肠道杆菌-志贺菌属
肠道杆菌 志贺菌属(病原生物学与免疫学课件)
所致疾病
临床表现为发热、腹痛、里急后重、粘液脓血便等。预后良好。
急性 菌痢
1
慢性 菌痢
3
中毒 菌痢
2
全身中毒症状明显，但肠道症状不明显。病 情凶险，死亡率高。
症状不典型，迁延2个月以上。
防治原则
01 早诊断、早治疗、早隔离。 02 加强饮水、食品安全
03 防蝇灭蝇，消毒排泄物 04 选用敏感抗生素志贺菌属俗称痢ຫໍສະໝຸດ 杆菌， 是人类细菌性痢疾的病 原体。
志贺菌属的分类
痢疾 志贺菌
福氏志贺菌
鲍氏志贺菌
宋内志贺菌
生物学性状
无芽 孢
革兰阴性杆菌
无荚 膜
无鞭 毛
培养特性
痢疾 志贺菌
致病性
侵袭力
内毒素
外毒素
➢菌毛：促进细菌粘附回肠末端和结肠粘膜上。 ➢内毒素：主要致病物质
内毒素血症—发热、神志障碍。 破坏肠粘膜—炎症、溃疡 、粘液脓血便 作用于肠壁植物神经系统，里急后重。 ➢外毒素：可产生志贺毒素ST，具有三 种生物学活性，肠毒性、细胞毒性、神经毒性。
肠道杆菌
completed
三、微生物学检查
1、肠外感染： 标本采集：中段尿、血液、脓液、脑脊液。 涂片革兰染色镜检 分离培养鉴定： 标本→肉汤→血平板→IMViC试验(++--) 2、肠内感染
粪便或排泄物→鉴别培养基→鉴定→肠 毒素及血清型检查
值得注意
35
（二）所致疾病
2、食物中毒
• 鼠伤寒杆菌，猪霍乱杆菌， 肠炎杆菌等污染食物引起 • 多为集体食物中毒 • 细菌一般不入血 • 潜伏期4-24h，呕吐症
常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒、鼠伤 寒及肠炎杆菌引起 症状：进入血流--高热、寒战、厌食、 贫血 进入组织器官—广泛感染，脑 膜炎、骨髓炎、胆囊炎、肾盂肾炎、 心内膜炎、
2
共同特性
4、抗原结构：菌体(O)抗原 鞭毛(H)抗原 荚膜或包膜(K)抗原 5、抵抗力：不强 6、变异：极易变异，毒力、菌落、 抗原、耐药性变异。
3
血清型表示方式： O：K：H 例： O111：K58：H2
一、大肠埃希菌
代表菌：大肠杆菌（E.coli）
正常菌群； 宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织或 器官时可引起肠外感染；某些强毒力菌 株可致肠内感染； 大肠埃希菌数被作为环境与食品卫生检 测指标。
H2S+ FeSO4 FeS 黑色沉淀 下层为含葡萄糖的蛋白胨水半固体，指示剂为酚红， 可观察细菌的动力和发酵葡萄糖的能力。 接种时用接种针挑取细菌，先由培养基的中央向下 垂直穿刺到接近管底，然后沿原线退出，再在斜面上划 线。 结果：伤寒杆菌： 1、分解葡萄糖产酸不产气 下层琼脂由红变黄，无 气泡，有动力 2、不分解乳糖 上层琼脂仍为红色 3、可产生H2S气体，试管有黑色沉淀 大肠杆菌： 1、分解乳糖、葡萄糖，产酸产气，整个糖管由红变黄， 糖管中有气泡产生，有动力 2、不产生H2S气体，无黑色沉淀
志贺菌属简介
志贺菌属简介志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。
根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。
CDC分类系统（1989）将生化性状相近的A、B、C群归为一群，统称为A、B、C血清群，将鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。
我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢-最为常见。
（一）生物学特性1.形态与染色：革兰阴性短小杆菌，（2～3）μm×（0.5～0.7）μm，无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。
2.培养特性：需氧或兼性厌氧，液体培养基中呈浑浊生长，在普通琼脂平板和SS培养基上形成中等大小、半透明的光滑型菌落，宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落医学|教育网搜集整理。
3.生化反应：志贺菌属的细菌KIA：K／A、产气-／+、H2S-，MIU：动力-、吲哚+／-、尿酶-，氧化酶-，不产生赖氨酸脱羧酶，氧化酶试验阴性。
4.抗原结构：志贺菌属只有O抗原而无鞭毛抗原，个别菌型及新分离菌株有K抗原。
（二）致病性致病物质：侵袭力：菌毛粘附于肠粘膜上皮细胞，诱导细胞内吞。
内毒素：破坏肠粘膜；肠壁通透性；肠壁植物神经——腹痛，腹泻，里急后重，粘液脓血便。
外毒素（志贺毒素，ST）：肠毒素活性；细胞毒活性；神经毒活性。
所致疾病：细菌性痢疾，简称菌痢医学|教育网搜集整理。
1.急性菌痢。
2.中毒性菌痢。
3.慢性菌痢。
传染源为病人和带菌者，经粪口传播。
（三）微生物学检验1.标本采集尽可能在发病早期及治疗前采集新鲜粪便，选择脓血便或粘液便，必要时可用肛拭子采集。
2.检验办法及鉴定（1）分离培养：取粪便（粘液或脓血部分）或肛拭标本接种GN肉汤增菌及再开展分离培养。
一般同时接种强弱选择性不一样的两个平板。
强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基（SS）；弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。
培养18～24h后选取可疑菌落开展下列鉴定。
（2）鉴定1）初步鉴定：挑选可疑菌落3～4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。
第四节 肠道杆菌
S.S.琼脂平板
其它肠道致病菌：淡 黄色半透明小菌落
大肠杆菌在双糖铁培养基中表现：
上层： 乳糖、 硫酸亚铁 下层： 葡萄糖 动力
记录：
葡萄糖 +
乳糖 +
动力 +
H2S
未接种管
大肠杆菌 生长管
—
IMViC试验
靛基质(吲哚、I)实验、甲基红(MR、M)实 验、乙二酰(VP、V)实验、枸橼酸盐利用(C) 试验的合称缩写，常用于鉴定肠道杆菌。 尤其对形态、革兰染色反应和培养特性相 同或相似的细菌更为重要(主要用于鉴别大 肠杆菌和产气肠杆菌，多用于水的细菌检 验)。
肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)
黏附素 侵袭素
肠出血性大肠埃希菌(EHEC) 1. 出血性结肠炎
溶血性尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome HUS) 2. O157:H7
3. 志贺毒素(shiga toxin,Stx) →糖脂受体 (肠绒毛和肾上皮细胞)
→终止蛋白质合成
肠出血性大肠埃希菌(EHEC)
肠杆菌科的主要代表菌
属 代 表 疾病
埃希氏菌属
大肠杆菌
肠内/外感染
志贺氏菌属
沙门氏菌属 变形杆菌属
痢疾杆菌
伤寒杆菌 变形杆菌
细菌性痢疾
肠热症 尿路感染
耶尔森氏菌
鼠疫杆菌
鼠疫
克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肺炎，气管炎 沙雷菌属 黏质沙雷菌 肺炎
发酵型
氧化型
产碱型
葡萄糖氧化发酵试验 （O-F试验）
氧化酶试验 阳性：紫红色 阴性：无色
分离培养
大肠埃希菌检验程序
分离培养 * 病料—麦康凯平板、血平板上划线分离培养—可疑菌落
志贺菌属
志贺菌属（痢疾杆菌）
志贺菌属是人类及灵长类动物细菌性痢疾最常见的病原菌，又称痢疾杆菌。
形态与染色：革兰阴性杆菌，无芽孢，无鞭毛，无荚膜，有菌毛。
培养特性：因不发酵乳糖而在肠道选择培养基上为无色透明或者半透明菌落。
抗原构造：菌体（0）抗原，无鞭毛（H）抗原，部分菌株有K抗原，
分类：根据生化反应特征，将志贺菌属分为4群:痢疾志贺菌群（A群），福氏志贺菌群（B群），鲍氏志贺菌群（C群），宋内志贺菌群（D群）。
鉴定：一般标本为粪便和肛拭子。
镜检：革兰阴性杆菌。
分离培养：将标本接与SS平板，麦康凯或伊红亚甲蓝平板，如肠道选择性平板有不发酵乳糖的无色透明或不透明菌落生长，则需要进一步鉴定。
生化鉴定：氧化酶阴性，硝酸盐还原阳性，在克氏双糖（KIA）斜面产碱，底层产酸，不产气，硫化氢为阴性，IMViC结果为-+--，MIU 为--/+-，赖氨酸脱羧酶阴性。
鉴别要点：志贺军属与肠侵袭性大肠埃希菌鉴别：在血清学上有交叉反应，生化特性相近，志贺菌分解葡萄糖产酸不产气，动力试验、赖氨酸脱羧酶、醋酸钠及黏液酸盐试验菌阴性，可与肠侵袭性大肠埃希菌鉴别。
志贺菌属与类志贺邻单胞菌鉴别：可用氧化酶、动力试验鉴别、志贺菌为阴性，后者阳性。
志贺菌属与伤寒沙门菌鉴别：可用动力试验、硫化氢和因子血清09鉴别，志贺为阴性，而沙门阳性。
肠杆菌科概述、分类与特性
3. 其中鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌对 人致病性较强。此外，许多细菌既 是正常菌群，也是条件致病菌。在 机体抵抗力下降，寄居部位的改变 或菌群失调时能引起机会感染。
肠杆菌科概述、分类和特性
二、临床意义
占临床分离菌总数的50％和Ｇ-总数的 80％, 将近50％的败血症70％以上的泌尿 道感染和大量的肠道感染是由肠杆菌科 细菌引起的。 1. 人类肠道外感染 除志贺菌较少引起肠外 感染，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产 酸克雷伯菌、奇异变形杆菌、产气肠杆 菌、阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌等均可引 起泌尿道、呼吸道、伤口和中枢神经系 统的感染;
⑵ 内毒素 具有发热、休克、DIC等病理作用。
⑶ 肠毒素 产生不耐热和耐热肠毒素两种肠 毒素：均可使肠道细胞中cAMP 的水平升高，引起肠液大量分泌 而导致腹泻。
肠杆菌科概述、分类和特性
二、临床意义 ⑵ 2. 所致疾病 ⑴ 肠道外感染 是临床分离的G-杆菌中最常见的 菌种，可引起泌尿系等各种类型的感染。 引起泌尿系感染的菌株以血清型01、 2、6为多见，本菌还可引起菌血症、 胆囊炎、肺炎及新生儿脑膜炎等。 常 见于腹腔内脓肿、肠穿孔继发腹膜炎、 肠道手术后继发感染或大面积灼伤创面 感染。
肠杆菌科概述、分类和特性
4. 培养和生化特性 营养要求不高，在普通培养基上生长
良好；兼性厌氧，主要生化特性包括发 酵葡萄糖(产酸或产酸产气)，触酶阳性, 氧化酶阴性，可将硝酸盐还原至亚硝酸 盐。 5. 抵抗力
抵抗力不强，加热60℃30min即被杀 死，不耐干燥，对一般化学消毒剂均敏 感。对低温有耐受力。能耐胆盐，能抵 抗染料的抑菌作用。
毛，能运动。致病性菌株有菌毛。 2. 抗原成分
⑴Ｏ抗原是细胞壁成分脂多糖。以核 心多糖为中心的三层结构，内侧是脂类 A, 为内毒素的毒性成分。外侧是由重复 的特异多糖，决定Ｏ抗原的特异性。
口腔执业医师基础知识：志贺菌属（痢疾杆菌）
口腔执业医师基础知识：志贺菌属（痢疾杆菌）2017口腔执业医师基础知识：志贺菌属 (痢疾杆菌)导语：志贺氏菌属(Shigella)是一类革兰阴性杆菌，是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，通称痢疾杆菌，耐寒，能在普通培养基上生长，形成中等大小，半透明的.光滑型菌落。
在肠道杆菌选择性培养基上形成无色菌落。
一、生物学性状1.形态染色：符合肠杆菌特征，有菌毛，无鞭毛，无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区别点。
2.培养特性：肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落。
3.生化反应：葡萄糖(+)、乳糖(-)(宋内志贺菌迟缓发酵乳糖)、H2S(-)、尿素(-)、动力(-)。
4.抗原分类根据O抗原分4群，40余型：①A群痢疾志贺菌(S.dysenteriae 10个血清型)②B群福氏志贺菌(S.flexneri 13个血清型)③C群鲍氏志贺菌(S.boydii 18个血清型)④D群宋氏志贺菌(S.sonnei 1个血清型)。
5.抵抗力：比其它肠杆菌弱，尤其对酸敏感。
二、致病性与免疫性致病物质：1.侵袭力：①菌毛：黏附肠黏膜上皮细胞②Ⅲ型分泌系统穿透上皮细胞并扩散、传播。
2.内毒素：强烈内毒素，作用于局部并可吸附入血引起全身症状。
3.外毒素：A群(Ⅰ、Ⅱ型)产生志贺毒素(ST)：(1)肠毒素：类似ETEC毒素、霍乱肠毒素作用水样便。
(2)细胞毒性：对人肝细胞、肠黏膜细胞有毒性，引起变性坏死。
(3)神经毒性：损伤动物神经系统(麻痹、死亡)。
所致疾病细菌性痢疾1.传染源：病人、带菌者;2.传播途径：经口;3.致病机制;4.临床类型：①急性菌痢②中毒性菌痢③慢性菌痢。
免疫力：牢固，易再感染。
三、微生物学检查与防治微生物学检查：1.分离鉴定2.毒力实验3.快速诊断：①免疫染色法②、免疫荧光菌球法③、协同凝集④、PCR。
防治：更有效的疫苗还在研制中，此菌极易出现多重耐药性菌株。
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志贺氏菌检验
志贺氏菌检验志贺氏菌属于肠杆菌科，是一种革兰氏阴性菌，会引起肠道感染，引发肠炎，当人出现连续性腹泻、腹痛等症状的时候，就需要考虑是否感染志贺氏菌。
志贺氏菌的传播途径主要是食物和水，比如沙拉、土豆、金枪鱼、虾、奶制品等，在密闭以及不卫生的条件下志贺氏菌会迅速传播，而且经常出现在人员比较密集的地方，比如餐厅、食堂等地。
食源性志贺氏菌的传播主要是因为从事食品工作的人员感染了志贺氏菌，并且将其传播到食物上所引起的，另外，保存食物的温度不当，也可能引起志贺氏菌。
志贺氏菌检验是临床上检验肠道感染疾病的一个重要途径，在检测过程中常用的方法有以下几种。
一、生化鉴定法常规的生化鉴定方法是志贺氏菌检验过程中的常用方法，需要对细菌进行增殖培养、分离、生化试验、血清学检验等步骤来完成，步骤比较繁琐，而且耗时较长，每一次一般只能检验一个样品，但是检测的结果比较准确，检测稳定性较高，假阳性率低。
二、免疫学检验方法免疫学是检验志贺氏菌最快速、准确的方法，特异性较强，而且灵敏度很高，主要的免疫学检验方法有以下几种：第一，酶联免疫法。
这种方法的灵敏度很高，而且简单快速，检测过程比较稳定，可以进行自动化操作，是志贺氏菌检测过程中最快速的一种方法。
但是，使用酶联免疫法进行检验的时候，影响检测结果的因素较多，而且假阳性率高，所以还需要采用其他的方法进行配合检验。
第二，SPA协同凝集法。
这种方法是使用已知标准血清吸附到含Ａ蛋白的金黄色葡萄球菌表面之后，让金黄色葡萄球菌成为吸附抗体的载体，再根据吸附的结果来诊断是否感染志贺氏菌的一种方法。
三、分子生物学方法分子生物学是建立在很多其他的检测技术基础上的，敏感度高、检测快速，而且特意性高，是生物技术革命的一个重要产物，目前在志贺氏菌的检测过程中十分常见。
志贺氏菌的分子生物学检测方法有以下几种：第一，聚合酶链式反应法，比如常规PCR、多重PCR法、实时荧光PCR法和恒温荧光PCR法等。
以恒温实时荧光PCR法为例，这种方法的原理是利用环介导等温扩增反应为原理进行测量的方法，灵敏度很高，与传统的荧光测量方法相比，灵敏度高出2～5个数量级，而且测量十分迅速，荧光反应的时间较短，一般30-60分钟就可以完成荧光反应。
志贺菌属标准操作规程
志贺菌属标准操作规程1.概述志贺菌属也是人类主要肠道病原菌之一。
该菌属分为4个群（种）：A群为痢疾志贺菌，B群为福氏志贺菌，C群为鲍氏志贺菌，D群为宋内志贺菌。
其中福氏志贺菌为该菌属最为常见的志贺菌。
2.标本类型粪便、肛拭子标本。
3.鉴定3.1 形态染色革兰阴性细小杆菌，大小为1um×（2~4um）。
无芽胞，无荚膜，无动力，无鞭毛，有菌毛。
3.2 培养特性在麦康凯琼脂平板上呈无色透明的小菌落；在SS琼脂平板上因不发酵乳糖而形成无色透明或半透明的较小菌落；在XLD琼脂平板上产生红色的菌落；在HE 琼脂平板上菌落呈淡绿色。
宋内志贺菌在麦康凯琼脂平板上可出现两种菌落，一种粉红色（迟发酵乳糖），另一种无色透明。
3.3 生化反应氧化酶试验阴性，TSI为K/A；发酵葡萄糖、甘露醇，不发酵乳糖、蔗糖；甲基红、硝酸盐还原试验阳性，动力、V-P、枸橼酸盐、H2S、醋酸盐试验均阴性。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌特征SS平板上无色菌落或半透明的小菌落，TSI为K/A，发酵葡萄糖，不发酵乳糖，无动力，尿素酶、H2S试验阴性。
符合上述特性者，可通过血清凝集试验作出诊断。
如血清不凝集，应进一步鉴别。
3.4.2 志贺菌属各菌种的鉴别：见表5-40。
表5-40 志贺菌属各菌种的生物学特性（阳性%）生化试验痢疾志贺菌福氏志贺菌鲍氏志贺菌宋内志贺菌ONPG 30 1 10 90鸟氨酸脱羧酶0 0 2 98乳糖0 1 1 2※甘露醇0 95 97 99海藻糖90 65 85 100吲哚45 50 25 0注：“2※”为迟缓发酵（48h以上）。
3.5操作步骤3.5.1 观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验参见三糖铁标准操作构规程。
3.5.2 血清学鉴定参见志贺菌血清学检测标准操作规程。
3.5.3 从SS琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化法进行细菌鉴定。
4. 药敏参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件。
肠杆菌科
肠杆菌科Enterobacteriaceae1.肠杆菌科：①是一大群寄居于人和动物肠道中的革兰阴性无芽胞杆菌（40种）, 常随人与动物粪便排出，广泛分布于水、土壤或腐物中。
②大多为正常菌群或条件致病菌，部分强致病菌。
2 分类：（1）埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、耶尔森菌属：胃肠道感染、增殖、引起症状（2）枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属、摩根菌属、欧文菌属、哈夫尼菌属、爱德华菌属（3）其它：肥杆菌属、致病杆菌属、克吕沃尔菌属、拉恩菌属、西地西菌属、塔特姆菌属3. 肠道杆菌的共同特性（1）形态与结构：G-杆菌，多数有鞭毛，大多有菌毛，少数有荚膜或包膜，无芽胞。
（2）培养特性：需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好，常用肠道选择培养基分离培养。
（3）生化反应：生化反应活泼，乳糖发酵试验在初步鉴别肠道致病和非致病菌时有重要意义，生化反应与致病性成反比。
（4）Ag构造：菌体（O）Ag、鞭毛（H）Ag、表面（K、Vi）Ag、粘附因子（F）Ag （5）变异现象：S-R、H-O、Ag、耐药性、毒素产生、生化反应等（6）传播方式：污染的饮水及食物、经消化道传播。
（7）致病性：菌毛、表面Ag、内毒素、肠毒素等，以肠道症状为主。
（8）抵抗力：不强，加热60℃经30分钟即死亡。
4. 肠道杆菌分离鉴定程序5.肠道选择鉴别培养基（2）其他选择鉴别培养基A. EMB(伊红美兰): 含乳糖，伊红和美蓝是抑菌剂和pH指示剂，可抑制革兰氏阳性菌，在酸性条件下产生沉淀，形成紫黑色菌落或具黑色中心的外围无色透明的菌落。
B. HE培养基：含乳糖、蔗糖和水杨素，胆盐、去氧胆酸钠、溴麝香草酚兰和酸性复红可抑制革兰氏阳性菌；硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂，发酵糖产酸的菌落呈红色，不发酵糖的菌落为蓝色。
选择鉴别培养基C. 麦康凯琼脂MacConkey：含乳糖，牛胆盐可抑制G+菌，中性红是pH指示剂，细菌发酵乳糖产酸时菌落呈粉红色，并在菌落周围出现胆盐沉淀的浑浊圈。
志贺菌
(三) 免疫性
感染后可获得一定程度的免疫力，但免疫期 短，也不稳固。这可能与菌型多以及型别间缺乏 交叉免疫有关
志贺菌属的感染主要限于肠道，细菌很少入 血。所以其抗感染免疫主要依赖肠道粘膜局部 sIgA 形成等。 sIgA 能阻止志贺菌吸附，于病后 3d左右出现，但维持时间短
三、微生物学检查法
(一) 病原菌的分离和鉴定 1.标本 存活期短，应迅速送检培养。如不能立即 培养，可放于30%甘油缓冲盐水保存液中
2.毒素 (1) 内毒素 各群志贺菌都能形成强烈的内 毒素 内毒素作用机制： * 破坏肠粘膜上皮，造成粘膜下层炎症，并 有毛细血管血栓形成，以致坏死、脱落，形成 溃疡，出现粘液脓血便 * 使肠壁通透性增高，促进毒素吸收，引起 一系列毒血症的症状，如发热、神志障碍，甚 至中毒性休克 * 作用于肠壁植物神经，使肠蠕动失调并痉 挛，尤以直肠括约肌受累明显，因而发生腹痛 、腹泻、里急后重等症状
2.分离培养与鉴定 标本接种于肠道杆菌选择培养基或鉴别 培养基上，常用S-S培养基。 37℃培养 18-24h ，取可疑菌落进行生化反应和血清鉴定，以确 定菌群和菌型
(二) 快速诊断法 1.免疫染色法 将粪便与志贺菌抗血清混匀，在显微镜观 察有无凝集现象 2.免疫荧光菌球检查法 在含有荧光素标记的志贺菌属免疫血清的 液体培养基中接种标本，培育 4-8h 后发现带有 荧光的菌球为阳性
重组活菌苗由多个型别 (或种型) 的免疫原 组成，具有广谱保护作用 ，已SPA的葡萄球菌标记志贺菌属抗体 ，测定病人粪便中或增菌培养液中细菌及其可 溶性抗原
另外，还有乳胶颗粒凝集试验和PCR检测技 术等
四、防治原则 1 早期发现、早期隔离和早期彻底治疗病人 外，查出带菌者 2 切断传染途径，包括加强粪便管理、水源 管理及食品卫生监督等
志贺菌属
鼠疫杆菌
生化反应 分解葡萄糖、甘露醇产酸不产气， 不分解其他糖；还原硝酸盐；苯丙氨酸脱氢酶、 脲酶、H2S阴性；无动力。 抵抗力 100℃ 1min 死亡，对一般消毒剂敏感， 但可耐日光1～4小时，在干燥咯痰和蚤粪中存 活数周，在冻尸中能存活4～5个月。对链霉素、 卡那霉素及四环素敏感。
二、致病性与免疫性
3. 动力不明显、H2S阴性的沙门菌的鉴别： 沙门菌继续培养后产H2S
血清学鉴定： 先与多价血清凝集
再与单价血清凝集 国内最多见的是B群,达70%以上,其次是D群,A群中除1 型（痢疾志贺菌）和2型（史密斯志贺菌）外，其余少见。
复习思考题
1. 志贺菌在SS、KIA等培养基上的生长情况
如何？与大肠埃希菌比较有何不同？
二、致病性与免疫性
致病物质：
1. 侵袭力：菌毛可粘附回肠和结肠粘膜上皮 细胞， 并侵入细胞内生长繁殖，在粘膜固有层形成感染灶引起 炎症反应。 2. 内毒素： ①作用于肠粘膜使其通透性增高，促 进内毒素吸收，形成内毒素血症（高热、意识障碍、中 毒性休克）；②直接破坏肠粘膜。形成炎症溃疡、出血， 呈典型的脓血粘液便；③还可以作用于肠壁植物神经， 使其肠蠕动失调和痉挛（直肠括约肌最明显）出现腹痛、 里急后重的症状。
培养特性 兼性厌氧，最适温度27-30；最适 PH6.9-7.7；营养要求不高。
普通平板上：生长缓慢，24h长成肉眼可见的小 菌落； 血平板上：生长良好， 28℃48小时后，长成不 透明的，不溶血，中央隆起，边缘呈花边样菌落， 为本菌的特征48h长成粗糙型菌落； 肉汤中：开始为浑浊，24h后成菌膜，48小时液 体表面形成薄菌膜，菌膜向长出下垂菌丝，呈钟乳
（二）检验程序
粪便、直肠拭子 分离培养
SS、EMB、MAC
致病性肠道杆菌
D1（O9）
伤寒沙门菌 肠炎沙门菌
9.12.Vi 1.9.12
d g.m
- -
E1 (O3．10)
鸭沙门菌
3.10
e.h
1.6
E2
纽因顿沙门菌
3.15
e.h
1.7
侵袭力 细菌能侵入小肠壁上皮细胞，并穿过上皮细胞层侵入固有层。细菌被巨噬细胞吞噬，吞噬后不被消灭，而是在巨噬细胞中繁殖，由巨噬细胞携带至机体的深层部位。这可能与该菌的特异0抗原或Vi抗原有关。已证明鼠伤寒沙门菌失去特异性O抗原后，对小鼠的致病力随之降低。此外，菌毛也与致病有关。
肠毒素 性质类似大肠埃希菌肠毒素。
致病因子
内毒素 引起体温升高、白细胞数下降。大剂量可导致中毒症候和休克。
致病性和免疫性
致病性和免疫性
所致疾病 人类沙门菌病(salmonellosis)包括： 1.肠热症：即伤寒、副伤寒，病原体是伤寒沙门菌(S．typhi)或副伤寒沙门菌(S，paratyphi)。细菌随污染的食物和饮水进入人体。发病与否，取决于侵入的菌量与人体的免疫状况。 2.急性胃肠炎或食物中毒 最常见的沙门菌病。主要由于摄入被大量(超过107个以上)鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌等污染的食物而引起。 3.沙门菌菌血症 多由猪霍乱沙门菌及丙型副伤寒沙门菌引起。儿童或有慢性疾病的成年人多发。
02
防治原则
1
沙门菌属(Salmomella)
2
种类繁多，主要有引起肠伤寒的病原菌伤寒沙门菌(S．typhi)以及甲型副伤寒沙门菌(S．paratyphi A)、乙型副伤寒沙门菌(S．paratyphi B)及丙型副伤寒沙门菌(S．paratyphi C)。
肠道杆菌
一、生物学性状
大多数大肠埃希菌有普通菌毛和性菌毛。有周身鞭毛。不 形成芽胞。革兰染色阴性。普通培养基上形成圆形隆起灰白 色菌落。
能发酵多种糖类产酸并产气。IMViC 试验是卫生细菌学 中常用的检测指标。凡能发酵乳糖产酸产气， 并IMViC试验 结果为“+、+、-、-”者是典型的大肠杆菌。
二、致病性 致病物质:
大肠埃希菌 (Escherichia coli)
埃希菌属一般不致病，是人类和动物肠道中 的正常菌群。其中以大肠埃希菌（E.coli）最 为重要。
大肠埃希菌，通称大肠杆菌，婴儿出生后数 小时就进入肠道，并终生伴随。当宿主免疫 力下降或细菌侵入肠外组织和器官，可引起 肠外感染。
有些特殊菌株致病性强，能直接导致肠道感 染。
志贺菌属的抗原分类：
A群: 痢疾志贺菌(Sh.dysenteriae)，有10个血 清型，各型间无交叉反应。均不分解 甘露醇。
B群：福氏志贺菌（Sh.flexneri），可分8个 血清型，均可分解甘露醇。
C群：鲍氏志贺菌（Sh.boydii）,可分为15个 血清型，各型间无交叉反应，均能分 解甘露醇。
三、微ห้องสมุดไป่ตู้物学检查法
标本应挑取病人粪便的脓血或粘液部分。中毒性菌痢 病例可取肛拭。 接种于肠道杆菌选择培养基上，挑取无色半透明可疑 菌落，做生化反应和血清学凝集试验，以确定其菌群 和菌型。
四、防治原则
目前尚无成功的免疫预防制剂。志贺痢疾菌对多种抗 生素有较高比率的耐药。某些中草药如黄连等不易耐药。
二、致病性与免疫性
致病物质
1.菌毛：吸附于小肠粘膜上皮细胞表面，并穿过上皮细胞层 到达上皮下组织。
2.内毒素：沙门菌内毒素毒性较强，可引起发热、白细胞减 少、中毒性休克。内毒素可激活补体系统释放趋化 因子，吸引白细胞，导致肠道局部炎症反应。
志贺氏菌的检验
2023-10-28contents •志贺氏菌概述•志贺氏菌的检验方法•志贺氏菌检验的实验室要求•志贺氏菌检验的临床意义•志贺氏菌检验的未来发展趋势目录01志贺氏菌概述志贺氏菌是一种革兰阴性细菌，属于肠杆菌科志贺氏菌属。
它是一种人类肠道内的正常菌群，但在特定条件下，如肠道疾病或免疫力下降时，它可以成为机会性致病菌，引起细菌性痢疾等肠道感染。
志贺氏菌的定义志贺氏菌主要通过粪-口途径传播，即通过摄入被志贺氏菌污染的食物、水或与感染者直接接触而传播。
此外，食物、水、生活用品等被志贺氏菌污染后，也可以通过间接接触传播给其他人。
志贺氏菌的传播途径志贺氏菌感染可引起细菌性痢疾，这是一种常见的肠道传染病，临床表现为发热、腹痛、腹泻、里急后重等症状。
严重病例可出现脱水、休克、死亡等严重后果。
因此，对志贺氏菌的检验和防控具有重要意义。
志贺氏菌的危害02志贺氏菌的检验方法通过选择性培养基，如SS、EMB等，将志贺氏菌从粪便、食物等样品中分离出来。
分离培养鉴定药敏试验通过生化试验、血清学鉴定等手段，对分离得到的菌株进行鉴定，确认为志贺氏菌。
对分离得到的志贺氏菌进行药敏试验，测定其对抗菌药物的敏感性，为治疗提供参考。
03细菌培养法0201免疫学检测法酶联免疫吸附试验（ELISA）通过特异性抗体捕捉志贺氏菌抗原，然后进行酶联免疫反应，检测粪便、食品等样品中的志贺氏菌。
免疫荧光抗体技术利用特异性抗体标记志贺氏菌，通过荧光显微镜观察，检测样品中的志贺氏菌。
设计特异性的引物，对志贺氏菌的DNA进行扩增，通过凝胶电泳等手段检测是否含有志贺氏菌DNA。
聚合酶链式反应（PCR）对扩增得到的DNA序列进行测序，与已知的志贺氏菌基因序列进行比对，确认是否为志贺氏菌。
基因测序分子生物学检测法03志贺氏菌检验的实验室要求实验室应具备有效的通风系统，减少空气中细菌数量。
实验室应配备高级别的个人防护装备，如实验服、手套、口罩等。
实验室内应保持清洁干燥，避免过度拥挤，减少交叉感染的风险。
肠道杆菌
伤寒沙门菌 鞭毛 （鞭毛染色 ×1824）
致病性
（1）致疾物质：鞭毛、肠毒素等 （2）所致疾病
伤寒与副伤寒 （肠热症）
由伤寒或副伤寒沙 门菌感染所致，表现为 持续发热、相对缓脉、 脾大、玫瑰疹、白细胞 减少等，护理不当，会 导致肠出血甚至肠穿孔。
食物中毒
由鼠伤寒沙 门菌、猪霍乱沙 门菌、肠炎沙门 菌所致。表现为 恶心、呕吐、腹 痛、腹泻和发热 等
G-，鞭毛、菌毛、 小数有荚膜
所致疾病
肠道外感染 （由正常菌群寄居部位改变引起） 化脓性感染：胆囊炎；复膜炎；术后伤口感染 泌尿道感染（逆行感染），最多见: 尿道炎 膀胱炎 肾盂肾炎 肠内感染（由致病性大肠埃希菌引起） ：婴儿腹泻和急性胃 肠炎
卫生学检测指标
因为大肠杆菌随粪便排出，检查物品中的大肠杆菌数可以 判断该物品被粪便污染的情况。因此，大肠杆菌群数常被 作为卫生学检测指标。
伤寒与副伤寒（肠热症）
持续发热、相对缓脉、脾大、玫瑰疹、白细 胞减少等，护理不当，会导致肠出血甚至肠 穿孔。
（三） 沙门菌属
沙门菌属是一群寄生于人和动物肠道中的革兰阴性菌。 目前，已知本菌属有2000多种，但对人致病的仅为少数， 如伤寒沙门菌、副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门 菌和猪霍乱沙门菌等。
食物中毒（发热、恶心、呕吐、 腹痛、水样泻）
3、败血症：
希氏沙门菌 鼠伤寒沙门菌 猪霍乱沙门菌 肠炎沙门菌
败血症（高热、寒战、厌食、贫血） 血 脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎
伤寒玛丽
4.无症状携带者
预防与治疗药物
预防： 药物：氯霉素、庆大霉素、氨苄西林、复方 新诺明、头孢类抗生素（如头孢哌酮、头孢 他啶等）、喹诺酮类（氧氟沙星）。
卫生讲义-志贺氏菌
志贺氏菌
一：志贺氏菌介绍
志贺氏菌属（shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌。
还能引起食物中毒。
生长最适温度为37度。
二、危害性
食入带志贺氏菌的食物后，菌体侵入空肠黏膜上皮细胞繁殖，菌体破坏后释放出毒素作用于肠壁、肠黏膜和肠壁植物性神经。
病人的主要症状为突然发生剧烈腹痛，多次腹泻，初期为水样便，以后带有血液和粘液，体温增高，可达40度，里急后重症状显著，少数病人发生痉挛，严重者出现休克症状。
只要少量病菌（至少为10个细胞）进入消化道，就有可能致病。
三、污染源
志贺氏菌常为食物爆发型或经水传播。
食源性志贺氏菌流行的最主要原因是从事食品加工行业人员患菌痢或带菌者污染食品，食品接触人员个人卫生差，存放已污染的食品温度不适当等。
志贺氏菌在拥挤和不卫生条件下能迅速传播，经常发现于人员
大量集中的地方如餐厅、食堂。
四、控制
预防控制志贺氏菌流行最好的措施是良好个人卫生和健康教育，水源和污水的卫生处理能防止水源性志贺氏菌的爆发。
对从事食品加工人员定期作带菌者检查。
五、国标
固体：阴性/25克抽检样品。
志贺氏菌属和埃希氏菌属
四、 防治
1.控制消灭传染源，切断传播途径。 2.特异性预防：注射伤寒、甲乙副伤 寒三联菌苗预防，但副作用大，口 服活菌苗在试用阶段。 3.用抗生素治疗,但停药过早容易复发。
2.抗原构造：有O、H、Vi抗原和菌毛抗原。 （1）菌体抗原（O）：LPS， 耐100℃数小 时。为分组的依据，A-E组对人致病， 刺激机体产生IgM抗体。 (2)鞭毛抗原（H）：为蛋白质，65℃10 分钟破坏，为分型依据，H抗原刺激机 体产生IgG抗体。 (3)毒力抗原（Vi）：少数新分离的菌株 有Vi抗原，有抗吞噬作用。
二.致病性和免疫性
致病物质：侵袭力与O 抗原、Vi抗原有
关，内毒素为其主要致病物质。
所致疾病:
1.肠热症（typhoid fever）：即伤寒、副 伤寒,由s.typhi or S.paratyphi引起。消化 道感染，传染源是病人、带菌者。
免疫性：肠热症后可获牢固免疫力。细胞内寄
生菌，主要是细胞免疫。 2．急性胃肠或食物中毒 由鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍 乱沙门氏菌引起，产生肠毒素致病。 3．沙门氏菌菌血症 多由猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏 菌引起 。
第十章 肠道杆菌
肠道病原菌 经消化道感染的病原菌包括:肠 杆菌科细菌、弧菌属、幽门螺杆菌、 空肠弯曲菌等。 肠杆菌科共14个属，对人有致病 作用的主要是沙门氏菌属、志贺氏 菌属和埃希氏菌属。
第一节大肠埃希氏菌
Escherichia coli (E.coli)
一、生物学性状： 1.分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖 类，在EMB培养基上呈紫黑色菌落。 2.抗原构造：用O抗原分群（170群）, 用H抗原、K抗原分型。血清型表示法： O：K：H ，如O157:H7。
二、致病性
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（2）慢性菌痢 病程>2个月 迁延不愈、时愈时发
（3）中毒性痢疾 中毒症状
微生物学检查
标本：取粪便注意挑选脓血、粘液部分 立即送检或30%甘油缓冲盐水中保存 中毒性菌痢——肛拭
小结
致病物质：菌毛、内毒素、肠毒素 临床常见症状：腹痛、腹泻、里急后重
脓血粘液便
THE END
[志贺菌属Shigella]
代表细菌——痢疾杆菌 所致疾病——细菌性痢疾
dysentery
内容要点
生物学性状 致病性 微生物学检查
Байду номын сангаас
目的要求
1． 掌握分类，致病物质（菌毛、内毒 素、肠毒素），致病机理、所致疾病。
2． 熟悉标本采集应注意的事项。 3． 了解生化反应。
分类
痢疾志贺菌Sh.dysenteriae
福氏志贺菌Sh.flexeri 我国为主
鲍氏志贺菌Sh.boydii 宋内志贺菌Sh.sonnei
生物学性状
1、形态与染色 无荚膜、芽胞、鞭毛 G-杆菌 有菌毛
2、生化反应 分解葡萄糖+ V-P试验 乳糖-
致病性 100 organisms disease
水样泻
所致疾病
细菌性痢疾（菌痢）
传染源：病人、带菌者 传染方式： 消化道 Four F’s:finger flies food
feces
finger food
fly
feces
stool
(1)急性菌痢 全身中毒症状+肠道症状 腹痛、腹泻里急后重、脓血粘液便
abdominal cramps, diarrheas
致病物质（1）侵袭力 菌毛 （2）内毒素 （主）
作用于肠壁 通透性↑ 吸收↑
发热、神志障碍、中毒性休克
破坏肠粘膜 炎症 溃疡（脓血便） 破坏肠壁植物NS 腹痛、腹泻、里急后重
欲拉不畅，欲罢不能，所排无几
致病性（续）
（3）肠毒素
神经毒性 中枢NS 四肢麻木
细胞毒性 肝C破坏 肠毒性 肠粘膜出血