莱克多巴胺检测方法
莱克多巴胺残留检测方法及其进展
莱克多巴胺残留检测方法及其进展王雪霞1，刘晓云2，彭运平2(1.广州万孚生物技术有限公司，广东广州 510663)（2.广州正冠生物科技有限公司，广东广州 510663)摘要：本文系统介绍了食品安全中莱克多巴胺测试的意义，并对比分析了酶联免疫方法、免疫层析方法、高效液相法、质谱法、毛细管电泳法、免疫传感器法、化学发光免疫分析法的特点及优劣，并对其发展方向进行了分析和展望。
关键词：莱克多巴胺；残留；检测文章篇号：1673-9078(2010)9-1009-1012Reviews of Detection Methods and Devolvement of RactopamineW ANG Xue-xia1, LIU Xiao-yun2, PENG Yun-ping2(1.Guangzhou Wondfo Biotech Co., Ltd, Guangzhou 510663, China)(2.Guangzhou Zhengguan Biotech Co., Ltd, Guangzhou 510663, China)Abstract: The detection methods of ractopamine were introduced in this article. The disadvantages and advantages of different test method for ractopamine were analyzed, including ELISA, GICA, HPLC, LC/MS, CE, CLIA and so on.Key words: ractopamine; residue; detection;动物源性食品中违禁药物（如β-激动剂、激素、抗生素和精神类药物等）的残留已成了困扰世界范围内食品卫生的难题[1]。
药物残留不仅影响我国畜禽产品的出口贸易，同时威胁着消费者的健康。
农产品快速检测技术W1202-5 速测卡法检测莱克多巴胺-微测试
《农产品/食品快速检测技术》课程-微测试一、单选题1、速测卡法检测猪肉中莱克多巴胺时，取样量通常为（）。
A．0.5g左右B．1g左右C．2g左右D．3~5g参考答案：D难度：低2、速测卡法检测猪肉中莱克多巴胺时，装有样品的离心管水浴的温度为（）。
A．37℃B．60℃C．80℃D．沸水浴参考答案：C难度：中3、速测卡法检测猪肉中莱克多巴胺时，样品水浴后需经离心机离心以得到澄清样液，离心的转速通常为（）。
A．2000r/minB．3000r/minC．4000r/minD．无转速限制参考答案：C难度：中二、多选题1、目前检测的“瘦肉精”类违禁药品主要是（）A、盐酸克伦特罗；B、莱克多巴胺；C、沙丁胺醇；D、磺胺类药。
参考答案：A；B；C难度：中三、判断题1、莱克多巴胺快速检测卡启封后，若不使用应密封保存至冰箱留待下次再用。
参考答案：F难度：低2、莱克多巴胺快速检测卡应储存在2℃～8℃，需要时取出平衡至室温后方可使用。
参考答案：F难度：中四、填空1、样品从冰箱中取出后，应将样品恢复至，然后进行测定。
参考答案：室温难度：中2、进行莱克多巴胺的快速检测时，样液滴加到检测孔后min可观察检测结果，min 后结果无效。
参考答案：5，10难度：中五、简答题1、请列举常见的快速检测莱克多巴胺的方法。
参考答案：速测卡法、酶联免疫吸附法（ELISA法）。
难度：中五、综合题1、请叙述速测卡法检测猪肉中莱克多巴胺时，若没有水浴设备和离心机，应如何处理。
参考答案：（1）如果没有水浴锅这种精确控温设备，可将水煮沸后停止加热3min，然后将离心管放入其中并浸泡10min；（2）如果没有离心设备，可将离心管置于平整台面静置5min，同样能起到分离上清液的效果；难度：高。
莱克多巴胺(血清)
莱克多巴胺（瘦肉精）快速检测卡——胶体金法(血清)一、简介“瘦肉精”快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的“瘦肉精”在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和硝酸纤维素膜（NC膜）检测线上“瘦肉精”-蛋白偶联物的结合。
如果样本“瘦肉精”含量≥3ppb/ml，检测线不显颜色，结果为阳性。
反之，检测线显红色，结果为阴性。
本产品是检测莱克多巴胺（瘦肉精）的快速筛选试剂，整个检测过程只需5-10分钟，适用于尿液样品的检测。
二、试剂组成1、莱克多巴胺免疫胶体金快速检测卡（50份/盒）；2、一次性塑料吸管（1个/袋）；3、干燥剂（1片/袋）；4、使用说明书（1张/盒）。
三、标本收集用干燥、洁净的离心管或适当容器采集血清。
如果不立即检测，可将血清冷冻保存；血清在2-8℃冷藏可保存24小时，要注意避免腐败造成失效或污染。
如果血清出现沉淀或浑浊物，请离心后再检测。
四、操作步骤1、在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。
2、撕开装有莱克多巴胺检测卡的包装袋，小心取出检测卡，水平放置于实验台上。
3、用塑料吸管吸2-3滴血清样本加入样本孔中。
4、5-8分钟内观察结果，10分钟后结果无效。
五、结果判定1、阳性结果：出现一条红色质控线（C）。
2、阴性结果：出现质控线（C）和反应线（T）两条红线。
3、无效结果：无红线出现，表明检测结果无效，需重新实验。
六、注意事项1、检测卡在保质期内一次性使用。
4℃冰箱中保存的检测卡检测前应平衡至室温后再开袋使用，否则会影响检测结果。
2、谨防检测卡受潮，铝箔包装袋受损或检测卡受潮后。
检测卡不能使用。
3、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面，检测时避免阳光直射。
4、塑料吸管不可混用，以免交叉污染；5、出现阳性结果，应用本卡复查并作阳性对照实验，必要时送实验室进一步定量。
6、铝箔包装袋中的小包是干燥剂，不可误服。
7、自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。
莱克多巴胺(Ractopamine)ELISA 检测试剂盒说明书
地址：北京市海淀区西北旺镇东北旺南路1号院东南1号房 电话：+86-10-82771310 82773503 82771993 827729271莱克多巴胺(Ractopamine)ELISA 检测试剂盒说明书本试剂盒可以在尿样、血清、饲料、组织等生物样品中酶免定性、定量检测莱克多巴胺的残留量。
提供的材料与试剂1、可拆96孔酶标板×1块 （包被有偶联抗原）2、标准液×6瓶：（1.5ml/瓶）0ppb ，0.3ppb ，0.9ppb ，2.7ppb ，8.1ppb ，24.3ppb3、高浓度标准品：（1.5ml/瓶） 100ppb4、抗体工作液 10ml ………………………绿色帽5、酶标二抗 7ml ………………………透明帽6、底物液 A 液 7ml ………………………白色帽7、底物液 B 液 7ml ……………………… 红色帽8、终 止 液 7ml ………………………黄色帽9、20×浓缩洗涤液 40ml ………………………透明帽 10、20×浓缩提取液 50ml ………………………蓝色帽一、概述莱克多巴胺（Ractopamine ）是一类结构和功能类似肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇胺类衍生物，属β-兴奋剂，是一种营养重分配剂，可加快畜禽生长速度，降低酮体脂肪含量，提高瘦肉率。
欧盟已禁止将β-兴奋剂作为家禽的生长促进剂，我国在《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录》中也有明文规定，但由于莱克多巴胺属于非处方药，且价格远低于克仑特罗，因此非法使用者有不断增多的趋势。
本试剂盒是应用ELISA 技术研发的新一代药物残留检测产品，操作时间仅需1.5小时，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA ，在酶标板微孔条上预包被上偶联抗原，样本中残留的莱克多巴胺和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗莱克多巴胺抗体，加入酶标二抗后，用TMB 底物显色，样本吸光度值与其所含莱克多巴胺含量成负相关，通过标准曲线换算出相应的值，再乘以样品稀释倍数，即可得出样品中莱克多巴胺的残留量。
莱克多巴胺检测标准
ICS 65.120 B 46备案号：DB33饲料中莱克多巴胺的测定Determination of ractopamine in feedstuffs浙江省质量技术监督局发布前言本标准是在参阅了国内外文献的基础上，根据我国技术发展水平研究制定的，采用了酶联免疫法、高效液相色谱－荧光检测法和气相色谱-质谱法。
本标准由浙江省农业厅提出并归口。
本标准由浙江省畜产品质量安全检测中心、浙江省疾病预防控制中心负责起草，浙江一星集团饲料有限责任公司参与起草。
本标准主要起草人：陈慧华、吴平谷、应永飞、任玉琴、屈健、周文海、陈勇、浦琴华。
饲料中莱克多巴胺的测定1 范围本标准规定了以酶联免疫（ELISA）法、高效液相色谱（HPLC）法和气相色谱－质谱（GC－MS）法检测饲料中莱克多巴胺的方法，规定GC－MS法为仲裁法。
本标准适用于饲料和饲料添加剂中莱克多巴胺的测定。
酶联免疫（ELISA）法为筛选方法，检测限为0.01mg/kg，高效液相色谱（HPLC）法和气相色谱－质谱（GC－MS）法为定量方法，定量限HPLC法为0.1mg/kg、GC－MS法为0.05mg/kg。
线性范围：酶联免疫（ELISA）法为0.005ng-0.05ng，高效液相色谱（HPLC）法为2.5ng-10ng，气相色谱－质谱（GC－MS）法为0.05ng-1.0ng。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699.1 饲料采样方法3 试样制备按GB/T 14699.1抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取约200g，粉碎至过0.45mm孔径的分析筛，混匀，装入磨口瓶中备用。
莱克多巴胺检测标准
ICS 65.120 B 46备案号：DB33饲料中莱克多巴胺的测定Determination of ractopamine in feedstuffs浙江省质量技术监督局发布前言本标准是在参阅了国内外文献的基础上，根据我国技术发展水平研究制定的，采用了酶联免疫法、高效液相色谱－荧光检测法和气相色谱-质谱法。
本标准由浙江省农业厅提出并归口。
本标准由浙江省畜产品质量安全检测中心、浙江省疾病预防控制中心负责起草，浙江一星集团饲料有限责任公司参与起草。
本标准主要起草人：陈慧华、吴平谷、应永飞、任玉琴、屈健、周文海、陈勇、浦琴华。
饲料中莱克多巴胺的测定1 范围本标准规定了以酶联免疫（ELISA）法、高效液相色谱（HPLC）法和气相色谱－质谱（GC－MS）法检测饲料中莱克多巴胺的方法，规定GC－MS法为仲裁法。
本标准适用于饲料和饲料添加剂中莱克多巴胺的测定。
酶联免疫（ELISA）法为筛选方法，检测限为0.01mg/kg，高效液相色谱（HPLC）法和气相色谱－质谱（GC－MS）法为定量方法，定量限HPLC法为0.1mg/kg、GC－MS法为0.05mg/kg。
线性范围：酶联免疫（ELISA）法为0.005ng-0.05ng，高效液相色谱（HPLC）法为2.5ng-10ng，气相色谱－质谱（GC－MS）法为0.05ng-1.0ng。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699.1 饲料采样方法3 试样制备按GB/T 14699.1抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取约200g，粉碎至过0.45mm孔径的分析筛，混匀，装入磨口瓶中备用。
莱克多巴胺
莱克多巴胺（Ractopamine，RAC）ELISA检测试剂盒说明书产品编号：3K30200-001.【概述】莱克多巴胺(Ractopamine，RAC) 属β- 兴奋剂类药物。
它可以提高瘦肉率，减少脂肪沉积和促进动物生长，被作为养殖促进剂使用。
其残留经食物链进入人体可导致头痛、头晕、胸闷、心悸、四肢麻木等中毒症状，对消费者的健康构成极大危害。
国家卫生部、农业部、药品监督管理局发出的公告明确禁止莱克多巴胺在食用动物中使用。
莱克多巴胺酶联免疫试剂盒具有方便、快速、灵敏等特点，适用于现场大批量样品检测。
2.【试验原理】采用直接竞争法，样品中的莱克多巴胺与酶标板上固定的抗原竞争酶标记的抗体，通过酶催化显色剂显色，根据显色的深浅来判断样品中的含量。
样本吸光值与其含有的莱克多巴胺呈负相关。
3.【适用范围】可定性、定量检测尿样中的莱克多巴胺。
4. 【试剂盒组份】4.1 标准品×6 瓶* 1ml/ 瓶4.2 莱克多巴胺酶标板：1块（8孔*12条）4.3 莱克多巴胺抗体工作液：1瓶(6ml)4.4 酶结合物工作液：1瓶（6ml）4.5 浓缩样品稀释液：1瓶（10×, 30ml）4.6 浓缩洗涤液：1瓶(20×,40ml)4.7 浓缩肉样提取液：1瓶(50×,12ml)4.8 底物液A 液1瓶：7ml4.9 底物液B 液1瓶：7ml4.10 终止液1瓶:7ml4.11 说明书1 份4.12 质控报告1 份4.13 盖板膜1 张4.14 自封袋1 个★注：标准品浓度为0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb。
5.【使用单位需自备的设备及试剂】5.1 仪器设备：5.1.1 微孔板酶标仪450nm/630nm5.1.2 均质器5.1.3 振荡器5.1.4 旋涡混合器5.1.5 离心机5.1.6 氮吹仪5.1.7 微量移液器5.1.8 计时器5.2 试剂：5.2.1针对组织样品一的样品乙腈、乙酸乙酯、正己烷（或正庚烷）5.2.2 针对于饲料样品1M NaOH溶液:称取4gNaOH加去离子水溶解并定容至100ml。
莱克多巴胺的检测方法及注意事项
莱克多巴胺的检测方法及注意事项时冉冉;姜波;王涛【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》【年(卷),期】2013(000)004【总页数】2页(P36-36,56)【作者】时冉冉;姜波;王涛【作者单位】山东省济南市畜产品质量安全监测中心山东济南 250000;山东省济南市畜产品质量安全监测中心山东济南 250000;山东省济南市动物卫生监督所，山东济南 250002【正文语种】中文莱克多巴胺属于β-兴奋剂，可行使营养重新分配，是一类结构和功能类似于肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇胺类衍生物，它可以加快畜禽生长速度，降低胴体脂肪含量，提高瘦肉率。
在欧盟β-兴奋剂已被禁止用于家禽的生长促进剂，我国在《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录》中也有明文规定，但由于莱克多巴胺属于非处方药，且价格远低于克伦特罗，因此，其非法应用者不断增多。
酶联免疫吸附法是目前β-兴奋剂类最佳的检测方法。
ELISA检测方法有双抗体夹心法测抗原、间接法测抗体、竞争法测抗体等。
利用竞争酶联免疫吸附法检测瘦肉精，具有速度快，灵敏度高的特点，是保证肉品卫生安全的较好监控方法，对以后瘦肉精检测工作的发展具有指导作用。
1 试验原理其原理是利用多克隆抗体既能与莱克多巴胺结合，也能与包被抗原结合。
这些包被抗原被固定在酶标板孔壁上，当样品中含有莱克多巴胺时，它与包被抗原竞争结合抗体中有限量的结合位点。
由于每一个孔中抗体的结合位点数相同，当样品中莱克多巴胺浓度低时，就有更多抗体的位点与包被抗原结合，更多的抗体被固定在酶标板壁上，就会与更多的酶标二抗结合，所以结果就呈现深蓝色。
相反，样品的莱克多巴胺浓度高，结果就呈现浅蓝色。
加入终止液后，蓝色相应变成黄色，然后用酶标仪进行测定。
这种方法可定性、定量检测尿液、饲料、组织样本中莱克多巴胺的残留量。
2 实验材料与方法2.1 试剂和材料莱克多巴胺-酶联免疫试剂盒，去离子水，猪肉样本。
2.2 仪器酶标仪、天平、均质器、氮气吹干装置、离心机、振荡器、微量移液器等。
饲料中莱克多巴胺的HPLC法测定(精)
饲料中莱克多巴胺的HPLC法测定摘要用碱性甲醇提取试样中的莱克多巴胺，经SLA固相萃取柱净化，浓缩后用2％乙酸溶液定容，过膜后用高效液相色谱－荧光检测法分离测定；色谱柱类型Waters Symmetry C18柱，250mm×4.6mm（i.d.），粒径5μm；流动相为戊烷磺酸钠溶液∶乙腈(体积比80∶20)；激发波长为226nm，发射波长为306nm；流速1ml／min；进样量50μl；饲料中莱克多巴胺的检测限为0.5mg/kg；莱克多巴胺的测定在0.02～0.50μg／ml范围内具有良好的线性关系，平均回收率在85.1％以上，RSD小于7.5％；方法简单，灵敏度高，可用于饲料中莱克多巴胺的含量测定。
关键词莱克多巴胺；残留；饲料；高效液相色谱法中图分类号 S816.7莱克多巴胺是苯乙醇胺类β2－肾上腺素兴奋剂，能促进动物体蛋白质沉积，抑制脂肪沉积，具有营养“再分配效应”[1,2]。
因此，有人用来作为饲料添加剂，提高猪酮体的瘦肉率。
但是，动物在饲用含莱克多巴胺的饲料后，会造成肌肉及组织中不同程度的残留，使用不当将导致消费者出现不同程度的中毒现象。
为保障人民的身体健康和生命安全，保障畜牧业的健康持续发展，我国已经明确将其列入禁用药品目录。
然而，在饲料或饲养过程中违法使用莱克多巴胺的现象已经出现，并有蔓延之势。
由于莱克多巴胺是一种新型的β2－肾上腺素兴奋剂，目前的检测方法和检测标准很少[3,4]，特别是国内尚未见文献报道。
因此探索饲料中莱克多巴胺的检测方法具有很重要的意义。
我们比较了提取剂、提取方法、固相萃取柱、萃取试剂、流动相对提取效果的影响，在此基础上对HPLC 测定方法进行了系统考察，即线性范围、重复性试验、稳定性试验、加标回收率等，最终确定了一套比较理想的检测条件。
1 实验部分1.1 仪器与试剂Waters 2695高效液相色谱仪；Waters W-474荧光检测器；PE LS-45型荧光分光光度计；KQ-500超声波振荡器；Sigma 2k15冷冻离心机；BüCHI B-490旋转蒸发仪；MS2 minishaker漩涡混匀器；METTLER AG-285电子天平；氮吹仪；SLA固相萃取柱（500mg/5ml），杭州富裕科技服务有限公司提供。
畜产品中莱克多巴胺残留的快速检测
在 ４ｈ ８ 后测不到放射性残留，但肝脏和肾脏仍可测 到放射性残留，而 ０ 休药期莱克多 巴胺在猪肝脏中 的总残 留为脂 肪组织 的 １ 倍 。美 国 Ｆ Ａ设定 的人 ９ Ｄ 每 日最 大摄 人 量 （ Ｄ ） １ ５ ｇｋ ， Ａ Ｉ为 ． ／ｇ推算 出的组 织 ２ 中 药 物 残 留 最 高 限 量 为 肌 肉 中 ０２ｐ ｍ， 脂 肪 ． ｐ ５ １ ｐｍ， ． ｐ 肾脏 １ ｐｍ， 脏 ０ ５ｐ 同 时设 定 莱 克 ５ ．ｐ 肝 ５ ． ｐｍ， ７ 多巴胺的休药期为 ０ ， ｄ 即上市前无须休药期。 １９ 年 以来 ， 国农 业部等 相关部 门多次发 文 ， ９７ 我 禁止生产和使用“ 肉精”但是仍有很多瘦 肉精 中 瘦 ， 毒事 件发生 ， 重威胁 消费者 的健 康 。因此检测 动物 严
试 验 研 究
畜产品 中菜 克多巴股 残 留的快速检 测
邱 建 琴 ，左 晓磊
（ 河北 省 石家庄 市 畜牧水 产局 。石 家庄 ００ ０ ） ５ ０ ０
摘 要 ：莱克 多巴胺属于 １ 类肾上腺激素 ， ３ 因具有“ 减脂增 肉” 的作用而被广泛用于畜牧生产 中， 但在动物机体 中有较大的残留时会严重威胁人类健康。 检测莱克多巴胺有 多种方法。 Ｅ Ｉ 而 ＬＳ Ａ应用 抗原 抗体 反应 ， 够对猪 尿 、 肝 中的 莱克 多 巴胺 残 留快速 进行 检 测 筛选 ， 而有 效控制 瘦 肉精在 能 猪 从
作 者 简 介 ： 建 琴 （９６ ， 邱 １５ ～） 高级 畜牧 师 ， 北鹿 泉 河 人 ，主要从事动物营养及 畜产品等方面研究检 测管 理 工作 。
甲醇（ 分析纯 、 ０ ； ｍ ｏ ／ＨＣ ； ｍ ｏ Ｈ— １ ％） ０ ｍ ＬＬ Ｌ１ ｍ ＵＬ ０ ５ ０
气相色谱_质谱法测定饲料中莱克多巴胺
第5卷第2期广东轻工职业技术学院学报Vol .5 No .22006年6月JOURNAL OF G UANG DONG I N DUSTRY TECHN I CAL COLLEGEJun . 2006 收稿日期:2006-04-20 作者简介:李 胜(1974-),男,硕士。
气相色谱-质谱法测定饲料中莱克多巴胺李 胜1 贺利民2 陈建新2(1.广东轻工职业技术学院食品与生物工程系,广东广州510000;2.华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价中心,广州510642)摘 要:建立了简单、可靠的气相色谱-质谱联用测定饲料中莱克多巴胺的分析方法。
试样用0.1mol/L 高氯酸溶液提取,离心,中和,经乙酸乙酯-异丙醇萃取,浓缩后,用SCX 固相小柱净化,4%浓氨水甲醇溶液洗脱、浓缩干,经N,O -双三甲基硅基三氟乙酰胺衍生,采用选择监测离子(m /z 179、250、267、502)模式进行检测。
实验结果表明,莱克多巴胺衍生物的峰面积与其浓度在20.0～1000μg/L 范围内呈较好的线性关系,相关系数大于0.997;饲料试样在20.0、100和5000μg/kg 三水平加标平均回收率在67.5%～92.3%,变异系数在3.0%～12%;方法检出限达5μg/kg 。
关键词:莱克多巴胺;饲料;气相色谱-质谱法中图分类号:O 657.7 文献标识码:A 文章编号:167221950(2006)022******* 近年来,我国政府加强了克伦特罗(俗称瘦肉精)作为饲料药物添加剂的查处,作为克伦特罗“替代品”的莱克多巴胺,在饲料中的非法添加日趋严重,给我国畜肉类食品安全带来巨大威胁。
因此,研究建立简单、快速、可靠的监测饲料中莱克多巴胺的分析方法十分必要,也非常迫切。
有关饲料及动物组织中克伦特罗的检测方法较多,而莱克多巴胺检测方法的文献很少。
Turberg [1]等建立了检测饲料和动物组织中莱克多巴胺的高效液相色谱-电化学检测方法,检测限达1mg/kg;Eshaq [2]等用高效液相色谱-荧光检测测定动物组织中莱克多巴胺,并用质谱确证,检测限为1～4μg/kg 。
液相色谱-串联质谱法检测饲料中的莱克多巴胺
关键 词 ： 质联 用 ； 液 检测 ； 料 ； 克 多 巴胺 饲 莱
１ ｌ ｌ 乙 酸 溶 液 ：准 确 移 取 冰 乙 酸 （ ．） ． ｍｏ Ｌ ９ ／ １ ４ 莱克 多 巴胺 也称 盐 酸莱 克 多 巴胺 ． 一 种 医 是 药 原料 ．可 用 于治 疗 充血 性 心力 衰竭 的强 心药 ．
定 浓 度 范 围 内成 正 比 ， 样 与 工 作 曲 线 比 较定 量 。 实验 ， 试 经
１ 甲酸 ： ． ５ 色谱 纯 ：
１ 三 水合 乙酸钠 ： ． ６ 优级 纯 ；
１ ＭＣ 混 合 型 阳 离 子 固 相 萃 取 净 化 小 柱 ： ． ７ Ｘ
６ ｍｇ３ｍＬ； ０ ／
肪 蓄积 由于莱 克 多 巴胺 有类 似于 盐酸克 伦特 罗
的作 用 ， 动 物 组 织 中残 留 ． 能 对 人 体 产 生 不 在 可
利 影 响 ， 以我 国农业 部 、 生部 、 所 卫 国家 药 品监督 管 理局 明文禁 止莱 克多 巴胺 用 于动物 养殖 饲 料 样 品 中 的莱 克 多 巴胺 经 酸性 三 水 合 乙 酸钠 溶 液提 取 ． 心后 经 ＭＣ 固相 萃取 柱 净化 ． 离 Ｘ
还 可 以用 于治 疗 肌 肉萎 缩 症 ． 长 肌 肉 ． 少 脂 增 减
５ ｍ 用 超纯 水定 容至 １０ ． Ｌ， ７ ０ ｍＬ容 量瓶 中 ， 匀 ； 摇 １１ 洗 脱 液 ： ． ０ 准确 移 取 氨水 （ ．） ． 。 乙 酸 １ ３ ｍＬ 用 ２ ５ 乙酯 （．） 容 至 １ ０ Ｌ容量 瓶 中 ， １ 定 ３ ０ｍ 摇匀 ； １１ 样 品复 溶 溶液 ： 取 甲醇 （．）０ ｍ 甲酸 ．ｌ 移 １１２ ０ Ｌ， （ ．） ｍ ，用超 纯 水定 容 至 １０ ０ Ｌ容 量瓶 中 ， １ ２Ｌ ５ ０ ｍ 混 合均匀 ： １１ 莱 克 多 巴胺 标 准 品 ：纯度 １９ ． 国家标 ．２ ＞ ９０ ％（ 准 物质 中心提 供 ） ：
浅析莱克多巴胺的危害及检测方法
显著的优势：具有较好的精确度；具有较好的回收率， ［4］ 王重洋 . 基质固相分散—色谱法分析食品中磺胺类
一般能达到（92.6±4.6）%。与前文所阐述的方法相比，
兽药残留、苏丹红染料及挥发性成分［D］. 长春：
优势更为明显：对生猪尿样的处理简单；分析过程较短，
吉林大学，2014．
检测所需的成本大大降低；检测过程比较稳定，干扰因 ［5］ 韩德娟，高艾英，高大山 . 液相色谱串联质谱内标法
力的提升，在胶体金免疫层析法的基础上，目前又发展 学原理实施分析，具备的优势十分显著：灵敏度较高；
了胶乳免疫层析法，胶乳免疫层析法的原理是利用胶乳 见效较快；成本较低；样品的预处理较为便捷；有着较
与标记物发生反应，在氨基和羧基之间形成较为稳定的 强的选择性。由于该技术具有的比较优势十分显著，也
化学结构，相比胶体金免疫层析法，胶乳免疫层析法结 是未来重点发展的主要趋势之一。
素少，所以检测的结果也较为可靠。毛细管电泳法（CE）的
测定猪肉中沙丁胺醇及莱克多巴胺残留量的不确定
缺陷也较为明显：使用样品的量较少，因此对低浓度样
度分析［J］. 食品安全质量检测学报，2020，11（1）：
品的检测具有较大难度；方法不具备可复制性。这类型
223-230.
缺陷可以采取等速电泳、电堆积技术加以改善。
董 科，刘 超，朱慧敏，等 . 浅析莱克多巴胺的危害及检测方法［J］. 南方农业，2021，15（30）：190-191.
浅析莱克多巴胺的危害及检测方法
董 科 1，刘 超 1，朱慧敏 1，李 慧 1，孟美辰 1，张雪涛 1，何 琪 2
（1. 句容市农产品质量安全监测中心，江苏句容 212400； 2. 句容市农业农村局，江苏句容 212400）
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莱克多巴胺检测方法
1．分析目标化合物
莱克多巴胺
2、仪器设备
高效液相色谱-质谱仪（LC-MS）。
3、试剂
除下列试剂外，使用附录2所列试剂。
莱克多巴胺：含莱克多巴胺99％以上，熔点为163.9℃～164.6℃。
4．试验溶液的制备
1）肌肉、肝脏、肾脏和其它可食用部分
肌肉：尽可能除去脂肪层，搅碎混合均匀后，称取其5.00g。
肝脏、肾脏和其它可食用部分：搅碎混合均匀后，称取其5.00g。
加入20mL乙酸乙酯和1mL4mol／L碳酸钾溶液，均质后，以每分钟3000转离心分离10分钟，收集乙酸乙酯层。
离心管内残留物中加入20mL乙酸乙酯，振荡5分钟后，按上述同样条件离心分离，合并所得的乙酸乙酯层，40℃以下浓缩，除去乙酸乙酯。
残留物中加入30mL乙腈溶解，移入分液漏斗中。
加入30mL乙腈饱和正己烷，振荡，弃去正己烷层，重复操作2次。
乙腈层在40℃以下浓缩，除去乙腈。
残留物中加入1.0mL 甲醇溶解，此为试验溶液。
2）脂肪
尽可能除去肌肉层，搅碎混合均匀后，称取其5.00g。
加入30mL乙腈和30mL乙腈饱和正己烷，均质后，以每分钟3000转离心分离10分钟，乙腈层移入分液漏斗中。
离心管内的正己烷层和残留物中加入30mL乙腈，振荡5分钟，按上述同样条件离心分离。
合并所得的乙腈层于前面的分液漏斗中，加入30mL 乙腈饱和正己烷。
激烈振荡5分钟后，静置，收集乙腈层， 40℃以下浓缩，除去乙腈。
残留物中加入1.0mL甲醇溶解，此为试验溶液。
5．标准曲线的制作
将盐酸莱克多巴胺标准品配制成0.025～0.5mg（以莱克多巴胺计）/L的甲醇溶液数点，分别注入GC-MS中，用峰高法或面积法绘制成标准曲线。
6．定量试验
注入试验溶液于GC-MS中，根据5的标准曲线求出莱克多巴胺的含量。
7．测定条件
LC-MS
柱：十八烷基甲硅烷基化硅胶（粒径2～5μm），内径2.0～6.0mm、100～250 mm
的不锈钢管。
柱温：40℃。
流动相：乙腈：0.05%三氟乙酸（1：4）混合溶液。
主离子(m/z)： ESI+ 302
保持时间标准： 4 ～ 6 分钟
8．定量界
0.01 mg/kg
9．注意事项
1) 检测方法概述
本方法用乙酸乙酯或乙腈从样品提取中莱克多巴胺，用乙腈／正己烷分配脱脂后，LC/MS测定和确证。
2) 注意点
①莱克多巴胺存在4 种光学异构体。
由于用柱子分离光学异构体，确认有复数峰时，应以各峰高或峰面积的和计算。
②采用主离子的仪器设备，因最佳离子化方法、生成的离子有不同，所以要研究仪器的最佳条件。
对于主离子之外的确证离子，ESI+为284(m/z)。
10．参考文献
无
11．类型
C。