亚甲蓝病毒灭活血浆的质量测定
亚甲蓝光化学病毒灭活血浆的质量控制与主要质量指标观察
全过程质量控制及产 品质量监测 ， 确保 了病毒灭括产 品临床输 血
安 全 质 量 。现 将 方 法 报 告 如 下 。 １ 资 料 与 方 法
查
Ｃ Ｄ —Ａ方 保 存 液 全 血 ６ｈ内 分 离 的 单 袋 滤 白 Ｐ
新鲜血浆外观检查 ， 应标签 完整 （ 血袋 上预先贴 有两条 相同
中外 医 学 研 究
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２１ ０ ０年 ６ 月 第 ８卷
第１ ２期
Ｃ Ｉ Ｅ ＥＡ Ｄ Ｆ Ｒ Ｉ Ｎ ＭＥ ＩＡ Ｅ Ｅ Ｒ Ｈ Ｈ Ｎ Ｓ Ｎ Ｏ Ｅ Ｇ Ｄ Ｃ ＬＲ Ｓ Ａ Ｃ
亚 甲蓝 光 化 学病 毒 灭 活 血 浆 的质 量控 制 与 主 要 质 量 指 标 观 察
种类 的局 限性 、 新病毒不断发现等 ， 窗 口期病毒 、 检测病毒 及 使 未
新病 毒 传 染 病 难 以检 出 ， 此 输 血 仍 有 引起 传 染 病 的 危 险 。 亚 甲 因 蓝 是 一 种 光 敏 剂 ， 以 与 病 毒 的 核 酸 以 及 病 毒 的 脂 质 包 膜 相 结 可
如下图 １
睫甲蓝 添加 元 件 止 流爽
１３ ５ 血 浆 袋 与 病 毒 灭 活 输 血 过 滤 器 无 菌 连 接 在 百 级 净 化 条 ． ． 件 按 无 菌 操 作 规 程 或 使 用 无 菌 接 驳 机 ， 保 管 腔 之 间 接 驳 过 程 确
无菌。 １３ ６ 献 血 码 标 签 转 贴 ．． 献 血 码 标 签 正 确 转 贴 是 至 关 重要 的 一
回收 率 均 大 于 ８ ％ ， ０ 结论
经 过 全 过 程 质 量 控 制 及 产 品质 量检 测 ， 鲜 血 浆 经病 毒 灭 活后 主 要 凝 血 因子 及 血 浆 蛋 白浓 度 含 量 虽均 有 新
研究亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆有效成分的影响
留取 血 浆 标 本 各 １ ｍＬ ， 置专用冰箱待测 。 １ ． ２ 试 剂 与 仪 器 费 森 尤 斯 传 统 血 袋 ； 中保 康 一 次 性 使 用 病
毒灭 活 装 置 配 套 用 输 血 过 滤 器 （ Ｚ Ｂ ＫＭＢ ０ ３ ） ； 中 保 康 医 用 血 浆 病毒灭活柜 （ Ｚ Ｂ Ｋ — Ｙ Ｂ Ｍ一 ０ １ ） ； 大 容量离 心机 （ 日立 Ｃ Ｒ ７ ） ； 无 菌
何 锐 洪
（ 广 东 中山市 中心血站 ， 广 东中山 ５ ２ ８ ４ ０ ３ ）
摘 要 ： 目的 探 讨 亚 甲蓝 光 化 学 法病 毒 灭 活 对血 浆 主要 质 量 指 标 的 影 响及 亚 甲蓝 残 留 情 况 。方 法 分 别 于病 毒 灭 活 前 和 病 毒 灭 活 后 无 菌 留取 血 浆标 本 ， 对 凝 血 因子 Ｖ 、 Ⅷ、 Ⅸ、 血 浆 纤 维 蛋 白原 （ Ｆ ｇ ） 、 血 浆 总蛋 白 （ Ｔ Ｐ ） 的含量及病毒灭活血浆 亚甲蓝残 留 量 进 行 测 定 。结 果 亚 甲蓝 光化 学 法 病毒 灭 活 对 血 浆 蛋 白浓 度 无 明显 影 响 ， 而 凝 血 因子 、 纤 维蛋 白原 含 量 均 有 一 定 程 度 的 降 低 ，
接驳 机 （ 费森尤斯 ） ； 半 自动 生 化 分 析 仪 （ 上 海科华 ） ； 总 蛋 白试
自动 生 化 仪 上 测 定 ， 亚 甲蓝 残 留 量 采 用 分 光 光 度 法 ， 严 格 按 仪 器 及 试 剂 说 明书 操 作 。 １ ． ４ 统计学处理 用配对 ｔ 检 验。
１ 材 料 与 方 法
１ ． ３ ． １ 新鲜血浆制备
三联采血袋采血后 ， ３ ｈ内 的 血 液 经 ３
８ பைடு நூலகம் ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ ， ５ ｍｉ ｎ两 次 离 心 ， 分离出新鲜血浆 。
亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆成分的影响
亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆成分的影响李雯瑛【摘要】目的探讨亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆成分的影响.方法 2013年4月到2014年3月的一年间,每月随机抽取新鲜血浆5袋,共计60袋作为研究对象,分别对亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒前后血浆中的凝血因子、血浆纤维蛋白原(Fg)、总蛋白(TP)含量进行测定,并检测亚甲蓝残留量.结果亚甲蓝光化学法病毒灭活前后,TP、Fg以及凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ等各项指标无显著变化,P ＞0.05,差异无统计学意义.病毒灭活血浆中亚甲蓝的残留量仅为0.06 ±0.01 μmol/L,其滤出率可以达到94.0％.结论在单袋血浆病毒灭活的过程中,亚甲蓝光化学法对血浆质量影响相对较小,是一种有效方法,实用性强,安全性好,值得临床推广应用.【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2016(023)001【总页数】3页(P95-97)【关键词】亚甲蓝光化学法;灭活血浆病毒;血浆成分;影响【作者】李雯瑛【作者单位】朝阳市中心血站成分科,辽宁朝阳122000【正文语种】中文临床血浆输注是特殊危急情况救治患者的重要方式之一，而在输全血或者血液成分的过程中，也有一定的病毒性疾病传播风险［1］。
虽然，在血液采集时，各采、供血机构的工作者会对采供血流程中各个环节进行积极的控制，但鉴于检测方法、病毒检测种类、检测试剂以及病毒感染血液后“窗口期”的存在、新病毒出现等多种因素的影响［2］，血浆输注时仍无法完全达到“零风险”的目标，因而，选择有效的病毒灭活方法，提高血浆使用的安全性，对于降低经血传播相关疾病的风险具有十分重要的意义。
随着近年来血液成分病毒灭活技术的发展，输血安全性得到了显著的提高。
亚甲蓝光化学法是用于单袋血浆病毒灭活的一种方法，因其具有安全、有效、实用的优点，在临床输血过程中逐渐被推广应用，但其仍存在缺少灭活后血浆的各项质控指标的标准和非脂包膜病毒的灭活等技术问题。
亚甲蓝残留量在病毒灭活血浆中的限量检测方法
亚甲蓝残留量在病毒灭活血浆中的限量检测方法黎添华;邢启明;劳丽嫦【摘要】目的：探讨亚甲蓝残留量在病毒灭活血浆中的限量检测方法。
方法留取病毒灭活血浆亚甲蓝滤过前和滤过后的样本各30份，每10份为一组，共分为三组：对照组，使用批号为2013001-A的病毒灭活过滤器；试验一组和试验二组，均使用批号为2013002-B的病毒灭活过滤器。
采用固相萃取小柱对血浆样品和标准品中的亚甲蓝进行萃取分离，结合分光光度法进行测定；通过已知浓度的标准品计算得到3组试验中每袋血浆的亚甲蓝释放量、残留量/率。
用双缩脲法测定总蛋白，计算总蛋白测定回收率；使用血凝仪测定VIII因子含量，计算VIII因子回收率。
结果三组亚甲蓝释放量指标比较，差异无统计学意义（P>0.05）。
与对照组比，试验一组和试验二组亚甲蓝残留量及亚甲蓝残留率增大，但差异无统计意义（P>0.05）。
与试验一组比较，试验二组亚甲蓝残留量及亚甲蓝残留率降低，差异显著（P<0.05）。
结论采用新型过滤器对血浆中亚甲蓝过滤两次，既能缩短过滤时间，提高工作效率，又能降低血浆中亚甲蓝残留率，保证血液产品质量，效果良好。
【期刊名称】《现代诊断与治疗》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】2页(P1464-1465)【关键词】亚甲蓝;残留量;病毒灭活;血浆;检测方法【作者】黎添华;邢启明;劳丽嫦【作者单位】广州市番禺区中心血站成分科，广东番禺 511400;广州市番禺区中心血站成分科，广东番禺 511400;广州市番禺区中心血站质控科，广东番禺511400【正文语种】中文【中图分类】R446.11MBP法血浆病毒灭活的重要质量控制标准［3，4］。
本研究结合采供血机构血液质量抽检及本单位的实际工作内容，建立常规工作、准确、稳定的检测方法和简便、有效的工作流程，为更好地控制机检测亚甲蓝水平在病毒灭活血浆中的限量提供依据。
报道如下。
1．1 材料取本站未经病毒灭活的混合血浆约150ml，以此来配制亚甲蓝标准品。
亚甲蓝病毒灭活血浆的质量测定
医用病毒灭活箱的应用
当前的医用病毒灭活箱是用于光照灭活 时的专用设备，它集光源、温控、机械 摆动等装置于一身，可以根据需要设定 照射强度、照射温度、照射时间和摆动 频率等诸多条件，使用方便。
光源选择：荧光灯
（1）单位时间内照射所释 放的热量较低； （2）达到相同灭活效果的 照射时间最短； （3）波长接600~700nm。
2004年，世界卫生组织将亚甲蓝光化学血浆病毒灭活技术列入 “人血 浆制品病毒灭活或去除指南”， 欧盟和英国也纳入“输血指南”。
2007年乌鲁木齐市血液中心引进该技术, 截至2014年底使用亚甲蓝光 化学病毒灭活血浆13万单位以上。
一次性使用血浆病毒灭活输血过滤器
Depasse 最早提出了 “过滤器的应用”， 极大地简化和改进了 MB-P 法的操作，为 MB-P 法由实验室走向临床迈出了重要一 步。
主要检测设备：固相萃取富集装置
19
亚甲蓝残留量检测方法
使用Waters Oasis小柱萃取血浆中的亚甲蓝
使用前的Waters小柱
1、用6ml甲醇活化Waters小柱 2、加入6ml供试血浆
亚甲蓝残留量检测方法
将萃取出的亚甲蓝洗脱后进行比色
Waters小柱萃取出 血浆中的亚甲蓝
3、萃取亚甲蓝 4、用30％甲醇6mL清洗 5、用含1％乙酸的甲醇溶液2ml洗脱 6、洗脱液离心（3500rpm/10min） 7、用含1％乙酸的甲醇溶液作试剂
辛酸处理法 低pH孵放法
以上方法多用于从原料血浆生产血 浆蛋白制品，均需要将大量的不同 人份的血浆混合处理，不但容易增 加某些不能被灭活病原体（如朊病 毒prion等）的扩散风险，且处理 难度大，费用高。
亚甲蓝光化学法能对单人份血 浆进行病毒灭活，适用于采供 血机构对临床用血浆的病毒灭 活处理，更适合于我国的国情 和临床实际应用。
亚甲蓝光化学病毒灭活法对血浆质量指标的影响
表 ２ 几 个 质 量 指 标 的 回收 率 （ ）
筛 查 尚不 能 完 全 杜 绝 经 输 血 传 播 病 毒 的风 险 。在 各 种 ｍ 液 成 分 中 ， 浆 是 临 床 需 求 量 大 且 病 毒 感 染 危 险 性 较 高 的 １种 制 血
品 。研 究 表 明 ， 甲蓝 光 化 学 病 毒 灭 活 法 能 有 效 灭 活 各 种 包 膜 亚
【 键 词 】 亚 甲蓝 光 化 学 ； 病 毒 灭 活 ； 血 浆 关
中 图 分类 号 ： ４ ６ １ Ｒ ４ ．
文 献 标 识 码 ： Ｂ
文 章编 号 ：６ ３４ ３ （ ０ ０ ０ ３ ００ １ ７ １ ０ ２ １ ） ４ ０ ９ — ２
血 浆 输 注 在 临 床 输 血 中 占有 重要 的地 位 ， 要 用 于 治疗 各 主 种凝 血 因子 缺 乏 引 起 的凝 血 功 能 障碍 。 由 于 血 浆 传 播 病 毒 的 危 险 比较 大 ， 因此 ， 用适 合 于 血 浆 病 毒 灭 活 的 方 法 处 理 临 床 输
材 料 与方 法
行 病 毒 灭 活 ， 接 制 备 成 新 鲜 冰 冻 血 浆 作 为 对 照 ， 备成 新 鲜 直 制 冰冻 血 浆 １ 后 ，７℃ 水 浴 融 化 ， 周 ３ 留样 检 测 ， 名 为 未 灭 活 新 命 鲜 冰冻 后 。另 一 份 进 行 血 浆 病 毒 灭 活 ， 活 操 作 前 留 样 检 测 ， 火 命 名 为 未 灭 活 新 鲜 冰 冻 前 ； 毒 灭 活 操 作 后 ， 冰 冻 前 留 样 检 病 于 测 ， 名为灭活后冰冻前 ； 备成 新鲜 冰冻血浆 ， 命 制 １周 后 ３ ℃ ７ 水浴融化 ， 留样 检测 ， 名 为 灭 活 新 鲜 冰 冻 后 。 从 采 血 到 血 浆 命
评估病毒灭活血浆两种制备方式的应用效果
评估病毒灭活血浆两种制备方式的应用效果【摘要】目的：分析病毒灭活血浆两种制备方式的应用效果。
方法：选取中心血站无偿献血的血液标本60份，时间为2020年4月-2022年4月，随机分为A组和B组，各30份。
分离新鲜血浆后制备病毒灭活血浆，A组采用亚甲蓝光化学法制备，B组采用巴斯德液态湿热法制备。
比较两组血浆病毒灭活后的各项指标水平。
结果：在指标水平上，A组总蛋白（59.75±3.47）g/L、纤维蛋白原（2.57±0.46）g/L、凝血因子Ⅷ（0.86±0.33）IU/ml，分别高于B组的（50.16±2.84）g/L、（1.93±0.32）g/L、（0.68±0.16）IU/ml，P＜0.05。
结论：在病毒灭活血浆的制备过程中，采用亚甲蓝光化学法制备，对血浆成分影响更小，应用效果更为理想。
【关键词】病毒灭活血浆；制备方法；应用效果在临床抢救及治疗当中，经常需要应用输血的方法，并且对于血液需求量也比较高。
为了保证输血的安全性，减少交叉感染的可能，应重点加强血液管理措施，提升血液筛查技术，降低感染性输血风险。
不过，为了进一步提高用血安全，减少输血参与分线，需要将血浆制品进行血液筛查之后，再利用灭菌工艺将参与病原体彻底杀灭，形成合格的病毒灭活血浆，满足安全输血的要求[1]。
目前常用的病毒灭活血浆制备方法，主要由于亚甲蓝光化学法、巴斯德液态湿热法等方法，对于血浆成分可能产生不同影响。
基于此，本文选取中心血站无偿献血的血液标本60份，时间为2020年4月-2022年4月，分析了病毒灭活血浆两种制备方式的应用效果。
1资料与方法1.1一般资料选取中心血站无偿献血的血液标本60份，时间为2020年4月-2022年4月，随机分为A组和B组，各30份。
所有血液标本均经初步检查合格，用于分离新鲜血浆后制备病毒灭活血浆。
1.2方法1.2.1仪器设备材料所用仪器设备和材料主要包括：凝血因子Ⅷ促凝活性检测试剂盒、总蛋白试剂盒、纤维蛋白原检测试剂盒、亚甲蓝、一次性使用病毒灭活输血器材、一次性使用血液病毒灭活剂吸附过滤器、CA-500血凝仪、PUZS-300全自动生化分析仪、ZBK-YBM-01医用血浆病毒灭活柜等。
亚甲蓝光化学疗法血浆病毒灭活技术的应用
风险 ，提 高血 浆输 注 的安 全性 ，一直 是输 血 医学 关 注 的课 题 。亚
甲蓝 光化 学灭 活血 浆病 毒 的方 法 能有 效灭 活 血浆 中的脂 质包 裹 病
毒 和 部分 非脂 质 包 裹病 毒 ，灭 活血 浆病 毒 效 果 可靠 ，对 血 浆 中 ｌ
有 效成 分无 明显 不 良影 响 ，对 人体 无 伤害 ，被 认 为是 一 种安 全 、 有效 、实用 的血 浆 病毒 灭 活方 法 ， 目前 已成功 地 用 于单 袋血 浆病 毒 灭 活【，是 唯一 获 准用 于 临床 的光 化学 血 浆病 毒 灭 活技 术 。 本 ４ 】 文 对 血 浆 在 亚 甲蓝 光 化 学 病 毒 灭 活 前 后 分 别 检 测 血 浆 总 蛋 白 和
论 ：亚 甲蓝 光化 学病 毒灭 活技 术对 血 浆Ｈ Ｖ 毒有 杀灭 作 用 ，对血 浆蛋 白浓度 无影 响 。 Ｂ 病 【 词】 毒灭 活 ；亚 甲蓝 ；Ｈ ＶＤ 关键 病 Ｂ － ＮＡ 亚 甲蓝 （ ＭＢ）光化 学疗 法 血 浆 病毒 灭 活技 术 作 为一 种 新 型 输血 技 术公 司提 供 。
１２ １２ ： １２ ２ ０ （２ ） １ ９ １ ８． ［】Ｅ ｅ Ｂ Ｐ ｌｕ Ｍ， ｉ ｕ ，ｔ ｌ ＮＡ ＤＡ ｄ ｍａ ｅ ｙ ２ ｐ ， ｆ ｍ Ｂｏｔ ｘ Ｓ ｅ ａ ， ａ ｅ ＤＮ Ｍ ａ ｇ ｂ
Ｐ ｔ ｓ ｎ ｉｉｅ ｓｉ ｅｌ ｌｒａ ｄ ｃ ｌ ｆｅ ｙ ｔ ｍ［］Ｍｕ ａｉｎ Ｈｏ ｏ ｅ ｓｔｚ ｒ ｎ ｃ ｌ ａ ｎ ｅ ｌ ｒ ｅｓ ｓｅ Ｊ ． ｔｔｏ ｕ ・ Ｒｅｅｒｈ１ ９ ，９ （—） ３ －４ ． ｓａｃ ，９ ３２ ９３４ ：１ ５ １ ５
３ 讨 论
（ Ｂ Ｈ Ｖ），该 项技 术 的应 用 可进一 步 降低 输注 血浆 传染 病毒 的危
亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆技术的应用及质量控制
亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆技术的应用及质量控制摘要】输血是临床抢救和治疗患者的重要手段之一，具有传染疾病的危险，因此对血浆进行病毒灭活并滤除白细胞成为保障输血安全的主要措施之一，MB-P法血浆病毒灭活技术应用于临床后取得了显著的效果，但由于灭活过程中病毒滴度降低程度与光照强度和亚甲蓝浓度有直接关系,但亚甲蓝又存在致突变的可能性,这就要求在有效的亚甲蓝释放浓度下尽可能降低其残留量,同时还要保证不能过多地破坏血浆中的重要成分，需要通过加强对原辅材料和制备过程的联合控制,达到在提高病毒灭活血浆制备效率的基础上,尽可能降低血浆中亚甲蓝残留量的目的，目前该技术还有许多需要解决的难题，因而如何有效保证该技术应用的安全性及采取高标准高质量的控制措施极其重要。
【关键词】亚甲蓝光化学法；病毒灭活；血浆；质量控制【中图分类号】R319 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）07-0126-02应用亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒是阻断患者输血传染病病毒感染的有效方法之一。
血浆病毒灭活的研究已取得了长足的进步，亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒是一种最安全、有效的适合于临床用单袋血浆病毒灭活的方法，其灭活效果已得到大量实验证实[1]。
我国最早是上海血液中心将MB-P法病毒灭活血浆应用于临床，并在各级血站逐步得到推广，结合本地区的实际情况，本站近年来已对部分血浆进行了病毒灭活，临床应用效果令人满意，并且用量呈逐年上升的趋势，现将本站的做法和体会介绍如下。
1.亚甲蓝光化学法(MB-P)简介1.1 亚甲蓝光化学法(MB-P)病毒灭活技术是20世纪90年代初发展起来的，在发达国家已开展多年，是一项比较成熟的技术，用于单袋人血浆的消毒处理，可高效灭活含脂质包膜病毒，对经血传播的病毒，如HIV、HBV、HCV等均具灭活作用。
亚甲蓝又名美蓝，分子量为373.90，是一种光敏剂，属吩噻嗪类染料，其最大吸收峰为670nm，临床上常作为解毒剂，用于治疗亚硝酸盐中毒引起的高铁血红蛋白血症和氰化物中毒。
血浆病毒灭活后质量回顾性分析
甲基 蓝 光 化 学 法病 毒 灭 活 处理 能够 提 高输 血 安 全性 。 时部 分 血 浆 成 分 含 量 有一 定 下 降 。 同
关键 词 ： 甲 基 蓝 ； 毒 灭 活 ； 浆蛋 白 ； 血 因子 亚 病 血 凝
ｄ ｉ１ ． ９ ９ ｊｉｓ ． ６ １８ ４ ． ０ ０ １ ． ４ ｏ ： ０ ３ ６ ／．ｓ ｎ １ ７ —３ ８ ２ １ ． ５ ０ ５
２０ ０ ６年 ３月 至 ２ ０ ０ ７年 ２月随机 抽 检 的 ４ ８份 新 鲜 冰 冻 血浆 和 ２ ０ ０ ７年 ３月 至 ２ ０ ０ ８年 ２月抽 检 的 ４ ８份 病 毒 灭 活 滤 白新 鲜 冰 冻 血 浆， ３ 经 ７℃ 水 浴融 化 后 测 定 总 蛋 白 、 因子 及 纤 维 蛋 白 原 含量 ， 行 统 计 分 析 。 结果 新 鲜 冰 冻 血 浆 经过 亚 甲基 蓝光 化 学法 病毒 Ⅷ 进 灭活 后 Ⅷ 因子 、 维蛋 白原 含 量 明 显 降低 ， 纤 差异 均 有 统 计 学 意 义 （ ＜ ０ ０ ） 总蛋 白含 量 无 明显 变化 （ ＞ ０ ０ ） Ｐ ．５ ； Ｐ ． ５ 。结 论 血 浆 经 亚
Ｗ Ａ ＮＧ ｉ， Ｆｅ ＬＵ “ ｈｕａ， Ｓｈ — ＹＥ ｉ ｏ ｙａｈ， ｔａ ． Ｘ ａ— ｅ １ （ ｅ ｚｈ ｎ Ｂｌｏ Ｃｅ ｌ ｒ。 １ ３５。 Ｓｈ ｎ ｅ ｏ ｄ ｎ ｅ ５ ８０ Ｃ＾ｉ ａ） ｎ
Ａｂｔａ ｔＯｂｅ ｔ ｅ Ｆ ｂ ｅ ｖ ｈ ａ ｉｔ ｎｏ ｌｓ ｏ ａ ｐ ｏｅｎ，ｏ ｃ ｎｒ ｔ ｓｒｃ ： ｊｃｉ ｏ ｏ ｓｒ ｅｔｅｖ ｒａｉ ｆｐａｍａ ｔｔｌ ｒｔｉ ｃ ｎ ｅ ｔａｅⅧ ｆｃｏ ｎ ｉｒｇ ｎａｔｒｍｅｈ ｌｎ ｌｅ ｖ ｏ ａ ｔｒａ ｄ ｆ ｏ ｅ ｆ ｌ ｙｅ ｅ ｂｕ ｂ ｅ
病毒灭活血浆中主要质量指标及亚甲蓝残留量的检测分析
ｍｏ ｌ ／ Ｌ ） 。结论
ＭＢ － Ｐ病 毒 灭 活前 、 后血浆各项主要质量指标接 近， ＭＢ残 留 量 符 合 质 量 要 求 ， ＭＢ － Ｐ病 毒 灭 活 血 浆 是 一 种 安 全
的血 液 制 品 ， 可 有 效 降低 输 血 风 险 ， 保障受血者身体健康 。
关键 词 ： 亚 甲蓝 ； 病 毒 灭 活 ； 光化 学 ； 输 血 Ｄ Ｏ Ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ ． ２ ０ １ ３ ． １ ４ ． ０ １ ６ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ３ — ４ １ ３ ０ （ ２ ０ １ ３ ） １ ４ — １ ８ ｌ １ 一 Ｏ ２
国际检 验 医学杂志 ２ ０ １ ３ 年 ７ 月第 ３ ４卷第 １ ４期
Ｉ ｎ ｔ Ｊ Ｌ ａ ｂ Ｍｅ ｄ ， Ｊ ｕ ｌ ｙ ２ ０ １ ３ ， Ｖｏ １ ． ３ ４ ， Ｎ ｏ ． １ ４
Байду номын сангаас
・
临床检 验研 究论 著 ・
病 毒 灭活 血 浆 中主要 质 量指 标 及 亚 甲蓝 残 留量 的检测 分 析
Ｃｈｅ ｎ Ａｉ ｈｕａ ， Ｌｉ ｕ Ｙｏ ｎｇｍ ｅ ｉ
（ Ｓ ｈ ｅ ｎ ｚ ｈ ｅ ｎ ｃ ｉ ｔ ｙ Ｂａ ｏ ａ ｎ Ｄｉ ｓ ｔ ｒ ｉ ｃ ｔ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｌ ｂ ｌ ｏ ｏ ｄ ｓ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｏ ｆｆ ｉ ｃ ｅ ， ５ １ ８ １ ０ １ ） Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： ０ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔｏ ｕ ｎ ｄ ｅ ｒ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｅ ｓ ｏ ｆ ｍｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｅ ｎ ｅ ｂ ｌ ｕ ｅ ｐ ｈ ｏ ｔ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ（ ＭＢ－ Ｐ）ｉ ｎ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｅ ｄ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｂ ｅ ｆ ｏ ｒ ｅ ａ ｎ ｄ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ
亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆质量的影响分析
会分 娩的 ，需转 至有Ｎ Ｉ Ｃ Ｕ的医 院， ＞３ ４ 周的顺 其 自然 ，不作常 规保
胎 ，终止妊娠 的方式可 以根据 胎儿 出生后存 活的可能性 ，考虑剖宫产 或是 更换引产方式 。 ４ 预 防措 施
Ｊ ｕ ｌ ｙ ２ ０１ ３ ， Ｖ ｏ １ ． １ １ ， Ｎｏ ． ２ ０
化 学法 病毒 灭 活对血 浆质量 的 影响 ， 以更 好地 保证 血液 质量 。本 文 总 结性 回顾 了广 州血液 中 ｔ ￣ ， ２ ０ １ １ 年３ １至２ ． ０ １ ２ 年３ ｙ ｊ 之 间 ，每 月随机
的 时间 ，血浆 会先流 经ＭＢ ＃ Ｉ ＇ ￣ Ｊ Ｉ 元件 ，再流入 光照袋 ，并将其 进行均 匀混 合 ，使之 充分反应 。再把 已经混合 了ＭＢ 的血 浆 ，且需要 将光 照 袋和 过滤器置于病毒灭箱 内 ，采用光 照额 的方式杀灭血 浆 中的病毒 。
胎妊娠 、破膜孕 周等都 会对 期待 时间有一定 的影响 ］ ，从 而医生在 工
［ Ｊ ］ ． 中国 实用妇 科与 产科杂 志 ， ２ ０ １ ０ ， ７ （ １ ２ ） ： ６ ９ — ７ ０ ．
亚 甲蓝 光化学法病毒 灭活对血 浆质量 的影响分析
徐 国胜
（ 广州血液 中心 ，广东 广州 ５ １ ０ ０ ９ ５ ）
１资 料与 方法 １ ． １一股资料 在２ ０ １ １ 年３ ７ ］ 至２ ０ １ ２ 年３ 月中 ，每 个月均 随机抽取 血浆５ 袋 ，每 袋 血 浆为２ ０ ０ ｍ Ｌ，总数量 为６ ０ 袋 ，经过统计 ，其 中Ａ型２ ０ 袋 ，男女各 １ ０
袋 ；Ｂ 型２ ０ 袋 ，男女各 １ Ｏ 袋 ；Ｏ 型血浆 １ ０ 袋 ，男女各５ 袋 ；Ａ Ｂ 型１ ０ 袋，
亚甲蓝残留量在病毒灭活血浆中的限量检测方法
随着 亚 甲 蓝 光 化 学 照 射 技 术 （ ＭＢ Ｐ ） 的发展 ． 其 对 于 照 射 血 浆 以此 灭 活 病 毒 等 应 用 越 来 越 广 泛 ． 并 在 采 供 血 机 构 广 泛
黎 添华 ， 邢启明 ， 劳丽嫦 （ 广州市番禺区中心血站 １ 成分科； ２ ． 质控科， 广东 番禺 ５ １ １ ４ ０ ０ ）
摘要 ： 目的 探 讨 亚 甲蓝 残 留 量 在病 毒 灭 活 血 浆 中 的限 量 检 测方 法 。方 法 留取 病 毒 灭 活 血浆 亚 甲蓝 滤 过 前 和 滤 过 后 的样 本 各 ３ ０份 ， 每１ ０份 为 一 组 ， 共 分为三组 ： 对照组 ， 使用批号为 ２ ０ １ ３ ０ ０ １ ． Ａ的病毒灭活 过滤器 ： 试 验 一 组 和 试 验二组 ， 均使用批号为 ２ ０ １ ３ ０ ０ ２ ． Ｂ的 病 毒 灭 活过 滤 器 。采 用 固 相 萃 取小 柱对 血 浆 样 品 和 标 准 品 中 的亚 甲蓝 进 行 萃 取
分离 ， 结合分光光度法进行测定； 通 过 已 知浓 度 的标 准 品计 算 得 到 ３组 试 验 中每 袋 血 浆 的亚 甲蓝 释 放 量 、 残 留 量／ 率。
用双缩脲法测定总蛋 白， 计算总蛋白测定 回收率 ： 使用血凝仪测定 Ｖ Ｉ Ｉ Ｉ 因子含量 ． 计算 Ｖ Ｉ Ｉ Ｉ 因子 回收率 结果
推广 。研 究 显 示 。 血 浆 病 毒 滴 度 降低 程 度 与 所 用 亚 甲蓝 浓 度
呈现 一定 的关 系Ｉ ｌ ｌ 但 过多 的亚 甲蓝 进 入 体 内 会 对机 体产 生
临床输血检验：血浆的病毒灭活方法
表16病毒灭活冰冻血浆质量控制项目和要求
质量控制项目 外观
容量 血浆蛋白含量 亚甲蓝残留量 无菌试验
要求
肉眼观察应呈黄色澄清液体，无色泽异 常、蛋白析出、气泡及重度乳糜等情况； 血袋完好，并保留注满冰冻血浆经热合 的导管至少10cm。 标示量（mL）±10%
≥50g/L ≤0.30μmol/L 无细菌生长
血浆的病毒灭活方法
SD（有机溶剂/去垢剂）法
•
SD血浆病毒灭活技术的方法更适合用于血浆生物制
品，而不是临床供血。我国血浆生物制品公司的原料浆就是
采用SD法进行灭活的，但这一技术在临床供血中不可行，因
为SD法只适合用于混合血浆的处理，且仅对脂质包膜病毒有
效，其他非脂质包膜病毒，例如甲型肝炎病毒、微小病毒B19
质量控制项目 外观
容量 血浆蛋白含量 Ⅷ因子含量 亚甲蓝残留量
要求
肉眼观察融化后的新鲜冰冻血浆，应呈 黄色澄清液体，无色泽异常、蛋白析出、 气泡及重度乳糜等情况；血袋完好，并 保血袋完好，并保留注满新鲜冰冻血浆 经热合的导管至少10cm。
标示量0.5 IU/mL
≤0.30μmol/L
血浆的病毒灭活方法
• 病毒灭活新鲜冰冻血浆 fresh frozen plasma methylene blue treated and removed 采集后储存于冷藏环境中的全血， 按新鲜冰冻血浆要求分离出血浆在速 冻前采用亚甲蓝病毒灭活技术进行病 毒灭活并速冻呈固态的成分血。
表14病毒灭活新鲜冰冻血浆质量控制项目和要求
等均无法灭活。
血浆的病毒灭活方法
巴斯德消毒法（液态加热法） 法国 加入保护剂（葡萄糖、甘氨酸等低分子量
的糖或氨基酸）60℃10小时，超滤去除保护剂 紫外线（UVA）/光敏物法
亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆的质量控制
关 键 词 ： 甲蓝 ； 化 学病 毒 灭 活 ； 浆 ； 量控 制 亚 光 血 质 中图 分 类 号 ： ４ ６ １ ９ Ｒ ４ ． １ 文 献 标 识 码 ： Ｂ 文 章 编 号 ： ６ １８ ４ （ ０ ７ ２ — ４ ８０ １７ —３ ８ ２０ ）４２ ９—２
亚 甲 蓝 光 化 学 （ Ｅ 法 灭 活 人 血 浆 中 的 病 毒 效 果 已被 证 Ｍ ） 实 ， 注 病 毒 灭 活 血 浆 成 为 当前 国 内外 预 防 输 注 血 浆 制 品 传 播 输 传染 病 的 有 效 措 施 ， ＭＢ法 病 毒 灭 活 血 浆 技 术 ， 被 推 广 应 用 已 于 全 国部 分 血 站 。但 迄 今 为 止 ， 于 ＭＢ法 病 毒灭 活 血 浆 的 制 对
摘 要 ： 目的 探 讨 亚 甲蓝 光 化 学 （ ） ＭＢ 法病 毒 灭 活血 浆 在 制备 过 程 中质 量 控 制 的 方 法 和 标 准 。 方 法 （ ） 立 ＭＢ 法病 毒 １建
灭 活 血 浆 制 备 操作 规程 ；２ 用血 凝 仪 检 测 病 毒 灭 活前 后 血 浆 内 Ｆ 、 ｉ （） Ⅷ Ｆｂ的含 量 （ 一 １ ） （ ） ｎ ６ ； ３ 电子 秤 称 量 病 毒 灭 活 前 后 血 浆容 量 （ 一２ ） （） 比例 抽 查 并 进 行 细 菌 培 养 ， 察输 注后 的 不 良反 应 。 结 果 病毒 灭 活后 血 浆 内 Ｆ 、 ｉ 量 和 血 浆 容 量 与 灭 活 ｎ ５ ；４ １ 观 Ⅷ Ｆｂ含 前 比 较 差 异 有 统计 学 意 义 （ ＜ Ｏ ０ ） 但 Ｆｂ 血 浆 容 量 仍 符 合 国 家质 量 标 准要 求 ； 培 养 检 测 未 见 细 菌 生 长 ； 床 输 注后 无 不 良 Ｐ ５， ｉ、 血 临 反 应 。结 论 ＭＢ法 病 毒 灭 活 血 浆 制 备 过 程 中 ， 需要 进 行 全 过 程 质 量控 制 ， 格 无 菌操 作 。 严
462袋病毒灭活血浆中亚甲蓝残留量检测结果分析
462袋病毒灭活血浆中亚甲蓝残留量检测结果分析杨红梅;蒋国新;吴敏;张建伟【摘要】目的：探讨亚甲蓝光化学法灭活血浆中病毒后亚甲蓝残留量结果范围。
方法采用固相萃取法检测462袋不同规格的病毒灭活血浆中亚甲蓝残留量，并分析亚甲蓝残留量超标存在的原因。
结果亚甲蓝残留量≥0～0．10μmol／L 126袋，≥0．10～0．20μmol／L 191袋，≥0．20～0．30μmol／L 112袋，≥0．3μmol／L共33袋（其中金坛分站11袋）。
按照2012年版血站技术操作规程抽检合格率≥75％符合要求，而常州地区2012～2015年病毒灭活冰冻血浆亚甲蓝残留量总合格率为92．86％（429／462），总不合格率为7．14％（33／462）。
Waters Oasis小柱的吸附效果明显好于北京瑞尔达小柱。
结论根据亚甲蓝残留量超标存在的原因采取相应措施，并加强制备过程中关键控制点的监测，以减少亚甲蓝残留量超标现象，保证输血安全。
【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2016(013)020【总页数】3页(P2974-2975,2976)【关键词】亚甲蓝;固相萃取;残留量;病毒灭活血浆【作者】杨红梅;蒋国新;吴敏;张建伟【作者单位】江苏省常州市中心血站 213004;江苏省常州市中心血站 213004;江苏省常州市中心血站 213004;江苏省常州市中心血站 213004【正文语种】中文输血技术是通过静脉输注给患者的一种治疗方法，但该技术存在可感染输血传染病毒性疾病的风险，因此对血液病毒进行灭活是保障临床安全输血的措施之一。
目前采供血机构为降低临床上输血感染病毒的风险，增加输血安全性，通常采用亚甲蓝光化学法灭活血浆中的病毒[1-2]。
亚甲蓝灭活血浆病毒有效浓度为1.0～5.0μmol/L(即亚甲蓝释放量)，才能保证病毒有效灭活。
在灭活病毒后使用一次性病毒灭活过滤器滤除亚甲蓝，使最大残留量不超过0.3 μmol/L(2012年版血站技术操作规程)，以保证大剂量输血后亚甲蓝在体内累积不超标，从而保证用血安全[3]；而且亚甲蓝残留量过多血浆外观和色泽会发生改变且不易被临床医院所接受，因此严格控制并检测血浆中亚甲蓝残留量有非常重要意义。
血浆中亚甲蓝含量的检测
血浆中亚甲蓝含量的检测张淑琴;温涛;赵君;王莉【摘要】目的建立固相萃取法提取血浆中微量亚甲蓝及分光光度法进行测定的方法.方法采用固相萃取小柱对血浆样品中残留的亚甲蓝进行萃取分离,在400～800 nm处选择分析波长,分光光度法进行含量测定.结果选择653 nm为检测波长,在亚甲蓝浓度0.1～2μmol/L的范围内,所得标准曲线方程为Y=66.171 X+0.0567,r=0.998,平均CV为6.5%,回收率在90%～110%之间,病毒灭活血浆亚甲蓝的滤除率大于80%.结论本法简便、准确、精密度高,能够用于血浆中微量亚甲蓝的分析.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2010(012)001【总页数】3页(P36-38)【关键词】亚甲蓝;血浆;分光光度法;固相萃取小柱【作者】张淑琴;温涛;赵君;王莉【作者单位】450012,郑州,河南省红十字血液中心质控科;450012,郑州,河南省红十字血液中心质控科;450012,郑州,河南省红十字血液中心质控科;450012,郑州,河南省红十字血液中心质控科【正文语种】中文【中图分类】R446.1对血液及其成分中的病毒进行灭活是保障输血安全的措施之一,临床应用较多的是用单人份血浆进行病毒灭活,常用的方法是亚甲蓝光化学法(MB-P)[1]。
血浆经灭活处理完毕后,再将光敏剂从血清中过滤出来。
国外研究表明其病毒滴度降低程度与所用的可见光强度和亚甲蓝浓度有直接关系[2],但亚甲蓝存在致突变的可能,若残留量过多,血浆的外观和色泽改变明显,因此,对血浆中亚甲蓝浓度的控制有重要的意义。
笔者采用固相萃取小柱对血浆样品中残留的亚甲蓝进行萃取分离[3],结合分光光度法进行测定,简便、准确、灵敏度高,能够用于血浆样品的分析。
材料与方法1 样本来源 8人份混合血浆约1 000 ml,用MBP法制备的病毒灭活血浆过滤前和过滤后的样本各10份。
以上血浆均来自本站无偿献血者的血液。
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Waters Oasis小柱特性: -大孔聚合物.对化合物的保留强 - 是一种通用性的吸附剂（pH范围较宽1-14） - 30%甲醇清洗,可完全去除血浆中的蛋白、脂质和其它杂 质 - 亚甲蓝在不同溶剂中,最大吸收峰不同： 甲醇溶液为653nm ,故本法选653nm 为测试波长. - 可用1％乙酸的甲醇溶液,迅速将柱床顶的亚甲蓝洗脱. 亚甲蓝酸性染料，（pH3.5 1％乙酸的甲醇溶液）
主要检测设备：固相萃取富集装置
19
亚甲蓝残留量检测方法
使用Waters Oasis小柱萃取血浆中的亚甲蓝
使用前的Waters小柱
1、用6ml甲醇活化Waters小柱 2、加入6ml供试血浆
亚甲蓝残留量检测方法
将萃取出的亚甲蓝洗脱后进行比色
Waters小柱萃取出 血浆中的亚甲蓝
3、萃取亚甲蓝 4、用30％甲醇6mL清洗 5、用含1％乙酸的甲醇溶液2ml洗脱 6、洗脱液离心（3500rpm/10min） 7、用含1％乙酸的甲醇溶液作试剂 空白，在654±2nm波长处测定 吸光度 注：用同样的方法萃取检测标准品
2007年乌鲁木齐市血液中心引进该技术, 截至2014年底使用亚甲蓝光 化学病毒灭活血浆13万单位以上。
一次性使用血浆病毒灭活输血过滤器
Depasse 最早提出了 “过滤器的应用”， 极大地简化和改进了 MB-P 法的操作，为 MB-P 法由实验室走向临床迈出了重要一 步。 目前使用的一次性使用血浆病毒灭活输 血过滤器主要由亚甲蓝添加元件、光照 袋、过滤器、血浆储存袋和连接管路组 成，是一种简便、实用的血浆灭活器材。
比色: 亚甲蓝遇光易分解，萃取后需及时比色
谢 谢！
亚甲蓝检测依据
《血站技术操作规程》2012年版：14 附录 F 血液质量控制检查方法 — F.19 亚甲蓝残留量。 《全血及成分血质量标准》 GB18467-2012— 5.16病毒灭活冰冻血浆质量标准，亚甲蓝残留 量 ≤0.30 µmol/L。
血浆中亚甲蓝残留量的检测
所需实验仪器、试剂
试验仪器:
亚甲蓝病毒灭活血浆的质量控制
乌鲁木齐市血液中心质量管理科 梅静 2015.4
血浆病毒 灭活的必 要性
亚甲蓝病 毒灭活的 技术原理
亚甲蓝病 毒灭活血 浆的制备
病毒灭活 血浆的质 量控制
血浆病毒灭活的必要性
随着血液检测技术的进步和血液管理措施的完善，目 前的HBsAg、抗-HCV、抗-HIV的检测在很大程度上降低了 输血导致病毒传播的几率，但由于 1 病毒变异导致免疫反应性的改变； 2 免疫静默感染； 3 检测技术存在窗口期漏检的局限性； 4 检测病原体种类的局限； 输血引起艾滋病病毒（HIV、HCV、HBV）的风险尚 不能完全杜绝；不常见的病毒如人类T淋巴细胞白血病病 毒（HTLV）、西尼罗病毒（WNV）、EB病毒等在大多数 国家均未被列入血液常规检测。现有的检测手段不能完全 排除血浆中可能存在的未知病毒。
血浆制品病毒去除方法：
主要在血浆蛋白分离工艺中应用
乙醇沉淀 深层过滤 离子交换色谱和亲和层析色谱 纳米膜过滤 纳米膜过滤技术 单一的病毒灭活/去除方法虽然能较好的起到处理病毒 效果，但是无法灭活和去除所有病毒，如细小病毒B19、 VIR918、PARV4、SV40和PrPSc。
血浆病毒灭活方法
有机溶剂/去污剂（S/D）法
成品试剂盒的组成
小柱
R1： 活化液
R2： 清洗液
R3： 洗脱液
亚甲蓝标准液：（100μmol/L)质控液：（0.300μmol/L）
操作方法（详读说明书、按说明书操作）
1、柱预处理
取小柱三支表明测定、标准、质控，分别插入固相萃取装臵过滤柱子
中，加入3ml活化液活化小柱。 2、加标准液（ 10μmol/L）：（取血浆0.36ml,加100μmol/L标准液
6、洗脱
换干净的试管，加2ml洗脱液洗脱小柱上的亚甲蓝。
7、检测
将洗脱液离心3000转/5分钟，取上清液于4040半自动 生化分析仪检测洗脱液调零，654nm波长，分别测定 标准管和测定管吸光度。
测定管吸光度 ×0.5 标准管吸光度
计算：亚甲蓝（μmol/L）= （μmol/L）
注意事项
留取标本：病毒灭活冰冻血浆臵30～37℃融化时 间应小于6分钟。为使其尽快融化，应不断轻柔 摇动血浆袋。不得急剧摇动血浆袋，以防止血浆 中出现大量泡沫。
固相萃取富集装臵及配套的固相萃取耗材：推荐使用Waters Oasis产品 （） 真空泵
分光光度计
试管离心机
试剂：亚甲蓝标准品粉剂、甲醇、乙酸、蒸馏水
其他耗材：容量瓶、移液器、试管等
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亚甲蓝残留量的检测原理
固相萃取-分光光度法
利用固相小柱内吸附介质是一种大孔聚合物， 对血浆中亚甲蓝具有很强的选择性吸附，可排除血 浆蛋白、脂肪和其它杂质的干扰，当血浆标本通过 小柱时，血浆中血浆中亚甲蓝被柱子中大孔聚合物 吸附，最后用洗脱液洗脱液洗脱亚甲蓝，采用柱子 提取血浆中残留亚甲蓝，用含1%醋酸的甲醇溶液调 零，在653 nm检测标准、质控、测定管，其吸光度 与浓度呈正比。
1992年，德国最早将依靠该项技术处理的新鲜冰冻血浆应用于临床。
90年代中期，上海血液中心开发以荧光照射光源和配臵亚甲蓝去除 滤器为特点的亚甲蓝光化学血浆病毒灭活技术，随后该项技术在我国 被逐步推广。
2004年，世界卫生组织将亚甲蓝光化学血浆病毒灭活技术列入 “人血 浆制品病毒灭活或去除指南”， 欧盟和英国也纳入“输血指南”。
亚甲蓝病毒灭活血浆在我国开展近十年，各种关于 病毒灭活对血浆主要成分影响情况的报道可归纳为： 血浆经过 MB-P 法灭活后，血浆总蛋白回收率90%以上； 但部分不稳定的凝血因子(Ⅴ，Ⅷ)和纤维蛋白原（Fg） 的变化明显，Ⅷ因子的回收率一般在 80%左右。血浆 的免疫原性、各种电解质、酶的稳定性等的变化不明 显，PH 值也未受影响。
亚甲蓝病毒灭活的技术原理
亚甲蓝又名美蓝，分子量 319185，是一种光敏剂，吩 噻嗪类染料，其最大吸收峰为 670nm，临床上常作为解 毒剂，用于治疗亚硝酸盐中毒引起的高铁血红蛋白血症 和氰化物中毒。 亚甲蓝表面携带正电荷，与病毒核酸结合后可以嵌入 DNA/RNA 中，与病毒核酸带负电荷的 G-C 碱基对相结 合。在有光照的条件下，亚甲蓝分子吸收光能后可激发 产生单态分子氧，这种单态分子氧通过修饰鸟嘌呤碱基 而影响核酸，使其产生缺口，引起核酸链的断裂或导致 碱基位点丢失，从而阻止其复制,达到灭活病毒的目的。
亚甲蓝作为一种外来物质进入人体后，对人体的潜在影响尚不 可知。若病毒灭活血浆中残留过多的亚甲蓝，还会造成血浆外 观和色泽的明显改变，使病人输注时可能产生心理负担。 在保证灭活所需的有效浓度下，要尽量减少其残留量，因而对 病毒灭活血浆中的亚甲蓝残留量/率进行控制很有必要。选择 合适的亚甲蓝含量的测定方法很重要。
热处理 终端干热法
辛酸处理法
蒸汽处理法
低pH孵放法
以上方法多用于从原料血浆生产血 浆蛋白制品，均需要将大量的不同 人份的血浆混合处理，不但容易增 加某些不能被灭活病原体（如朊病 毒prion等）的扩散风险，且处理 难度大，费用高。
亚甲蓝光化学法能对单人份血 浆进行病毒灭活，适用于采供 血机构对临床用血浆的病毒灭 活处理，更适合于我国的国情 和临床实际应用。
对亚甲兰光化学法病毒灭活有效性的研究显示，血浆中指 示病毒的滴度显著下降，血浆中的病毒含量下降了6个数量级， 可能残留的病毒量低于百万分之一，达到了国际公认的血浆病 毒灭活有效性指标，也符合卫生部关于血浆制品病毒灭活的有 关规定。
美国AABB技术手册描述了病原体灭活血浆制品， 介绍了欧盟开展的三种病毒灭活方法，其中包括 亚甲蓝、核黄素和补骨脂素。但美国未开展。 欧盟指南中描述了病原体灭活的FFP制品的质量 要求，同时也介绍了三种方法。 英国指南中明确描述了亚甲蓝处理和去除的FFP 制品的质量要求，质量要求中对亚甲蓝残留量要 求为≤0.3umol/L ，与我们的国标一致。
医用病毒灭活箱的应用
当前的医用病毒灭活箱是用于光照灭活 时的专用设备，它集光源、温控、机械 摆动等装臵于一身，可以根据需要设定 照射强度、照射温度、照射时间和摆动 频率等诸多条件，使用方便。
光源选择：荧光灯 （1）单位时间内照射所释 放的热量较低； （2）达到相同灭活效果的 照射时间最短； （3）波长接600~700nm。 照射方式：有效光照强度范 围在 30 000~40 000lx。 （1）放臵血袋的托盘为钢丝 结构，有较大空隙，使血袋 两面都可以接受照射； （2）照射过程中托盘以 60±2 次/分钟的频率摆动； （3）箱内面为镜面，可以将 灯管直射的光源和镜面反射 的光源从 360 度全方位地 照射血浆。
0.04ml混匀）于标明标准的小柱内加0.3ml标准液
3、加质控液（0.300μmol/L）： （取血浆0.36ml,加质控液0.04ml混匀） 于标明标准的小柱内加0.3ml质控液 4、加样：于标明测定的小柱内加6.0ml血浆
5、清洗
待血浆完全进入小柱后，用3ml清洗液清洗小柱，去血浆中的蛋白
质、脂质和其他杂质，血浆中亚甲蓝被吸附于吸附剂上。
亚甲蓝病毒灭活的技术原理
与脂膜和蛋白质结合 对核酸有较高的亲和性 亚甲蓝为多靶点的光敏剂，光照射产生单线态氧和羟自由基引 起广泛损伤 亚甲蓝可与病毒的核酸与脂质包膜相结合，在可见光的作用下， 可使病毒的核酸断裂，包膜破损，因而能杀灭包括艾滋病病毒 （HIV）、乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）等的脂质包 膜病毒和部分非脂质包膜病毒。
亚甲蓝的浓度与血浆病毒的灭活效果有直接关系， 只有达到一定的释放量才能起作用，但亚甲蓝若残留 过多会影响血浆的外观色泽，且亚甲蓝存在致突变的 可能性，因而必须对灭活前后亚甲蓝的含量进行测。