实验五 肝中酮体的生成

实验五肝中酮体的生成

一、课堂目标

1．说出酮体在体内生成的必要条件及过程

2．注意观察比较和记录实验结果，分析原因，得出明确的结论

3．深入理解为什么酮体的生成是肝特有的功能

二、原理

酮体是乙酰乙酸，β—羟丁酸和丙酮三种物质的总称。肝脏中含有合成酮体的酶

系，用丁酸作为底物与新鲜的肝匀浆混合后保温，即有酮体生成，酮体与含亚硝基铁

氰化钠的显色粉作用产生紫红色化合物。经同样处理的肌匀浆，因缺乏酮体生成的酶

则不产生酮体，无显色反应。通过本实验能证明酮体生成部位。

三、试剂

1．生理盐水

2．洛克溶液氯化钠0．9克、氯化钾0．042克、氯化钙0．024克、碳酸氢钠0．02 克、葡萄糖0．1克，将以上物质混合溶于水中，溶解后加入蒸馏水至100毫升。

3．0．5摩尔／升丁酸溶液取44．0克丁酸溶于0．1摩尔／升氢氧化钠溶液中，并用0．1摩尔／升氢氧化钠稀释至100毫升。

4．0．1摩尔／升磷酸缓冲液(pH7．6) 准确称取磷酸氢二钠7．74克和磷酸二氢

钠0．897克，用蒸馏水稀释至500毫升，精确测定pH值。

5．15％三氯醋酸溶液

6．显色粉亚硝基铁氰化钠

四、器材

试管及试管架、滴管，解剖剪刀、搅拌机、恒温水浴箱、台式天平、离心机、小药匙。

五、操作

1，肝匀浆和肌匀浆的制备；取家兔一只，处死后迅速取出肝和大腿肌肉

各约10克，分别放入搅拌机磨成浆，然后各加入生理盐水20毫升混匀，过滤，备用。

2．取试管4支，标号，按下表操作

3．将各管摇匀后，置入37℃水浴中保温40~50分钟。

4．取出各管，各加入15％三氯醋酸10滴，混匀，离心5分钟(3000转／分)。

5．分别取出上述各管上清液，放入显色粉一小匙，观察和记录所产生的颜色反应，并分析结果。

六、实验报告

2．简答

(1) 何谓酮体? 酮体在何处生成? 何处利用? 为什么?

(2) 酮体生成有何生理意义?

实验日期：____月 ____日评分____________ 评改老师___________