实验室操作手册
实验室仪器设备操作规程手册(2024)
![实验室仪器设备操作规程手册(2024)](https://img.taocdn.com/s3/m/6c5b6103c950ad02de80d4d8d15abe23492f0312.png)
引言概述:正文内容:1.仪器设备的基本操作步骤1.1准备工作1.1.1环境检查及安全措施1.1.2辅助设备准备1.1.3样品准备1.2设备启动及运行1.2.1电源接通及设备启动1.2.2参数设置及校准1.3样品处理1.3.1样品进样1.3.2数据采集及记录1.4设备关闭及清理1.4.1设备关闭1.4.2设备清理及维护2.常见故障排除方法2.1故障现象的判断与分析2.2故障排除的基本步骤2.3常见故障及其解决方法2.3.1电源故障2.3.2传感器故障2.3.3控制单元故障2.3.4液体泵故障2.3.5数据采集故障3.仪器设备的维护保养3.1定期保养计划制定3.2清洁与消毒3.3部件更换与维修3.4润滑与润滑剂的选择3.5环境要求及仓储措施4.安全操作规范4.1实验室安全要求4.2个人防护措施4.3废弃物管理4.4火灾和紧急情况处理4.5仪器设备操作中的安全要求5.仪器设备操作经验分享5.1操作过程中的注意事项5.2常见问题及解决方法5.3操作技巧与实用技巧5.4经验总结与分享总结:引言:实验室仪器设备是科研工作不可或缺的重要工具,正确的操作规程手册是保证实验结果准确性和实验过程安全的关键。
本文将详细介绍实验室仪器设备操作规程手册的编写和内容要点,帮助实验室人员正确操作仪器设备,提高实验效果和安全性。
一、仪器设备的基本介绍1.仪器设备的名称和型号2.仪器设备的基本原理和工作方式3.仪器设备的组成部分和功能介绍4.仪器设备的操作要求和安全注意事项5.仪器设备的维护和保养方法二、仪器设备的操作步骤1.准备工作:检查设备是否完好、准备所需材料和试剂2.仪器设备的开机和初始化3.样本的处理和准备4.仪器设备的设置和参数调整5.操作步骤的执行和数据记录三、仪器设备的常见问题和处理方法1.仪器设备的故障排除方法2.数据结果的异常情况的处理方法3.试剂或样本的误操作的处理方法4.清洗和消毒操作的要点和注意事项5.临时故障处理方法和紧急情况的处置方式四、仪器设备的质量控制和指标评价1.常见的质控方法和标准2.环境因素对仪器设备的影响及控制方法3.仪器设备的使用寿命评估和维护计划制定4.仪器设备的运行质量评价和数据分析方法5.不同型号和品牌仪器设备的比较和选择方法五、实验室仪器设备操作规程手册的维护和更新1.操作规程手册的编写和审核流程2.操作规程手册的存档和更新频率3.操作规程手册的培训和宣贯4.实验室人员的操作规程手册使用反馈和改进5.操作规程手册的变更和修订流程总结:实验室仪器设备操作规程手册的编写对于实验室的安全和高效运行非常重要。
学校实验室安全操作手册
![学校实验室安全操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/33b2b495a0c7aa00b52acfc789eb172dec639979.png)
学校实验室安全操作手册在学校里,实验室是同学们探索科学奥秘、进行实践操作的重要场所。
然而,实验室中往往存在着各种潜在的危险,如果不遵守安全操作规范,可能会导致意外事故的发生,给自己和他人带来伤害。
为了确保每一位同学都能在安全的环境中进行实验,特制定本安全操作手册。
一、进入实验室前的准备1、了解实验内容在进入实验室之前,一定要仔细阅读实验教材和相关资料,了解实验的目的、步骤和注意事项。
如果对实验内容有任何疑问,应及时向老师请教。
2、穿着合适的服装进入实验室时,应穿着长袖长裤,避免穿着短裤、短裙和拖鞋。
长发应束起,以免头发卷入仪器设备中。
3、佩戴个人防护用品根据实验的需要,佩戴相应的个人防护用品,如护目镜、手套、口罩等。
二、实验室中的安全注意事项1、遵守实验室规则严格遵守实验室的各项规章制度,听从老师的指导,不得擅自进行实验操作。
2、熟悉仪器设备的使用方法在使用任何仪器设备之前,必须认真阅读使用说明书,熟悉其操作方法和注意事项。
未经老师允许,不得随意摆弄仪器设备。
3、化学品的使用(1)了解化学品的性质在使用化学品之前,要了解其毒性、腐蚀性、易燃性等性质,并采取相应的防护措施。
(2)正确取用化学品按照规定的量取用化学品,使用后及时将容器盖好,放回原处。
严禁随意混合化学品。
(3)化学品的存放化学品应分类存放,易燃、易爆、有毒的化学品要存放在专门的柜子中,并加锁保管。
4、用电安全(1)了解电源的位置和开关熟悉实验室电源的位置和开关,以便在紧急情况下能够迅速切断电源。
(2)不得私自乱接电线严禁私自乱接电线,如需增加电器设备,应向老师报告并由专业人员安装。
(3)使用电器设备时要注意防水、防潮避免在有水的环境中使用电器设备,以防触电事故的发生。
5、防火安全(1)严禁烟火实验室是严禁烟火的场所,不得在实验室内吸烟、使用明火或焚烧物品。
(2)灭火器材的使用了解实验室灭火器材的位置和使用方法,一旦发生火灾,能够迅速采取灭火措施。
实验室操作手册
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• ⑷ 开机后,不按设置键,直接进行测试,即拉伸20cm返回。每当按“复位键”后, • 拉伸长度均自动设为20cm。
4、ISO 105-A03:1993欧标灰卡
• 用途:用于干/湿磨擦色牢度评级; 沾色牢度评级。
• 用法:在充分黑暗的环境 下,在灯 箱D65光源下,45度斜角评级。
5ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱpH计 pH827
• 说明:天然 纤维或含有 天然纤维成 份的面料需 要测PH值。
• 测试方法: 详见PH操作 手册
6、HY-4调速多用振荡器
7、伊莱克斯W455H洗衣机
用途: W355H洗衣机为H&M指定仪 器,以保证我们的测试结果和H&M 结果一致。 操作指导: 1、将洗衣机门打开(如图2),把 测试样品放进去,把门锁上,放10g 碧浪洗衣粉(如图3) 。 2、根据成衣的洗唛选择水温设定程 序;按开关,启动程序(如图2) 。 备注:常规水温40度,用时:42~49 分钟,样品厚薄轻重会直接影响洗 衣时长。 3、常规程序:洗涤、漂洗、过软, 脱水、甩干、结束。(如图2); 4、洗水完成后拿出样品,关闭电源 。
• 2、洗涤完成后拿出 样品并关掉开关。
10、伊莱克斯T4130烘箱
• 用途:对测试 样衣的烘燥。
• 操作说明:按 照洗唛上烘燥 温度的要求设 定好温度和时 间。
• 如图2上的功能 键介绍
11、扬子佳美冰箱(BC-98)
• 说明:主要用 来储存化学用 品,比如:pH 缓冲液 6.00/10.00, pH电极保护液 等等。
• 4、 选择定时,定时开关如左图中间 的旋钮,定时范围:0-120分钟将定 时旋钮调至“定时”或“常开”位 置。
• 5、接通外电源,将电源开关(左图 红色按钮)置于“开”的位置,指 示灯亮。缓慢调节调速旋钮,升至 所需转速。 每次停机前,必须将调 速旋钮置于最小位置,再将定时器 置“零”,关闭电源开关,切断电 源
实验室安全操作手册
![实验室安全操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/64704bc2900ef12d2af90242a8956bec0875a57e.png)
实验室安全操作手册第一章:实验室安全概述1.1 实验室安全意识的重要性实验室安全是保障实验室工作人员和设备安全的重要保障措施。
具备正确的实验室安全意识,能够有效预防和应对潜在的危险和事故,保障实验室的正常运行。
1.2 实验室安全管理体系建立完善的实验室安全管理体系是确保实验室安全的基础。
包括安全责任制度、安全培训与教育、安全设施与装备、事故应急预案等方面的内容。
第二章:实验室安全操作规范2.1 实验室出入管理进入实验室前,必须佩戴适当的个人防护装备,如实验服、手套、护目镜等。
离开实验室时,要确保实验台面上的试剂、设备等已经妥善处理。
2.2 实验室试剂的储存与管理试剂的储存应按照其性质分类,并标明相关安全注意事项。
易燃、易爆、剧毒等试剂应单独存放在专用柜中,严禁与其他试剂混放。
2.3 实验室设备的操作与维护使用实验室设备前,必须了解其操作规范,并按照要求进行操作。
实验结束后,要及时清理设备并进行维护保养,确保设备的正常运行。
2.4 实验室废弃物的处理实验室废弃物应按照规定分类处理,并妥善存放在指定的容器中。
废弃物的处理应符合相关法律法规和环保要求,确保不对环境造成污染。
第三章:实验室安全事故应急处理3.1 实验室事故的分类与等级实验室事故可分为火灾、泄漏、爆炸等不同类型,根据事故的严重程度进行等级划分。
了解不同等级事故的特点和处理方法,能够更好地应对实验室事故。
3.2 实验室事故应急预案建立实验室事故应急预案,明确各类事故的应急处理措施和责任分工。
定期组织演练,提高实验室工作人员的应急处理能力和危机意识。
3.3 实验室事故记录与分析对实验室发生的事故进行记录和分析,总结事故原因,提出改进措施,以避免类似事故再次发生。
并将记录和分析结果及时通报给相关人员。
第四章:实验室安全培训与教育4.1 实验室安全培训计划根据实验室工作人员的不同职责和需求,制定相应的安全培训计划。
包括新员工培训、定期安全知识培训等内容,提高员工的安全意识和操作技能。
实验室操作规范技术手册
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实验室操作规范技术手册一、引言实验室操作规范技术手册是为了保证实验室工作的安全性、可靠性和规范性而编写的重要文件。
本手册旨在提供一套可行的操作指南,确保实验室操作人员能够正确、标准地进行实验室工作,降低事故和错误的发生率,保障实验室的正常运行。
二、实验室安全操作规范2.1 工作服和个人防护装备2.1.1 所有人员进入实验室必须穿戴符合标准的实验室工作服和个人防护装备。
2.1.2 工作服和个人防护装备必须经常清洗和更换,确保其保持整洁和可用性。
2.1.3 不得在实验室内穿戴外出的衣物和饰品,如围巾、项链、戒指等。
2.2 实验室进出要求2.2.1 在进入实验室前,必须按规定进行洗手,并戴上适当的个人防护装备。
2.2.2 入口处必须清晰标识实验室的级别和所需个人防护装备,并配备必要的消毒设施。
2.2.3 进入和离开实验室时,要保持实验室门的关闭以防止外界物质进入。
2.3 实验室危险品的管理2.3.1 实验室必须按照相关法规和标准储存、使用和处理危险化学品。
2.3.2 实验室内的危险化学品必须标识清晰,每个容器上必须贴有正确的标签,并保持容器的密闭性。
2.3.3 危险化学品必须进行分类、分级和储存,确保其与其他物质隔离,并避免发生化学反应。
2.4 实验操作规范2.4.1 实验之前必须阅读并熟悉实验操作手册,并了解实验可能存在的危险、注意事项和操作步骤。
2.4.2 实验操作过程中应注意操作环境的清洁和整洁,并及时清理实验台面、设备和试剂。
2.4.3 实验操作人员必须根据实验需要正确选择和使用实验仪器和设备,并保证其正常运行和安全使用。
2.5 实验室废弃物管理2.5.1 所有废弃物必须根据相关法规和标准进行正确分类、分装和处理,并将其放置在指定的处置场所。
2.5.2 废弃物容器必须标注清晰的标签,包括废弃物的类型、数量和处理日期等信息。
三、实验室安全应急处理指南3.1 火灾应急处理3.1.1 发现火灾时,立即按实验室内的火灾报警按钮,并迅速撤离实验室。
实验室安全操作手册
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实验室安全操作手册在实验室中工作,安全永远是首要任务。
无论是进行科学研究、教学实验还是质量检测,都必须遵循严格的安全操作规范,以保障人员的生命安全和实验室的正常运行。
本手册将为您详细介绍实验室安全操作的各个方面。
一、实验室环境安全1、实验室布局合理规划实验室的布局至关重要。
不同功能的区域应明确划分,如实验区、仪器区、储存区等。
实验台之间要保持足够的间距,以便于操作和人员走动。
2、通风系统良好的通风能有效排除实验过程中产生的有害气体和粉尘。
通风设备应定期检查和维护,确保其正常运行。
3、清洁与卫生保持实验室的清洁卫生是防止污染和交叉感染的重要措施。
实验结束后,应及时清理实验台面、仪器设备和地面。
二、个人防护装备1、实验服进入实验室必须穿着长袖、过膝的实验服,以保护身体免受化学物质的溅洒和伤害。
2、防护眼镜在进行可能产生飞溅物、刺激性气体或其他危险物质的实验时,应佩戴防护眼镜。
3、手套根据实验的性质选择合适的手套,如耐酸碱手套、防割手套等。
手套使用后应正确处理,避免交叉污染。
4、口罩在有粉尘、有害气体或微生物的环境中,应佩戴口罩。
三、化学品安全1、化学品的储存化学品应按照其性质分类存放,易燃、易爆、有毒的化学品要存放在专门的储存柜中,并做好标识。
储存柜应保持通风良好,远离火源和热源。
2、化学品的使用在使用化学品前,必须仔细阅读其安全说明书,了解其危险性和应急处理方法。
严格按照操作规程进行取用和使用,避免浪费和泄漏。
3、化学品的废弃废弃的化学品应按照规定的程序进行处理,不能随意倒入下水道或垃圾桶。
四、仪器设备安全1、仪器设备的选择根据实验的需求选择合适的仪器设备,并确保其质量和性能符合要求。
2、仪器设备的安装与调试新仪器设备在安装和调试时,应按照说明书进行操作,由专业人员完成。
3、仪器设备的使用操作人员必须经过培训,熟悉仪器设备的操作方法和注意事项。
使用过程中要定期检查仪器设备的运行状态,发现问题及时维修。
化学实验室安全操作手册
![化学实验室安全操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/365efa4c54270722192e453610661ed9ad5155e7.png)
化学实验室安全操作手册一、实验室安全规则1、进入实验室前,必须了解实验室的安全规定和紧急出口位置。
2、穿着合适的实验服,佩戴防护眼镜、手套等个人防护装备。
3、禁止在实验室内饮食、吸烟、大声喧哗和嬉戏打闹。
4、保持实验室整洁,实验结束后及时清理实验台和仪器设备。
二、化学品的安全使用1、了解所使用化学品的性质、危害和安全操作方法。
2、化学品应按照规定分类存放,易燃易爆、有毒有害的化学品要存放在专门的储存柜中,并上锁保管。
3、取用化学品时,要遵循“少量多次”的原则,避免浪费和意外发生。
4、化学品的标签应清晰完整,如有脱落或损坏,应及时更换。
三、仪器设备的安全使用1、熟悉各种仪器设备的操作方法和注意事项,严格按照操作规程进行操作。
2、定期对仪器设备进行检查和维护,确保其正常运行。
3、加热设备(如电炉、酒精灯等)使用时要有人看守,防止火灾发生。
4、电器设备要接地良好,避免触电事故。
四、实验操作的安全注意事项1、进行实验前,要做好充分的准备工作,包括检查仪器设备、准备实验用品等。
2、严格控制实验条件,如温度、压力、浓度等,避免发生危险。
3、进行有危险的实验(如有毒气体产生、爆炸等)时,要在通风橱内进行,并采取必要的防护措施。
4、实验过程中要密切观察实验现象,如有异常情况应立即停止实验,并采取相应的措施。
五、废弃物的处理1、实验产生的废弃物要分类收集,按照规定进行处理。
2、有害废弃物(如有毒液体、固体等)要进行无害化处理,严禁随意丢弃。
3、可回收利用的废弃物要进行回收处理,以节约资源。
六、紧急情况的处理1、火灾:一旦发生火灾,应立即切断电源,使用灭火器或消防沙进行灭火,并及时报告消防部门。
2、化学品泄漏:如果发生化学品泄漏,应迅速撤离现场,打开通风设备,并用适当的方法进行处理(如用吸附剂吸附、用中和剂中和等)。
3、中毒:如有人中毒,应立即将其转移到通风良好的地方,并拨打急救电话。
4、触电:发生触电事故时,应立即切断电源,对触电者进行急救,并拨打急救电话。
实验室操作手册
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实验室操作手册简介本实验室操作手册旨在指导实验室工作人员正确操作实验室设备、遵守实验室规章制度,确保实验室工作的安全与高效。
实验室安全1. 所有进入实验室的人员必须佩戴个人防护装备,包括实验室服、实验手套、护目镜等。
在实验中涉及有毒、易燃、易爆物质或高温操作时,必须穿戴相应的个人防护设备。
2. 工作人员必须熟悉实验室中的紧急救援装备位置,包括紧急洗眼器、紧急淋浴器、灭火器等,并且知道如何正确使用这些装备。
3. 实验室禁止携带食物和饮料入内,禁止吸烟,并保持实验室的通风良好。
设备操作1. 在操作设备之前,必须先读取相关设备的使用说明和操作手册,了解设备的功能、操作步骤和安全注意事项。
2. 每位工作人员都应熟悉设备的电源开关、调节按钮和紧急停止按钮的位置,并使用正确的方法启动和关闭设备。
3. 实验室中的设备使用完毕后,工作人员应当进行及时的清洁与消毒。
对于需要维护和保养的设备,应按照设备操作手册中的要求进行维护和保养工作。
4. 在使用设备时,要确保操作台面干燥整洁,避免液体或固体物质滴落或洒落到设备上,以免损坏设备。
废弃物处理1. 实验室废弃物应根据其性质分类储存,并且妥善标记名称和危险程度。
2. 非危险废弃物应放置于专用垃圾桶内,并定期清理和更换垃圾袋。
3. 危险废弃物应根据所需的处理方式进行储存,并通过合法渠道进行处理。
4. 在处理废弃物时,应遵循有关法律、法规和实验室的相关规定,确保废弃物的安全处理和处置。
紧急程序1. 发生紧急情况时,工作人员应立即向实验室管理员汇报,并按照紧急程序进行处理。
2. 在火灾发生时,工作人员应迅速使用灭火器进行灭火,如情况无法控制,应立即撤离实验室并通知消防部门。
3. 对于意外溅洒到皮肤的化学品,应立刻用大量清水冲洗,并向医护人员寻求帮助。
结论本实验室操作手册包含实验室安全、设备操作、废弃物处理和紧急程序等内容,旨在帮助实验室工作人员正确操作设备、遵守规章制度,确保实验室安全和工作高效进行。
科研实验室安全操作手册
![科研实验室安全操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/44da955ca66e58fafab069dc5022aaea998f4135.png)
科研实验室安全操作手册尊敬的科研实验室成员:为了确保您在实验室工作期间的安全和顺利进行,我们特别编写了这份科研实验室安全操作手册。
请您认真阅读并牢记以下内容,并在实验室工作中严格遵守安全规定和操作要求,以保障您自身的安全以及实验室的正常运作。
一、实验室基本安全规定1.佩戴个人防护装备在进入实验室之前,请先佩戴必需的个人防护装备,包括实验室提供的实验服、手套、护目镜、口罩等。
这些装备将为您提供必要的防护,减少受伤或感染的风险。
2.熟悉实验室布局和安全设施在开始实验之前,您应该熟悉实验室的布局和安全设施的位置。
了解实验室的安全出口、紧急报警按钮和消防器材的使用方法,以便在紧急情况下能够迅速采取相应措施。
3.禁止私自操作设备私自操作实验室的设备是极其危险的行为。
除非您已经经过相关培训并获得授权,否则严禁任何非授权人员操作实验室的设备。
4.注意化学品安全在使用化学试剂之前,必须仔细阅读并遵守相关安全操作规程。
避免接触皮肤、眼睛和口腔等部位。
将试剂放置在指定的安全位置,并确保合理密闭储存和处理。
5.遵守实验室纪律每个实验室成员都应该遵守实验室的纪律和规定。
不得擅自借用他人的实验材料和设备,不得在实验室内吃东西,不得随意更改实验设置等。
二、实验室急救处理1.意外伤害处理在发生意外伤害或受伤时,请立即停止实验操作,寻找助教或实验室负责人寻求帮助。
同时,您应该学会简单的急救处理方法,如处理创伤、烧伤和化学品溅伤等。
2.火警应急处理如果发生火警,请立即按下警报器,用湿毛巾捂住口鼻,并迅速离开实验室,沿着逃生指示标志前往安全出口处。
不要乘坐电梯,如果身上有明火,请立即就地翻滚灭火。
三、实验室设备与仪器的操作规范1.设备使用前检查在使用设备和仪器之前,请仔细检查其是否完好无损,如有损坏或异常情况应及时向实验室负责人报告,避免因设备问题导致意外发生。
2.合理操作仪器在操作仪器时,请务必按照正确的步骤进行,勿过度操作或随意更改设置。
实验室操作手册规范
![实验室操作手册规范](https://img.taocdn.com/s3/m/3a978b6659fb770bf78a6529647d27284a73374a.png)
实验室操作手册规范1. 实验室操作概述实验室操作手册是为了规范实验室操作流程,保证实验室工作的顺利进行而制定的。
本手册旨在提供一份详尽的操作指南,以确保实验室工作的安全和高效。
2. 实验室安全注意事项- 开展实验前,首先应了解相关实验室的安全规范,并确保自己对实验室安全操作程序的理解和掌握。
- 操作人员须佩戴适当的实验室防护用品,如实验室服、手套、护目镜和口罩等。
- 实验室内禁止吃东西,禁止饮水。
严禁将实验室器皿用作个人用途。
- 各种试剂应妥善保存,避免与其他物品混淆,防止发生意外。
- 实验室操作完毕后,及时清洗操作台、仪器设备,并保持实验室的整洁和干净。
3. 实验室操作流程- 在进行任何实验之前,请仔细阅读实验操作手册,了解实验目的和步骤。
- 准备实验所需的试剂和设备,并按照实验室操作规范进行摆放。
- 在操作台上清理工作区域,确保无杂乱物品。
- 根据实验要求,准备好容量精准的试管、烧杯等实验器皿。
- 根据实验步骤操作,确保每一步的顺利进行。
- 记录实验中的观察结果和数据,及时整理和上传到实验记录系统。
- 实验结束后,彻底清理实验器皿和操作台,妥善处理废弃物。
4. 实验室设备使用规范- 使用实验设备前,应先仔细阅读设备操作说明书,并遵守操作指南进行正确操作。
- 使用前,检查设备是否正常运行,如有异常情况应及时报修。
- 使用实验设备时,需注意操作步骤,避免错误操作导致设备损坏或人身伤害。
- 操作过程中,不得擅自修改实验设备的设置参数和电源线连接等。
- 使用完毕后,应将设备归位,并检查设备周围是否清洁整齐。
5. 废弃物和环境保护- 使用完毕的试剂和废液,应按照相关规定进行分类和处理。
- 废弃物应放入指定的废弃物中,严禁随意丢弃。
- 实验室内保持良好的通风,避免有害气体滞留。
- 环境保护意识应深入人心,鼓励开展垃圾分类、节约用水等环保行动。
6. 安全事故处理- 在实验过程中如发生安全事故,应立即采取措施确保人员安全,如紧急停止实验、报警并请示主管领导。
校园实验室安全操作手册
![校园实验室安全操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/0587d2857e192279168884868762caaedd33baa8.png)
校园实验室安全操作手册在校园中,实验室是进行科学研究和教学实践的重要场所。
然而,实验室中往往存在着各种潜在的危险,如果不遵循正确的安全操作规范,可能会对师生的健康和安全造成威胁。
为了确保大家能够在安全的环境中进行实验,特制定本校园实验室安全操作手册。
一、实验室安全基础知识1、了解实验室的潜在危险实验室中常见的危险包括化学品泄漏、火灾、爆炸、触电、中毒、放射性物质辐射等。
在进入实验室之前,要清楚了解所进行实验可能涉及的危险,并做好相应的防护措施。
2、认识安全标识实验室中会有各种安全标识,如禁止标识、警告标识、指令标识和提示标识等。
要熟悉这些标识的含义,并严格按照标识的要求进行操作。
3、个人防护装备进入实验室必须穿戴适当的个人防护装备,如实验服、防护眼镜、手套、口罩等。
不同的实验可能需要不同的防护装备,要根据实验的具体情况进行选择。
二、化学品的安全使用1、化学品的储存化学品应按照其性质分类存放,易燃、易爆、有毒、有腐蚀性的化学品要分别存放在专门的储存柜中,并保持通风良好。
化学品的储存柜要上锁,防止未经授权的人员接触。
2、化学品的取用取用化学品时要仔细阅读标签和说明书,了解其性质、危害和使用方法。
使用量具准确量取所需的化学品,避免浪费和污染。
取用后要及时将化学品瓶盖拧紧,放回原处。
3、化学品的使用在使用化学品进行实验时,要在通风橱内进行,避免化学品蒸气对人体造成伤害。
如果不慎将化学品溅到皮肤上或眼睛里,应立即用大量清水冲洗,并及时就医。
三、仪器设备的安全使用1、仪器设备的检查在使用仪器设备之前,要对其进行检查,确保其性能良好、无损坏。
如果发现仪器设备存在故障或安全隐患,应及时报告并维修。
2、正确操作仪器设备严格按照仪器设备的操作规程进行操作,不得随意更改操作步骤。
对于不熟悉的仪器设备,要在老师或技术人员的指导下进行操作。
3、仪器设备的维护定期对仪器设备进行维护和保养,保持其清洁、干燥、润滑。
维护和保养工作应由专业人员进行,不得私自拆卸仪器设备。
医学实验室技术操作手册
![医学实验室技术操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/e7782d62580102020740be1e650e52ea5518ceaa.png)
医学实验室技术操作手册1. 实验室安全指南1.1 实验室环境与设备实验室应保持清洁、整洁。
设备使用前应检查是否正常运作。
1.2 个人防护操作人员应佩戴实验室指定的个人防护用具,如实验室服、手套、护目镜等。
1.3 废弃物处理废弃物应按规定分类处理,并放置在指定的容器中,确保环境卫生。
2. 样本采集与处理2.1 样本采集准备在采集前,确认所需材料齐备,并检查样本采集器械的完整性与清洁度。
2.2 手部消毒和穿戴手套手部消毒后,穿戴干净的手套,以确保采集过程的无菌性。
2.3 样本采集技巧采用合适的采集方法和适量的样本,避免干扰因素的影响。
2.4 样本储存与运输将样本储存在适当的温度下,并按规定标记,确保安全运输。
3. 试剂使用与储存3.1 试剂准备检查试剂的标签、有效期和储存条件,并按照使用说明进行准备。
3.2 试剂使用技巧仔细遵循试剂使用指南,按照准确浓度和比例使用试剂。
3.3 试剂储存条件将试剂存放在正确的温度和湿度条件下,并避免阳光直射和污染。
4. 实验仪器操作4.1 仪器前操作准备检查仪器的完整性和清洁度,并确认所需的耗材和试剂已准备就绪。
4.2 仪器操作步骤详细描述每个仪器的操作步骤,包括启动、样本处理、数据录入等流程。
4.3 仪器日常维护定期进行仪器的维护和保养,清洁仪器表面和内部的污垢。
4.4 仪器故障排除列举常见的仪器故障,并给出相应的解决方法。
5. 结果分析与报告5.1 结果的解读对实验结果进行详细的分析和解读,并考虑实验条件、误差和参考范围。
5.2 报告的编写编写准确、清晰的实验报告,包括实验目的、方法、结果和结论等要素。
5.3 结果记录与保存结果应准确记录,并按规定保存,以便后续查询和分析。
通过本手册,您可以了解到医学实验室中各项操作的基本原则和实施方法。
遵循操作手册,确保实验室操作的安全性、准确性和可靠性,是保证实验结果有效性的关键。
在操作过程中,需要时刻关注实验室的安全环境和个人的防护,严格遵循实验室规范和操作流程,以保证实验的顺利进行。
学校实验室安全操作手册
![学校实验室安全操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/7166a61c302b3169a45177232f60ddccda38e6a5.png)
学校实验室安全操作手册一、引言实验室是学校教学和科研的重要场所,为了保障实验室的安全,减少意外事故的发生,特编制此安全操作手册。
本手册将为实验室人员提供必要的安全知识和操作指南,帮助他们正确使用实验设备、处理危险物质,以及应对紧急情况。
二、实验室设备操作1. 实验设备的正确使用- 在操作设备之前,先阅读并熟悉设备的操作说明书,并确保已经获得相关的培训与指导。
- 选择合适的设备来完成实验,并按照正确的步骤进行操作。
- 不得随意更改设备的设置、参数等,除非经过批准或需要进行实验调整。
- 操作结束后,及时对设备进行清洁和维护,确保其正常工作和安全性能。
2. 危险化学品的操作- 在使用危险化学品之前,先了解其性质、特点和相关的安全措施。
- 使用危险化学品时,佩戴个人防护装备,如实验手套、护目镜、实验服等。
- 确保实验室通风良好,并使用化学品时要保持合适的距离,避免呼吸到有毒气体。
- 严禁随意调配或混合危险化学品,以免发生化学反应或爆炸。
三、实验室危险品管理1. 危险品存放- 危险品应储存在专门设计的柜子或货架上,并且应当标有明确的标识,方便辨认。
- 不同种类的危险品要严格分开存放,避免发生混乱、泄漏或反应。
- 过期或废弃的危险品必须及时进行处理,并严禁随意丢弃或混合存放。
2. 废弃物处理- 废弃物应归类、分装并妥善处理,不能直接丢弃到普通垃圾箱。
- 对于有毒、易燃、易爆等危险特性的废弃物,应按照相关的规定进行专门处理。
- 非危险性废弃物也要进行分类处理,如纸张、瓶子等可回收物要进行回收。
四、安全应急措施1. 火灾事故处理- 熟悉灭火器材的种类和使用方法,知道最近的灭火器的位置。
- 当发生火灾时,立即向周围人员发出警报,并尽快报警。
- 对于小型火灾,可使用灭火器进行扑灭,但务必确保自身安全。
- 对于无法控制的火灾,应迅速撤离实验室,并按照逃生预案进行疏散。
2. 溢液和意外伤害- 在进行实验时,及时清理掉溢出的液体,避免造成滑倒或其他伤害事故。
实验室操作手册流程
![实验室操作手册流程](https://img.taocdn.com/s3/m/bccaa558793e0912a21614791711cc7930b7784e.png)
实验室操作手册流程
目标
本操作手册旨在为实验室操作人员提供清晰的指导和流程,以确保实验室工作的安全性和高效性。
准备
在进行实验室操作之前,操作人员应进行以下准备工作:
1. 检查所需实验材料和设备是否完备。
2. 确保实验室安全设施完好并处于工作状态,如紧急出口、灭火器等。
3. 检查实验室清洁度,确保操作区域干净整洁。
流程
实验室操作手册的流程分为以下几个步骤:
1. 确定实验目的和方法。
2. 仔细阅读相关实验操作手册和安全手册,了解实验步骤及安全要求。
3. 按照操作手册的指导准备实验材料和设备。
4. 佩戴个人防护装备,如实验手套、安全眼镜等。
5. 将实验装置置于操作台上,调整设备参数至所需数值。
6. 预热设备,确保实验开始时温度和环境适宜。
7. 按照实验方法逐步进行实验操作。
8. 注意观察实验过程中产生的现象和数据,记录实验结果。
9. 如果发生意外情况或实验失控,立即停止实验,并向主管或安全人员报告。
10. 在实验结束后,清理实验区域,归还实验材料和设备,并关闭设备电源。
注意事项
在进行实验室操作时,注意以下事项:
1. 严格遵守实验室操作规程和安全要求。
2. 注意个人防护,确保佩戴防护装备。
3. 小心操作,避免破坏实验材料和设备。
4. 注意实验中产生的废物和危险物质的处理,遵守环保和安全规定。
5. 定期检查实验材料和设备的状态,及时修理或更换损坏的部件。
本操作手册涵盖了基本的实验室操作流程和要求,但在具体实验中,操作人员应根据实际情况和实验要求做出相应调整和判断。
实验室操作手册手指南
![实验室操作手册手指南](https://img.taocdn.com/s3/m/862fd21c3a3567ec102de2bd960590c69ec3d8f4.png)
实验室操作手册手指南1. 引言实验室操作手册是对实验室内各种实验操作的规范和指导,用于确保实验室工作的安全、高效进行。
本手册旨在提供给实验室工作人员,包括实验室主管、实验员和其他相关人员,帮助他们正确、规范地使用实验室设备和执行实验操作。
2. 实验室安全规范2.1 实验室准入要求- 进入实验室前,必须佩戴实验室服装、安全鞋和防护眼镜。
- 禁止携带易燃、易爆、剧毒或有害物质进入实验室。
- 禁止在实验室内吃东西、吸烟或进行其他与实验无关的活动。
2.2 实验室设备操作要求- 在使用实验室设备之前,必须熟悉设备的操作说明和安全规范。
- 禁止未经授权的人员擅自调整设备的参数或进行维修。
- 在操作任何设备之前,必须确保设备与电源之间的连接安全可靠。
2.3 实验室事故处理要求- 当发生实验室事故时,必须立即向实验室主管报告,采取相应的应急措施。
- 在事故处理过程中,不得擅自改变现场或移动可能的证据。
- 对于实验室事故中受伤的人员,必须立即提供急救并送往医院。
3. 实验操作指南3.1 实验前准备- 确保实验室环境整洁、无障碍,并将实验所需的材料和设备准备齐全。
- 仔细阅读实验操作步骤和相关安全注意事项,确保了解实验的整体流程。
3.2 实验过程- 严格按照实验操作步骤执行实验,确保操作的准确性和规范性。
- 注意实验过程中的安全事项,遵守化学品的使用和处理规范。
- 如发现实验结果异常或有意外情况发生,应立即停止操作并报告实验室主管。
3.3 实验后处理- 实验结束后,清理实验台面和设备,确保实验室环境整洁干净。
- 对实验结果进行记录和整理,保留有关实验数据和材料。
4. 实验室设备使用手册实验室设备使用手册是对各种具体设备的详细说明和操作指南。
请参阅相关设备的使用手册以了解设备的具体操作要求和注意事项。
5. 实验室操作培训与考核为确保实验室操作的规范和安全,实验室工作人员必须接受相关的操作培训和考核。
实验室主管应负责组织相关培训和考核工作,并定期进行复和更新。
科研实验室安全操作规程手册
![科研实验室安全操作规程手册](https://img.taocdn.com/s3/m/7b76b29377a20029bd64783e0912a21615797f69.png)
科研实验室安全操作规程手册1. 前言科研实验室是进行学术研究和创新的重要场所,为了保障实验人员和设备的安全,提高实验工作的效率和质量,制定了本《科研实验室安全操作规程手册》。
本手册旨在规范实验室的日常操作行为,控制实验室内的风险,减少事故发生的可能性。
2. 实验室准备2.1 实验人员须在进入实验室前进行相关的安全培训,并理解本手册的内容;2.2 在进行实验前,实验人员应检查实验室设备、仪器的安全状态,如有异常现象应立即报告修理;2.3 实验人员应检查消防器材的完好性,并熟悉其使用方法;2.4 检查安全柜、储存柜等是否符合要求,有无泄漏或损坏。
3. 实验操作3.1 实验室操作人员应穿戴适当的实验服,佩戴安全帽、防护眼镜等个人防护装备;3.2 遵守实验室内的通行规则,不得奔跑、打闹或吸烟;3.3 实验人员应按照实验方案进行操作,切勿随意更改实验条件或参数;3.4 在使用有毒、易燃、易爆等危险品时,必须进行标记,并遵守相应的操作规程;3.5 实验结束后,实验人员应及时清理实验现场,归还使用的器材和材料,保持实验室的整洁和安全。
4. 废弃物管理4.1 废弃物应分类储存,并放置于指定的储存容器中;4.2 有机溶剂、酸碱废液等应存放于耐腐蚀、密闭的容器中;4.3 废弃物应定期送往指定的处置点处理,不得随意丢弃或倾倒;4.4 废弃物管理过程中应注意防止污染环境和不安全的操作。
5. 紧急事故处理5.1 实验室中如发生火灾、泄漏等紧急事故,应立即按实验室安全应急预案操作,确保个人安全和事故的扩散;5.2 灭火器的使用需要掌握正确的使用方法,尽量使用针对不同火灾类型的火灭灾器;5.3 在紧急情况下,应及时向相关负责人报警,并配合消防部门的救援工作;5.4 事故发生后,需要及时进行安全事故的调查和记录,总结经验教训,完善安全管理体系。
6. 安全责任6.1 实验室负责人应制定并执行本手册中的规章制度,定期进行安全培训和检查;6.2 实验室成员应严格遵守实验室的安全操作规程,自觉维护实验室的安全环境;6.3 对于存在安全隐患的行为和设备,实验室成员有权利和义务向实验室负责人进行报告和整改。
学生实验室安全操作手册
![学生实验室安全操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/038121090a4c2e3f5727a5e9856a561252d3218f.png)
学生实验室安全操作手册引言实验室是大学教育中重要的一环,提供了学习、实践科学知识的机会。
然而,实验室中也存在许多潜在的危险因素。
为了确保学生在实验室中的安全,特编写此安全操作手册,旨在指导学生正确、安全地进行实验操作。
一、实验室入场须知1.1 穿戴适当的防护服:进入实验室前确保已穿戴适当的防护服,包括实验室外套、防护手套、实验眼镜和实验室鞋。
1.2 带好个人证件:进入实验室前需要带好学生证或其他个人身份证件,以便工作人员核实身份。
1.3 注意禁止事项:禁止在实验室内食用、吸烟、喝水,同时禁止将食物或饮料带入实验室。
二、实验室仪器设备的正确使用2.1 仪器设备认识:学生在使用任何仪器设备前,必须熟悉其结构和使用方法,并向实验室管理员咨询相关问题。
2.2 电器使用规范:确保使用电器设备时,插头正常接地,线路无漏电情况,并避免将设备靠近水源。
2.3 化学品存储注意事项:学生在使用实验室中的化学品前,必须了解其性质和储存要求,并按照规定的方法进行储存。
三、实验室实验操作的基本要求3.1 细心认真:进行实验操作时,学生应细心认真,全神贯注,避免粗心大意产生危险。
3.2 按规定操作:学生在进行实验操作时,必须按照教师或实验室管理员的指导进行,不得擅自更改实验方案或步骤。
3.3 知识储备:学生在进行实验操作前,应提前预习实验内容,了解实验的目的、原理及可能的危险因素。
四、实验中的安全防护措施4.1 防护眼镜:进行与化学品有关的实验时,必须佩戴防护眼镜,以避免化学液体或固体溅入眼睛造成伤害。
4.2 防护手套:操作化学品或与锋利物品接触时,必须戴上防护手套,以防止皮肤受伤或化学物质侵入。
4.3 实验室外套:穿戴实验室外套可防止衣物被化学物质污染,并阻挡溅到身体的物体。
五、实验废弃物处理方法5.1 分类储存:将实验室废弃物按类别分类储存,包括化学品废液、废弃试剂、废弃的实验用品等。
5.2 合理处理:根据不同类型的废弃物,采取相应的处理措施,如化学品废液应由专业人员处理,废弃试剂应按规定清洗后或封存妥善处理。
学校实验室安全操作手册
![学校实验室安全操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/755908fcd4bbfd0a79563c1ec5da50e2524dd18e.png)
学校实验室安全操作手册第一部分:实验室安全基础知识实验室是学生进行科学实验和研究的重要场所。
但是,实验室中存在各种危险和风险,学生们必须了解和遵守相关的安全操作手册,以确保实验室工作的安全。
1.1 实验室危险品和标识实验室中常见的危险品包括有毒物质、易燃物质、腐蚀性物质等。
在实验室内,这些危险品应该妥善存放,并标有相应的标志。
例如,有毒物质应该用标有“有毒”的标志进行标识,易燃物质应该用标有“易燃”的标志进行标识。
学生必须熟悉这些标志的含义,并避免接触到这些危险物质。
1.2 实验室安全装置和设备实验室中的一些安全装置和设备对于保护学生的生命和健康至关重要。
例如,紧急报警按钮、紧急洗眼器和淋浴器等。
学生在使用这些设备时,必须熟悉其使用方法,并保持设备的正常运作。
第二部分:实验室操作安全规范2.1 实验前的安全准备在进行实验之前,学生必须仔细检查实验室中的安全设施和设备是否正常运作。
同时,需要穿戴适当的个人防护装备,例如实验眼镜、实验手套和实验服等。
2.2 实验器材和试剂的正确使用学生在进行实验时,必须正确使用实验器材和试剂。
例如,使用玻璃容器时要注意防止破裂,使用刀具时要小心操作,避免切伤手指。
同时,要准确使用试剂,并遵守实验操作规程,防止产生危险的化学反应。
2.3 火灾和紧急情况的处理在实验室中发生火灾或其他紧急情况时,学生需要冷静应对。
首先,立即按下紧急报警按钮,通知负责人员和其他同学。
其次,迅速疏散到安全区域,并遵循教师或负责人员的指示。
在火灾发生时,学生不得擅自使用灭火器,应等待专业人员前来处理。
第三部分:实验室废物处理和环境保护3.1 实验废物的分类和储存实验废物必须按照危险性进行分类,并储存于相应的容器中。
例如,有毒废物应该存放在特定的有毒废物桶中,化学废液应该存放在密闭的容器内。
学生在使用完实验废物后,必须妥善处理,以避免对环境造成污染。
3.2 实验室的环境保护学生在实验室工作过程中,应该遵守环境保护法规。
实验室安全操作手册
![实验室安全操作手册](https://img.taocdn.com/s3/m/8be6ca4f00f69e3143323968011ca300a7c3f64e.png)
实验室安全操作手册1. 前言本实验室安全操作手册是为了确保实验室工作环境的安全,保护实验室人员的身体健康而编写的。
阅读本手册前,请务必仔细阅读,严格按照要求执行。
2. 实验室入口与出口管理2.1 出入口设置2.1.1 实验室出入口应设立合适的标志,标明实验室名称、工作地点和工作时间。
2.1.2 出入口附近应配备洗手设施,实验室人员在进入和离开实验室时都应进行必要的手部消毒。
2.2 出入人员管理2.2.1 进入实验室前,必须经过身份确认和安全培训,并佩戴正确的个人防护装备。
2.2.2 禁止未经授权的人员进入实验室。
2.2.3 每位进入实验室的人员都必须填写实验室出入记录,包括姓名、时间以及来访目的等信息。
3. 实验室个人防护3.1 实验室服装3.1.1 实验室人员在进行实验操作时,应穿戴合适的实验服,确保身体的覆盖度。
3.1.2 实验服应具备一定的防护性能,防止酸碱溅射、热源灼伤等。
3.1.3 实验室人员在离开实验室时,应脱下实验服,避免外部环境受到污染。
3.2 个人防护装备3.2.1 实验室人员应根据实验的具体内容和危害程度佩戴个人防护装备,如实验手套、护目镜、防护面罩等。
3.2.2 个人防护装备应定期检查和更换,如有破损或过期的情况,应及时更换。
3.2.3 在使用个人防护装备时,应正确佩戴,不得随意调整或脱下。
4. 实验室化学品管理4.1 化学品储存4.1.1 实验室内应设立专门的化学品储存区域,储存区域内应标明储存的化学品名称、性质和储存方式等信息。
4.1.2 化学品的储存应分门别类,按照易燃、易爆、有毒等性质分类储存,并采取防火、防爆和防腐蚀措施。
4.2 化学品使用4.2.1 使用化学品前,必须详细阅读化学品的安全说明书,并了解其危害性和应对措施。
4.2.2 实验室人员在使用易燃、易爆和有毒化学品时,应保证通风设施的良好工作状态。
4.2.3 使用化学品时必须佩戴个人防护装备,严禁直接接触皮肤。
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1微生物鉴定
1.1 显微镜相关操作
1.1.1 简单染色
实验步骤:
涂片:取干净载玻片一块,在载玻片上加一滴蒸馏水,用接种环取菌涂在载玻片上,做成菌悬液。
晾干:让载玻片自然晾干或者在酒精灯火焰上方用火缓慢烘干。
固定:拿住载玻片一端,让菌膜朝上,通过火焰2~3次固定(以不烫手为宜)。
染色:将固定过的载玻片加复红染色1~2min。
水洗:用蒸馏水洗去载玻片上的染色液。
干燥:将载玻片放在空气中晾干或用吸水纸吸干。
镜检:先用低倍镜观察,再切换到高倍镜观察,并在找到视野后,将高倍镜转出,在载玻片上加入一滴香柏油,将油镜浸入油滴中仔细调焦观察细菌的形态。
1.1.2 革兰氏染色
实验步骤:
涂片:取干净载玻片一块,在载玻片上加一滴蒸馏水,用接种环取菌涂在载玻片上,做成菌悬液。
晾干:让载玻片自然晾干或者在酒精灯火焰上方用火缓慢烘干。
固定:拿住载玻片一端,让菌膜朝上,通过火焰2~3次固定(以不烫手为宜)。
结晶紫染色:在载玻片上加适量(盖满细菌涂面)的结晶紫染色液染色1min。
水洗:用蒸馏水洗去结晶紫染液。
媒染:滴加碘液,媒染1min。
水洗:用蒸馏水洗去碘液。
脱色:将载玻片倾斜,连续滴加95%乙醇脱色20~25s至流出液无色,立即水洗。
复染:滴加番红复染5min。
水洗:用蒸馏水洗去番红染液。
晾干:将染色好的载玻片放在空气中晾干或用吸水纸吸干。
镜检:先用低倍镜观察,再切换到高倍镜观察,并在找到视野后,将高倍镜转出,在载玻片上加入一滴香柏油,将油镜浸入油滴中仔细调焦观察细菌的革兰氏染色反应性。
1.1.3 扫描电镜样品制备
取材:选取培养良好的微生物菌液约5~7mL。
分装到1mL离心管中,12000rpm 离心5min,弃置上清液,收集菌体。
清洗:用PBS缓冲液(pH=7.2)清洗菌体,12000rpm离心5min,弃置上清液,收集菌体,重复5~7次,确保菌液中没有残留培养基。
固定:常用固定剂有 2.5%戊二醛,1%四氧化锇。
在4℃下固定一晚上。
次日用PBS缓冲液(pH=7.2)清洗样品。
脱水:用40%、70%、90%和100%的乙醇分别依次脱水,每次15min。
经脱水后的样品应马上干燥,若无法进行干燥操作,应当将脱水后的样品放置在-80℃冰箱中保存。
干燥:菌体样品一般采用真空冷冻干燥法、临界点干燥法对菌体进行干燥处理。
镀膜:将菌体样品放在真空镀膜机内,把金喷镀到样品表面后。
镀膜完成后取出样品制备完毕。
1.1.4 透射电镜样品制备
超薄切片技术是为透射电镜观察提供薄样品的专门技术,广泛应用于生物体的各种细胞的超微结构观察。
一般厚度在10~100nm的切片称为超薄切片,制作这种切片的技术叫做超薄切片技术。
样品制备步骤:
取材:选取培养良好的微生物菌液约5~7mL。
分装到1mL离心管中,12000rpm 离心5min,弃置上清液,收集菌体。
清洗:用PBS缓冲液(pH=7.2)清洗菌体,12000rpm离心5min,弃置上清液,
收集菌体,重复5~7次,确保菌液中没有残留培养基。
前固定:将菌体样品浸入2.5%戊二醛(进口品质)溶液,离心沉淀后送到电镜平台(农业微生物学国家重点实验室C座1楼),由平台工作人员负责抽真空和块状处理。
注意:泡在2.5%戊二醛固定液的菌体材料最多可以放2周。
漂洗:用PBS缓冲液(pH= 7.2)冲洗3次,每次15mins。
后固定:加入1%锇酸处理到样品变黑。
真菌、细菌一般处理2h。
注意事项:a,锇酸剧毒物质,易挥发,操作时要在毒品柜中谨慎使用。
b,锇酸比较昂贵,需特别节约使用。
漂洗:用PBS缓冲液(pH= 7.2)冲洗3次,每次15mins。
脱水:室温下,依次用30%,50%,70%,80%,90%丙酮作用30mins,再用100%纯丙酮脱水3次,每次30mins。
渗透:其目的是使包埋剂逐步渗入细胞内。
植物样品需要的渗透梯度多、渗透时间长。
其他样品可以适当减少或缩短渗透梯度和时间。
以水稻叶片为例,其渗透流程如下:
a, 无水丙酮/包埋剂=5:1作用12h;
b, 无水丙酮/包埋剂=3:1作用12h;
c, 无水丙酮/包埋剂=1:1作用12h;
d, 无水丙酮/包埋剂=1:3作用12h;
e, 无水丙酮/包埋剂=1:5作用12h;
f, 纯包埋剂45℃作用12h。
注意事项:包埋剂为强致癌剂,特别要注意规范操作!
包埋:用牙签将渗透好的样品挑到包埋板中,45℃聚合12h,60℃聚合36~48h。
超薄切片:在超薄切片机上进行超薄切片,切片面积最大不能超过0.5mm×0.3mm。
正染色:超薄切片先柠檬酸铅染色10分钟;去二氧化碳的双蒸水清洗3次;醋酸铀染色30分钟;双蒸水清洗3次;等超薄切片干燥后,即可上透射电镜观察。
注意事项:a,醋酸铀具有放射性,使用时要特别注意。
b,柠檬酸铅染液极易和空气中的二氧化碳反应形成不溶解的黑色颗粒,污染切片。
柠檬酸铅染液一定要
现用现配,所用的双蒸水一定要煮沸除去二氧化碳。
c,由于染色不可控制因素较多,产生污染的几率有40%,所以每个样品的切片一定要留出铜网作备份。
1.1.5 相差显微镜样品制备
实验步骤:
涂片:取干净载玻片一块,在载玻片上加一滴蒸馏水,取少量菌体涂在载玻片上,做成菌悬液。
盖片:盖上盖玻片,确保无起泡产生。
用吸水纸吸去周围多余水分,制片完成。
1.2 16s rRNA检测
实验步骤:
提取菌体总DNA。
利用16S rRNA通用引物用PCR扩增出其16S rRNA。
取出部分扩增产物进行跑胶验证,测试其纯度与大小,一般目的基因是1500bp 左右。
将其余部分扩增产物送去基因测序公司测序,把测序后的16S rRNA目的序列拿到NCBI上进行序列搜索,就可以大致上知道该菌体和什么细菌亲缘关系较近。
1.3 G+C mol%测定
实验步骤:
提取待测菌体和E.coli K-12的DNA,并分别用0.1×SSC溶液溶解并稀释,使测定用DNA的最终浓度为A260nm = 0.15~0.30,纯度为A260:A280:A230 ≥ 1:0.515:0.450。
将待测菌体的DNA和参比菌株E.coli K-12的DNA分别装入两只石英比色杯中,比色杯塞好带有热敏电阻探头温度计的塞子,另一带塞子的石英比色杯装入0.1×SSC作空白对照。
比色杯放入带有加热装置的分光光度计比色架内,将固定波长设定为260nm。
迅速将比色杯内的温度上升到50℃左右,取出比色杯检查有无气泡,如有气泡
用手指轻弹比色杯除去气泡。
按照每分钟升温1℃的速度设置升温程序。
从50℃开始继续加热,同时记录变性曲线。
在A260条件下,当吸光值不再增加时,即为测定终点。
记录测定终点温度,即Tm值。
计算GC含量,在0.1×SSC溶液中,G+C mol%的计算公式为:
G+C mol%=51.2+2.08×{Tm(X)- Tm(R)}
其中Tm(X)为待测菌体Tm值,Tm(R)为E.coli K-12的Tm值。