红细胞计数检验

方法学评价
AHD575测定法
优点：试剂简易无毒、呈色稳定、
准确性与精密性较高。 缺点：575nm波长比色，血液分析仪 上应用受限，不能转化HbF。
方法学评价
HiN3测定法
优点：准确度、精密度较高。 缺点：试剂有毒、HbCO 转化慢。
方法学评价
CATB测定法
优点：溶血强，不破坏白细胞，适用于
在有核红及网织红内合成
是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白
Hb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多， 中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状 合成速度受促红细胞生成素（EPO）与雄激 素调节
血红蛋白组成
2条α链
珠蛋白
Hb （四聚体）
2条非α链 原卟啉
血红素
铁原子
血液中血红蛋白的存在形式
存在形式 还原血红蛋白（Fe2+ ） 氧合血红蛋白 碳氧血红蛋白 硫化血红蛋白 高铁血红蛋白（Fe3+ ） 所占比例 正常成人>99%
①继发性增多，由EPO代偿性或非代偿性增高引起。 ②原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。
病理性减少（贫血）
贫血：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比 容低于参考值下限。 病因学分类
3
血管丢失
2 3
破坏过多
1 3
生成减少
红细胞生成减少
骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍 性贫血。 造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、 缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。
Hb存在年龄 与性别的差异
儿童： 120～140 g/L
老年（＞70岁）：男性 94～122 g/L
女性 87～112 g/L
临床意义（同红细胞计数）
判断贫血程度优于红细胞计数 临床应用注意事项
Hb和RBC不一定正确反应全身红细胞总容量 的变化。 某些贫血， Hb和RBC减少程度可不一致， 同时测定Hb和RBC，对诊断更有意义。
贫血程度的判定
分度 轻度： 中度： 重度： 极重度： Hb含量
91g/L~正常值下限
症状
症状轻微
61g/L~90g/L
31g/L~60g/L <30g/L
活动后心悸、气促
休息时也有心悸、气促 常合并贫血性心脏病
RBC显微镜计数法原理 小结 RBC计数的临床意义 HiCN测定法原理
Hb测定方法学评价
质量保证（显微镜法）
显微镜法红细胞计数误差来源有三个
技术误差 仪器误差 分布误差
技术误差
1 3
采血部位不当 稀释倍数不当 充液不当 血液凝固
2
3 4
参考值
RBC存在年龄 与性别的差异
成年男性：（4.09～5.74）×1012/L 成年女性：（3.68～5.13）×1012/L 新生儿：（5.2～6.4）×1012/L 婴儿： （4.0～4.3）×1012/L
1%
Hb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。
检测原理
血液的物理特性：比重法，折射仪法 Hb的分子组成：全血铁法 Hb与O2可逆性结合：血气分析法
Hb衍生物光谱特点：HiCN，SDS-Hb等
HiCN法检测原理
红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种 血红蛋白（SHb除外）氧化为高铁血红蛋白
方法学评价
HiCN测定法（参考方法）
优点：操作简单 ，反应速度快，产物 稳定，便于质控。 缺点：试剂有毒、高WBC造成试剂 混浊 、HbCO 转化慢、不能测SHb。
方法学评价
SDS-Hb测定法（ HiCN替代方法）
优点：操作简单 ，试剂无毒，结果准确， 重复性好 。 缺点：SDS质量差异大；消光系数未定， 不能直接计算Hb浓度；不能测定SHb ； SDS破坏白细胞。
红细胞破坏过多
细胞内在缺陷（遗传性缺陷）
膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异常致红细胞寿命缩短。
细胞外在异常（获得性因素）
免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病等。 非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、寄生虫及 脾亢等。
血液丢失：急、慢性失血性贫血
外伤引发的出血
血红蛋白（hemoglobin，Hb ）
儿童： （4.0～4.5）×1012/L
临床意义
生理性 变化
RBC＞参考值上限，RBC增多 RBC＜参考值下限，即贫血
病理性 变化
生理性增多
生理性缺氧引起
6个月-2岁婴儿
病理性增多
相对性增多：见于呕吐、高热等引起暂时性
血液浓缩。通过补液，血容量恢复正常，红细胞 增多即消失。
绝对性增多：
第二章/第一节红细胞检查
正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡
，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。
血液中红细胞数量可 通过红细胞计数获得
红细胞计数（red blood cell count, RBC）
测定单位体积血液中红细胞的数量
诊断贫血及红细胞增多的指标之一 红细胞计数的方法
RBC/L=（A/5)×25×10×106×200 =(A/100)×1012
ห้องสมุดไป่ตู้
Neubauer计数盘
血液分析仪法
采用电阻抗法或激光检测法
方法学评价
方法 显微镜 计数法 血液分 析仪法 优点 传统方法，设 备简单，廉价 操作便捷， 易于标准化， 精密度高 缺点 适用范围
费时费力， 参考方法；分析 精密度低 仪异常结果复核 价贵；环境 健康人群普查； 要求较高 大批量标本筛检
显微镜计数法 血液分析仪法
检测原理
RBC未排除 白细胞数量影响
显微镜计数法（重点）
用等渗液稀释血液后，滴入 血细胞计数板，计数一定范 围内的红细胞，经换算得每 升血液中的红细胞数。
操作
10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血
加入2ml等渗液中，混匀 混悬液充入改良牛鲍计数板 高倍镜下计数中央大方格的四角及中央五个 中方格内的红细胞总数A。 换算？
血液分析仪。
缺点：精密度、准确度低。
质量保证（比色法）
标本：引起血清浊度增加的因素致Hb假性增高。
器材及试剂：定期校准仪器，选用合格的微量采
血管和刻度吸管，保证试剂质量。
技术操作：控制技术误差。
废弃物：妥善处理废液。
参考值
成年男性：131～172 g/L 成年女性：113 ～151 g/L 新生儿：180～190 g/L 婴儿： 110～120 g/L
（Hi），后者与试剂中的 CN - 结合生成棕红
色的氰化高铁血红蛋白（HiCN）。在
540nm处测定HiCN的吸光度，直接换算Hb
浓度或在标准曲线上查得Hb浓度。
操作
20ul血液加入5ml转化液中，充分溶 血转化后，以转化液调零，测定标本 （HiCN）在540nm的吸光度A。 计算
直接计算（符合WHO标准的分光光度计） Hb＝ A×64458÷44000×251＝A×367.7 以 HiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光度 A在标准曲线上查出Hb浓度