多糖高级结构研究方法

1. 红外光谱法（IR）

红外光谱在多糖的结构分析上的应用主要是确定糖苷键的构型以及常规官能团。如：多糖化合物在890cm- 1处吸收是β-吡喃糖苷键特征峰，而820 cm- 1和850cm- 1则是α-吡喃糖苷键特征峰。

2.核磁共振法( NMR)

主要用于确定多糖结构中糖苷键的构型以及重复结构中单糖的数目。

3. 原子力显微镜（AFM）

该技术是在扫描隧道显微镜( STM )基础上发展起来的一种新颖的物质结构分析方法。其用很尖的探针扫描待测样品表面, 探针附在一根可活动的微悬臂的底端上, 当探针与样品接触时, 产生的微小作用力引起微悬臂的偏转, 通过光电检测系统对微悬臂的偏转进行检测和放大, 信号经过转换可得到样品的三维立体图像。

如：该技术研究了香菇多糖在不同浓度NaOH 溶液下构型和构象的转变。

4. X- 射线衍射法(XRD)

X - 射线衍射法可得到晶体的晶胞参数和晶格常数, 再加上立体化学方面的信息，包括键角、键长、构型角和计算机模拟, 就可以准确的确定多糖的构型。

5. 圆二色谱( CD)

从CD 可以知道绝对构型、构象等信息, 是研究多糖的三维结构的有效办法。中性多糖因缺少一般紫外区可提供信息的结构, 难以直接得到由CD 谱提供的结构信息，通常可进行衍生化或者将多糖与刚果红络合后测定。

6. 快原子轰击质谱( FAB - M S)

FAB- MS适合于分析极性大、难挥发、热不稳定的样品。在快原子轰击过程中, 样品通过正离子方式增加一个质子或阳离子, 或通过负离子方式失去一个质子产生准分子离子作为谱图的主要信号, 并给出反映连接顺序等信息的碎片。因此FAB- MS可用来测定寡糖链的分子量。通过FAB- MS形成[M - H ] - 离子是确定寡糖中单糖组成的一种方便的方法。

7. 气质联用(GC - M S)

气相色谱与质谱联用可以得到有关单糖残基类型、链的连接方式、糖的序列和糖环形式、聚合度等多种结构信息。气相色谱要求试样具有良好的挥发性和热

稳定性。多糖为大分子物质, 不能直接挥发, 不适用于气象色谱, 因而将大分子多糖降解为结构单糖或寡糖, 并且将其衍生成具有易挥发, 对热稳定的衍生物。一般衍生方法有三甲基硅烷化、三氟醋酸酯衍生化和糖醇醋酸酯衍生化等。