质粒及质粒载体复习题及答案.doc
质粒及质粒载体复习题及答案.doc
质粒及质粒载体复习题及答案一、填空题1、基因工程中有三种主要类型的载体：质粒DNA、病毒DNA、质粒和病毒DNA杂合体。
2.由于不同构型的DNA插入EB的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同。
SC DNA的泳动速度最快，OC DNA泳动速度最慢，L DNA居中，通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。
3.就克隆一个基因（DNA片段）来说，最简单的质粒载体也必须包括三个部分：复制子（含有复制起点）、选择标记（主要是抗性基因）、克隆位点（便于外源DNA插入）。
另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子质量。
4.如果两个质粒不能稳定地共存于一个寄主细胞中，则属于同一个不亲和群，这是因为它们的复制机制相同所致。
5.质粒拷贝数是指细胞中质粒的份数同染色体的比值，即质粒/染色体。
6.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫质粒消除（或治愈）。
7.PBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于pMBl ,它的四环素抗性基因来自于pSClOl ,它的氨节青霉素抗性基因来自于PSE2124 （R质粒）。
8.YAC的最大容载能力是1000~2000kb , BAC载体的最大容载能力是300kb 。
9.把那些没有可检测表型的质粒称为隐蔽性质粒。
10.pUC18质粒是目前使用较为广泛的载体。
pUC系列的载体是通过PBR322和M13两种质粒改造而来。
它的复制子来自pMBl , Amp抗性基因则是来自转座子。
11・Ti质粒是自然界存在的植物基因工程的天然载体。
12.既能在夙coll又能在S・cerevisiae中自我复制的载体DNA称为穿梭载体。
二、选项题（单选或多选）1.下面关于松弛型质粒（relaxed plasmid）性质的描述中，（C ）是不正确的。
的制约, 而有较多的拷贝数A.质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制B.可以在氯霉素作用下进行扩增C.通常具有较少的拷贝数D.同严紧型质粒整合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子2.基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的，真正的天然质粒载体很少，在下列载体中只有（B ）被视为用作基因工程载体的天然质粒载体。
分子生物学习题库与参考答案
分子生物学习题库与参考答案一、单选题（共49题，每题1分，共49分）1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案：D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案：D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案：B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案：A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案：A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案：B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案：B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案：A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案：A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案：B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案：B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案：C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案：B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案：B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案：D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案：C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案：D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案：C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案：C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案：C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案：B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案：B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案：D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案：C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案：A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案：C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案：C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案：D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案：D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案：C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案：C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案：C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案：A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案：C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案：B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案：B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案：B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案：D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案：C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案：D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案：D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案：A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案：B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案：A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案：D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案：C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案：D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案：B二、多选题（共35题，每题1分，共35分）1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案：BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案：G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案：BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案：EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案：B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案：G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案：AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案：G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案：G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案：B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案：G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案：CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案：B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案：ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案：G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案：G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案：D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案：AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案：BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案：G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案：G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案：F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案：C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案：CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案：G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案：B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案：E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案：D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案：ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案：ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案：AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案：F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案：CG三、判断题（共38题，每题1分，共38分）1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。
生物化学-期末复习资料
生物化学-期末复习资料一、判断题（每题1分，共15分）1、蛋白质溶液稳定的主要因素是蛋白质分子表面形成水化膜,并在偏离等电点时带有相同电荷( )2、糖类化合物都具有还原性( )3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体，是因为它含有的不饱和脂肪酸比植物油多。
( )4、维持蛋白质二级结构的主要副键是二硫键。
( )5、ATP含有3个高能磷酸键。
( )6、非竞争性抑制作用时，抑制剂与酶结合则影响底物与酶的结合。
( )7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收，预防佝偻病。
( )8、氰化物对人体的毒害作用是由于它具有解偶联作用。
( )9、血糖基本来源靠食物提供。
( )10、脂肪酸氧化称β-氧化。
( )11、肝细胞中合成尿素的部位是线粒体。
( )12、构成RNＡ的碱基有Ａ、Ｕ、Ｇ、T。
( )13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。
( )14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。
( )15、脂溶性较强的一类激素是通过与胞液或胞核中受体的结合将激素信号传递发挥其生物。
( )二、（学科教研组期末学业水平汇编）单选题（每小题1分，共20分）1、下列哪个化合物是糖单位间以α-1，4糖苷键相连：( )A、麦芽糖B、蔗糖C、乳糖D、纤维素E、香菇多糖2、下列何物是体内贮能的主要形式 ( )A、硬酯酸B、胆固醇C、胆酸D、醛固酮E、脂酰甘油3、蛋白质的基本结构单位是下列哪个：( )A、多肽B、二肽C、L-α氨基酸D、L-β-氨基酸E、以上都不是4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是( )A、能加速化学反应速度B、能缩短反应达到平衡所需的时间C、具有高度的专一性D、反应前后质和量无改E、对正、逆反应都有催化作用5、通过翻译过程生成的产物是： ( )Ａ、ｔRNA Ｂ、ｍRNA Ｃ、ｒRNA D、多肽链Ｅ、DNA 6、物质脱下的氢经NADH呼吸链氧化为水时，每消耗1/2分子氧可生产ATP分子数量( )A、１B、2C、3D、4．（学科教研组期末学业水平检测精选汇编）E、57、糖原分子中由一个葡萄糖经糖酵解氧化分解可净生成多少分子ATP？ ( )A、1B、2C、3D、4E、58、下列哪个过程主要在线粒体进行( )A、脂肪酸合成B、胆固醇合成C、磷脂合成D、甘油分解E、脂肪酸β-氧化9、酮体生成的限速酶是( )A、HMG-CoA还原酶B、HMG-CoA裂解酶C、HMG-CoA合成酶D、磷解酶E、β-羟丁酸脱氢酶10、有关G-蛋白的概念错误的是( )A、能结合GDP和GTPB、由α、β、γ三亚基组成C、亚基聚合时具有活性D、可被激素受体复合物激活E、有潜在的GTP 活性11、鸟氨酸循环中，合成尿素的第二个氮原子来自 ( )A、氨基甲酰磷酸B、NH3C、天冬氨酸D、天冬酰胺E、谷氨酰胺12、下列哪步反应障碍可致苯丙酮酸尿症 ( )A、多巴→黑色素B、苯丙氨酸→酪氨酸C、苯丙氨酸→苯丙酮酸D、色氨酸→5羟色胺E、酪氨酸→尿黑酸13、胆固醇合成限速酶是： ( )A、HMG-CoA合成酶B、HMG-CoA还原酶C、HMG-CoA裂解酶D、甲基戊烯激酶E、鲨烯环氧酶14、关于糖、脂肪、蛋白质互变错误是： ( )A、葡萄糖可转变为脂肪B、蛋白质可转变为糖C、脂肪中的甘油可转变为糖D、脂肪可转变为蛋白质E、葡萄糖可转变为非必需氨基酸的碳架部分15、竞争性抑制作用的强弱取决于：( )A、抑制剂与酶的结合部位B、抑制剂与酶结合的牢固程度C、抑制剂与酶结构的相似程度D、酶的结合基团E、底物与抑制剂浓度的相对比例16、红细胞中还原型谷胱苷肽不足，易引起溶血是缺乏( )A、果糖激酶B、６－磷酸葡萄糖脱氢酶C、葡萄糖激酶D、葡萄糖６－磷酸酶E、己糖二磷酸酶17、三酰甘油的碘价愈高表示下列何情况 ( )A、其分子中所含脂肪酸的不饱和程度愈高B、其分子中所含脂肪酸的不饱和程度愈C、其分子中所含脂肪酸的碳链愈长D、其分子中所含脂肪酸的饱和程度愈高E、三酰甘油的分子量愈大18、真核基因调控中最重要的环节是 ( )A、基因重排B、基因转录C、DNA的甲基化与去甲基化D、mRNA的衰减E、翻译速度19、关于酶原激活方式正确是：( )A、分子内肽键一处或多处断裂构象改变，形成活性中心B、通过变构调节C、通过化学修饰D、分子内部次级键断裂所引起的构象改变E、酶蛋白与辅助因子结合20、呼吸链中氰化物抑制的部位是： ( )A、Cytaa3→O2B、NADH→Ｏ2C、CoQ→CytbD、Cyt→CytC1 D、Cytc→Cytaa3三、多选题（10个小题，每题1分，共10分）1、基因诊断的特点是：( )A、针对性强特异性高B、检测灵敏度和精确性高C、实用性强诊断范围广D、针对性强特异性低E、实用性差诊断范围窄2、下列哪些是维系DNA双螺旋的主要因素( )A、盐键B、磷酸二酯键C、疏水键D、氢键E、碱基堆砌3、核酸变性可观察到下列何现象 ( )A、粘度增加B、粘度降低C、紫外吸收值增加D、紫外吸收值降低E、磷酸二酯键断裂4、服用雷米封应适当补充哪种维生素( )A、维生素B2B、V—PPC、维生素B6D、维生素B12E、维生素C5、关于呼吸链的叙述下列何者正确？ ( )A、存在于线粒体B、参与呼吸链中氧化还原酶属不需氧脱氢酶C、NAD+是递氢体D、NAD+是递电子体E、细胞色素是递电子体6、糖异生途径的关键酶是 ( )A、丙酮酸羧化酶B、果糖二磷酸酶C、磷酸果糖激酶D、葡萄糖—6—磷酸酶E、已糖激酶7、甘油代谢有哪几条途径( )A、生成乳酸B、生成CO2、H2O、能量C、转变为葡萄糖或糖原D、合成脂肪的原料E、合成脂肪酸的原料8、未结合胆红素的其他名称是 ( )A、直接胆红素B、间接胆红素C、游离胆红素D、肝胆红素E、血胆红素9、在分子克隆中，目的基因可来自( )A、基因组文库B、cDNA文库C、PCR扩增D、人工合成E、DNA结合蛋白10关于DNA与RNA合成的说法哪项正确： ( )A、在生物体内转录时只能以DNA有意义链为模板B、均需要DNA为模板C、复制时两条DNA链可做模板D、复制时需要引物参加转录时不需要引物参加E、复制与转录需要的酶不同四、填空题（每空0.5分，共15分）1、胞液中产生的NADＨ经和穿梭作用进入线粒体。
分子生物学检验技术复习题与答案
分子生物学检验技术复习题与答案一、单选题（共80题，每题1分，共80分）1、世界上首次用已经分化成熟的体细胞核通过克隆技术培育的动物是A、克隆猪B、克隆绵羊C、克隆鼠D、克隆猴E、克隆奶牛正确答案：B2、检测靶序列是DNA的技术是A、Norther杂交B、Southern杂交C、Western杂交D、Eastem杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：B3、有关核酶的恰当解释是A、它是RNA分子，但具有酶的功能B、它是蛋白质C、是专门水解核酸的蛋白质D、它是由RNA和蛋白质构成的E、它是由DNA和蛋白质构成的正确答案：A4、下列哪种物质在 PCR 反应中不能作为模板：A、单链DNAB、RNAC、cDNAD、肽链E、双链DNA正确答案：D5、双链DNA的Tm值主要与下面哪项有关A、C-T含量B、A-T含量C、T-G含量D、A-G含量E、C-G含量正确答案：E6、寡核苷酸芯片主要采用A、原位合成法制备B、杂交技术C、探针固化技术D、显微光蚀刻技术E、DNA微阵列的制作方法正确答案：A7、在已知序列信息的情况下获取目的基因的最方便方法是：A、聚合酶链反应B、组织细胞提取C、cDNA文库法D、基因组文库法E、化学合成法正确答案：A8、凝胶色谱分离蛋白质的依据是A、等电点B、亲和作用C、固定相对蛋白质的吸附作用不同D、分子大小E、疏水作用正确答案：D9、α互补筛选法属于：A、免疫化学筛选B、酶联免疫筛选C、原位杂交筛选D、标志补救筛选E、抗药性标志筛选正确答案：D10、关于DNA双螺旋结构模型的叙述中，除了哪一项外其余都是正确的A、螺旋直径为2nmB、两股链间有严格的碱基配对关系C、两股核苷酸链呈反向平行D、为右手螺旋，每个螺距含10对碱基E、极性磷酸二酯键位于双螺旋内侧正确答案：E11、DNA变性的本质是下列哪种键的断裂？A、氢键B、二硫键C、离子键D、盐键E、共价键正确答案：A12、从细菌体内分离出的质粒DNA，在体外的状态是A、线性B、开环C、多聚体D、单链E、超螺旋正确答案：E13、下述双链DNA序列（仅列出其中一条链序列）中，不属于完全回文结构的是A、AAGATCTTB、AGAATTCTC、GGAATTCCD、CGTTAAGCE、TGAATTCA正确答案：D14、在基因工程中所使用的质粒DNA通常存在于：A、酵母染色体外B、哺乳类细胞染色体外C、细菌染色体上D、细菌染色体外E、酵母染色体上正确答案：D15、目前常用的基因表达体系细胞包括A、以上都是B、昆虫细胞C、大肠埃希菌D、哺乳动物细胞E、酵母细胞正确答案：A16、EB溴化乙锭作为核酸电泳指示剂的原理是A、EB是一种可视物质B、EB特异性结合核酸分子C、EB插入核酸分子之间并在紫外光下产生荧光D、EB在紫外光下放射荧光E、EB是核酸转性染料正确答案：C17、EB溴化乙锭作为核酸电泳指示剂的原理是A、EB特异性结合核酸分子B、EB在紫外光下放射荧光C、EB是核酸传性染料D、插入核酸分子之间并在紫外光下产生荧光E、EB是一种可视物质正确答案：D18、DNA提取中不能有效去除蛋白质的是A、RNaseB、酚-氯仿抽提C、蛋白酶KD、SDSE、高盐洗涤正确答案：A19、下列几种DNA分子的碱基组成比例,其中Tm值最高的是A、G+C-40%B、G+C=60%C、G+C=25%D、A+T=80%E、A+T=15%正确答案：E20、DNA超螺旋结构中哪项恰当A、核小体由DNA和非组蛋白共同构成B、以上都不恰当C、核小体由DNA和H1，H2，H3，H4各二分子构成D、组蛋白的成分是H1，H2A，H2B，H3和H4E、核小体由RNA和H1，H2，H3，H4各=分子构成正确答案：D21、最早发现的抑癌基因是A、VHLB、p53C、DCD、RbE、APC正确答案：D22、Southem杂交通常是指A、RNA与RNA杂交B、DNA与RNA杂交C、DNA与蛋白质杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA与DNA杂交正确答案：E23、在已知序列信息的情况下获取目的基因的最方便方法是：A、聚合酶链反应B、cDNA文库法C、组织细胞提取D、基因文库法E、化学合成法正确答案：A24、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为A、0.5-2mmol/LB、0.3-1mmol/LC、0.5-1mmol/LD、2-2.5 mmol/LE、0.3-2mmol/L正确答案：A25、DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不恰当A、体内以B构型最常见B、腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数C、DNA双螺旋中碱基对位于外侧D、同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似E、二股多核苷酸链通过A与T或C与C之间的氢键连接正确答案：C26、一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象，通过化学发光可以像核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。
分子生物学复习题 第八章重组DNA技术
第八章重组DNA技术一、选择单选1、下列哪项不属于生物工程？A. PCR技术B.重组DNA技术C.蛋白质工程D.酶工程E.细胞工程2、重组DNA技术中所用的限制酶是哪类？A.Ⅰ型限制酶B.Ⅱ型限制酶C.Ⅲ型限制酶D.Ⅳ型限制酶E.Ⅴ型限制酶3、可以利用蓝白筛选法筛选用pUC转化的重组DNA克隆，是因为pUC包含以下哪种元件？A.复制起点B. amp RC.acZ'D.多克隆位点MCSE.调节基因lacI4、关于λ噬菌体，以下叙述错误的是A.基因组DNA的部分序列并非溶原性生长所必需B.基因组DNA感染大肠杆菌后形成闭环结构C.在溶原性生长时进行滚环复制D.复制时形成多联体结构E.其转化的细菌经过培养形成噬菌斑5、pBR322质粒包含两个抗性基因：氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，据此可以利用哪种方法筛选重组DNA克隆？A.α互补B. PCRC.插入失活D.核酸分子杂交E.蓝白筛选6、制备重组DNA首先要制备目的DNA，要保证目的DNA的量和纯度能满足重组要求。
常用的制备方法不包括A.PCR扩增B.从组织细胞分离基因组DNAC.化学合成D.逆转录合成cDNAE.限制酶截取7、第一种应用于临床的重组蛋白是A.基因工程疫苗B.基因工程抗体C.激素D. 生长因子E.细胞因子8、在重组DNA技术中，目的DNA与载体在体外连接的过程称为DNA的体外重组。
体外重组的方法不包括：A.加人工接头连接B.加同聚物尾连接C.互补黏端连接D.连接E.平移连接9、重组DNA的宿主细胞有原核细胞和真核细胞。
用于制备基因文库的宿主细胞主要是A.哺乳动物细胞B.大肠杆菌C.酵母D.枯草杆菌E.昆虫细胞10、哪种方法要求宿主细胞必须是感受态细胞？A.CaCl2法B.病毒感染法C.脂质体载体法D.显微注射法E.穿刺法11、蓝白筛选属于筛选重组DNA克隆方法的哪种？A.PCR分析B.插入失活分析C.核酸分子杂交分析D.酶切分析E.免疫分析12、重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A. T病毒基因组DNA的一部分B. 细菌染色体外的独立遗传单位C. 细菌染色体DNA的一部分D. 真核细胞染色体外的独立遗传单位E. 真核细胞染色体DNA的一部分13、某限制性内切核酸酶切割5’…GGGGGG▼AATTCC…3’序列后产生A. 5’突出末端B. 5’或3’突出末端C. 5’及3’突出末端D. 3’突出末端E. 平末端14、“克隆”某一目的DNA的过程不包括A. 重组DNA分子导人受体细胞B. 外源基因与载体的拼接C. 基因载体的选择与构建D. 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞E. 表达目的基因编码的蛋白质15、关于基因文库及其构建，以下叙述错误的是A.基因文库包括基因组文库和cDNA文库B.构建基因组文库常用的克隆载体是λ噬菌体、粘粒和酵母人工染色体系统C.目前构建的cDNA文库可以包含一种生物基因组所含的全部编码序列D.真核生物cDNA文库中的目的基因可以在原核细胞内表达活性产物E.构建cDNA文库要用到逆转录酶多选：1、用目的DNA和质粒制备重组DNA，下列哪些工具酶是必需的？A.DNA聚合酶B.核酸酶C.连接酶D.限制酶E.修饰酶2、影响限制酶切割效率的因素有那些？A.底物纯度B.底物甲基化程度C.底物结构D.反应温度E.反应体系组成3、哪些因素会降低限制酶的特异性?A.高浓度限制酶B.高浓度甘油C.低离子强度D.用Mn2+取代Mg2+E.高pH值4、限制酶的应用非常广泛，包括:A.DNA重组B.质粒改造C. DNA杂交D.探针制备E.基因定位5、关于重组DNA技术使用的DNA 连接酶A.用以将目的DNA与载体共价连接成重组DNAB.包括大肠杆菌DNA连接酶和T4 DNA连接酶C.大肠杆菌DNA连接酶需要NAD，而T4 DNA连接酶需要ATPD.大肠杆菌DNA连接酶用于连接切口或互补黏端E.T4 DNA连接酶用于连接互补黏端或平端6、重组DNA技术常用的DNA聚合酶有A.DNA聚合酶ⅠB. Klenow片段C. Taq DNA聚合酶D. 逆转录酶E. T4 DNA聚合酶7、载体分为克隆载体和表达载体两类。
基因工程考试 质粒的分子生物学与质粒载体
第二章 DNA重组克隆的单元操作练习题质粒的分子生物学与质粒载体（练习题）一、填空题1. 基因工程中有3 种主要类型的载体：、、。
2. 由于不同构型的DNA 插入EB 的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同，SC DNA 的泳动速度，OC DNA 泳动速度，L DNA 居中，通过凝胶电泳和EB 染色的方法可将不同构型的DNA 分别开来。
3. 质粒的复制像染色体的复制一样，是从特定的起始点开始的。
然而，质粒的复制可以是向的、或是向的。
在杂种质粒中，每个复制子斑点都可以有效地加以使用。
但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地位。
并认为：当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后，在正常情况下的复制起点可能被关闭。
4. 就克隆一个基因(DNA 片段) 来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：、、。
另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
5. 如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中，则属于群，这是因为它们的所致。
6. 质粒拷贝数是指细胞中。
7. 复制子由三部分组成：(1) (2) (3) 。
8. 酵母的2μm 质粒有，可以配对形成哑铃结构。
9. 一个带有质粒的细菌在有EB 的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫。
10. pBR322 是一种改造型的质粒，它的复制子来源于，它的四环素抗性基因来自于，它的氨苄青霉素抗性基因来自于。
11. 粒的消失同染色体基因的突变是不同的，前者不能恢复，后者可以通过恢复该基因的性状。
12. ColEl 质粒复制的起始需要三种酶，即、和。
13. YAC 的最大容载能力是，BAC 载体的最大容载能力是。
14. pSCl01 是一种复制的质粒。
15. 把那些没有可检测表型的质粒称为。
16. 转座子主要由下列部分组成：(1) (2) (3) 。
17. pUCl8 质粒是目前使用较为广泛的载体。
pUC 系列的载体是通过和两种质粒改造而来。
分子实验复习题
简述基因的克隆和表达的步骤1）获得目的基因和质粒载体；2）形成重组质粒；3）制备感受态细胞，用重组质粒转化大肠杆菌细胞；4）培养大肠杆菌，让重组质粒及外源目的基因形成大量拷贝；5）筛选含重组质粒的大肠杆菌细胞，进行检查或鉴定；6）表达目的蛋白。
实验一：质粒DNA的提取及鉴定1.分子生物学实验常用载体有哪些?它们的特点是什么?常用载体：大肠杆菌中的质粒、λ噬菌体、M13噬菌体、噬菌粒、酵母人工染色体载体、动植物病毒载体。
特点：具有复制子（一段具特殊结构的DNA序列，使与之结合的外源基因复制）、可检测的遗传表型、限制性内切酶单一识别位点（便于外源基因插入）、适合的拷贝数（有利于载体制备；使细胞中克隆基因的剂量增加）2.分离基因组DNA和质粒DNA有哪些异同点？相同：提取的步骤基本上都属DNA的提取步骤，包括细胞裂解，DNA释放，纯化，最后沉淀溶解。
不同：质粒提取过程中，有一个DNA变性、复性的过程，这个与基因组提取完全不同，这是利用质粒是以超螺旋结构存在于大肠杆菌中的特殊状态，分离纯化质粒时总是会利用这个特点来分离基因组DNA与质粒DNA。
3.核酸分离过程中，酚、氯仿、异戊醇的作用是什么？1）酚、氯仿作用是变性蛋白质。
酞与氯仿是非极性分子，水是极性分子，当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时，蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去，使蛋白失去水合状态而变性。
经过离心，变性蛋白质的密度比水的密度为大，因而与水相分离，沉淀在水相下面，从而与溶解在水相中的DNA分开。
而酚与氯仿有机溶剂比重更大，保留在最下层。
作为表面变性的酚与氯仿，在去除蛋白质的作用中，各有利弊，酚的变性作用大，但酚与水相有一定程度的互溶，大约10％～15％的水溶解在酚相中，因而损失了这部分水相中的DNA，而氯仿的变性作用不如酚效果好，但氯仿与水不相混溶，不会带走DNA。
所以在抽提过程中，混合使用酚与氯仿效果最好。
经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚，由于酚与氯仿是互溶的，可用氯仿第二次变性蛋白质，此时一起将酚带走。
分子生物学与检验技术复习题
分子生物学与检验技术复习题2套复习题（一）一、单选题1、分子生物学检验技术发展的第二个阶段是A.DNA测序技术B.生物芯片技术C.聚合酶链反应D.分子杂交技术2、下列不属于RNA水解产物的是A.胞嘧啶B.腺嘌呤C.胸腺嘧啶D.尿嘧啶3、不属于细胞增殖的物质准备和积累阶段的是A.G1期B.S期C.G2期D.M期4、下列哪种说法是错误的A.用于核酸提取的痰液标本应加入1mol/L NaOH初步处理B.用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C.用于RNA检测的样本短期可保存在-20℃D.如使用血清标本进行检测应尽快分离血清5、聚合酶链反应PCR的延伸温度是A.50℃B.60℃C.72℃D.95℃6、下列关于Taq DNA聚合酶的描述，错误的是A.使DNA链沿5´→3´方向延伸B.不具有3´→5´外切酶活性C.具有校正功能，能够修复错配的碱基D.催化形成3´, 5´-磷酸二酯键7、在PCR反应中，可以引起非靶序列扩增的是A.延伸时间过长B.引物加量过多C.缓冲液中镁离子含量过高D.温度过高8、关于SYBR Green I的描述，不正确的是A.荧光染料的成本低B.不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记C.操作比较简单D.特异性强9、DNA测序中，核酸分子储存和传递遗传信息是通过A.核苷的结构B.磷酸二酯键C.碱基顺序D.核苷酸的结构10、DNA探针的长度通常为A.1000-2000bpB.100-400bpC.<100bpD.400-500bp11、将待测DNA转移到硝酸纤维素膜上，再与探针进行杂交的技术是A.杂交淋巴瘤技术B.Western印迹杂交C.Southern印迹杂交D.Northern印迹杂交12、质粒的分子结构是A.线状双链DNA分子B.线状单链DNA分子C.环状双链DNA分子D.环状单链DNA分子13、以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称为A.转化B.转染C.感染D.转位14、蛋白质分离和提取的步骤可分为A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定15、用于蛋白质检测的标本长期保存于A.-20℃B.4℃C.-70℃D.室温16、用于检测HPV的分子生物学检测方法中，哪个具有高特异、高敏感、高通量、操作简便快速的特点A.核酸杂交技术B.流式荧光技术C.荧光定量PCRD.基因芯片技术17、检测TB的实验室技术中，哪种被认为是目前最先进的一种检测TB及其耐药性的方法A.PCR技术B.PCR-RFLP技术C.全自动结核杆菌检测技术 E.荧光定量PCR技术18、用于非结核杆菌PCR检测的痰液标本应置于A.1mol/L HCLB.生理盐水C.1mol/L NaOHD.变性剂19、临床检验标本可以短期保存于4℃的是A.DNAB.RNAC.蛋白质D.核酸20、核酸的最大吸收峰在A.260nmB.280nmC.320nmD.350nm21、移码突变导致蛋白质功能的改变属于A.点突变B.插入/缺失突变C.动态突变D.错义突变E.重复序列22、错义突变和无义突变属于A.点突变B.插入/缺失突变C.动态突变D.错义突变E.重复序列23、短串联重复序列的拷贝数发生扩增而产生的突变属于A.点突变B.插入/缺失突变C.动态突变D.错义突变E.重复序列24、杂交反应效率高，非特异性杂交少的探针是A.DNA探针B.RNA探针C.寡核苷酸探针D.杂交探针E.PCR探针25、最常用的探针是A.DNA探针B.RNA探针C.寡核苷酸探针D.杂交探针E.PCR探针26、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列的探针是A.DNA探针B.RNA探针C.寡核苷酸探针D.杂交探针E.PCR探针27、DNA双螺旋之间氢键断裂，双螺旋解开，DNA分子成为单链，这一过程称A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期28、在第一次变性时应给予足够时间以便模板彻底变性，这一过程是A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期29、引物与互补的单链DNA模板结合，形成杂交链的过程是A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期30、哪一过程的反应时间取决于扩增产物长度A.预变性B.变性C.延伸D.退火E.平台期31、下列不属于L-α-氨基酸的是A.甘氨酸B.亮氨酸C.苏氨酸D.甲硫氨酸E.异亮氨酸32、下列密码子中，终止密码子是A.UUAB.UGAC.UGUD.UAUE.UCG33、下列有关真核生物结构基因的说法不正确的是A.结构基因大都为断裂基因B.产物多为单顺反子RNAC.含有大量的重复序列D.编码基因比非编码基因多34、在DNA重组技术中,最常用到的并存在于原核生物中的载体是A.YACB.人工染色体C.质粒D.噬菌体E.DNA35、下列说法错误的是A.用于检测的样本短期可保存在-20℃.B.用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C.如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D.外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E.用于核酸提取的痰液标本应加入lmol/L NaOH初步处理36、影响DNA分离纯化效果的是A.材料新鲜，低温保存B.加核酸酶抑制剂C.剧烈振荡D.除净蛋白质E.除净多糖37、下列哪种方法不早根据蛋白分子大小进行蛋白分离纯化的A.透析B.超滤C.凝胶过滤层析D.离子交换层析E.离心38、不能作为PCR模板的是A.DNAB.RNAC.质粒和DNAD.蛋白质E.cDNA39、PCR中的脱氧核苷三磷酸不包括A.dATPB.dTTPC.dCTPD.dGTPE.dUTP40、Southern杂交通常是指A.DNA和DNA杂交B.DNA和RNA杂交C.RNA和RNA杂交D.蛋白质和蛋白质杂交E.DNA和蛋白质杂交41、目前临床分子生物学检验的标志物主要以（）为主A.核酸B.蛋白质C.代谢产物D.PCRE.基因组42、原核生物基因组中没有A.内含子B.外显子C.转录因子D.插入序列E.操纵子43、质粒的主要成分是A.多糖B.蛋白质C.氨基酸衍生物D.DNA分子E.脂类44、下列说法错误的是A.用于检测的样本短期可保存在-20℃B.用于PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C.如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D.外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E.用于核酸提取的痰液标本应加入lmol/L NaOH初步处理45、DNA链的Tm值主要取决于核酸分子的A.A-C含量B.A-T含量C.A-G含量D.G-C含量E.T-G含量46、下列不是影响DNA复性因素的是A.DNA浓度B.DNA的分子量C.温度D.碱基组成E.DNA的来源47、PCR反应体系的描述错误的是A.模板B.一条引物C.dNTPD.DNA聚合酶E.缓冲液48、有关PCR的描述下列不正确的是A.是一种酶促反应B.引物决定了扩增的特异性C.由变性、退火、延伸组成一个循环D.循环次数越多产物量就越大，可增加循环次数提高产物量E.扩增的对象是DNA序列49、关于定量PCR的描述，不正确的是A.可以定量或半定量PCR产物的方法B.定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C.水解探针技术中TaqMan探针的位置位于两条引物之间D.分子信标在自由状态下为发夹结构，荧光信号极低E.定量PCR在封闭状态下进行，有效避免了产物的实验室污染50、以下为荧光染料技术的优点，不正确的是A.适合任何一个反应体系B.荧光信号量与PCR反应产物量成正比，可以实时监测C.荧光信号的检测在每一次循环延伸后，简单方便D.不需要进行凝胶分离等二次处理PCR产物，避免污染E.特异性高51、Sanger双脱氧链终止法使用的链终止物是A.NTPB.dNTPC.ddNTPD.a-32P-dNTPE.a-35S-dNTP52、关于Westerm印迹以下说法正确的是A.需要对靶蛋白进行放射性核素标记B.缺点是不能对转移到固相膜上的蛋白质进行连续分析C.检测的灵敏性为0.1-1ngD.是由凝胶电泳和固相免疫组成E.固相膜保存时间短53、目前已知感染人类最小的DNA病毒是A.HIVB.HPVC.HBVD.HAVE.HCV54、下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A.可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B.可以实现对感染细菌的广谱快速检测C.可以对细菌进行基因分型D.可以检测病原菌耐药基因E.其检验技术都是PCR及其衍生技术55、不符合分子诊断特点的是A.灵敏度高B.特异性强C.样品获取便利D.易于早期诊断E.检测对象为自体基因56、下列因素中不会引起染色体畸变的是A.电离辐射B.妊娠反应C.环磷酰胺D.巨细胞病毒E.母亲年龄57、以下关于mtDNA的描述不正确的是A.mtDNA为闭合双链环状分子B.mtDNA非编码序列少,只占mtDNA6%C.mtDNA 重链(H)富含胞嘧啶,轻链(L)富含鸟嘌呤D.mtDNA呈母系遗传规律E.mtDNA在具有自主复制、转录功能58、以下不是原癌基因的特点的是A.广泛存在于生物界，是细胞生长必不可少的B.在进化过程中，基因序列呈高度保守性C.通过表达产物DNA来实现功能D.在某些因素的作用下会形成能够致瘤的癌基因E.对正常细胞不仅无害，而且是细胞发育、组织再生、创伤愈合等所必需59、CYP450与一氧化碳结合物的最大吸收峰所在波长是A.350nmB.450nmC.280nmD.460nmE.550nm60、在器官移植中HLA配型最重要的位点是A.HLA-DRB.HLA-AC.HLA-BD.HLA-DPE.HLA-C二、判断题1、分子生物学检测的靶标是蛋白质。
生物技术复习题(附参考答案)
生物技术复习题（附参考答案）一、单选题（共40题，每题1分，共40分）1、在DNA生物合成中，具有催化RNA指导的DNA聚合反应、RNA水解反应及DNA指导的DNA聚合反应三种功能的酶是A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、逆转录酶D、DNA水解酶正确答案：C2、有关辅酶的叙述正确的是( )A、为一种高分子化合物B、一种辅酶只能与一种酶蛋白结合C、不参与质子、电子及化学基团转移D、可决定酶的特异性E、与酶蛋白结合比较疏松正确答案：E3、用含Oligo-dT配基的纤维素柱层析提纯真核组织mRNA是非常有效的方法，这是因为mRNA含有A、m7Gppp的结构B、CCA-OH的结构C、poly(A)的结构D、poly(T)结构正确答案：C4、反竞争性抑制作用的描述是A、抑制剂既与酶结合又与酶-底物复合物相结合B、抑制剂使酶促反应的K m值升高，V max降低C、抑制剂使酶促反应的K m值降低，V max增高D、抑制剂只与酶-底物复合物相结合正确答案：D5、细菌芽孢释放的时期（）A、延滞期B、稳定期C、衰亡期D、指数期正确答案：C6、位于糖酵解、糖异生、磷酸戊糖途径、糖原合成和糖原分解各条代谢途径交汇点上的化合物是A、1-磷酸葡萄糖B、1，6-二磷酸果糖C、6-磷酸果糖D、6-磷酸葡萄糖正确答案：D7、胞质中的NADH可以进行下列哪项A、直接进入线粒体氧化B、将H交给FAD，生成FADH 2后进入线粒体氧化C、还原磷酸二羟丙酮后所生成的还原产物可进入线粒体D、由肉碱协助进入线粒体进一步氧化正确答案：C8、采用温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对物体本身基本无害的措施叫（）A、化疗B、消毒C、防腐D、灭菌正确答案：B9、氯仿在植物DNA提取过程中的作用,表述正确的是( )。
A、氯仿使蛋白质变性B、氯仿降低产生气泡C、氯仿除去多糖D、氯仿提取DNA正确答案：A10、细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（）A、接种针、手、高压锅B、高压锅、手、接种针C、接种针、手、培养基D、培养基、手、接种针正确答案：D11、DNA拓扑异构酶的作用是A、将DNA双螺旋解链B、使DNA解链旋转时不致打结C、稳定解开的双螺旋D、将复制中不连续的两段链连接起来正确答案：B12、配制1000mL的固体培养基需加琼脂为（）A、2～7gB、50gC、10gD、15～20g正确答案：D13、仅适用于澄清液体和气体的灭菌方法是（）A、化学药品灭菌法B、湿热灭菌法C、干热灭菌法D、过滤除菌法正确答案：D14、尿素的合成过程称为A、嘌呤核苷酸循环B、柠檬酸循环C、鸟氨酸循环D、核蛋白体循环正确答案：C15、干热法常用于（）灭菌。
《基因工程》各章内容及参考答案(42页).docx
复习题1 （包括分子生物学基础知识）（请各位同学将所有题目翻译成英文后再做!）一、解释下列名词1.Gene manipulation2.Promotor3.Cloning:4.Subcloning二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。
1.基因操作（Gene manipulation）的核心部分是基因克隆（gene cloning）, gene cloning的基本要点有（），（）和（）。
2.（）是遗传物质的基木单位，也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的，也可以是（）；可以是（），也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以（）3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的（）、（）、（）和（）等与基因研究相关的内容。
4.启动子（Promo（or）是指（）。
通常一个Gene是否表达，（）是关键的一步，是起决定作用的。
在转录过程屮，Promoter还是（）的结合位点。
5.原核生物的RNApolymerase主要由两部分组成：（）和（），其屮。
■因子并不参与RNA 的合成，它的作用主要是（）。
6.从（）到（）的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其屮可包括一个或者多个Gene。
7.转录终止子主要有两种，一种是（），另一种是（）。
8.重叠基因（Overlapping gene）是指（）,间隔基因（Interrupted gene）是指（）三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。
四、简答题：1.简述基因克隆的两个基本特征？参考答案：基因克隆的两个基本特征是一是强调外源核酸分子（一般情况下都是DNA）在不同宿主屮的繁殖，打破自然种的界限将来自于不相关物种的基因放入一个宿主中是基因操作的一个重要特征，基因操作的另一个重要特征是繁殖。
2.什么是gene cloning ?什么是亚克隆（subcloning） ?参考答案：基因克降：一定程度上等同于基因的分离，即从复杂的生物体基因组中，经过酶切，消化等步骤，分离带有目的基因的DNA片段。
基因工程期末复习题(含答案)
一、填空题1、基因文库的构建通常采用cDNA法和鸟枪法两种方法。
2、限制性内切酶识别序列的结构一般为具有 180度旋转对称的回文结构。
3、DNA连接酶主要有两种：T4噬菌体和大肠杆菌DAN连接酶。
4、根据质粒在宿主细胞中所含拷贝数的多少，可以把质粒分为两种类型：紧密型质粒和松弛型质粒。
5、原核受体细胞通常包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和蓝细菌。
6、原核生物或低等真核生物，将外源重组 DNA导入受体细胞的方法有借助生物载体的转化、转染、转导。
7、对细菌细胞进行转化的关键是细胞处于感受态。
8、基因工程是_____1970’____年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
9、部分酶切可采取的措施有：(1)减少酶量；(2)缩短反应时间；(3)增大反应体积等。
10、第一个分离的限制性内切核酸酶是EcoK；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是EcoRl。
11、DNA聚合酶 I的 Klenow大片段是用枯草杆菌蛋白酶切割 DNA聚合酶I得到的分子量为 76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)5'-3'合成酶的活性；(2)3'-5'外切核酸酶的活性。
12、为了防止 DNA的自身环化，可用_碱性磷酸酶__去双链 DNA_5’端的磷酸基团_。
13、测序酶是修饰了的 T7DNA聚合酶，它只有5'-3'合成酶的活性，而没有 3'-5'外切酶的活性。
14、切口移位(nick translation)法标记 DNA的基本原理在于利用 DNA聚合酶 I的5'一 3'合成酶和 5'一 3'合成酶的作用。
15、欲将某一具有突出单链末端的双链 DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用S1核酸酶切割或DNA聚合酶补平。
16、反转录酶除了催化 DNA的合成外，还具有核酸水解酶 H的作用，可以将DNA-RNA杂种双链中的 RNA水解掉。
17、 pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于pMBl，它的四环素抗性基因来自于pSCl01，18、pSCl01是一种严紧复制的质粒。
基因工程复习(含答案)
基因工程复习题一、名词解释: （10～20%）基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶得Star活性PCR引物PCR扩增平台期DNA芯片基因组文库cDNA文库转化限制与修饰系统原位杂交: 将细胞或组织得核酸固定保持在原来得位置上, 然后用探针与之杂交得一种核酸分子杂交技术, 该方法可较好地反映目得基因在细胞或组织中得分布与表达变化。
粘性末端: 双链DNA被限制性内切酶切割后, 形成得两条链错开几个碱基, 而不就是平齐得末端。
Northern印迹杂交: 将RNA进行变性电泳后, 再转移到固相支持物上与探针杂交得一种核酸分子杂交技术, 可用于检测目得基因得转录水平。
转位: 一个或一组基因片段从基因组得一个位置转移到另一个位置得现象。
基因工程: 在体外, 用酶学方法将各种来源得DNA与载体DNA连接成为重组DNA, 继而通过转化与筛选得到含有目得基因得宿主细胞, 最后进行扩增得到大量相同重组DNA分子得过程称为基因工程, 又称基因克隆、DNA克隆与重组DNA等。
目得基因：基因工程中, 那些被感兴趣得、被选作研究对象得基因就叫作目得基因。
连接器: 人工合成得一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段, 连接到目得基因得两端, 便于基因重组中得切割与连接。
转化: 受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变得过程。
停滞效应: PCR中后期, 随着目得DNA扩展产物逐渐积累, 酶得催化反应趋于饱与, DNA扩增产物得增加减慢, 进入相对稳定状态, 即为停滞效应, 又称平台期。
逆转录PCR: 以mRNA为原始模板进行得PCR反应。
PCR: 即聚合酶链式反应。
在模板, 引物, 4种dNTP与耐热DNA聚合酶存在得条件下, 特异性地扩增位于两段已知序列之间得DNA区段地酶促合成反应。
α-互补（α-complementation）：指在M13噬菌体DNA或PUC质粒序列中, 插入了lac 启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端145个氨基酸得核苷酸序列（又称α-肽）, 该序列不能产生有活性得β-半乳糖苷酶。
基因工程复习题及参考答案
【基因工程复习题及参考答案】绪论、基因工程基础一、填空题1. 基因工程是20 世纪70 年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
基因工程技术的诞生使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代，走向按人们的需要定向地改造和创造具有新的遗传性品种的时代。
2．Cohen 等在1973 年构建了第一个有功能的重组DNA 分子。
3．基因工程的两个基本特点是：（1）分子水平上的操作，（2）细胞水平上的表达。
4．基因克隆中三个基本要点是：克隆基因的类型、受体的选择和载体的选择。
5．克隆基因的主要目的有四个：①扩增DNA ；②获得基因产物；③研究基因的表达调控；④改造生物的遗传特性。
6．基因工程的基本程序包括DNA 制备、体外DNA 重组、遗传转化、转化细胞的筛选等方面。
7．基因工程又称重组DNA 技术/基因操作技术/基因克隆/分子克隆/遗传修饰/新遗传学。
8．克隆的进行依赖于各种参与DNA 新陈代谢的酶的使用，它们主要是从原核细胞中分离的。
限制性内切核酸酶能够将DNA 切割成特定大小的片段。
各种各样的DNA 聚合酶也是克隆所必需的，包括将RNA 转录出单链DNA 的反转录酶。
DNA 连接酶用于连接限制性片段。
克隆也需要来源于微生物的DNA 序列，包括用来运载被被克隆DNA 的克隆载体。
质粒载体来源于天然细菌质粒，通常携带有抗生素抗性基因。
其他载体来源于噬菌体，如λ噬菌体，它们经过修饰后可以运输外源DNA。
要想克隆一个感兴趣的真核生物的基因就必须先制作一个能与该基因杂交的探针。
人们已经发展了很多有效而精细的技术来分析克隆的DNA。
例如，极微量的DNA 片段可以通过PCR 得到扩增。
在感兴趣基因的启动子上连接，如CAT 或LacZ 之类的报告基因能够定量检测基因的活性。
二、选项题（单选或多选）1．因研究重组DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是（C ）。
A. Kornberg AB. Gilbert WC. Berg PD. McClintock2．第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是（A ）。
三四章分子克隆载体---题目_完_
第三章分子克隆载体（Molecular cloning vectors）一、名词解析二、填空题1.基因工程中有三种主要类型的载体、和。
2.就克隆一个基因来说，最简单的质粒载体也必须包括三个部分和、。
另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子质量。
3.如果两个质粒不能稳定的存在已同一个宿主细胞中，则属于群，这是因为他们的所致。
4.pBR 322是一种改造型质粒，它的复制子来源于，它的四环素抗性基因来源于，它的氨苄青霉素抗性基因来源于。
5.Puc18质粒是目前使用较为广泛的载体。
pUC系列的载体是通过和两种质粒改造而来。
它的复制子来源于，Amp抗性基因则是来源于。
6.当λ噬菌体DNA进入宿主细胞以后是靠宿主细胞的和形成封闭的环状的DNA分子的。
7.λ噬菌体是感染大肠杆菌的噬菌体。
8.α-互补是指 lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的阴性的突变体之间实现互补。
9.溶源化的频率和与有关。
10.噬菌体DNA通过其上唯一的整合位点与宿主染色体DNA上的唯一整合位点发生重组，从而整合到染色体中。
11.通过分析大量缺陷型λ噬菌体的 DNA ，发现 J 基因与 Cro 基因之间的 DNA 被或替换后，不影响λ噬菌体裂解生长。
12.对野生型大肠杆菌来说，向溶源和裂解方向的转变是由和决定的。
13.代表性λ噬菌体载体有和14.粘粒的组成包括________，________，________。
15.柯斯质粒(Cosmid)载体：一种由________和_______cos尾巴构建的复合载体。
16.pcos1 EMBL 是设计用于筛选体内重组的重组粘粒文库，通过同源重组过程达到筛选目标克隆的目的。
该载体的复制起点来源于__________质粒，含_________和_________抗性基因。
17.酵母人工染色体由酵母染色体的__________、__________和__________等功能性DNA序列组成。
噬菌体载体复习题及答案.docx
噬菌体载体复习题及答案一、填空题1. 噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：①它 在细菌中能够大量繁殖，这样有利于外源DNA 的扩增；②对某些噬菌 体(如入噬菌体)的遗传结构和功能研究的比较清楚，其大肠杆 宿主系统的遗传研究的比较详尽。
2. 入噬菌体基因组DNA 为48.5 kb,根据入噬菌体的包装能力，其 包装DNA 限度为37〜51 kb,为其本身基因组的75〜105 %。
将野生 型入噬菌体的基因组DNA 改造成插入型载体，如X ZAP II,该载体的 最小分子大小约为48.2kb,插入的外源片段最大不超过10. 2kb 。
构 建的入取代型载体XEMBL4,基因组大小为42. 36kb,填充DNA 片段为 14 kb,可容纳的外源DNA 分子最大为23 kb 。
3. 野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是没有合适的 限制性内切核酸酶识别位点和选 择标记。
4. 黏粒(cosmid)是质粒一噬菌体杂合载体，它的复制子来自质粒,大的克隆片段达到45 kb o 8.野生型的入噬菌体DNA 不宜作为基因工程载体，原因是：① 分子 质量大；②酶的多切点；③无选择标记。
cmCOS 位点序列来自入噬菌体，9. M13单链噬菌体的复制分为三个阶段：①SS-RF ；②RF-RF ；③ RF->SSo二、选择题（单选或多选）1.限制性内切核酸酶屁oR I在野生型的入噬菌体DNA中有5个切点，Hind III 有7 个切点，Banil I也有5个切点。
调整这些酶切位点的数量，主要通过（A ）。
A.体内突变B.完全酶切后连接C.部分酶切D.先用甲基化酶修饰后再酶切2.pBluescript M13载体在多克隆位点的两侧引入了T7和T3两个噬菌体的启动子，这样增加了该载体的功能，下述四种功能中哪一种是不正确的？（D ）A. 可以对插入到多克隆位点的外源片段进行转录分析B. 利用这两个启动子的通用引物进行PCR扩增C. 利用通用引物进行序列分析D.利用这两个启动子进行定点突变3. 下面关于细菌人工染色体（BAC）的特征描述，除了（C ）外都是正确的。
(完整word版)《基础分子生物学》复习题及参考答案
《基础分子生物学》复习题及参考答案一、填空题1.核酸分子中糖环与碱基之间为β型的糖苷键，核苷与核苷之间通过磷酸二酯键连接成多聚体。
2.DNA变性后，紫外吸收增加，粘度下降，浮力密度升高，生物活性丧失。
3.DNA双螺旋直径为 2 nm，每隔 3.4nm上升一圈，相当于10个碱基对。
4.Z-DNA为左手螺旋。
5.hn-RNA是真核生物mRNA的前体。
6.用Sanger的链末端终止法测定DNA一级结构时，链终止剂是双脱氧核苷三磷酸。
7.维系DNA双螺旋结构稳定的力主要有氢键和碱基堆积力。
8.在碱性条件下，核糖核酸比脱氧核糖核酸更容易降解，其原因是因为核糖核酸的每个核苷酸上-OH 的缘故。
9.DNA复制时，连续合成的链称为前导链；不连续合成的链称为随从链。
10.DNA合成的原料是四种脱氧核糖核苷三磷酸；复制中所需要的引物是RNA 。
11.DNA合成时，先由引物酶合成 RNA引物，再由 DNA聚合酶Ⅲ在其3′端合成DNA链，然后由 DNA聚合酶Ⅰ切除引物并填补空隙，最后由 DNA连接酶连接成完整的链。
12.细菌的DNA连接酶以NAD为能量来源，动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶以ATP为能源。
13.大肠杆菌RNA聚合酶的全酶由α2ββ′σ组成，其核心酶的组成为α2ββ′。
14.RNA转录过程中识别转录启动子的是σ因子，协助识别转录终止部位的是ρ因子。
15.真核细胞mRNA合成后的成熟过程包括戴帽、加尾、剪接、甲基化修饰。
16.遗传信息由RNA传递到 DNA 的过程称为逆转录，由逆转录酶催化。
17.反密码子第 1 位碱基和密码子第 3 碱基的配对允许有一定的摆动，称为变偶性。
18.在原核细胞翻译起始时，小亚基16SrRNA的3′端与mRNA5′端的 SD序列之间互补配对，确定读码框架，fMet-tRNA f占据核糖体的 P位点位置。
19.细胞内多肽链合成的方向是从 N 端到 C 端，而阅读mRNA的方向是从 5′端到3′端。
专题1 基因工程(一轮复习)
人干扰素基因、
用限制酶 切断DNA 种子贮藏蛋白基因、
植物抗病基因等。
三、基因工程的基本操作程序
（2）提取目的基因的途径 提取目的基因的途径
从供体细胞的DNA 中直接分离基因
方法：鸟枪法
人工合成基因（真核细胞）
反转录法 根据已知氨基酸 序列合成DNA
三、基因工程的基本操作程序
2、目的基因与运载体结合
思考
（１）质粒上会存在某些标记基因，标记基因有什么用途？ （２）要想将某个特定基因与质粒相连，需要用几种限制性内 切酶和几种DNA连接酶处理？
三、基因工程的基本操作程序
1、提取目的基因 (1)目的基因的概念：人们需要的特定基因。
目前被较广泛提取使用的 目的基因有：
苏云金杆菌抗虫基因、
取出DNA 人胰岛素基因、
G C T T A A
A
A T T C G
一、基因工程的基本工具
３、基因的运输工具——运载体
作用：将外源基因送入受体细胞。 能在宿主细胞内复制并稳定地保存 具备的条件
具有多个限制酶切点
具有某些标记基因
种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。
使用运载体的目的：用它作为运载工具，将目的基 因送到宿主细胞中去。
2.DNA连接酶 （1）种类：按来源可分为E·coliDNA连接酶和 T4DNA连接酶。 磷酸二酯键 （2）作用：在两个核苷酸之间形成____________以 两段DNA片段 连接______________。
一、基因工程的基本工具
限制酶切割ＤＮＡ分子示意图
思考
G A C T A T T C T A A G 要想获得某 个特定性状的基 因必须要用限制 酶切几个切口？ 可产生几个黏性 末端？ 两个切口，四 个黏性末端。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
质粒及质粒载体复习题及答案一、填空题1、基因工程中有三种主要类型的载体：质粒DNA、病毒DNA、质粒和病毒DNA杂合体。
2.由于不同构型的DNA插入EB的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同。
SC DNA的泳动速度最快，OC DNA泳动速度最慢，L DNA居中，通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。
3.就克隆一个基因（DNA片段）来说，最简单的质粒载体也必须包括三个部分：复制子（含有复制起点）、选择标记（主要是抗性基因）、克隆位点（便于外源DNA插入）。
另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子质量。
4.如果两个质粒不能稳定地共存于一个寄主细胞中，则属于同一个不亲和群，这是因为它们的复制机制相同所致。
5.质粒拷贝数是指细胞中质粒的份数同染色体的比值，即质粒/染色体。
6.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫质粒消除（或治愈）。
7.PBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于pMBl ,它的四环素抗性基因来自于pSClOl ,它的氨节青霉素抗性基因来自于PSE2124 （R质粒）。
8.YAC的最大容载能力是1000~2000kb , BAC载体的最大容载能力是300kb 。
9.把那些没有可检测表型的质粒称为隐蔽性质粒。
10.pUC18质粒是目前使用较为广泛的载体。
pUC系列的载体是通过PBR322和M13两种质粒改造而来。
它的复制子来自pMBl , Amp抗性基因则是来自转座子。
11・Ti质粒是自然界存在的植物基因工程的天然载体。
12.既能在夙coll又能在S・cerevisiae中自我复制的载体DNA称为穿梭载体。
二、选项题（单选或多选）1.下面关于松弛型质粒（relaxed plasmid）性质的描述中，（C ）是不正确的。
的制约, 而有较多的拷贝数A.质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制B.可以在氯霉素作用下进行扩增C.通常具有较少的拷贝数D.同严紧型质粒整合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子2.基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的，真正的天然质粒载体很少，在下列载体中只有（B ）被视为用作基因工程载体的天然质粒载体。
A. pBR322 B ・ pSClOl C ・ pUBllO D ・ pUC183. 下列哪种克隆载体对外源DNA 的容载量最大？ （ C ）A.质粒B.黏粒C.酵母人工染色体（YAC ）D.入噬菌体E. cDNA 表 达载体Col El 是惟一用作基因工程载体的自然质粒，这种质粒（ACD ）。
同一种质粒DNA,以三种不同的形式存在，电泳时它们的迁移速率 是（B）。
A. OC DNA>SC DNA>L DNA B ・ SC DNA>L DNA>0 CDNAC. L DNA>OC DNA>SCDNAD. SC DNA>OCDNA>LDNA关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确？（ B ）A.在不同的宿主中具有不同的复制机制B.在不同的宿主细胞中使 用不同的复制起点C.在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶D.在不同的宿主细胞中 具有不同的复制速率8. Ti 质粒（ACDE ）o 4. 松弛型质粒（D ）。
A. 在寄主细胞中拷贝数较多B.可用氯霉素扩增C. 一般没有选择标记D.上述A 、B 两项正确5. A. 是松弛复制型B.具有四环素抗性C. 能被氯霉素扩增D.能产生肠杆菌素6. 7.A.可从农杆菌转到植物细胞中B.作为双链DNA被转移C.在植物中导致肿瘤D.介导冠痿碱的合成，作为细菌的营养物和 植物的生长激素编码一种酶，将RNA 转化为DNA D.编码一种抗生素抗性的酶 编码一种可检测的酶，当基因内部的位点插入任何外源片段，ORF 遭到破坏时，产物即不能表达11. 一个质粒含有四环素抗性基因（力力）和基因，tetr 内有 一Hind III 位点，LacZ 中有一Eco RI位点。
如用这两种切割载体一并连接入相应的外源片段，则带有该重 组质粒的细胞将（D ）。
A.有四环素抗性，在X-gal 平板上呈现蓝色B.对四环素敏感，在 X-gal 平板上呈现蓝色E.1基因帮助转移F.在植物细胞中作为染色体外质 9. 下列哪些属于重组DNA 分子？（ C ）A. PCR 扩增的DNA 片段B.单链RNA 与单链DNA 杂交得到的产物C. 人基因组片段与质粒载体连接的产物D.存在于细菌细胞内的入 噬菌体染色体E.质粒经限制性内切核酸酶酶切后的产物10.屁必基因通常用于构建质粒载体的目的是什么？（ E ）A. 编码一种限制性内切核酸酶，在转化细胞时用于切割载体B. 编码蓝色色素产物，可用于示踪转化的细胞C. E.C.有四环素抗陛，在X-gal平板上呈现白色D.对四环素敏感，在X-gal平板上呈现白色12・质粒具备下列特征，因此适合作为克隆载体，除了（E ）。
A.赋予宿主细胞某种可检测的特性B.可通过一定的纯化步骤与宿主细胞基因组分离C.独立复制的能力D.可复制自身DNA以及插入的外源DNAE.甲基化防止宿主的限制性内切核酸酶对其降解13.下列对质粒特性描述中，不正确的是（AC ）。
A.既能以单链环状又能以双链环状的形式存在。
B.是独立于细染色体DNA以外的复制子C.没有线性的质粒DNAD.能够自我复制三、判断题1.迄今发现的质粒DNA都是环状的。
错误。
链霉菌属质粒为线状2.一个带有反向重复序列的双链DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。
正确3.能够在不同的宿主细胞中复制的质粒叫穿梭质粒。
正确4.任何一种质粒都可以用氯霉素扩增的方法，增加它的拷贝数。
错误，对氯霉素抗性质粒不能5.只有完整的复制子才能进行独立复制，一个失去了复制起点的复制子不能进行独立复制。
正确6.CsCl-EB密度梯度离心法纯化SC DNA的原理是根据EB可以较多地插入到SC DNA中，因而沉降速度较快。
错误，EB插入SCDNA量少，密度改变较小，离心后停留在较高部位密度小的地方7.质粒ColEl同pSClOl共整合后，得到的重组质粒PSC134,具有两任何细胞中都是可以使用的。
错误, 般使用ColEl的复制起始点个复制起始点，这两个起始点在8.所谓穿梭质粒载体是能够在两种以上的不同宿主细胞中复制的质粒，所用的复制起点不同。
正确9.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。
错误，主要是独立存在10. ColEl是惟一用作基因工程的自然质粒载体，它具有四环素抗性标记，因而很容易选择。
错误，其无四环素抗性基因11.某一染色体DNA经内切酶SaZI切割后，产生了若干个具有黏性末端的DNA片段，将这些片段分别在T4DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，这些片段都可以进行独立地复制。
错误，无复制子12.基因克隆中，低拷贝数的质粒载体是没有用的。
错误，对有剂量限制的基因克隆需用低拷贝质粒载体四.问答题1.YAC载体具有什么样的？为什么在克隆大片段时，YAC具有优越性？答：(1)功能性DNA序列:①来自于酵母的125bp DNA片段的着丝点序列(CEN4)。
②来自酵母的自主复制序列(ARS1),起始在酵母中的DNA复制。
③来自酵母的端粒序列，它是(5-TGTGGGTGTGGTG-3)的多拷贝重复, 它对染色体的复制和维持是必需的。
④在酵母中进行选择的标记基因，〃嘲5(尿囉喘生物合成基因)和咖(色氨酸合成基因)。
寄主是这些基因的营养缺陷性，只有带有这些基因的转化体才能在选择培养基上生活⑤具有细菌的复制起始点和选择标记基因。
YAC载体通常含有ColEl 的姑,和氨节青霉素抗性标记基因，可以在大肠杆菌中复制和繁殖，所以它也是一种穿梭载体。
(2)优越性：YAC能够容纳长达上千kb的外源DNA,这是质粒和黏粒办不到的。
大片段的插入更有可能包含完整的基因，在染色体步移中每次允许更大的步移距离，同时能够减少完整基因组文库所需的克隆数目。
2.列举质粒载体必须具有的基本条件。
答：(1)能独立复制；(2)具有选择标记；(3)有独特的酶切位点；(4)能转化但不扩散。
3.举例说明什么是穿梭载体？答：穿梭载体是含有细菌质粒和克隆的真核生物DNA片段的杂种质粒，有两个复制起点和能在两种不同细胞中进行选择的选择标记，所以，很容易从一宿主转到另一个宿主(来回穿梭)。
4.由于基因工程是人为改变遗传信息的操作，因此必须注意被操作基因的安全。
进行严格地监控对质粒载体的安全是十分重要的。
请问质粒载体的安全条件包括哪几个方面？答：(1)非传递性和不被带动转移。
对于多数基因克隆操作来说，都不希望载体能够进行自主传递，也不希望被带动转移。
(2)具有条件致死突变，如温度敏感质粒pJC307 (ColEl的衍生质粒)在哺乳动物正常体温下就丧失复制能力，可防止克隆基因扩散，只存在于限定的宿主细胞中。
(3)一般情况下不希望与宿主染色体发生重组，因为重组后有可能给宿主带来突变。
(4)有较小的宿主范围。
5.什么是YAC? YAC克隆载体常出现哪些问题？答：YAC即酵母人工染色体(Yeast Artificial Chromosome)的缩写，是人工构建的染色体样大容量克隆载体，基本组成有着丝点、能在细菌和酵母中进行复制的复制起始点和选择标记及端粒。
最大DNA克隆片段可达到2000kbo问题有：(1) YAC有嵌合现象，一个YAC中克隆的DNA片段可能来自两个或多个不同的染色体。
在基因组文库中，嵌合体占克隆总数的10%〜60%。
(2)YAC内部有重组现象，插入的DNA较大，序列发生重排，导致和原来染色体的序列不一致, 重组很难检出。
(3)YAC还有缺失现象，影响YAC文库的代表性。
(4)YAC结构和酵母天然染色体结构相似，使用常规方法不易将YAC和酵母天然染色体分开。
(5)构建好的YAC转化原生质化的酵母菌，转化效率低。
(6)建好库后保存方便，但要筛选某个基因时工作量大6.什么是BAC? BAC载体的组成与优缺点有哪些?①细菌人工染色体(BAC)是从大肠杆菌F因子改造构建而来的，能够携带大约300kb的DNA插入片段。
②载体具有F因子的复制起始点5iS),可使载体维持每个细胞一个拷贝的水平。
③载体包括有4个维持DNA复制和拷贝数目的基因，repE, parA, parB and parCo④具有一个抗生素选择标记基因，和lacZ，基因。
在lacZ'基因中组装有一多克隆位点，便于外源片段的插入和蓝白反应筛选克隆子。
⑤插入的DNA片段非常稳定，可以在大肠杆菌细胞中维持数百代, 而且不易发生重组和从寄主细胞中丢失。
⑥主要缺点是每个细胞中的拷贝数少（1~2个），使得分离和筛选较为困难。