阪崎杆菌的控制研究ppt
控制婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌:国际上法律法规的要求和良好的控制手段资料
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factory well.
• 第四如果级这个程序在工厂得到很好的执行将最大程度保 • 第五证我级们产品的安全
• Use Enterobacteriacease (EB) as an indicator
• 第• 二En级terobacter Sakazakii 阪崎杆菌
• •
第• 三Co级ntrol of Enterobacter Sakazakii 阪崎杆菌控制: 第• 四1C)o级Znotrnoel oIdf eEant分er区obacter Sakazakii 阪崎杆菌控制:
• 第五2)级Mirco-biologic monitoring program 微生物监
• 单击red此uce处u编nwa辑nt母ed 版con文tam本in样atio式ns • 第• 二对Ke生级ep产t区he域d分ry区a以re减a f少ro非m预w期et污. 染Minimize using water in • 第三hig级h care areas.
干湿区分开。在高洁净区尽可能减少用水
By Joe Zhou, QA Manager of Cargill USA 周永武博士,美国嘉吉质量保证经理
1
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• 单• 击I配nf此方an奶处t F粉编or和m辑微u母la生版a物n文d风M本险ic样rob式iological Risks 婴幼儿
to be controlled for micro contaminations 与干混配
• 第二料级和产品有关的操作步骤是需要控制微生物污染的
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阪崎肠杆菌_ppt课件
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※氧化酶阴性
※过氧化氢酶阳性,并生成黄色菌落
营养成分表
样品
美赞臣 安婴儿婴儿配方奶粉
罐装
配料表: 100%进口奶源配料:乳糖、精炼植物油、浓缩 乳清蛋白、脱脂奶粉、低聚半乳糖(GOS)、 花生四烯酸(ARA)和二十二碳六烯酸(DHA) (来源于单细胞油)、矿物质(碳酸钙、氯化钙、 柠檬酸钾、氯化钾、氯化镁、硫酸亚铁、硫酸锌、 硫酸铜、硫酸锰、亚硒酸钠、碘化钾)、玉米糖 浆固体、维生素(维生素A、维生素D3、维生素 E、维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素B6、 维生素B12、维生素K1、胆碱、肌醇、烟酰胺、 叶酸、泛酸、生物素)、牛磺酸、核苷酸、食品 添加剂:磷脂、抗坏血酸棕榈酸酯、氢氧化钙、 碳酸氢钾。
44 ℃±0.5 ℃ 培养24h±2h 。
10 mL mLST-Vm 肉汤
36 ℃±1 ℃培 养24 h±2 h。
各取增菌培养物1 环,分 别划线接种于两个阪崎肠 杆菌显色培养基平板
①前增菌和 增菌
②分离
挑取1 个~5 个可疑菌落,划 线接种于TSA 平板。 25 ℃±1 ℃培养48 h±4 h。
③鉴定
阪崎肠杆菌显色培养基DFI
微生物
菌落颜色
• 阪崎肠杆菌 • 大肠杆菌 • 金黄色葡萄球菌
蓝绿色 无色菌落 被抑制不生长
培养基和试剂
• 4 、胰蛋白胨大豆琼脂(trypticase soy agar, TSA):见附录A 中A.3。
• 5 、生化鉴定试剂盒。 • 6、 氧化酶试剂:见附录A 中A.4。 • 7、 L-赖氨酸脱羧酶培养基:见附录A 中A.5。 • 8 、L-鸟氨酸脱羧酶培养基:见附录A 中A.6。 • 9 、L-精氨酸双水解酶培养基:见附录A 中A.7
阪崎肠杆菌的研究进展
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龙道崎、邹妍、关郁芳、 雷丹丹、边伟、胡鹏
目录
概述
生物学特性
检测方法 致病性 预防和控制
阪崎肠杆菌概述
阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)属肠杆菌科, 是人和动物肠道内寄生的一种周生鞭毛、能运动、 无芽孢的革兰氏阴性菌,一直以来被称为黄色阴沟 肠杆菌 (Enterobacter cloacae),于1980年以日 本细菌学家 Riichi Sakazakii的名字命名。 阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠 炎和败血症,近年来受到了研究者的广泛关注
阪崎肠杆菌的毒力因子可能是一类肠毒素样 化合物。在组织培养过程中一些菌株产生细 胞毒效应,且菌株间的毒力作用有差异。 细菌内毒素(脂多糖),是构成革兰氏阴性 细菌细胞外壁的主要成分。具有热稳定性, 能增加小肠上皮细胞通透性,促使细菌侵入 肠壁中而致病。
Байду номын сангаас防与控制
预防 坚持母乳喂养 选择检查合格的奶粉 开水冲调婴幼儿配方食品,再次食用前应重新加热。 控制 制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准 制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则 制定有效的环境监测计划 建立实验室监测网络,对阪崎肠杆菌的来源、传播途径 等进行调查研究
阪崎肠杆菌的致病性
阪崎肠杆菌是存在自然环境中的一种
“条件致病菌”,由其引发的危害人群 主要是婴儿以及早产儿。偶尔还可引起 成人局部感染。
阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、
菌血症和坏死性小肠结肠炎,并可能遗 留严重的神经系统后遗症,死亡率20 %~50%。
阪崎杆菌的致病性
致病机制研究不多,尚不清楚。 目前所知阪崎肠杆菌致病性可能与肠毒素和内毒 素有关
阪崎杆菌的控制研究-贾超
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阪崎肠杆菌的控制研究引言1958 年,人们在一例新生儿脑膜炎病例中第一次暗示了阪崎肠杆菌( Enterobacter sakazakii) 的存在,此后大约有70 例阪崎肠杆菌感染报告[1]。
事实上,阪崎肠杆菌在所有国家都远没有被充分报告。
阪崎肠杆菌可引起所有年龄组人群的疾病,但人们普遍认为婴儿受感染的危险最大。
而且,阪崎肠杆菌感染能在新生阶段以后,引起从前健康的婴儿染病[2]。
感染在医院和门诊部都曾发生过。
2004 年,分别发生在新西兰和法国[3]的两次阪崎肠杆菌爆发,被人们在微生物学上证明与婴幼儿配方奶粉有联系。
法国的爆发有9 例,造成2 名婴儿死亡。
由于现有的信息缺乏,尚不能确定每一次爆发中患者接触的阪崎肠杆菌数量,则不能画出阪崎肠杆菌剂量反应曲线图[4]。
然而,我们可以确定,配方奶粉中存在少量细菌就会引发疾病。
如果还原乳液中细菌有繁殖的条件,如放置在不适宜温度下时间过长,则这种危险会迅速增加。
本文综述了阪崎肠杆菌的生物特性、食物中阪崎肠杆菌的污染状况,以及如何对婴儿配方粉进行污染并采取的一些控制措施。
一、阪崎杆菌的介绍阪崎杆菌(E. sakazakii)属于肠杆菌科,起初E. sakazakii被认为是肠杆菌的生物变型菌, 并被命名为“黄色阴沟肠杆菌”,直到1980年, Farmer[5]与其合作者在E. sakazakii和E. cloacae 的脱氧核糖核酸(DNA) 杂交的基础上, 分析生化反应、黄色菌落产物以及对抗生素敏感性的基础上, 建议将该菌更名为在E. sakazakii, 此名称被广泛地采纳, 并沿用至今。
[6]E. sakazakii是一种兼性厌氧的条件致病菌。
能引起严重的新生儿脑膜炎、败血症及坏死性小肠结肠炎等疾病,并伴随神经系统后遗症,E. sakazakii作为一种条件性致病菌,具有较高的致死率,死亡率高达50%。
[7]二、阪崎肠杆菌微生物特性1. 形态特征:阪崎肠杆菌为革兰氏阴性杆菌,形态粗而短、周身有菌毛、无芽胞, 属于肠杆菌科肠杆菌属的一种条件致病菌。
坂崎肠杆菌
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阪崎肠杆菌是人和动物肠道内寄生的一种革兰阴 性无芽孢杆菌,属肠杆菌科肠杆菌属,是肠道正 常菌丛中的一种,在一定条件下可引起人和动物 致病。在1980年之前一直被称为黄色阴沟肠杆菌
。
阪崎肠杆菌兼性厌氧,营养要求不高,能耐受一 定程度的渗透压和干燥,能在营养琼脂、血平板 、麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂、脱氧胆酸琼脂等 多种培养基上生长繁殖。
增殖特性
• 所有的阪崎肠杆菌都能在胰蛋白酶大豆琼脂上 36℃快速生长,24小时后形成直径2~3mm的菌落 ;25℃生长24h后形成直径1~1.5mm的菌落, 48小时后形成直径2~3mm的菌落。 • 坂崎肠杆菌在25℃放置10小时可增加30000倍,即 使婴儿配方粉中只有极微量的污染,阪崎肠杆菌 能在婴儿配方粉中也可长期存活,在配方粉食用 前的冲调期和储藏期该菌可能会大量繁殖。
因阪崎肠杆菌这些特性,使得奶粉生产时不易被杀灭,储 存时易生存下来。
致病性
• 阪崎肠杆菌感染的大多数病例都是婴儿,特别是早产儿、 出生体重偏低等身体状况较差的新生儿。感染主要引起脑 膜炎、脓血症、坏死性小肠结肠炎,阪崎肠杆菌引起的脑 膜炎常引起脑梗塞、脑脓肿、囊肿形成和脑室炎等并发症 ,并且可引起神经系统后遗症或迅速死亡。除了感染新生 儿外,该菌偶尔还可引起成人局部感染和菌血症等。
阪崎肠杆菌(又称阪崎氏肠杆菌)是肠杆菌科的一种,1980年 由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。其有周身菌毛,无芽 孢,有动力。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠 结肠炎和菌血症,死亡率高达50% 以上。目前,微生物学家 尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源,但许多病例报告表明婴儿 配方粉是目前发现的主要感染渠道。 1961年,Franklin等首次报道了2例由阪崎肠杆菌引起的脑膜 炎病例。以后相继在世界范围内(美国、冰岛、荷兰等国家) 报道了一系列新生儿阪崎肠杆菌感有耐热及耐寒性,在外界环境中比其他肠道 杆菌生存率强,培养最佳温度25—36℃,在6~45℃下都 能生长,某些菌株可在47℃下生长。阪崎肠杆菌比其他肠 杆菌耐高温,LEHNER研究发现阪崎肠杆菌在婴儿配方奶粉 中60℃存活2.5min,并且72℃仍能存活。BREELLWER等观 察阪崎肠杆菌在58℃下能持续0.39~0.60min不死。 • 由于阪崎肠杆菌细胞内含有大量的海藻糖酶,累积有大量 的海藻糖,使得阪崎肠杆菌比沙门菌和其他肠杆菌更耐受 渗透压和干燥。 • 阪崎肠杆菌耐酸性并对清洁剂和杀菌剂有较强抵抗力。 LEH—NER的实验表明,阪崎肠杆菌能在pH0.9~2下存活( 胃部的酸性环境),可能与阪崎肠杆菌周身菌毛结构有关 ,该菌毛结构易使细菌形成共生集合体,也易粘附在各种 物体表面形成一层生物保护膜,对清洁剂和杀菌剂具有较 强的抵抗力。
阪崎肠杆菌研究进展
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肠杆菌属,鉴于所分离出的阪崎肠杆菌 之间也有差异,被分成15个生物型或群。
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
细菌分类方面的问题
• 种是生物分类中基本分类单位,是具有高 度特征相似性的菌株群,该菌株群与其它 类群的菌株有很明显的区别;
• 细菌学家和分类学家存在一定分歧; • DNA杂交同源性在60-70%以上,或
• GB/T 4789.40—2008 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验
– 第一法 定性方法 – 第二法 MPN方法
Keith Lampel 基思.蓝佩尔
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
阪崎肠杆菌检测方法的实验设计
传统方法
• 前增菌
– 蒸馏水
– BPW
• 选择性增菌
– mLST
– EE
• 选择性分离
– 显色培养基(DFI、ESIA,其他)
– VRBGA
• 主要生化特征的鉴别
– 产黄色素 – DNA酶
• 生化鉴定
– API
– VITEK – 其他
分子生物学方法
• 前增菌
• 选择性增菌
• 目标片段扩增
– dnaG.基因,大分子合成操纵子; – gluA.基因,α-葡萄糖苷酶; – rpob基因,编码RNA聚合酶β亚单
阪崎肠杆菌研究进展
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 赵贵明 2009年8月
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
内容提要
• 第一部分:阪崎肠杆菌的分类学变化 • 第二部分:阪崎肠杆菌检验研究进展
中国检验检疫科学研究院食品安全研究所
阪崎肠杆菌的重视程度
• 《CODE OF HYGIENIC PRACTICE FOR POWDERED FORMULAE FOR INFANTS AND YOUNG CHILDREN》 CAC/RCP 66 - 2008替代 CAC/RCP 21-1979 – 由争论到定论 – 给出了制定阪崎肠杆菌监控计划的指南
食品卫生微生物学检验-阪崎肠杆菌 ppt课件
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阪崎肠杆菌介绍
易感人群:
免疫力低下者和婴幼儿、新生儿, 尤其是早产儿、低体重儿可以致病。感 染来源主要是受阪崎肠杆菌污染的奶粉, 人与人之间无传染性。
阪崎肠杆菌介绍
1、阪崎肠杆菌在自然界分布广泛,在水、土壤、食 物、排泄物等中都能够检出。细菌不耐热,加热到 72℃持续15秒就可以杀灭。细菌不在人与人之间传播。 2、阪崎肠杆菌在一般情况下不对人体健康产生危害, 但对于新生儿,尤其是早产儿、低体重儿可以致病。 3、绝大多数患者为轻症病例,表现为轻微的消化道 症状,恢复良好;重症病例罕见但病死率高。对于发 现的病例应及时报告。
阪崎肠杆菌介绍
阪崎肠杆菌(Enterobater sakazakii)属肠杆菌科肠杆 菌属,革兰染色阴性杆菌。阪崎肠杆菌在自然界分布 广泛,繁殖迅速,但不耐热,可通过巴斯德消毒法杀 灭。阪崎肠杆菌属条件致病菌,在一般情况下,不对 人体健康产生危害,但对于免疫力低下者和婴幼儿、 新生儿,尤其是早产儿、低体重儿可以致病。感染来 源主要是受阪崎肠杆菌污染的奶粉,人与人之间无传
食品卫生微生物学检验-阪崎肠杆菌 ppt课件
阪崎肠杆菌检验 GB/T 4789.40-2008
一、采标情况
二、适用范围 三、操作过程 1 第一法 阪崎肠杆菌的检验 2 第二法 阪崎肠杆菌的计数
阪崎肠杆菌检验 GB/T 4789.40-2008
二、适用范围
适用于婴幼儿配方奶粉、乳和乳制品及 其原料中阪崎肠杆菌的检验
挑取绿色菌落
接种TSA平板
25℃±1 ℃ 48 h ± 4 h 挑取黄色菌落
生化鉴定
阪崎肠杆菌
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• 婴幼儿脑膜炎:未足月出生的新生儿占75%。主要变现为 发热、面色苍白,有抽搐或颤抖,张力亢进,囱门隆出, 无颈项强直。合并有菌血症者占5/8,坏死性小肠结肠炎 占2/8,死亡率高达75%。阪崎肠杆菌引起的脑膜炎常引 起脑梗塞、脑脓肿、囊肿形成和脑室炎等并发症,并且可 引起神经系统后遗症或迅速死亡。 。 • 新生儿菌血症:低热,寒战,白细胞偏低,血液培养分离 可得到阪崎肠杆菌 ,多数症状较轻,如出现严重的脓毒 血症,死亡率可达36%。 • 新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC):多发生于未足月出生体重 较轻的婴幼儿 。 • 成人感染 :阪崎肠杆菌引起成人菌血症或局部感染。
所致疾病
阪崎肠杆菌可以对任何年龄段的人群引起疾 病,但主要是婴幼儿,特别是1岁以下和出生28 天以内的婴儿,早产儿、低体重儿或免疫缺陷的 婴幼为他们主要依靠奶粉喂养, 比其他婴幼儿更容易感染。感染主要引起脑膜炎、 脓血症、坏死性小肠结肠炎,阪崎肠杆菌引起的脑 膜炎常引起脑梗塞、脑脓肿、囊肿形成和脑室炎 等并发症,并且可引起神经系统后遗症或迅速死亡。
生物学性状
• 形态特征:革兰阴性粗短杆菌细胞大小为 ( 0.6~1.1 )×( 1.2~3.0 )µm,有周身菌毛,无芽胞,有动力 。 • 培养:兼性厌氧,营养要求不高,能在营养琼脂、血平板、麦 康凯等多种培养基上生长。在TSA和BHI生长为 1.5~2.5mm的黄色菌落 ,在VRBG能产生紫红色菌落,而 在TSA上加xα-GLC将出现绿色菌落,氧化酶阴性,触酶 反应阳性。 • 抵抗力:耐高温、干燥、渗透压 阪崎肠杆菌比其他肠杆 菌耐高温。耐酸性并对清洁剂和杀菌剂有较强抵抗力 。 •
我国对阪崎肠杆菌方面的管理规定
• 《关于对进口乳制品进行阪崎肠杆菌检测的通知》(国质 检食函[2005]690号); • 《关于加强进口乳制品检验检疫监督管理工作的通知》 国质检食函[2007]298号); • 《婴幼儿配方乳粉生产许可证审查细则》(2006、2008 版)
阪崎肠杆菌的测定
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阪 崎 检 测 步 骤
1前增菌 2选择性增菌 3平板分离 4平板确认 5 生化鉴定
操作:100g样品+900mL增菌液,培养18h±2h GB使用的增菌液为BPW 主要作用:营养丰富,更利于食品检验具有缓冲体系
阪崎肠杆菌检验——前增菌
未混匀
混合均匀
阪崎肠杆菌检验——选择性增菌增菌
操作:1mL样液+10mL增菌液, 44℃±0.5℃培养24h±2h 培养基的作用
婴儿配方粉中的污染状况
公共卫生关注的婴儿配方粉中阪崎肠杆菌的
来源包括以下2种情况: 内在污染—二次污染 如:加工环境中微生物ห้องสมุดไป่ตู้存在;加工装置的 表面微生物的存在,热处理后,与干燥基粉 混合的加入成分中存在的微生物。 外源性污染—配方粉中调制环境和调制器皿 受阪崎污染的配方粉或调制配方在较高温度 下存放,食用前不加热或加热不彻底,喂食 时间较长等都可导致阪崎有机会生长繁殖, 增加患病的危险性。
生化鉴定(API20E)
步骤一
步骤二
步骤三
生化鉴定(API20E)
改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨加万古霉素增菌液(mLST-Vm), Vm有效抑制G+,同时能在高温下长的更好。而较高温度 可以抑制其他细菌生长 mLST含盐高,利于筛选高渗透压的阪崎 因前增菌优化,仅使用1mL前增菌液即可 注: mLST-Vm,灭菌后使用前加Vm,放置不超24h 要求44℃培养,温度波动<0.5℃
阪崎肠杆菌的危害
婴儿:
1. 脑膜炎
2. 坏死性小肠结肠炎
3. 菌血症 • 严重的神经系统后遗症 成人:局部感染、菌血症、术后骨髓炎
阪崎肠杆菌的生物学特征
阪崎肠杆菌的研究进展
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生物学特性
菌落培养特性 菌 落 特 征
在胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)、脑心浸液琼脂 (BHI)及血平板
上经25~36℃培养24 h后,形成1.5~2.5mm的黄色菌落
在结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂 (VRBGA) 平板上划线分离, 生长24h后菌落形态有2种:一种为典型的光滑型菌落,极易
被接种环移动;另一种为干燥或粘液样,周边呈放射状,不
谢谢!
请各位指正与提问
分布及受污染食品
阪崎肠杆菌在自然界分布广泛,早在1974年从水,土
壤、植物根茎、下水道、动物和人类排泄物中分离到
阪崎肠杆菌。
婴儿配方奶粉是新生儿阪崎肠杆菌感染的主要感染源 阪崎肠杆菌的污染调查:分别从饼干巧克力类、方便 面类、谷物类、儿童食品类、干果类和其他类食品中 检出阪崎肠杆菌。
阪崎肠杆菌不仅存在于奶粉中,而且在 其它食品也存在
阪崎肠杆菌的毒力因子可能是一类肠毒素样 化合物。在组织培养过程中一些菌株产生细 胞毒效应,且菌株间的毒力作用有差异。 细菌内毒素(脂多糖),是构成革兰氏阴性 细菌细胞外壁的主要成分。具有热稳定性, 能增加小肠上皮细胞通透性,促使细菌侵入 肠壁中而致病。
预防与控制
预防 坚持母乳喂养 选择检查合格的奶粉 开水冲调婴幼儿配方食品,再次食用前应重新加热。 控制 制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准 制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则 制定有效的环境监测计划 建立实验室监测网络,对阪崎肠杆菌的来源、传播途径 等进行调查研究
阪崎肠杆菌的致病性
阪崎肠杆菌是存在自然环境中的一种
“条件致病菌”,由其引发的危害人群 主要是婴儿以及早产儿。偶尔还可引起 成人炎、
菌血症和坏死性小肠结肠炎,并可能遗 留严重的神经系统后遗症,死亡率20 %~50%。
食源性阪崎肠杆菌研究进展
![食源性阪崎肠杆菌研究进展](https://img.taocdn.com/s3/m/c79856d976eeaeaad1f3306a.png)
儿 阪 崎 肠 杆 菌感 染 的主 要 感 染 源 】 。
1 阪崎肠杆菌 的 生物学特 性
1 1 茵 落培 养 特 性 .
阪崎 肠 杆 菌 属 兼 性 厌 氧 菌 , 营 养 要 求 不 高 , 在 营 养 对 能
利用 a 一葡 萄 糖 苷酶 水 解 X G C, a L 释放 糖 苷 配 基 5 一溴 ~4 一 氯 一吲 哚 , 糖 苷 配 基 在 氧 存 在 时 形 成 色 素 溴 一氯 一吲 哚 , 该 使 菌 落 呈 现 特异 性 的 蓝 绿 色 的 特性 , T A培 养 基 中 加 人 5 在 S
环触 碰 可 发 现 菌 落 极 富 弹 性 ; 一 种 是 典 型 , 该 菌 在 肉汤 培 养 基 中 生 长 呈 团 块 或 沉 且
淀状 , 目前 还 不 清 楚 菌 落 特 征 差 别 是 否 与 其 毒 性 有关 。 但
蛋 白酶 大 豆 琼脂 培 养 基 上 2 ℃ 培 养 4 ~ 7 , 取 黄 色 菌 5 8 2h 挑 落, A I0 用 P E生 化 鉴 定 试 剂 盒 或 VI E 生 化 鉴 定 系 统 进 2 T K 行生化鉴定 , 同时 进 行 氧 化 酶 试 验 。
2 2 DF 1 I法 : 方 法 是 在 F 该 DA 法 基 础 上 的 改 进 , 要 是 主
年 来 已经 受到 了研 究 者 的 广 泛 关 注 【 。 目前 . 关 阪 崎 肠 杆 3 ) 有
菌 的 污 染 来 源还 尚不 清 楚 , 研 究 认 为 婴 儿 配 方 奶 粉 是 新 生 有
培 养 基 在 3 ℃ 过 夜 进 行 选 择 培 养 , 挑 取 5个 可 疑菌 落 到 胰 6 再
一
琼 脂 、 平 板 、 康 凯 琼 脂 、 S B 琼 脂 和 伊 红 美 蓝 琼 脂 血 麦 T A、 HI
阪崎肠杆菌的测定PPT
![阪崎肠杆菌的测定PPT](https://img.taocdn.com/s3/m/c6ec5a8f0d22590102020740be1e650e53eacf68.png)
03
样品处理与准备
样品采集与保存
采样工具
使用无菌采样工具,避免交叉污染。
采样部位
保存条件
将采集的样品立即放入无菌容器中,密 封并标识清楚,置于低温条件下保存, 以确保样品的新鲜度和避免细菌增殖。
根据检测需求,选择合适的采样部位, 如食品表面、内部或液体样品等。
样品前处理
样品均质化
对于固体或半固体样品, 需进行均质化处理,以便 后续检测。
公共卫生监测
建立阪崎肠杆菌的监测网络,及时发现和控 制食品、水源等环境中的污染问题,保障公 众健康。
08
总结与展望
研究成果总结
检测方法优化
通过改进培养基配方、提高检测灵敏度等方式,成功 建立了高效、准确的阪崎肠杆菌检测方法。
污染源追溯
利用分子生物学技术,对阪崎肠杆菌进行基因分型, 实现了对污染源头的快速识别和追溯。
保存期限
注意样品的保存期限,过期样品可 能会影响检测结果的准确性。
04
实验步骤与操作
培养基配制与灭菌
培养基选择
针对阪崎肠杆菌的生长特性,选择适当的培养基, 如阪崎肠杆菌选择性培养基。
培养基配制
按照培养基说明书或实验室标准操作程序(SOP) 进行配制,确保各成分比例准确。
灭菌处理
将配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌,确保无菌 状态,避免实验过程中的污染。
考核与评估
定期对实验人员进行考核和评估,包括实验操作技能考核、理论知识测试等,确保实验人员能够熟练掌 握实验技能和知识。同时,对考核结果进行分析和总结,针对存在的问题进行改进和完善。
07
应用实例与案例分析
食品中阪崎肠杆菌的测定
食品样品采集与处理
从食品生产、加工、运输和储存等各环节采集样品,进行适当处 理以消除干扰因素。
阪崎肠杆菌如何预防
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阪崎肠杆菌如何预防阪崎肠杆菌(Escherichia coli O157:H7)是一种引起食物中毒的细菌,可以导致严重的胃肠道疾病。
为了预防阪崎肠杆菌引起的食物中毒,我们需要采取一系列的预防措施。
本文将介绍如何预防阪崎肠杆菌的传播和食物中毒的发生。
了解阪崎肠杆菌阪崎肠杆菌是一种常见的细菌,存在于动物的肠道中,尤其是在牛的肠道中。
阪崎肠杆菌传播主要通过食物和水源感染。
当食物或水受到污染后,细菌可以生长繁殖,如果人们食用这些污染食物或饮用污染水源,就可能感染阪崎肠杆菌。
因此,了解这种细菌的特点和感染途径对于预防阪崎肠杆菌感染至关重要。
预防措施:1. 保持良好的卫生习惯良好的卫生习惯是预防阪崎肠杆菌感染的基础。
包括保持手部卫生、定期洗手,并使用肥皂和温水洗手至少20秒。
特别是在接触动物、处理生食或用餐前后,务必洗手。
此外,定期清洗和消毒厨房及餐具也是必要的。
2. 食品安全控制在食品方面,确保食品安全是预防阪崎肠杆菌感染的关键。
以下是一些常见的食品安全措施:•生食处理:避免直接接触生肉、生蔬菜和未煮熟的食物。
在食用之前,确保食物彻底煮熟,特别是肉类和禽类产品。
避免食用生肉、生蔬菜和生鱼片等。
•温度控制:食品的储存和烹饪温度是预防细菌感染的重要因素。
冷藏食品应储存在零下5摄氏度以下,烹饪食品应达到适当的温度,通常为摄氏75摄氏度以上。
确保食物的温度适宜,可以有效地杀死阪崎肠杆菌。
•使用安全水源:饮用水和食物加工过程中使用的水源必须是安全的。
确保饮用水经过适当处理或来自可靠的供水系统,并确保使用的水用于清洗食物和餐具是安全的。
3. 防止交叉污染交叉污染是指细菌从一个食物或表面传播到另一个食物或表面的过程。
为了预防阪崎肠杆菌的交叉感染,我们可以采取以下措施:•使用专用切割板:使用专用切割板来切割不同类型食物,特别是生肉和生食。
避免将同一个切割板用于处理生肉和其他食物。
•分开存放食材:食材在储存时要分开存放,避免不同食物之间的直接接触。
阪崎肠杆菌培训资料
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五、生理特性பைடு நூலகம்防控措施
阪崎肠杆菌生物特性表明, 阪崎肠杆菌生物特性表明,阪崎肠杆菌能在生产至食用的 整个过程中存活, 整个过程中存活,从容易造成生成过程中的污染并进而引 起致病阪崎肠杆菌能在很宽的温度范围内生长( 47摄 起致病阪崎肠杆菌能在很宽的温度范围内生长(6~47摄 氏度) 氏度)本实验室分离到的阪崎肠杆菌生长温度范围为 46摄氏度)。阪崎肠杆菌在10、18、21、37摄氏度 摄氏度)。阪崎肠杆菌在10 (8~46摄氏度)。阪崎肠杆菌在10、18、21、37摄氏度 温度时的代时分别是13.6 2.9、1.3、0.5h, 13.6、 温度时的代时分别是13.6、2.9、1.3、0.5h,可见阪崎肠 杆菌相对于其它杆菌科细菌生长范围更广, 杆菌相对于其它杆菌科细菌生长范围更广,并且迟滞时间 和代时更短。 和代时更短。因此冲好的奶粉中如果含有少量的阪崎肠杆 1cfu/mI),在较短时间内就能增加到10 ),在较短时间内就能增加到10的 菌(1cfu/mI),在较短时间内就能增加到10的7次方 cfu/mI,从而威胁健康。 cfu/mI,从而威胁健康。不同阪崎肠杆菌株耐温能力相差 很大,Nazarowec-White和Farber发现阪崎肠杆菌在配方 很大,Nazarowec-White和Farber发现阪崎肠杆菌在配方 奶粉中D60 2.5min,并且72摄氏度仍能存活, D60为 72摄氏度仍能存活 奶粉中D60为2.5min,并且72摄氏度仍能存活,说明该微 生物非常耐热;Edelson-Mammel和Buchanan发现阪崎肠杆 生物非常耐热;Edelson-Mammel和Buchanan发现阪崎肠杆 D58为30.5~591.9s, 菌D58为30.5~591.9s,因此阪崎肠杆菌可能具有热敏感 和热耐受两种表现型。 和热耐受两种表现型。
阪崎克罗诺杆菌耐热性和耐酸碱性的研究
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基 金 项 目: 国家 科 技 支撑 计 划 项 E t( 项I ]编号 :2 0 1 3 B AD I 8 B I 1、2 0 1 2 B AK 1 7 B 0 4 、2 0 1 2 B AD 2 8 B 0 2) 。 作者简介:柴云雷 ( 1 9 8 6 一 ) ,女 , 硕士研究生,主要研究方向为食品安全。 通讯作者:姜毓君 ( 】 9 7 1 一 ) ,男,博士 ,教授,主要研究方向为食品安全。
2 8
f 1国 食 物 与 营 养
第2 【 ) 卷
( 续)
5 、 8 、l 0 、 2 0 、3 0 、 6 0 m i n 。然后将 处理 后 的试 管冷 却 至室温 ,振荡摇 匀,吸取 1 0 0 u L处理后的菌液 ,均匀涂 布于 F S A培 养基上 ,3 7 q C 倒 置培养过夜 ,最后观察 阪 崎克罗诺杆菌 的生长情况。
阪 崎肠 杆 菌 是 一 种 重 要 的 条件 致 病 菌 ,在 1 9 8 0年 以前 一 直 被称 为 黄 色 阴 沟 肠 杆 菌 ( Y e l l o w p i g m e n t e d E n —
氏杀菌后环境涂抹 ( 固定床筛网)及终产品。所有分离
菌株 经 显 色 培 养 ,A P I 2 0 E生 理 生 化 试 验 ,均 鉴 定 为 阪
培养 1 8 h 后 ,作为原始菌液 ,同时测定该原始菌液 的菌
液浓 度 。
1 . 4 . 2 阪 崎 克 罗诺杆 菌的 耐热 性试 验
和7 2℃ ( 即巴氏杀 菌温度) 下温度耐受性 ,袁 飞等 则
综合研究 了阪崎克 罗诺 杆 菌对 温度 和强酸 强碱 的耐 受 性 。本文通过对 4株不 同来源 的阪崎克罗诺杆菌 耐受 性的研究 ,对 降低该菌的感染风险提供 了基 础 ,从 而更 好的预 防与降低该菌的污染风险。
【优秀文档】细菌食品中毒李斯特菌阪崎肠杆菌PPT
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进入宿主细胞胞 浆
形成双膜结构 并逃逸二 级吞噬体
2.6 我们的思考
如何控制食品中的李斯特菌?
•
单增李斯特菌在一般热加工处理中能存活,热处理已杀灭了竞
争性细菌群,是单增李斯特菌在没有竞争的环境条件下易于存活,
所以在食品加工中,中心温度必须达到70℃持续2分钟以上。
细菌食品中毒李斯 特菌阪崎肠杆菌
壹
食物中毒
贰
李斯特菌
叁
阪崎肠杆菌
能在2-42℃下生存(也有报道0℃能缓慢生长)能在冰箱冷藏室内较长时间生长繁殖。 细菌特点:革兰氏阴性无芽孢杆菌 由于丹增李斯特菌在4℃下仍然能生长繁殖,所以未加热的冰箱食品增加了食物中毒的危险。 细菌先在食物内生长繁殖,然后产生毒素,食用后引起食物中毒。
monocy togenes 能在2-42℃下生存(也有报道0℃能缓慢生长)能在冰箱冷藏室内较长时间生长繁殖。 沙门氏菌、志贺氏菌、变形杆菌、病原性大肠杆菌等。
单增李斯特菌在一般热加工处理中能存活,热处理已杀灭了竞争性细菌群,是单增李斯特菌在没有竞争的环境条件下易于存 活,所以在食品加工中,中心温度必须达到70℃持续2分钟以上。 形成双膜结构并逃逸二级吞噬体
1.4 细菌性食物中毒
中毒类型 感染型
毒素型
中毒机理及症状
常见细菌
食用的食物内含有大量的 病原菌,进入人体后大量 生产繁殖,然后引起中毒 ,以急性肠胃炎症状为多 见。
沙门氏菌、志贺氏菌、变 形杆菌、病原性大肠杆菌 等。
细菌先在食物内生长繁殖 ,然后产生毒素,食用后 引起食物中毒。以急性肠 胃炎症状为中毒特征。
形成双膜结构并逃逸二级吞噬体
酸性、碱性条件下
牛奶和乳制品;肉
都适应
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另外对紫外光也有很好的耐受性,在60℃-70℃紫外光照射下E. sakazakii
能存活120min。 同时, Breeuwer 等的研究结果表明,E. sakazakii由于 含有大量的海藻糖酶, 能在细胞内积累海藻糖,阻止蛋白变性和膜融合,使
其较其他细菌更能耐受干燥和渗透压, 从而使之能在婴儿配方粉中长期存活。
阪崎杆菌的控制研究
姓 名 导 师
贾 超 张 筠
1 2 3
4
引 言
阪崎杆菌的介绍 阪崎杆菌生物特性 阪崎杆菌在食品中的污染状况
5Байду номын сангаас
6
阪崎杆菌如何污染婴儿配方粉
阪崎杆菌的控制措施
1
引 言
1958 年,人们在一例新生儿脑膜炎病例中第一次暗示了阪崎肠杆菌 ( Enterobacter sakazakii) 的存在,此后大约有70 例阪崎肠杆菌感染 报告。事实上,阪崎肠杆菌在所有国家都远没有被充分报告。阪崎肠 杆菌可引起所有年龄组人群的疾病,但人们普遍认为婴儿受感染的危 险最大。而且,阪崎肠杆菌感染能在新生阶段以后,引起从前健康的 婴儿染病。感染在医院和门诊部都曾发生过。2004 年,分别发生在新 西兰和法国的两次阪崎肠杆菌爆发,被人们在微生物学上证明与婴幼 儿配方奶粉有联系。法国的爆发有9 例,造成2 名婴儿死亡。由于现有 的信息缺乏,尚不能确定每一次爆发中患者接触的阪崎肠杆菌数量, 则不能画出阪崎肠杆菌剂量反应曲线图。然而,我们可以确定,配方 奶粉中存在少量细菌就会引发疾病。如果还原乳液中细菌有繁殖的条 件,如放置在不适宜温度下时间过长,则这种危险会迅速增加。 本文综述了阪崎肠杆菌的生物特性、食物中阪崎肠杆菌的污染状况, 以及如何对婴儿配方粉进行污染并对其采取的一些控制措施。
条件致病菌。我国也非常重视E. sakazakii的监测情况,已将其列入食源性致病
菌的监测范围。在2010-2011年各地疾控中心的食源性致病菌监测结果E. sakazakii的检出情况中显示,广西梧州市监测的175份食品中检出率为5.26% , 江苏宿迁市的891份样品中检出率为2.6%,甘肃定西市对321份市售食品监测中
3
阪崎杆菌生物特性
1 2 3
形态特征 培养特性 抵抗性 增值能力
1
4
生物 特性
2
4
3
形态特征
阪崎肠杆菌为革兰氏阴性杆菌,形态粗而短、周身有
菌毛、无芽胞, 属于肠杆菌科肠杆菌属的一种条件致病菌。
培养特性
阪崎肠杆菌营养要求不高, 能在多种培养基中生长繁殖。不同的 琼脂培养其菌落颜色不同, 如在结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂 (VRBG)平板中36℃ 孵育24h, 可出现紫色菌落, 而接种在胰蛋白酶大 豆琼脂( TSA ) 平板25℃ 48-72h, 可出现黄色菌落 , 在胰蛋白酶大豆 琼脂 ( TSA )上加5- 溴- 4-氯- 吲哚- A- D 吡喃葡萄苷( X a- GLC ) , 能 产生蓝绿色菌落, 现已作为阪崎肠杆菌快速培养的选择性培养基。
增值能力
阪崎肠杆菌于25℃ 放置6h, 其相对危险性可增加30倍; 25℃ 放置10h相对危险性可增加30 000倍。因此, 即使婴儿配 方粉中只有极微量的阪崎肠杆菌污染, 在配方粉食用前的冲调期 和储藏期该菌也可能大量繁殖。
4
阪崎杆菌在食品中的污染状况
在过去的E. sakazakii感染案例中,婴儿配方奶粉(FIP)是E. sakazakii的 主要感染渠道。自1961年首次报道由E. sakazakii引起的新生儿脑膜炎之后, 全球范围陆续出现感染事件,丹麦、希腊、英国、荷兰、冰岛等国均有报道。 多个品牌婴幼儿食品中检测出E. sakazakii,其严重性已引起世界多国相关部门 的重视,E. sakazakii已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴儿死亡的重要
检出率为0.31%,湖南长沙市监测的286份食品中检出率为6.3%。2013年董晓
晖等对300份奶粉和50份非奶粉类食品中克罗诺杆菌进行定量检测,检出率达 6.6%,23个污染样品中有4个样品的含菌量大于100 MPN/100g。说明E. sakazakii在我国已经存在一定程度的污染且污染食品范围较广。
喂养婴儿 前被污染。
表1-配方粉干混原料成分中致病菌的调查结果
6
阪崎杆菌的控制措施
控制初级原料的质量 在食品的加工过程中灭菌
防止灭菌后的产品在后续的生产环 节被再次污染
生产设备的控制
防止食品在消费环节被污染
1
控制初级原料的质量
阪崎肠杆菌是在自然界中广泛存在的生物,它可能存在于生产食品的各种 原辅料中。这些原辅料有植物来源也有动物来源的。植物来源包括蔬菜、水
2
阪崎杆菌的介绍
阪崎杆菌(E. sakazakii)属于肠杆菌科,起初E. sakazakii被认为是肠 杆菌的生物变型菌, 并被命名为“黄色阴沟肠杆菌”,直到1980年, Farmer与 其合作者在E. sakazakii和E. cloacae的脱氧核糖核酸(DNA) 杂交的基础上, 分析生化反应、黄色菌落产物以及对抗生素敏感性的基础上,建议将该菌更 名为在E. sakazakii,此名称被广泛地采纳, 并沿用至今。 E. sakazakii是一种兼性厌氧的条件致病菌。能引起严重的新生儿脑膜 炎、败血症及坏死性小肠结肠炎等疾病,并伴随神经系统后遗症, E. sakazakii作为一种条件性致病菌,具有较高的致死率,死亡率高达50%。
5
阪崎杆菌如何污染婴儿配方粉
近几年来, 国内外报道了一系列配
方粉污染事件。阪崎肠杆菌污染配 方粉的途径主要有3条
1 2
通过生产婴儿配方奶粉的 原料。国外对相关配方产 品进行的生产原料调查资 料表明, 在配方粉生产使用 的配方原料中, 淀粉被致病 性微生物污染的危险性最 高 。见下表
3
在巴氏杀菌后污 染或随其他添加 剂带入。
抵抗力
阪崎肠杆菌耐高温, Farber研究表明,E. sakazakii 是所研究的肠杆 菌中最耐热的一种,在60℃为2.5 min 条件下,要使E. sakazakii 减少6或 7个数量级,需要在60℃分别加热15 min和17.5 min,而在高温短时 (72℃/15s)的巴氏杀菌条件下,理论上可以杀灭所有的E. sakazakii。