生化第四章资料
生物化学-生化知识点_第四章 氨基酸及其重要衍生物的生物合成.
一一一氨基酸及其重要衍生物的生物合成下册P340 31章§4.1 概论不同生物合成氨基酸的能力不同,合成氨基酸的种类也有很大差异。
必需氨基酸:肌体维持正常生长所必需而又不能自己合成,需从外界获取的氨基酸。
人和大白鼠需以下十种氨基酸(由大白鼠喂饲试验得来):Phe、Lys、Ile、Leu 、Met、Thr、Trp、Val、(His、Arg)。
对于成人为前八种,对幼小动物为十种。
非必需氨基酸:肌体可以通过其他原料自己合成的氨基酸。
高等植物可以合成自己所需全部氨基酸。
微生物合成氨基酸能力有很大差距。
E.coli可合成全部所需氨基酸,乳酸菌则不能合成全部。
§4.2 氨基酸生物合成途径:可用为生物遗传突变株研究。
使突变株在氨基酸的某个合成环节上产生缺失,造成某种中间物积累,从而判明各个中间代谢环节,由此已阐明20种氨基酸的生物合成途径。
在生物合成中,氨基酸的氨基多来自Glu的转氨基反应,而各种碳骨架起源于TCA、糖酵解等代谢途径,由此划分为若干类型。
根据生物合成起始物的不同,可将氨基酸生物合成途径归纳为六族。
P341 图31-1为氨基酸生物合成的分族情况:①谷氨酸族②天冬氨酸族③丝氨酸族④丙氨酸族⑤芳香氨基酸族⑥组氨酸。
P341图31-2为20种氨基酸生物合成概貌。
一一一谷氨酸族氨基酸的生物合成:均以α-酮戊二酸为前提。
α-酮戊二酸形成Glu后可生成Gln、Pro和Arg(P344,P345 图31-6,P346 图31-7);在真菌中还可生成Lys(P347图31-8)。
一一一天冬氨酸族氨基酸的生物合成:草酰乙酸生成Asp后可生成Asn,经天冬氨酸β-半醛可生成Lys(P349图31-9),再经高丝氨酸可生成Thr,进一步生成Ile,还可生成Met(P350图31-10,P351 图31-11,图31-12)。
一一一丙氨酸族氨基酸的生物合成:丙酮酸可直接生成Ala,经α-酮异戊酸可生成Val和Leu(P352 图31-13,P353 图31-15)。
生化第三版考研课件第4章蛋白质的共价结构
端
NO2
NO2
分
DNFB
N-端氨基酸
DNP衍生物
析
H+ O2N
RO HN CH C OH +
氨基酸
H2O
NO2
黄色 DNP-氨基酸
(二)、末端氨基酸残基的鉴定
丹磺酰氯(DNS)法
• 二甲氨基萘磺酰-AA有强荧光,检测灵敏度高
1
、N
N(CH3)2
RO
N(CH3)2
末
+ H2N CH C
端
多 肽 N-端
(二)、末端氨基酸残基测定
• 两类多肽链末端氨基酸残基: N-端氨基酸 C-端氨基酸
• 在肽链氨基酸顺序分析中,最重要的是 N-端氨基酸分析法。
(二)、末端氨基酸残基的鉴定
二硝基氟苯(DNFB)法
• Sanger法
二硝基苯衍生物
1
、N 末 O2N
R O 碱性条件
F + H2N CH C
O2N
RO HN CH C
N-端 CH2
H CH
H CH2
H CH2
H CH2 C-端
OH
CH3 CH3
CO2H
CH2
肽键 OH
CONH2
• 多肽链中AA残基按一定顺序排列:氨基酸顺序 • 含游离-氨基的一端:氨基端或N-端
含游离-羧基的一端:羧基端或C-端 • AA顺序是从N-端开始以C-端氨基酸残基为终点
如上述五肽:Ser-Val-Tyr-Asp-Gln
PITC PTC-肽
2、氨肽酶法或羧肽酶法
3、质谱法(MS)
灵敏度高、所需样品少、测定速度快
4.根据核苷酸序列的推定法 蛋白质链
《生化》第四章核酸化学(修改)(4学时)
CH3
H H
N,N二甲基鸟嘌呤
HN N NH N CH2 N
CH3
CH C CH3 CH3
双氢尿嘧啶 S
NH NH O 4-巯尿嘧啶
N6-异戊烯腺嘌呤
(3)r RNA:无明显的一级结构特征。
3. RNA的二级结构
RNA的二级结构主 要是呈线状的多核苷酸 单链,在某些位置能自 身回折,碱基彼此靠近, 并按A=U,C=G的原则 配对,形成局部双螺旋 结构,其他未配对的碱 基区形成突环。
氢键:碱基互补配对形成的氢键,这 是稳定双螺旋结构的主要的力。
离子键:磷酸基团上的负电荷与介质 中的阳离子之间形成离子键。
3. DNA的三级结构
DNA的三级结构是指DNA在二级结构的 基础上,进一步扭曲,螺旋而成的结构。又称 为超螺旋DNA。
4. 染色质DNA
在真核细胞中, DNA以超螺旋的形式盘绕在 组蛋白颗粒上,构成核小体,许多个核小体再高度 折叠相连,形成念珠状的结构,构成染色质。
核小体的串珠状结构
二、RNA的结构
1. RNA的类型
在生物细胞中主要含有三种类型的RNA (1)m RNA(信使RNA):它是蛋白质合成的模板。其信 息来源于DNA,是由DNA转录而来,占总RNA的3-5%。 (2)r RNA(核糖体RNA):是核糖体的主要组成成分, 核糖体是蛋白质合成的场所。占总RNA的80%。 (3)t RNA(转运RNA):携带氨基酸参与蛋白质的生物 合成,占总RNA的15%。t RNA种类较多,每一种氨基 酸都有其特异的t RNA。
1´
OH OH
脱氧核苷:dAR, dGR, dTR, dCR
4. 核苷酸(ribonucleotide)
生化每章知识点总结归纳
生化每章知识点总结归纳第一章:蛋白质的合成与结构本章主要介绍了蛋白质的合成与结构。
蛋白质是生物体内最为重要、最为复杂的一类有机化合物,是构成细胞结构,参与细胞代谢、调节机体生理功能等各种生命活动的关键物质。
蛋白质合成包括转录和翻译两个阶段。
转录是指将DNA上的具体基因转录成mRNA,而翻译则是将mRNA上的密码子翻译成氨基酸序列,合成具体的蛋白质。
蛋白质的结构主要包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
一级结构是指氨基酸序列,二级结构是指α-螺旋和β-折叠,三级结构是指蛋白质分子的立体构象,四级结构是指多肽链之间的相互作用。
第二章:酶的结构、功能和应用本章主要介绍了酶的结构、功能和应用。
酶是生物体内催化生物化学反应的生物催化剂,能够加速化学反应的速率,而不改变反应的热力学性质。
酶的结构主要包括酶的活性中心和辅基团。
酶的活性中心是其催化作用的关键部位,而辅基团则是在酶的构象和功能中扮演重要角色的组织。
酶的功能主要包括底物特异性、催化速率和酶的调节。
底物特异性是指酶对底物的选择性,催化速率是指酶对底物的反应速率,而酶的调节是指酶在生物体内活性的调节。
酶的应用主要包括在医药、食品、工业、环境保护等领域的应用。
第三章:脂肪酸、三酰甘油和脂质膜本章主要介绍了脂肪酸、三酰甘油和脂质膜。
脂肪酸是由羧基和长链碳水化合物构成的脂肪酸,是构成三酰甘油和磷脂等脂质的基本组成部分。
三酰甘油是由三个脂肪酸和一个甘油分子经酯化反应而成,是储存体内能量的主要途径。
脂质膜是由脂质和蛋白质构成的生物膜结构,是生物体内细胞结构的基本单位,具有选择透过性和双层膜状结构。
第四章:核酸的结构与功能本章主要介绍了核酸的结构与功能。
核酸是生物体内存储和传递遗传信息的重要分子,包括DNA和RNA两种类型。
DNA是双螺旋结构的分子,能够稳定地存储生物体内的遗传信息,而RNA则是单链结构的分子,参与了蛋白质的合成和其他生物化学反应。
核酸的功能主要包括遗传信息传递和细胞代谢调控。
生化工程第四章 通气与搅拌
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生 化 工 程 第 四 章 通 气 与 搅 拌
液体的粘度对流动性质和气液传质有很大的 影响。随液体粘度上升传质系数 KL下降;同 时粘度高的液体湍流程度小,气泡的直径较 大,使比界面(内界面)面积a下降。考虑液 体粘度 μ 的影响的关系式为:
溶氧的保证可经由以上公式酌情获得,这是 通气控制的基础,由此迚一步确定搅拌情况。
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生 化 雷诺准数是惯性力与液体的粘滞力乊比。在 工 搅拌容器中,液体的代表速度 U = ND,以搅 程 拌器直径 D 代替 d,则搅拌雷诺准数为: 第 四 章 通 气 与 搅 拌
ReM
D N D
ND
2
生物工程专业课程 因为搅拌功率准数与搅拌雷诺准数乊间成函 生 化 数关系。在系列几何相似罐中做试验,在双 工 对数坐标上绘制出 Np~ReM 曲线簇。
第 度可由下式计算: 四 W 章 mb 0.4 D 通 W : 挡板宽度 气 与 D : 罐径 搅 mb : 挡板块数 拌
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生 化 工 程 第 四 章 通 气 与 搅 拌
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生 化 工 程 第 四 章 通 气 与 搅 拌
NP
单位体积液体所受外力 单位体积液体的惯性力
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生 一、搅拌器的型式及流型 化 工 程 对収酵液迚行搅拌的目的主要是:促迚氧气 第 的溶解;使代谢产物能及时排走; 四 章 对収酵而言,希望以径向液流为主,同时兼 通 顾轴向液流的翻动作用,各种不同形式的搅 气 拌器,其产生两种流向的侧重不同。 与 搅 拌
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生 化 工 程 第 四 章 通 气 与 搅 拌
P0 / V ma / V
生化第4-6章
⽣化第4-6章第四章糖代谢概述:1.糖类(碳⽔化合物)化学本质为多羟醛或多羟酮及其衍⽣物或多聚糖。
2.⾷物中糖主要是淀粉,经消化为基本组成单位葡萄糖后被吸收。
3.功能:为机体⽣理活动提供能量;转化为单糖和其他重要化合物;体内重要化合物的前体及组织结构成分;4.根据糖分⼦构成特点分:单糖、寡糖、多糖、结合糖第⼀节糖的⽆氧分解1.糖的⽆氧分解:即糖酵解,是指葡萄糖⽣成丙酮酸在⽆氧条件下转变为乳酸的过程。
2.部位:细胞液⼀、糖酵解的反应过程分两个阶段:第⼀阶段葡萄糖分解为丙酮酸;第⼆阶段丙酮酸转变为乳酸。
催化此途径的酶类存在于细胞液。
1.葡萄糖磷酸化为6-磷酸葡萄糖:反应不可逆,需ATP提供磷酸基和能量,关健酶是⼰糖激酶2.6-磷酸葡萄糖转化为6-磷酸果糖:可逆反应;3.6-磷酸果糖磷酸化成1,6-⼆磷酸果糖:不可逆反应。
需ATP提供磷酸基和能量。
关健酶为6-磷酸果糖激酶-1。
4.1,6-⼆磷酸果糖裂解成2个磷酸丙糖:3-磷酸⽢油醛+磷酸⼆羟丙酮=磷酸丙酮;5.3-磷酸⽢油醛氧化为1,3-⼆磷酸酸⽢油酸:3-磷酸⽢油醛脱氢酶催化,辅酶NAD+接受氢和电⼦产⽣NADH+H+,该途径唯⼀的氧化步骤6.1,3-⼆磷酸⽢油酸转变成3-磷酸⽢油酸:磷酸⽢油酸激酶催化,第⼀个底物⽔平磷酸化反应(产⽣ATP)7.3-磷酸⽢油酸转变为2-磷酸⽢油酸:可逆的磷酸基转移过程8.2-磷酸⽢油酸转变成磷酸烯醇式丙酮酸:脱⽔⽣成磷酸烯醇式酮酸(PEP),利于⾼能磷酸键⽣成9.磷酸烯醇式丙酮酸转变成丙酮酸:第⼆个底物⽔平磷酸化反应,反应不可逆,关健酶为丙酮酸激酶10.丙酮酸可作为受氢体还原⽣成乳酸:保证糖酵解过程得以继续运⾏糖酵解⼩结:1.不需氧的产能过程:从葡萄糖开始净⽣成2mol ATP;从糖原开始净⽣成3mol ATP2.全过程在细胞液中进⾏3.三个关键酶催化的反应不可逆,关键酶:⼰糖激酶,6-磷酸果糖激酶-1,丙酮酸激酶4.乳酸的⽣成:使糖酵解途经中⽣成的NADH+H+重新转变成NAD+,保证糖酵解过程继续运⾏5.体内产⽣ATP的⽅式:底物⽔平磷酸化,氧化磷酸化。
生物化学第四章维生素与辅因子
例如: 在乙醇发酵过程中,TPP作为脱羧酶的辅酶,丙酮酸通过酵母丙酮酸脱羧酶产生CO2和乙醛; 在糖分解代谢过程中TPP作为丙酮酸脱氢酶复合体和 -酮戊二酸脱氢酶复合体中脱氢酶的辅酶分别 参加丙酮酸及α-酮戊二酸的氧化脱羧作用(详见糖代谢)。
酵母丙酮酸脱羧酶的反应机制 酸性质子
二、维生素B2与FMN和FAD 1、名称:
维生素B3是辅酶A(CoA或CoA-SH)的组成成分,在机体内维生素B3与ATP和巯基乙胺经一系列反应 合成辅酶A。其结构式如图4-7。
辅酶A的结构 磷酸泛酰巯基乙胺
辅酶A是酰基的载体,是酰化酶的辅酶。它的SH可与酰基形成硫酯,其重要的生理功能是在代谢过程中作为酰基的载体。
第二节 水溶性维生素与辅因子
水溶性维生素 溶于水而不溶于有机溶剂的维生素称为水溶性维生素。水溶性维生素包括维生素B族、 维生素C,属于维生素B族的主要有维生素B1、B2、PP、B6、泛酸、生物素、叶酸和B12等。这类 辅酶在肝脏内含量最丰富。与脂溶性维生素不同,进入人体的多余的水溶性维生素及其代谢产物均 自尿中排出,体内不能多贮存。
?构成脱氢酶的辅酶nad烟酰胺腺嘌呤二核甘酸nadp烟酰胺腺嘌呤二核甘酸磷酸专业资料烟酰胺烟酸ncoohnconh2专业资料烟酰胺在生物体内以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸nad又称辅酶和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸nadp又称辅酶的形式存在
生物化学第四章维生素与辅因子
维生素的发现: 人类对维生素的认识可以追溯到公元前3500年,当时古埃及人发现夜盲症可以被一些食物治愈;
生物素0.2mg,
叶酸0.4mg,
维生素D 10~20mg, 维生素C 60~100mg。
2、不是构成机体的物质,也不是能量物质,在代谢中起调节作用; 维生素的生理功能——调节酶活性及代谢活性; 大部分的辅酶与辅基衍生于维生素。维生素的重要性就在于它们是体内一些重要的代谢酶的辅酶或辅基
生化第四章
5、糜蛋白酶断裂Phe、Trp和Tyr等疏水氨基酸残基的羧基端肽键。由题,得到的一条肽(Asp、Ala、Tyr)结合(3)、(4)可得该肽的氨基酸序列为:Asn-Ala-Tyr-Glu-Lys-His-Gln-Val
第四章 蛋白质的共价结构
习题
1.如果一个相对分子质量为12000的蛋白质,含10种氨基酸,并假设每种氨基酸在该蛋白质分子中的数目相等,问这种蛋白质有多少种可能的排列顺序?[10100]
解:1012000/120=10100
2、有一个A肽,经酸解分析得知为Lys、His、Asp、Glu2、Ala以及Val、Tyr忽然两个NH3分子组成。当A肽与FDNB试剂反应后得DNP-Asp;当用羧肽酶处理后得游离缬氨酸。如果我们在实验中将A肽用胰蛋白酶降解时,得到两种肽,其中一种(Lys、Asp、Glu、Ala、Tyr)在pH6.4时,净电荷为零,另一种(His、Glu以及Val)可给除DNP-His,在pH6.4时,带正电荷。此外,A肽用糜蛋白酶降解时,也得到两种肽,其中一种(Asp、Ala、Tyr)在pH6.4时全中性,另一种(Lys、His、Glu2以及Val)在pH6.4时带正电荷。问A肽的氨基酸序列如何?[Asn-Ala-Tyr-Glu-Lys-His-Gln-Val]
(4)嗜热菌蛋白酶能水解Tyr、Phe等疏水氨基酸残基,故此肽(Cys2、Phe)来自链2,结合(3)中含Tyr,可知(3)中形成的二硫键为链1 8位Cys与链2中3位Cys与链2中3位Cys之间;(4)中(Cys2、Phe)说明链2中1位Cys与5位Cys中有二硫键。
生化第4章_酶
体内的物质代谢。
维生素分为脂溶性和水溶性两大类。脂溶性维生素在体内 可直接参与代谢的调节作用,而水溶性维生素是通过转变 成辅基对代谢起调节作用。
大多数辅酶的前体是水溶性 B 族维生素。辅酶I、辅酶II
9
3. 酶结构与功能特点
蛋白质的结构特点: 一级、二级、三级、四级结构
根据结构不同酶可分为:
37
3.酶与底物结合形成中间络合物的方式(理论)
(1) 锁钥假说 (lock and key hypothesis):
•
认为整个酶分子的天然构象具
有刚性结构,酶表面具有特定 的形状。酶与底物的结合如同
一把钥匙对一把锁一样。
(2) 诱导契合假说(induced–fit hypothesis):
•
认为酶表面并没有一种与底物
H2N C OH
CH2 NH2 OH
亲核性基团
酸碱性基团
16
酶催化反应举例
溶菌酶(lysozyme)降解细菌细胞壁多糖
溶菌酶是一种葡萄糖苷酶,水解NAG形成的β(1, 4)糖苷键
溶菌酶内部几乎都是非极性的,在分子表面有一较深的裂缝
其大小恰好容纳底物的 6 个单糖,是酶的活性部位.
酶的水解作用
31
(7) 核酸酶(催化核酸) (Ribozymes)
核酸酶是唯一的非蛋白酶, 是一类特殊 RNA,能催化 RNA 分子中的磷酸酯键的水解及其逆反应。
B
3'
B
3'
B
3'
B
3'
B
3'
P
5'
P
5'
P
生化第四章-第三节-修改
pH > pI 9>7
二、两性游离和等电点2 两性游离和等电点2
蛋白质两性游离的特点
COOH, 肽与氨基酸都有 α-COOH,α- NH2,但肽还 含有侧链R基上的可解离基团, 含有侧链R基上的可解离基团,且其为主要解离 基团。 基团。 肽链中的α-COOH与α-NH2相距较远,因此它 相距较远, 肽链中的α COOH与 们之间的静电引力较弱,可离子化程度较低。 们之间的静电引力较弱,可离子化程度较低。 大的肽比小肽的离子化程度低, 大的肽比小肽的离子化程度低,即大肽完全质 子化所需pH比小肽低。 pH比小肽低 子化所需pH比小肽低。 值比游离氨基酸的小, N端α-NH2的pK,值比游离氨基酸的小,C-端 COOH的 值比游离氨基酸的大,侧链R 的α-COOH的pK,值比游离氨基酸的大,侧链R基 值在两者之间。 的pK,值在两者之间。
六、蛋白质的颜色反应1 蛋白质的颜色反应1
1.双缩脲反应2 1.双缩脲反应2 双缩脲反应
O 2H2N-C -NH2 1320C O O H2N-C-N-C-NH2+NH3↑ H
尿素 双缩脲
CuSO4+NaOH
双缩脲 紫红色物质
六、蛋白质的颜色反应2 蛋白质的颜色反应2
2.酚试剂(福林试剂) 2.酚试剂(福林试剂)反应 酚试剂
二、两性游离和等电点3 两性游离和等电点3
蛋白质两性游离的应用2 蛋白质两性游离的应用2
电泳
三、蛋白质的胶体性质1 蛋白质的胶体性质1
为什么蛋白质具有胶体性质
由于蛋白质分 子大, 子大,且球状蛋白 质分子中亲水的氨 基酸残基多位于颗 粒表面, 粒表面,故在水溶 液中能与水起水合 作用。因此, 作用。因此,蛋白 质的水溶液具有亲 水胶体的性质
生化第4章第4节课糖代谢
磷酸烯醇式丙酮酸
ADP
丙酮酸
ATP
实验证实:
以乳酸为原料进行异生糖时,草酰乙酸 通过天冬氨酸方式进入胞液。 以丙酮酸或能转化成丙酮酸的生糖氨基 酸为原料进行糖异生时,草酰乙酸通过 苹果酸方式进入胞液。
目录
(2)1,6-二磷酸果糖转变为 6-磷酸果糖
Pi
1,6-二磷酸果糖
果糖双磷酸酶-1
6-磷酸果糖
(3) 6-磷酸葡萄糖水解为葡萄糖
Pi
6-磷酸葡萄糖
葡萄糖-6-磷酸酶
葡萄糖
目录
葡萄糖-6-磷酸酶 6-磷酸葡萄糖
葡萄糖 6-磷酸果糖 果糖双磷酸酶-1 1,6-二磷酸果糖 3-磷酸甘油醛
NAD+
1-磷酸葡萄糖
糖原
糖 酵 解
NADH+H+ 3-磷酸甘油 磷酸二羟丙酮
ADP
1,3-二磷酸甘油酸
NADH+H+
糖的有氧氧化: 三羧酸循环(TCA循环) 磷酸戊糖途径: 糖异生: 血糖及其调节:
糖的代谢旁路
糖原的合成与分解:糖的储存形式
ATP
6-磷酸果 糖激酶-1
AMP ATP
1,6-双磷酸果糖
ADP
目录
(2)共价修饰调节亦呈相反变化 :
胰高血糖素↑ 腺苷酸环化酶↑ cAMP ↑ PKA↑
2,6-双磷 酸果糖↓
6-磷酸 果糖激 酶-1 ↓
果糖双 磷 酸 酶-1↑
糖酵解↓
糖异生↑
6-磷酸果糖激酶-2磷酸化失活
2. 磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)与丙酮酸之间
脑组织不能利用脂酸,通常情况下主要依赖葡萄 糖供能; 红细胞没有线粒体,完全通过糖酵解获能; 骨髓及神经组织代谢活跃,常利用糖酵解供能。
生化技术第四章 疏水层析
原理 高浓度盐溶液中,亲水性的较强的物质,分
子内部的疏水基团外露,便可与疏水的固定相 以疏水作用力相结合(吸附).由于这种作用力 大小不同,可以通过改变极性流动相的离子强 度(由高到低)使其依次解吸附。
二、操作
1.层析柱制备
层析柱规格:类似普通层析。当被分离样品量较大时、 被分离物与杂质间的疏水性差异较大时,选用体积较大的 柱子(h:d≤3)。 固定相选择:根据要分离物质的特点进行选择。
苯基类适合分离纯化与芳香族化合物有亲和力的物 质。
辛基类常用于分离纯化亲脂性较强的物质。
2.疏水性吸附剂:又称非亲水性吸附剂。由疏水性基质 与吸附疏水性物质的配体构成的固定相。
有:苯基、辛基、烷基(C4、C8、C18)与硅胶或 (苯乙烯、二乙烯聚合物)的共价复合物。
以硅胶为基质的高pH下不稳定;树脂为基质的则各种 pH下均稳定。 性能与用途:耐压、机械性能好,常压、高压均适用。
第四章 疏水层析
(hydrophobic interaction
chomatography,HIC)
一、基本原理
(一)概念:疏水层析是依据在特定条件下有效
成分和固定相之间疏水性相互作用的差异大小,
而进行分离的方法。
(二)吸附剂:在普通层析介质的 基础上,耦联了疏水性基团。
吸附层析的 作用力:范
德华力
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ两部分构成:
①基质:同一般的层析介质,如交联琼脂糖、硅胶、树脂
等。
②配体:如苯基、烷基(C3-C8)、烷氨基、聚乙二醇等。
基质与配体以共价键耦连在一起。
疏水性
亲水或 疏水
固定相
基团
配
基质
体
1.亲水性吸附剂:由亲水性基质与吸附疏水性物质的 配体构成的固定相。
生化第4章第4节课糖代谢
⑤ 减少脂肪动员。
目录
(二)胰高血糖素
—— 体内升高血糖水平的主要激素
胰高血糖素的作用机制: ① 促进肝糖原分解,抑制糖原合成; ② 抑制糖酵解,促进糖异生; ③ 促进脂肪动员。
* 此外,糖皮质激素和肾上腺素也可升高血糖, 肾上腺素主要在应急状态下发挥作用。
目录
(三)糖皮质激素
c. 糖尿病可分为二型: Ⅰ型(胰岛素依赖型)和Ⅱ型(非胰岛素依赖型)
d. 临床表现:多饮、多食、多尿、消瘦等表现,即“三 多一少”症状。
目录
小结
1、糖异生的概念、器官、原料、关键酶、 调节及意义;
2、乳酸循环的概念及生理意义; 3、血糖的基本概念、来源和去路; 4、 胰岛素、胰高血糖素调节血糖的机制; 5、名词解释:糖异生、底物循环、三碳途径、
ADP
G-6-P
二、丙酮酸异生为葡萄糖
F-6-P
ATP ADP
F-1,6-2P
1.定义
指从丙酮酸生成葡萄糖的具体
磷酸二 羟丙酮
3-磷酸 甘油醛
NAD+
NADH+H+
1,3-二磷酸甘油酸
ADP ATP
3-磷酸甘油酸
2-磷酸甘油酸
磷酸烯醇式丙酮酸
ADP
ATP
丙酮酸
反应过程。
2. 过程
糖酵解中有3个由关键酶催化的不 可逆反应。在糖异生时,须由另 外的反应和酶代替。
PEP
1,6-二磷酸果糖
ADP 丙酮酸激酶 P
丙氨酸 丙酮酸羧化酶
ATP
丙酮酸
丙酮酸脱氢酶复合体
乙 酰 CoA
饥饿
目录
三、糖异生的生理意义
(一)饥饿时维持血糖水平稳定(最主要)
生化第四章资料
第四章糖代谢【测试题】一、名词解释1.糖酵解(glycolysis)11.糖原累积症2.糖的有氧氧化12.糖酵解途径3.磷酸戊糖途径13.血糖(blood sugar)4.糖异生(glyconoegenesis)14.高血糖(hyperglycemin)5.糖原的合成与分解15.低血糖(hypoglycemin)6.三羧酸循环(krebs循环)16.肾糖阈7.巴斯德效应(Pastuer效应)17.糖尿病8.丙酮酸羧化支路18.低血糖休克9.乳酸循环(coris循环)19.活性葡萄糖10.三碳途径20.底物循环二、填空题21.葡萄糖在体内主要分解代谢途径有()和()22.糖酵解反应的进行亚细胞定位是在()最终产物为()23.糖酵解途径中仅有的脱氢反应是在酶催化下完成的,受氢体是()两个底物水平磷酸化反应分别由()酶和()酶催化。
24.肝糖原酵解的关键酶分别是()和丙酮酸激酶。
25.6—磷酸果糖激酶—1最强的变构激活剂是()是由6—磷酸果糖激酶—2催化生成,该酶是一双功能酶同时具有()和()两种活性。
26.1分子葡萄糖经糖酵解生成分子ATP,净生成分子ATP,其主要生理意义在于。
27.由于成熟红细胞没有,完全依赖供给能量。
28.丙酮酸脱氢酶复合体含有维生素()和()29.三羧酸循环是由与缩合成柠檬酸开始,每循环一次有()次脱氢、-()次脱羧和()次底物水平磷酸化,共生成()分子ATP。
30.在三羧酸循环中催化氧化脱羧的酶分别是()和()31.糖有氧氧化反应的进行亚细胞定位是()和()1分子葡萄糖氧化成CO2和H2O净生成()或()分子ATP。
32.6—磷酸果糖激酶—1有两个ATP结合位点,一是ATP作为底物结合,另一是与ATP亲和能力较低,需较高浓度ATP才能与之结合。
33.人体主要通过()途径,为核酸的生物合成提供()34.糖原合成与分解的关键酶分别是()和()在糖原分解代谢时肝主要受()的调控,而肌肉主要受()的调控。
生化分离技术 第四章 沉淀技术
第二节 蛋白质沉淀的基本方法 及沉淀技术的应用
2.有机溶剂沉淀法
(1)基本原理 有机溶剂对于许多蛋白质(酶),核酸,多糖和小 分子生化物质都能发生沉淀作用,是较早使用的沉淀方法之一.其沉淀 作用的原理主要是降低水溶液的介电常数,溶剂的极性与其介电常数密 切相关,极性越大,介电常数越大,如20℃时水的介电常数为80,而乙 醇和丙酮的介电常数分别是24和21.4,因而向溶液中加入有机溶剂能降 低溶液的介电常数,减小溶剂的极性,从而削弱了溶剂分子与蛋白质分 子间的相互作用力,增加了蛋白质分子间的相互作用,导致蛋白质溶解 度降低而沉淀.溶液介电常数的减少就意味着溶质分子异性电荷库仑引 力的增加,使带电溶质分子更易互相吸引而凝集,从而发生沉淀.另一 方面,由于使用的有机溶剂与水互溶,它们在溶解于水的同时从蛋白质 分子周围的水化层中夺走了水分子,破坏了蛋白质分子的水膜,因而发 生沉淀作用.
第一节 蛋白质沉淀的基本原理
沉淀剂的性质和浓度,加入蛋白质溶液的方式,反应器 的几何形状和水力学特性都会影响沉淀过程的动力学和聚集 体的数量与大小.沉淀剂的加入可快可慢,可以溶液形式也 可以固体形式加入(如硫酸铵).在搅拌式反应器或管式反 应器或活塞式流动反应器中,它们的混合情况各不相同,因 此沉淀剂和蛋白质溶液之间的接触状况在这些反应器中很不 相同,得到的絮体或聚集体的性质也不相同. 搅拌强度在成核阶段是一个非常重要的因素,可以通过 混合速率来控制初始微粒的数量和大小.可以假定:初始微 粒是在非常小的液体穴内形成的(湍动的涡流),在此穴中 沉淀剂扩散很快.如果脱稳作用快于涡流存在的时间,则沉 淀物中所含的蛋白质多少和微粒的大小可以用涡流的大小和 蛋白质的含量(蛋白质浓度)来计算.
第二节 蛋白质沉淀的基本方法 及沉淀技术的应用
生化 第四章-第四节-修改
一、氨基酸的分析分离2 氨基酸的分析分离2
分配系数Keff: 分配系数 Keff:某一物质在层析系统中的 Keff 行为并不直接决定于它们的分配系数Kd, Kd,而 行为并不直接决定于它们的分配系数 Kd, 而 是取决于有效分配系数Keff Keff。 是取决于有效分配系数Keff。
Keff=某物质在A相中的总量/某物质在B Keff=某物质在A相中的总量/某物质在B相中的 总量
5.气相色谱
定义:层析系统的流动相为气体, 定义:层析系统的流动相为气体,固定相为 涂渍在固体颗粒表面的液体, 因此也叫气- 涂渍在固体颗粒表面的液体 , 因此也叫气 - 液色谱。 液色谱。 优点:气相色谱法具有微量快速的优点。 优点:气相色谱法具有微量快速的优点。 缺点:但在分析生物成分方面存在一个限制, 缺点:但在分析生物成分方面存在一个限制, 它要求样品能气化, 且对热的稳定性高。 它要求样品能气化 , 且对热的稳定性高 。 而 氨基酸由于含有各种极性基团, 氨基酸由于含有各种极性基团 , 气化十分困 难 , 必须把它转变成容易挥发的化合物才能 进行气相层析。 进行气相层析。
超滤
(2)密度梯度(区带)离心1 密度梯度(区带)离心1
蛋白质颗粒和沉降不仅决定于它的大小, 蛋白质颗粒和沉降不仅决定于它的大小 , 而且也取决于它的密度, 而且也取决于它的密度,常用的密度梯度为 蔗糖梯度。 蔗糖梯度。 蛋白质颗粒在具有密度梯度的介质中离心 时,质量和密度大的颗粒比质量和密度小的 颗粒沉降得快, 颗粒沉降得快,并且每种蛋白质颗粒沉降到 与自身密度相等的介质梯度时,即停止不前, 与自身密度相等的介质梯度时,即停止不前, 最后各种蛋白质在离心管中被分离成各自独 立的区带。 立的区带。
1.分配柱层析2 分配柱层析2
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第四章糖代谢【测试题】一、名词解释1.糖酵解(glycolysis)11.糖原累积症2.糖的有氧氧化12.糖酵解途径3.磷酸戊糖途径13.血糖(blood sugar)4.糖异生(glyconoegenesis) 14.高血糖(hyperglycemin)5.糖原的合成与分解15.低血糖(hypoglycemin)6.三羧酸循环(krebs循环)16.肾糖阈7.巴斯德效应(Pastuer效应) 17.糖尿病8.丙酮酸羧化支路18.低血糖休克9.乳酸循环(coris循环)19.活性葡萄糖10.三碳途径20.底物循环二、填空题21.葡萄糖在体内主要分解代谢途径有()和()22.糖酵解反应的进行亚细胞定位是在()最终产物为()23.糖酵解途径中仅有的脱氢反应是在酶催化下完成的,受氢体是()两个底物水平磷酸化反应分别由()酶和()酶催化。
24.肝糖原酵解的关键酶分别是()和丙酮酸激酶。
25.6—磷酸果糖激酶—1最强的变构激活剂是()是由6—磷酸果糖激酶—2催化生成,该酶是一双功能酶同时具有()和()两种活性。
26.1分子葡萄糖经糖酵解生成分子ATP,净生成分子ATP,其主要生理意义在于。
27.由于成熟红细胞没有,完全依赖供给能量。
28.丙酮酸脱氢酶复合体含有维生素()和()29.三羧酸循环是由与缩合成柠檬酸开始,每循环一次有()次脱氢、- ()次脱羧和()次底物水平磷酸化,共生成()分子ATP。
30.在三羧酸循环中催化氧化脱羧的酶分别是()和()31.糖有氧氧化反应的进行亚细胞定位是()和()1分子葡萄糖氧化成CO2和H2O 净生成()或()分子ATP。
32.6—磷酸果糖激酶—1有两个A TP结合位点,一是A TP作为底物结合,另一是与ATP亲和能力较低,需较高浓度A TP才能与之结合。
33.人体主要通过()途径,为核酸的生物合成提供()34.糖原合成与分解的关键酶分别是()和()在糖原分解代谢时肝主要受()的调控,而肌肉主要受()的调控。
35.因肝脏含有()酶,故能使糖原分解成葡萄糖,而肌肉中缺乏此酶,故肌糖原分解增强时,生成()增多。
36.糖异生主要器官是()其次是()37.糖异生的主要原料为()和()38.糖异生过程中的关键酶分别是()和()39.调节血糖最主要的激素分别是()和()40.在饥饿状态下,维持血糖浓度恒定的主要代谢途径是()四、问答题191.简述糖酵解的生理意义。
192.试比较糖酵解与糖有氧氧化有何不同。
193.简述三羧酸循环的特点及生理意义。
194.试述磷酸戊糖途径的生理意义。
195.试述机体如何调节糖酵解及糖异生途径。
196.乳酸循环是如何形成,其生理意义是什么?197.简述6-磷酸葡萄糖的来源、去路及在糖代谢中的作用。
198.试述机体调节糖原合成与分解的分子机制。
199.试述丙氨酸如何异生为葡萄糖的。
200.试述胰高血糖素调节血糖水平的分子机理。
【参考答案】一、名词解释1.缺氧情况下,葡萄糖分解生成乳酸的过程称之为糖酵解。
2.葡萄糖在有氧条件下彻底氧化生成CO2和H2O的反应过程称为有氧氧化。
3.6-磷酸葡萄糖经氧化反应和一系列基团转移反应,生成CO2、NADPH、磷酸核糖、6-磷酸果糖和3-磷酸甘油醛而进入糖酵解途径称为磷酸戊糖途径(或称磷酸戊糖旁路)。
4.由非糖物质乳酸、甘油、氨基酸等转变为葡萄糖或糖原的过程称为糖异生。
5.由单糖(葡萄糖、果糖、半乳糖等)合成糖原的过程称为糖原的合成。
由糖原分解为1-磷酸葡萄糖、6-磷酸葡萄糖、最后为葡萄糖的过程称为糖原的分解。
6.由草酰乙酸和乙酰CoA缩合成柠檬酸开始,经反复脱氢、脱羧再生成草酰乙酸的循环反应过程称为三羧酸循环。
由于Krebs正式提出三羧酸循环,故此循环又称Krebs循环。
7.有氧氧化抑制糖酵解的现象产物巴斯德效应(Pasteur effect)。
8.丙酮酸在丙酮酸羧化酶催化下生成草酰乙酸,后经磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶催化生成磷酸烯醇式丙酮酸的过程称为丙酮酸羧化之路。
9.肌肉收缩时经酵解产生乳酸,通过血液运输至肝,在肝脏异生成葡萄糖进入血液,又可被肌肉摄取利用称为乳酸循环。
也叫Cori循环。
10.葡萄糖先分解成丙酮酸、乳酸等三碳化合物,再运往肝脏,在肝脏异生为糖原称为三碳途径或称合成糖原的简接途径。
11.由于先天性缺乏与糖原代谢有关的酶类,使体内某些器官、组织中大量糖原堆积而引起的一类遗传性疾病,称糖原累积症。
12.葡萄糖分解生成丙酮酸的过程称之为糖酵解途径。
是有氧氧化和糖酵解共有的过程。
13.血液中的葡萄糖称为血糖,其正常值为3.89~6.11mmol / L(70~110mg / dL)。
14.空腹状态下血糖浓度持续高于7.22mmol / L(130mg / d L )为高血糖。
15.空腹血糖浓度低于3.89mmol / L(70mg / dL ) 为低血糖。
16.当血糖浓度高于8.89~10.00mmol / L,超过了肾小管重吸收能力时糖即随尿排出,这一血糖水平称为肾糖阈。
17.由于胰岛素的绝对或相对不足引起血糖升高伴有糖尿的一种代谢性疾病,称为糖尿病。
18.当血糖水平过低时,就会影响脑细胞功能,从而出现头晕、倦怠无力、心悸等,严重时出现昏迷称为低血糖休克。
19.在葡萄糖合成糖原过程中,UTPG称为活性葡萄糖,在体内作为葡萄糖的供体。
20.在体内代谢过程中由催化单方向反应的酶,催化两个底物互变的循环称底物循环。
二、填空题21.糖酵解有氧氧化磷酸戊糖途径22.胞浆乳酸23.3-磷酸甘油醛脱氢NAD+ 磷酸甘油酸激丙酮酸激24.磷酸化酶6-磷酸果糖激酶-125.2、6-双磷酸果糖磷酸果糖激酶-2 果糖双磷酸酶-226.4 2 迅速提供能量27.线粒体糖酵解28.B1 硫辛酸泛酸B2 PP29.草酰乙酸乙酰CoA 4 2 1 1230.异柠檬酸脱氢酶α-酮戊二酸脱氢酶复合体31.胞浆线粒体36 3832.活性中心内的催化部位活性中心外的与变构效应剂结合的部位33.磷酸戊糖核糖34.糖原合酶磷酸化酶胰高血糖素肾上腺素35.葡萄糖-6-磷酸乳酸36.肝脏肾脏37.乳酸甘油氨基酸38.丙酮酸羧化酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶果糖双磷酸酶-1 葡萄糖-6-磷酸酶39.胰岛素胰高血糖素40.糖异生四、问答题191.糖酵解的生理意义是:(1)迅速提供能量。
这对肌肉收缩更为重要,当机体缺氧或剧烈运动肌肉局部血流不足时,能量主要通过糖酵解获得。
(2)是某些组织获能的必要途径,如:神经、白细胞、骨髓等组织,即使在有氧时也进行强烈的酵解而获得能量。
(3)成熟的红细胞无线粒体,仅靠无氧酵解供给能量。
192.糖酵解与有氧氧化的不同糖酵解有氧氧化反应条件缺氧有氧进行部位胞液胞液和线粒体关键酶己糖激酶(葡萄糖激酶)、除酵解途径中3个关键酶外还有丙酮酸脱氢磷酸果糖激酶-1、丙酮酸酶复合体、异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱激酶氢酶复合体、柠檬酸合成酶产能方式底物水平磷酸化底物水平磷酸化和氧化磷酸化终产物乳酸CO2和H2O产生能量少(1分子葡萄糖酵解净产多(1分子葡萄糖有氧氧化净产生36~38生2分子ATP)分子A TP)生理意义迅速提供能量;某些组织依是机体获能的主要方式赖糖酵解供能193.三羧酸循环的反应特点:(1)TAC是草酰乙酸和乙酰CoA缩合成柠檬酸开始,每循环一次消耗1分子乙酰基。
反应过程中有4次脱氢(3分子NADH+H+、1分子FADH2)、2次脱羧,1次底物水平磷酸化,产生12分子ATP。
(2)TAC在线粒体进行,有三个催化不可逆反应的关键酶,分别是异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶复合体、柠檬酸合成酶。
(3)TAC的中间产物包括草酰乙酸在循环中起催化剂作用,不会因参与循环而被消耗,但可以参与其它代谢而被消耗,因此草酰乙酸必需及时的补充(可由丙酮酸羧化或苹果酸脱氢生成)才保证TAC的进行。
三羧酸循环的生理意义:(1)TAC是三大营养素(糖、脂肪、蛋白质)在体内彻底氧化的最终代谢通路。
(2)TAC是三大营养素互相转变的枢纽。
(3)为其它物质合成提供小分子前体物质,为氧化磷酸化提供还原当量。
194.磷酸戊糖途径的生理意义是:(1)提供5-磷酸核糖作为体内合成各种核苷酸及核酸的原料。
(2)提供细胞代谢所需的还原性辅酶Ⅱ(即NADPH)。
NADPH的功用①作为供氢体在脂肪酸、胆固醇等生物合成中供氢。
②作为谷胱苷肽(GSH)还原酶的辅酶维持细胞中还原性GSH的含量,从而对维持细胞尤其是红细胞膜的完整性有重要作用。
③参与体内生物转化作用。
195.糖酵解和糖异生途径是方向相反的两条代谢途径。
若机体需要时糖酵解途径增强,则糖异生途径受到抑制。
而在空腹或饥饿状态下糖异生作用增强,抑制了糖酵解。
这种协调作用依赖于变构效应剂对两条途径中关键酶的相反作用及激素的调节作用。
(1)变构效应剂的调节作用:①AMP及2、6-双磷酸果糖激活6-磷酸果糖激酶-1,而抑制果糖双磷酸酶-1。
②A TP及柠檬酸激活果糖双磷酸酶-1,而抑制6—磷酸果糖激酶-1。
③ATP激活丙酮酸羧化酶,抑制了丙酮酸激酶。
④乙酰CoA激活丙酮酸羧化酶,而抑制了丙酮酸脱氢酶复合体。
(2)激素的调节:胰岛素能增强糖酵解的关键酶,己糖激酶、6-磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶等活性,同时抑制糖异生关键酶的活性。
胰高血糖素能抑制2、6-双磷酸果糖的生成及丙酮酸激酶的活性。
并能诱导磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶基因表达,酶合成增多。
因而促糖异生,抑制糖酵解。
196.乳酸循环的形成是因肝脏和肌肉组织中酶的特点所致。
肝内糖异生活跃,又有葡萄糖6-磷酸酶水解6-磷酸葡萄糖生成葡萄糖;而肌肉中除糖异生活性很低外还缺乏葡萄糖6-磷酸酶,肌肉中生成的乳酸即不能异生为糖,更不能释放出葡萄糖。
但肌肉内酵解生成的乳酸通过细胞膜弥散进入血液运输入肝,在肝内异生为葡萄糖再释放入血又可被肌肉摄取利用,这样就构成乳酸循环。
其生理意义在于避免损失乳酸以及防止因乳酸堆积而引起酸中毒。
197.6-磷酸葡萄糖的来源:(1)糖的分解途径,葡萄糖在己糖激酶或葡萄糖激酶的催化下磷酸化生成6-磷酸葡萄糖。
(2)糖原的分解,在磷酸化酶催化下糖原分解成1-磷酸葡萄糖后转变为6-磷酸葡萄糖。
(3)糖异生,由非糖物质乳酸、甘油、氨基酸异生为6-磷酸果糖异构为6-磷酸葡萄糖。
6-磷酸葡萄糖的去路:(1)进行酵解生成乳酸。
(2)进行有氧氧化彻底分解生成CO2和H2O、释放出能量。
(3)在磷酸葡萄糖变位酶催化下转变成1-磷酸葡萄糖,去合成糖原。
(4)在肝葡萄糖6-磷酸酶的催化下脱磷酸重新生成葡萄糖。
(5)经6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化进入磷酸戊糖途径,生成5-磷酸核糖和NADPH。
总之6-磷酸葡萄糖是糖酵解、有氧氧化、糖异生、磷酸戊糖途径以及糖原合成与分解的共同中间产物。