3.光学显微镜分类及观察方法
实验一 普通光学显微镜的使用和细菌形态观察
实验一普通光学显微镜的使用和细菌形态观察一、实验目的1.了解普通光学显微镜的构造和原理。
2.学习并掌握普通光学显微镜——油镜的使用方法。
3.利用油镜观察细菌的形态和构造。
二、实验原理微生物学研究用的普通光学显微镜通常有低倍物镜(16mm,10×)高倍物镜(4mm,40-45×)和油镜(1.8mm,95-100×)三种。
油镜常标有黑圈或红圈(或白圈),它是三者中放大倍数最大的。
使用油镜时,油镜与其他物镜的不同是载玻片与接物镜之间,不是隔一层空气,而是隔一层油质,称为油浸系。
这种油常选用香柏油,因香柏油的折射率n=1.52,与玻璃基本相同。
当光线通过载玻片后,可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。
如果玻片与物镜之间的介质为空气,则称为干燥系;当光线通过玻片后,受到折射发生散射现象,进入物镜的光线显然减少,这样视野的照明度就减低了(图Ⅰ-1)。
图Ⅰ-1油镜的原理图Ⅰ-2 镜口角利用油镜不但能增加照明度;更主要的是能增加数值口径。
因为显微镜的放大效能由其数值孔径决定的。
所谓数值孔径,即光线投射到物镜上的最大角度(称镜口角)的一半正弦,乘上玻片与物镜间介质折射率所得的乘积,可用下列公式表示:NA=nsinθ数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据;分辨力是指显微镜能辨别物体两点间最小距离的能力。
可分辨两点之间的最小距离=λ/2NA=λ/2nsinθ式中λ:所用光源波长;θ:为物镜镜口角的半数,取决于物镜的直径和工作距离。
n:玻片与物镜间介质的折射率,空气(n=1.0)、水(n=1.33)、香柏油(n=1.52)、玻璃(n=1.52)等。
nSinθ:数值孔径(NA),是决定物镜性能的最重要指标。
由上述可知若n值和α角越大则NA越大或光波波长越短,则显微镜的分辨力越大(图Ⅰ-2)。
三、实验器材1.仪器:显微镜。
2.材料:标本片(大肠杆菌、葡萄球菌、链球菌、八叠球菌、炭菌杆菌的芽孢和荚膜、细菌三形涂片),香柏油,二甲苯,擦镜纸等。
显微镜种类及使用方法
显微镜的种类及其使用方法一、光学显微镜光学显微镜是一种精密的光学仪器。
当前使用的显微镜由一套透镜配合,因而可选择不同的放大倍数对物体的细微结构进行放大观察。
普通光学显微镜通常能将物体放大1500~2000 倍(最大的分辨力为0.2μm)。
(一)光学显微镜的基本结构(附图1)1.光学部分包括目镜、物镜、聚光器和光源等。
(1)目镜通常由两组透镜组成,上端的一组又称为“接目镜”,下端的则称为“场镜”。
两者之间或在场镜的下方装有视场光阑(金属环状装置),经物镜放大后的中间像就落在视场光阑平面上,所以其上可加置目镜测微尺。
在目镜上方刻有放大倍数,如10×、20×等。
按照视场的大小,目镜可分为普通目镜和广角目镜。
有些显微镜的目镜上还附有视度调节机构,操作者可以对左右眼分别进行视度调整。
另有照相目镜(NFK)可用于拍摄。
(2)物镜由数组透镜组成,安装于转换器上,又称接物镜。
通常每台显微镜配备一套不同倍数的物镜,包括:①低倍物镜:指1×~6×;②中倍物镜:指6×~25×;③高倍物镜:指25×~63×;④油浸物镜:指90×~100×。
其中油浸物镜使用时需在物镜的下表面和盖玻片的上表面之间填充折射率为1.5 左右的液体(如香柏油等),它能显著地提高显微观察的分辨率。
其他物镜则直接使用。
观察过程中物镜的选择一般遵循由低到高的顺序,因为低倍镜的视野大,便于查找待检的具体部位。
显微镜的放大倍数,可粗略视为目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。
(3)聚光器由聚光透镜和虹彩光圈组成,位于在载物台下方。
聚光透镜的功能是将光线聚焦于视场范围内;透镜组下方的虹彩光圈可开大缩小,以控制聚光器的通光范围,调节光的强度,影响成像的分辨力和反差。
使用时应根据观察目的,配合光源强度加以调节,得到最佳成像效果。
(4)光源较早的普通光学显微镜借助镜座上的反光镜,将自然光或灯光反射到聚光器透镜的中央作为镜检光源。
显微镜的结构及使用方法
光学显微镜的结构及使用方法
一、光学显微镜的基本结构:
目镜—--—长的放大倍数小
镜头
1、光学结构物镜---—长的放大倍数大
反光镜(平面镜、凹面镜)-—--调节视野亮度粗、细准焦螺旋-——使镜筒上升或下降,调节物像清晰度。
2、机械结构转换器————更换不同放大倍数的物镜
光圈—-—-调节视野亮度(有大小之分)
二、光学显微镜的成像:
1、倒立的虚像。
2、放大倍数实质是指放大物体的长度或宽度。
3、放大倍数的计算:物镜放大倍数×目镜放大倍数。
三、光学显微镜的一般使用方法:
1、取镜与安放:
2、对光:
①转到转换器,使低倍物镜对准通光孔。
②选较大的光圈对准通光孔,左眼注视目镜,转动反光镜,直到看到白亮的视野。
3、低倍镜的观察:
①把所要观察的玻片标本放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。
②转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(此时实验者应该在侧面看物镜与玻片,避免相撞)。
③左眼看目镜内,同时反向缓缓转动粗准焦螺旋使镜筒上升,直到看到物像为止,再稍稍转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
4、高倍镜的观察:
①低倍镜换高倍镜的一般步骤是怎样的?
②低倍镜换上高倍镜后物镜与玻片的距离有何变化?视野的亮度、大小有何变化?观察到的细胞体积、细胞数目有何变化?
③如果在视野中发现有污点,则污点的位置可能在什么部件上?如何来判断污点所在的位置?。
光学显微镜的分类及应用领域
显微镜的主要分类、功能及应用领域一、显微镜的分类(一)、按使用目镜的数目可分为单目、双目和三目显微镜。
单目价格比较便宜,可以作为初学爱好者的选择,双目稍贵点,观察的时候两眼可以同时观察,观察得舒适些,三目又多了一目,它的作用主要是连接数码相机或电脑用,比较适合长时间工作的人员选用。
(二)、根据其用途以及应用范围分为生物显微镜、金相显微镜、体视显微镜等。
1、生物显微镜是最常见的一种显微镜,在很多实验室中都可以见到,主要是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。
生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察,可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程等。
在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛。
2、体视显微镜又称为实体显微镜、立体显微镜,解剖镜,是一种具有正像立体感的目视仪器,广泛的应用于生物学、医学、农林等。
它具有两个完整的光路,所以观察时物体呈现立体感。
主要用途有:①作为动物学、植物学、昆虫学、组织学、考古学等的研究和解剖工具。
②做纺织工业中原料及棉毛织物的检验。
③在电子工业,做晶体等装配工具。
④对各种材料气孔形状腐蚀情况等表面现象的检查。
⑤对文书纸币的真假判断。
⑥透镜、棱镜或其它透明物质的表面质量,以及精密刻度的质量检查等。
3、金相显微镜主要是用来鉴定和分析金属表面组织结构,是金属学研究金相的重要仪器,是工业部门鉴定产品质量的关键设备,专门用于观察金属和矿物等不透明物体金相组织的显微镜。
这些不透明物体无法在普通的透射光显微镜中观察,故金相和普通显微镜的主要差别在于前者以反射光,而后者以透射光照明。
不仅可以鉴别和分析各种金属、合金材料、非金属物质的组织结构及集成电路、微颗粒、线材、纤维、表面喷涂等的一些表面状况,金相显微镜还可以广泛地应用于电子、化工和仪器仪表行业观察不透明的物质和透明的物质。
光学显微镜
物镜数值孔径
三、显微镜的几个基本概念
显微镜的分辨率和放大倍数是两个互相联系的性能 参数;
选用物镜数值孔径不够大,分辨率不够高时,显微 镜不能分清物体的微细结构,此时即使过度增大放 大倍数,得到的图像只是一个轮廓虽大但不清晰的 图像,此时的放大率称为无效放大倍数;
如果分辨率很高而放大倍数不足时,如果图像太小 仍然不能被人眼清晰地观察。
(十)工作距离
工作距离也叫物距,即指物镜前透镜的表面到被 检物体之间的距离。 数值孔径大的高倍物镜,其工作距离小。
四、显微镜的结构
光学放大系统 目镜
物镜 光源 折光镜
组成
照明系统
聚光镜 滤光片
机械和支架系统
光学显微镜基本结构: 1. 照明灯(Lamp) 2. 聚光器(Condenser) 3. 载物台和切片夹 (Mechanical stage and specimen retainer) 4. 推进器(Mechanical stage adjustment knob) 5. 物镜(Objectives) 6. 粗细螺旋(Course and fine focus knob) 7. 目镜(Oculars) 8. 照相机等接口 (Connection to camera, etc.)
三、显微镜的几个基本概念
(一)光源:能发射光波的物体,物理学上指 能发出一定波长范围的电磁波(包括可见光 与紫外线、红外线和X光线等不可见光)的 物体。通常指能发出可见光的发光体
可见光频率范围:7.5×1014 - 3.9×1014 Hz。 真空中对应的波长范围:390nm – 760nm 相应光色:紫、蓝、青、绿、黄、橙、红
瞳距调节
屈光度调节
光学显微镜的使用及菌体观察
实验光学显微镜的使用及菌体观察一、实验原理1.普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。
当前使用的显微镜都是由一套透镜组成的。
普通光学显微镜通常能将物体放大 1500-2000倍。
分辨率(可辨出两点间最小距离),公式如下:D=0.5λ/n*sinα/2公式中:λ为所用光源波长;α为物镜镜口角;n为玻片与物镜间介质的折射率。
最短可见光450nm。
空气n=1.0;水n=1.33;香柏油n=1.52。
光学显微镜在最短波长450nm,用油镜其最大的分辨率为0.18μm。
肉眼正常德分辨率为0.25mm。
因此光学显微镜有效的最高总放大倍数能达到1000~1500倍。
根据上式,可通过:(1)减低波长;(2)增大折射率;(3)加大镜口角来提高分辨力。
紫外线作光源的显微镜和电子显微镜就是利用短光波来提高分辨力以检视较小的物体的。
数值孔径(numeri cal apeatu re简写为NA)是物镜的主要参数,是决定物镜性能的最重要指标。
数值孔径可用下式表示:N A= n* sinα/2镜口角α总是小于180°。
因为空气的折射率为1,所以干燥物镜的数值孔径总是小于1,一般为0.05~0.95;油浸物镜如用香柏油(折射率为1.515)浸没,则数值孔径最大可接近1.5。
虽然理论上数值孔径的极限等于所用浸没介质的折射率,但实际上从透镜的制造技术看,是不可能达到这一极限的。
通常在实用范围内,高级油浸物镜的最大数值孔径是1.4。
2. 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。
细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色,从而能更清楚地观察到其形态和结构。
常用碱性染料进行简单染色,因为在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞常带负电荷,而碱性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷,因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。
高一显微镜知识点归纳
高一显微镜知识点归纳在高一生物学学习中,显微镜是一项非常重要的工具。
它可以帮助我们观察微小的细胞结构和微生物,深入了解生物的奥秘。
为了帮助同学们更好地掌握显微镜的知识,下面将对高一显微镜知识点进行归纳。
一、显微镜的分类和组成显微镜可以分为光学显微镜和电子显微镜两大类。
光学显微镜又可分为简单显微镜和复合显微镜。
1. 简单显微镜:由一个凸透镜构成,只能放大物体一定倍数,并且不能调焦。
2. 复合显微镜:由物镜、目镜、光源和调焦机构等组成。
物镜可以放大物体20倍至100倍不等,目镜放大10倍。
最终显微镜的放大倍数为物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。
二、显微镜的使用方法1. 准备工作:清洁显微镜镜头与物镜,调节光源亮度。
2. 调焦:先用粗调焦轮将物镜放置在离玻璃片约1厘米处,然后通过转动细调焦轮逐渐拉近物镜与玻璃片的距离,直到物镜与玻璃片接触并调整清晰。
3. 观察物体:将待观察的物体放在玻璃片上,将玻璃片放在物镜下方,用夹子夹紧。
通过调节细焦距轮,使目标物体清晰可见。
4. 视野调整:当视野不够明亮或物体偏离中心时,可通过调整光源亮度和物镜位置来进行调整。
三、显微镜常见问题与解决方法1. 视野太暗:检查显微镜光源是否打开,并适当调节亮度。
也可能是目镜或物镜上有灰尘,需要及时清洁。
2. 物体模糊:先通过细焦距轮逐渐调整焦距,如果仍然模糊,可能是物镜或目镜不够清洁,需要擦拭。
3. 调焦困难:有时调焦轮过紧或过松会导致调焦困难,可以适当调整调焦轮松紧度。
四、显微镜的应用领域显微镜在科学研究、医学、生物学等领域有着广泛的应用。
以下是显微镜在不同领域的应用举例:1. 科学研究:通过显微镜的放大功能,科学家可以观察微小颗粒和细胞结构,研究物质的组成和属性。
2. 医学:显微镜在医学领域用于观察细菌、病毒和人体组织细胞,帮助医生进行疾病的诊断和治疗。
3. 生物学:显微镜是生物学研究中不可或缺的工具,可以观察植物和动物的细胞组织、细胞器和细胞分裂过程。
光学显微镜的结构及使用
光学显微镜的结构及使用光学显微镜(Optical Microscope)是一种通过光学方式来观察微观物体的仪器,它是一种广泛应用于生物学、药学、医学、材料科学等领域的重要工具。
光学显微镜的主要结构包括光源、凸透镜、物镜、目镜、载物台等组成部分。
在使用光学显微镜时,首先需要将待观察的样品放置在载物台上,调整光源和透镜的位置,通过调节目镜和物镜的距离和焦距,可以观察到样品的细微结构和细胞组织。
下面将详细介绍光学显微镜的结构及使用方法。
1.光源:光源是光学显微镜的一个重要组件,它用来提供光线,使样品被照亮。
常见的光源有白光源以及透射式或反射式的激光器光源。
2.凸透镜:凸透镜通常用于聚焦和放大光线。
它位于光源和样品之间,可以调整光线的聚焦度。
3.物镜:物镜是位于样品下方的镜头,它是放大样品的主要部分。
物镜通常有多个镜片组合而成,不同的物镜具有不同的放大倍数和焦距。
常用的物镜有4X、10X、40X、100X等。
4.目镜:目镜是位于物镜上方的镜头,用于放大和观察样品。
目镜通常有10X或者15X的放大倍数。
5.载物台:载物台是用来放置待观察的样品的平台。
它通常是一个可移动的平台,可以通过调节螺旋装置来调整样品的位置。
6.焦距调节装置:焦距调节装置用于调整物镜和目镜之间的距离,以便观察不同放大倍数下的样品。
使用光学显微镜的步骤如下:1.打开光源,调整适当的亮度,使样品得到充分的照明。
2.将待观察的样品放置在载物台上,固定好位置。
3.通过调节载物台的高度,使样品与物镜保持适当的距离,准备观察。
4.眼睛对准目镜,通过调节焦距和目镜的调焦装置,使样品清晰地显示在目镜中。
5.如果需要更高的放大倍率,可以通过旋转物镜转盘来切换不同的物镜。
注意,在切换物镜时需要调整焦距。
6.观察到感兴趣的结构后,可以通过移动载物台或者调节显微镜的焦距,来寻找更小的细节。
7.观察结束后,关闭光源,并将样品从载物台上移开。
1.在观察之前,确保透镜表面干净。
实验一 光学显微镜的使用与微生物观察
实验一光学显微镜的使用与微生物观察第一节普通光学显微镜的使用一、实验目的1、了解普通光学显微镜的基本构造和工作原理。
2、学习并掌握普通光学显微镜,重点是油镜的使用技术和维护知识。
3、在油镜下观察微生物的几种基本形态。
二、基本原理(一)普通光学显微镜的构造普通光学显微镜由机械系统和光学系统两部分组成(图1-1)。
1、机械系统机械系统包括镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调节器等。
(1)镜座:它是显微镜的基座,可使显微镜平稳地放置在平台上。
(2)镜臂:用以支持镜筒,也是移动显微镜时手握的部位。
(3)镜筒:它是连接接目镜(简称目镜)和接物镜(简称物镜)的金属圆筒。
镜筒上端插入目镜,下端与物镜转换器相接。
镜筒长度一般固定,通常是160mm。
有些显微镜的镜筒长度可以调节。
(4)物镜转换器:它是一个用于安装物镜的圆盘,位于镜筒下端,其上装有3~5个不同放大倍数的物镜。
为了使用方便,物镜一般按由低倍到高倍的顺序安装。
转动物镜转换器可以选用合适的物镜。
转换物镜时,必须用手旋转圆盘,切勿用手推动物镜,以免松脱物镜而招致损坏。
(5)载物台:载物台又称镜台,是放置标本的地方,呈方形或圆形。
载物台上装有压片夹,可以固定被检标本;有标本移动器,转动螺旋可以使标本前后和左右移动。
有些标本移动器上刻有标尺,可指示标本的位置,便于重复观察。
(6)调节器:调节器又称调焦装置,由粗调螺旋和细调螺旋组成,用于调节物镜与标本间的距离,使物像更清晰。
粗调螺旋转动一圈可使镜筒升降约10mm,细调螺旋转动一圈可使镜筒升降约0.1mm。
图1-1 普通光学显微镜的构造1. 镜座2. 镜臂3. 镜筒4. 转换器5. 载物台6. 压片夹7. 标本移动器8. 粗调螺旋9. 细调螺旋10. 目镜11. 物镜12. 虹彩光阑(光圈)13. 聚光器14. 反光镜2、光学系统光学系统包括目镜、物镜、聚光器、反光镜等。
(1)目镜:它的功能是把物镜放大的物像再次放大。
常用光学显微镜的种类
常用光学显微镜的种类光学显微镜是一种采用透镜系统及其组合来放大物体的显微镜,是现代科学研究和实验室工作不可或缺的重要仪器之一。
它可以通过放大物体的图像使我们更好地观察和研究细胞、微生物以及其他微小物体。
在这篇文章中,我们将介绍常用的光学显微镜种类。
1. 复合显微镜复合显微镜是最常见的显微镜之一。
它由两个透镜系统组成,可以在大约40倍至1000倍的范围内放大物体。
它通常用于生物学、医学、材料科学和环境科学中的实验室工作,适用于例如观察组织切片、细胞和细菌等的研究和分析。
复合显微镜的光源为钨丝灯或氙灯,也可以添加干涉仪等约束光路的配件。
2. 倒置显微镜倒置显微镜是一种可以将物体倒置立的显微镜。
它的透镜系统比复合显微镜更大,可以在多个方向上移动物镜和目镜以适应不同的放大倍数和视场。
它通常用于生物学中观察活细胞、培养组织和观察大量生物样品等。
倒置显微镜的光源有荧光、相衬、偏光、自动聚焦等多种可选配件。
3. 荧光显微镜荧光显微镜使用荧光染料来使样品在光线照射下发出荧光,以增加对细胞、分子、组织和细菌等的检测、鉴定和研究。
荧光显微镜的透镜系统、光源和荧光染料均有巨大的进步,使其广泛应用于医学、生物学和材料科学领域,同时也具有广阔的潜力用于生命科学、医学以及实用化学和材料研究中。
4. 相衬显微镜相衬显微镜是一种通过干涉测量和成像技术能够减少物体颜色和结构的显微镜。
在观察像过程中,它不需要任何染色或样品制备。
一般用于观察无色物体、细胞、胚胎和生物样品等。
它的视场范围相对较大,可以方便快速地移动镜头进行不同角度的观察和分析。
相衬显微镜的透镜组包括像差光学系统和衬比调节系统。
5. 偏光显微镜偏光显微镜通常用于观察单晶和其他材料的颜色和结构。
它通过加入两种不同成像方向的偏光滤镜来减少和取消材料颜色和结构的影响。
这种显微镜使用晶体样品,将偏振滤镜和各种衍射技术进行组合使用,可以帮助化学家们研究晶体相关的结构和成分。
总之,不同类型的光学显微镜均具有其使用篇幅,用途和应用场景。
实验3普通显微镜使用方法
实验三普通显微镜的构造与使用方法一、实验目的和要求:1. 熟悉两类显微镜的构造和原理2. 正确掌握两类显微镜的使用方法3. 牢记显微镜使用时的注意事项二、显微镜的种类及原理1.光学显微镜的类型光学显微镜主要有以下几种类型: 普通光学显微镜、体视显微镜、倒置显微镜、暗场显微镜、相衬显微镜、偏振光显微镜、微分干涉衬显微镜、荧光显微镜、万能衬显微镜、电视衬显微镜。
其中普通光学显微镜、体视显微镜是海洋生物学实验经常使用的显微镜。
2.普通显微镜的构造和使用方法普通显微镜的构造可分为光学系统和机械装置两部分(图1-1):1 )光学系统<1>. 物镜: 放大倍数越高越长。
接近标本, 因此也叫接物镜。
物镜安装在镜筒的下端。
它的作用是将标本作第一次放大, 然后再由目镜将第一次放大的像作第二次放大。
物镜是决定显微镜性能的最重要部件, 即决定分辨力的高低, 显微镜越好, 分辨力越高。
在使用高倍镜时, 由于工作距离短, 要特别注意不要使物镜直接碰到标本片, 以免损坏镜头。
<2>. 目镜: 安装在镜筒上端, 作用是把已经被物镜放大***的物象进一步放大。
它相当于一个放大镜, 并不增加显微镜的分辨力, 一般常用的目镜放大倍数为4—20 倍。
<3>. 聚光器:载物台中央, 通光孔下方的聚光镜和可变光阑合称聚光器, 聚光镜相当于一组凹透镜, 可汇集来自内置光源的光(或反光镜反射的光)。
可变光阑又叫光圈, 位于聚光镜下方, 由十几片金属薄片组成, 中心部分形成圆孔, 推动光圈的把手, 可以随意调节园孔的大小, 选择适当的光强度。
<4>.照明器:也称内置光源, 通常采用高亮度、高效率的卤素灯和非球面聚光镜。
<5>.反光镜:没有照明器的显微镜都有反光镜, 即安放在镜柱或镜座上的圆形平凹双面镜, 可作各方向转动, 对准光源(采自然光或灯光), 把光线反射到聚光器。
平面镜只具反光作用, 凹面兼具反光和聚光作用, 通常光线较弱时使用凹面镜, 强光时用平面镜。
七年级学显微镜知识点
七年级学显微镜知识点
显微镜是用来观察微小物体和生物的一种工具,在中学生物课程中,显微镜是必不可少的实验器材之一。
本文将详细介绍七年级学生在学习显微镜时需要掌握的知识点。
一、显微镜的种类
主要有两种:光学显微镜和电子显微镜。
光学显微镜可以分为单透镜显微镜和复合式显微镜,而电子显微镜包括透射电镜和扫描电镜。
二、光学显微镜的结构
光学显微镜由镜筒、倍率转换装置、台面、光源和镜片等部分组成。
镜筒包括物镜和目镜,倍率转换装置用于调整物镜和目镜的距离,台面放置待观察物体,光源发出光线照亮样品。
三、调整显微镜的方法
1. 调节物镜:首先选择低倍率物镜,将物镜转到下降架上,然后用调节旋钮将物镜调入适当位置。
2. 调节目镜:将目镜放置在顶部平台上,通过左右调节旋钮将目镜调入中心位置。
3. 调整焦距:将样品放置在台面上,通过调节物镜和目镜的距离来调整焦距,使样品清晰显示。
四、观察显微镜下的物体
首先选择低倍率镜头,然后将样品置于台面上,调整焦距使物体清晰可见。
注意调整光源的位置,避免光线直接照到样品上。
五、显微镜在生物学中的应用
在生物学研究中,显微镜是不可或缺的工具。
学生可以用显微镜观察细胞结构、细胞分裂、微生物、植物细胞等等。
利用显微镜,学生可以了解生物的微小结构,探索生命之谜。
总之,七年级学生应掌握显微镜的种类、结构、调整方法以及观察方法,并了解显微镜在生物学中的应用。
只有通过实践,善于运用显微镜,才能更好地理解生命的奥秘。
光学显微镜的常用分类及操作规程
光学显微镜的常用分类及操作规程光学显微镜的常用分类光学显微镜有多种分类方法:按使用目镜的数目可分为双目和单目显微镜;按图像是否有立体感可分为立体视觉和非立体视觉显微镜;按察看对像可分为生物和金相显微镜等;按光学原理可分为偏光、相衬和微差干涉对比显微镜等;按光源类型可分为一般光、荧光、紫外光、红外光和激光显微镜等;按接收器类型可分为目视、数码(摄像)显微镜等。
所以在选购显微镜前,确定要确定哪种显微镜适合本身。
常用的光学显微镜有生物显微镜、体视显微镜、金相显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、相衬显微镜、倒置显微镜等。
1、生物显微镜生物显微镜放大倍数一般在40X—2000X之间,光源为透射光。
生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、讨论所用于微生物、细胞、细菌、组织培育、悬浮体、沉淀物等的察看,同时可以察看其他透亮或者半透亮物体以及粉末、细小颗粒等物体。
可连续察看细胞、细菌等在培育液中繁殖分裂的过程等。
在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛,是食品厂、饮用水厂办QS、HACCP认证的必备检验设备。
2、体视显微镜体视显微镜又称实体显微镜或解剖镜,是一种具有正像立体感的目视仪器。
体视显微镜放大倍数在7X—45X左右,也可以放大到90X,180X,225X。
在生物、医学领域广泛用于切片操作和显微外科手术;在工业中用于微小零件和集成电路的观测、装配、检查等工作。
它利用双通道光路,双目镜筒中的左右两光束不是平行,而是具有确定的夹角——体视角(一般为12度——15度),为左右两眼供应一个具有立体感的图像。
它实质上是两个单镜筒显微镜并列放置,两个镜筒的光轴构成相当于人们用双目察看一个物体时所形成的视角,以此形成三维空间的立体视觉图像。
目前体视显微镜的光学结构是由一个共用的初级物镜,对物体成象后的两光束被两组中心物镜————变焦镜分开,并成一体视角再经各自的目镜成象,它的倍率变化是由更改中心镜组之间的距离而获得的,因此又称为连续变倍体视显微镜。
《光学显微镜的构造和使用》
《光学显微镜的构造和使用》张建尚/江苏一、显微镜的光学部分光学显微镜的光学部分由目镜、物镜、反光镜、聚光器等四部件组成。
1.目镜:装于镜筒上方,由两组透镜构成,其作用是把物镜所形成的倒立像再放大成为一个虚像。
目镜上刻有5×,8×,10×,15×,25×等符号,表示放大倍数。
我们所观察到的标本的物像,其放大倍数是物镜和目镜放大倍数的乘积。
2.物镜:目镜装在镜筒下端物镜转换器的孔中,一般的显微镜有2~4个物镜镜头,每个镜头都是由一系列的复式透镜组成的,其上也有放大倍数记号,有4×,10×,40×及100×。
标有4×及10×的是低倍镜,40×是高倍镜,100×是油镜。
低倍镜常用于搜索观察对象及观察标本全貌,高倍镜则用于观察标本某部分或较细微的结构,油镜常用于观察微生物或细胞的更细微的结构。
3.遮光器或聚光器:遮光器位于载物台(通光孔)下方,呈圆盘状,上有顺次大小不等的一圈圆孔,叫做光圈,能够控制光线进入的量。
光线过强时,使用较小的光圈,光线过弱时,使用较大的光圈。
现在的光学显微镜一般没有了遮光器,而是使用聚光器。
聚光器也是位于载物台(通光孔)的下方,由两块或数块镜片组成,它能将反光镜反射来的光线集中以射入物镜,有的聚光器可以升降,便于调光,集光器下有一可伸缩的园形光圈,叫虹彩光圈,可调集光器口径的大小和照射面,以调节光线强弱。
光线过强时,可缩小虹彩光圈。
4.反光镜:反光镜是显微镜观察时获得光源的装置,位于显微镜镜座中央,一面为平面镜,一面为凹面镜。
转动反光镜,可使外面光线通过聚光器照射到标本上。
光线强时用平面镜,光线弱时用凹面镜。
二、显微镜的放大原理光线→反光镜→遮光器→通光孔→标本(一定要透明)→物镜(第一次放大成倒立实像)→镜筒→目镜(再放大成虚像)→眼。
物镜的作用:使被观察物体成一个倒立的放大的实像。
八年级生物显微镜知识点
八年级生物显微镜知识点
随着生物学研究的深入,显微镜的重要性也越来越显著。
在生物实验室中,显微镜是必不可少的工具。
那么,本文将为大家介绍八年级生物显微镜知识点。
让我们一起来了解一下吧。
I. 显微镜的种类
在生物学实验中,常用的显微镜有光学显微镜、电子显微镜、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等。
本文重点介绍光学显微镜。
II. 光学显微镜结构
1. 目镜:位于显微镜的上部,用于放大显微镜底物的像;
2. 物镜:位于显微镜的下部,通过对显微镜底物进行放大以形成像;
3. 样品台:用于放置样品;
4. 光源:通过样品台,照亮样品;
5. 对焦轮:用于调节物镜与样品之间的距离。
III. 光学显微镜使用
使用光学显微镜需要经过以下步骤:
1. 将样品放在样品台上;
2. 调节光源,照亮样品;
3. 选择合适倍数的物镜;
4. 使用对焦轮将物镜与样品之间的距离调整到合适位置;
5. 通过目镜观察样品。
IV. 光学显微镜的配件
在进行光学显微镜实验时,还需要一些配件,如目镜清洁杆、差分干涉仪、热像仪等。
V. 光学显微镜的应用
生物学研究中,光学显微镜的应用非常广泛,例如:
1. 观察细胞和细胞器的结构与形态;
2. 研究昆虫、植物和动物的组织构造;
3. 研究微生物的形态、数量和分布。
总结:
如上述所述,八年级生物显微镜知识点是非常重要的。
光学显微镜的应用性广泛,其结构也比较简单,使用也比较方便。
介绍完毕,希望本文能对大家有所帮助。
显微镜的基本常识
光学显微镜基本知识一、光学显微镜的发展历史早在公元前一世纪,人们就已发现通过球形透明物体去观察微小物体时,可以使其放大成像。
后来逐渐对球形玻璃表面能使物体放大成像的规律有了认识。
1590年,荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的放大仪器。
1610年前后,意大利的伽利略和德国的开普勒在研究望远镜的同时,改变物镜和目镜之间的距离,得出合理的显微镜光路结构,当时的光学工匠遂纷纷从事显微镜的制造、推广和改进。
17世纪中叶,英国的胡克和荷兰的列文胡克,都对显微镜的发展作出了卓越的贡献。
1665年前后,胡克在显微镜中加入粗动和微动调焦机构、照明系统和承载标本片的工作台。
这些部件经过不断改进,成为现代显微镜的基本组成部分。
1673~1677年期间,列文胡克制成单组元放大镜式的高倍显微镜,其中九台保存至今。
胡克和列文胡克利用自制的显微镜,在动、植物机体微观结构的研究方面取得了杰出成就。
19世纪,高质量消色差浸液物镜的出现,使显微镜观察微细结构的能力大为提高。
1827年阿米奇第一个采用了浸液物镜。
19世纪70年代,德国人阿贝奠定了显微镜成像的古典理论基础。
这些都促进了显微镜制造和显微观察技术的迅速发展,并为19世纪后半叶包括科赫、巴斯德等在内的生物学家和医学家发现细菌和微生物提供了有力的工具。
在显微镜本身结构发展的同时,显微观察技术也在不断创新:1850年出现了偏光显微术;1893年出现了干涉显微术;1935年荷兰物理学家泽尔尼克创造了相衬显微术,他为此在1953年获得了诺贝尔物理学奖。
古典的光学显微镜只是光学元件和精密机械元件的组合,它以人眼作为接收器来观察放大的像。
后来在显微镜中加入了摄影装置,以感光胶片作为可以记录和存储的接收器。
现代又普遍采用光电元件、电视摄像管和电荷耦合器等作为显微镜的接收器,配以微型电子计算机后构成完整的图像信息采集和处理系统。
目前全世界最主要的显微镜厂家主要有:奥林巴斯、蔡司、徕卡、尼康。
光学显微镜(OM)法
光学显微镜(OM)法米尔科·登莱乌(Milko den Leeuw)1.分类光学显微镜(optical microscopy,OM)法是利用可见光的非侵入式成像技术。
2.说明OM是利用放大镜系统在可见光下以更高的放大倍率观看小面积艺术品或样品的技术。
基础光学显微镜的设计正在变得越来越复杂,因而分辨率和样品/背景对比度也在不断地提高。
可见光显微镜的类型包括体视显微镜和偏光显微镜。
现代显微镜是用电荷耦合器件(charge-coupled device,CCD)将图像显示在计算机屏幕上,并进行拍摄的。
也可使用两种不同波长的光(如可见光和紫外线),并用滤镜控制到达目镜或相机的光的波长,来增强对区域或样品的视觉检查效果。
3.应用OM常用于物体表面研究,以便直观地表征艺术品所用的技法材料、鲜明特征、历史干预以及现存状况。
OM非常适于研究龟裂纹,尤其是它可以鉴别自然龟裂与人工老化龟裂。
用偏光显微镜(polarized light microscopy,PLM)结合OM可识别颜料品种,但PLM需采集少量样品,做树脂包埋才能观察。
每种颜料粉都有独特的结构(通常称为颗粒)和颜色,在偏振光下观察时各有不同的表现。
可凭借这些特征表现来实现颜料粉的定性。
可将对象取样制成断面样品,用光学显微镜观察。
这种方法对层位检测非常有用,可揭示艺术家所用的材料和技法细节,包括颜料颗粒的类型(颜色、大小、形状、分布)、层内的变化(褪色)、污染物层、光油层、层间界面、底料层的类型以及画作的支撑体。
4.局限性尽管偏光显微镜法可识别不同种类的颜料粉,但要做出更准确的鉴定,还需要用至少一种其他的技术来支持,如拉曼光谱法、XRF、XRD或SEM-EDX。
虽然OM可对物体表面做非侵入式分析,但通过取样分析(侵入式分析)可获得更多的信息。
分析样品时,衍射(也称艾里环)可能造成图像细节损失,导致颜料颗粒之间的线条变得模糊。
5.补充技术共聚焦显微镜法、UV/VIS显微镜法断面微观分析、TOF-SIMS成像断面微观分析、化学染色法断面微观分析、昼光照相术、红外假彩色照相术、红外反射成像、扫描电子显微镜结合能量色散X射线光谱法,拉曼光谱法、紫外照相术、X射线照相术以及X射线荧光成像。
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体颗粒等
• 散射效应 • 暗背景,样品闪亮 • 分辨率降低,但优异的外部形态 • 如:细菌(密螺旋体),银增强等
集成调制反差 IMC –Integrated Modulation Contrast
三维立体图像 斜照明 狭缝照明 不需要特殊物镜 可用于塑料培养皿
用于体内标记的y (Sigma Aldrich) Alexa Fluor (Invitrogen) BODIPY (Invitrogen) Cy-dyes FluoProbes (Interchim) DyLight Fluor (Thermo Scientific, Pierce) DY and MegaStokes Dyes (Dyomics) MitoTracker Sulfo Cy dyes (CYANDYE, LLC)
– 明场 – 暗场 – IMC – 荧光
明场(Bright Field)
染色(明场观察) • 通过对样品染色给予反差 • 如:H&E染色, Gram染色等
暗场(Dark Field)
实际是暗场照明法。不直接观察到照明的光线,而观察到的是被 物体反射或散射的光线。
适用范围: 生物样品:微小水生生物、纤维、
显微镜观察方法
目录
• 光学显微镜分类 • 显微镜的观察方法
光学显微镜分类
• 宽场显微镜有正置和倒置显微 镜(这两者也合称复合式- Compound microscopes), 以及体视显微镜。
• 共聚焦(激光扫描)显微镜两 大类
正置显微镜 倒置显微镜 体视显微镜
复合式显微镜观察方法(反差增强方法)
通过聚光镜狭缝斜照明产生的立体 浮雕效果可以配合明场物镜使用
通过调节 IMC 模块可以优化 IMC 的观察效果
荧光(Fluorescence)
荧光发光原理
FITC
FITC / Rhod
Rhod
merged
Bovine endothelial cells
荧光样品染色标记类型
• 荧光染料的免疫细胞化学法 • 荧光探针 • 荧光蛋白基因转染
Emission spectra for the Alexa Fluor dye series (life technology)
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