真菌学实验指导
细菌和真菌_教案
细菌和真菌_教案教案名称：探索细菌和真菌教学目标：1.了解细菌和真菌的基本概念和特点；2.掌握不同细菌和真菌的分类；3.能够描述细菌和真菌的生长环境及其对人类的影响；4.培养学生的科学思维和实验操作能力。
教学重点：1.细菌和真菌的分类及特点；2.细菌和真菌的生长环境及其对人类的影响。
教学难点：1.如何进行实验观察和记录；2.如何通过实验验证细菌和真菌的特点。
教学准备：1.实验材料：细菌培养皿、琼脂培养基、棉签、石膏板、可见光灯、显微镜等；2.PPT课件；3.实验操作指导手册。
教学过程：Ⅰ.导入（10分钟）1.利用PPT课件引导学生回顾前一个单元所学的生物基础知识，如细胞的基本结构和功能等。
2.出示一张细菌的图片，请学生简要描述细菌的特点。
Ⅱ.细菌（30分钟）1.首先，讲解细菌的基本概念和特点。
-细菌是一类微小的单细胞生物，形态简单，体积小。
-细菌不同于真菌及其他复杂的生物，没有真核细胞结构，没有细胞核。
-细菌可以根据其形态特点进行分类，如球菌、杆菌、弧菌等。
2.接下来，进行细菌的实验观察。
-学生分组完成实验。
每组取一只细菌培养皿，插入湿润的棉签，用棉签在特定环境采集微生物样本，再将棉签划过琼脂培养基上。
-将培养皿封闭、颠倒放置，放在适宜的温度下培养24小时。
-次日，学生用显微镜观察培养皿中的细菌形态以及细菌的生长情况。
-学生记录观察结果并进行简单分析。
Ⅲ.真菌（30分钟）1.首先，讲解真菌的基本概念和特点。
-真菌是一类多细胞生物，多数为多细胞菌丝体，有些真菌是单细胞的。
-真菌通常根据其菌丝和孢子形态特点进行分类，如担子菌、子囊菌等。
2.进行真菌的实验观察。
-学生分组完成实验。
每组取一块石膏板，将其浸泡在温水中，待其湿润后，放置在暗处。
-每天观察石膏板上是否出现真菌的菌丝。
观察时间为一周。
3.结合实验结果，讨论真菌的生长环境及其对人类的影响。
-指导学生分析实验观察结果，讨论真菌的生长条件和喜好环境。
真菌观察实验报告
真菌观察实验报告真菌观察实验报告引言：真菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，它们在生态系统中扮演着重要的角色。
为了更深入地了解真菌的生态特征和生活习性，我们进行了一项真菌观察实验。
通过观察不同环境条件下真菌的生长情况和形态特征，我们希望能够对真菌的生态适应性和多样性有更全面的认识。
实验目的：1. 观察不同环境条件下真菌的生长情况；2. 分析真菌在不同环境条件下的形态特征；3. 探讨真菌的生态适应性和多样性。
实验材料：1. 真菌培养基：富含营养物质的琼脂培养基；2. 不同环境条件下的培养皿：包括高温、低温、湿润和干燥等条件；3. 放大镜和显微镜等观察工具。
实验步骤：1. 准备不同环境条件下的培养皿，分别标注好；2. 在每个培养皿中加入适量的真菌培养基；3. 从自然环境中采集真菌样本，分别放置在不同环境条件的培养皿中；4. 将培养皿放置在恒温箱或适当的环境中，保持适宜的温度和湿度；5. 每天观察并记录真菌的生长情况和形态特征；6. 持续观察一周后，结束实验并进行数据分析。
实验结果：通过观察和记录，我们得到了以下实验结果：1. 高温条件下的真菌生长情况：在高温环境下，真菌的生长速度较快，但菌丝的形态较短小，颜色较浅。
这可能是由于高温环境下真菌代谢活动加快，但也会对其生长产生一定程度的抑制作用。
2. 低温条件下的真菌生长情况：在低温环境下，真菌的生长速度较慢，菌丝的形态较长，颜色较深。
这可能是由于低温环境下真菌代谢活动减缓，导致生长速度变慢，但也能够适应寒冷环境的生存。
3. 湿润条件下的真菌生长情况：在湿润环境下，真菌的生长速度较快，菌丝的形态较丰富，颜色较鲜艳。
这可能是由于湿润环境提供了充足的水分和营养物质，有利于真菌的生长和繁殖。
4. 干燥条件下的真菌生长情况：在干燥环境下，真菌的生长速度较慢，菌丝的形态较短小，颜色较浅。
这可能是由于干燥环境缺乏水分和营养物质，对真菌的生长产生一定的限制。
实验讨论：通过这次实验，我们发现真菌对不同环境条件的适应性较强，能够在各种环境下生存和繁殖。
植物病理学高级实验技术指导
管平躺，30℃ 60rpm 2-3h。 酶解过程中应吸取菌液镜检，检查原生质体是否释放；酶液需现配现用，PH 值很
关键，需用低浓度（0.1M）的 NaOH 调 PH 至 5.8。 * 以下步骤于 4℃下完成，0.7M NaCl 溶液,1ⅹSTC 先放于 4℃预冷。 6、取出酶解液，加少许 0.7M NaCl 溶液，轻轻摇晃，倒于三层擦镜纸过滤，用 0.7M
CaCl2
4、TB3
Autoclave
3g
Yeast Extract
3g
Casamina Acids
20%
Sucrose
Add ddH2O to 1L for solid media add agar to 0.65-0.75% Autoclave 5、PTC
60% （w/v）
PEG4000 in 1ⅹSTC
第一部分 真菌学实验技术
实验一 稻瘟病菌转化（Transformation of Magnaporthe grisea）
一．原生质体的制备（Protoplasting） 1、活化菌株，接种菌丝块(2mm×2mm)于 CM 平板上生长 6d 左右，菌落直径约 3cm，
菌株不宜太老，最好不要超过 12 d。 2、切取直径约 3cm 的菌落，尽量切碎，置于约 100ml CM/5ⅹYEG 的液体培养基
Add ddH2O to 100ml Store in a dark glass bottle at 4℃
2、5ⅹ YEG
5g
Yeast Extract
10g
D-Glucose
3、1ⅹ STC
真菌教学设计方案
一、教学目标1. 知识目标：- 了解真菌的基本结构、生命周期和分类。
- 理解真菌在自然界中的作用以及与人类生活的关系。
- 掌握真菌的鉴定方法和实验操作技能。
2. 能力目标：- 培养学生观察、比较、分析和综合的能力。
- 提高学生的实验操作技能和实验报告撰写能力。
- 培养学生的科学探究精神和团队合作意识。
3. 情感目标：- 培养学生对生物学学科的兴趣和热爱。
- 增强学生的环保意识和生态保护观念。
- 培养学生的社会责任感和使命感。
二、教学内容1. 真菌的基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核。
2. 真菌的生命周期：无性生殖、有性生殖。
3. 真菌的分类：酵母菌、霉菌、大型真菌。
4. 真菌在自然界中的作用：分解者、生产者、消费者。
5. 真菌与人类生活的关系：食品、药品、工业应用等。
6. 真菌的鉴定方法：形态学鉴定、分子生物学鉴定。
7. 真菌的实验操作：样品采集、样品处理、显微镜观察。
三、教学过程第一阶段：导入新课- 利用多媒体展示真菌的图片和视频，激发学生的学习兴趣。
- 提出问题：什么是真菌？真菌有什么特点？真菌在自然界中有什么作用？第二阶段：讲授新课1. 讲解真菌的基本结构，通过模型或实物展示，让学生直观了解。
2. 介绍真菌的生命周期，通过图示和动画，让学生理解无性生殖和有性生殖的过程。
3. 讲解真菌的分类，通过实例讲解，让学生掌握不同类别真菌的特点。
4. 分析真菌在自然界中的作用，结合实际案例，让学生认识到真菌的重要性。
5. 介绍真菌与人类生活的关系，让学生了解真菌在食品、药品、工业等领域的应用。
第三阶段：实验操作1. 样品采集：组织学生到户外采集真菌样本。
2. 样品处理：指导学生进行样本的清洗、固定和切片。
3. 显微镜观察：指导学生使用显微镜观察真菌的微观结构。
4. 实验报告撰写：要求学生根据实验结果撰写实验报告。
第四阶段：总结与反思- 组织学生进行课堂讨论，分享实验心得和发现。
- 总结本节课的学习内容，强调真菌的重要性和保护意识。
微生物菌种选育实验指导
《微生物菌种选育实验》是一门涉及食品理化分析、微生物学实验且由学生自行设计实验方案的综合性、设计性实验课程，集中三周时间开课。
一、实验目的通过本环节训练，加深对发酵工程上游技术中菌种筛选的认识；学会常规选种方法；掌握微生物诱变育种的方法；掌握常规工业微生物菌种保藏法；树立科学认真仔细的态度，培养科研协作精神。
二、实验内容实验一工业微生物菌种分离根据一定的生产目的如产酶、产酸、产酯等，建立不同的筛选模型，并从特定的样品如曲药、酸乳、土壤中筛选出高产适宜的菌株。
1、分离培养基的配制2、无菌器材的准备3、菌悬液的制备4、接种5、培养6、初步鉴定(1) 菌落形态(2) 个体形态7、斜面接种培养实验二工业微生物菌种复筛通过摇瓶培养对实验一所得的菌株的生产性能进行精确的定量测定。
1、发酵培养基的配制；2、目的菌株的摇瓶培养；3、发酵液的生理活性测定。
实验三微生物的诱变育种用紫外线对实验一所得的高产菌株进行诱变，并测定诱变后的菌株的生产能力。
1、单细胞(或单孢子) 悬液的制备；2、致死曲线的测定；3、诱变处理；4、初筛；5、复筛；6、菌种保藏。
三、实验要求1．学生自行设计具体实验方案，在教师指导下由学生自主完成实验。
2．实验结束后，要求学生完成一篇微型小论文。
论文的撰写应本着实事求是的原则，对所做实验过程和数据进行认真、严格的记录和处理，并进行独立分析，不得抄袭他人的数据。
四、考核办法1、考核内容：实验方案、实验态度、操作技能、实验报告等。
2、考核办法：按照实验方案、实验态度、操作技能、实验报告等内容综合考核学生，得到学生该门实验课程的成绩。
成绩考核采用优秀、良好、中等、及格、不及格五级记分制。
3、考核标准：以实际操作技能和分析解决问题的技能为主，实验考核内容各单项所占分数比例为实验方案20%、实验态度10%、操作技能40%、实验报告30%。
微生物菌种选育概述微生物的菌种对进行微生物工作来讲是非常重要的。
没有“种”无法进行微生物的科学研究；没有良种，不能进行发酵工业的生产。
培养真菌生物实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解真菌的基本生物学特性。
2. 掌握真菌的培养方法。
3. 学习显微镜观察真菌的方法。
二、实验原理真菌是一类真核生物，具有细胞壁、细胞核、细胞质、线粒体等结构。
真菌的生物量巨大，在自然界中分布广泛，与人类生活密切相关。
真菌的培养是研究真菌生物学特性的基础，本实验旨在通过培养真菌，观察其生长状况，学习显微镜观察真菌的方法。
三、实验材料1. 真菌菌种：香菇、木耳、金针菇等。
2. 培养基：马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）。
3. 实验器具：无菌培养皿、无菌镊子、无菌移液器、酒精灯、显微镜、载玻片、盖玻片等。
四、实验方法1. 真菌菌种的活化（1）将菌种接种于PDA培养基上，放入恒温培养箱中培养，温度控制在25-28℃。
（2）待菌落生长到一定大小后，取出培养基，用无菌镊子将菌落挑取至新的PDA培养基上，重复操作2-3次，使菌种活化。
2. 真菌培养（1）将活化后的菌种接种于PDA培养基上，放入恒温培养箱中培养。
（2）观察菌落生长情况，记录生长时间、生长速度等数据。
3. 显微镜观察（1）将生长良好的菌落挑取至载玻片上，用盖玻片封口。
（2）将载玻片放入显微镜中，调整焦距，观察真菌的菌丝、子实体等结构。
五、实验结果与分析1. 真菌菌落的生长情况在实验过程中，不同真菌菌种在PDA培养基上的生长情况如下：（1）香菇：菌落生长迅速，菌丝白色，呈放射状分布，菌落边缘整齐。
（2）木耳：菌落生长较快，菌丝白色，呈网状分布，菌落边缘较不规则。
（3）金针菇：菌落生长较快，菌丝白色，呈束状分布，菌落边缘整齐。
2. 显微镜观察结果在显微镜下，观察到以下真菌结构：（1）香菇：菌丝细长，无色，有横隔，呈链状排列；子实体呈伞状，菌柄短，菌盖宽，表面光滑。
（2）木耳：菌丝细长，无色，有横隔，呈网状排列；子实体呈耳状，菌柄短，菌盖宽，表面不平。
（3）金针菇：菌丝细长，无色，有横隔，呈束状排列；子实体呈针状，菌柄长，菌盖小，表面光滑。
八年级生物第三节真菌教学设计
5.真菌与人类生活的关系：讲解真菌在食品、药品、生物防治等方面的应用，使学生认识到真菌与人类生活的密切关系。
（三）学生小组讨论
1.教学活动：将学生分成小组，针对真菌的分类、生活习性、繁殖方式等问题进行讨论。
（1）认识到真菌在自然界中的重要作用，如分解有机物、促进物质循环等。
（2）了解真菌与人类生活的密切关系，如食品、药品、生物防治等。
（3）关注真菌资源的开发和利用，为人类生活和社会发展做出贡献。
二、学情分析
八年级的学生已经具备了一定的生物学基础，对生物的分类、生活习性等概念有初步的认识。在此基础上，他们对真菌这一类生物充满好奇，但可能对真菌的形态、生活习性和繁殖方式等方面的知识掌握不足。因此，在教学过程中，应关注以下学情：
（3）利用网络、书籍等资源，培养学生的自主学习能力。
（三）情感态度与价值观
1.情感态度方面：通过本节内容的学习，培养学生以下情感态度：
（1）对生物学产生兴趣，激发学生的求知欲。
（2）尊重生命，关爱自然，培养学生的环保意识。
（3）敢于质疑，勇于探索，培养学生的创新精神。
2.价值观方面：引导学生树立以下价值观：
1.学生对真菌的认知程度：大部分学生可能仅了解真菌的表面特征，对真菌的内部结构、生活习性、繁殖方式等深入了解有限。教师应结合学生的认知水平，运用生动形象的语言和实例，帮助学生建立完整的真菌知识体系。
2.学生的实践操作能力：八年级学生具有一定的实验操作能力，但操作过程中可能存在不规范、不熟练等现象。教师应重视实验教学的引导，培养学生的实验操作技能和观察能力。
2.实践作业：
真菌学实验指导
真菌学实验指导本课程，本课程是大学本科生物技术、生物科学专业的选修课程。
介绍真菌分类现状、分类方法（包括传统与现代分类方法的比较）、分类依据及其原则。
本课程的教学不限于介绍研究的成果，重在介绍分析和解决问题的方法，以培养学生分析问题和创新的能力。
所以在理论学习的同时开设综合性实验，培养学生观察、分析和动手能力。
基本掌握真菌分离、鉴定的方法，并应用于真菌其它领域的研究。
本指导书适用于生物技术和生物科学专业。
1、实验：内生真菌的分离及鉴定···························································································3 2、实验报告基本内容要求···························································································7 3、实验报告格式································································8实验内生真菌的分离及鉴定实验学时：18实验类型：综合实验要求：选修一、实验目的1.了解真菌形态的基本特征。
2.掌握丝状真菌制片方法和真菌鉴定方法。
二、实验内容采集植物样品包括叶、茎、根、花、种子或果实，然后对分离样品的内生真菌，并进行形态和分子生物学方法的鉴定。
三、实验原理、方法和手段（一）实验原理根据真菌的形态特征和ITS序列等分子证据对分离到真菌进行归类和鉴定。
（二）实验手段和方法1、内生真菌分离纯化方法1.1样品的表面消毒及预处理分别取根、茎、叶、果实，用洗涤剂在自来水下洗净。
老树皮用75%酒精进行表面消毒后，用镊子取出，于酒精灯上烧灼15秒至表面焦糊，切成1×1cm2大小置于PDA固体培养基上。
对于根、茎、叶、果实按下列程序进行表面消毒：75%的酒精漂（浸）洗2-3min→无菌水冲洗4-6次→0.1%升汞不同的消毒时间（共设置7个梯度）→无菌水冲洗4-6次→用灭菌滤纸吸干多余水分→无菌刀片将材料切成小块将根、茎的表皮、韧皮部、木质部大致分开，并切成0.5×0.5cm2大小。
生物上册《真菌》教案
生物上册《真菌》教案一、教学目标1.让学生了解真菌的基本特征、分类和常见的真菌类型。
2.使学生掌握真菌的营养方式、繁殖方式以及与人类生活的关系。
3.培养学生的观察、思考和动手操作能力。
二、教学重难点重点：真菌的基本特征、分类及繁殖方式。
难点：真菌的营养方式及与人类生活的关系。
三、教学过程1.导入新课通过展示一组真菌的图片，引导学生关注真菌的形态、结构特点，激发学生的学习兴趣。
2.知识讲解（1）真菌的基本特征介绍真菌的细胞结构、细胞壁成分、繁殖方式等基本特征。
通过比较真菌与细菌、动植物的区别，让学生明确真菌的分类地位。
（2）真菌的分类讲解真菌的分类，包括酵母菌、霉菌、大型真菌等，介绍各类真菌的特点。
（3）真菌的营养方式介绍真菌的营养方式，包括寄生、腐生等，分析真菌在自然界中的地位和作用。
（4）真菌的繁殖方式讲解真菌的繁殖方式，包括无性繁殖和有性繁殖，介绍常见的繁殖器官和繁殖过程。
3.互动环节（1）观察真菌让学生观察实验室中培养的真菌，如酵母菌、霉菌等，观察它们的形态、结构特点。
（2）讨论真菌与人类生活的关系引导学生讨论真菌在食品制作、医药、环保等方面的应用，以及真菌引起的疾病和防治方法。
4.实践操作（1）制作真菌培养基让学生分组制作真菌培养基，学习培养基的配制、灭菌、接种等步骤。
（2）观察真菌生长（2）针对学生在实践操作中的表现，给予评价和指导。
四、作业布置1.复习本节课所学内容，整理笔记。
2.深入了解真菌在人类生活中的应用，举例说明。
3.观察家中或周围的真菌，记录它们的生长环境、形态特点等。
五、教学反思本节课通过讲解、观察、实践等多种教学手段，让学生对真菌有了较为全面的了解。
在教学过程中，注意引导学生关注真菌与人类生活的关系，培养学生的实践操作能力和创新思维。
但部分学生在实践操作中仍存在一定的问题，需要在今后的教学中加强指导。
重难点补充：1.知识讲解（1）真菌的基本特征教师：“同学们，真菌和你们平时所熟悉的植物、动物有什么不同呢？我们今天就来仔细看看真菌的独特之处。
真菌+精品教案
合作交流后，回答：细菌没有成形的细胞核，细菌没有叶绿体，不能进行光合作用，只能利用现成的有机物生活。
让学生利用已有的植物学知识思考问题，通过对比分析蘑菇的结构特点，从而对真菌获得初步的认识。
【提出问题】图中的蘑菇有根、茎、叶吗？它们的生长是否需要光？它们是不是植物，为什么？
思考问题，回答。
【讲解】蘑菇没有根、茎、叶，它的生长有光无光都可以。蘑菇不能进行光合作用，只能利用现成的有机物生活，所以蘑菇不是植物，属于真菌。
【提出问题】将真菌细胞与细菌细胞和植物细胞对比，三者有何异同？
思考问题并回答。
与上节课知识相联系，完善根据“有无细胞核”来对生物进行分类的方法。
【总结】表格形式讲解三者的异同。
环节六：
拓展延伸
【拓展】制作孢子印。
拓展延伸。
环节七：
总结
【课堂小结】请同学们来总结本节课的主要内容。
学生回忆复述总结。
培养学生的知识输出能力。
【总结】像细菌一样，真菌细胞内没有叶绿体，只能利用现成的有机物生活的生物，为异养生物。
环节五
讲授新课：
真菌的生殖
【提出问题】巴斯德的鹅颈瓶实验告诉我们，生物是不能自然发生的，那么真菌又是怎样繁殖后代的呢？
思考问题，结合实验和生活实际想象真菌的繁殖方式。
结合实验观察中的酵母菌出芽生殖现象和霉菌孢子飞散的视频，以及霉菌孢子的实物，使学生认识到不同种类的真菌的繁殖方式不同。
第三节真菌
◆教学目标
1．举例说出生活中常见的真菌种类。
2．描述真菌的主要特征。
实验四 细菌、真菌、放线菌的分离与培养
实验报告课程名称：环境微生物学实验实验类型：综合实验实验项目名称：微生物的分离与培养与菌落观察学生姓名：专业：环境工程学号：同组学生姓名：指导老师：实验地点：实验日期：2018 年 10月16日一、实验目的和要求1.掌握微生物接种培养技术2.掌握微生物分离纯化技术3.学习并掌握放菌落形态结构的观察方法，认识并理解它们的形态特征。
二、实验内容和原理土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现具有重要价值微生物的主要菌源。
在不同土壤中，各类微生物的数量千差万别。
为了分离获得某种微生物,需要预先制备不同稀释度的菌悬液，并添加相应的抗生素抑制不需要的微生物，例如，添加链霉素25~50U/mL抑制细菌;添加0.5%重铬酸钾液或制霉素50 U/mL 抑制霉菌。
通过10倍稀释以及平板分离、平板涂布和平板划线等操作，微生物可在平板上分散成单个的个体，经过适宜条件培养，单个个体可形成单个菌落。
挑取单个菌落转接至新鲜平板上，即可使目的菌种纯化。
1.菌种的分离纯化：从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。
在分子生物学的研究及应用中，不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物，而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“单一性”，防止其他微生物的混入。
2.平板涂布法：因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。
用途上，一般多用于从菌种的纯化;优点是可以观察菌落特征，对混合菌进行分离;但不能计数3.平板划线法：最简单的分离微生物的方法是平板划线法，其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。
划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。
用途一般多用于筛选菌株。
(完整版)微生物学实验指导书
实验一微生物的分离和纯化本实验以微生物的分离和纯化为主线，综合包括了培养基的配制、消毒灭菌、微生物的分离等内容,在给定的时间内由学生自主完成。
包括以下知识内容。
学生书写实验报告的时候,不能照抄袭原文，要用自己的语言，表述实验过程，在别人看完你的实验报告后,能够知道你是怎样做的，能够重复你的实验过程。
一、目的要求1．了解培养基的配制原理，掌握常用培养基的配制方法.2．掌握高压蒸汽灭菌的原理和操作方法。
3 学习、掌握细菌、放线菌、酵母菌和霉菌稀释分离、划线分离等技术.4 学习从样品中分离、纯化出所需菌株。
5 学习并掌握平板倾注法和斜面接种技术,了解培养细菌、放线菌及霉等种类的微生物的培养条件.二、原理培养基是将微生物生长繁殖所需要各种营养物质，用人工方法配制而成的各种营养基质。
其中除含有水分、碳水化合物、含氮化合物和无机盐类。
此外，微生物还必须在最合适的酸碱度范围的培养基上生长繁殖，因此，对不同种类的微生物，应将培养基调节到一定的PH值范围.根据研究目的不同,可将培养基制成固体、半固体和液体三种形式。
固体培养基是在液体培养基中加入1.5～2％的琼脂作凝固剂，半固体培养基则加入0.5～0.8％的琼脂.有时为了特殊目的，也可用明胶或硅胶等作为凝固剂。
由于微生物营养类型不同，应提供不同种类的培养基。
在分离、培养异样微生物时，对一般细菌常用肉膏蛋白胨培养基，对放线菌常用高氏合成1号培养基，培养酵母菌、霉菌则用麦芽汁或豆芽汁葡萄糖培养基，有时也常用马丁培养基分离霉菌。
马丁培养基除含有霉菌所含需的各种营养物外,还有孟加拉红染料，能抑制放线菌和细菌，链霉素可杀死或抑制细菌，但对霉菌均无害，所以这种培养基具有选择作用。
灭菌的方法很多，最常用的是加压蒸汽灭菌法。
此法是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的。
在每平方厘米为一个大气压（即15磅/时2）的压力下，温度可达121℃，一般只要持续15～20分钟后，就可杀死一切微生物的营养体和它们的各种孢子.由于加压蒸汽灭菌是通过提高蒸汽压力而使其升高温度以杀死微生物的，所以，该法只有当灭菌锅内的空气完全排尽后，才能达到最佳效果。
高中生物真菌教案设计
高中生物真菌教案设计教学目标：1. 了解真菌的基本生物特征和分类；2. 掌握真菌的生活方式和生长环境；3. 理解真菌在生态系统中的重要作用。
教学准备：1. 真菌的图片和标本；2. PPT 材料；3. 实验室设备和材料，如显微镜、培养皿等；4. 班级内的学生分组表。
教学过程：一、导入（5分钟）1. 引导学生通过观察图片，讨论他们对真菌的认识；2. 提出问题，激发学生的兴趣，如真菌的特点和用途。
二、学习真菌的分类和特征（15分钟）1. 通过PPT介绍真菌的分类和基本特征；2. 讨论不同类群的真菌的形态差异和生活习性。
三、观察真菌的形态（20分钟）1. 将班级分成小组，每组观察一份真菌标本；2. 利用显微镜观察标本的细胞结构和形态特征，并记录观察结果。
四、实验探究真菌的生长环境（20分钟）1. 将真菌培养在不同的培养基上；2. 观察并记录不同培养基对真菌生长的影响。
五、总结与反思（10分钟）1. 分享实验结果，总结真菌在生态系统中的作用；2. 提出问题，激发学生对真菌更深层次的思考。
六、作业布置（5分钟）要求学生回家继续研究真菌在生态系统中的作用，并准备下节课的讨论内容。
教学延伸：1. 可邀请专家来校进行真菌的实地调查；2. 组织学生进行真菌观察和鉴定比赛；3. 班级内开展真菌培养实验，观察真菌的生长过程。
教学反思：通过本堂课的教学，学生对真菌的生物特征有了更深入的了解，培养了他们对生态系统中真菌的重要性的认识。
在未来的教学中，可以加强真菌分类和生态功能的教学，提高学生的综合认知水平。
2024年生物教案：《真菌》
2024年生物教案：《真菌》一、教学目标（一）知识目标1. 描述真菌的主要特征、菌丝和孢子。
2. 举例说明真菌在自然界中的作用。
（二）能力目标培养学生学会从书本中获取知识的能力和理论联系实际的能力。
（三）德育目标通过学习真菌的有关知识，激发学生对生物学的兴趣，培养学生探索自然界奥妙的求知欲望。
二、教学重点和难点（一）教学重点1. 酵母菌的形态结构。
2. 酵母菌的生活环境及作用。
（二）教学难点真菌的主要特征及真菌在自然界中的作用。
三、教具准备显微镜、装片、挂图、投影（或实物）等。
四、教学步骤及方法（一）复习提问：上节生物学课我们学习了什么内容？今天我们继续学习第2章《生物的分类》，首先请同学们回忆一下前面所讲过的什么是生物？生物共分为几个类群？并举例说明。
学生思考并回答后，教师再指出生物除了可划分为动物和植物外，还可划分为真菌、细菌、原生动物和病毒等类群。
其中真菌在自然界中分布广泛，数量惊人，但人们平时并不注意，今天我们就来学习有关真菌的一些知识。
板书课题：第四节真菌（二）讲授新课：教师指导学生阅读课文及相关内容后，进行以下活动。
首先，教师指出本节课要学习的内容：真菌的主要特征；菌丝和孢子。
并指出学习重点是通过观察实验认识真菌的形态结构特征，并举例说明菌丝和孢子。
然后，教师出示实验材料，指导学生观察并描述其特征，如酵母菌的形态多为卵圆形，有芽体，菌盖有菌幕，菌柄多与培养基的纤维相连等。
接着教师指导学生进一步观察显微镜下的结果，并描述其特征，如霉菌的菌丝多呈分枝的丝状，与植物的导管类似等。
最后教师指出真菌在自然界中的作用，并引导学生思考讨论：为什么说真菌在自然界中分布广泛，数量惊人？学生讨论后回答：因为真菌既可作为分解动植物遗体的腐生性生物，又可与人类和动植物共生，提供出人类所需的食品和药品等。
教师指出：同学们回答得很好，下面我们再进一步思考讨论：为什么说酵母菌是一种单细胞真菌？学生回答后教师指出：因为酵母菌具有单细胞真菌的一般特征，同时它还能进行出芽繁殖。
微生物培养实验报告
微生物培养实验报告微生物培养实验报告引言微生物是一类极小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界中的各种环境中，对人类和环境都有着重要的影响。
为了深入了解微生物的生长特性和影响因素，本次实验旨在通过培养不同微生物菌株，观察其生长情况，并分析影响微生物生长的因素。
实验材料与方法1. 实验材料：- 不同微生物菌株：细菌、真菌、酵母等- 培养基：琼脂、葡萄糖、氯化钠等- 实验器材：培养皿、试管、移液管等2. 实验方法：- 准备培养基：按照配方将琼脂、葡萄糖、氯化钠等溶解在适量的蒸馏水中，加热至溶解，冷却后倒入培养皿中。
- 培养微生物：将不同微生物菌株分别接种到培养基上，用移液管取适量的微生物悬液滴在培养基表面，避免交叉污染。
- 培养条件控制：将培养皿密封，放置在恒温箱中，保持适宜的温度和湿度。
- 观察和记录：每隔一段时间，观察培养皿中微生物的生长情况，记录菌落的数量、大小和颜色等信息。
实验结果与分析1. 细菌菌落的生长情况：在培养基上，细菌菌落呈现出白色、透明、光滑的特点。
随着培养时间的延长，菌落数量逐渐增多，直径逐渐扩大。
这表明细菌在适宜的温度和营养条件下，能够快速繁殖并形成菌落。
2. 真菌菌落的生长情况：真菌菌落通常呈现出灰色、粗糙的特点。
与细菌不同，真菌的生长速度较慢，菌落数量相对较少。
这可能是因为真菌对温度和营养条件的要求较高，需要更长的时间才能形成明显的菌落。
3. 酵母菌的生长情况：酵母菌通常呈现出白色、光滑、凝胶状的特点。
与细菌和真菌不同，酵母菌能够进行发酵作用，产生二氧化碳和乙醇等物质。
因此，在培养过程中，酵母菌菌落周围可能会有气泡产生。
结论通过本次实验，我们观察到了不同微生物菌株在培养基上的生长情况，并分析了影响微生物生长的因素。
细菌菌落生长迅速，数量众多，而真菌菌落生长较慢，数量相对较少。
酵母菌具有独特的凝胶状菌落和发酵能力。
这些结果表明微生物的生长受到温度、营养条件和菌种特性等因素的影响。
2023最新-生物教案：《真菌》(优秀5篇)
生物教案：《真菌》（优秀5篇）作为一名优秀的教育工作者，总归要编写教案，借助教案可以恰当地选择和运用教学方法，调动学生学习的积极性。
我们应该怎么写教案呢？为大家精心整理了生物教案：《真菌》（优秀5篇），希望大家可以喜欢并分享出去。
生物教案：《真菌》篇一一、说教材1、教材简析本课是在学生学习了细菌和病毒之后，进而对与细菌和病毒相似的生物真菌的探究。
本课力图引导学生通过探究食用真菌与生活的密切关系认识和了解真菌。
2、说教学目标根据新课标的要求和本单元的教学特点，并考虑到学生现有的认知结构和心理特征，本节课我确定了以下教学目标：知识与技能1、认识蘑菇的形态结构，掌握它的营养方式和生殖方式；2 、知道一些常见的食用真菌；3、学会分辨毒蘑菇的方法；过程与方法实验观察、自主学习、展示交流、概括总结；情感态度价值观1、在观察、合作、交流、展示中体验生物学习的乐趣；2、感知真菌对自然界的意义和与人类的关系二、说教法新课标指出教师是教学的组织者和引导者，根据本课的特点，结合学生的知识层面，为了能让学生轻松把握教学重点，突破教学难点我确定了以下教学方法：观察法、实验法、探究法三、说学法遵循“教师为主导，学生为主题，探究为主线，全面培养学生科学素质为宗旨”的教育思想，为学生创设情景，创造科学探究的机会我设计了以下学法：小组合作法、讨论法四、说教学过程依据本节教材的编排顺序和学生的认识规律，以上述分析为指导，以培养能力为导向，紧扣重点，突破难点，整个教学过程我设计了以下三部分。
1、情景导入，引出课题学生观看关于各种各样的蘑菇的视频，并提出如何描述蘑菇的形态特点的问题。
视频资料舒缓了学生紧张的情绪，激发了学生的灵性，将学生课下分散状态很快的集中在学习知识的状态。
巧妙的引入本节的知识内容，激发学生对真菌探究的`兴趣和求知欲。
2、师生互动，探索新知观察蘑菇、金针菇的实物投影，然后再给学生播放一些关于真菌的图片及文字解说资料，同学间互相描述它们的形态特征和生活环境。
初中生细菌和真菌实验教案设计
初中生细菌和真菌实验教案设计一、教学目标1.通过对细菌和真菌的实验操作，加深对微生物的认识和理解。
2.学习细菌和真菌的基本特征、分类、生长条件及其对人类的影响。
3.培养学生的观察、科学实验技能和实验操作能力。
二、教学内容1.细菌实验（1）材料明胶平板、三角板筷、医用酒精灯、无菌棉签、标签、细菌悬液、皮肤消毒液、手套、口罩、安全眼镜、防护衣。
（2）方法a.实验前准备①准备培养基，把明胶平板装入培养皿中，放置于高温高压灭菌锅中进行灭菌处理。
②活菌液的处理：把细菌悬液置于高温高压条件下进行灭菌。
b.实验操作①水龙头打开，将手和三角板筷用水冲洗干净。
②将手洗净之后，用皮肤消毒液对手进行彻底的消毒。
③把准备好的明胶平板在无菌条件下打开，用三角板筷迅速在平板上划一条直径约5mm的直线，再反过来画一条与之垂直的划线，如图所示。
④把无菌棉签浸入活菌液中，再从细菌悬液中取出适量的菌液悬在三角板筷上，并把菌液涂抹在明胶平板上所画的十字交叉点上。
⑤在涂好菌液后，把明胶平板盖上，用塑料袋密封，上标签。
⑥进行培养操作：把培养皿装在恒温恒湿箱内，维持28°C温度下培养48小时。
c.此活动视安全情况可自由调整实验细节。
2. 真菌实验（1）材料蘑菇菌包、剪刀、粘土、土壤、细沙、长颈瓶、自来水、画笔等。
（2）方法a.实验前准备①确定实验的地点、时间和相关材料到位。
②拆封蘑菇菌包，浸入恒温水中20-30分钟，恒温时间与水量的比例要保持一致。
③把粘土放在种植盘里，压实、整平，直径要留有2-3cm空隙。
④在种植盘底部铺上2cm深的细沙层，以利于引流。
b.实验操作①把菌包里的菌株用消毒的剪刀剪成小块，均匀地撒在种植盘的表层。
②在菌包区域浇逐渐加大力度的水，浇透，注意不要冲淤土。
③维持适宜的温度和湿度，并每天进行观察和浇水。
c.扩展操作本实验可以拓展对土壤、水质和空气等环境因素对真菌生长的影响。
三、实验注意事项1.实验过程中必须穿戴安全保护用具。
《真菌》教学设计
《真菌》教学设计教材分析：真菌在生物界中具有特殊的地位，既与植物有相似之处，也有自己独特的特点。
本节内容较为抽象，学习时需要具备一定的基础知识，因此教学难度较大。
本节课的主要任务是通过实验和观察，了解真菌的基本结构和特征，并学习真菌的分类方法。
教学目标：1.知识目标：了解真菌的基本结构特征和分类方法。
2.能力目标：能够正确识别常见真菌，掌握其基本特征和分类方法。
3.情感态度和价值观：培养学生对自然界的热爱和探究精神，提高环境保护意识。
教学重点：1.真菌的基本结构和特征。
2.真菌的分类方法。
教学难点：1.能够正确识别常见真菌。
2.掌握真菌的分类方法。
教具和多媒体资源：1.显微镜。
2.菌落样本。
3.投影仪和PPT。
4.教学视频。
教学方法：1.激活学生的前知：通过提问了解学生前期所学的生物学知识。
2.教学策略：采用讲解、示范、小组讨论和实验相结合的方式进行教学。
3.学生活动：进行显微镜观察实验、菌落样本观察实验和小组讨论。
教学过程：1.导入：提问导入，询问学生“你知道哪些生物属于真菌吗？”并引导学生思考真菌的基本特征。
2.讲授新课：通过PPT展示真菌的基本结构和特征，并讲解其分类方法。
然后进行实验环节，让学生通过显微镜观察菌落样本，加深对真菌结构的认识。
3.巩固练习：提供一些菌落样本，让学生尝试识别并描述其特征。
同时安排小组讨论，让学生互相交流学习成果。
4.归纳小结：总结真菌的基本结构和特征，以及其分类方法。
同时让学生分享自己在小组讨论中的学习成果，以便大家共同进步。
评价与反馈：1.设计评价策略：组织学生进行小测验，检测学生对所学知识的掌握情况。
同时安排小组报告，让学生展示自己的学习成果，以便教师给予及时的反馈和指导。
2.为学生提供反馈：根据学生的小测验和小组报告情况，为学生提供具体的反馈和建议，帮助他们更好地掌握所学知识。
同时也要肯定学生在学习过程中的表现和成果，激发他们的学习兴趣和自信心。
作业布置：1.阅读相关文献或书籍，了解真菌在生态系统中的作用和意义。
真菌的作业设计
真菌的作业设计【最新版】目录一、真菌的概述1.真菌的定义与特点2.真菌的分类与常见种类二、真菌的作业设计目的与意义1.提升学生对真菌的认知2.培养学生的实践能力三、真菌的作业设计内容1.观察真菌的形态特征2.分析真菌的生长环境3.研究真菌的生态功能四、真菌的作业设计实施步骤1.准备阶段：收集真菌相关资料，选取实验对象2.观察阶段：观察真菌的形态特征，记录生长过程3.分析阶段：分析真菌的生长环境，总结观察结果4.总结阶段：撰写实验报告，交流展示成果五、真菌的作业设计评价与反馈1.评价标准：观察记录的完整性，分析总结的准确性2.反馈方式：指导教师评价，同学之间的互相评价与建议正文一、真菌的概述真菌是一类具有细胞核的真核微生物，它们主要通过吸收营养的方式生长和繁殖。
真菌的种类繁多，包括酵母、霉菌、蘑菇等，其中一些种类在人类的生活中具有重要意义，如用于制作食品和药物，另一些则可能对人体和动植物造成危害。
二、真菌的作业设计目的与意义真菌的作业设计旨在提升学生对真菌的认知，培养学生的实践能力。
通过观察和分析真菌的形态特征、生长环境及生态功能，学生可以更深入地了解真菌的特点，为今后进一步研究真菌相关领域打下基础。
三、真菌的作业设计内容1.观察真菌的形态特征：学生需要观察真菌的形态特征，如菌丝、菌落等，并记录观察过程中的变化。
2.分析真菌的生长环境：学生要分析真菌的生长环境，包括温度、湿度、光照等因素，并探究这些因素对真菌生长的影响。
3.研究真菌的生态功能：学生需要研究真菌在生态系统中的作用，如分解有机物、循环养分等，以了解真菌在自然界中的重要地位。
四、真菌的作业设计实施步骤1.准备阶段：学生需要收集真菌相关资料，了解真菌的基本知识，并根据实际情况选取实验对象。
2.观察阶段：学生要进行实验观察，记录真菌的生长过程及形态特征，并注意观察环境的变化。
3.分析阶段：学生需要对观察结果进行分析，探讨真菌的生长环境对其生长的影响，以及真菌在生态系统中的作用。
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本课程，本课程是大学本科生物技术、生物科学专业的选修课程。
介绍真菌分类现状、分类方法（包括传统与现代分类方法的比较）、分类依据及其原则。
本课程的教学不限于介绍研究的成果，重在介绍分析和解决问题的方法，以培养学生分析问题和创新的能力。
所以在理论学习的同时开设综合性实验，培养学生观察、分析和动手能力。
基本掌握真菌分离、鉴定的方法，并应用于真菌其它领域的研究。
本指导书适用于生物技术和生物科学专业。
1、实验：内生真菌的分离及鉴定···························································································3 2、实验报告基本内容要求···························································································7 3、实验报告格式································································8实验内生真菌的分离及鉴定实验学时：18实验类型：综合实验要求：选修一、实验目的1.了解真菌形态的基本特征。
2.掌握丝状真菌制片方法和真菌鉴定方法。
二、实验内容采集植物样品包括叶、茎、根、花、种子或果实，然后对分离样品的内生真菌，并进行形态和分子生物学方法的鉴定。
三、实验原理、方法和手段（一）实验原理根据真菌的形态特征和ITS序列等分子证据对分离到真菌进行归类和鉴定。
（二）实验手段和方法1、内生真菌分离纯化方法1.1样品的表面消毒及预处理分别取根、茎、叶、果实，用洗涤剂在自来水下洗净。
老树皮用75%酒精进行表面消毒后，用镊子取出，于酒精灯上烧灼15秒至表面焦糊，切成1×1cm2大小置于PDA固体培养基上。
对于根、茎、叶、果实按下列程序进行表面消毒：75%的酒精漂（浸）洗2-3min→无菌水冲洗4-6次→0.1%升汞不同的消毒时间（共设置7个梯度）→无菌水冲洗4-6次→用灭菌滤纸吸干多余水分→无菌刀片将材料切成小块将根、茎的表皮、韧皮部、木质部大致分开，并切成0.5×0.5cm2大小。
将果实的外种皮去掉，消毒之后将内种皮去掉。
灭菌时，沥干的植物材料转放到烧杯中，记好时间，倒入消毒溶液，不时用玻璃棒轻轻搅动，以促进材料各部分与消毒溶液充分接触，驱除气泡，使消毒彻底。
在快到时间之前1-2分钟，开始把消毒液倾入一备好的大烧杯内，要注意勿使材料倒出，倾净后立即倒入无菌水，轻搅漂洗。
灭菌时间是从倒入消毒液开始，至倒入无菌水时为止。
灭菌液要充分浸没材料。
宁可多用些灭菌液，切勿勉强在一个体积偏小的容器中使用很多材料灭菌。
1.2内生真菌的分离与纯化将上述组织块置于分离培养基上（每一平皿培养5块组织块）于27℃恒温培养，同时将上述消毒过程中最后一次冲洗组织块后的无菌水滴在培养基上平行培养，用以检测消毒是否彻底。
观察菌丝生长情况及污染情况。
培养3-4天后及时采用尖端菌丝挑取法，挑取形态不同的菌丝或菌落移种到新鲜PDA培养基上。
纯化3-4次以保证所得菌落为纯培养。
2、真菌的形态学鉴定方法对分离到的内生真菌的分类鉴定主要根据宏观的培养性状（菌落形态），微观的个体形态特征及一些生物学特性进行经典分类研究。
2.1 培养性状（菌落形态）培养基：查氏培养基（Czapek agar）、沙氏培养基和PDA培养基。
方法：将固体培养基制成平板，以点植法接钟，即用接种针尖沾取少量孢子点植在平板的中心位置，然后于25-28℃培养一定时间（通常为7天或14天）进行观察，观察时可用肉眼或借助放大镜等。
观察的要点：大小：以菌落的直径（mm）表示。
颜色：包括菌落表面和背面的颜色，及色素是否渗入培养基。
菌落表面的纹饰：如皱纹、辐射沟纹、同心环、整个菌落致密或疏松等。
菌落的质地：毡状、毯状、绒毛状、棉絮状、粉粒状、革质状、有无成束状或绳状的气生菌丝。
菌落的高度：扁平、凸起或隆起，及菌落中心部分状况等。
菌落边缘：全缘、锯齿状、树枝状等。
渗出物：菌落表面有无液滴及液滴的颜色等。
2.2个体形态菌丝的特征：表面性状（粗糙或光滑），宽度等分生孢子梗：分支情况--简单或复杂，轮生或单生等；长短；基部粗糙或光滑等。
产孢结构的形态特征：形状，大小，着生状况（位置，单生、互生或成轮生体）分生孢子的形态：形状，大小，表面状况，聚集方式（直链、斜链或聚集成头）2.3真菌制片方法——粘片法胶带粘贴法：选用在显微镜油镜下观察细致不粗糙且粘性好的胶带。
取一小段胶带从菌落表面的中心向边缘粘，75%乙醇固定，乳酸石炭酸棉蓝染色液染色，将粘有菌丝的一面向上，盖上盖玻片，于显微镜下观察产孢结构等特征。
2.4显微摄影照片在Motic数码显微镜下，观察并选取具典型性状特征的视野拍照、直接测量相关数据和进行描述记载。
2.5菌种的鉴定根据描述的菌种的特征，索引分析相关文献，综合分析对比相关特征的异同，最后确定待定菌株的分类地位。
3、真菌的分子生物学鉴定方法3.1真菌菌丝的获得（1）固体培养基培养菌丝体对于气生菌丝较多的真菌可以选择PDA固体培养基在培养皿上培养，在固体培养基平板上铺一层玻璃纸，27℃培养5-7天。
将3-4个用培养皿平行培养的新鲜菌丝小心地刮下，收集在一起，以备进行DNA提取。
在刮取菌丝体时，要注意的是不要把培养基一起刮下来，以免对提取DNA造成影响。
（2）液体培养基培养菌丝体培养基成分与不加琼脂的PDA固体培养基成分相同。
将液体培养基以100mL每瓶分装至250mL三角瓶中，用8层纱布封口。
121℃，蒸汽灭菌20min。
将菌丝致密的真菌接种到液体培养基中，于恒温振荡培养箱中27℃、120rpm 培养5-7天。
用两层灭菌纱布过滤菌丝球，用无菌蒸馏水冲洗菌丝球5次，避免培养基中的糖类和蛋白对DNA提取的影响。
40℃下烘干菌丝，但是不要过于干燥，然后进行DNA的提取。
3.2基因组DNA的提取DNA提取采用CTAB法。
CTAB（cetyltriethylammonium bromide，十六烷基三乙基溴化铵）是一种去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中是可溶的，当降低溶液盐浓度到一定程度时，从溶液中沉淀，通过离心可将CTAB与核酸的复合物同蛋白质、多糖类物质分开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液，再加乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇。
CTAB 法的好处是能很好地去掉糖类杂质，提取前期可得到高含量的DNA。
用CTAB法提取材料DNA的具体步骤如下：(1) 将CTAB buffer在65℃水浴锅中预热，研钵用液氮预冷；(2) 取0.1g左右菌丝体，在液氮中迅速研磨成粉末后，迅速加入5mL预热的提取液及10μLβ-巯基乙醇，混合均匀后把混合液转入1.5mL离心管中700μL/管；(3) 于65℃水浴保温0.5-1h，时间不能超过1.5h。
保温期间要轻轻振摇几次；(4) 冷却至室温后，加入等体积(700μL)的饱和酚：氯仿：异戊醇(25：24：1)，充分混匀后静置10min。
(5) 离心(12000rpm，10min，室温)，去沉淀，将上清液转入干净离心管中。
(6) 根据杂质的去除情况重复步骤4、5数次，直至无杂质；(7) 加入等体积氯仿：异戊醇(24：1)抽提一次以去除饱和酚，离心(12000rpm，10min，室温)；(8) 将上清液逐滴加入两倍体积的-20℃预冷无水乙醇，以沉淀出DNA。
室温放置10-20min，可以过夜；(9) 挑取或离心去上清液(10000 rpm，5min)的方法取出DNA；用75%乙醇洗涤两次；(10) 37℃保温箱中干燥后溶于适量的TE缓冲液中4℃备用。
3.3多聚酶链式反应(PCR扩增)3.3.1引物ITS5：GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGITS4：TCCTCCGCTTATTGATATGC3.3.2扩增条件扩增体系PCR反应体系为50μL体系，包括：10×PCR buffer：1/10MgCl2 ： 1.5mM，dNTPs（dATP、dTTP、dCTP、dGTP）：各200μM，Primer1 0.2μM，Primer2 0.2μM，Taq酶：1~2.5U，DNA模板：约100ng。
扩增条件预变性95℃5min变性95℃1min复性51℃1min 30~35个循环延伸72℃1min延伸补齐72℃10min3.3.3扩增产物的纯化及序列的测定送测序公司。
4、保存方法将所分离的所有纯化菌株采用两种方法保存。
①斜面低温保藏法：将菌株接种至PDA固体斜面培养基上于27℃下培养，待菌落长满斜面，观察没有污染后，放于4℃的冰箱中保存。
这种保藏方法适合本实验条件下各菌种的保藏，保藏时间为三个月到六个月，传代次数过多时容易导致菌种变异退化。
②无菌水保存法：在柱形Eppendorf离心管中加入2/3体积的蒸馏水，蒸汽灭菌，将带有菌丝的琼脂小块放入无菌水中，4℃的冰箱中保存。
此法保存菌株的时间要长于斜面保存。
用这种保藏方法可以保藏1-2年。
比较而言这种方法是较好的菌种保藏方法。
四、实验组织运行要求采用“集中授课，学生自主训练为主的开放模式组织教学。
”五、实验条件仪器设备：高压蒸汽灭菌锅，培养箱，调温电炉、摇床、磁力搅拌器、15W紫外灯、超净工作台、离心机等。
1.5mL eppendorf 离心管，研钵，解剖刀，镊子，纱布，滤纸，三角瓶等；胶带，剪刀，镊子，解剖刀，纱布，滤纸，脱脂棉，三角瓶，9或10cm培养皿，玻璃棒，接种钩，接种环药品和试剂：葡萄糖、蛋白胨、KH2P04·3H2O、MgSO4·7H2O，马铃薯、琼脂。
孟加拉红，青霉素，链霉素，甲基蓝，蛋白胨，酵母膏，蔗糖，磷酸盐，葡萄糖，琼脂条，无菌水等。
消毒剂：75%的乙醇，0.1%升汞（HgCl2），次氯酸钠溶液（含活性氯10%），30%双氧水。
双蒸水、琼脂糖，Tris饱和酚、巯基乙醇(β- Mercaptoethanol)，石英砂，Tris饱和酚，氯仿，异戊醇，无水乙醇，硼酸，冰醋酸，氯化钠，盐酸，氢氧化钠，EDTA，CTAB。
六、实验步骤（一）培养基配置1、马铃薯、葡萄糖琼脂培养基马铃薯汁 1000ml，葡萄糖20g，琼脂20g（注：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000毫升煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加葡萄糖20克，琼脂15克，溶化后分装，15磅灭菌30分钟。
）2、察氏琼脂培养基蔗糖30g，NaNO33g，MgSO4.7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，K2HPO41g，琼脂13g，蒸馏水1000ml，自然pH3、沙氏培养基蛋白胨 1g，葡萄糖或麦芽糖 4 g，琼脂 1.5克，水 100 ml。