烟草瞬时表达

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MES溶液10 mmol MES, 10 mmol MgCl2,调整PH值到5.8

乙酰丁香酮0.1mmol/l 取0.018g用DMSO溶解

1.准备好12-15天的烟草(本生烟),

2.培养农杆菌200rpm 28c 12-16h

3.离心收集菌块2ml 3000g 3min

4.加500ul MES 重悬菌块避光室温(25C)静置3-4h

5.取20ul+180ul MES 测OD600值

6.加MES 稀释到OD600浓度为1(加1‰乙酰丁香酮)

7.利用注射器将稀释液注射到嫩叶内,使叶体浸润整块叶片

8.浸润后48h-72h用激光共聚焦显微镜观察

9.如需要DAPi染色细胞核,用10nm的dapi稀释1000倍,注射到烟草细胞内,避光培养3-4小时后用激光共聚焦显微镜观察

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