13章 分枝杆菌属
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麻风分枝杆菌是至今唯一不能人工 培养的细菌。
麻风Hale Waihona Puke Baidu枝杆菌抗酸染色
抗酸染色阳性，排列呈束状或成团排列
二、致病性与免疫性
流行地区人群多为隐性感染，幼年最敏感。潜 伏期长，平均2～5年，长者可达数十年。发病 缓慢，病程长，迁延不愈。主要侵犯人体皮肤 和神经，如果不治疗可引起皮肤、神经、四肢 和眼的进行性和永久性损害。
溶酶体的融合。
（3）蛋白质
结核菌素（tuberculin），有抗原性，和蜡 质D结合后能使机体发生迟发型超敏反应， 引起组织坏死和全身中毒症状，并在形成 结核结节中发挥一定作用。
（二）所致疾病
传播方式：以呼吸道为主的多途径传播， 因此肺结核最多，此外还有肠结核、肾结 核、结核性脑膜炎等等；
易感人群：易感率高，发病率低。
治疗：
早期、联合、足量、规范、全程使用抗结核药 物。常用药物有异烟肼、利福平、链霉素、对氨水 杨酸、乙胺丁醇等。
第二节 麻风分枝杆菌
一、生物学性状
形态上酷似结核分枝杆菌，亦表现 明显的抗酸染色特性。该菌是典型的胞 内寄生菌，这种细胞的胞质呈泡沫状， 称为泡沫细胞或麻风细胞，这是与结核分 枝杆菌感染的一个主要区别。
昔日麻风村唯一的小学，在海拔1800米的山上。教室是两间破土房 子，没有一扇完整的窗户。学校的招牌，是小偷唯一看得上的财产， 早已被盗。这里挤着70多个学生，大部分只能站着听课，孩子们的 脸都很脏，“脏到只能看见两颗眼珠子”。
今日的大营盘小学
第十四章 嗜血杆菌属 Haemophilus
流感嗜血杆菌(H.influenzae)
2、结核杆菌为胞内寄生菌，抗结核免疫主 要是细胞免疫，包括致敏T淋巴细胞和巨噬细胞;
3、感染、细胞免疫、超敏反应三者同时存 在，故可通过结核菌素试验测定机体对结核有无 免疫力。
结核菌素试验
原理：
人类感染结核分枝杆菌后，产生免疫力 的同时也会发生迟发型超敏反应。
结核菌素试剂有两种：
旧结核菌素（old tuberculin，OT） 纯蛋白衍生物（purified protein derivative, PPD）
卡介苗（BCG）——毒力变异株，卡-
介二氏将有毒的牛型结核分枝杆菌培养于 含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，历经 13年230次传代，使其毒力发生变异，成为 对人无致病性，但保留良好免疫原性的而 获得的减毒活菌株。
二、致病性
全球
结核菌感染严重：1/3人感染了结核菌 ； 结核病人不断增加：现有结核病2000万，95%
一、生物学性状
（一）形态与染色
G+，细长略弯曲，呈单个或分枝状排列， 用药后颗粒状梭状排列，无鞭毛、无芽 胞。
抗酸染色阳性。
抗酸染色（Ziehl-Neelsen）步骤
5%浓石炭酸复红 加热5-7min
3%盐酸酒精脱色 1min
加热目的： 使菌体表面疏松，染料易进入 增强染料在脂质中的溶解度
美兰复染 1min 干后镜检
结核杆菌
(三)生化反应
可合成烟酸和还原硝酸盐，而牛分枝杆菌 则不能。
“热触酶”试验阴性，牛型结合杆菌为阳 性
（四）抵抗力
湿热：生活用品煮沸消毒；
四 紫外线：病房空气，床上用品消毒； 怕 乙醇：处理医务人员的手；
抗生素：对链霉素、异烟肼、利福平敏感
干燥：干痰中可存活6～8个月；
四 不 怕
酸碱：在3％HCl、6％H2SO4或4％NaOH溶液中能 耐受30min，因而常以酸碱处理严重污染的样本，
杀死杂菌和消化粘稠物质，以提高检出率；
某些染料：对结晶紫、孔雀绿耐受；
青霉素
（五）变异性
毒力：卡介苗（Bacillus Calmette-Guerin，BCG） 耐药性：对链霉素、利福平、异烟肼等抗结核药 物较易产生耐药性，耐药性菌株常伴随活力和毒 力减弱； 抗原性：卡介苗的广泛使用，目前发现卡介苗子 代株基因组缺失16个区段，效果越来越差； L-型变异：结合杆菌抗酸性减弱，常规培养成阴 性，容易漏诊。
G+ ，胞壁中含大量脂质，着色难，；一经 染色有对抗酸酒精脱色作用，抗酸染色阳性， 又叫“抗酸菌”；
无鞭毛、芽胞，无内、外毒素和侵袭性的酶 类，致病性与菌体成分有关，引起慢性感染 伴有肉芽肿；
营养要求高，专性需氧，生长慢；
第一节 结核分枝杆菌
结核杆菌引起结核病。对人致病的主要 包括人型结核杆菌和牛型结核杆菌。该菌 可以侵犯全身各组织器官，肺结核最常见。
强阳性反应：表明可能有活动性结核病；
阴性反应：表明无免疫力，未感染过结核分枝 杆菌或未接种过卡介苗。
原发感染早期、正患严重结核病或其他严 重疾病致细胞免疫功能低下者（如用过免疫抑 制者）也可能出现阴性反应。
应用：
①诊断婴幼儿的结核病； ②测定接种卡介苗后免疫效果； ③在未接种卡介苗的人群作结核分枝杆 菌感染的流行病学调查； ④用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。
（二）所致疾病
结核病（肺结核最常见，乙类传染病） 原发感染：多见于儿童，肺内原发灶、淋巴
管炎和胸内肿大的淋巴结X线胸片显示哑铃 状阴影，称为原发综合征； 原发后感染：多见于成人，病灶局限，主要 表现为慢性肉芽肿性炎症，形成结核结节； 肺外感染
三、免疫性
1、结核免疫为感染免疫，又叫有菌免疫 （只有当细菌存在时才有免疫力，一旦体内的细 菌或其组分全部消失，免疫也随之消失）；
流感嗜血杆菌是流感时继发感染的常见 细菌。
培养特性：
巧克力培养基——X因子 —— 血红素
V因子 —— 辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ 与金黄色葡萄球菌共培养时有“卫星现象”
“卫星现象（satellite phenomenon）”
将流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平 板上共培养时，在金黄色葡萄球菌菌落周 围的流感杆菌菌落较大，离葡萄球菌菌落 越远则流感杆菌菌落越小，此现象称为卫 星现象，有助于流感杆菌的鉴定。
①磷脂： 能刺激单核细胞增生，并可抑制蛋白酶的
分解作用，形成结核结节和干酪样坏死； ②分枝菌酸：
又称索状因子，抑制中性粒细胞游走和吞 噬，引起慢性肉芽肿； ③蜡质D：
能引起迟发型超敏反应，并具有佐剂作用; ④硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖：
能抑制吞噬细胞中的吞噬体与溶酶体融合， 使结核分枝杆菌存活。
患病率高：居世界第二，仅次于印度，全国 有450万，传染性病人200万，青壮年患病多, 活动性肺结核占53%；
死亡率高：肺结核的发病率和死亡率在27 种法定传染病中排第一位，每年死于结核 病人数约25万；
耐药率高：初始耐药18.6%,继发耐药高达 46.5%，全国1/4以上菌阳患者耐药；
农村患病率高：80%集中在农村，特别是中 西部地区。
抗酸机制： 石炭酸在脂质中溶解度大 细胞结构完整 具分枝菌酸，能与复红结合
抗酸染色（Ziehl-Neelsen）结果
（二）培养特性
1.营养要求高：常用曲氏或罗氏培养基。
2.专性需氧菌：在液体培养基中呈粗糙皱纹 状菌膜生长。
3.生长缓慢：12~24 h繁殖一代，接种后4～ 6周才出现肉眼可见的菌落。菌落为干燥、 坚硬、表面呈颗粒状、乳酪色或黄色，形似 菜花样。
在发展中国家，每年新发800~1000万； 结核病死亡达历史最高水平，成为头号传染病
杀手，每天8000人死于结核病，每年约300万人 死于结核病；
贫困、人口增多、移民、流动人口增多；多耐 药结核病增多；艾滋病流行与结核病双重感染 使结核病问题雪上加霜。
中国：呈现“五高”
感染率高：全国人口的结核感染率为44.5%， 全国有4-5亿人受感染 ；
“你我共同参与，依法防控结核—— 发现、治疗并治愈每一位患者”
2015年3月24日是第20个世界防治结核病日。 全国第五次结核病流行病学抽样调查结果 显示，中国传染性肺结核患病率由2000年的 169／10万下降到了66／10万，十年降幅约 为61％。
过去20年中国在结核病控制方面取得了全 球最大的进步，领跑了全球结核病控制。
四、微生物学检查法
1．直接涂片染色
咳痰、无菌采取的脑脊液、导尿或中段尿； 抗酸染色法（若症状明显但直接涂片镜检
阴性，可采用浓缩集菌）；
2．分离培养：常用罗氏培养基，生长缓慢 3．结核分枝杆菌核酸及抗体检测：PCR
五、防治原则
预防：
接种卡介苗能极大降低结核病发病率。 婴儿出生后即接种，“出生第一针”，较大儿 童须做结核菌素试验，阴性者接种。
方法：
目前多用PPD法。 取PPD-C和BCG-PPD各 5单位分别注入两前 臂皮内，48～72 h后， 观察结果。
红 肿 硬 结 ＜ 5 m m —— 阴 性 反 应 ； 红肿硬结＞5mm——阳性； 红肿硬结≥15mm——强阳性。
结果分析：
阳性反应：表明有特异性免疫力，机体已感染 过结核枝杆菌或卡介苗接种成功， 对结核杆菌有迟发型超敏反应；
第十三章 分枝杆菌属 （Mycobacterium ）
教学目的和要求
掌握结核分枝杆菌的形态染色、培养特性 及抵抗力；
掌握结核分枝杆菌的免疫性，结核菌素试 验原理、方法、结果及意义；
掌握结核分枝杆菌的致病性、微生物学检 查和防治原则。
一、主要特点
细菌细长微弯，具有分枝生长现象，又叫 “分枝杆菌”；
根据临床表现、免疫病理变化、细菌检查等可 将大部分患者分为瘤型麻风和结核样型麻风；
麻风病为丙类传染病，瘤型麻风传染性强 主要通过呼吸道、破损的皮肤黏膜和密切
接触传播 麻风患者应隔离治疗
台 湾 女 记 者 张 平 宜 1999年，这个台湾女记者放弃了原本衣食无忧的优越生 活，投身四川凉山一个麻风康复村——大营盘村的教育事 业。这儿曾被人称为“隐形的村落”。从1959年开始，因 为麻风病的蔓延，当地政府在此建立了麻风康复村，对麻 风病人实行隔离集中的治疗，并持续了半个多世纪。
（一）致病物质
结核分枝杆菌无内毒素，也不产生外 毒素和侵袭性酶类，其致病作用主要靠菌 体成分，特别是胞壁中所含的大量脂质， 可能与细菌在组织细胞内顽强增殖引起炎 症反应，以及诱导机体产生迟发型超敏反 应性损伤有关。
（1）脂质（Lipid）
含量越高，毒力越强； 占菌体干重20～40%，占胞壁干重60%，主要是 磷脂、分枝菌酸和蜡质D，大多与蛋白质或多糖 结合成复合物。
（2）荚膜
近年发现结核分枝杆菌在细胞壁外尚有一层荚膜， 主要成分为多糖，部分脂质和蛋白质。
功能：①与吞噬细胞表面CR3结合，有助于菌体的粘附 与入侵；
②荚膜中有多种酶可降解宿主组织中的大分子 物质，给入侵细菌提供营养；
③防止宿主的有害物质进入结核分枝杆菌; ④结核分枝杆菌入侵后荚膜还可抑制吞噬体与
麻风Hale Waihona Puke Baidu枝杆菌抗酸染色
抗酸染色阳性，排列呈束状或成团排列
二、致病性与免疫性
流行地区人群多为隐性感染，幼年最敏感。潜 伏期长，平均2～5年，长者可达数十年。发病 缓慢，病程长，迁延不愈。主要侵犯人体皮肤 和神经，如果不治疗可引起皮肤、神经、四肢 和眼的进行性和永久性损害。
溶酶体的融合。
（3）蛋白质
结核菌素（tuberculin），有抗原性，和蜡 质D结合后能使机体发生迟发型超敏反应， 引起组织坏死和全身中毒症状，并在形成 结核结节中发挥一定作用。
（二）所致疾病
传播方式：以呼吸道为主的多途径传播， 因此肺结核最多，此外还有肠结核、肾结 核、结核性脑膜炎等等；
易感人群：易感率高，发病率低。
治疗：
早期、联合、足量、规范、全程使用抗结核药 物。常用药物有异烟肼、利福平、链霉素、对氨水 杨酸、乙胺丁醇等。
第二节 麻风分枝杆菌
一、生物学性状
形态上酷似结核分枝杆菌，亦表现 明显的抗酸染色特性。该菌是典型的胞 内寄生菌，这种细胞的胞质呈泡沫状， 称为泡沫细胞或麻风细胞，这是与结核分 枝杆菌感染的一个主要区别。
昔日麻风村唯一的小学，在海拔1800米的山上。教室是两间破土房 子，没有一扇完整的窗户。学校的招牌，是小偷唯一看得上的财产， 早已被盗。这里挤着70多个学生，大部分只能站着听课，孩子们的 脸都很脏，“脏到只能看见两颗眼珠子”。
今日的大营盘小学
第十四章 嗜血杆菌属 Haemophilus
流感嗜血杆菌(H.influenzae)
2、结核杆菌为胞内寄生菌，抗结核免疫主 要是细胞免疫，包括致敏T淋巴细胞和巨噬细胞;
3、感染、细胞免疫、超敏反应三者同时存 在，故可通过结核菌素试验测定机体对结核有无 免疫力。
结核菌素试验
原理：
人类感染结核分枝杆菌后，产生免疫力 的同时也会发生迟发型超敏反应。
结核菌素试剂有两种：
旧结核菌素（old tuberculin，OT） 纯蛋白衍生物（purified protein derivative, PPD）
卡介苗（BCG）——毒力变异株，卡-
介二氏将有毒的牛型结核分枝杆菌培养于 含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，历经 13年230次传代，使其毒力发生变异，成为 对人无致病性，但保留良好免疫原性的而 获得的减毒活菌株。
二、致病性
全球
结核菌感染严重：1/3人感染了结核菌 ； 结核病人不断增加：现有结核病2000万，95%
一、生物学性状
（一）形态与染色
G+，细长略弯曲，呈单个或分枝状排列， 用药后颗粒状梭状排列，无鞭毛、无芽 胞。
抗酸染色阳性。
抗酸染色（Ziehl-Neelsen）步骤
5%浓石炭酸复红 加热5-7min
3%盐酸酒精脱色 1min
加热目的： 使菌体表面疏松，染料易进入 增强染料在脂质中的溶解度
美兰复染 1min 干后镜检
结核杆菌
(三)生化反应
可合成烟酸和还原硝酸盐，而牛分枝杆菌 则不能。
“热触酶”试验阴性，牛型结合杆菌为阳 性
（四）抵抗力
湿热：生活用品煮沸消毒；
四 紫外线：病房空气，床上用品消毒； 怕 乙醇：处理医务人员的手；
抗生素：对链霉素、异烟肼、利福平敏感
干燥：干痰中可存活6～8个月；
四 不 怕
酸碱：在3％HCl、6％H2SO4或4％NaOH溶液中能 耐受30min，因而常以酸碱处理严重污染的样本，
杀死杂菌和消化粘稠物质，以提高检出率；
某些染料：对结晶紫、孔雀绿耐受；
青霉素
（五）变异性
毒力：卡介苗（Bacillus Calmette-Guerin，BCG） 耐药性：对链霉素、利福平、异烟肼等抗结核药 物较易产生耐药性，耐药性菌株常伴随活力和毒 力减弱； 抗原性：卡介苗的广泛使用，目前发现卡介苗子 代株基因组缺失16个区段，效果越来越差； L-型变异：结合杆菌抗酸性减弱，常规培养成阴 性，容易漏诊。
G+ ，胞壁中含大量脂质，着色难，；一经 染色有对抗酸酒精脱色作用，抗酸染色阳性， 又叫“抗酸菌”；
无鞭毛、芽胞，无内、外毒素和侵袭性的酶 类，致病性与菌体成分有关，引起慢性感染 伴有肉芽肿；
营养要求高，专性需氧，生长慢；
第一节 结核分枝杆菌
结核杆菌引起结核病。对人致病的主要 包括人型结核杆菌和牛型结核杆菌。该菌 可以侵犯全身各组织器官，肺结核最常见。
强阳性反应：表明可能有活动性结核病；
阴性反应：表明无免疫力，未感染过结核分枝 杆菌或未接种过卡介苗。
原发感染早期、正患严重结核病或其他严 重疾病致细胞免疫功能低下者（如用过免疫抑 制者）也可能出现阴性反应。
应用：
①诊断婴幼儿的结核病； ②测定接种卡介苗后免疫效果； ③在未接种卡介苗的人群作结核分枝杆 菌感染的流行病学调查； ④用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。
（二）所致疾病
结核病（肺结核最常见，乙类传染病） 原发感染：多见于儿童，肺内原发灶、淋巴
管炎和胸内肿大的淋巴结X线胸片显示哑铃 状阴影，称为原发综合征； 原发后感染：多见于成人，病灶局限，主要 表现为慢性肉芽肿性炎症，形成结核结节； 肺外感染
三、免疫性
1、结核免疫为感染免疫，又叫有菌免疫 （只有当细菌存在时才有免疫力，一旦体内的细 菌或其组分全部消失，免疫也随之消失）；
流感嗜血杆菌是流感时继发感染的常见 细菌。
培养特性：
巧克力培养基——X因子 —— 血红素
V因子 —— 辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ 与金黄色葡萄球菌共培养时有“卫星现象”
“卫星现象（satellite phenomenon）”
将流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平 板上共培养时，在金黄色葡萄球菌菌落周 围的流感杆菌菌落较大，离葡萄球菌菌落 越远则流感杆菌菌落越小，此现象称为卫 星现象，有助于流感杆菌的鉴定。
①磷脂： 能刺激单核细胞增生，并可抑制蛋白酶的
分解作用，形成结核结节和干酪样坏死； ②分枝菌酸：
又称索状因子，抑制中性粒细胞游走和吞 噬，引起慢性肉芽肿； ③蜡质D：
能引起迟发型超敏反应，并具有佐剂作用; ④硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖：
能抑制吞噬细胞中的吞噬体与溶酶体融合， 使结核分枝杆菌存活。
患病率高：居世界第二，仅次于印度，全国 有450万，传染性病人200万，青壮年患病多, 活动性肺结核占53%；
死亡率高：肺结核的发病率和死亡率在27 种法定传染病中排第一位，每年死于结核 病人数约25万；
耐药率高：初始耐药18.6%,继发耐药高达 46.5%，全国1/4以上菌阳患者耐药；
农村患病率高：80%集中在农村，特别是中 西部地区。
抗酸机制： 石炭酸在脂质中溶解度大 细胞结构完整 具分枝菌酸，能与复红结合
抗酸染色（Ziehl-Neelsen）结果
（二）培养特性
1.营养要求高：常用曲氏或罗氏培养基。
2.专性需氧菌：在液体培养基中呈粗糙皱纹 状菌膜生长。
3.生长缓慢：12~24 h繁殖一代，接种后4～ 6周才出现肉眼可见的菌落。菌落为干燥、 坚硬、表面呈颗粒状、乳酪色或黄色，形似 菜花样。
在发展中国家，每年新发800~1000万； 结核病死亡达历史最高水平，成为头号传染病
杀手，每天8000人死于结核病，每年约300万人 死于结核病；
贫困、人口增多、移民、流动人口增多；多耐 药结核病增多；艾滋病流行与结核病双重感染 使结核病问题雪上加霜。
中国：呈现“五高”
感染率高：全国人口的结核感染率为44.5%， 全国有4-5亿人受感染 ；
“你我共同参与，依法防控结核—— 发现、治疗并治愈每一位患者”
2015年3月24日是第20个世界防治结核病日。 全国第五次结核病流行病学抽样调查结果 显示，中国传染性肺结核患病率由2000年的 169／10万下降到了66／10万，十年降幅约 为61％。
过去20年中国在结核病控制方面取得了全 球最大的进步，领跑了全球结核病控制。
四、微生物学检查法
1．直接涂片染色
咳痰、无菌采取的脑脊液、导尿或中段尿； 抗酸染色法（若症状明显但直接涂片镜检
阴性，可采用浓缩集菌）；
2．分离培养：常用罗氏培养基，生长缓慢 3．结核分枝杆菌核酸及抗体检测：PCR
五、防治原则
预防：
接种卡介苗能极大降低结核病发病率。 婴儿出生后即接种，“出生第一针”，较大儿 童须做结核菌素试验，阴性者接种。
方法：
目前多用PPD法。 取PPD-C和BCG-PPD各 5单位分别注入两前 臂皮内，48～72 h后， 观察结果。
红 肿 硬 结 ＜ 5 m m —— 阴 性 反 应 ； 红肿硬结＞5mm——阳性； 红肿硬结≥15mm——强阳性。
结果分析：
阳性反应：表明有特异性免疫力，机体已感染 过结核枝杆菌或卡介苗接种成功， 对结核杆菌有迟发型超敏反应；
第十三章 分枝杆菌属 （Mycobacterium ）
教学目的和要求
掌握结核分枝杆菌的形态染色、培养特性 及抵抗力；
掌握结核分枝杆菌的免疫性，结核菌素试 验原理、方法、结果及意义；
掌握结核分枝杆菌的致病性、微生物学检 查和防治原则。
一、主要特点
细菌细长微弯，具有分枝生长现象，又叫 “分枝杆菌”；
根据临床表现、免疫病理变化、细菌检查等可 将大部分患者分为瘤型麻风和结核样型麻风；
麻风病为丙类传染病，瘤型麻风传染性强 主要通过呼吸道、破损的皮肤黏膜和密切
接触传播 麻风患者应隔离治疗
台 湾 女 记 者 张 平 宜 1999年，这个台湾女记者放弃了原本衣食无忧的优越生 活，投身四川凉山一个麻风康复村——大营盘村的教育事 业。这儿曾被人称为“隐形的村落”。从1959年开始，因 为麻风病的蔓延，当地政府在此建立了麻风康复村，对麻 风病人实行隔离集中的治疗，并持续了半个多世纪。
（一）致病物质
结核分枝杆菌无内毒素，也不产生外 毒素和侵袭性酶类，其致病作用主要靠菌 体成分，特别是胞壁中所含的大量脂质， 可能与细菌在组织细胞内顽强增殖引起炎 症反应，以及诱导机体产生迟发型超敏反 应性损伤有关。
（1）脂质（Lipid）
含量越高，毒力越强； 占菌体干重20～40%，占胞壁干重60%，主要是 磷脂、分枝菌酸和蜡质D，大多与蛋白质或多糖 结合成复合物。
（2）荚膜
近年发现结核分枝杆菌在细胞壁外尚有一层荚膜， 主要成分为多糖，部分脂质和蛋白质。
功能：①与吞噬细胞表面CR3结合，有助于菌体的粘附 与入侵；
②荚膜中有多种酶可降解宿主组织中的大分子 物质，给入侵细菌提供营养；
③防止宿主的有害物质进入结核分枝杆菌; ④结核分枝杆菌入侵后荚膜还可抑制吞噬体与