蛇床子中欧前胡素和蛇床子素提取与分析方法研究 6 80%加热回流3次 1h
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３讨论
由方法学研究表明，用 ＨＬ ＰＣ法测定蛇床子中欧前胡素和蛇床子素的准确度和灵敏度较高，实验操作
相对简单，适用于本文的研究。综合考虑提取溶剂的实际应用价值选用 ８％ ０ 乙醇为提取溶剂，在此提取体 系中，由于水介质对蛇床子药材的溶胀作用，有利于极性溶剂的渗入和溶出，从而提高了蛇床子中包括欧 前胡素和蛇床子素在内亲脂性成分提取率。 通过正交试验确定了最佳提取溶剂倍量、回流时间和回流次数。考察试验中，由于溶剂用量超过 ６ 倍
ｋ １
４
：
６ ５ ４０ ．１
７ ８ ４９ ．２
生 众 今 众 １０
６ ７４ ７０ １ ６２
１０ １０ 住
欧 前 胡 素
ｋ１
４
生 众
ｋ １
６７ １３
１０ １０
５１ ．７
１１ ．６
５ 刃
蛇 床 子 素
ｋ １
７９ ７６ １７
１ ．５ ０６ １ ．７ １８ ０４ ．２ ２７ ．９
， 山 飞 〕 ，、 ， 乙 ，， ４
９４ ８６ ７５ ９７ ８４ １６
１ ｝
１６ ，４
１３１ ， １６ ，６ １８ ．１
４
Ｏ
，
１７
今ｊ
１１
ｒ 、
．
５２
９ ３ ３ ２ １７ ．２ ３９ ．６
了蛇床子中欧前胡素和蛇床子素的同时提取方法。 １仪器与试药
高效液相系统包括： Ｃ１Ａ ｖ色谱泵， Ｐ－０ｖ紫外检测器旧 本岛津公司） ７２ 型进样器 （ Ｌ－０Ｔ ｐ ＳＤｌＡ ｐ 和 ７５ 美 国Ｒ ｅｄｎ 公司） ＡＡＴＲ ｈｏｙｅ ； ＮＳＡ 色谱工作站 （ 天津奥泰科技有限公司） 。欧前胡素和蛇床子素对照品（ 中国药 品生物制品检定所） ；蛇床子药材 （ 西安市药材市场） ，经西安交通大学药学院生药教研室鉴定为中国药典 规定药材。色谱纯甲醇 （ 美国Ｆｓｅ 公司） ｉｈｒ ，双蒸去离子水（ 实验室自 。 制） ２ 方法与结果 ２１ 对照品溶液制备 取欧前胡素和蛇床子素对照品约 ５ｇ ． ｍ，精密称定，置于 ＩＭ 量瓶中，用甲醇溶解 ＯＬ 并定容至刻度，摇匀。精密量取上述溶液 １Ｌ Ｍ，稀释到 ＩＭ 作为对照品溶液，置于冰箱（０） ＯＬ ４ 内备用。 Ｃ ２２ 色谱条件 色谱柱： ｒｍｓＩ （ ０ｍ４６ ５ ， ． Ｋｏａｉ Ｃ８ ｍｘ． ｕ 流动相： 醇一 ７： ） 流速： ｍ． ＇ １ １ ５ ｍ， ） ｍ 甲 水（ ３ ， ００ １Ｌｍｎ， ｉ
检测波长：３２ｍ ０ｎ 。在此条件下测得欧前胡素和蛇床子素对照品及蛇床子总提物的色谱图如图 １ 所示。
ｏ ｚ
图 １ 欧前胡素、蛇床子素对照品 （）和蛇床子总提取物 （ ）色谱图 ａ ｂ １ ． 欧前胡素 ａ蛇床子素 ．
２ 增刊 ） ０３ ３（ ，２ ０
溶 超 提取３ ｉ 静 过 滤 定 至ｌ ， 心 １０ ｒ ｉ１ 社滤， 确 取 液１１ 剂， 声 ０ ｎ 置 夜， 过， 容 ＯＬ 离 （ ，０ｍｎ） ｍ。 ｍ ００ － － 后 准 吸 滤 ０ ，
Ｌ 进样分析欧前胡素Fra Baidu bibliotek蛇床子素含量（ １ 结果表明：甲 ， 见表 ） 。 醇和８％乙 ０ 醇作溶剂的提取率较高， 考虑实
１ ４ ４ ． ６ １ ５ ． １８ ．２
３ ７ ６ ． ０ ３ ７ ． ３７ ．６
３ ８ ７ ． ２ ３ １ ．
结果表明，超声和 ８％ ０ 乙醇加热回流 １，欧前胡素和蛇床子素的提取率较高，因此在含量测定中可选 ｈ 择超声法，但在工艺研究中选择回流方式。 ２９ 正交试验 表 １ ． 的结果表明８％ ０ 的乙醇回流提取率较高，因此，取蛇床子细粉 ２ｇ ０ ，采用 ３ 因素 ３ 水 平正交实验法对提取溶剂倍量、 回流时间、 回流次数进行试验研究（ ３。 表 ） 将提取液定容至 ５０Ｌ 用 Ｈ Ｌ ０ｍ， Ｐ Ｃ 法测定溶液中欧前胡素和蛇床子素含量，计算其提取率（ ４． 见表 ）
２３ 标准曲线 分别配制不同浓度的欧前胡素和蛇床子素对照品混合溶液， ． 在上述色谱条件下进行测定， 进样量为 ｌ 。以欧前胡素和蛇床子素进样量 （）对峰面积 （）进行线性拟合，欧前胡素和蛇床子素 Ｏ ｌ ａ Ｌ Ｘ Ｙ
回归方程分别为：
欧前胡素 Ｙ ０６１ ８５． ７２２ ｙ ．９８ ＝ Ｘ一１５．， ０９９ ＝ 蛇床子素 Ｙ ９８Ｘ一４４．， ＝．９３ ２１１ ＝ ９０４ ｙ ９９ ０ 结果欧前胡素在 ３ｎ －８ｎ，蛇床子素在 １６ｇ ２ｎ 范围内线性关系良 ４ｇ ０ｇ ６ ０ｎ －１０ｇ ２ 好。
９． ４ ４ ０． ４ ０
以欧前胡素和蛇床子素含量 （ 为考察指标，由表 ４中极差 Ｒ值大小显示，欧前胡素各因素作用主次 ） ％ 为 Ｂ Ａ ＞Ｃ ＞ ，蛇床子素各因素作用主次为 Ｂ Ａ Ｃ ＞ ；方差分析结果表明：Ｂ因素的影响显著性意义，以 ＞ Ａ Ｂ Ｃ 组合为佳，即用 ６ ２ ３２ 倍量 ８％ ０乙醇加热回流 ３ 次，每次 ｌｏ ｈ
２１ 方差分析 将正交试验结果（ ） Ｓ Ｓ ．０ 表４ Ａ 软件进行方差分析，结果见表５ 用 ０
表 ５ 欧前胡素：蛇床子素方差分析表
误差来源
欧前胡素
Ｄ ｏａ Ｆ Ａ ｖ Ｓ ｎ Ｓ
２ ０ ２ ７ ０． ３ ６ ０
述色谱条件下测定，平行做４ 次，平均回收率为９． ＲＤ＝２８％． ７０％； ２ Ｓ ．９
３６ 样品测定 取清热解毒口 ． 服液供试品，按所选条件进行测定，测得清热解毒口 服液中黄琴普含量为 １１１ ｍ · ‘ ． ８ Ｍ ９ ｇＬ ｏ
４ 结论
毛细管电泳法用于清热解毒口服液中黄答普含量的测定， 方法简便快捷， 分析结果的重现性、 精密度 和回收率均较好，且有效成分分离较好，口 服液中的其它成分基本不形成干扰，可作为清热解毒口 服液质
１ ７ ８ ． ２ １ １ ．
（ －， ｍ ｇ） ｇ
蛇床子 素含量
１ ７ ２ ４ ５ ５ ． ３ ． １ ３ １ ． ２ ０ ． １ ０ ． ２ １ ． ３０ ３ ８ ０ ． ５ ４ ３ ．
（ ＇｝ ｍ ８ ８ ）
２４ 精密度 取蛇床子细粉约０２， ． ． ｇ精密称定， ０乙醇超声， ｍｎ 用８％ ６ ｉ放冷定容至 ＩＭ。 ０ ＯＬ离心（ ００／ｉ） １ ０ｒｍｎ ０ 后过滤，准确吸取滤液 １１ ，重复进样 ６次，测定峰面积积分值，欧前胡素和蛇床子素的 Ｒ Ｄ ． 分 ０１ Ｌ Ｓ
别为 １ ４ ． ％和 １ ０ ２ ． ％． ６ ２５ 重现性试验：取同一份蛇床子药材 ６ 平行进行提取测定， ． 份， 求得欧前胡素和蛇床子素含量的 Ｒ Ｄ Ｓ 分别 ２ １ 和 １ ６ ． ％ ． ％． ４ ８
９
６
ｒ Ｊ
蛇床子素
２ ３ ０ ９ ０． ２ ８ ０ ６ ４ ０ ０． １ ０ ４ ２ ２ ６ ９ １． ０ ８ ７ ０ ４ ４ ０． １ ３ ４
２ ０ ４ ９ ０． ０５ ８ ． ０ ７ ４ ０ ０ ２４
０． ２ ８ ４
药物分析杂志
ｍ ＂Ｌ范围内具有良 ｇ ‘ ｍ 好的线性关系。 ３ ３ 精密度测定 精密吸取浓度为０３９ ｍ ＂ 的黄琴昔对照品溶液，重复进样 ５ ． ．２６ ｍ ‘ ｇ Ｌ 次，黄答昔峰面积
Ｒ Ｄ ＝ ２４ ％，迁移时间的 ＲＤ＝０２ ％． Ｓ ．１ Ｓ ．４
３４ ．
重现性测定 精密吸取清热解毒口服液 ２ ，再加入无水乙醇 ６ ，按样品测定项下操作，样品溶 ｍ Ｌ ｍ Ｌ 液重复进样 ５ 次，测得的黄答昔浓度的ＲＤ＝３０ ％。说明该方法重现性良 Ｓ ．９ 好。 ３５ 加样回收率的测定 精密量取一定量的样品溶液 ４ ． 份，分别精密加入一定量的黄答普对照品，在上
超声 提取方法
３ ｍｉ ｍｉ ０ ｎ ６ ０ ｎ
回流提取
放置过夜
９ｍｎ ０ ｉ
—
索氏提取
１ ｈ ２ ｈ ３ ｈ
欧前胡素 含量 （） ％ 蛇床子素 含量 （） ％
１ ７ ２ ． ２ １６ ．
１ ６ ． ６ １５ ．４ ３ ９ ． ８ ３６ ．１
２６ 回收率试验 准确称取己 ． 测知含量的蛇床子样品粉末６ 份，各０ ｇ ． ，分别加入对照品溶液适量，按 １ 上述方法处理，依法测定。测得欧前胡素和蛇床子素平均回收率分别为 ９． ９． Ｒ Ｄ分别 １ １ ９ ％， ８ ９ ８ ％， Ｓ ．％ １
和 １４ ． ％． ０
２ 提取溶剂选择 取蛇床子生药， ． ７ 粉碎成细粉， 称取０ ｇ 精密称定。 ．， ２ 分别加入一定体积的１种不同 １
际应用的可行性，选择 ８％乙醇作为提取溶剂。 ０
表１ 提取溶剂选择试验结果
提取 溶剂 欧前胡 素含量
正 己烷 石油醚
乙醚
氯仿
醋酸
乙酷
丙酮
甲醇
乙醇
８ ％ ０
７％ ０
６％ ０
乙醇
乙醇
乙醇
０８ ． ６
１ ５ ４ ． ６ １ ２ ５ ． ０ ７ ６ ． １ ２ ５ ． １５ ．
２ ２ ８ ６ ０． ４ ４ ７
Ｍ ａ Ｓｕｒ ｅ ｎ ａ ｅ ｑ
Ｆ ａｕ Ｖ ｌｅ
０
Ｐｒ Ｆ ＞
０． ０ ６ ３ ０ １３ ０． ２ ２ ３ １４ ３
０． １ １
８． ９ ３ ０． ４ ０
０． １ ２
０ ０
９
…
０
『土
１
０
６
２ ０ ０ ７ ０． １ ６ ０ ０ ３ ０ ０． ０ ５ ３
表３
因素
因素水平表
回流次数
水乎
溶剂量 （／） Ｖｇ
回流时间
（） ｈ
３ ７ ３ ２
药物分析杂志
表４
正交 验 Ｌ（） 实 表（ ３ ９４ ）
量控制的一种方法。
蛇床子中欧前胡素和蛇床子素提取与分析方法研究
杨广德 贺浪冲
（ 西安交通大学药学院 陕西 西安 ７０６ ） １０１
蛇床子为伞形科植物蛇床子（ｎ ｉ ｍ ｎｉｉ） ｓ Ｃｉｕ ｏｎ ｒＬ Ｃｓ 的干燥成熟果实。 ｄ ｍ ｅ（ ｕ ） 性辛苦温， 味苦。 中国 《 药
２８ ．
提取方式选择 取蛇床子细粉 ０２，精密称定，用 ８％ ． ｇ ０乙醇作为溶剂，分别用不同的提取方式进行
提取，滤过，定容至 １ Ｌ ０ 。离心（ ， － ｎ） Ｍ １ ＯＯ ｍ 一后过滤，准确吸取滤液 １１ ０ Ｏｒ ｉ ＇ ０Ｌ ，进样分析欧前胡素和蛇床
子素含量 （ ２。 见表 ）
表 ２提取方法选择试验结果
２ 增刊） ０３ ３（ ，２０ １ ９
后，欧前胡素和蛇床子素提取量无显著差异，考虑到在大规模生产时的成本与资源利用等因素，选择用 ６ 倍量溶剂进行提取较为合适。 在实验研究中发现，蛇床子样品回流时间越长，测得含量呈下降趋势，可能是欧前胡素和蛇床子素对
典》２０ 年版一部记载具有温肾壮阳、 ００ 燥湿， 祛风， 杀虫之功效。 欧前胡素和蛇床子素为蛇床子的主要活 性成分之一。有关蛇床子药材中定量检测通常有薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法。由于欧前胡 素和蛇床子素的不稳定性有文献报道提取效率和溶剂的关系、水提物活性成分的研究、 温度与时间对提取 蛇床子素香豆素得率、正交实验等方法。本文用不同溶剂、不同提取方法及正交实验法，较为系统地研究
由方法学研究表明，用 ＨＬ ＰＣ法测定蛇床子中欧前胡素和蛇床子素的准确度和灵敏度较高，实验操作
相对简单，适用于本文的研究。综合考虑提取溶剂的实际应用价值选用 ８％ ０ 乙醇为提取溶剂，在此提取体 系中，由于水介质对蛇床子药材的溶胀作用，有利于极性溶剂的渗入和溶出，从而提高了蛇床子中包括欧 前胡素和蛇床子素在内亲脂性成分提取率。 通过正交试验确定了最佳提取溶剂倍量、回流时间和回流次数。考察试验中，由于溶剂用量超过 ６ 倍
ｋ １
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６ ５ ４０ ．１
７ ８ ４９ ．２
生 众 今 众 １０
６ ７４ ７０ １ ６２
１０ １０ 住
欧 前 胡 素
ｋ１
４
生 众
ｋ １
６７ １３
１０ １０
５１ ．７
１１ ．６
５ 刃
蛇 床 子 素
ｋ １
７９ ７６ １７
１ ．５ ０６ １ ．７ １８ ０４ ．２ ２７ ．９
， 山 飞 〕 ，、 ， 乙 ，， ４
９４ ８６ ７５ ９７ ８４ １６
１ ｝
１６ ，４
１３１ ， １６ ，６ １８ ．１
４
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今ｊ
１１
ｒ 、
．
５２
９ ３ ３ ２ １７ ．２ ３９ ．６
了蛇床子中欧前胡素和蛇床子素的同时提取方法。 １仪器与试药
高效液相系统包括： Ｃ１Ａ ｖ色谱泵， Ｐ－０ｖ紫外检测器旧 本岛津公司） ７２ 型进样器 （ Ｌ－０Ｔ ｐ ＳＤｌＡ ｐ 和 ７５ 美 国Ｒ ｅｄｎ 公司） ＡＡＴＲ ｈｏｙｅ ； ＮＳＡ 色谱工作站 （ 天津奥泰科技有限公司） 。欧前胡素和蛇床子素对照品（ 中国药 品生物制品检定所） ；蛇床子药材 （ 西安市药材市场） ，经西安交通大学药学院生药教研室鉴定为中国药典 规定药材。色谱纯甲醇 （ 美国Ｆｓｅ 公司） ｉｈｒ ，双蒸去离子水（ 实验室自 。 制） ２ 方法与结果 ２１ 对照品溶液制备 取欧前胡素和蛇床子素对照品约 ５ｇ ． ｍ，精密称定，置于 ＩＭ 量瓶中，用甲醇溶解 ＯＬ 并定容至刻度，摇匀。精密量取上述溶液 １Ｌ Ｍ，稀释到 ＩＭ 作为对照品溶液，置于冰箱（０） ＯＬ ４ 内备用。 Ｃ ２２ 色谱条件 色谱柱： ｒｍｓＩ （ ０ｍ４６ ５ ， ． Ｋｏａｉ Ｃ８ ｍｘ． ｕ 流动相： 醇一 ７： ） 流速： ｍ． ＇ １ １ ５ ｍ， ） ｍ 甲 水（ ３ ， ００ １Ｌｍｎ， ｉ
检测波长：３２ｍ ０ｎ 。在此条件下测得欧前胡素和蛇床子素对照品及蛇床子总提物的色谱图如图 １ 所示。
ｏ ｚ
图 １ 欧前胡素、蛇床子素对照品 （）和蛇床子总提取物 （ ）色谱图 ａ ｂ １ ． 欧前胡素 ａ蛇床子素 ．
２ 增刊 ） ０３ ３（ ，２ ０
溶 超 提取３ ｉ 静 过 滤 定 至ｌ ， 心 １０ ｒ ｉ１ 社滤， 确 取 液１１ 剂， 声 ０ ｎ 置 夜， 过， 容 ＯＬ 离 （ ，０ｍｎ） ｍ。 ｍ ００ － － 后 准 吸 滤 ０ ，
Ｌ 进样分析欧前胡素Fra Baidu bibliotek蛇床子素含量（ １ 结果表明：甲 ， 见表 ） 。 醇和８％乙 ０ 醇作溶剂的提取率较高， 考虑实
１ ４ ４ ． ６ １ ５ ． １８ ．２
３ ７ ６ ． ０ ３ ７ ． ３７ ．６
３ ８ ７ ． ２ ３ １ ．
结果表明，超声和 ８％ ０ 乙醇加热回流 １，欧前胡素和蛇床子素的提取率较高，因此在含量测定中可选 ｈ 择超声法，但在工艺研究中选择回流方式。 ２９ 正交试验 表 １ ． 的结果表明８％ ０ 的乙醇回流提取率较高，因此，取蛇床子细粉 ２ｇ ０ ，采用 ３ 因素 ３ 水 平正交实验法对提取溶剂倍量、 回流时间、 回流次数进行试验研究（ ３。 表 ） 将提取液定容至 ５０Ｌ 用 Ｈ Ｌ ０ｍ， Ｐ Ｃ 法测定溶液中欧前胡素和蛇床子素含量，计算其提取率（ ４． 见表 ）
２３ 标准曲线 分别配制不同浓度的欧前胡素和蛇床子素对照品混合溶液， ． 在上述色谱条件下进行测定， 进样量为 ｌ 。以欧前胡素和蛇床子素进样量 （）对峰面积 （）进行线性拟合，欧前胡素和蛇床子素 Ｏ ｌ ａ Ｌ Ｘ Ｙ
回归方程分别为：
欧前胡素 Ｙ ０６１ ８５． ７２２ ｙ ．９８ ＝ Ｘ一１５．， ０９９ ＝ 蛇床子素 Ｙ ９８Ｘ一４４．， ＝．９３ ２１１ ＝ ９０４ ｙ ９９ ０ 结果欧前胡素在 ３ｎ －８ｎ，蛇床子素在 １６ｇ ２ｎ 范围内线性关系良 ４ｇ ０ｇ ６ ０ｎ －１０ｇ ２ 好。
９． ４ ４ ０． ４ ０
以欧前胡素和蛇床子素含量 （ 为考察指标，由表 ４中极差 Ｒ值大小显示，欧前胡素各因素作用主次 ） ％ 为 Ｂ Ａ ＞Ｃ ＞ ，蛇床子素各因素作用主次为 Ｂ Ａ Ｃ ＞ ；方差分析结果表明：Ｂ因素的影响显著性意义，以 ＞ Ａ Ｂ Ｃ 组合为佳，即用 ６ ２ ３２ 倍量 ８％ ０乙醇加热回流 ３ 次，每次 ｌｏ ｈ
２１ 方差分析 将正交试验结果（ ） Ｓ Ｓ ．０ 表４ Ａ 软件进行方差分析，结果见表５ 用 ０
表 ５ 欧前胡素：蛇床子素方差分析表
误差来源
欧前胡素
Ｄ ｏａ Ｆ Ａ ｖ Ｓ ｎ Ｓ
２ ０ ２ ７ ０． ３ ６ ０
述色谱条件下测定，平行做４ 次，平均回收率为９． ＲＤ＝２８％． ７０％； ２ Ｓ ．９
３６ 样品测定 取清热解毒口 ． 服液供试品，按所选条件进行测定，测得清热解毒口 服液中黄琴普含量为 １１１ ｍ · ‘ ． ８ Ｍ ９ ｇＬ ｏ
４ 结论
毛细管电泳法用于清热解毒口服液中黄答普含量的测定， 方法简便快捷， 分析结果的重现性、 精密度 和回收率均较好，且有效成分分离较好，口 服液中的其它成分基本不形成干扰，可作为清热解毒口 服液质
１ ７ ８ ． ２ １ １ ．
（ －， ｍ ｇ） ｇ
蛇床子 素含量
１ ７ ２ ４ ５ ５ ． ３ ． １ ３ １ ． ２ ０ ． １ ０ ． ２ １ ． ３０ ３ ８ ０ ． ５ ４ ３ ．
（ ＇｝ ｍ ８ ８ ）
２４ 精密度 取蛇床子细粉约０２， ． ． ｇ精密称定， ０乙醇超声， ｍｎ 用８％ ６ ｉ放冷定容至 ＩＭ。 ０ ＯＬ离心（ ００／ｉ） １ ０ｒｍｎ ０ 后过滤，准确吸取滤液 １１ ，重复进样 ６次，测定峰面积积分值，欧前胡素和蛇床子素的 Ｒ Ｄ ． 分 ０１ Ｌ Ｓ
别为 １ ４ ． ％和 １ ０ ２ ． ％． ６ ２５ 重现性试验：取同一份蛇床子药材 ６ 平行进行提取测定， ． 份， 求得欧前胡素和蛇床子素含量的 Ｒ Ｄ Ｓ 分别 ２ １ 和 １ ６ ． ％ ． ％． ４ ８
９
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ｒ Ｊ
蛇床子素
２ ３ ０ ９ ０． ２ ８ ０ ６ ４ ０ ０． １ ０ ４ ２ ２ ６ ９ １． ０ ８ ７ ０ ４ ４ ０． １ ３ ４
２ ０ ４ ９ ０． ０５ ８ ． ０ ７ ４ ０ ０ ２４
０． ２ ８ ４
药物分析杂志
ｍ ＂Ｌ范围内具有良 ｇ ‘ ｍ 好的线性关系。 ３ ３ 精密度测定 精密吸取浓度为０３９ ｍ ＂ 的黄琴昔对照品溶液，重复进样 ５ ． ．２６ ｍ ‘ ｇ Ｌ 次，黄答昔峰面积
Ｒ Ｄ ＝ ２４ ％，迁移时间的 ＲＤ＝０２ ％． Ｓ ．１ Ｓ ．４
３４ ．
重现性测定 精密吸取清热解毒口服液 ２ ，再加入无水乙醇 ６ ，按样品测定项下操作，样品溶 ｍ Ｌ ｍ Ｌ 液重复进样 ５ 次，测得的黄答昔浓度的ＲＤ＝３０ ％。说明该方法重现性良 Ｓ ．９ 好。 ３５ 加样回收率的测定 精密量取一定量的样品溶液 ４ ． 份，分别精密加入一定量的黄答普对照品，在上
超声 提取方法
３ ｍｉ ｍｉ ０ ｎ ６ ０ ｎ
回流提取
放置过夜
９ｍｎ ０ ｉ
—
索氏提取
１ ｈ ２ ｈ ３ ｈ
欧前胡素 含量 （） ％ 蛇床子素 含量 （） ％
１ ７ ２ ． ２ １６ ．
１ ６ ． ６ １５ ．４ ３ ９ ． ８ ３６ ．１
２６ 回收率试验 准确称取己 ． 测知含量的蛇床子样品粉末６ 份，各０ ｇ ． ，分别加入对照品溶液适量，按 １ 上述方法处理，依法测定。测得欧前胡素和蛇床子素平均回收率分别为 ９． ９． Ｒ Ｄ分别 １ １ ９ ％， ８ ９ ８ ％， Ｓ ．％ １
和 １４ ． ％． ０
２ 提取溶剂选择 取蛇床子生药， ． ７ 粉碎成细粉， 称取０ ｇ 精密称定。 ．， ２ 分别加入一定体积的１种不同 １
际应用的可行性，选择 ８％乙醇作为提取溶剂。 ０
表１ 提取溶剂选择试验结果
提取 溶剂 欧前胡 素含量
正 己烷 石油醚
乙醚
氯仿
醋酸
乙酷
丙酮
甲醇
乙醇
８ ％ ０
７％ ０
６％ ０
乙醇
乙醇
乙醇
０８ ． ６
１ ５ ４ ． ６ １ ２ ５ ． ０ ７ ６ ． １ ２ ５ ． １５ ．
２ ２ ８ ６ ０． ４ ４ ７
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０． ０ ６ ３ ０ １３ ０． ２ ２ ３ １４ ３
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表３
因素
因素水平表
回流次数
水乎
溶剂量 （／） Ｖｇ
回流时间
（） ｈ
３ ７ ３ ２
药物分析杂志
表４
正交 验 Ｌ（） 实 表（ ３ ９４ ）
量控制的一种方法。
蛇床子中欧前胡素和蛇床子素提取与分析方法研究
杨广德 贺浪冲
（ 西安交通大学药学院 陕西 西安 ７０６ ） １０１
蛇床子为伞形科植物蛇床子（ｎ ｉ ｍ ｎｉｉ） ｓ Ｃｉｕ ｏｎ ｒＬ Ｃｓ 的干燥成熟果实。 ｄ ｍ ｅ（ ｕ ） 性辛苦温， 味苦。 中国 《 药
２８ ．
提取方式选择 取蛇床子细粉 ０２，精密称定，用 ８％ ． ｇ ０乙醇作为溶剂，分别用不同的提取方式进行
提取，滤过，定容至 １ Ｌ ０ 。离心（ ， － ｎ） Ｍ １ ＯＯ ｍ 一后过滤，准确吸取滤液 １１ ０ Ｏｒ ｉ ＇ ０Ｌ ，进样分析欧前胡素和蛇床
子素含量 （ ２。 见表 ）
表 ２提取方法选择试验结果
２ 增刊） ０３ ３（ ，２０ １ ９
后，欧前胡素和蛇床子素提取量无显著差异，考虑到在大规模生产时的成本与资源利用等因素，选择用 ６ 倍量溶剂进行提取较为合适。 在实验研究中发现，蛇床子样品回流时间越长，测得含量呈下降趋势，可能是欧前胡素和蛇床子素对
典》２０ 年版一部记载具有温肾壮阳、 ００ 燥湿， 祛风， 杀虫之功效。 欧前胡素和蛇床子素为蛇床子的主要活 性成分之一。有关蛇床子药材中定量检测通常有薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法。由于欧前胡 素和蛇床子素的不稳定性有文献报道提取效率和溶剂的关系、水提物活性成分的研究、 温度与时间对提取 蛇床子素香豆素得率、正交实验等方法。本文用不同溶剂、不同提取方法及正交实验法，较为系统地研究