三：菌种的管理和保藏[2]
菌种保藏室管理制度
菌种保藏室管理制度第一章总则第一条为规范菌种保藏室的管理，确保菌种资源的使用和保护，提高菌种的保存质量，特制定本管理制度。
第二条菌种保藏室是指一个专门用于菌种资源的保存、管理和利用的实验室。
第三条本管理制度适用于所有使用菌种保藏室的实验室及工作人员。
第四条菌种保藏室的管理原则是" 管理科学、操作规范、保藏严谨、使用安全”。
第五条所有菌种的管理必须符合《微生物实验室安全操作规程》和相关法律法规的规定。
第二章菌种保藏室的设立第六条菌种保藏室设有专门的实验室，实验室应符合微生物实验室的相关要求。
第七条菌种保藏室应设有专门负责菌种管理的工作人员，负责日常的菌种保藏、更新、记录等工作。
第八条菌种保藏室应设有专门的存储设施，保障菌种的安全保存。
第九条菌种保藏室的设立必须经过相关部门的认可和注册。
第三章菌种的采集、保藏及更新第十条采集新的菌种来源必须符合相关规定，取得相关部门的许可。
第十一条采集的菌种必须在规定的时间内用适当的方法保存，保证菌种的纯净性和活力。
第十二条菌种的保藏要有完善的记录，包括菌种来源、采集时间、保存方法等。
第十三条菌种的更新要进行定期检查，确保菌种的活力和纯度。
第十四条菌种的更新要在菌种信息系统中记录，保证信息的完整性。
第四章菌种的使用与管理第十五条使用菌种前必须经过专门人员的审批，确保使用目的明确，操作规范。
第十六条使用菌种时必须遵守相关的操作规程，保证操作的安全性。
第十七条使用菌种后必须按照规定的处理方法进行处理，确保操作的安全性。
第十八条菌种使用后必须及时进行记录，保持菌种的流转记录清晰。
第十九条菌种使用完毕后必须按照规定的处理方法进行处理，确保操作的安全性。
第五章菌种保藏室的安全管理第二十条菌种保藏室应设置专门的安全管理人员，协调安全管理工作。
第二十一条菌种保藏室必须建立健全的安全管理制度，确保菌种的安全保存。
第二十二条菌种保藏室必须进行定期的安全检查，发现问题及时整改。
菌种的管理和保藏课件
•2024/5/26
•菌种的管理和保藏
•25
详细记录
菌种的来源、接收、传代、分离、复壮、使用 和鉴定等均应做好详细记录。包括菌保存位置、 环境(温度)、种传代或使用时间、名称、菌号、 代数、传代或保存形式、分离、复壮方式、使 用内容、鉴定情况等都应进行详细的记录。
•2024/5/26
•菌种的管理和保藏
分离一般采用平板培养基。
分离方法主要有分段划线法、连续划线法、 涂布分离法、倾注分离法等。
•2024/5/26
•菌种的管理和保藏
•16
培养 ：接种后的培养基，根据不同微生物
生长条件的要求，将培养基放在适宜微生物 生长的环境中（温度、湿度、氧气等），使 其生长繁殖的过程。 需气菌培养法 厌氧培养法
•2024/5/26
•菌种的管理和保藏
•13
细菌的接种、分离和培养 常用培养基种类 斜面培养基 半固体培养基。 液体培养基 平板培养基
•2024/5/26
•菌种的管理和保藏
•14
接种方法 涂布法 划线法 穿刺法 直接加入法等
•2024/5/26
•菌种的管理和保藏
•15
分离：为了获得纯菌种（株），采用的 将细菌分离成单个细胞，使其独立分裂繁 殖形成单个菌落的操作技术。
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菌种不得随意带出实验室，外单位索取、购买 应有证明和登记，并包装严密。 菌种处理应严格按操作规程进行，灭菌处理应 有详细记录。
•2024/5/26
•菌种的管理和保藏
•27
菌悬液的制备与保存
菌悬液的制备与保存 参照《中国药典》2010版培养基适用性 试验。
•2024/5/26
•菌种的管理和保藏
•28
谢谢
菌种保藏管理制度
菌种保藏管理制度第一章总则第一条为规范和加强菌种保藏管理，提高菌种资源的利用率和保藏质量，制定本制度。
第二条本制度适用于菌种保藏单位的管理和操作。
第三条菌种保藏管理应遵循法律法规、国家标准和相关管理制度，保障菌种资源的合法、安全、有效性。
第四条菌种保藏管理应遵循科学性、规范性和合理性原则。
第二章菌种保藏管理制度要求第五条菌种保藏单位应有合格的菌种保藏人员，具有相关专业知识和操作技能。
第六条菌种保藏单位应具备完善的菌种保藏设施和设备，满足菌种的质量保护和管理需求。
第七条菌种保藏单位应制定菌种保藏管理规章制度，明确菌种资源的申请、保藏、使用和监管流程。
第八条菌种保藏单位应建立菌种信息数据库，对菌种资源进行准确、完整地记录和管理。
第九条菌种保藏单位应定期组织对菌种资源进行检测和鉴定，确保菌种的纯度和活力。
第十条菌种保藏单位应加强安全管理，确保菌种资源的安全使用和保护。
第十一条菌种保藏单位应建立菌种资源的追溯机制，对菌种资源的来源和去向进行记录和跟踪。
第三章菌种保藏管理流程第十二条菌种保藏单位应依法收集菌种资源，并进行鉴定和分类。
第十三条菌种保藏单位应按照规定对菌种资源进行保存和保藏，确保其质量和活力。
第十四条菌种保藏单位应制定菌种资源的使用管理规定，明确使用范围和条件。
第十五条菌种保藏单位应建立菌种资源的定期更新机制，确保菌种资源的新鲜和多样性。
第十六条菌种保藏单位应建立菌种资源的信息共享平台，促进菌种资源的交流和共享。
第四章菌种保藏管理监督第十七条有关行政部门应加强对菌种保藏单位的监督和检查，确保菌种资源管理的合法性和合规性。
第十八条菌种保藏单位应定期对菌种资源进行抽查和自检，发现问题及时整改。
第十九条菌种保藏单位应接受社会监督，加强与公众的沟通和交流。
第二十条对违反菌种保藏管理制度的单位和个人，依法给予相应的处罚和通报。
第五章附则第二十一条本制度自颁布之日起正式执行。
第二十二条本制度的解释权归菌种保藏管理部门所有。
菌种保藏与管理
菌种保藏与管理第一节概述一、菌种的定义菌种是从事微生物学及生命科学研究的基本材料，也是与微生物有关的生产部门的重要生产资料。
本文所指的菌种，包括可以培养的有一定科学意义或实用价值的细菌、真菌、病毒、细胞等代表株。
二、菌种保藏的意义微生物具有生命活力，其世代时间（generation time）一般很短，在传代过程中易发生变异甚至死亡。
因此，菌种保藏是一项重要的基础工作，是进行微生物学研究和微生物育种工作的重要组成部分。
它既是保护微生物资源的一种手段，又为持久而有效的利用微生物资源提供了保证，受到世界各国的极大重视。
很多国家相继建立了专门的菌种保藏机构，组织科学技术人员从事收集国内外长期利用及新发现的各类菌(毒)种。
实行集中保藏、科学的育种传代以及分类管理，并负责同世界各地相互交流，研究保藏菌(毒)种的科技情报工作，使各类菌种长期满足社会需要，更好的为生产和人类健康服务。
三、菌种保藏的目的和任务菌种保藏是应用及研究微生物工作者的一个必须且重要的一门应用学科技术，不单纯是菌种的分离培养、种株纯化、分类鉴别及储藏保管，还涉及多种学科，如微生物生理学、生物化学、生态学、遗传学、形态学、分子生物学以及微生物种群的分类等。
只有掌握了相关学科的科学技术，才有可能全面做好菌种保藏工作。
菌种保藏的中心任务是将现有菌种或广泛收集的各种有用的微生物菌种，选择最适宜的保藏方法，避免在保藏期间和传代过程中死亡、变异及衰退，以保持菌种原有的各种生物学特性，从而达到保证研究、检验、交换和使用的目的。
如何保持菌种性状的稳定是菌种保藏研究的重要课题。
事实上没有哪一种保藏方法能使菌种的原有性状保持绝对不变，所以菌种保藏研究就是要研究各类菌种最合适的保藏方法，使菌种变异和死亡达到最低限度。
因此，菌种保藏研究不但需要研究原种的营养代谢、生理功能和遗传变异，还需研究菌种衰退后仍可恢复其原来的生物学性状和生理功能的科学方法。
菌种保藏也是食品、药品微生物检验工作中的一项常用技术。
菌种管理规范
菌种管理规范引言概述：菌种管理是生物技术领域中非常重要的一项工作，它涉及到菌种的保存、鉴定、培养和分发等方面。
规范的菌种管理能够保证菌种的纯度和可靠性，为科学研究和工程应用提供可靠的基础。
本文将从菌种的保存、鉴定、培养、分发和记录等五个大点，分别阐述菌种管理的相关内容。
正文内容：1. 菌种的保存1.1 保存条件：菌种保存需要提供适宜的环境条件，包括温度、湿度和光照等。
不同菌种对保存条件的要求不同，因此需要根据菌种的特性进行调整。
1.2 保存方式：常见的菌种保存方式包括冷冻保存、冷冻干燥保存和液氮保存等。
不同保存方式有其优缺点，需要根据菌种的特性和使用需求选择合适的保存方式。
2. 菌种的鉴定2.1 鉴定方法：菌种的鉴定是确定其物种和亚种的过程，常用的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化特性鉴定和分子生物学鉴定等。
鉴定方法的选择应根据菌种的特性和鉴定目的进行。
2.2 鉴定标准：菌种的鉴定需要依据一定的标准和参考物种进行比对。
国际上常用的鉴定标准包括国际菌种保存中心（CBS）和美国类型菌种文化集（ATCC）等。
3. 菌种的培养3.1 培养基选择：菌种的培养需要提供适宜的培养基，包括基础培养基和特定培养基。
基础培养基可根据菌种的需求选择，特定培养基则针对特定菌种的培养需求进行设计。
3.2 培养条件控制：菌种的培养需要控制适宜的温度、pH值和培养时间等条件。
不同菌种对培养条件的要求有所不同，因此需要根据菌种的特性进行调整。
4. 菌种的分发4.1 分发要求：菌种的分发需要满足科学研究和工程应用的需求，同时要保证菌种的纯度和可靠性。
分发过程中需要采取一系列措施，如制备分生孢子、制备冻干粉和制备液体培养物等。
4.2 分发方式：常见的菌种分发方式包括直接分发和间接分发。
直接分发是将菌种直接提供给用户，间接分发是通过菌种库或合作单位进行分发。
分发方式的选择应根据实际情况进行。
5. 菌种的记录5.1 记录内容：菌种的记录需要包括菌种的基本信息、保存和鉴定的结果、培养条件和分发情况等。
微生物菌种常规保藏技术规程
微生物菌种常规保藏技术规程一、前言微生物菌种的保藏是微生物研究中非常重要的一环，它对于保障菌种的长期保存和研究使用具有重要的意义。
本技术规程旨在规范微生物菌种的常规保藏技术，确保其安全、稳定和可持续使用。
二、常规保藏技术1. 冻干法（Lyophilization）：将培养的微生物菌株悬液在前冷冻过程中给予低温、高真空条件，使其中的水分直接从冰态升华为气态，从而避免了常规冻存法中由于结冰时水晶体的生成对菌体的危害，从而达到保存微生物菌株的目的。
操作步骤：a. 微生物培养物经适当稀释后应当倒入试管中，滴入约1ml 20%乳糖溶液在表面形成一层薄膜，待乳糖凝固后，在加入4ml 0.5-0.7%匀浆的2%干燥乳铁粉液，将试管摇匀，再灌入16ml混合液保持无气泡，放置于冰浴上。
b. 待培养物温度达到0摄氏度，再清洗喷雾器，灌入76％露醇20ml，培养物放入冷板上，适当时间后将试管封口放入冷板上经杀菌后真空泵连接，把真空泵打开，通过真空泵提供的条件慢慢降低压强，一般12小时后真空泵关闭。
c. 提供适当温度下作干燥处理，通常使用倍耐安减压干燥器空干40-80小时，干燥后的干燥灸试管，将试管放入吸气瓶中后置入-40—-50摄氏度低温冷冻管内低温保存(一般保存温度为—40摄氏度或更低)，备用空干矿温度—20摄氏度或更低。
2. 酶解冻存法（Enzymatic freezing）：在培养基中添加蔗糖，结合酶解冻存方法，经冻干后的菌种耐冻性和储存时间明显提高。
操作步骤：a. 将微生物分别接种于琼脂平板上，预培养24小时，取2-3份储备品。
菌液于冻干菊花瓶中进行前冷冻，真空抽气消耗20分钟。
b. 平均地用EP管管接受，采用3次“起冻—冷冻”的方法完全冻干，最后0.1至0.3ml真菌液在5摄氏下冷冻6小时，然后在5摄氏下还原18小时。
c. 移除冻存，延长试验保存时间。
必须在-80摄氏下保存。
3. 液氮冻存法（Liquid nitrogen freezing）：液氮冷冻法是现在应用最广泛的冷冻保存方法，在液氮的作用下，微生物菌种在-196摄氏度下冷冻，保持良好的生物活性。
菌种保藏管理
菌种保藏管理菌种保藏管理是指对微生物菌种进行保存、管理、鉴定和利用的一系列工作。
菌种保藏管理的目的是保护微生物资源，促进微生物资源的研究和利用，防止微生物污染和传播，维护科学研究的诚信和公正。
一、菌种保存菌种保存是指将微生物菌株保存在适宜的条件下，以保证其生命活力和遗传稳定性。
常见的菌种保存方式有以下几种：1. 冷冻保存：将菌株在-70℃以下的低温条件下保存，可保存数年至数十年。
2. 干燥保存：将菌株在低湿度条件下干燥保存，可保存数年至数十年。
3. 液氮保存：将菌株在液氮中保存，可保存数十年至数百年。
4. 长期培养：将菌株在适宜的培养基上连续传代培养，可保存数年至数十年。
二、菌种管理菌种管理是指对保存的菌株进行鉴定、分类、记录和更新等工作。
常见的菌种管理工作有以下几个方面：1. 鉴定和分类：对保存的菌株进行鉴定和分类，确定其种属和亚种。
2. 记录和更新：对保存的菌株进行详细的记录和更新，包括菌株来源、保存时间、保存方式、鉴定结果等信息。
3. 质量控制：对保存的菌株进行质量控制，包括检测菌株的纯度、活力和遗传稳定性等指标。
4. 分发和交换：将保存的菌株分发给需要的研究人员或机构，或与其他机构进行菌株交换。
三、菌种利用菌种利用是指利用保存的菌株进行科学研究和应用开发。
常见的菌种利用方式有以下几种：1. 研究应用：利用保存的菌株进行科学研究和应用开发，如发酵生产、药物研发、环境修复等。
2. 教学实验：利用保存的菌株进行教学实验，培养学生的实验技能和科学素养。
3. 保护利用：利用保存的菌株进行保护利用，促进微生物资源的可持续利用和保护。
总之，菌种保藏管理是保护微生物资源、促进科学研究和应用开发的重要工作，需要科学规范的管理和操作。
菌种保藏的方法
菌种保藏的方法菌种保藏是一种重要的微生物资源保护方式，对于研究、应用和开发微生物具有重要意义。
以下是几种常见的菌种保藏方法及其操作步骤。
一、低温冷冻保藏法低温冷冻是一种常用的微生物保藏方法，适用于大多数真菌、细菌和酵母菌。
其主要原理是将菌株保存在低温下，使其生理活动缓慢，以延长菌种的保藏时间。
操作步骤：1. 选择菌株：选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。
2. 菌株处理：将菌株经过预处理，如鉴定鉴别、菌落孤立等。
3. 制备保存液：根据不同菌株的需要，制备适宜的保存液，常用的保存液有甘油、甘露醇等。
4. 菌种保存：将菌株用保鲜膜包裹，放入保存管中，加入保存液，密封保存管。
5. 冷冻保存：将保存管放入低温冰箱或液氮罐中进行冷冻保存。
二、干燥保藏法干燥保藏法是一种简便、经济的保藏方法，适用于真菌、细菌、放线菌等微生物。
其基本原理是将菌种与干燥剂混合，使其水分含量降低，从而实现微生物的休眠状态。
操作步骤：1. 选择菌株：选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。
2. 菌株处理：将菌株经过预处理，如鉴定鉴别、菌落孤立等。
3. 制备干燥剂：根据不同菌株的需要，选择合适的干燥剂，如硅胶、氧化钙等。
4. 菌种混合：将菌株与干燥剂按照一定比例混合均匀。
5. 干燥保存：将混合物均匀地散布在无菌培养基上，置于通风干燥的环境中进行保存。
三、冷冻冻干保存法冷冻冻干保存法是一种较为复杂的菌株保藏方法，适用于难保存的微生物，如厌氧菌、放线菌等。
其主要原理是将菌株在低温下冻结干燥，从而保护微生物的活力。
操作步骤：1. 选择菌株：选择生长良好、菌株特性完整的菌株进行保藏。
2. 菌株处理：将菌株经过预处理，如鉴定鉴别、菌落孤立等。
3. 制备保存液：根据不同菌株的需要，制备适宜的保存液，如甘油、甘露醇等。
4. 冷冻过程：将菌株加入保存液中，放入冷冻机冷冻至低温（通常为-80℃）。
5. 冻干过程：将冷冻的菌株经过真空排气、结冰降温等步骤进行冻干处理。
菌种的保藏管理制度
菌种的保藏管理制度一、前言随着微生物研究领域的不断发展，菌种的保藏和管理变得日益重要。
菌种在科学研究、工业生产、医药卫生等领域起着重要作用。
菌种的保藏管理制度不仅是对菌种进行有效保护和管理的重要手段，也是对科研机构和生产企业负责任的表现。
本文将从菌种的保藏目的、原则、保藏管理程序、管理机构和管理人员的职责等方面进行详细阐述，以便各单位建立完善的菌种保藏管理制度。
二、菌种的保藏目的1. 保证菌种的纯度、活力和保存性能；2. 保证菌种在长时间内可以被有效使用；3. 促进菌种资源的共享和交流；4. 保证菌种在科研、生产和应用中的安全性和可追溯性。
三、菌种的保藏原则1. 选择适宜的保藏方法，确保菌种的长期保存和传代；2. 严格按照操作规程操作，保证菌种的纯度和活力；3. 建立完善的菌种信息档案，保证菌种的可追溯性；4. 定期检测保藏菌株的纯度和活力，确保菌种的质量；5. 加强对菌种的安全管理，防止菌种的交叉污染和泄露。
四、菌种的保藏管理程序1. 菌种的采集、分离和鉴定（1）菌种的采集应按照规范程序进行，同时将采集信息记录在案，包括采集地点、采集时间、样品编号等；（2）菌种的分离和鉴定应由具有相关资质和经验的专业人员进行，并建立菌种信息档案。
2. 菌种的保存和传代（1）选择适宜的保存方法，如低温、冷冻、干燥等；（2）菌种的传代应按照规范程序进行，记录传代信息并定期对保存菌株进行检测。
3. 菌种的信息管理（1）建立菌种信息档案，包括菌种的采集信息、分离和鉴定信息、保存和传代信息等；（2）对菌种信息进行分类归档，方便查阅和管理。
4. 菌种的质量控制（1）定期对保存菌株进行纯度和活力检测；（2）对检测结果进行记录和分析，并定期进行质量评估。
5. 菌种的安全管理（1）加强菌种管理的安全防护措施，防止菌种的交叉污染和泄露；（2）对涉及菌株管理的人员进行相关培训和教育，提高他们的安全意识。
六、菌种的管理机构和管理人员的职责1. 菌种管理机构（1）设立专门的菌种管理机构，负责菌种的保藏和管理工作；（2）建立菌种管理制度，制定相关管理规定和操作程序。
菌种的管理和保藏
生物安全：加 强生物安全管 理防止菌种泄
漏和污染
应用拓展：扩 大菌种保藏的 应用领域如食 品、医药、环
保等
感谢观看
汇报人：
菌种保藏设施与设备
低Байду номын сангаас冰箱： 用于保存菌 种温度控制 在-20℃以下
超低温冰箱： 用于长期保 存菌种温度 控制在-80℃
以下
干燥器：用 于干燥菌种 防止菌种受
潮
培养基：用 于培养菌种 提供营养物
质
灭菌锅：用 于灭菌防止
菌种污染
生物安全柜： 用于操作菌 种防止菌种 污染和传播
01
菌种保藏的应用
农业领域
生物能源：用于 生产生物燃料如 乙醇、生物柴油 等
医学领域
疫苗生产：用于生产疫苗提高疫苗的质量和产量 抗生素生产：用于生产抗生素提高抗生素的产量和质量 生物制药：用于生物制药提高药物的疗效和安全性 基因工程：用于基因工程提高基因工程的效率和准确性
环境领域
土壤修复：利用 微生物降解污染 物改善土壤质量
菌种保藏技术
低温保藏：将菌种置于低温环境中如冰 箱、冷库等
真空保藏：将菌种置于真空环境中如 真空包装、真空罐等
干燥保藏：将菌种干燥后置于干燥环 境中如干燥器、干燥箱等
化学保藏：将菌种置于化学环境中如 化学试剂、化学溶液等
液氮保藏：将菌种置于液氮环境中如液 氮罐、液氮冷冻机等
辐射保藏：将菌种置于辐射环境中如 紫外线、伽马射线等
命名规则：采用拉丁文或英文进 行命名
命名示例：Escherichi coli K12
菌种鉴定与保藏
菌种鉴定：通过形态学、生理生化和分子生物学等方法进行鉴定 菌种保藏：包括低温保藏、干燥保藏、液氮保藏等方法 菌种管理：包括菌种登记、菌种库管理、菌种使用等环节 菌种保藏的重要性：确保菌种的纯度和活性防止菌种退化和污染
实验室菌毒种保藏存管理制度
实验室菌毒种保藏存管理制度实验室菌毒种保藏存管理制度引言：实验室的菌毒种保藏存管理制度是为了确保实验室内存储的菌种和毒素的安全，并保证其可持续使用。
该制度包括了对菌种和毒素的正确保藏方法、存储设施的管理、访问控制以及风险评估等方面的规定。
本文将对实验室菌毒种保藏存管理制度进行深入探讨，重点关注其重要性、操作指南和潜在挑战等方面的内容。
1. 实验室菌毒种保藏存管理制度的重要性实验室菌毒种保藏存管理制度的建立和实施对于实验室的安全和研究工作具有重要意义。
首先，该制度可以有效保护实验室内的菌毒种资源，防止其被外部人员非法获取或滥用。
其次，菌毒种保藏存管理制度可以提供研究人员在需要时方便地获得所需的菌种和毒素，以促进科学研究的进展。
最后，该制度还有助于监测和管理实验室内的菌毒种库存，确保其质量和完整性，避免遗失和浪费。
2. 实验室菌毒种保藏存管理制度的操作指南2.1 菌毒种保藏方法实验室在收到新的菌种和毒素时，需要进行有效的保藏处理。
这包括正确的分离、传代和存储方法。
分离时应遵循无污染的原则，确保菌种的纯度。
传代过程中要保持菌种的活力和稳定性。
对于菌种的存储，可以选择冷冻、干燥或液氮冷冻等方法，根据菌种的特性和实验室条件来确定最适合的存储方式。
2.2 存储设施的管理实验室菌毒种保藏存管理制度需要规定存储设施的管理要求。
这包括对存储设施的温度、湿度和光照等条件的监控与调节。
同时，应进行定期的设施检查和维护，确保存储设施的正常运行和安全性。
2.3 访问控制实验室菌毒种保藏存管理制度应明确对菌种和毒素的访问权限以及相关的安全措施。
只有经过授权和培训的人员才能够访问存储的菌毒种。
此外，实验室还需要记录每次的访问情况，以便进行跟踪和管理。
2.4 风险评估实验室菌毒种保藏存管理制度需要对存储的菌种和毒素进行风险评估。
这包括对其潜在危害性和对环境的潜在影响进行评估，并制定相应的应急措施和处理方法。
此外，还需要对相关人员进行安全培训，提高其对风险的认识和处理能力。
医学微生物菌种保藏管理方法
医学微生物菌种保藏管理方法一、菌种保藏的基本原则1.保鲜原则：菌种在采集和分离过程中应尽量保持其原汁原味，避免外源菌的混入和污染。
2.单株原则：保藏时应保证每支菌株是单株，以保证其纯度和稳定性。
3.多种原则：对同一种微生物的不同菌株应采取多中多位保藏，以增加菌种的多样性。
4.全程可控原则：采取全程可追溯和可控制的管理方法，确保菌种的安全保藏和利用。
5.国际标准原则：按照相关国际标准和规范进行菌种保藏和管理，以提高交流和合作的效率。
二、菌种保藏的方法1.冷冻保存法：将纯菌株悬浮液或细胞片通过添加保护剂如甘油或DMSO等，将菌株冷冻保存在低温下，通常是-70°C或液氮中。
此方法简单易行，适用于细菌和真菌的保存。
2.干燥保存法：将菌落或菌株通过无菌技术处理后，放在无菌培养基上晾干后保存。
此法适用于真菌和酵母菌等耐干燥的菌种，保存条件较为简单。
3.血清冻干保存法：将微生物菌株通过添加保护剂的方法制备成冻干粉末，然后放置在低温干燥器中冻干保存。
此法适用于需长时间保存且具有较高生物学活性的病毒和细菌。
4.深层培养保存法：将纯菌株制备成深层培养基中的斜面培养或沉淀法保存。
此法适用于常规保存，保存条件较为简单。
5.液体亚培养保存法：将菌种接种到液体培养基中，通过调整培养基成分，采取亚培养保存的方式，保持菌种的生存状态。
此法适用于对菌株的要求较高的特殊菌株。
2.制度规范：建立菌种保藏和管理的工作制度和操作规范，明确工作流程和责任分工，保证工作的科学性和规范性。
3.定期检测：对保存的菌种进行定期检测，保证其纯度、活性和遗传稳定性，及时发现和处理菌种变异和污染等问题。
4.定期更新：对长时间保存的菌种进行定期更新，保持菌种的活力和可持续利用能力，与其他菌种资源中心进行流通和交换。
5.安全保障：建立菌种保藏和管理的安全保障制度，包括物理安全、信息安全和生物安全等方面的管理措施，保证菌种和研究人员的安全。
综上所述，医学微生物菌种保藏管理是一项综合性较强的工作，需要遵循基本原则，采用适合的保存方法，并且进行科学的管理和规范的操作，以确保菌种的质量和可持续利用能力。
菌种管理制度
菌种管理制度篇一：检验用菌种管理制度检验用菌种管理制度为保证药品生产、检定和科研的质量，加强对检验用菌种的科学管理，特制定本制度。
Ⅱ. 范围Scope适用于本厂检验用菌种的管理。
Ⅲ. 职责Responsibility菌种管理人对菌种的申购、保藏、检查、发放和销毁负责，检验员对菌种的使用和操作安全负责，采购部对菌种的订购负责，QC部经理对本制度的实施监管负责。
Ⅳ. 定义检验用菌种是用于无菌检查、微生物限度检查、抗生素微生物测定、评价防腐剂和抗菌剂的抑菌效果、确认灭菌工艺效果、检验方法的验证、培养基的促菌生长能力检查、样品检验时的阳性对照等的标准菌株（对照物质）。
一代：将微生物接种至一新鲜培养基上/内，每萌发一次即称为一代。
Ⅴ.程序Procedure1. 总则1.检验用菌种应来自认可的国内或国外菌种保藏机构的标准菌株，或使用与标准菌株所有相关特性等效的商业派生菌株。
1.2 检验用菌种的管理由QC部指定专人负责。
1.2.1负责菌种的申购、接收与复活、保藏、定期传代、检查及销毁。
1.2.2根据需要及时提供菌种，并监督其使用。
1.2.3负责填写菌种记录。
2. 菌种的申购、接收2.1 根据检验要求申购所需菌种,写明购买菌种名称、标准菌号、数量、保藏机构。
2.22.3对新购进的菌种应仔细核对菌种标签、包装完整性和随菌种附有的说明书，及时填写菌种保管登记记录。
3. 菌种的保藏、传代3.1 标准菌株的复活或培养物的制备应按供应商提供的说明或按已验证的方法进行。
3.2 冻干管开启后可制备菌种甘油管和转种斜面。
3.3 斜面菌种1～3个月传代一次，传代次数不得超过错误！未找到引用源。
代。
传代应及时填写制备及传代记录。
3.4 除另有规定外，菌种冻干管、甘油管应保存于-20℃以下冰箱中，菌种斜面、菌液应保存于2～8℃冰箱。
3.5 冷冻菌种一旦解冻转种制备工作菌株后，不得重新冷冻和再次使用。
3.6 保藏的菌种都要有明显的标志，标明菌种名称、标准菌号、接种日期、传代数与菌种记录一一对应。
实验室常用菌种的保存和管理
实验室常用菌种的保存和管理摘要：保藏菌种的目的不仅要保存菌株的生命本身，而且还必须要尽可能地使菌株的遗传性状保持不变，同时保证其在整个保存过程中不被杂菌污染。
因此，选择有效且稳定的保藏微生物菌种的方法至关重要。
关键词：菌种；保存；管理医学病原生物学实验室主要承担微生物实验教学任务，日常工作中经常要分离、鉴定细菌、试教演示、保存菌种等。
菌种是微生物实验的基本材料，因涉及到师生的安全，所以要正确保存，妥善管理，逐步实现菌种的保存制度化与科学化。
一、材料与方法1.教学实验常用的菌种保存营养要求不高的菌种：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、志贺氏菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌。
营养要求高的菌种：链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌、脑膜炎奈瑟菌。
厌氧芽孢杆菌：产气荚膜杆菌。
需氧芽胞杆菌：枯草芽孢杆菌。
真菌：白色念珠菌、新生隐球菌。
2.菌种的鉴定实验室中保存的菌种都要经过鉴定合格后方可使用，常用的鉴定方法有形态学观察、菌落特征、生化反应及血清学鉴定。
3.菌种的保存（1）定期传代保存法传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存，它是最基本的微生物保存法。
传代保存时，培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低，培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。
①液体培养基低温保存法。
将保持营养要求不高的细菌接种于装有营养肉汤的试管中，营养要求高的细菌接种于含15%血清的营养肉汤中，经37℃培养18~14小时后，取出封口，置4℃冰箱保存。
②半固体穿刺保存法。
将细菌穿刺接种于普通半固体培养基内，37℃培养18~24小时后，在无菌条件下加入灭菌液体石蜡，厚度约1厘米，封口后置4℃冰箱保存。
③琼脂斜面保存法。
营养要求不高的菌种用普通琼脂斜面保存法，营养要求高的菌种用血液琼脂斜面保存，将细菌蜿蜒接种于血液琼脂斜面上，置37℃培养18~24h后，石腊封口，放于4℃冰箱保存。
④沙保氏培养基保存法。
发酵工程第2章2 菌种的选育与保藏
2.3传代保藏
将菌种定期在新鲜琼脂培养基上传代，然后在一定的 生长温度下生长和保存的传代保藏方法。
可用于实验室中若干菌种的保藏。 此法最为简单和经济，且不要求任何特殊的设备。 但此方法易发生培养基干枯、菌体自溶、基因突变。
2.3 传代培养法
实验原理：保藏的菌种通过斜面、穿刺或疱肉培养基（用于 厌氧细菌）培养好后，置4C˚冰箱中存放，定期 进行传代培养、再存放。 可用胶塞代替棉塞或在斜面上覆盖一层无菌液体 石蜡来进一步延长保存期。
冷冻干燥过程中必须使用冷冻保护剂，目前国内常 用脱脂乳和蔗糖，国外尚有运用动物血清等。
大部分微生物菌种可以在冻干状态下保藏10年之久 而不丧失活力。而且经冻干后的菌株无需进行冷冻 保藏，便于运输。
培养物的冻干过程
冷冻真空干燥操作流程
配制保护剂 灭菌
菌种 培养 制备菌悬液
分装安培瓶 预冻
真空干燥 测定水分
操作方法 1、斜面保藏法 将菌种转接在适宜固体斜面培养基上，待其充分生长后，
用牛皮纸将棉塞部分包扎好（棉塞换成胶塞效果更好），置 4C˚冰箱中包藏。
保藏时间依微生物的种类而定。霉菌、放线菌及芽孢菌保 存2－4个月移种一次，酵母菌间隔两个月，普通细菌一个月， 假单胞菌两周传代一次。
此法优点是操作简单、使用方便，缺点是保藏时间短、易 被污染。
加速保藏试验可用于预测保藏过程中保藏培养物的 稳定性。
在一给定温度下通过对高温下短期活力丧失程度检 测，可以用来预测嗜酸乳杆菌的稳定性。
成功的菌种长期保藏方法之有价值的指标包括：在 保藏6个月、1年或更长时间后存活百分率(或存活单 位)、细胞群体的形态学特征或一些特别的生化特征 应在菌种保藏前后保持同一性，以及实验室中、中 试车间中和生产发酵中产品滴度的稳定性，后者极 为重要。
菌种的保藏与管理
原理
1.根据微生物的生理、生化特性在人工创造的条件下尽量降低微生物细 胞的代谢强度，使细胞处于基本休眠状态，生长繁殖受到抑制但又至于 不死亡，以减低菌种的变异率。低温、干燥、缺乏营养等环境条件都有 抑制微生物代谢的作用。 2.低温、干燥、真空是用于菌种保藏的重要手段。 3.在选择方法时，首先要考虑方法能否长期有效的保持菌种原有的特性， 同时也应兼顾到方法的经济和简便。
菌种的保藏与管理
2012.12.13
菌种保藏的意义
• 菌种保存是为了减慢或停止菌种的生长繁殖﹔不被杂菌污染﹐在较长时 期内保持著生活能力。以便为日常工作需求提供可靠的优质菌株。 • 微生物具有生命活力，在传代过程中容易发生变异甚至死亡，因此菌种 保存是一项重要的基础工作，是微生物基础学工作的一项重要内容，也 是药品 微生物工作中的一项常用技术。 • 更有效的利用微生物资源。Fra bibliotek谢谢观赏
菌种保藏机构
常用的菌种保藏方法
方法 主要原理 低温（4℃） 低温、缺氧 干燥、无营养 干燥、低温、缺 氧 超低温 适用的微生物 广泛 广泛 产孢微生物 广泛 广泛 保藏时间 1--6个月 1年以上 1--10年 5--10年以上 数十年 特点 简便 简便 简便但有效 复杂但有效 复杂但有效
斜面琼脂低温保 存
液氮超低温保藏发
原理
当温度达到-70℃时，菌体的原生质会形成稳定的“玻璃态”，能长时间 保藏菌种，故菌株在液氮（-196℃），干冰或超低温的冰箱中保藏，此 时菌株的新陈代谢已经停止，但不会死亡。（国外已经普遍采用）
菌种的管理
• 使用菌种的单位，需有一定从事微生物工作的条件和设备，菌种应有专 人负责保管和发放，并建立相关制度。 • 定期转种和（生化、纯度）鉴定，防止菌种衰退、变异、死亡。 • 菌种的采购、接受、鉴定、发放、使用、转种、销毁均应有详细记录。
中国医学微生物菌种保藏管理办法
病原微生物菌（毒）种和样本的重要性段丽莉. 菌种保管应有专人负责，保存于冰箱中，房门专人加锁，确保菌种安全。
保管人员变动时，必须严格交接手续。
2、菌种应有严格的登记，包括形态，分离日期，鉴定日期，签发者，主要鉴定性能（包括形态、染色、抗原结构、动物致病力等），并注明使用、转移、销毁情况及原因。
3、各种菌种应按规定时间接种，一般在接种三次后作一次全面的鉴定，注意菌种有无污染及变异，如发现变异时，应及时更换。
4、菌种保存范围及向外单位转移，应按国家卫生部规定执行。
5、所有存在菌种应具备清单。
编写：审核：批准：批准日期：主要内容病原微生物菌（毒）种和样本是国家重要生物资源，是保障生物安全和国家经济安全与稳定的重要战略资源。
是人类传染病预防、诊断和治疗以及医学科研和教学事业的基础和重要支撑条件，也是保障食品安全、生物安全以及抵御生物恐怖袭击的前提条件。
病原微生物菌（毒）种和样本病原微生物菌（毒）种和样本由于其本身所具有的特殊性，在其采集、携带、运输、保藏管理和使用过程中必须强调生物安全，必须符合国家传染病防治、医学微生物菌（毒）种管理有关法规的规定。
其管理不仅强调在硬件设备上要符合微生物安全防护的要求，更重要的是强调所有管理人员、工作人员在日常工作中要有常备不懈的防护意识和守法观念。
菌（毒）种分类按照微生物结构、组成分为三大类：原核细胞型微生物：细菌、支原体、立克次体、衣原体、螺旋体和放线菌。
真核细胞型微生物：真菌非细胞型微生物：病毒中国医学微生物菌种保藏管理办法第二条菌种的分类菌（毒）种的分类根据其危险性决定的对实验室感染的可能性；人体感染后发病的可能性；发病后症状轻重及愈后情况；有无致命危险及有效的防止实验室感染方法；用一般的微生物操作方法能否防止实验室污染；我国有否此种菌种及曾否引起流行人群免疫力等情况。
依其危险程度的大小，我国的菌(毒)种分为四类。
中国医学微生物菌种保藏管理办法第二条菌种的分类一类：实验室感染的机会多，感染后发病的可能性大，症状重并能危及生命，缺乏有效的预防方法，以及传染性强，对人群危害性大的烈性传染病，包括国内未发现或虽已发现，但无有效防治方法的烈性传染病菌（毒）种。
菌种管理规范
菌种管理规范一、引言菌种管理是指对菌种资源进行收集、保存、鉴定、繁育和分发的一系列管理活动。
良好的菌种管理规范能够确保菌种资源的可持续利用和有效管理，保障菌种资源的质量和安全性。
本文旨在制定一套菌种管理规范，以确保菌种资源的可靠性和可追溯性。
二、菌种收集与保存1. 菌种收集菌种收集应遵循科学、合法、道德的原则。
收集的菌种应具有科学研究和应用价值，并且应遵循国家和地方相关法律法规的规定。
2. 菌种保存菌种应在符合国际通行的菌种保存方法下进行保存，如低温冷冻保存、干燥保存、液氮冷冻保存等。
保存条件应符合菌种的生物学特性和保存要求，确保菌种的长期保存和稳定性。
三、菌种鉴定与命名1. 菌种鉴定菌种鉴定应基于科学的鉴定方法和技术，包括形态学观察、生理生化特性鉴定、分子生物学鉴定等。
鉴定结果应具备可靠性和可重复性，并应记录相关鉴定信息。
2. 菌种命名菌种命名应遵循国际菌种命名法规定，确保菌种名称的唯一性和标准性。
命名过程中应注意避免重复命名和混淆命名，确保菌种名称的准确性和规范性。
四、菌种繁育与保藏1. 菌种繁育菌种繁育应采用合适的培养方法和培养基，确保菌种的纯度和活力。
繁育过程中应注意避免菌种突变、杂交和污染等现象，确保繁育的菌种质量。
2. 菌种保藏菌种保藏应采用可靠的保存方法，确保菌种的长期保存和稳定性。
保藏过程中应定期检测菌种的活力和纯度，并记录相关信息。
如菌种失活或变异，应及时更新保存菌种。
五、菌种分发与交流1. 菌种分发菌种分发应遵循科学、公正、公平的原则。
分发的菌种应符合相关法律法规的规定，并应提供详细的菌种信息和使用说明。
分发过程中应确保菌种的质量和安全性。
2. 菌种交流菌种交流应促进国内外的学术交流和合作。
交流的菌种应符合相关法律法规的规定，并应遵循双方的合作协议。
交流过程中应确保菌种的可追溯性和安全性。
六、菌种管理与监控1. 菌种管理菌种管理应建立健全的管理制度和流程，确保菌种资源的有效管理和利用。
菌种保藏的要点
菌种保藏的要点
菌种保藏的要点包括以下几点：
1. 菌种的分离与培养：选择合适的方法将所需菌种从样品中分离出来，并进行适当的培养，确保纯净度和菌株的健康状态。
2. 菌种的保存介质：选择适合菌种保存的介质，常见的包括琼脂、液体培养基、冰冻保存液等。
保存介质要符合菌株生长的需求，并具备较长的保存时间。
3. 冷冻保存：将菌种培养物经过适当处理后保存在低温环境中，常见的冷冻方式包括冷冻干燥、液氮冷冻等。
冷冻保存可以有效地延长菌株的保存时间。
4. 恒温保存：将菌种培养物保存在稳定恒温环境中，如恒温培养箱或恒温冰箱。
保存温度要根据菌株的生长特性进行调整，通常为4-8摄氏度。
5. 定期传代：定期传代菌株，避免菌株在长期保存过程中发生遗传变异或失活。
6. 保存记录：建立并及时更新菌株的详细保存记录，包括菌株的来源、保存时间、保存方式、特性描述等信息，以便于菌株的溯源和使用。
7. 双重保存：对于重要的菌种，可以考虑进行双重保存，即同时进行冷冻保存和恒温保存，以增加保存的安全性。
8. 定期检测：定期检测保存的菌株，包括菌株的纯度、生长状况和遗传特性等，确保保存的菌株依然具有所需的特性和活力。
以上是常见的菌种保藏要点，可以根据具体的实验需求和菌种特点进行调整和优化。
同时，注意进行合理的菌种管理和使用，以减少菌株的失活和遗传变异，保证科研的可靠性和稳定性。
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2020/8/19
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二、菌种的传代和使用
工作菌种的传代次数应严格控制，不得超过5 代，（从菌种保藏中心获得的标准菌株为第0 代）防止过度的传代造成菌种变异。1代是指 将活的培养物接种到新鲜培养基中，任何亚 培养的形式均被认为是转种或传代一次。必 要时，实验室应对工作菌株的特性和纯度进 行确认。
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标准储备菌株经纯度和特性确认后保存°
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工作菌株不可代替标准菌株，标准菌株的 商业衍生物仅可用作工作菌株。
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不同的微生物，应根据其生物特征来选择最 适宜 的保藏方法，菌种的保藏方法一般分 四个阶段：
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⑴ 挑选特征典型的纯菌菌落 ⑵确定保藏的合适菌体形态 ⑶选择最适宜的方法保藏 ⑷定期对保藏的菌种进行检查
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菌种保藏机构
中国菌种保藏管理委员会（CCCCM） 成立于1979年。下设7个菌种保藏管理中
心及有关专 业实验室，共12个单位实行统一领导，按
专业分工管理。 国外的菌种保藏机构
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常用菌种保藏方法
菌种保藏的原则 根据微生物菌种的生理、生化特性， 在人工创造的条件下尽量降低微生物 细胞的代谢强度，使细胞基本上处于 休眠状态，生长繁殖受到抑制但由不 至于死亡，以减低菌种的变异率。
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Байду номын сангаас
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菌悬液的制备与保存
菌悬液的制备与保存 采用经验证的方法制备菌悬液，除另有规定外，微生物限 度试验用菌悬液应按《中国药典2010年版》规定制备
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2、实验室必须建立菌种保存和使用文 件化的程序管理制度. 3、菌种应冷藏或冷冻保存，保存菌种的 冰箱不得放置食品和易挥发性药品，放 置菌种的专门冰箱，应上锁管理。
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4、应由专人按操作规程和有关要求定期进 行传代，并定期对保存的菌种进行检查， 一般每年1～2次，（或定期更换栋干菌 种）。
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三、菌种的检查与复壮
菌种的衰退 菌种经过长期人工传代培养或保藏，由自发突 变的作用而引起某些优良特性变弱或消失的 现象。
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控制菌种的衰退方法 ⑴控制传代次数 ⑵创造适宜的培养条件 ⑶用不同类型的细胞进行传代 ⑷采用有效的保藏方法
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定期检查
菌种在保藏期间必须定期检查，发现变 异或衰退，应及时给予恢复。
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细菌的接种、分离和培养
接种、分离、培养是微生物学实验 的基本
作技术，要求严格的无菌操作和在 无菌环境下进行。
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常用培养基种类 斜面接种
半固体培养基 液体培养基 平板培养基
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接种方法 涂布法 划线法 穿刺法 直接加入法等
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分离：
分段划线法、连续划线法、涂布分 离法、倾注分离法等。
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详细记录 菌种的来源、接收、传代、分离、复壮、使用和鉴 定等均应做好详细记录。包括菌种传代或使用时间、 名称、菌号、代数、传代或保存形式、分离复壮方 式、使用内容、鉴定情况等都应进行详细的记录。
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菌种不得随意带出实验室，外单位索取、购 买应由登记，并包装严密。 菌种处理应严格按操作规程进行，灭菌处理 应有详细记录。
菌种的保藏和管理
2009年10月
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1
菌种保藏
微生物实验过程中，实验菌株可能是最敏感 的，因为它们的生物活性和特性依赖于合适 的试验操作和贮藏条件。
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2
实验室菌种的处理和保藏的程序应
标准化，使尽可能减少菌种污染和 生长特性的改变。按统一操作程序 制备菌株是微生物试验结果一致性 的重要保证。
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7
常用菌种保藏方法
标准菌株的复活或培养物的制备应按供 应商提供的说明或按验证的方法进行。 标准储备菌株-从国内、外菌种收藏机构 获得的标准菌株经复活并在适宜的培养基 中生长后,既为标准储备菌株。
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8
低温、干燥、缺氧、缺乏营养等环境条件 都可以抑制微生物的代谢和生长繁殖，因 此低温、干燥和真空是菌种保藏的重要手 段。
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培养 ：接种后的培养基，根据不同微生物
生长条件的要求，置培养基于适宜微生物生 长的环境中，使其生长繁殖的过程。 需气培养法 厌氧培养法
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培养后微生物的生长判断 固体培养基 液体培养基
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菌种的传代和使用 菌液的制备和使用
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3
菌种保藏是微生物学检验工作中的一项 常规技术，菌种的科学保藏和管理直接 关系到检验结果的正确性
试验菌种应是从国家菌种中心获得的标 准菌种，经过实验室复活并在适宜的培 养基中生长后保存.
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菌种保藏的中心任务是广泛收集各种
有用的微生物菌种，选择最适宜的保藏 方法，避免在保藏和传代过程中死亡、 变异、衰退及活力减弱，以保持菌种原 有的各种生物学特性，从而达到保证研 究、检验、交换和使用要求的目的。
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菌种的复壮 使衰退的菌种重新恢复原来的优良特性的 过程。实验室主要采用分离纯化的方法。
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四、菌种的管理
1、使用菌种的单位，应具备从事微生
物工作的条件和设备。 菌种应由专人负责管理，管理人员应 具有微生物专业知识和技术水平，并应 具有较强的责任心。
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