最新化学发光免疫检测
化学发光免疫测定
时间分辨荧光法 消除样品背景干扰的另一种方法是时间分辨荧 光法。样品背景的荧光寿命一般为10ns，而镧 系鳌合物的荧光寿命一般为10-100μs。且斯托 克斯位移较大，很适用于时间分辨法进行测定。
时间分辨荧光免疫原理图
（Time-resolved Fluorescence Immunoassay）
3 化学生物发光免疫分析法的特点 （1）优点： 高灵敏度 宽的线性范围 分析速度快 高选择性 高稳定性 花费少 所用试剂无毒 消除放射性同位素的污染。
（2）缺点： 实验结果的重复性方面存在一定问题 发光免疫测定是一种瞬时的化学反应 免疫反应中各种因素的干扰 氧化反应中各种因素的干扰 对催化反应原理有的还不十分清楚，对 实验的反应条件不易控制，干扰现象不 易估计和说明。
2. 发光标记物 （1）发光反应中消耗掉的标记物 a．Luminol及其衍生物 Luminol偶联于配体后，其发光效率较低 Isoluminol及其衍生物被广泛应用 Luminol的氨基取代导致Ф降低 Isoluminol的氨基取代导致Ф增加 此类标记可用于各种分析物，但CL需催化 剂，因此有较高的背景信号。
荧光免疫分析法优点： 消除放射性同位素的污染 稳定性较好 缺点： 高的背景光，限制了灵敏度 干扰测定
三．化学发光免疫分析法 这种分析方法既有发光检测的高灵敏度，又有免 疫分析法的特异性。 1．主要发光体系 鲁米诺，异鲁米诺及其衍生物 焦焙酚 光泽精 吖啶酯 1，2-双氧基化合物 过氧化草酸酯 萤火虫发光体系 细菌发光体系
3 酶免疫分析法
用酶标记抗原或抗体 例：酶联免疫法测定氯霉素 微量反应板——羊抗兔IgG抗体 兔抗氯霉素抗体+氯霉素酶结合物 +氯霉素样品 没有结合的酶结合物被洗去，再向相应孔中加入 过氧化氢和邻苯二胺，作用一定时间后，结合后的酶 结合物将无色的邻苯二胺转化为蓝色的产物，加入终 止液后颜色由蓝变黄，用波长450nm（双波长时最适 参考波长≥600nm）酶标仪进行检测，吸光值与样品 中氯霉素含量成反比。 酶不稳定、光度分析线性范围窄
免疫发光常见检测项目
免疫发光常见检测项目免疫发光是一种用于检测生物体中特定分子的方法，利用特定的抗体结合目标分子后，再结合荧光素酶等酶促发光物质产生荧光或发光信号，通过测量光信号的强度来判断目标分子的存在与浓度。
免疫发光技术已经广泛应用于医学诊断、生物学研究和药物筛选中，以下是免疫发光常见的检测项目：1. 甲型肝炎病毒(HAV)抗体检测：使用免疫发光法检测患者体内是否存在甲型肝炎病毒抗体，用于诊断甲型肝炎和评估疫苗免疫效果。
2. 丙型肝炎病毒(HCV)抗体检测：通过检测丙型肝炎病毒抗体来判断患者是否感染了丙型肝炎病毒，用于早期诊断和治疗监测。
3. 人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体检测：利用免疫发光技术检测患者体内是否存在HIV抗体，用于早期发现HIV感染并进行防治工作。
4. 乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原检测：用于检测患者体内是否存在乙型肝炎病毒表面抗原，用于早期诊断和治疗监测。
5. 梅毒螺旋体特异抗体检测：通过检测患者体内梅毒螺旋体特异抗体来判断是否感染了梅毒，用于早期发现和诊断。
6. 甲亢相关抗体检测：用于检测患者体内是否存在与甲状腺功能亢进相关的抗体，帮助诊断和评估甲亢的程度。
7. 进展性多灶性白质脑病相关抗体检测：通过检测患者体内特定的抗体，帮助早期诊断进展性多灶性白质脑病。
8. 自身免疫性肝炎相关抗体检测：利用免疫发光技术检测患者体内是否存在与自身免疫性肝炎相关的抗体，帮助早期诊断和治疗选择。
9. 甲状腺自身抗体检测：通过检测患者体内存在的甲状腺自身抗体，帮助诊断自身免疫性甲状腺疾病。
10. 类风湿因子检测：通过检测抗体类风湿因子的存在来诊断类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。
11. 癌胚抗原(CEA)检测：用于检测患者体内是否存在癌胚抗原，用于早期诊断以及治疗效果的监测。
12. 前列腺特异抗原(PSA)检测：通过检测前列腺特异抗原的存在来筛查和诊断前列腺癌。
以上是免疫发光常见的检测项目，通过检测特定分子的存在和浓度，免疫发光技术为临床医生提供了快速、准确、灵敏的检测手段，对于疾病的早期诊断、治疗效果的监测以及临床研究具有重要意义。
免疫发光常见检测项目
免疫发光常见检测项目免疫发光技术（immunofluorescence）是一种常见的免疫检测方法，广泛应用于生物医学研究和临床诊断中。
免疫发光检测项目包括许多常见的检测目标和应用领域，下面将介绍一些典型的项目。
1.抗核抗体（ANA）检测：ANA是自身免疫疾病的重要标志物，如系统性红斑狼疮。
ANA检测通过检测体液中的抗核抗体，能够帮助医生诊断自身免疫疾病并评估疾病的严重程度。
2.甲状腺抗体检测：甲状腺抗体（抗甲状腺球蛋白抗体和抗甲状腺过氧化物酶抗体）的检测用于甲状腺自身免疫疾病的诊断，如自身免疫性甲状腺炎和Graves病。
3.肾炎相关抗体检测：包括抗肾小球基底膜抗体、抗肾小管基底膜抗体和抗核细胞抗体等，是诊断肾炎和相关疾病的重要依据。
4. I型和II型糖尿病抗体检测：I型糖尿病是自身免疫性疾病，I型糖尿病患者体内可出现胰岛β细胞相关的抗体，如抗胰岛细胞抗体和抗谷氨酰-tRNA合成酶抗体。
II型糖尿病患者体内不产生这些抗体。
5.抗神经元抗体检测：用于诊断神经免疫性疾病，如抗NMDA受体脑炎、抗VGKC复合物抗体相关性脑炎等。
6.单克隆蛋白（M蛋白）定量检测：单克隆蛋白（monoclonal protein）是指由单个淋巴细胞克隆产生的一类异常免疫球蛋白。
定量测定血液中的M蛋白水平，可用于诊断多发性骨髓瘤、类白血病及其他与异常免疫反应相关的疾病。
7.性激素检测：通过检测血液中的性激素水平，可以帮助诊断和评估不孕症、性发育异常、多囊卵巢综合征等与性激素水平异常相关的疾病。
8.传染病相关抗体检测：包括乙肝病毒表面抗体、乙肝病毒核心抗体、丙肝病毒抗体等，用于诊断和监测乙、丙肝等传染病。
9.肿瘤标志物检测：包括癌胚抗原（CEA）、前列腺特异抗原（PSA）、癌细胞血清抗原（CA125）等常见的肿瘤标志物检测，可用于肿瘤早期筛查、诊断和预后评估。
10.抗感染性疾病抗体检测：如HIV抗体检测、梅毒抗体检测、布鲁氏菌抗体检测等，用于感染性疾病的诊断和筛查。
化学发光免疫检测操作流程
化学发光免疫检测操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!化学发光免疫检测操作流程免疫学化学发光法（CLIA）是一种高灵敏度、高特异性的免疫检测技术，已广泛应用于临床诊断、生物医药和科学研究领域。
免疫荧光层析法 化学发光
免疫荧光层析法化学发光免疫荧光层析法（Immunofluorescence Assay，简称IFA）和化学发光（Chemiluminescence）是两种常用的检测技术，广泛应用于生物医学研究、临床诊断和生物工程等领域。
本文将介绍这两种技术的原理、步骤和应用，以及它们之间的区别和优缺点。
免疫荧光层析法是一种利用抗体与特定抗原结合后可发出荧光信号的检测方法。
它的原理是将标记有荧光染料（如荧光素）的抗体与待检样品中的目标抗原结合，形成免疫复合物。
通过荧光显微镜观察，可以检测到目标抗原的存在与否。
这种方法具有高灵敏度、高特异性和无需放射性标记物的优点，被广泛应用于病原微生物的检测、抗体的定量和细胞蛋白的定位等研究领域。
化学发光是一种利用化学反应产生的光信号来检测目标物质的方法。
它的原理是将待检样品中的目标物与标记有化学发光底物的抗体结合，形成免疫复合物。
当加入特定的激发剂后，底物会发生化学反应，产生可见的光信号。
通过光电倍增管或摄像机的检测，可以定量地测量化学发光强度，从而判断目标物的含量。
化学发光方法具有高灵敏度、宽线性范围和较低的背景信号等优点，因此在临床诊断和生物工程领域得到广泛应用。
免疫荧光层析法和化学发光在实验步骤上存在一些差异。
免疫荧光层析法的步骤包括样品制备、抗体标记、免疫反应、洗涤和显微镜观察等。
而化学发光的步骤则包括样品制备、抗体标记、免疫反应、洗涤和化学反应等。
两种方法的原理都是基于抗体与抗原的特异性结合，但在标记物和检测信号的产生上有所不同。
免疫荧光层析法和化学发光在应用上也存在一些差异。
免疫荧光层析法常用于检测细胞表面标记物、病原微生物和抗体等，广泛应用于免疫学研究和临床诊断。
而化学发光常用于检测肿瘤标志物、药物残留和基因表达等，被广泛应用于药物研发和生物工程领域。
两种方法在不同领域有着各自的优势和适用范围。
总的来说，免疫荧光层析法和化学发光是两种常用的生物分析技术，具有高灵敏度、高特异性和广泛应用的特点。
化学发光免疫分析
3
在血循环中，约99.5%的T3与TBG结合，但T3与TBG的亲和力明显低于T4；T3不与TBPA结合
参考范围：0.58—1.62 ug/dL 临床意义： T3升高：⑴见于甲状腺功能亢进的病人，轻型甲亢、早期甲亢、亚临床甲亢的变化较T4明显，适合轻型甲亢、早期甲亢和亚临床甲亢以及甲亢治疗后复发的诊断；T3型甲亢仅有T3和FT3升高； ⑵与T4一样，T3亦受TBG变化影响，但受影响程度不及T4。 T3降低： ⑴仅于较重甲状腺功能减退的病人，T3和T4均下降，轻型甲减T3不一定下降； ⑵重症全身性疾病状态或慢性病变可导致T3下降，多见于慢性肾功能不全、慢性心功能不全、糖尿病、心梗等疾病的患者。
参考范围：5.0—14.5ug/dl（CENTAUR） 临床意义： T4升高：⑴见于甲状腺功能亢进的病人，但轻型甲亢、早期甲亢、亚临床甲亢的变化未如T3明显； ⑵凡引起TBG升高的因素均可使T4升高，如妊娠、应用雌激素、葡萄胎、淋巴瘤、血卟啉病等；⑶药物如胺碘酮、含碘造影剂、β受体阻断剂、奋乃近、海洛因等 T4降低： ⑴见于甲状腺功能减退的病人，轻型甲减、亚临床甲减的变化较T3明显； ⑵缺碘性甲状腺肿可见T4降低或在正常低限，而T3正常； ⑶肾病综合征、肝功能衰竭、遗传性TBG缺陷症、肢端肥大症、重症全身性疾病状态等；⑷以及应用糖皮质激素、雄激素、生长激素、苯妥英钠等药物
血清FT3和FT4降低： ⑴甲减病人两者皆下降，但轻型甲减、甲减初期多以FT4下降为主；⑵低T3综合征仅有FT3下降； ⑶某些药物，如苯妥英钠、多巴胺、糖皮质激素也可使FT3和FT4降低。
临床意义：
T3、T4均升高：高TBG血症、甲亢、甲状腺激素不敏感综合征。 T4升高，T3正常或下降：家族性白蛋白异常性高T4血症；胰高血糖素瘤；药物普萘洛尔、胺碘酮、胆囊造影剂；全身性疾病、精神性疾病；苯丙胺成瘾；T4型甲亢、甲亢伴T4转换T3障碍。 T4正常，T3升高：T3型甲亢；甲减用T3或者其他甲状腺激素制剂替代治疗后 T4正常，T3下降：患有全身性疾病时；5’单脱碘酶活性下降；血皮质醇升高的各种情况；营养不良综合征。 T4下降、T3升高：医源性甲亢；甲状腺功能正常病人服用甲状腺激素制剂。 T4下降，T3正常：轻至中度甲减；碘缺乏；苯妥英钠、卡马西平。 T3和T4均下降：中至重度甲减；重症全身性疾病；低TBG血症；大剂量使用水杨酸制剂
临床免疫检验：直接化学发光免疫分析
胰岛素 C-肽 肌红蛋白 肌钙蛋白
思考题
LOGO
1.直接化学发光免疫分析的原理是什么？方法类型有哪些？ 2.常用的直接化学发光剂是什么？
小结
01
直接化学发光免疫分析的检测原理
02
直接化学发光免疫分析的方法类型
03 直 接 化 学 发 光 免 疫 分 析 的 关 键 技 术
04
直接化价
活化吖啶酯可直接标记抗 原或抗体，结合物稳定， 不影响吖啶酯发光效率及
抗原或抗体免疫活性
吖啶酯具有化学发光反应 简单、快速，发光本底较 低，无需催化剂等优点
02 01
LOGO
固相载体采用纳米磁性微球
03
可增大包被面积，加快反应
“分离-洗涤”简便、快捷
吖啶酯发光为瞬间发光，持
04
续时间短，对信号检测仪的
灵敏度要求较高
临床应用
激素
甲状腺激素 生殖激素
肾上腺激素 垂体激素
治疗药物监测
茶碱 地高辛 环孢素 巴比妥
贫血因子
维生素B12 叶酸
红细胞叶酸 铁蛋白
过敏性疾病
总lgE 特异性lgE
肿瘤标记物
AFP CEA PSA CA19-9
骨代谢
骨胶原酶 脱氧吡啶啉
LOGO
病原体血清 标志物
HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb
现对超微量物质的定量分析方法
化学发光剂
LOGO
化学发光免疫分析使用的发光剂是吖啶酯
方法类型
LOGO
夹心法
1
间接法
2
竞争法
3
检测原理
LOGO
发光标记物的制备
LOGO
化学发光微粒子免疫检测法
化学发光微粒子免疫检测法
化学发光微粒子免疫检测法（Chemiluminescent Micro-
Particle Immunoassay，CMIA）是一种常用的免疫分析技术。
它结合
了生物技术和化学技术，可快速、敏感、特异地检测多种分子，包括
蛋白质、抗体、激素、细胞因子等。
CMIA的原理是将待检测物（如血清中的某种蛋白质）与特异性结合该蛋白的抗体标记的化学发光微粒子结合，形成固相免疫复合物。
然后加入激发化学发光作用的底物，使该微粒子发出光信号。
根据光
信号的强度来定量检测待检测物的浓度。
CMIA具有以下优点：1）灵敏度高，检测下限可达到pg/ml级别；2）特异性好，可以将同类标记物分别检测；3）操作简便，无需专业
培训即可进行；4）试剂稳定性好，不受温度、湿度等环境因素的影响。
CMIA目前已广泛应用于临床检测中，例如检测乙肝表面抗原、
HIV抗体、丙型肝炎病毒抗体等。
免疫发光常见检测项目
免疫发光常见检测项目
免疫发光技术是一种将光信号与免疫分析融为一体的标记免疫分析技术，具有快速、简便、灵敏、特异等特点，现已广泛应用于各种激素、肿瘤标志物、药物及其他微量生物活性物质的测定。
以下是免疫发光常见的一些检测项目：1.维生素B12、叶酸、铁蛋白等含量：这些成分在贫血诊断
中具有重要意义。
2.肿瘤标志物：如甲胎蛋白、癌胚抗原、前列腺特异性抗原、
游离前列腺特异性抗原、糖类抗原19-9等，有助于诊断原发性肝癌、前列腺癌、胰腺癌、直肠癌等。
3.感染相关检测：如衣原体抗原、弓形体IgG抗体、弓形体
IgM抗体、风疹病毒IgG抗体、风疹病毒IgM抗体、巨细胞病毒IgG抗体、巨细胞病毒IgM抗体、乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝核心抗体等的含量，有助于诊断是否有乙肝病毒、风疹、弓形虫等感染。
4.糖尿病相关检测：如胰岛素等，有助于鉴别糖尿病类型。
5.心血管疾病相关检测：如肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、肌
红蛋白、肌钙蛋白等，有助于诊断心肌疾病，如急性心肌梗死、病毒性心肌炎等。
请注意，以上信息仅供参考，具体检测项目应根据临床需求和具体情况来确定。
免疫化学发光检验项目
免疫化学发光检验项目
免疫化学发光（Immunochemiluminescence，ICL）检验是一种常用的免疫测定技术，通过测量化学发光信号的强度来定量测定样品中的生物分子。
免疫化学发光检验项目广泛应用于临床诊断、药物研发和生命科学研究领域。
免疫化学发光检验项目包括但不限于以下几个方面：
1. 抗体测定：通过检测特定抗体的存在或水平来诊断某些疾病。
例如，乳腺癌标志物CA15-3、甲状腺功能相关抗体（TPO-Ab、TG-Ab）、乙肝病毒表面抗原（HBsAg）等。
2. 药物测定：检测药物在体内的浓度，用于药物治疗的监测和调整剂量。
常见的药物测定项目包括抗生素、抗抑郁药物、免疫抑制剂等。
3. 激素测定：检测体内激素水平的变化，用于诊断内分泌疾病。
常见的激素测定项目包括性激素（雌激素、孕激素等）、甲状腺激素（T4、T3、TSH等）、肾上腺皮质激素（皮质醇等）等。
4. 微量元素测定：测定体内微量元素的水平，用于评估人体营养状况和某些疾病的诊断。
常见的微量元素测定项目包括钙、铁、锌、镁、铜等。
5. 肿瘤标志物测定：通过检测肿瘤标志物的水平来筛查、诊断和监测肿瘤的发展。
常见的肿瘤标志物测定项目包括癌胚抗原
（CEA）、前列腺特异性抗原（PSA）、甲胎蛋白（AFP）等。
6. 受体测定：测定体内受体的水平，用于研究受体与相关疾病的关系以及药物研发。
常见的受体测定项目包括雌激素受体（ER）、雄激素受体（AR）等。
总之，免疫化学发光检验项目广泛涉及了多个医学领域，通过对特定生物分子的定量检测，可以为临床诊断、疾病监测和药物治疗提供有力的支持。
化学发光免疫检测
吖啶酯
CH3 N+ HO2
CH3 N
CH3 N
O
O
C O
C O O
+ CO2+ 光
O O C O
R
R
吖啶酯发光
代表仪器：拜耳公司的ACS180 西门子的ADVIA Centaur 雅培的ARCHITECT
异鲁米诺发光
原理： 发光过程和原理与吖啶酯完全相同，但激发发光速度更
快，在3秒内完成整个过程，测试速度最快，而且克服了吖啶酯
三联毗啶钌 分子结构图
N N
O O N N Ru N N O O N
电化学发光反应原理
这一过程可在电极表面周而复始地进行， 产生许多光子，使光信号增强
底物：三联吡啶钌[Ru(bpy)2+3]、三丙胺(TPA)
电化学发光
代表仪器：罗氏e601、e411
进口全自动化学发光仪
仪器型号
生产厂家 反应原理
cobas® e601 ARCHITECT® i 2000 SR
罗氏 电化学发光 雅培 化学发光微 粒子 吖啶酯衍生 物 直接发光
Unicel® DxI800
贝克曼 微粒子酶促 化学发光 金刚烷 AMPPD AKP，酶促发 光 常规单克隆 Ag/Ab包被 400T/H
LIAISON
索灵 磁性微粒子 化学发光 异鲁米诺衍 生物ABEI 直接发光
1. 酶促化学发光
代表仪器：迈瑞CL-2000i、安图Autolumo A2000
2. 直接化学发光
不需催化剂，只需改变溶液的pH等条件就能发光的物质
1
反应迅速
2
背景低
3
信比高
吖啶酯化学发光
• 吖啶酯在含H2O2的强酸、强碱激发底物的作用下，快速发出可见， 特点 • 发光过程在5秒内完成，激发发光程序简单，测试速度快，但发光标 记物吖啶酯在缓冲液中不稳定，易水解，影响试剂稳定性。
免疫化学发光检测项目参考值及临床意义(精)
免疫化学发光检测项目参考值及临床意义甲状腺功能检测甲状腺功能检测包括FT3、FT4、TSH、抗-TG、抗TPO项目。
正常参考值：FT3：1.20-4.20 pg/mlFT4：0.72-1.72 ng/dlTSH: 0.35-5.5 uIU/ml抗-TG：< 60 U/ml抗TPO:< 60 U/ml临床意义：重症肌无力及部分正常妇女，不明原因的抗TPO持续升高疑似自身免疫甲状腺炎个体，非淋巴浸润性甲状腺机能亢进，以及TG检测中用TG-自身抗体排除干扰。
尽管同时测定其他甲状腺抗体（抗TPO，TSH-受体抗体）可增加检测敏感性，但正常结果也不能排除自身免疫疾病的存在。
抗体测定浓度与疾病的临床疾病活动状态无关。
③抗TPO抗体升高可见于90%的慢性淋巴性甲状腺炎以及70%的突眼性甲状腺肿患者。
本试验与其他抗甲状腺抗体测定方法，如抗TG、抗TSH受体抗体同时测定可提高敏感性，但正常结果不能排除自身免疫病的可能性。
糖尿病检测血清胰岛素(Insulin)胰岛素是人体内降低血糖的主要激素，测定血清胰岛素是糖尿病诊断和分型的参考指标，也是胰岛瘤诊断、疗效观察和预后判断的指标。
正常参考值：空腹3.0-28.0 mU/ml，0.5-1h可达基础值5-10倍，2h<30mU/ml，可降至空腹水平。
临床意义：①生理性增高：进食或静脉输注葡萄糖后、妊娠、单纯性肥胖等。
②病理性增高：(1)胰岛素分泌功能亢进，如胰岛素瘤、某些胰腺增生性疾病等。
(2)非胰岛素依赖性糖尿病(Ⅱ型糖尿病)，由于血糖升高，刺激机体Ins代偿性分泌增加。
(3)非特异性增多，如肢端肥大症、肝硬化、甲亢等。
③病理性降低：(1)胰岛素分泌功能不足，如胰岛素依赖性糖尿病(I型糖尿病)。
(2)某些损伤胰岛素分泌功能的胰腺疾病，如弥漫性胰腺炎等。
血清C肽测定(C-peptide)C－肽与胰岛素系从胰岛素原分裂而成的等分子肽类，不被肝脏酶灭能，其半寿期为10～11分钟，故其血中浓度可更好地反映胰岛β细胞储备功能。
免疫化学发光全套检查项目及临床意义（附参考数值）
免疫化学发光全套检查项目及临床意义（附参考数值）展开全文化学发光免疫分析技术发展于上世纪90年代，通过对标记的化学发光物质发光的控制及测量，检测相应的生物标志物，因具有灵敏度高、检测快速、试剂稳定无生物毒性、易全自动等特点，成为免疫分析技术中最具发展前景的发光之一，在许多疾病的临床诊断中具有重大意义。
本文整理化学发光临床常见的检测项目、临床意义及参考范围，不足之处敬请指正。
一、甲状腺功能1、总三碘甲状腺原氨酸（Tot T3）临床意义：Tot T3是判断甲状腺功能亢进首选指标之一，对甲状腺功能紊乱进行确诊。
增高：Grave 病，大多数是由于甲状腺机能亢进引起（特发性T3型甲亢、新生儿一过性甲亢、亚急性甲状腺炎、TBG、白蛋白增高时、地方性缺碘甲状腺肿、服用外源性T3等）。
降低：原发性甲状腺机能减低（如呆小症、Hashimoto 甲状腺炎、先天性甲状腺形成异常、新生儿甲状腺机能减退症、特发性粘液性水肿等）；继发性甲状腺机能减低（如垂体功能低下、TSH单独缺乏症等）；下丘脑功能障碍、重症消耗性疾病；先天性TBG减少症；65岁以上。
参考范围 1.34～2.73 nmol/L （0.87–1.78 ng/mL）2、总甲状腺素（T ot T4 ）临床意义：增高：甲亢；妊娠、新生儿；服用雌激素和避孕药；高TBG血症；急性肝炎；服用碘时；亚急性甲状腺炎；TSH分泌性肿瘤；甲状腺激素过度使用。
降低：甲减；TSH不应症；甲状腺形成异常；母体抗甲状腺制剂的应用；TBG低下症；某些严重肝病、禁食、高热病、肾病综合症。
参考范围 78.38～157.4 nmol/L （6.09～12.23 ug/dL）3、游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）临床意义：甲亢增高，甲减降低，与病理生理相一致，不受TBG等的影响，故可诊断妊娠性甲亢，并是诊断甲亢的最佳指标。
参考范围 3.8～6.0 pmol/L （2.5～3.9 pg/mL）4、游离甲状腺素（FRT4）临床意义：甲亢、T4中毒症、恶性肿瘤等增高，甲减降低，与病理生理相一致，不受TBG等影响，是诊断甲减的最佳指标。
化学发光免疫分析技术
化学发光免疫分析技术化学发光免疫分析技术（Chemiluminescence Immunoassay，简称CLIA）是一种用于检测物质浓度的生化分析技术。
该技术利用免疫反应，在荧光底物的作用下产生可见光发射，从而实现对物质的检测和定量分析。
化学发光免疫分析技术的基本原理是将待测物与对应的抗原或抗体结合，形成免疫复合物。
然后，将荧光标记的抗体或抗原加入到体系中，与免疫复合物结合。
接下来，加入荧光底物，在适当的条件下，底物被激活，产生化学反应，释放出能量，从而形成荧光。
荧光信号可以通过荧光仪进行检测和定量分析。
荧光仪通过光电倍增管等装置将荧光信号转化为电信号，经过控制和处理，最终得到物质的浓度。
化学发光免疫分析技术的优势在于其灵敏度高。
由于发光底物的特殊性质，即使在低浓度下，也能产生明显的发光信号。
此外，化学发光免疫分析技术的特异性强，能够准确识别目标物质，避免误判。
另外，与其他传统的免疫分析方法相比，化学发光免疫分析技术反应速度快，可以在较短的时间内得到结果。
此外，操作简单，无需复杂的设备和技术，具有很高的实用性。
化学发光免疫分析技术在医学诊断中有着广泛的应用。
比如，可以用于检测血清中肿瘤标志物的浓度，从而实现早期诊断和预测疾病进展的风险。
此外，化学发光免疫分析技术还可以应用于感染性疾病的快速诊断，如艾滋病、结核病等。
此外，化学发光免疫分析技术还被广泛应用于生物制药工业中的药物分析。
在食品安全领域，也可以利用化学发光免疫分析技术检测食品中的有害物质，从而保障食品的质量安全。
总之，化学发光免疫分析技术是一种灵敏、特异、操作简单的生化分析技术。
在医学诊断、药物检测、食品安全检测等领域有着广泛的应用前景。
随着技术的不断发展和创新，化学发光免疫分析技术将进一步完善，并在更多的领域发挥重要的作用。
化学发光免疫检测原理
化学发光免疫检测原理
化学发光免疫检测原理是一种基于化学发光原理的免疫学检测方法，利用特殊的化学反应，引发荧光或化学发光反应来检测目标物质。
该方法的原理大致可分为以下几个步骤：
1. 样品制备：首先需要对样品进行前处理，如离心、稀释、提取等操作，使样品中的目标物质能够和检测试剂充分反应。
2. 免疫反应：将样品与适当的免疫试剂（如抗体、抗原等）混合，使其发生特异性的免疫反应，形成稳定的抗原-抗体复合物。
3. 发光信号产生：加入化学发光试剂（如酶标记底物）并激活，当化学发光试剂与抗原-抗体复合物结合时，能够引发荧光或化学发光反应产生发光信号。
4. 信号检测与分析：利用检测仪器（如光度计、荧光分析仪）检测发光信号的强度，并对其处理和分析，以确定目标物质的存在及其浓度等信息。
化学发光免疫检测原理具有灵敏度高、特异性好、快速、简便等优点，广泛应用于医学、环境、食品等领域的疾病诊断、病原微生物的检测、污染物的监测等方面。
免疫化学发光检测实验的基本流程
免疫化学发光检测实验的基本流程示例文章篇一：《免疫化学发光检测实验的基本流程》免疫化学发光检测实验，这听起来是不是超级高大上？其实呀，只要我们一步一步来，就会发现它并没有那么难。
我记得有一次，我跟着老师去实验室看这个免疫化学发光检测实验。
一进去，就看到好多瓶瓶罐罐，还有各种仪器。
老师旁边站着几个大哥哥大姐姐，他们都特别认真。
首先呢，样本的准备是很关键的一步。
就像我们做菜得先把食材准备好一样。
我们要检测的样本可能是血液、尿液或者其他体液。
比如说血液样本，要先采集好血液，这采集过程可不能马虎。
就像从树上摘果子，得小心翼翼的，不然果子破了或者没摘好就不行了。
采集好血液后，还得对它进行处理。
有的时候要离心，就是把血液放在一个小管子里，然后放在离心机里转呀转。
这就好比是把混在一起的沙子和石子分开，要让我们想要的东西单独出来。
大哥哥告诉我，离心的速度和时间都得控制好，不然就达不到理想的效果。
速度太快了，可能会把样本弄坏；速度太慢了，又分不出来。
接下来就是标记抗体啦。
抗体就像是一个个小侦探，专门去找那些我们想要检测的东西。
我们要给这些小侦探做个标记，这样等它们找到目标的时候，我们就能发现啦。
这标记的过程就像是给小侦探穿上一件会发光的衣服。
大姐姐拿着那些装着抗体的小瓶子，小心翼翼地往里面加各种试剂，一边加还一边看说明书。
我就问她：“姐姐，这加多少得很精确吗？”姐姐说：“那当然啦，就像我们做饭放盐，放多了太咸，放少了没味道，这里面加试剂也是这个道理。
”然后就是反应阶段啦。
把标记好的抗体和样本放在一起，让它们充分地混合反应。
这个时候呀，那些被标记的抗体就开始在样本里找它们的目标啦。
我看着那些小管子里的液体，就想象着里面有好多小侦探在忙碌地工作。
这个反应的时间也很重要呢，不能太短，太短了可能还没找到目标；也不能太长，太长了可能会有其他不好的反应。
就像我们跑步，跑的时间太短达不到锻炼的效果，跑太久了又会太累甚至受伤。
再之后就是分离和洗涤啦。
化学发光法检测传染病
HBsAb
10 mIU/mL
(-/-)20/20
12.05%
10 mIU/mL
(-/-)20/20
7.45%
HBeAg
1# ≥1:64 2# ≥1:128 3# ≥1:32
(-/-)15/15 (+/+)9/10
12.04%
1# ≥1:64 2# ≥1:128 3# ≥1:32
(-/-)15/15 (+/+)10/10
方法学 项目
传统酶免法
微粒子发光法
分析敏感度
特异性
精密度
分析敏感度
特异性
精密度
HBsAg
adr 0.1IU/mL adw 0.1IU/mL ay 0.2IU/mL
(-/-)20/20 (+/+)3/3
13.21%
adr 0.1IU/mL adw 0.1IU/mL ay 0.2IU/mL
(-/-)20/20 (+/+)3/3
通过整体系统优化，进一步扩大阴阳反差，使结果判读泾渭分明。
添加标题
包被和标记实现双特异，以降低假阳性率，并提高分析敏感度。
添加标题
1、酵母真核表达抗原，高效减少灰区标本 eg: E.coli与Pichia pastoris 检测国标
国标品 表达载体
雅培 免疫项目
全自动、管式、直接化学发光法 --------------特异性强、性能稳定 超长时间无人值守 试剂区15个试剂位， 样本区12 ╳ 12 = 144 个样本位 码垛区一次性装载720个反应杯 测试中可随时添加，随时替换
01
真正的急诊功能，急诊样本，随到随测。
02
化学发光免疫试验
化学发光免疫试验化学发光免疫试验CONTENTS第一节第二节第三节化学发光免疫试验基本原理常用化学发光免疫试验临床应用化学发光免疫试验基本原理抗原抗体反应高特异性化学发光剂标记高敏感性精密仪器检测光子强度信号高精密度概念化学发光免疫试验=免疫技术标记技术+发光产生过程示意图•化学发光（chemiluminescence ）是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象，由于化学反应产生电子能级处于激发态的物质，后者通过跃迁释放能量产生光子，从而导致的发光现象。
A + B→C*（发光体）C*→C + hγ间接直接A + B→C*（能量给予体）C* + D→C + D*（发光体）D*→D + hγ化学发光类型化学发光剂类型化学发光产生的条件•固相分离：➢板式、管式分离➢珠式分离：聚丙烯酰胺珠子顺磁性微粒：内含三氧化铁的聚苯乙烯小颗粒•过滤分离：标记的免疫复合物因分子量大留在过滤膜表面，游离的标记物滤过过滤膜磁微粒模式图Y常用化学发光免疫试验直接化学发光免疫试验化学发光酶免疫试验发光氧通道免疫试验•方法学评价：1. 化学反应简单、无需催化剂、快速2.AE与大分子的结合并未减少所产生的光量，从而增加灵敏度，灵敏度可达10-15g/mL3.AE标记试剂有效期长，可达一年4. 固相分离剂为极幼细的磁粉，除增大包被面积、加快反应外，亦同时使清洗及分离更简易、快捷Electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA•方法学评价：1. 标记物的再循环利用，使发光时间更长、强度更高、易于测定2. 敏感度高，可达pg/ml或pmol水平3. 线性范围宽＞1044. 反应时间短，20min以内可完成测定5. 试剂稳定性好，2~5℃可保持一年以上Luminescent oxygen channeling immunoassay, LOCI均相化学发光技术发光微粒与感光微粒结构示意图激发光680nm 发射光612nm•方法学评价：1. 感光微粒与发光微粒均匀分布在反应体系中，在分子作用力下自由运动，能更快速、充分的完成免疫反应，所以光激化学发光的免疫反应时间更短2. 由于反应原理的特殊性，整个反应过程稳定，不易受到pH值、离子强度和温度的影响3. 检测灵敏度更高。
2024年化学发光免疫诊断市场需求分析
2024年化学发光免疫诊断市场需求分析引言化学发光免疫诊断是一种基于免疫学反应原理，利用化学发光技术进行检测的诊断方法。
随着现代医疗水平的提高和人们对于疾病诊断的需求增加，化学发光免疫诊断在临床应用中扮演着重要的角色。
本文将对化学发光免疫诊断市场需求进行分析，以揭示其发展前景和潜在机遇。
市场需求分析1. 快速、准确诊断的需求化学发光免疫诊断具备快速、准确的特点，可以在短时间内完成疾病检测。
随着人们生活节奏的加快，对于快速诊断的需求也日益增长。
化学发光免疫诊断的高准确性能够帮助医生更准确地判断病情，及时采取治疗措施，满足了人们对于健康的追求。
2. 慢性病筛查的需求随着老龄化人口的增加和生活方式的改变，慢性疾病的发病率也呈上升趋势。
化学发光免疫诊断可以对一系列慢性病进行筛查，早期发现并干预疾病，从而减少疾病带来的负担。
慢性病筛查的需求将推动化学发光免疫诊断市场的发展。
3. 个性化医疗的需求个性化医疗是医学领域的重要发展方向，化学发光免疫诊断所提供的个体化检测结果，能够满足不同患者的治疗需求，提高治疗效果。
随着个性化医疗的概念逐渐深入人心，化学发光免疫诊断市场将会迎来更多机遇。
4. 疫情防控的需求近年来，全球范围内出现了多次传染性疾病暴发，如SARS、禽流感、新冠肺炎等。
化学发光免疫诊断技术可以用于疫情的早期筛查，迅速诊断出感染者，帮助及早隔离和治疗。
疫情防控的需求将推动化学发光免疫诊断的市场需求。
5. 医学科研的需求化学发光免疫诊断技术具备高灵敏度、高通量等特点，广泛应用于医学科研中。
科研人员利用化学发光免疫诊断技术可以对疾病的发生机制进行深入研究，为新药研发和治疗方案提供科学依据。
医学科研的需求将促进化学发光免疫诊断技术的不断创新和发展。
发展前景和机遇化学发光免疫诊断具备快速、准确、高灵敏度等优势，受到了广大医疗机构和患者的认可。
随着人们对健康需求的不断增加，化学发光免疫诊断市场的需求也将不断扩大。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
吖啶酯
CH 3
N+
- HO 2
CO
O
CH 3 N
O CO O
R R
CH 3 N
O CO O
+ CO2+ 光
吖啶酯发光
代表仪器：拜耳公司的ACS180 西门子的ADVIA Centaur 雅培的ARCHITECT
异鲁米诺发光
原理：发光过程和原理与吖啶酯完全相同，但激发发光速度更 快，在3秒内完成整个过程，测试速度最快，而且克服了吖啶酯 在缓冲液不稳定、易水解的缺点
ADVIA Centaur
西门子 固相磁粉化 学发光
吖啶酯,直接 发光
链霉亲和素 －生物素间 接包被
170T/H
磁珠包被 200T/H
常规单克隆 磁性微粒子 磁性微粒子
Ag/Ab包被 包被技术
包被技术
400T/H
180T/H
240T/H
国产全自动化学发光仪
企业 迈瑞 安图 新产业 迈克 威高
长光华医 博奥塞斯
cobas® e601
罗氏 电化学发光
三联吡啶钌 直接发光
ARCHITEC T® i 2000 SR
雅培
化学发光微 粒子
Unicel® DxI800
贝克曼 微粒子酶促 化学发光
LIAISON
索灵 磁性微粒子 化学发光
吖啶酯衍生 物
直接发光
金刚烷 AMPPD
AKP，酶促发 光
异鲁米诺衍 生物ABEI
直接发光
AMPPD
ALP /OH —
O O OCH3
光
OHPO4
2—
1. 酶促化学发光
反应原理图
利用酶对发光底物催化作用而直接发光， 通过光强度的测定而直接进行定量。
1. 酶促化学发光
• 特点：激发发光时间长，测试速度慢，因为酶易受环境温度的影响，试剂的 稳定性不如直接化学发光好。
• 代表仪器：美国贝克曼公司的ACCESS 2、 DXI800
仪器型号
CL-2000i
Autolumo A2000
MAGLUMI 4000
IS 1200
AutolumiS 2000
EVERESYS A1800
Axceed 260
发光机制 ALP+AMPPD
HRP
测试速度 240T/H 200T/H
ABEI+NaOH、 H2O2 HRP
ABEI+NaOH、 H2O2
HRP
辣根过氧化物酶 常用的底物为鲁米诺或其衍生物
碱性磷酸酶 常用的底物为AMPPD和4-MUP
ALP
1. 酶促化学发光
鲁米诺在碱性缓冲液中被HRP催化发生氧化反应
鲁米诺
H2O2 /OH — HRP
+N2 + H2O + 光
1. 酶促化学发光
AMPPD在碱性条件下，被ALP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子， 其有2～30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续性光，在 15min时其强度达到高峰，15～60min内光强度保持相对稳定
delay 2.5s
delay 0.1s
+ NaOH
+ H2O2
激发底物1
激发底物2
发光
异鲁米诺发光
代表仪器：瑞典索灵公司的LIAISON、新产业MAGLUMI 2000/4000
电化学发光
• 是指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质 • 特点：①反应在电极进行；
②电子供体为：三丙胺（TPA） ③化学发光剂：三联毗啶钌
吖啶酯
240T/H 120T/H 220T/H
180T/H
鲁米诺衍生物 180T/H
测试项目数 20 65 95 17 42
34 35
测试题与讨论
1. 酶促化学发光是发光底物经
作用而发出光,常用的酶有：
和
。
的降解
2. 雅培ARCHITET i2000采用
标记的
标记分子，专利的
衍生物，具有更
高的发光效率以及稳定性。
三联毗啶钌 分子结构图
N
N
N
Ru
N
N
N
O O
N
O
O
电化学发光反应原理
这一过程可在电极表面周而复始地进行， 产生许多光子，使光信号增强
底物：三联吡啶钌[Ru(bpy)2+3]、三丙胺(TPA)
电化学发光
代表仪器：罗氏e601、e411
进口全自动化学发光仪
仪器型号
生产厂家 反应原理 标记物
包被方式 测试速度
化学发光免疫检测
学习目标
1. 化学发光检测的分类及原理 2. 了解常见进口、国产全自动化学发光仪检
测原理
化学发光免疫检测分类
辣根过氧化物酶（HRP） 碱性磷酸酶（ALP）
01
酶促化学发光
02
吖啶酯发光 异鲁米诺发光
直接化学发光
电化学发
光
1. 酶促化学发光
酶促反应的发光底物是指经酶的降解作用而发出光,常用的酶HRP和ALP
谢谢大家！
结束语
谢谢大家聆听！！！
22
1. 酶促化umo A2000
2. 直接化学发光
不需催化剂，只需改变溶液的pH等条件就能发光的物质
1 反应迅速
2 背景低
3 信比高
吖啶酯化学发光
• 吖啶酯在含H2O2的强酸、强碱激发底物的作用下，快速发出可见， 特点 • 发光过程在5秒内完成，激发发光程序简单，测试速度快，但发光标