19.DNA复制方式探究

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第一步:在氮源为14N的培养基上生长的大肠杆菌,其DNA分子 均为14N—14N;在氮源为15N的培养基上生长的大肠杆菌,其 DNA分子均为15N—15N。用某种离心方法分离得到的结果如上 图所示,其DNA分别分布在轻带和重带上。
第二步:将亲代大肠杆菌(含15N)转移到含14N的培养基上繁殖一代 (Ⅰ),请分析:
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第三步:将第二步所得到的大肠杆菌放入含14N的培养基中培养, 得到子二代,然后提取DNA进行CsCl梯度离心,实验结果是 离心管中有2条带,即一条轻带(两条链都含14N),另一条为中 带。
【典例印证】
某校一个生物活动小组借助某大学的实验设备,对有关DNA复制 的方式进行探究,有人认为DNA是全保留复制,也有人认为 DNA是半保留复制。为了证明这两种假设,这个小组设计了下 列实验程序,请完成实验并对结果进行预测。
3.实验过程
第一步:将大肠杆菌放在含有15N的培养基中培养,获得实验用 的亲代细菌,使亲代的DNA双链都标记上15N(两条链均为重 链),提取DNA进行CsCl梯度离心,结果只有一条重带。
第二步:将双链均被15N标记的亲代DNA放在含14N的培养基中生 长,让其再繁殖一代,取子代的DNA进行CsCl梯度离心,实 验结果显示离心管中出现一条中带(一条链含15N,另一条链含 14N)。
(2)有人提出:第一代(Ⅰ)的DNA用解旋酶处理后再离心,就能直 接判断DNA的复制方式,如果轻带和重带各占1/2,则一定为 半保留复制。你认为此人说法是否正确?_______。原因是 _________________________________________________。
源自文库
(1)实验步骤:
(2)弥散复制模型:亲代DNA双链被切成双链片段,而这些片段 又可以作为新合成双链片段的模板,新、老双链又以某种方式 聚集成“杂种链”。
(3)半保留复制:在复制过程中,原来双螺旋的两条链并没有被 破坏,它们分成单独的链,每一条旧链作为模板再合成一条新 链,这样在新合成的两个双螺旋分子中,每个分子中都有一条 旧链和一条新链。
【理论指导】
1.实验方法
探究DNA复制的方式,采用的是同位素示踪技术和离心处理, 根据试管中DNA的分布位置确定复制方式。
2.有关DNA复制方式的推测
(1)全保留复制模型:作为模板的DNA的两条母链分开,分别复 制形成两条DNA子链,此后两条母链彼此结合,恢复原状,新 合成的两条子链彼此互补结合形成一条新的双链DNA分子。
(1)实验步骤: 第一步:在氮源为14N的培养基上生长的大肠杆菌, 其DNA分子均为14N—14N;在氮源为15N的培养 基上生长的大肠杆菌,其DNA分子均为15N—15N。 用某种离心方法分离得到的结果如上图所示,其
DNA分别分布在轻带和重带上。 第二步:将亲代大肠杆菌(含15N)转移到含14N的培养基上繁殖一代
(Ⅰ),请分析: 如果DNA位于________带位置,则是全保留复制;如果DNA位于
________带位置,则是半保留复制。
第三步:为了进一步验证第二步的推测结果,将亲代大肠杆菌(含 15N)转移到含14N的培养基上连续繁殖两代(Ⅱ),请分析:
如果DNA位于________带位置,则是全保留复制;如果DNA位 于________带位置,则是半保留复制。
如果DNA位于_1_/2_重__和_1_/_2轻___带位置,则是全保留复制;如果DNA 位于___全_中____带位置,则是半保留复制。
第三步:为了进一步验证第二步的推测结果,将亲代大肠杆菌(含 15N)转移到含14N的培养基上连续繁殖两代(Ⅱ),请分析:
如果DN如A果位DN于A_的_1复/_4_重制_和方__3式_/4为_轻_全_保带留位复置制,,则则一是个全亲保代留(15复N—制15;N)如的大果肠DNA 位于杆_1_菌/_2转中__移和_到1_/_含2_轻1_4N_的带培位养置基,上则繁殖是一半代保,留子复代两制个。DNA分子是:一
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