加盖，并将盖上的排气软管插入内层桶的排气槽内，在以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，螺栓松紧一致，勿漏气。④打开电源加热，待压力上升到0.5MP时打开气阀，排净锅内冷空气后，待压力降到0MPA时关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压2 / 6

力而逐渐上升，当锅内压力上升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。⑤灭菌所需时间到后，切断电源，让锅内温度自然下降，当压力下降到零时，打开排气阀，旋松螺木栓，打开锅盖，取出物品7、规划一个植物组织培养室，绘制实验室的分区结构示意图，需要购置哪些必须仪器？

仪器：超净工作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等8、如何对菊花茎段进行消毒？

流水冲洗10min→摘掉叶片，切成合适茎段装入消毒瓶→超净工作台处用75%酒精浸泡30S→无菌水漂洗1次→3min/次→封存备用。

9、如何对月季茎段进行消毒？

0.1%KMnO4(30min)→自来水冲洗→在超净工作台处用75%酒精浸泡30S→无菌水漂洗1次

（3min）→0.1%升汞浸泡10min后倒入回收瓶→无菌水冲洗3次，3min/次→封存备用。

10、以大蒜茎尖脱毒为例，简述无菌接种操作的流程和注意事项。

流程：①消毒接种工具并冷却②体视显微镜下剥茎尖③接种至DS培养基

注意事项：进无菌室之前，操作人员需着经灭菌的白色工作服，戴口罩。操作人员双手必顺进行灭菌。

11、以石斛播种为例，简述无菌接种操作的流程和注意事项。

答：操作流程：①超净工作台及工具的准备

②接种工具灭菌

③用注射器吸取0.2ml石斛种子悬浮液

④打开石斛种子培养基

⑤注射进培养基中上部

⑥封口

注意事项：①每次使用注射器之前，轻甩注射器，将其中酒精甩出，用完后，需放

入装有酒精的锥形瓶中。

②接种时试管最好不要倾斜，以免悬浮液流到试管壁上

③接种封口后，轻轻摇动试管，使悬浮液均匀的布满培养基表面。

12、以银杏胚培养为例，简述无菌接种操作的流程和注意事项。

答：操作流程：①超净工作台及工具的准备

②银杏种子消毒

③接种工具灭菌

④用接种刀从中间切开银杏种子，取出银杏胚

⑤打开培养基，用镊子夹取银杏胚，将其接到培养基上。

⑥封口

注意事项：①防止污染：接种全过程要求无菌操作。为减少污染，要求方法简3 / 6

单、

操作迅速。

②银杏胚接种时，切忌接种过深

③注意胚的形态学上端，不要接倒了。

13、继代培养有什么作用，以菊花为例，简述其继代培养的操作方法

答：作用：①改善培养环境②扩大繁殖系数③控制突变

操作方法：①超净工作台及工具的准备

②接种工具灭菌

③将菊花茎段从试管中取出，放于接种盘上

④用接种刀和镊子，将菊花茎段上的新鲜茎段切下

⑤打开继代培养基

⑥将切下的外植体快速的接入培养基上

⑦封口