应用BED_CEIA方法估算江苏省男男性行为人群艾滋病病毒感染的新发感染率
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第 30 卷第 4 期 2010 年 4 月
南京医科大学学报（自然科学版） ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING（Natural Science）
·467·
应用 BED-CEIA 方法估算江苏省男男性行为人群艾滋病病毒感染的新 发感染率
胡海洋，沈 圣 1，还锡萍*，闫红静，肖 瑶 1，蒋 岩 1
·468·
南京医科大学学报
第 30 卷第 4 期 2010 年 4 月
例 （HIV-1 特异性 IgG 量随着感染时间延长连续增 长 ）来 识 别 HIV-1 新 发 感 染 ，进 而 估 算 HIV-1 新 发 感染率，即 BED HIV-1 IgG 捕获酶免疫法（IgG-capture BED-enzyme immunoassay，BED-CEIA）。 本研究 应用 BED-CEIA 方法，对江苏省 2008 年国家男男性 行 为 人 群 （men who have sex with men，MSMs） 艾 滋 病综合防治试点工作进行新发感染的监测及新发 感染率的估计。
每个试剂盒同时提供质控品 1 套，包括阴性质 控 品 （NC）、 校 准 品 （CAL）、 弱 阳 性 质 控 品 （LPC） 和 强
阳性质控品（HPC）各 1 份。 新发感染检测实验分为 初筛试验和确认试验， 每个反应板中包含 NC2 个， CAL、LPC 和 HPC 各 3 个。 将每次实验中得到的质 控品（NC、LPC 和 HPC）的中值 A 和样本的 A 值（确 认实验中为中值 A）除以 CAL 的中值 A 就会得到标 准化的 A-n 值。 实验中，质控品的 A 和 A-n 值必须 在规定的范围内，该次实验才有效，否则为无效实 验，需重新检测。 实验流程见图 1 。 ［5－6］
中新发感染的比例高达 57．5％；校正后的 HIV-1 新发感 染率为 7．54％（95％ CI：4．46％～10．62％）。 结论：HIV-1 在江苏省 MSM 人
群中的流行已经处于较高水平且新发感染状况不容乐观，必须加大防控力度。
［关键词］ 艾滋病病毒； BED-CEIA； 新发感染率； 男男性行为人群
1 材料与方法
1．1 材料 所有检测样本来自 2008 年 5 月～7 月的江苏省
2008 年国家男男性行为人群艾滋病综合防治试点工 作。试点工作中，南京市共采集血浆样本 430 份，苏州 市共采集血浆样本 280 份，共 710 份，保存于－80℃超 低温冰箱。 1．2 方法
HIV 抗 体 初 筛 及 复 检 试 验 采 用 艾 康 生 物 技 术 （杭州）有限公司生产的 HIV 1 ／ 2 抗体诊断试剂（乳 胶层析法，批号：200802190）及韩国 SD 公司生产的 HIV 抗体诊断试剂（胶体金法，批号：BD7002）。 HIV 抗体确认试验采用新加坡 MP 生物医学亚太私人有 限公司生产的 HIV Blot 2．2 试剂盒（Western blot，批 号：AE8008、AE8015）。 BED-CEIA 检测采用 Calypte HIV-1 BED Incidence EIA 试剂盒（Calypte Biomedical Corperation，美国，批号：CRP-104）。 各项试验均 严格按照各标准及各试剂盒说明书进行 。 ［4－6］
确认为 HIV 血清阳性的样本（单份检测）
若 A-n 值＞1．2 为长期感染
若 A-n 值≤1．2 样本分成三份重 复检测（确认试验）
若 A-n 值＞0．8 为长期感染 若 A-n 值≤0．8 为新发感染
图 1 BED-CEIA 检测流程图 Fig 1 BED-CEIA of testing course
数 据 采 用 SPSS 13．0 软 件 进 行 统 计 分 析 。 以 HIV 阴性的 MSM 为对照，用 Logistic 回归分析不同 因素（年龄、教育程度、户籍、感染梅毒、有无保护性 肛交、寻找性伴场所等）对 HIV 新发感染的影响［7］。
2结果
2．1 感染率及感染者中新发感染的比率 710 份样本经 HIV 初筛，复检及确认试验，共检
［基金项目］ 江苏省社会发展计划资助项目（BE2009685） *通 讯 作 者 ，E-mail：huanxp＠vip．sina．com
而，确定新发感染者（一般 6 个月内感染）和准确地 估计新发感染率却很难， 只能依靠传统的队列研究。 近年来， 已有多种实验室方法用来估计横断面调查 的 HIV-1 新发感染率。 自 1998 年 Janssen 等［2］采用 实验室方法 检测 HIV 新发感 染并估 计 新 发 感 染 率 以来，应用实验室方法估计 HIV-1 新发感染率就受 到了越来越多的 关注。 2002 年，Parekh 等 ［3］通过间 接检测血清阳转后 HIV-1 特异性 IgG 占总 IgG 的比
BED-CEIA 试 验 的 仪 器 为 Authos 2010 酶 标 仪 和 Authos Fluido 洗板机 （Authos Labtec Instruments 公司，奥地利）。 HIV 抗体确认试验的仪器为 Autoblot System 20 全自动蛋白印迹仪 （MP 公司， 新加 坡）。 1．3 统计学方法
性样本，再应用 BED HIV-1 IgG 捕获酶免疫法（BED-CEIA）检出其中的新发感染样本，进而估算该人群的 HIV-1 新发感染率。 结果：
710 份样本共检出 HIV-1 阳性样本 40 份，HIV-1 感染率为 5．63％；40 份 HIV-1 阳性样本中的 23 份被判定为新发感染， 感Biblioteka Baidu者
BED-CEIA 是一种 IgG 捕获的 EIA 试验， 微孔 包 被 羊 抗 人 IgG 来 捕 获 血 浆 或 血 清 中 的 抗 HIV-1 抗体和非抗 HIV-1 抗体。 通过捕获的抗 HIV-1 抗体 和非抗 HIV-1 抗体的相对数量，可间接检测样本中 抗 HIV-1 特异性 IgG 抗体占总 IgG 抗体的比例。 在 HIV 感 染 者 体 内 ，HIV-1 特 异 性 IgG 抗 体 占 总 IgG 抗体的比例随着感染时间的延长而逐渐增高。 从标 准 EIA 检 测 抗 体 呈 阳 性 开 始 至 预 先 设 定 （ 应 用 BED-CEIA 检测）的 光密度值（A）（可 以区分新 发感 染和长期感染的临界值）的时间，称为 BED-CEIA 的 平均窗口期。 虽然该平均窗口期对于 HIV 的不同亚 型略微不同，但是计算人群新发感染率时平均窗口 期为 155 天。 根据检测样本的 A 值与校准品的 A 值 比较，＞0．8 为感染 155 天以上，≤0．8 为 采 样 前 155 天内感染，从而判断是新发感染还是既往感染。
［Acta Univ Med Nanjing， 2010， 30（04）: 467-471］
监测工作是艾滋病预防与控制工作的重要内 容，而新发感染率的估计则是艾滋病监测工作中的 关键部分，对于了解艾滋病流行状况，预测疫情变 化，确定监测方案和高危人群，配置资源，制定和评 价防控措施，最大限度地减少传播都非常重要［1］。 然
［Abstract］ Objective：To understand HIV infection of men who have sex with men （MSMs） in Jangsu Province，and estimate the annual HIV incidence of MSMs． Methods：710 samples from national pilot work of HIV ／ AIDS comprehensive prevention and care among MSMs in 2008 were tested to find HIV-1 seropositive samples．BED HIV-1 IgG capture enzyme immunoassay （BED-CEIA） was used to find recent HIV-1 infections in HIV-1 seropositive samples，and the annual HIV-1 incidence of MSMs was estimated． Results：40 samples were HIV-1 seropositive and the HIV-1 infection incidence was 5．63％． 23 samples were confimrcl to be recently infected， and the recent infection rate was 57．5％． The corrected annual HIV-1 incidence was 7．54％ （95％ CI：4．46％～10．62％）among MSMs． Conclusion：The HIV-1 infectin in MSMs in Jiangsu Province has entered a period of rapid growth，powerful prevention and control efforts must be performed． ［Key words］ HIV； BED-CEIA； incidence； MSMs
HIV-1 感 染 率 ＝HIV-1 阳 性 人 数 ／ 样 本 总 数 × 100％。 感染者中新发感染的比例＝BED-CEIA 检测 为新发感染的人数 ／ HIV-1 阳性人数×100％。
HIV-1 新 发 感 染 率 I＝［（365 ／ w）×R］ ／ ［N＋（365 ／ w）×R ／ 2］×100％。 其中 N 为 HIV 检测为阴性的总人 数 ，R 为BED-CEIA 检测为新发感染的 总人数，w 为 窗口期（从血清阳转到 BED-CEIA 方法能够判为新发 感染的最长时间， 为 155 天），95％可信区间 I95％CI＝± 1．96×I ／ SQRT（R）［6］。
出 HIV-1 阳 性 样 本 40 份 ，HIV-1 感 染 率 为 5．63％。 依据中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制 中心编写的 “中国 HIV-1 BED 新近感染检测 ／ 监测 试 点 方 案 ” 中 检 测 样 本 入 选 及 排 除 标 准［6］，40 份
（江苏省疾病预防控制中心性病与艾滋病防制所，江苏 南京 210009；1 中国疾病预防控制中心，性 病艾滋病预防控制中心，国 家艾滋病参比实验室，北京 100050）
［摘 要］ 目的：了解江苏省男男性行为人群（MSM）艾滋病病毒（HIV）的感染状况，估算 HIV 在该人群中的新发感染率。 方法：
对 2008 年国家男 男 性 行 为 人 群 艾 滋 病 综 合 防 治 试 点 工 作 的 710 份 样 本 ，进 行 HIV-1 初 筛 、复 检 及 确 证 试 验 ，检 出 的 HIV-1 阳
［中图分类号］ R512．91
［文献标识码］ A
［文章编号］ 1007-4368（2010）04-0467-05
Estimation of HIV-1 incidence of MSM in Jiangsu Province with BED-CEIA assay
HU Hai-yang，SHEN Sheng1，HUAN Xi-ping*，YAN Hong-jing，XIAO Yao1，JIANG Yan1 （Section of AIDS ／ STD Control and Prevention，Jiangsu Center for Disease Control and Prevention，Nanjing 210009；1National AIDS Reference Laboratory，National Center for AIDS ／ STD Control and Prevention，Chinese Center for Disease Control and Prevention，Beijing 100050，China）
南京医科大学学报（自然科学版） ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING（Natural Science）
·467·
应用 BED-CEIA 方法估算江苏省男男性行为人群艾滋病病毒感染的新 发感染率
胡海洋，沈 圣 1，还锡萍*，闫红静，肖 瑶 1，蒋 岩 1
·468·
南京医科大学学报
第 30 卷第 4 期 2010 年 4 月
例 （HIV-1 特异性 IgG 量随着感染时间延长连续增 长 ）来 识 别 HIV-1 新 发 感 染 ，进 而 估 算 HIV-1 新 发 感染率，即 BED HIV-1 IgG 捕获酶免疫法（IgG-capture BED-enzyme immunoassay，BED-CEIA）。 本研究 应用 BED-CEIA 方法，对江苏省 2008 年国家男男性 行 为 人 群 （men who have sex with men，MSMs） 艾 滋 病综合防治试点工作进行新发感染的监测及新发 感染率的估计。
每个试剂盒同时提供质控品 1 套，包括阴性质 控 品 （NC）、 校 准 品 （CAL）、 弱 阳 性 质 控 品 （LPC） 和 强
阳性质控品（HPC）各 1 份。 新发感染检测实验分为 初筛试验和确认试验， 每个反应板中包含 NC2 个， CAL、LPC 和 HPC 各 3 个。 将每次实验中得到的质 控品（NC、LPC 和 HPC）的中值 A 和样本的 A 值（确 认实验中为中值 A）除以 CAL 的中值 A 就会得到标 准化的 A-n 值。 实验中，质控品的 A 和 A-n 值必须 在规定的范围内，该次实验才有效，否则为无效实 验，需重新检测。 实验流程见图 1 。 ［5－6］
中新发感染的比例高达 57．5％；校正后的 HIV-1 新发感 染率为 7．54％（95％ CI：4．46％～10．62％）。 结论：HIV-1 在江苏省 MSM 人
群中的流行已经处于较高水平且新发感染状况不容乐观，必须加大防控力度。
［关键词］ 艾滋病病毒； BED-CEIA； 新发感染率； 男男性行为人群
1 材料与方法
1．1 材料 所有检测样本来自 2008 年 5 月～7 月的江苏省
2008 年国家男男性行为人群艾滋病综合防治试点工 作。试点工作中，南京市共采集血浆样本 430 份，苏州 市共采集血浆样本 280 份，共 710 份，保存于－80℃超 低温冰箱。 1．2 方法
HIV 抗 体 初 筛 及 复 检 试 验 采 用 艾 康 生 物 技 术 （杭州）有限公司生产的 HIV 1 ／ 2 抗体诊断试剂（乳 胶层析法，批号：200802190）及韩国 SD 公司生产的 HIV 抗体诊断试剂（胶体金法，批号：BD7002）。 HIV 抗体确认试验采用新加坡 MP 生物医学亚太私人有 限公司生产的 HIV Blot 2．2 试剂盒（Western blot，批 号：AE8008、AE8015）。 BED-CEIA 检测采用 Calypte HIV-1 BED Incidence EIA 试剂盒（Calypte Biomedical Corperation，美国，批号：CRP-104）。 各项试验均 严格按照各标准及各试剂盒说明书进行 。 ［4－6］
确认为 HIV 血清阳性的样本（单份检测）
若 A-n 值＞1．2 为长期感染
若 A-n 值≤1．2 样本分成三份重 复检测（确认试验）
若 A-n 值＞0．8 为长期感染 若 A-n 值≤0．8 为新发感染
图 1 BED-CEIA 检测流程图 Fig 1 BED-CEIA of testing course
数 据 采 用 SPSS 13．0 软 件 进 行 统 计 分 析 。 以 HIV 阴性的 MSM 为对照，用 Logistic 回归分析不同 因素（年龄、教育程度、户籍、感染梅毒、有无保护性 肛交、寻找性伴场所等）对 HIV 新发感染的影响［7］。
2结果
2．1 感染率及感染者中新发感染的比率 710 份样本经 HIV 初筛，复检及确认试验，共检
［基金项目］ 江苏省社会发展计划资助项目（BE2009685） *通 讯 作 者 ，E-mail：huanxp＠vip．sina．com
而，确定新发感染者（一般 6 个月内感染）和准确地 估计新发感染率却很难， 只能依靠传统的队列研究。 近年来， 已有多种实验室方法用来估计横断面调查 的 HIV-1 新发感染率。 自 1998 年 Janssen 等［2］采用 实验室方法 检测 HIV 新发感 染并估 计 新 发 感 染 率 以来，应用实验室方法估计 HIV-1 新发感染率就受 到了越来越多的 关注。 2002 年，Parekh 等 ［3］通过间 接检测血清阳转后 HIV-1 特异性 IgG 占总 IgG 的比
BED-CEIA 试 验 的 仪 器 为 Authos 2010 酶 标 仪 和 Authos Fluido 洗板机 （Authos Labtec Instruments 公司，奥地利）。 HIV 抗体确认试验的仪器为 Autoblot System 20 全自动蛋白印迹仪 （MP 公司， 新加 坡）。 1．3 统计学方法
性样本，再应用 BED HIV-1 IgG 捕获酶免疫法（BED-CEIA）检出其中的新发感染样本，进而估算该人群的 HIV-1 新发感染率。 结果：
710 份样本共检出 HIV-1 阳性样本 40 份，HIV-1 感染率为 5．63％；40 份 HIV-1 阳性样本中的 23 份被判定为新发感染， 感Biblioteka Baidu者
BED-CEIA 是一种 IgG 捕获的 EIA 试验， 微孔 包 被 羊 抗 人 IgG 来 捕 获 血 浆 或 血 清 中 的 抗 HIV-1 抗体和非抗 HIV-1 抗体。 通过捕获的抗 HIV-1 抗体 和非抗 HIV-1 抗体的相对数量，可间接检测样本中 抗 HIV-1 特异性 IgG 抗体占总 IgG 抗体的比例。 在 HIV 感 染 者 体 内 ，HIV-1 特 异 性 IgG 抗 体 占 总 IgG 抗体的比例随着感染时间的延长而逐渐增高。 从标 准 EIA 检 测 抗 体 呈 阳 性 开 始 至 预 先 设 定 （ 应 用 BED-CEIA 检测）的 光密度值（A）（可 以区分新 发感 染和长期感染的临界值）的时间，称为 BED-CEIA 的 平均窗口期。 虽然该平均窗口期对于 HIV 的不同亚 型略微不同，但是计算人群新发感染率时平均窗口 期为 155 天。 根据检测样本的 A 值与校准品的 A 值 比较，＞0．8 为感染 155 天以上，≤0．8 为 采 样 前 155 天内感染，从而判断是新发感染还是既往感染。
［Acta Univ Med Nanjing， 2010， 30（04）: 467-471］
监测工作是艾滋病预防与控制工作的重要内 容，而新发感染率的估计则是艾滋病监测工作中的 关键部分，对于了解艾滋病流行状况，预测疫情变 化，确定监测方案和高危人群，配置资源，制定和评 价防控措施，最大限度地减少传播都非常重要［1］。 然
［Abstract］ Objective：To understand HIV infection of men who have sex with men （MSMs） in Jangsu Province，and estimate the annual HIV incidence of MSMs． Methods：710 samples from national pilot work of HIV ／ AIDS comprehensive prevention and care among MSMs in 2008 were tested to find HIV-1 seropositive samples．BED HIV-1 IgG capture enzyme immunoassay （BED-CEIA） was used to find recent HIV-1 infections in HIV-1 seropositive samples，and the annual HIV-1 incidence of MSMs was estimated． Results：40 samples were HIV-1 seropositive and the HIV-1 infection incidence was 5．63％． 23 samples were confimrcl to be recently infected， and the recent infection rate was 57．5％． The corrected annual HIV-1 incidence was 7．54％ （95％ CI：4．46％～10．62％）among MSMs． Conclusion：The HIV-1 infectin in MSMs in Jiangsu Province has entered a period of rapid growth，powerful prevention and control efforts must be performed． ［Key words］ HIV； BED-CEIA； incidence； MSMs
HIV-1 感 染 率 ＝HIV-1 阳 性 人 数 ／ 样 本 总 数 × 100％。 感染者中新发感染的比例＝BED-CEIA 检测 为新发感染的人数 ／ HIV-1 阳性人数×100％。
HIV-1 新 发 感 染 率 I＝［（365 ／ w）×R］ ／ ［N＋（365 ／ w）×R ／ 2］×100％。 其中 N 为 HIV 检测为阴性的总人 数 ，R 为BED-CEIA 检测为新发感染的 总人数，w 为 窗口期（从血清阳转到 BED-CEIA 方法能够判为新发 感染的最长时间， 为 155 天），95％可信区间 I95％CI＝± 1．96×I ／ SQRT（R）［6］。
出 HIV-1 阳 性 样 本 40 份 ，HIV-1 感 染 率 为 5．63％。 依据中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制 中心编写的 “中国 HIV-1 BED 新近感染检测 ／ 监测 试 点 方 案 ” 中 检 测 样 本 入 选 及 排 除 标 准［6］，40 份
（江苏省疾病预防控制中心性病与艾滋病防制所，江苏 南京 210009；1 中国疾病预防控制中心，性 病艾滋病预防控制中心，国 家艾滋病参比实验室，北京 100050）
［摘 要］ 目的：了解江苏省男男性行为人群（MSM）艾滋病病毒（HIV）的感染状况，估算 HIV 在该人群中的新发感染率。 方法：
对 2008 年国家男 男 性 行 为 人 群 艾 滋 病 综 合 防 治 试 点 工 作 的 710 份 样 本 ，进 行 HIV-1 初 筛 、复 检 及 确 证 试 验 ，检 出 的 HIV-1 阳
［中图分类号］ R512．91
［文献标识码］ A
［文章编号］ 1007-4368（2010）04-0467-05
Estimation of HIV-1 incidence of MSM in Jiangsu Province with BED-CEIA assay
HU Hai-yang，SHEN Sheng1，HUAN Xi-ping*，YAN Hong-jing，XIAO Yao1，JIANG Yan1 （Section of AIDS ／ STD Control and Prevention，Jiangsu Center for Disease Control and Prevention，Nanjing 210009；1National AIDS Reference Laboratory，National Center for AIDS ／ STD Control and Prevention，Chinese Center for Disease Control and Prevention，Beijing 100050，China）