HPLC法测定桔梗不同部位_不同产地药材中桔梗皂苷D含量
HPLC 法对杏桔合剂中桔梗皂苷 D 的含量测定研究
HPLC 法对杏桔合剂中桔梗皂苷 D 的含量测定研究芮海波;赵学龙;王文晓;张国花【摘要】目的：建立杏桔合剂中桔梗皂苷 D 的含量测定方法，为杏桔合剂的质量控制提供量化参考。
方法：采用 HPLC 方法测定桔梗皂苷 D 的含量。
结果：桔梗皂苷D 在0．5～8μg 范围内线性关系良好，回归方程：y ＝238632x ＋10382，r ＝0．9997，加样回收率93．64％，RSD ＝1．54％。
结论：应用 HPLC 测定杏桔合剂中桔梗皂苷 D 含量的方法可行，可以作为其质量控制的参考依据。
%Objective:To establish content determination method of platycodinD in apricot orange mixture so as to provide quanti-tative information for quality control of apricot orange mixture.Methods:HPLC was used to determine contents of platycodin D.Re-sults:Platycodin D in the range 0.5~8ug had good linear relationship,and the regression equation was:y=238632x +1 0382, r =0.9997,recovery was 93.64%,RSD=1 .54%.Conclusion:The method of HPLC to determine Platycodin D in apricot orange mixture is feasible,and it can be used as a reference for its quality control.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】4页(P910-912,916)【关键词】杏桔合剂;桔梗皂苷D;含量;HPLC【作者】芮海波;赵学龙;王文晓;张国花【作者单位】南京市中医院药剂科，南京，210001;南京市中医院药剂科，南京，210001;南京中医药大学，南京，210014;南京中医药大学，南京，210014【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R-331杏桔合剂为江苏省南京市中医院较早大量生产的浓缩剂之一,并收载于“南京市医院制剂规范”中。
HPLC法测定桔梗药材中桔梗皂苷D的含量
HPLC法测定桔梗药材中桔梗皂苷D的含量洪玮;罗娟敏;郭磊;樊海燕;索卫国;黄卫东;蔡继宝【期刊名称】《江西中医药》【年(卷),期】2014(045)002【摘要】目的:建立HPLC法测定不同产地桔梗药材中桔梗皂苷D的含量.方法:HPLC分析采用Phenomenex Luna C18色谱柱,以0.1％磷酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.5mL/min,检测波长210nm.结果:桔梗皂苷D分离良好,质量浓度与峰面积在测定范围内线性关系良好(r＞0.999),重现性好,平均加样回收率为100.09％,13批不同产地桔梗药材中桔梗皂苷D占药材量的平均含量为0.2101％.结论:本研究所建立的HPLC方法稳定可靠,简便易行,可用于桔梗中桔梗皂苷D的定量,为桔梗的质量评价和质量控制奠定了基础.【总页数】3页(P59-61)【作者】洪玮;罗娟敏;郭磊;樊海燕;索卫国;黄卫东;蔡继宝【作者单位】江西中烟工业有限责任公司技术研发中心南昌330096;江西中烟工业有限责任公司技术研发中心南昌330096;江西中烟工业有限责任公司技术研发中心南昌330096;江西中烟工业有限责任公司技术研发中心南昌330096;江西中烟工业有限责任公司技术研发中心南昌330096;江西中烟工业有限责任公司技术研发中心南昌330096;江西中烟工业有限责任公司技术研发中心南昌330096【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.HPLC法测定不同采收期及不同桔梗中桔梗皂苷D含量2.用HPLC法测定桔梗流浸膏中桔梗皂苷D含量的效果分析3.HPLC-ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量4.RP-HPLC法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量5.HPLC法测定桔梗不同部位、不同产地药材中桔梗皂苷D含量因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法检测桔梗中的皂苷D
高效液相色谱法检测桔梗中的皂苷D张娜;程满环;杨芬;王婉莹【摘要】建立了桔梗中皂苷D的HPLC快速测定方法.以甲醇为提取剂,超声波处理法提取皂苷D,以乙腈—水(体积比25∶75)为流动相,以C18为色谱柱,保留时间定性,峰面积定量.在该实验条件下皂苷D质量浓度在4.62～85.20 μg/mL范围内呈线性相关,R2=0.999 6,回归方程y=2.871 7x+0.343 2,检出限为2.31 μg/mL,样品的加标回收率为92.86％～95.12％,RSD为1.2％.该法样品处理简单、快速,检测灵敏度高,重现性好,适合测定桔梗中皂苷D的质量分数.【期刊名称】《淮海工学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(024)003【总页数】4页(P47-50)【关键词】桔梗;皂苷D;高效液相色谱【作者】张娜;程满环;杨芬;王婉莹【作者单位】黄山学院化学化工学院,安徽黄山 245041;黄山学院分析测试中心,安徽黄山 245041;黄山学院化学化工学院,安徽黄山 245041;黄山学院化学化工学院,安徽黄山 245041【正文语种】中文【中图分类】R2840 引言桔梗为桔梗科桔梗属植物桔梗（Platycodon grandiflorum）的干燥根，是我国传统的中药材.现代药理学研究表明，桔梗具有镇咳、降低胆固醇［1］、抗菌及抗癌［2－3］等作用.其主要化学成分有皂苷类、多糖类等［4］.近几年来，从桔梗中又先后获得10余种新化合物［5－8］.桔梗的主要活性成分为桔梗皂苷，其中桔梗皂苷D一直被作为桔梗质量控制的指标性化合物［9］.皂苷的提取方法主要有回流提取法、水提醇沉法、超声波提取法等，通常依靠盐沉淀分离、吸附分离、色谱分离以及膜分离技术进行纯化［10］.其定量分析方法有比色法、UV－Vis法、HPLC法等.本实验利用超声波法提取桔梗皂苷，湿法过柱对桔梗皂苷提取液进行纯化，HPLC 法对其进行定量检测分析.其中超声波的空化作用可以加速植物有效成分的浸出，缩短提取时间，提高产品产率［11］.桔梗中皂苷类成分种类多、含量少，其提取物中还含有大量的多糖类化合物，故其提取液还需用内径2 cm的硅胶柱进行纯化.而HPLC法具有分离效率高、检测灵敏度高等优点，因而大多数皂苷类检测通常采用此法.作为大宗药材品种，桔梗形似人参，药食两用，素有“南方人参”的美誉.桔梗产地较多，不同产地药材的质量品质不同.本文对其中桔梗皂苷D的提取及定性、定量方法进行探讨，以期为桔梗的研究与质量控制提供参考.1 实验部分1.1 实验仪器与试剂Agilent 1260型高效液相色谱仪（安捷伦），AUY220电子分析天平（岛津），JK－2200DVE超声波清洗仪（合肥金尼克）.对照品溶液：将桔梗皂苷D标准品（分析纯，北京裕策达科贸有限责任公司）配制成质量浓度为0.426 0mg／mL的甲醇溶液.供试品溶液［12］：取桔梗药材粉末4.000 0g，精密称定，加入体积分数为50%的甲醇50mL，超声处理30min，放冷，过滤，滤液置水浴上蒸干.残渣加水20mL，微热使其溶解，加入水饱和的正丁醇，振摇并提取3次，20mL／次，合并正丁醇液，用氨试液50mL洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水50 mL洗涤，弃去水溶液，将正丁醇溶液蒸干.残渣加甲醇3mL使溶解，加硅胶1.0g搅拌均匀，置水浴上蒸干，加于硅胶柱上［100～120目，20g，内径为2 cm，用三氯甲烷—甲醇（体积比9∶1）混合溶液湿法装柱］，以三氯甲烷—甲醇（体积比9∶1）混合溶液50mL洗脱，弃去洗脱液，再用三氯甲烷—甲醇—水（体积比60∶20∶3）混合溶液100mL洗脱，弃去洗脱液，继续用三氯甲烷—甲醇—水（体积比60∶29∶6）混合溶液100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5mL容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，过0.45μm的微孔滤膜备用.桔梗饮片（亳州沪谯药业有限公司），使用前于烘箱70℃干燥处理后打碎，使之呈细粉状，备用.甲醇、正丁醇、三氯甲烷（均为色谱纯，国药集团化学试剂有限公司）；其余试剂为市售分析纯，实验用水为超纯水.1.2 色谱检测条件色谱柱为 Agilent Eclipse XDB－C18，5μm，4.6 mm×250mm；流动相为乙腈—水（体积比25∶75），流速1.0mL／min；柱温为室温；紫外检测器，检测波长210nm；进样量20μL.1.3 定性与定量分析分别取供试品溶液和对照品溶液进行液相分析，比较其在规定检测波长下色谱峰的保留时间，进行定性.标准曲线的绘制：将对照品溶液分别稀释5，10，25，100倍，标点质量浓度分别为85.20，42.60，17.04，4.26μg／mL.分别取上述稀释后的对照品溶液20μL 进样，测量保留时间和峰面积，用峰面积对皂苷D的质量浓度作图，绘制标准曲线.样品中皂苷D的质量分数测定：取20μL供试品溶液进样，根据保留时间定性，峰面积代入标准曲线定量.2 结果与讨论2.1 流动相的选择采用流动相乙腈与水的体积比分别为20∶80，25∶75进行试验［12］，考察流动相比例对样品分离效果的影响.试验结果表明，当乙腈与水的体积比为20∶80时，流动相对样品分离效果虽好，但干扰峰的峰面积较大；当乙腈与水的体积比为25∶75时，不仅分离效果好，而且干扰峰的面积也有所减小.故选择乙腈与水的体积比为25∶75作为流动相.2.2 定性分析分别取供试品溶液和对照品溶液进行液相分析，对照品溶液与供试品溶液的色谱图如图1和图2所示.由图1可以看出，桔梗皂苷D对照品溶液在14.23min时出现一色谱峰，即桔梗皂苷D的保留时间为14.23min.由图2可以看出，供试品溶液在14.24min时出现一色谱峰，表明供试品溶液中含有桔梗皂苷D.图1 对照品溶液色谱图Fig.1 HPLC chromatogram of standard solution图2 供试品溶液色谱图Fig.2 HPLC chromatogram of sample solution2.3 定量分析2.3.1 标准曲线的绘制将不同质量浓度的皂苷D对照品溶液进样，测其峰面积，以峰面积对质量浓度作图，绘制标准曲线，结果如图3所示.求得回归方程为y＝2.871 7x＋0.343 2，线性相关系数R2为0.999 6.图3 皂苷D的标准曲线图Fig.3 Standard curve for determination of platycodin D结果表明，皂苷D质量浓度在4.26～85.20 μg／mL范围具有良好的线性关系.2.3.2 样品的测定在试验的最佳条件下测定供试品溶液的峰面积，得样品峰面积分别为215.2，215.8，213.2，均值为214.7.计算得样品所对应的供试品溶液中皂苷D质量浓度为74.64μg／mL.2.3.3 检测结果的换算根据桔梗取样质量及样品处理过程中定容的体积，计算出桔梗样品中皂苷D的质量分数.计算公式为式中：X为样品中皂苷D的质量分数（mg／kg），C为样品测定液中查标准曲线得到的相当于标准的质量浓度（μg／mL），V 为样品定容体积（mL），m 为桔梗的取样量（g）.经计算得桔梗中皂苷D的质量分数为93.3mg／kg.2.4 精密度试验精密吸取“1.1”项下对照品溶液各20μL，连续进样6次，测其峰面积，计算RSD.得试验的相对标准偏差为0.15%，说明本方法精密度较好.2.5 稳定性试验精密吸取“1.1”项下供试品溶液20μL，于2，4，6，8，12，24h后测定，记录峰面积，计算 RSD.得试验的相对标准偏差为0.935%，表明本方法稳定性较好. 2.6 重复性试验精密称取6份桔梗粉末各4.000 0g，按“1.1”项下制备供试品溶液并稀释10倍，按“1.2”项下进样，测定，记录峰面积，计算RSD.得试验的相对标准偏差为2.12%，表明本试验方法重复性较好.2.7 加标回收率试验将已测定的样品精密称取3份，每份4.000 0 g，按“1.1”项下制备原供试品溶液，各取0.50mL，各精密加入适量的对照品溶液0.50mL，制成加标后的供试品溶液，按“1.2”项下进样，测定，记录峰面积，结果如表1所示.表1 加标回收率试验结果（n＝3）Table 1 Results of recovery tests（n＝3）样品编号本底值／（μg／mL）加入值／（μg／mL）测得值／（μg／mL）回收率／%平均回收率／%RSD／%1 37.32 10.65 47.45 95.12 2 37.32 21.30 57.10 92.86 94.18 1.20 3 37.32 42.60 77.60 94.55由以上结果可以看出，回收率为92.86%～95.12%，RSD为1.20%，说明本方法测定皂苷D的质量分数具有较高的准确度.3 结论（1）桔梗中皂苷D在高效液相色谱法下分离效率高，检测灵敏度好；本实验测得桔梗中皂苷D的质量分数为93.3mg／kg.（2）通过对桔梗中皂苷D稳定性的探讨，可以看出桔梗皂苷D在24h内基本无变化，说明其稳定性良好.（3）准确度试验和精密度试验结果均良好，表明本文对皂苷D的测量结果准确、稳定、可靠、简捷.建立了一种测定桔梗中皂苷D的液相色谱方法，可作为实验室测定桔梗皂苷D的方法.【相关文献】［1］杨壮.桔梗总皂苷的提取和纯化工艺研究［D］.杭州：浙江大学，2007.［2］舒娈，高山林.桔梗研究进展［J］.中国野生植物资源，2012，20（2）：4－6.［3］ CHOI C Y，KIM J Y，KIM Y S，et al.Augmentation of macrophage functions by an aqueous extract isolated from Platycodon grandiflorum ［J］.Cancer Leters，2001，166（1）：17－25.［4］周秀娟.桔梗的质量研究［D］.合肥：安徽中医药大学，2013.［5］ FU Wenwei，SHIMIZU N，DOU Deqiang，et al.Five new triterpenoid saponins from the roots of Platycodon grandiflorum［J］.Chemical and Pharmaceutical Bulletin，2006，54（4）：557－560.［6］付文卫，候文彬，窦德强.桔梗中远志酸型皂苷的化学研究［J］.药学学报，2006，41（4）：358－360.［7］ FU Wenwei，DOU Deqiang，SHIMIZU N，et al.Studies on the chemical constituents from the roots of Platycodon grandiflorum［J］.Journal of Natural Medicines，2006，60（1）：68－72.［8］ HE Zhendan，QIAO Chunfeng，HAN Quanbin，et al.New triterpenoid saponins from the roots of Platycodon grandiflorum［J］.Tetrahedron，2005，61（8）：2211－2215.［9］李伟.桔梗皂苷类化学成分及药理活性研究［D］.长春：吉林农业大学，2007.［10］贺红军.茅莓总皂苷提取及纯化工艺研究［D］.重庆：重庆医科大学，2011.［11］纵伟，李翠翠，赵光远，等.桔梗皂苷超声提取工艺优化研究［J］.江苏农业科学，2012，40（6）：244－247.［12］李喜凤，刘素梅，李振国.RP－HPLC法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量［J］.中华中医药学刊，2008，26（2）：283－284.。
不同产地桔梗皂苷成分HPLC指纹图谱比较研究
不同产地桔梗皂苷成分HPLC指纹图谱比较研究曾金祥;方香香;朱继孝;吴波;钟国跃;刘福青;李洪泽;韩风雨【摘要】目的：研究不同产地的桔梗药材皂苷指纹图谱，为桔梗的质量控制与生产提供参考依据。
方法：采用DB101大孔树脂纯化精制桔梗皂苷，应用HPLC-ELSD法测定全国9省市自治区39批桔梗样品皂苷类化学成分指纹图谱。
色谱条件：选用Agilent HC-C8（4.6 mm×250 mm，5μm）柱，流动相为乙腈-0.5%乙酸系统，梯度洗脱；进样量6μL；流速0.5 mL·min-1；漂移管温度90℃；氮气流速1.2 mL·min-1。
结果：以内蒙古赤峰产区牛家营子镇6批样品共有指纹图谱为参照，发现各产区桔梗药材品质存在较大差异，其品质与各地桔梗栽培用种种源不规范和生态环境差异及药材干燥、贮藏等初加工方式密切相关。
结论：在桔梗栽培生产中，应加强桔梗种源基地建设，规范用种，合理制定桔梗生产区划，规范桔梗产地加工。
%The HPLC fingerprint differences ofRadix Platycodonis from different origins were studied to provide references for their quality control and production. The total platycodins were purified by DB101 macroporous resin. HPLC-ELSD fingerprints of the total platycodins for 39 batches ofRadix Platycodonis samples from 9 provinces were performed on an Agilent HC-C8 column (4.6 mm x 250 mm, 5µm) with gradient elution. The mobile phase was acetonitrile-0.5% acetic acid. The injection volume was 6μL. The flow rate was 0.5 mL·min-1. The temperature of drift tube was set at 90℃. And the gas flow (N2) was set at 1.2 mL·min-1. The results showed that there were large differences in the quality ofRadix Platycodonis from different origins with the common fingerprints of 6 batches of samples fromChifeng in Inner Mongolia as references. Thequality ofRadix Platycodonis was closely related to the seeds, the ecological environment, the way of drying and storing and so on. It was concluded that it was important to strengthen the provenance base construction, standardization of the seeds, reasonable formulation of the regionalization, and standardization of the production processing for the cultivation and production ofRadix Platycodonis.【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】7页(P1000-1006)【关键词】桔梗;指纹图谱;皂苷;品质差异【作者】曾金祥;方香香;朱继孝;吴波;钟国跃;刘福青;李洪泽;韩风雨【作者单位】江西中医药大学中药资源与民族药研究中心南昌330004; 江西省中药种质资源工程技术研究中心南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心南昌330004; 江西省中药种质资源工程技术研究中心南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心南昌330004; 江西省中药种质资源工程技术研究中心南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心南昌330004; 江西省中药种质资源工程技术研究中心南昌330004;内蒙古蒙吉药业科技有限责任公司赤峰024000;内蒙古天奇中蒙制药股份有限公司赤峰 024000;内蒙古天奇中蒙制药股份有限公司赤峰 024000【正文语种】中文【中图分类】R284.1桔梗为常用中药材，来源于桔梗科植物桔梗Platycodon grandiflorum（Jacq.）A. DC.的干燥根，具有宣肺、利咽、祛痰、排脓的功效，用于咳嗽痰多，胸闷不畅，咽痛音哑，肺痈吐脓[1]。
不同产地桔梗药材HPLC指纹图谱及桔梗皂苷D含量测定研究
不同产地桔梗药材HPLC指纹图谱及桔梗皂苷D含量测定研
究
李喜凤;杜云锋;谢新年;刘素梅;郝哲
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2010(032)004
【摘要】目的:建立桔梗药材的HPLC指纹图谱并测定桔梗皂苷D的含量.方法:采用RP-HPLC法,以Hypersil C_(18)柱(250mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.05 mol/L H_3PO_4溶液进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长210 nm(桔梗皂苷D含量测定为206 nm),柱温30℃.结果:以桔梗皂苷D为参照物峰,确定了12个共有峰,建立了18批药材的共有图谱,并比较了样品中桔梗皂苷D的含量.结论:所建立的HPLC指纹图谱及含量分析方法均具有较好的重现性,两者结合为桔梗药材质量控制提供了新的方法.
【总页数】4页(P529-532)
【作者】李喜凤;杜云锋;谢新年;刘素梅;郝哲
【作者单位】河南中医学院,河南,郑州,450008
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.HPLC法测定不同产地桔梗的桔梗皂苷D含量 [J], 王新军;何念武;邓寒霜
2.山东省不同区域桔梗药材中桔梗皂苷D的测定 [J], 申茹;徐英辉;莫颖华;王立娟;
郭玉岩
3.不同产地桔梗中桔梗皂苷D及总多糖的含量比较 [J], 金传山;张伟;桂双英;彭代银;吴德玲;黄力;李保明
4.不同产地桔梗HPLC指纹图谱及化学模式识别研究 [J], 张迟;黄戎婕;曾金祥;钟国跃;韩风雨;于秀玲
5.HPLC法测定桔梗不同部位、不同产地药材中桔梗皂苷D含量 [J], 石俊英;王颖;巩丽丽;任霜亭
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同产地桔梗药材HPLC指纹图谱及桔梗皂苷D含量测定研究
关键词：桔梗； 指纹图谱； 桔梗皂苷 D； 含量测定
摘要：目的：建立桔梗药材的 HPLC 指纹图谱并测定桔梗皂苷 D 的含量。方法：采用 RP-HPLC 法，以 Hypersil C18 柱（250 mm × 4. 6 mm，5 μm） 为色谱柱，乙腈-0. 05 mol / L H3 PO4 溶液进行梯度洗脱，流速 0. 5 mL / min，检测波长 210 nm（ 桔梗皂 苷 D 含量测定为 206 nm） ，柱温 30 ℃ 。结果：以桔梗皂苷 D 为参照物峰，确定了 12 个共有峰，建立了 18 批药材的共有
1. 0021 2. 319 3 2. 385 1 4. 704 9 99. 57
收稿日期：2009-12-16 基金项目：河南省科技厅资助项目（0323032200） 作者简介：李喜凤（1952 － ） ，女，教授，硕士生导师，研究方向：中药新药及质量标准的研究。Tel. ：（0371）65575823 E-mail：dyf323 @ yahoo. com. cn
529
2010 年 4 月 第 32 卷 第 4 期
2010 年 4 月 第 32 卷 第 4 期
中成药 Chinese Traditional Patent Medicine
April 2010 Vol. 32 No. 4
［中药指纹图谱］
不同产地桔梗药材 HPLC 指纹图谱及桔梗皂苷 D 含量测定研究
李喜凤， 杜云锋， 谢新年， 刘素梅， 郝 哲 （ 河南中医学院，河南 郑州 450008）
定。结果显示，桔梗皂苷 D 的平均回收率为 100. 87% ，RSD
为 1. 11% 。结果见表 2。
表2
加样回收试验测定结果
Table 2 Determination of average recovery
HPLC_ELSD法测定桔梗中3种桔梗皂苷的含量_叶静
第31卷第5期2010年9月西安交通大学学报(医学版)Jo ur nal of X i an Jiao to ng U niv ersity (M edical Scie nce s)V ol.31N o.5Sep.2010HPLC -ELSD 法测定桔梗中3种桔梗皂苷的含量叶 静1,肖美添1,2,汤须崇1,黄雅燕1(华侨大学:1.化工与制药工程系;2.制药工程研究所,福建厦门 361021)摘要:目的 建立测定桔梗药材中桔梗皂苷D 、D 3、E 含量的方法。
方法 采用高效液相色谱-蒸发光激光闪射检测器(H PL C -EL SD)法,H ypersil C 18柱(5 m,4.6mm 150mm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0mL/min,EL SD 漂移管温度113 ,载气(N 2)流速3.0L /min 。
结果 桔梗皂苷D 、D 3、E 的线性范围分别为13.78~275.6 g /mL (r =0.9995)、8.40~168.0 g /mL (r =0.9997)、12.02~240.4 g/mL (r =0.9996),平均回收率(n =5)为98.3%、99.4%和101.3%。
结论 本法操作简便,结果准确可靠,可用于桔梗皂苷D 、D 3、E 含量的测定。
关键词:桔梗;桔梗皂苷;H PL C -ELSD中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1671-8259(2010)05-0640-03HPLC -ELS D for determining the content ofthree platycodins in Radix platy codoiYE Jing 1,XIAO M e -i tian 1,2,T ANG Xu -chong 1,H UA NG Ya -yan 1(1.Department of Chemical and Pharm aceutical Eng ineer ing,H uaqiao University,Xiamen 361021; 2.Institute of Pharm aceuticalEngineering ,H uaqiao U niv ersity,Xiamen 361021,China)ABSTRAC T:Objective T o establish a qua ntita tiv e metho d to de term ine the co ntent of platy codin D ,D 3and Ein Radix platycodi.Methods H igh pe rf or mance liquid chro mata gr aphy -ev apro r ative light scatter ing decto r(HP LC -EL SD)met hod was a do pted.Platy codin D ,D 3and E we re se pa ra ted by C 18(5 m,4.6mm 150m m)w ith aceto nitr ile -w ater as mo bile phase in a gr adient pr og ra m;f lo w rate was 1.0mL /min,the tem per at ure o f dr if t tube was set at 113 ,a nd the gas f lo w (N 2)wa s set at 3.0L /min.R esults T he linea r r anges o f platy codin D ,D 3andE w er e 13.78-275.6 g/m L (r =0.9995),8.40-168.0 g /mL (r =0.9997)a nd 12.02-240.4 g /mL (r =0.9996),respec tiv ely.T he a ver age reco ve ries (n =5)wer e 98.3%,99.4%and 101.3%,respec tiv ely.C onclusion T he metho d is co nvenient,accura te and r eliable,and can be used fo r the deter minatio n of platy codinD,D 3and E in Radix plat yco do i.KEY WORDS:Ra dix platycodoi ;pla tyco din;HP LC -EL SD 收稿日期:2009-09-02 修回日期:2009-12-07作者简介:叶静(1980-),女(汉族),讲师,硕士,主要从事中药及中药制剂质量分析研究.E -m ail:yejenny@h 中药桔梗(Radix p laty codi )为桔梗科植物桔梗Platy codon g randif lor um (Jacq.)A.DC.的干燥根,在我国药用历史悠久,具有宣肺、利咽、祛痰和排脓之效[1]。
HPLC-ELSD法测定桔梗饮片中8种桔梗皂苷的含量
妮 等Ｅ首 次采用 ＨＰ — Ｉ Ｄ 法测 定 了桔 梗 中皂苷 Ｄ含量 ．夏泉 等 通过 ＨＰ — Ｉ Ｄ 建立 了测 定 ｓ ］ Ｉ Ｅ Ｃ Ｓ ］ Ｉ Ｅ Ｃ Ｓ 桔梗 样 品 中桔 梗皂 苷 Ｅ含 量 的方 法．Ｆ Ｚ ＴＩ ７ 用 ＨＰ — Ｉ Ｄ法 分离 、 定 了 ２ 种 人 参 皂 ＵＺ Ａ 等Ｉ采 Ｉ Ｅ Ｃ Ｓ 测 ５ 苷．在本 文 中 ， 笔者将 首次 通过 建立 多指标 体系 的方法 ， 采用 ＨＰ — Ｉ Ｄ法 测定 桔梗 饮 片中 ８种桔 Ｉ Ｅ Ｃ Ｓ
中 图 分 类号 ： ５ ． ２ Ｒ ２ ４ １ ０ ６ ７ ７ ； ８． 文 献标 识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：１０ —８ ４ ２ ０ ） ４ ０ ４ —０ ０ ７ ２Ｘ（０ ８ ０ — ０ １ ４
桔梗 （ ａ ｉ ｐａｙｏ ｏ ｉ 为 桔梗 科 （ ａ ａ ｕａｅｅ 植 物 桔 梗 Ｐ ａｙ ｏ ｏ ｒｎ ｉｌ ｕ （ａｑ ） Ｒ ｄｘ ｌ ｃｄ ｎ ） ｔ ｓ Ｃ ｍｐ ｎ ｌ ａ ） ｃ ｌｔｃｄ ｎｇ ａ ｄｆｏ ｍ Ｊｃ ． ｒ Ａ．Ｄ ． Ｃ 的干燥根 ｎ ，经炮 制可 制得 桔梗 饮 片Ｌ ，是 临床 中药配 伍 常用 的一 味 中药．桔梗 的主要有 效 ］ ２ ］ 成分 为桔 梗皂 苷 ， 占 ２ ４ ．３ 约 ． ［ 由于皂 苷 类化合 物无 共轭 结构 ， 强 的发 色基 团 ， 在紫 外光 谱 区仅 无 故
HPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量
HPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量植物资源与环境2001,10(4):11—13JoMofP/antResourcesandEr~vlronmentHPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量朱丹妮,舒娈,郅慧,高山林(中国药科大学,江苏南京210038)摘要:首次采用高效液相一蒸发光散射检测器色谱法测定桔梗[P/atycodonl朋卿1帅(Jacq.)A.Dcj中桔梗皂苷D吉量,c.a(5.um,46哪×250哪)为色谱拄,(乙腈):"水)=28:72为流动相,流速O7mI3min,ELSD-5~为检测器,外标法定量.结果表明:桔梗皂营D在O.3～2.4腭范厨内呈线性,回收率为99.57%(n=5),RSD为110%.对8种不同来源的桔梗材料和加个四倍体株系桔梗皂甙D含量的测定说明,此法是测定桔梗皂苷D的较佳方法,可作为我国桔梗质量控制和评价的一种可靠的技术.关键词:桔梗;桔梗皂甙D;高效液相一蒸发光散射中国分类号:$657.72;S:~i7.239;o946.83文献标识码:A文章编号:l0(2∞1)04-001I-03I)e~fionofpla留0曲D.m用哟m峨肋nⅢby珈PIⅡI地山0dZttUDan-ni,sHuh锄,丑ⅡHui,GAOshan—bn(ChinaPharmaceuticalUniversity,Naniing210o38,cna),J.P/o~aRe∞Ⅳ.&Er~ron.2cl01.10(4):11—13A晌ct:1kSp4perestabliBhedanHPLc-E|Dmeth0dtodeterminethe~,nlentofplatye0dinDin differentsampofPlacycodon曲%Ⅲ(Jaeq.)A.Dc.Allt~hC18Ilr|lrI(5,4.6mmX250mm) w鹊used,mobilepIIasew鹊(aeetonimle):(water)=28:72at0.7m[/n~,l即eed.Ⅱs】)-500deteemrwasUSedforqualitativeandqu~ltitativeanalysisinextemalstandardⅡIetll0d.Obrainedresultsindie~tedthatwithin0.3— 2.4pl0ayeodinDhadago0dlinearity.1heaveragerecoveryw舾99.57%(n=5)wi由RSD1.10%.Inordertoevaluatetllereliabilltyoftllisnewmethod.thecontentofplatye~linDin8eV elldifferent疵lals~np]esand20inducedtetraploidlinesintissuecultureweredetermined.11leobtainedres ultsindie~tedthatthisiSfirsttimetoreportanadvancedandeffectivem柚0dfortlleqltv~ntm]andevaluatiOnforrawmaterialsofP..Key删rds:Placycodo~姗回z叭m(J.)A.IX1.;p【a|yo0djnD;l~yploid;}删一ELsD 中药桔梗为桔梗科植物桔梗(im耐‰m(Jacq.)A.IX:.]的干燥根.在我国药用历史悠久,有宣肺,利咽,祛痰和排脓之教….桔梗皂苷为桔梗中主要有效成分,桔梗皂苷D是桔梗皂苷中的主要皂苷.中国药典中对桔梗总皂苷含量的测定用重量法…,无桔梗皂苷D含量测定方法的记录.韩国学者采用反相ttPLC测定桔梗皂苷D.测得韩国国内桔梗根中的皂苷D含量为0.050%～0.090%."l.日本学者用ttPLC法以'INK-GEL酰胺.8o为分析柱,以(乙腈):V(水):82:18为洗脱液,检测波长203nm,定量或定性分析桔梗皂苷D;我国学者许传莲等采用I/P-IfPLC法测定不同产地桔梗中皂苷D的含量,选择C,.柱为色谱分析柱,检测波长为210nm.由于桔梗皂苷D无C=C双键和共轭结构,无强的发色基团,末端吸收(203n/in,210nm)检测干扰较大.作者首次采用ttPLC.E1SD法测定桔梗皂苷D含量,旨在为控制桔梗药材质量提供科学的分析方法.l材料和方法1.1材料来源供试的桔梗药材购白安徽省毫州药材公司.经余伯阳教授鉴定;桔梗四倍体株系由中国药科大学遗传育种教研室经组织培养人工诱导培育;对照品桔梗皂苷D由吉林农业大学刘墨祥教授惠赠.1.2仪器与试剂Shin~lzu10A高效液相色谱仪(配备Shama~C—R6A数据处理机,NlteehELSD.500型蒸发光散射收藕日期:20Ol-O7—23作者简介:朱丹妮(1946一).女,上海市人.学士.副研究员,长期从事中药复方化学和物质基础研究.2植物资源与环境第1O卷检测器)乙腈(色谱纯1,水为二次重蒸水.1.3色谱条件色谱柱为c8柱(5,4.6mm×250ram):流动相:(乙腈):V(水)=28:72;流速0.7mLhnin;柱温为室温;进样量:2(】;ELSD检测器检测参数:漂移管温度l11;载气()流速2.75Um_ml_理论塔板数据按桔梗皂苷D峰计算,应不低于30C0.1.4供试品提取方法比较1.4.1回流提取精密称取干燥粉碎过5O日筛的桔梗药材200mg,加入5OrIlL甲醇于索氏提取器中四流提取4h,过滤,滤液回收至干,残渣加入25mL水溶解,以乙醚萃取3次.水液以水饱和正丁醇萃取5次,合并正丁醇液,LHj收至干,残渣以甲醇溶解并定容5mL作为供试品.1.42超声提取精密称取干燥粉碎过5O目筛的桔梗药材2OOmg,加入25mL甲醇超声提取30min, 过滤,滤渣再加入25mL甲醇超声提取30mln,过滤,用少量甲醇洗涤滤渣,合并2次滤液,回收甲醇至于,将残渣以甲醇溶解并定容于5mL容量瓶中. 以上2种供试液按上述色谱条件注入液相色谱仪,测定峰面积,试验表明两种方法制备的供试品中桔梗皂苷D的含量无显着性差异,因此以下供试品溶液的制备采用操作简便的超声提取法.l_5对照品溶液的制备精密称取桔梗皂苷D对照品1.2mg,置10mL容量瓶中加适量甲醇溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液(O.12rrrIlL).l_6测定方法按超声提取法制备供试品溶液精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20uL,注入液相色谱仪,按以上色谱条件测定峰面积,峰面积及浓度均取自然对数后用标准曲线计算桔梗皂苷D含量.1.7不同产地及桔梗多倍体样品桔梗皂苷D含■测定取河南,广西,安徽,山西,湖南,湖北和江苏产桔梗药材及2o个四倍体株系试管苗,依上法测定桔梗皂苷D含量2实验结果2.1桔梗皂苷D浓度和峰面积线性关系的考察分别取上述对照品溶液2.5,5,lO,l5和2ouL进样,按上述色谱条件测定峰面积,以色谱峰峰面积的自然对数为纵坐标,以桔梗皂苷D对照品进样量的自然对数为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程:l,=1.7858X+4.8797,r=0.9991,线性范围为0.3～2.4tzg表明线性关系良好2.2精密度试验精密吸取桔梗皂苷D对照品溶液2OuL,重复进样5次,测定其峰面积积分值分别为44191, 44980,44O69,44784和43806,平均44366,RSD为1.12%(n=5),表明进样精密度良好2.3稳定性试验将同一供试品溶液分别在0,2,4,6和8h进样.测得桔梗皂苷D的峰面积分别为24384,24775, 248o3,24773和24468,均值24641,ItSD为0.81%,表明样品溶液在8h内稳定2.4重现性试验取同一产地桔梗药材5份,按1.4.2项下制得供试品,按以上色谱条件测得桔梗皂苷D的含量分别为0.2470%,02442%,0.2475%,0.2427%和0.2447%,平均0.2452%,RSD=0.82%,表明用此方法测定桔梗皂苷D重现性较好.2.5回收率试验采取加样回收测定方法,精密称取已知含量同批药材粉末(其中含桔梗皂苷D0245%)5份,每份约100mg,加入对照品溶液2mL(含桔梗皂苷D 0.24mg),按1.4.2项下制备,进样2o止,测定桔梗皂苷D峰面积,计算回收率,结果见表l.可以看出5份样品的平均回收率为99.57%,表明此法的回收率较高.2.6不同产地桔梗药材中桔梗皂苷D含■采自河南,广西,安徽,山西,湖南,湖北和江苏的桔梗药材中桔梗皂苷D的含量(ng)分别为2.65,2.68,2.49,2_86,2.8o,2.68和2.78,变动于2.49Ⅱg～2.86mug(0.249%～0.286%)之间,但均显着高于采用反相HPLC法测得的韩国产桔梗根中的桔梗皂苷D含量(O050%～0.090%)3J.2.7桔梗多倍体样品桔梗皂苷D含■根据本研究建立的方法,以桔梗二倍体为对照测定了20个多倍体株系(称样量均为200mg)桔梗皂苷D含量,结果见表2.第4期朱丹妮等:HPLC—ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量13 表1桔梗皂苷D加样回收覃试验结果Table1R咧惦0f呻叫哪r0fp咖_mD襄2桔梗四倍体株系殛亲奉二倍体试管苗桔梗皂苷Ⅱ音量2Tk蛳t0f曲哪∞d-ⅢD-mtet瑚p10柚删曲,l.id0f∞出嘞mⅢIJ日蚺.)A.Dc.表2表明:20个四倍体株系的桔梗皂苷D含量在2.02~ng/g～306IIg之问,有8个株系高于=:倍体,c.5株系含量最高达3.06lg,比二倍体高176%,余均与二倍体接近,桔梗四倍体,二倍体株系测得的桔梗皂苷D含量大多在2.5mg(0.25%)以上,与7省区采集的桔梗根的桔梗皂苷D含量相近四倍体的田问农艺性状及根部产量优于二倍体,因此为进一步选育产量高及皂甙含量高的优良桔梗品种展示了较好的前景3讨论蒸发光散射检测器ELSD是一种通用质量型检测器,流动相由热气流使之气化喷雾.再进人加热管,溶剂在此挥发,所得分析检测的物质颗粒通过狭窄光束散射,由光电倍增管收集,ELSD的响应取决于被分析物质颗粒的数量和大小,不受溶剂的干扰,已成功用于皂苷,生物碱,萜类内酯,氨基酸和糖类等分析,是分析无紫外吸收和紫外吸收弱成分的有力工具本实验的条件是经过反复实验后,综台评价而得出的.作者首次采用HPLC—ELSD法测定桔梗皂苷D的含量.并通过对7个不同来源的桔梗材料和20个四倍体株系桔梗皂苷D的含量测定,验证此方法用于桔梗皂苷D含量测定是可行的.供试样品溶液的制备采用2种方法.一种为超声提取法;另一种为传统提取法经过测定,得出两种方法制备的供试品中桔梗皂苷D的含量无显着性差异.因此选择采用步骤少,操作简便的超声提取法作为供试品的制备方法.2OOO年版中华人民共和国药典未收载桔梗皂苷D的含量测定方法,仅用重量法测定正丁醇部位的量,比较粗糙,HPLC—ELSD法的建立,为控制桔梗的质量和试管苗的早期筛选提供了新的方法.参考文献:[1]中华^民共和国药典委员会.中华^民共和国药典2∞0年版(一部)[M]北京:化学工业出版社.2∞02252]肖祟厚中药化学[川上海:上海科学技术出版社.1997,419—421.【3jKimTJ,LeeSjlsolati~anddetemfimai~ofplaty,zodlnD platyc,od~【J.~malSeiTedmol,1990.3(3):339～341.[4]小木曾弘尚桔梗皂苷的I-IPLC定量分析J].国外医学中医中药分册,1995.17(5):33[5]原田正敏繁用生药成分定量M],京:东京广JIJ书店,j989j20一j33[6]许传莲.杨睹虎,郁毅男,等应用RP.I-IPLC法测定不同产地中桔梗皂苷DJ].吉林农业大学.1999.21(4):35—38.7]舒娈.高山林.桔梗蛆鲤培养技术的研究[J]植物资掉与环境,2.00110(3):63—64(责任编辑:宗世贤)。
HPLC法测定桔梗药材中桔梗皂苷D的含量
艺。
的峰 面积 ， 其Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ４ ２ ％， 表 明精 密 度 良好 。
三萜 皂 苷 ， 桔 梗 皂苷 Ａ、 桔梗 皂 苷 Ｂ、 桔梗皂苷 Ｄ
柱（ ２ ５ ０ ｍ ｍ×４ ． ６ ａ ｒ ｍ， ５ ｔ ｘ ｍ） ； 流 动 相 Ａ： ０ ． １ ％ 磷 酸溶 液， 流 动相 Ｂ： 乙腈 ， 按 表 １进 行 梯 度 洗 脱 ； 流速 ： ０ ．
５ ｍ ｌ Ｍｍｉ ｎ ； 柱温： ３ Ｏ ℃； 进样量 １ ０ １ ｘ Ｌ ； 检 测 波 长 为
２ｌ Ｏｎ ｍ。
等， 其他 尚含有 黄 酮 、 聚炔 、 甾体 、 酚酸、 脂 肪 酸 等类 型 的化合 物 。现代 研 究 表 明 ， 桔梗 的主 要 活 性成 分
表 １ 梯 度 洗 脱 程 序
Байду номын сангаас
为桔梗皂苷类成分 ， 具有祛痰 、 抗炎 、 降低毛细血管 通 透性 、 抑 制佐 剂性 关 节 炎 、 以 及 松 弛 肠 道 平 滑
明， 超声 提取 与加 热 回流提 取 的桔 梗 皂 苷 Ｄ 的含量
２ ． ５ 精 密度 试验
精 密 吸取 对 照 品溶 液 １ ０ ｐ ￣ Ｌ ， 在
２ ． １ 项 色谱条 件下 ， 连 续进 样 ６次 ， 得 到桔 梗 皂 苷 Ｄ
相当， 且 大 于索 氏提取得 到 的量 ， 由于超声 方法 比较
甲醇 ３ ０ ｍＬ ， 超声 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 滤过 ； 滤 渣 置 具 塞 锥 形 瓶
Ｂ Ｓ Ａ １ ２ ４ Ｓ天平 （ Ｓ ａ ｒ ｔ ｏ ｒ ｉ ｕ ｓ ） 。
中， 精 密加 入 ５ ０ ％ 甲醇 ３ ０ ｍ Ｌ ， 超声 ３ ０ ｍｉ ｎ ， 滤过 ； 合 并续 滤 液 ， 于水 浴 中蒸 干 至 ５ ０ ｍ Ｌ以下 ， 用 甲醇定 容 至５ ０ ｍＬ ， 续滤 液过 ０ ． ２ ２ １ ｘ ｍ微 孔滤膜 ， 备用。
HPLC-ELSD法测定复方桔梗止咳片中桔梗皂苷D的含量
HPLC-ELSD法测定复方桔梗止咳片中桔梗皂苷D的含量张秀丽;郑琰;崔岩【摘要】Objective To determine the compound Platycodon cough of platycodin D establish a method. Method Using the method of HPLC-ELSD, The column was KromasilC18(4.6 mm ×250 mm,5 μm), mobile phase acetonitrile water (28∶72), The lfow rate was 0.9 mL/min, the ELSD drift tube temperature of 70 ℃, and the gas lfow rate is 3.0 SLPM/ min.Results The linear range of Platycodin D was 0.1950~4.8750 μg(r=0.9996), The average recovery was 99.44%, RSD=1.2% (n=6). Conclusion The method is accurate with a good reproducibility ,and suitable for quality control of compound Platycodon cough.%目的：建立一方法来测定复方桔梗止咳片中的桔梗皂苷D。
方法采用HPLC-ELSD法，色谱柱为KromasilC18（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-水（28∶72），流速为0.9mL/min，ELSD漂移管温度为70℃，气体流速为3.0SLPM/min。
结果在0.513～10.26μg线性范围内桔梗皂苷D进样量与峰面积呈良好的线性关系良好（r=0.9996），平均回收率99.44%，RSD=1.2%（n=6）。
HPLC法测定不同产地桔梗的桔梗皂苷D含量
HPLC法测定不同产地桔梗的桔梗皂苷D含量王新军;何念武;邓寒霜【摘要】Through adopting HPLC method,we determined the content of platycodin D in Platycodon grandiflorum samples at various growth ages and from different areas. The results revealed that there was a great difference in the content of platycodin D in various samples;the content of platycodin D in Platycodon grandiflorum sample was positively correlated with its growth age;the 3-year-old Platycodon grandiflorum sample from Zibo,Shandong had the highest platycodin D content.%采用HPLC法测定了不同产地、不同生长年限的桔梗样品中桔梗皂苷D的含量。
结果显示：不同产地、不同生长年限的桔梗样品中桔梗皂苷D含量差别较大；桔梗样品中桔梗皂苷D的含量与其生长年限呈正相关；以山东淄博3年生桔梗中的桔梗皂苷D含量最高。
【期刊名称】《江西农业学报》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】4页(P57-60)【关键词】桔梗;HPLC;桔梗皂苷D;含量;产地【作者】王新军;何念武;邓寒霜【作者单位】商洛学院生物医药工程系，陕西商洛726000;商洛学院生物医药工程系，陕西商洛726000;商洛学院生物医药工程系，陕西商洛726000【正文语种】中文【中图分类】S567.19桔梗Platycodon grandiflorum (Jacq.) A. DC.为桔梗科、桔梗属多年生双子叶草本植物,是一种药食同源的中药材[1],为2010年版《中国药典》收载品种,其根部入药,亦可食用,主要的化学成分为桔梗皂苷。
论文-RP-HPLC测定桔梗地上部分桔梗皂苷D的含量
目录题目 (I)摘要及关键词 (I)1 前言 (1)2 材料与方法 (1)2.1 材料 (1)2.2 方法 (1)2.2.1 色谱条件 (1)2.2.2 对照品溶液的制备 (1)2.2.3 样品溶液制备 (1)2.2.4 线性关系考查 (2)2.2.5 精密度实验 (2)2.2.6 稳定性实验 (2)2.2.7 重复性实验 (3)2.2.8 加样回收率实验 (3)3 结果 (3)4 总结与讨论 (3)参考文献 (4)致谢 (5)RP-HPLC测定桔梗地上部分桔梗皂苷D的含量学生：专业：指导教师：摘要：目的是建立桔梗地上部分桔梗皂苷D的检测方法。
采用反相高效液相色谱法，以Hypersil ODS2色谱柱（150mm×4.6mm,5μm），乙睛/水为流动相，梯度洗脱，流速：1.0mL/min；检测波长210nm; 柱温：室温，以外标法检测。
结果显示桔梗皂苷D在0.8-6.4μg范围内呈良好线性关系，平均回收率为97.8%。
结论说明首次报道了桔梗地上部分桔梗皂苷D的含量测定方法，该方法准确可靠，可作为桔梗地上部分桔梗皂苷D 的质量控制依据。
关键词：桔梗地上部分；桔梗皂苷D；RP-HPLCRP-HPLC Determination of platycodin D in aerial parts ofPlatycodon grandiflorumName: Zhang XinMajor: Traditional Chinese MedicineTutor: ×××Abstract:To set up an assay method for the determination of platycodin D in the aerial parts of Platycodon grandiflorum A.DC. The samples was determined by RP-HPLC on a Hypersil ODS2 column (150mm×4.6mm,5μm).The mobile phase con sisted of CH3CN-H2O by gradient elution. The flow rate was 1.0mL/min.The detection wavelength was 210nm. Results show that the calibration curve was linear in the range of 0.8-6.4μg. The average recovery was 97.8% . The conclusion indicates we firstly repo rted the method for platycodin D in the aerial parts of Platycodon grandiflorum A.DC. and it can be for the quality control of the the aerial parts of Platycodon grandiflorum A.DCKey words: Aerial parts of Platycodon grandiflorum ; platycodin D; RP-HPLCI1 前言桔梗（Platycodi Radix）为桔梗科(Campanulaceae)植物桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq.)A.DC.的干燥根。
HPLC-ELSD法测定不同海拔高度桔梗皂苷的含量
Ｒ Ｓ Ｄ高浓度 分别 为 ０ ． ５ ％、７ ． １ ％， 低 浓度 分别 为 ７ ． ４ ％、７ ． ６ ％，
中间浓度分别 为 ４ ． ６ ％、５ ． ８ ％。
３ 讨 论
楼江 ， 王峰 ， 李焕德 ． 阳离子色谱柱 一 ＨＰ Ｌ Ｃ法测定 人血 浆中氯 氮平及去 甲氯氮平浓度 ． 药物分析杂志 ， ２ ０ １ ３ （ １ ） ： ４ ４ — ４ ９ ． 刘伟忠 ， 陈清 霞 ， 朱军 ． 等 ． ＲＰ — Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法 同时测定 人血浆 中氯
样 品处 理方法 进行 ，日内进行 ６ 次测定 ， 隔 日进行 １ 次测定 ， 结 果 高浓 度 为 ２ ． ０ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ ， 低 浓 度为 ０ ． １ ０ ｍｇ ／ Ｌ ，中间浓 度为 ０ ． ５ ０ ｍ ｇＬ ， 对 照品血浆 的 回收率 高浓度为 （ ９ ２ ． １ ±３ ． １ ） ％， 低浓
参 考 文 献
张文英 ， 郭莉萍 ， 沈广虎 ． 在线 固萃 取一 高效液相色谱法检测
人血清 中氯氮平浓度 ． 山东医药 ， ２ ０ １ ３ ， ５ ３ （ １ ９ ） ： ５ ２ ． 杨辉 ， 张冰 ， 李荣 ， 等． 高效液 相色谱法测定 人血清中氯 氮平 浓度 ． 中国实用医药 ， ２ ０ １ ０ ， ５ （ ２ ０ ） ： ９ ２ ．
１
］ｊ
２
３
４
］
５
６
ＨＰ Ｌ Ｃ — Ｅ Ｌ Ｓ Ｄ法测 定不 同海拔 高度 桔梗 皂苷 的含量
陈 良胜 方应 权
【 摘要 】 目的 测定大别 山不 同海拔高度桔梗药材 的桔梗皂苷 的含 量 ， 为评价其质量品质提供理论 依据。方法 采用高效液相色谱 一蒸发光 散射检测器 （ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ － Ｅ Ｌ Ｓ Ｄ ） 法， Ｋ ｉ ｎ ｅ ｔ ｅ ｘ Ｃ 色谱柱 （ ４ ． ６ ｉ ｆ ｌ ｍ ｘ １ ０ ０ ｍｍ ， ５ ｍ １ ； 流 动相 乙腈 （ Ａ ） 一 ０ ． １ ％ 甲酸溶 液 （ Ｂ ） ， 梯 度洗脱 ； 流速 ０ ． ４ ｍｌ ／ ｍ ｉ ｎ 。结果 １ ０ ０ ０ ｍ海拔． Ｄ ｃ ． 的干燥 根 ， 在我 国药 用 历史 悠久 ， 具有 宣肺 、 利 咽 、祛痰 和排脓 之效 ¨ 。』 。桔梗 中 主要成分 是桔 梗皂 苷 ， 现代药理研究试 验表明 ： 桔梗 中的主要 活性 物质桔梗总皂苷 具有广 泛的生物 活性 ， 在免疫 调节 、抗炎 、镇 痛 、解热 、祛
HPLC-ELSD法同时测定桔梗中5种皂苷含量
HPLC-ELSD法同时测定桔梗中5种皂苷含量岳虹;陈芙蓉;王梦丽;谢红英;冯亚男;徐小平【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2016(042)001【摘要】建立高效液相色谱法同时测定桔梗药材中去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷D的方法.色谱柱为ODS 250mm×4.6 mm×5 μm,流动相A为乙腈-0.2％甲酸,流动相B为水,采用梯度洗脱(0～15 min,20％～22％A;15～60 min,22％A;60～65 min,22％～30％A;65～70 min,30％～20％A).供试品经50％甲醇(v/v)超声提取30min,过滤蒸干后以50％甲醇(v/v)定容至5mL容量瓶中;漂移管温度为75℃,氮气流量为2.5 L/min.去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷D分别在0.64～6.4μg、1.22～12.2 μg、1.08～10.8μg、0.74～7.4 μg,1.7～17 μg范围内组分浓度与峰面积线性关系良好;药材中5种成分的平均加标回收率分别为101.1％、99.9％、100.4％、100.7％和101.6％;RSD均＜5％.该方法简便、准确,分离效果好,可用于桔梗药材的质量控制.【总页数】4页(P49-52)【作者】岳虹;陈芙蓉;王梦丽;谢红英;冯亚男;徐小平【作者单位】四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041;四川大学华西药学院,四川成都610041【正文语种】中文【相关文献】1.不同海拔高度桔梗药材中3种桔梗皂苷含量的测定 [J], 黄娇;姜登军2.HPLC-ELSD法测定桔梗中3种桔梗皂苷的含量 [J], 叶静;肖美添;汤须崇;黄雅燕3.HPLC-ELSD同时测定知母药材中3种主要皂苷含量 [J], 朱岩4.HPLC-ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量 [J], 朱丹妮;舒娈;郅慧;高山林5.HPLC-ELSD同时测定铁破锣中3种三萜皂苷含量及体外抗氧化性研究 [J], 周静;叶朝晖;吴燕华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC—ELSD法同时测定桔梗中5种皂苷含量
HPLC—ELSD法同时测定桔梗中5种皂苷含量作者：岳虹陈芙蓉王梦丽谢红英冯亚男徐小平来源：《中国测试》2016年第01期摘要：建立高效液相色谱法同时测定桔梗药材中去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷D的方法。
色谱柱为ODS250mmx4.6mmx5μm，流动相A为乙腈-0.2%甲酸，流动相B为水，采用梯度洗脱（0-15min，20%-22%A； 15-60min，22%A；60-65min，22%-30%A；65-70min，30%-20%A）。
供试品经50%甲醇（咖）超声提取30min，过滤蒸干后以50%甲醇（v/v）定容至5mL容量瓶中；漂移管温度为75℃，氮气流量为2.5L/min。
去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、去芹糖桔梗皂苷D、桔梗皂苷D 分别在0.64-6.4μg、1.22-12.2μg、1.08-10.8μg、0.74-7.4μg，1.7-17μg范围内组分浓度与峰面积线性关系良好；药材中5种成分的平均加标回收率分别为101.1%、99.9%、100.4%、100.7%和101.6%：RSD均关键词：桔梗；桔梗皂苷；HPLC-ELSD；梯度洗脱文献标志码：A文章编号：1674-5124（2016）01-0049-040 引言桔梗（Platycodon radix（Jacq.）A.DC.）为桔梗科（Campanulacae）桔梗属（Platycodin）多年生草本植物，广泛分布于东亚地区，我国多地区均有种植。
桔梗的主要活性成分是齐墩果烷型三萜皂苷，药理研究表明桔梗皂苷具有多种活性，包括抗癌、抗氧化、抗丙肝、减肥等功能，而对桔梗药材质量的有效控制是其发挥药效的基础。
我国幅员辽阔，桔梗药材生长环境差异大，导致其质量良莠不齐，有效成分含量变化大，有必要加强其质量控制以保证药效。
桔梗中皂苷成分结构复杂，活性多样，而在《中国药典》2010版中仅对桔梗皂苷D（Platycodin D，PD）设定了含量限度，不能更全面地反映药效和控制桔梗药材质量。
商洛桔梗根不同部位桔梗皂苷D动态研究
商洛桔梗根不同部位桔梗皂苷D动态研究赵志新;潘苗;王通【摘要】采用高效液相色谱法(HPLC),分析商洛种植的2年生桔梗根不同部位(须根、木质部和韧皮部)及不同月份(5-11月)中桔梗皂苷D的含量变化,以探究主要次生代谢产物在桔梗根中积累量的变化.结果显示,在5-11月期间,桔梗皂苷D含量在须根和木质部中稳步增加,二者分别在9,11月份达到最大值,而韧皮部中则变化不大,10月达到最大值;不同部位桔梗皂苷D平均含量大小为须根(0.410％)＞韧皮部(0.182％)＞木质部(0.039％).建议商洛地区所种植桔梗采收期在10-11月,采收时须根要充分收集.研究结果可为确定商洛桔梗采收期以及为桔梗质量控制及规范化种植提供借鉴.【期刊名称】《山西农业科学》【年(卷),期】2019(047)007【总页数】4页(P1149-1151,1162)【关键词】桔梗;HPLC;桔梗皂苷D;不同月份;不同部位【作者】赵志新;潘苗;王通【作者单位】商洛学院生物医药与食品工程学院,陕西商洛726000;商洛学院生物医药与食品工程学院,陕西商洛726000;商洛学院生物医药与食品工程学院,陕西商洛726000【正文语种】中文【中图分类】S567桔梗（Platycodon grandiflorum（Jacq.）A.DC.）为常用大宗药材，被2015年版《中国药典》收录，主要以根入药，很多地方作为食品使用[1]。
桔梗在我国大部分地区均有分布，常见于河南、安徽、吉林、山东、四川、陕西等地，在河南省商洛地区广泛种植，被誉为“五大商药”之一[2]。
桔梗具有开宣肺气、祛痰排脓之功效，其主要成分为三萜皂苷类化合物（Triter penoid saponins），目前发现有70余种皂苷类成分，主要以桔梗皂苷为主；桔梗具有镇咳祛痰、抗肿瘤、抗氧化、增强免疫力、抗炎、防治心脑血管疾病等作用[3-5]；除了主要成分三萜皂苷类化合物外，桔梗多糖具有抗衰老、降血糖、抗凝血等保健作用[6-8]。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
HPLC法测定桔梗不同部位、不同产地药材中桔梗皂苷D 含量
石俊英，王颖，巩丽丽，任霜亭
[摘要] 目的：采用反相高效液相法测定桔梗不同部位、不同产地药材中桔梗皂苷D含量。
方法：采用Phenomenex C18色谱柱，流动相比例为CH3CN：H2O：2%H3PO4= 28：57 ：15，流速为1.0 ml/ min，检测波长210 nm，柱温25℃。
结果：山东淄博GAP 基地桔梗药材中桔梗皂苷D 含量最高，质量最佳；不同部位中韧皮部及根上部含量最高。
结论：该方法准确、可行，可以作为测定桔梗皂苷D 的定量方法。
[关键词]桔梗；HPLC；桔梗皂苷D；含量
桔梗来源于桔梗科植物桔梗Platycodon grandif lorum Jacq.A.DC. 的干燥根。
桔梗药材中含有皂苷类、多糖、脂肪酸、氨基酸等多种成分，其中皂苷类是主要的药理活性成分。
桔梗皂苷的种类非常多，包括桔梗皂苷A-L 以及远志苷D、
D2 等。
我们曾研究了不同产地桔梗中总皂苷成分与质量的相关性[1]。
许传莲等采用RP-HPLC 法测定了不同产地桔梗中皂苷D 的含量，选择C18柱为色谱分析柱，检测波长为210 nm[2]。
朱丹妮等采用HPLC-ELSD法，以乙腈水( V/ V) = 28：72 为流动相，ELSD-500为检测器，进行了外标法定量[3]。
目前对于桔梗皂苷D 的测定方法研究较少，本文期望通过实验研究，探讨桔梗药材不同部位中桔梗皂苷D 的分布规律，不同产地桔梗药材中桔梗皂苷D 的含量，为进一步制定桔梗的含量测定方法和质量评价指标提供科学依据。
1 仪器及材料
1.1仪器
AGILENT 1100 LC 高效液相色谱仪( 美国) ；AGILENT CHEMSTAT ION 工作站( 美国安捷伦科技公司) ；检测器：AGILENT DAD；色谱柱：Phenomenex-C18 柱( 250×4.6 mm，粒度5 µm；迪马公司)。
1.2 试验材料
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的桔梗皂苷D 对照品，加甲醇溶解，配成0. 4 mg/ ml，作为对照品溶液。
2. 2 供试品溶液的制备
精密称取本品粉末4 g，以甲醇25 ml超声提取30 min，过滤，回收甲醇，浸膏加水以乙醚脱脂，水液以水饱和的正丁醇提取，提取液蒸干，以甲醇定容至10ml。
2. 3 测定方法
色谱柱：Phenomenex-C18柱( 250×4. 6 mm，5 µm) ；柱温：25℃；流动相：乙腈：水：2% 磷酸( 28：57：15) ；流速：1. 0 ml/ min；检测波长：210 nm。
设定HPLC 色谱仪的测定参数：在线脱气，自动进样，每次10 µl流速1. 0 ml/ min，柱温25 ℃，记录25 min的色谱图。
在供试品色谱中，以相对保留时间和峰面积为参照，对比分析图谱，进行鉴别。
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 标准曲线的绘制分别精密吸取对照品溶液2，5，10，15，20，25，30µl进样，按上述色谱条件测定峰面积。
以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标绘制标准曲线，得回归方程：桔梗皂苷D Y= 85. 79x+4. 8975，r= 0. 9995，参见图2。
表2 精密度试验结果
对照品编号 1 2 3 4 5 RSD(%)
峰面积354.8828 354.3709 353.2275 351.2946 353.7172 0.39
2. 4. 2 精密度试验取同一对照品溶液10µl连续进样5 次，测其峰面积，计算RSD。
结果见表2。
2. 4. 3 稳定性试验取同一供试品溶液，分别在0，2，4，8，12，24，48 h测定峰面积，计算RSD，结果见表3。
2. 4. 4 重复性试验取桔梗药材供试品5 份，按样品测定法测定，计算RSD。
结果见表4。
2..4. 5回收率试验采用标准加入法，精密称取已测知含量的样品5 份，分别加入一定量的对照品溶液，按样品测定项下方法操作，计算回收率，结果见表5。
表6 桔梗不同部位所含桔梗皂苷D的含量比较（n=3）样品编号产地加工方法采收地点桔梗皂苷D含量%
12 桔梗木质部山东淄博0.26
13 桔梗韧皮部山东淄博0.44
14 桔梗栓皮山东淄博0.03
15 桔梗芦头山东淄博0.26
16 桔梗根上端山东淄博0.41
17 桔梗根中端山东淄博0.36
18 桔梗根下端山东淄博0.34
表7 不同产地桔梗中桔梗皂苷D的含量比较（n=3）样品编号产地加工方法采收地点桔梗皂苷D含量%
1 去皮桔梗山东淄博0.39
2 去皮桔梗山东泗水0.20
3 去皮桔梗山东临朐0.18
4 去皮桔梗山东青岛0.36
5 去皮桔梗安徽亳州0.14
6 去皮桔梗河北安国0.26
7 去皮桔梗陕西丹凤0.38
8 去皮桔梗黑龙江饶河0.18
9 去皮桔梗贵州贵阳0.34
10 去皮桔梗河南桐柏0.33
11 去皮桔梗河南周口0.32
2. 5 样品测定
按供试品溶液制备项下方法制备样品溶液，用0. 45µm滤膜过滤后，进样
10µl，按上述色谱条件测定。
2. 6 结果
桔梗不同部位的成分比较见表6。
桔梗皂苷D的含量依次为：韧皮部> 根上段> 根中段> 根下段> 木质部> 芦头> 栓皮。
韧皮部中桔梗皂苷D 的含量最高，栓皮含量最少。
不同产地样品桔梗皂苷D 的含量见表7。
桔梗皂苷D 的含量依次为：山东淄博> 陕西丹凤> 山东青岛> 贵州贵阳> 河南桐柏> 河南周口> 河北安国> 山东泗水> 山东临朐> 安徽亳州。
山东淄博产药材中桔梗皂苷D 含量最
高。
3 讨论
桔梗皂苷类成分为桔梗的主要活性成分，桔梗皂苷D 在桔梗皂苷类成分中含量最高，可以在一定程度上反映桔梗的药材质量。
从实验结果可以看出，桔梗的不同部位中，桔梗皂苷D 含量以韧皮部中含量最高( 0. 44%) ，栓皮中含量极少( 0. 03% ) ，可以在产地加工时去除。
这提示我们桔梗传统的去皮加工技术是科学的。
从实验结果可以看出，不同产地的药材质量差别较大，其中山东淄博GAP 基地产药材桔梗皂苷D含量最高，质量最佳，其次为陕西丹凤、山东青岛、贵州贵阳、河南桐柏等。
因此，建议使用桔梗GAP 基地药材。
[ 参考文献]
[ 1] 石俊英，董其亭，巩丽丽，等. 不同产地桔梗中总皂苷成分与质量的相关性研究[ J ] . 山东中医药大学学报，2006，30 ( 3) ：247 ~250.
[ 2] 许传莲，杨腊虎，郑毅男，等. 应用RP HPLC 法测定不同产地中桔梗皂苷D[ J] . 吉林农业大学学报，1999，21( 4) ：35.
[ 3] 朱丹妮，舒娈. HPLC ELSD 法测定桔梗中桔梗皂苷D 的含量[ J ] . 植物资源与环境学报，2001，10( 4) ：11~ 13.。