实验六-从淡奶粉中分离、鉴定酪蛋白和乳糖

综合实验-几种乳制品中酪蛋白和乳糖的制备与鉴定(生化实验2)

将乳糖晶体重新溶于水后，取2倍体积本尼迪特试剂（基于蓝色的碱性硫酸铜可被还原为红色的氧化铜的原理检查葡萄糖等还原糖的试剂），置沸水浴中加热数分钟，观察颜色变化。
几种乳制品中酪蛋白和乳糖的制备与鉴定
5. 时间安排
（1）12课时(8 hr)：原理及操作讲解、酪蛋白分离、乳糖的结晶；
（2）3课时(2 hr)：酪蛋白含量测定及蛋白鉴定、乳糖晶体洗涤及干燥。
几种乳制品中酪蛋白和乳糖的制备与鉴定
1. 实验目的
➢ 学习从牛奶中分离酪蛋白和乳糖的原理； ➢ 掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法； ➢ 学习常用蛋白质和乳糖的鉴定方法。
几种乳制品中酪蛋白和乳糖的制备与鉴定
2. 实验原理
乳制品中主要含有酪蛋白和乳清蛋白两种蛋白质，其中酪蛋白占了其蛋白质总量的80%。乳制品在pH4.7时酪蛋白等电聚沉后剩余的蛋白质统称为乳清蛋白。酪蛋白是白色、无味的物质，不溶于水、乙醇等有机溶剂，但溶于碱溶液。乳清蛋白不同于酪蛋白，其粒子的水合能力强，分散性高，在乳中呈高分子状态。
（3）乳糖的分离及含量测定：将上述实验所得的上清液（约40 mL）加热煮沸（小烧杯
在沸水浴中加热），趁热过滤，除去沉淀的蛋白质和残余的 CaCO3，将澄清滤液置于蒸发皿中，蒸气浴（将蒸发皿置于盛水的烧杯上，在电炉上加热至沸）浓缩至5 mL左右，冷却后转移至小烧杯，加入20 mL 95%乙醇，加薄膜密封，4 ℃放置3 ~ 4 d（冰箱），让乳糖充分结晶，过滤收集乳糖晶体，并用冷的 95%乙醇洗涤晶体，干燥2 d，称重，计算含量。
（2）酪蛋白的鉴定：
取0.5 g酪蛋白颗粒于烧杯中，加入NaCl溶液30 mL溶解。
➢ 取5 mL酪蛋白溶液（试管），加入茚三酮溶液3滴，振荡，放入沸水浴（烧杯）中加热2 - 3 min，观察溶液颜色变化（茚三酮反应：所有氨基酸及具有游离α-氨基和α-羧基的肽与茚三酮反应都产生蓝紫色物质，只有脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（亮）黄色物质）。

综合化学实验讲义

.综合化学实验实验讲义有机化学教研室编制实验一醋酸正丁酯的制备一、实验目的1 掌握醋酸正丁酯合成的原理和方法；2 学习通过恒沸物除去反应体系中水分的方法。

二、实验原理醋酸正丁酯是一种良好的有机溶剂，可以应用于人造革、医药、塑料及香料等工业，并可以用作萃取剂和脱水剂。

醋酸正丁酯通过酯化反应由醋酸和正丁酯制备，加入极少量的浓硫酸作为催化剂。

CH3COOH +CH 3CH 2CH 2CH 2OH 浓硫酸CH 3COOCH 2CH 2CH 2CH 3+H 2O通过将体系中形成的副产物水除去，可以提高酯化反应的转化率。

利用乙酸正丁酯-正丁醇-水形成恒沸物，可以通过分水器将反应过程中形成的水分分出，促进酯化反应平衡向右移动，提高反应的转化率。

三、实验方法250 ml 的四口烧瓶中加入27.9 m l 正丁醇和14.4 ml 醋酸再加入10滴浓硫酸，反应装置装上分水器和回流冷凝管。

可以在分水器中预先加入少量水，使水面略低于支管口的位置。

开始加热回流，并记录分出水的体积。

约40分钟后至体系中不再有水分分出为止，停止加热。

计算分出的水分，并与理论应分出的水量进行比较。

冷却后将分水器中酯层和烧瓶中的反应物一起倒入分液漏斗，用20ml 水洗涤，分出水层。

酯层再用25m l 浓度为10 wt%的碳酸钠溶液洗涤至中性，分出水层。

将酯层再用20 ml 水洗涤，分出水层。

酯层用无水硫酸镁干燥。

干燥好的酯层经蒸馏，收集124-126 ºC 的馏分。

称重，计算产率。

四、注意事项1. 实验中使用的作催化剂的浓硫酸不可过量，以免引起有机物碳化脱水等；2. 控制体系的回流温度3. 反应产物洗涤过程五、思考题1. 影响反应产物转化率的主要因素有哪些？实验中是如何提高反应的转化率的?2. 分水器使用的原理及方法?3. 反应过程中如何除去水分的?4. 怎样计算反应完全时分出的水量？酯化反应时为何要加过量的酸或碱?5. 乙酸丁酯有哪些应用?实验二苯乙烯-马来酸酐共聚物的合成一、实验目的1 学习自由基聚合的原理和沉淀聚合方法；2 掌握苯乙烯-马来酸酐共聚物的合成方法。

实验六-从淡奶粉中分离、鉴定酪蛋白和乳糖

实验六从淡奶粉中分离、鉴定酪蛋白和乳糖教学要求:1 掌握通过等电点分离蛋白质的原理和方法；2 掌握蛋白质鉴定的特征反应；3 掌握还原性糖的鉴定方法。

教学重点：掌握通过调节溶液体系的pH值利用等电点分离蛋白质。

教学难点：蛋白质和还原性糖鉴定反应的操作及其现象观察教学时数：4 学时一、实验目的１、掌握分离蛋白质和糖的原理和操作方法；２、掌握蛋白质的定性鉴定方法；３、了解乳糖的一些性质。

二、实验原理牛奶的主要成分是水、蛋白质、脂肪、糖和矿物质，其中，蛋白质主要是酪蛋白，而糖主要是乳糖。

蛋白质在等电点时溶解度最小，当把牛奶的ＰＨ值调到4.8时(酪蛋白的等电点),酪蛋白便沉淀出来。

酪蛋白不溶于乙醇和乙醚，可用乙醇和乙醚来洗去其中的脂肪。

乳糖不溶于乙醇在滤去酪蛋白的清液中加入乙醇时，乳糖会结晶出来。

三、实验步骤１、酪蛋白与乳糖的提取４g奶粉与80 mL 40℃温水调配均匀，以10%乙酸调节pH=4.7(用精密pH试纸测试)，静置冷却，抽滤。

滤饼用6mL水洗涤，滤液合并到前一滤液中。

滤饼依次用6mL95%乙醇，6mL乙醚洗涤，滤液弃去。

滤饼即为酪蛋白，晾干称重。

在水溶液中加入2.5g碳酸钙粉，搅拌均匀后加热至沸，过滤除去沉淀，在滤液中加入1～2粒沸石，加热浓缩至8ml左右，加入10ml 95%乙醇（注意离开火焰）和少量活性炭，搅拌均匀后在水浴上加热至沸腾，趁热过滤，滤液必须澄清，加塞放置过夜，乳糖结晶析出，抽滤，用95%乙醇洗涤产品，晾干称重。

２、酪蛋白的性质缩二脲反应取10ml酪蛋白溶液，加入10% NaOH溶液2ml后，滴入1%CuSO4溶液1ml。

振荡试管，观察现象(溶液呈蓝紫色)。

蛋黄颜色反应取10ml酪蛋白溶液，加入浓硝酸2ml后加热，观察现象（有黄色沉淀生成）。

再加入10%NaOH溶液2ml，有何变化?(沉淀为橘黄色)3、乳糖的性质Fehling反应Ｆehling试剂A和Ｂ各3mL,混匀，加热至沸后加入0.5mL5%乳糖溶液，观察现象。

从牛奶中分离奶油、酪蛋白和乳糖实验指导书

从牛奶中分离奶油、酪蛋白和乳糖实验指导书一、实验目的要研究各种蛋白质的性质就要把它从水混合食品体系中分离出来，其它物质亦然。

通过本实验，掌握奶油酪蛋白和乳糖的分离、提取和鉴定方法。

二、实验原理奶油是食品工业的一种重要产品和原料，从鲜奶中分离奶油仅需用离心分离，在离心场下，鲜奶中脂肪球因比重轻于水而上浮，在离心管上凝结成一层，可直接取出。

乳蛋白是完全蛋白质，含八种必需氨基酸，有胱氨酸这种含硫氨基酸，属于磷蛋白质，又是多亚基蛋白质，它的4种亚基之一K酪蛋白在钙离子浓度很宽的范围内溶解性很大，这一性质使它起着稳定酪蛋白沉淀下来。

分离出去后其它蛋白在介质调回中性后加热就可沉淀出去，清液中的乳糖则可用乙醇沉淀出来。

遵循的操作步骤如下：首先将脱脂乳温热并加入稀乙酸使酪蛋白沉淀。

重要的是不要加热过度或使用太强的酸。

因为这些条件也会使乳糖水解成其它的组分，除去酪蛋白后剩余的乙酸用碳酸钙中和，然后将溶液加热至沸，使原溶液（脱脂乳）中溶解的其它蛋白质（主要是白蛋白）变性沉淀，过滤掉这些沉淀后，滤液进行浓缩，于浓缩液中加酒精，并将溶液脱色，用真空过滤使溶液通过助滤剂后，α-乳糖便在冷却时结晶析出，杂质可用活性炭及助滤剂吸附去除。

三、实验材料、试剂和仪器鲜牛奶（经过巴氏杀菌）；电炉1台；天平1台；离心机1台；试管架1个；500mL、100mL烧杯各2个；试管5支；抽滤装置1套；玻动搅棒2个；滤纸1盒；冰箱；1：10乙酸溶液，取10mL冰乙酸，溶解到90mL水中；碳酸钙（原包装）；95%乙醇（原瓶）；活性炭（原包装）；硅藻土；2%醋酸铅溶液；浓硝酸；乳糖、半乳糖和葡萄糖少许。

米伦试剂：按重量溶解1份于2份量硝酸（比重1.42）中，再用2倍体积水稀释之。

注意：配制的作用剧烈，应少量配制，容器亦大，缓慢操作，并应于通风设备中操作。

四、实验内容1、从牛奶中分离生奶油取400mL鲜奶，分装于四支离心管中，在台秤上称量，使每管重量相等，插装在离心机的离心管架中，在4000转/分钟的速度下离心5~10分钟，直到奶油层完全形成，然后用小钢勺轻轻将生奶油取出。

牛奶中酪蛋白和乳糖的分离和鉴定

牛奶中酪蛋白和乳糖的分离和鉴定肖丽王进（武汉大学化学与分子科学学院，2001级化学基地班）摘要：本文用实验的方法分离出牛奶的主要组成物质酪蛋白和乳糖，并用其特征反应和化学特性定性定量地检验了所分离的产物。

关键词：酪蛋白，乳糖，等电点，纸电泳，分离。

1 引言牛奶是一种营养价值丰富且易被人体吸收的物质。

现代研究表明，牛奶中所含的水，蛋白质，脂肪，糖，无机盐，维生素等都容易被人体吸收利用，除具有较高的营养价值外，对一些疾病还有一定治疗作用和保健养老作用。

酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质，是含磷蛋白质的复杂混合物，在牛奶中以钙盐存在。

酪蛋白是两性化合物，当调节牛奶的pH值到酪蛋白的等电点（pH=4.8）时，酪蛋白呈电中性，这时酪蛋白的溶解度最小，会从牛奶中沉淀出来。

本实验利用酪蛋白的这种性质对其进行分离。

酪蛋白不溶于乙醇和乙醚，因此分离后用乙醇和乙醚洗去其中残留的脂肪。

牛奶中的糖主要是乳糖。

乳糖是一种还原性二糖，是目前唯一由哺乳动物合成的糖，以α-乳糖和β－乳糖两种同分异构体存在，在水溶液中两种乳糖可以相互转化，故水溶液有变旋光现象。

乳糖不溶于乙醇，本实验使用乙醇使它结晶，达到分离目的。

2 实验部分2.1 原料和仪器50 ml烧杯, 100 ml量筒，数字旋光异仪，蒸发皿，水浴锅，电泳仪，精密PH 试纸，简单抽滤装置。

冰HAc，95%乙醇，新鲜牛奶（伊利牌），碳酸钙，乙醚，考马斯亮蓝试剂，硫酸铜，氢氧化钠。

2.2 分离实验（1）酪蛋白的分离：步骤：取20ml新鲜牛奶于50ml烧杯中，在恒温水浴中加热到50ºC，不断搅拌下滴加10%HAc,用精密PH试纸调节牛奶的PH值至4.6~4.8（理论等电点pH=4.8，此步操作见后讨论），空气中放置一段时间冷却，之后过滤出其中的酪蛋白（滤液中加少量碳酸钙，留做下部实验用），依次用乙醇，乙醇和乙醚等体积混合液，乙醚洗涤酪蛋白，除去其中的脂肪，将其转入到表面皿上，在空气中风干后称重，得酪蛋白1.4218 g。

从奶粉中分离酪蛋白的原理

从奶粉中分离酪蛋白的原理
从奶粉中分离酪蛋白的主要原理是通过酪蛋白在特定条件下的溶解和沉淀。

下面是一种常见的分离方法：
1. 将奶粉溶解在适量的水中，使其充分溶解成悬浮液。

2. 调节溶液的酸碱度，使其达到酪蛋白的最佳溶解条件。

通常使用酸性条件，如加入适量的醋酸或盐酸。

3. 在溶解后的奶粉悬浮液中加入酪蛋白沉淀剂，例如酒石酸或乙酰巴豆酸钠。

这些沉淀剂能与酪蛋白形成复合物，并促使酪蛋白沉淀。

4. 搅拌溶液，使沉淀剂与酪蛋白充分反应。

5. 离心沉淀液，使酪蛋白沉淀到底部。

6. 倒掉上清液，得到含有酪蛋白的沉淀物。

7. 用适量的清洁水洗涤沉淀物，以去除掉一部分杂质。

8. 继续离心，除去多余的水分。

9. 最后得到纯净的酪蛋白沉淀物，可以用于进一步的分析或加工。

从牛奶中分离酪蛋白和乳糖

从牛奶中分离酪蛋白和乳糖从牛奶中分离酪蛋白和乳糖一、引言牛奶中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/l。

酪蛋白在乳中是以酪蛋白酸钙-磷酸钙复合体胶粒存在，胶粒直径约为20～800纳米，平均为100纳米。

在酸或凝乳酶的作用下酪蛋白会沉淀，加工后可制得干酪或干酪素。

本实验利用加酸，当达到酪蛋白等电点PH=4.7时，酪蛋白沉淀。

脱脂乳中除去酪蛋白后剩下的液体为乳清，在乳清中含有乳白蛋白和乳球蛋白，还有溶解状态的乳糖，乳中糖类的99.8%以上是乳糖，可通过浓缩、结晶制取乳糖。

二、实验材料和试剂脱脂乳或脱脂奶粉。

醋酸-醋酸钠缓冲溶液（PH=4.7），95%乙醇，乙醚，碳酸钙粉末，苯肼试剂。

三、实验步骤1. 从牛奶中分离酪蛋白在烧杯中加入2g脱脂奶粉，再加入40ml40℃，PH=4.7的醋酸-醋酸钠缓冲溶液40ml，用PH精密试纸检验液体的PH值。

静置冷却至室温，倾去上层清液（留作分离乳糖用），剩下的悬浮液分别装入两支离心试管中，用转速为2000转/分离心分离3～5分钟，倾出上层清液，（合并于上一清液中），得酪蛋白粗品。

于离心管中加入5ml蒸馏水，用玻棒充分搅拌，洗涤除去其中的水溶性杂质（如乳清蛋白，乳糖以及残留的缓冲溶液），离心后弃去上层液，再用蒸馏水洗一次。

于试管中加入5ml95%乙醇，充分搅拌，离心后弃去乙醇溶液，用乙醇洗涤主要是除去磷脂类物质。

最后再用5ml乙醚以同样方法洗涤，以除去脂肪类物质。

将酪蛋白沉淀物凉干，称重、并计算得率。

2. 从牛奶中分离乳糖在除去酪蛋白的乳清中，加入1.5g CaCO3粉末，搅拌均匀后加热至沸。

加CaCO3的目的一方面是中和溶液的酸性，防止加热时乳糖水解，另方面又能使乳白蛋白沉淀。

过滤除去沉淀，在滤液中加入1～2粒沸石，加热浓缩至3～5ml，加入10ml 95%乙醇（注意离开火焰）和少量活性炭，搅拌均匀后在水浴上加热至沸腾，趁热过滤，滤液必须澄清。

加塞放置过夜，乳糖结晶析出，抽滤，用95%乙醇洗涤产品。

牛奶中酪蛋白和乳糖的分离

牛奶中酪蛋白和乳糖的分离、原理牛奶是一种乳状液，主要由水、脂肪、蛋白质、乳糖等组成。

牛奶蛋白分为四种： B -乳球蛋白、丫 -乳清蛋白、乳清蛋白和酪蛋白。

其中酪蛋白对牛奶蛋白的贡献最大，占了 80%含有10%的磷，对促进大脑发育起至关重要的作用；乳清蛋白分子比较小，相对酪蛋白更加易消化；而乳球蛋白多是牛奶中的生物活性物质，如免疫球蛋白、乳铁蛋白、溶菌酶等。

酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质，是含磷蛋白质的复杂混合物。

蛋白质是两性化合物,当调节牛奶的pH 达到酪蛋白的等电点(pH = 4. 8)时, 蛋白质所带正、负电荷相等，呈电中性，此时酪蛋白的溶解度最小，会从牛奶中沉淀出来,以此分离酪蛋白。

因酪蛋白不溶于乙醇和乙醚 ,可用此两种溶剂除去酪蛋白中的脂肪。

乳糖是一种二糖,由一分子B -D-半乳糖的半缩醛羟基与另一分子葡萄糖 C4k 的醇性羟基缩去一分子水通过B -1 , 4糖苷键结合而成。

乳糖也不溶于乙醇,当乙醇混入乳糖水溶液中，乳糖会结晶出来，从而达到分离的目的。

orD-葡萄糖H 0HCHOH tt-D- ( + )-葡萄糖(占36%) H H HCH20H CH20HHOHp-D-半乳糖残基D-葡萄糖残基、实验材料和试剂脱脂乳或脱脂奶粉醋酸-醋酸钠缓冲溶液（PH=4.7）, 95聽醇，乙醚，碳酸钙粉末，苯肼试剂。

三、实验步骤1.从牛奶中分离酪蛋白在烧杯中加入2g脱脂奶粉，再加入40ml40C, PH=4.7的醋酸-醋酸钠缓冲溶液40ml，用PH精密试纸检验液体的PH fi（使牛奶pH = 4. 8 ），放置冷却、澄清后，用尼龙布过滤酪蛋白。

（在滤液中加入少量粉状碳酸钙，留作乳糖的分离。

）依次用乙醇、乙醇和乙醚的等体积混合液、乙醚洗涤酪蛋白，去除脂肪,待酪蛋白充分干燥后称量其重量,并计算牛奶中酪蛋白的含量。

2.从牛奶中分离乳糖在除去酪蛋白的乳清中，加入1.5g CaCO3粉末，搅拌均匀后加热至沸。

综合化学实验II讲义

综合化学实验II实验讲义实验二苯乙烯-马来酸酐共聚物的合成一、实验目的1 学习自由基聚合的原理和沉淀聚合方法；2 掌握苯乙烯-马来酸酐共聚物的合成方法。

二、实验原理马来酸酐是强的吸电子单体而苯乙烯是强的给电子单体，因此二者等量混合，在引发剂引发下易发生共聚而形成交替共聚物。

本实验采用过氧化苯甲酰（BPO ）作为引发剂，引发苯乙烯与马来酸酐发生自由基聚合，形成苯乙烯-马来酸酐共聚物，并通过碱性水解制备水解的苯乙烯-马来酸酐共聚物。

OOOnnCH 2CHBPOCH CH CH 2CHCC O On由于苯乙烯与马来酸酐均可以溶解于甲苯中，而其共聚物在甲苯中不溶，因此其共聚物可以从甲苯中沉淀出来而称为沉淀聚合。

三、实验方法1 共聚物的合成250 ml 的四口烧瓶中加入150 ml 经蒸馏的甲苯，10.4g 苯乙烯、9.8g 马来酸酐和0.1gBPO ，升温至50℃左右，搅拌15分钟使马来酸酐完全溶解。

然后，升温到80℃左右反应1小时。

反应物降至室温，将产物滤出，在60℃下真空干燥。

2 共聚物皂化在100 ml 圆底烧瓶中加入2 g 干燥的共聚物和50 ml 2mol/L 的氢氧化钠溶液，加热至沸腾，待聚合物溶解后继续回流1h 。

降温至50℃，将溶液倾入200 ml 3mol/L 的盐酸中，使聚合物沉淀，过滤、洗涤、干燥，获得水解的苯乙烯-马来酸酐共聚物。

四、注意事项1. 实验中使用的苯乙烯、马来酸酐、BPO 实验前应该精制2. 聚合过程中要控制反应温度不可以太高，以免反应太快！五、思考题1. 影响共聚反应的竟聚率的因素主要有哪些?2. 聚合反应的溶剂选择要考虑哪些因素?3. 苯乙烯-马来酸酐共聚物有哪些应用?4. 聚合反应的溶剂选择要考虑哪些因素? 为什么苯乙烯反应前经碱洗, 减压蒸馏?5. 未蒸馏过的苯乙烯试剂用于聚合反应时, 为什么要适量加大BPO 的量?为什么苯乙烯-马来酸酐共聚物产物中苯乙烯自聚副产物量较少?6. 苯乙烯-马来酸酐共聚物的聚合反应中, 反应温度过高将发生什么现象?实验三 α-苯乙胺的合成一、实验目的1. 学习Leuckart 反应合成外消旋体α-苯乙胺的原理和方法。

试验五从牛奶中分离奶油酪蛋白和乳糖

02 高速离心法
利用高速离心机将牛奶中的不同组分进行分离。此方法分离速度快，纯度较高，但对设备要求较高。
03
超滤法
04
利用超滤膜将牛奶中的不同组分进行过滤分离。此方法操作简便，纯度高，但对膜的选用和清洗要求较高。
比较结果
通过对比不同方法的分离效果，可以发现高速离心法和超滤法在纯度和效率方面表现较好，但设备和操作要求较高；传统沉淀法虽然纯度较低，但操作简单，适合实验室或小规模生产。
学习分离奶油、酪蛋白和乳糖的方法
01
02
03
分离奶油
将牛奶静置一段时间，奶油会浮到表面，可以将其撇出。也可以使用离心机分离。
分离酪蛋白
通过酸或碱调节牛奶的pH 值，使酪蛋白沉淀，然后将其与水分离。
分离乳糖
将牛奶蒸发浓缩后，加入乙醇或甲醇使乳糖结晶析出，然后过滤分离。
掌握分离过程的原理
05
结论与总结
总结试验过程和结果
试验过程
本试验采用离心分离法从牛奶中分离奶油酪蛋白和乳糖。首先，将牛奶加热至沸腾，然后冷却至室温，加入硫酸铵至饱和状态，形成奶油酪蛋白沉淀。接着，将混合物放入离心机中离心分离，收集上清液即为乳糖溶液。
VS
试验结果
成功分离出奶油酪蛋白和乳糖，分别得到乳糖溶液和奶油酪蛋白沉淀。分离效果良好，乳糖和奶油酪蛋白的纯度较高。
改进
在加热牛奶过程中，可以采取更为温和的方式，如使用水浴加热，以减少蛋白质变性。
建议
在后续试验中，可以尝试使用不同的离心转速和时间，以找到最佳的分离条件。此外，可以尝试使用不同的盐类替代硫酸铵，以获得更纯的奶油酪蛋白和乳糖。
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从牛奶中分离酪蛋白和乳糖

从牛奶中分离酪蛋白和乳糖一、引言牛奶中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/l。

酪蛋白在乳中是以酪蛋白酸钙-磷酸钙复合体胶粒存在，胶粒直径约为20～800纳米，平均为100纳米。

在酸或凝乳酶的作用下酪蛋白会沉淀，加工后可制得干酪或干酪素。

本实验利用加酸，当达到酪蛋白等电点PH=4.7时，酪蛋白沉淀。

脱脂乳中除去酪蛋白后剩下的液体为乳清，在乳清中含有乳白蛋白和乳球蛋白，还有溶解状态的乳糖，乳中糖类的99.8%以上是乳糖，可通过浓缩、结晶制取乳糖。

二、实验材料和试剂脱脂乳或脱脂奶粉。

醋酸-醋酸钠缓冲溶液（PH=4.7），95%乙醇，乙醚，碳酸钙粉末，苯肼试剂。

三、实验步骤1. 从牛奶中分离酪蛋白在烧杯中加入2g脱脂奶粉，再加入40ml40℃，PH=4.7的醋酸-醋酸钠缓冲溶液40ml，用PH精密试纸检验液体的PH值。

静置冷却至室温，倾去上层清液（留作分离乳糖用），剩下的悬浮液分别装入两支离心试管中，用转速为2000转/分离心分离3～5分钟，倾出上层清液，（合并于上一清液中），得酪蛋白粗品。

于离心管中加入5ml蒸馏水，用玻棒充分搅拌，洗涤除去其中的水溶性杂质（如乳清蛋白，乳糖以及残留的缓冲溶液），离心后弃去上层液，再用蒸馏水洗一次。

于试管中加入5ml95%乙醇，充分搅拌，离心后弃去乙醇溶液，用乙醇洗涤主要是除去磷脂类物质。

最后再用5ml乙醚以同样方法洗涤，以除去脂肪类物质。

将酪蛋白沉淀物凉干，称重、并计算得率。

2. 从牛奶中分离乳糖在除去酪蛋白的乳清中，加入1.5g CaCO3粉末，搅拌均匀后加热至沸。

加CaCO3的目的一方面是中和溶液的酸性，防止加热时乳糖水解，另方面又能使乳白蛋白沉淀。

过滤除去沉淀，在滤液中加入1～2粒沸石，加热浓缩至3～5ml，加入10ml 95%乙醇（注意离开火焰）和少量活性炭，搅拌均匀后在水浴上加热至沸腾，趁热过滤，滤液必须澄清。

加塞放置过夜，乳糖结晶析出，抽滤，用95%乙醇洗涤产品。

牛奶中酪蛋白和乳糖的分离和鉴定

牛奶中酪蛋白和乳糖的分离和鉴定学生：指导教师：[摘要]：通过调节牛奶的pH法分从牛奶中离出酪蛋白和乳糖,并对其进行鉴定[关键词]：牛奶；酪蛋白；乳糖；分离；鉴定牛奶是一种营养价值很高的食品，主要由水、脂肪、蛋白质、乳糖和盐组成。

酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质，含量约为2.6g／100mL，占牛奶中蛋白质总量的80％。

酪蛋白含有人体必需的8种氨基酸，极易消化吸收，是优质氨基酸供给源，成为婴幼儿及幼畜的主要蛋白源，牛奶中的糖主要是乳糖。

乳糖是一种二糖，它是唯一由哺乳动物合成的糖，它是在乳腺中被合成的。

乳糖是成长中的婴儿建立其发育中的脑干和神经组织所需的物质。

由于酪蛋白与乳糖在食品加工、医药等领域具有广泛的用途，所以对分离方法的研究具有重要的经济效益和社会效益。

1．原理部分牛奶中的蛋白质主要是酪蛋白，约占牛奶含量的34％，实际上，酪蛋白是含磷蛋白质的复杂混合物，在牛奶中以其钙盐形式存在，即酪蛋白钙。

利用蛋白质在等电点时溶解度较小的特性，把牛奶的PH值调到酪蛋白的等电点(PH=4.8)来沉淀分离酪蛋白：酪蛋白不溶于乙醇，所以可用乙醇将其中的脂肪洗涤除去。

乳糖也是不溶于乙醇的，所以当乙醇混入水溶液中时，乳糖会结晶出来，扶而达到分离的目的。

2.实验部分2.1实验试剂醋酸、无水乙醇、95％乙醇、乙醚、碳酸钙等均为分析纯；市售袋装纯牛奶。

2.2实验仪器烧杯(600ML)；温度计；420A酸度计；SHZ—D(HI)真空抽气泵；恒温水浴锅；白纱布；布氏漏斗；锥形瓶；表面皿。

2.3实验方法2.3.1酪蛋白的提取取 100mL新鲜纯牛奶于250mL烧杯中，恒温水浴加热至40℃后加入 10％醋酸溶液，调pH值至其等电点附近(PH=4.8)。

用纱布过滤，用少量水洗涤沉淀2—3次。

加人30mL95％的乙醇，搅拌后用布氏漏斗过滤，用乙醚和乙醇等体积混合液20mL洗涤沉淀2次，用 15mL乙醚分2次洗涤酪蛋白，用布氏漏斗过滤，把固体转移到表面皿上，放于恒温干燥箱中干燥 1d。

牛奶中酪蛋白和乳糖分离及检测方法

牛奶中酪蛋白和乳糖分离及检测方法
CONTENTS 目录
• 引言 • 酪蛋白和乳糖的特性 • 分离方法 • 检测方法 • 分离和检测技术的应用 • 结论
CHAPTER 01
引言
研究背景
牛奶作为人们日常生活中的重要饮品，其成分的分离和检测对于食品工业、乳制品生产和质量控制具有重要意义。
酪蛋白和乳糖是牛奶中的主要成分，对于它们的分离和检测方法的研究有助于提高乳制品的质量和安全性。
CHAPTER 06
结论
研究成果总结
成功分离了牛奶中的酪蛋白和乳糖，并确定了最佳分离条件。
研究表明，该方法具有较高的准确性和重复性，适用于实际生产中的质量控制。
开发了一种快速、准确的检测方法，可同时测定酪蛋白和乳糖的含量。
与传统方法相比，新方法具有更高的效率和实用性，可降低检测成本。
对未来研究的建议
结构
酪蛋白具有复杂的结构，包括球状和纤维状结构，能够形成胶束和凝胶。
功能性质
酪蛋白具有乳化、胶凝和增稠等特性，对牛奶的口感和质地有重要影响。
乳糖的特性
组成
乳糖是牛奶中的主要糖类，由葡萄糖和半乳糖通过β-1,4糖苷键连接而成。
结构
乳糖是一种双糖，具有半乳糖残基的α型和葡萄糖残基的β型。
功能性质
CHAPTER 05
分离和检测技术的应用
在食品工业中的应用
质量控制
食品安全检测
在食品工业中，牛奶是重要的原材料，分离和检测牛奶中的酪蛋白和乳糖有助于确保产品的质量和安全性。
分离和检测技术可用于检测牛奶中的有害物质和污染物，如抗生素、重金属和微生物等，确保食品安全。
食品研发
通过分离和检测技术，可以研究不同来源的酪蛋白和乳糖对食品口感、质地和稳定性的影响，从而优化食品配方和加工工艺。

化学专业试验

实验阴离子表面活性剂的合成及应用一实验目的1. 掌握十二烷基苯磺酸钠的合成原理和合成方法, 了解烷基芳基磺酸盐类阴离子表面活性剂的性质和用途；2. 了解洗洁精各组分的性质及配方原理，掌握洗洁精的配制方法。

二实验原理十二烷基苯磺酸钠(sodium dodecyl benzo sulfonate)又称石油磺酸钠，简称LAS、ABS-Na，是重要的阴离子表面活性剂。

本品为白色固体、易溶于水，在碱性、中性及弱酸性溶液中较稳定，在硬水中有良好的润湿、乳化、分散、泡沫和去污能力。

易生物降解，易吸水，遇浓酸分解，热稳定性较好。

本品主要用做液体和浆状洗涤剂，用于制洗衣粉，在纺织、印染行业用作脱脂剂、柔软剂、匀染剂等。

1．合成原理主要的磺化剂为浓硫酸、发烟硫酸和三氧化硫等。

以发烟硫酸做磺化剂，由烷基苯与磺化剂作用，然后用氢氧化钠中和制成，反应方程式为① C12H25-C6H6 + H2SO4(或SO3)→ C12H25-C6H6-SO3H + H2O② C12H25-C6H6-SO3H + NaOH → C12H25-C6H6-SO3Na + H2O2．洗洁精的配制洗洁精(cleaning mixture)又叫餐具洗涤剂或果蔬菜洗涤剂，是无色或淡黄色透明液体。

主要用于洗涤碗碟和水果蔬菜。

设计洗洁精的配方结构时，应根据洗涤方式、污垢特点、被洗物特点，以及其他功能要求，具体可归纳为以下几条：(1) 基本原则：①对人体安全无害；②能较好地洗净并除去动植物油垢，即使对粘附牢固的油垢也能迅速除去；③清洗剂和清洗方式不损伤餐具、灶具及其他器具；④用于洗涤蔬菜和水果时，应无残留物，也不影响其外观和原有风味；⑤手洗产品发泡性良好；⑥消毒洗涤剂应能有效地杀灭有害菌，而不危害人的安全；⑦产品长期贮存稳定性好，不发霉变质。

(2) 配方结构特点：①洗洁精应制成透明状液体，要设法调配成适当的浓度和粘度；②设计配方时，一定要充分考虑表面活性剂的配伍效应，以及各种助剂的协同作用。

牛奶中乳脂、酪蛋白和乳糖的鉴定和分离

牛奶中乳脂、酪蛋白和乳糖的鉴定和分离摘要牛奶是一种营养成分齐全、保健功能显著的食品，因此被称为“白色血液”。

牛奶是营养最完备的食品之一，这一点己为许多人认识并接受。

尤其是在婴儿及青少年时期，每天一定量的牛奶能促进身体健康成长。

牛奶的主要成分是脂肪、蛋白质、糖、水和矿物质，这些都是人体发育所必不可少的物质。

牛奶中含有一种称为酪蛋白的蛋白质，还含有糖类化合物乳糖，蛋白质化合物白蛋白和一些甘油脂。

本文介绍了从奶粉中分离酪蛋白和乳糖的一些简便方法，并讨论了有关因素的影响。

同时介绍了一种利用有机溶剂二氯甲烷萃取奶粉中乳脂的方法。

关键词：酪蛋白；乳糖；乳脂；等电点In the milk and cream lactose casein of separationAbstractMilk is a complete nutrition, health care function to significant food, so it is called "the white blood".Milk is one of the most complete nutrition food, this point has many people to understand and accept the. Especially in the infant and adolescent period,every day a certain amount of milk can promote healthy growth. The maincomp onents of milk fat, protein, sugar, is water and minerals, these are theessential substances of human development.Contains a protein called casein in milk, also contains carbohydrates lactose,protein albumin and triglyceride compound. This paper introduces some simple method for separation of casein and lactose in milk powder from, and discussed the influence of the relevant factors. At the same time, this paper introduces a method of organic solvent dichloromethane extraction of fat in milk powder. Keyword：Casein;Lactose；Butterfat；isoelectricpoint；Separation1引言牛奶是营养最为完备的食品之一，这一点已为许多人认识并接受。

实验报告从牛奶中分离酪蛋白

实验报告-从牛奶中分离酪蛋白实验报告-从牛奶中分离酪蛋白1.实验目的本实验的主要目的是通过酸沉淀法从牛奶中分离酪蛋白，理解酪蛋白的性质和用途。

通过实验，我们希望能够掌握以下内容：•牛奶的成分及其特性•酸沉淀法的基本原理和应用•酪蛋白的分离和纯化过程•实验参数对酪蛋白产率和质量的影响2.实验原理牛奶是一种复杂的液体，含有多种蛋白质，如血清蛋白、免疫球蛋白、乳球蛋白、乳蛋白等。

这些蛋白质的含量和性质受奶源、饲料、奶牛的健康状况等多种因素的影响。

其中，酪蛋白是牛奶中最主要的蛋白质，含量约为3.5-4.5%。

酸沉淀法是利用酸性条件下，牛奶中的蛋白质会逐渐沉淀，最终形成凝胶状物质的过程。

通过控制pH值，可以使得酪蛋白率先沉淀，从而达到与其他蛋白质分离的目的。

3.实验步骤（1）准备试剂和设备：本实验需要用到牛奶、浓盐酸、乙醇、去离子水、烧杯、磁力搅拌器、pH计等。

（2）将100ml牛奶加入烧杯中，用磁力搅拌器搅拌并维持温度在30℃。

（3）用pH计测定牛奶的初始pH值，并记录。

（4）向牛奶中缓慢加入一定量的浓盐酸，并不断搅拌，使得牛奶的pH值维持在3.5-4.5之间。

在此过程中，要避免盐酸加入过快导致局部pH值过低。

（5）维持此pH值并继续搅拌30分钟，使得酪蛋白充分沉淀。

（6）将上清液倒出，并加入95%乙醇，使得乙醇的体积分数为20%，继续搅拌10分钟。

（7）将沉淀物过滤，并用乙醇清洗。

将过滤后的沉淀物放入烘箱，在40℃下烘干。

（8）收集烘干后的酪蛋白，测定其质量并计算产率。

4.结果分析表1：实验参数记录表实验方法是有效的。

从表1可以看出，实验过程中各个参数的控制对实验结果有着重要影响。

例如，如果pH值过低或过高，都会导致产率和纯度的下降；酸加入量过多或过少也会影响酪蛋白的沉淀效果；沉淀时间和烘干时间的长短也会影响产率和纯度。

因此，在实验过程中，需要严格控制各项参数。

5. 结论总结通过本次实验，我们成功地使用酸沉淀法从牛奶中分离出了酪蛋白。

牛奶中酪蛋白和乳糖的分离与鉴定

牛奶中酪蛋白和乳糖的分离与鉴定前言牛奶是营养最完备的食品之一，这一点已为许多人认识并接受。

尤其是在婴儿及青少年时期，每天一定量的牛奶能促进身体健康成长。

牛奶的主要成分是水、蛋白质、脂肪、糖和矿物质，这些都是人体发育所必不可少的物质。

牛奶中的蛋白质主要是酪蛋白。

酪蛋白是含磷蛋白质的复杂混合物，在牛奶中以其钙盐形式存在，即酪蛋白钙。

利用蛋白质在等电点时溶解度最小的特性，把牛奶的ＰＨ值调到酪蛋白的等电点(pＨ=4. 8)来沉淀分离酪蛋白。

酷蛋白不溶于乙醇和乙醚，所以可用乙醇和乙醚将其中的脂肪洗涤除去。

牛奶中的糖主要是乳糖。

乳糖是一种二糖。

它是唯一由哺乳动物乳糖合成的糖，它是在乳腺中被合成的。

乳糖是成长中的婴儿建立其发育中的脑子和神经组织所需的物质。

乳糖也是不溶于乙醇的，所以，当乙醇混入水溶液中时,乳糖会结晶出来,从而达到分离的目的。

1材料与方法1.1材料（1）实验仪器恒温水浴锅、抽气抽滤瓶、布氏漏斗、蒸发皿、烧杯600ml、100ml各一个、表面皿、天平、玻璃棒。

（2）主要试剂10%醋酸溶液、95%乙醇、乙醚、奶粉、精密pH试纸（pH=3~5）、碳酸钙、滤纸、1%CuSO4溶液、10%NaOH溶液、茚三酮溶液、30% Acr单体贮液、浓缩胶缓冲贮液等。

1.2方法1.2.1酪蛋白的分离称取29g奶粉溶解于100ml温水中，取三份20ml牛奶于100ml烧杯中，在恒温水浴中加热至45℃，边搅拌边慢慢加入10%醋酸溶液，通过pH试纸测量至牛奶pH分别为4.8、4.6和3.8。

放置冷却、澄清后，抽滤。

注意先将上层清液滤出一部分，再将沉淀倾入漏斗中进行抽滤得沉淀（滤完后，收集滤液，并在滤液中加入少量粉状碳酸钙留作乳糖的分离）。

用蒸馏水洗沉淀2次，离心10min （3500r/min），弃去上清液，在沉淀中加入30ml乙醇。

搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。

再用乙醇-乙醚混合液（1:1）洗涤沉淀2次，最后用乙醚洗涤沉淀1次（用乙醚洗涤时，注意用玻璃棒捣碎成团的固体，并反复翻洗，保证脂肪被洗净），抽滤得沉淀。

从奶粉中分离酪蛋白、乳糖、乳脂的研究

从奶粉中分离酪蛋白、乳糖、乳脂的研究
主要步骤如下：
1. 分离酪蛋白：首先将奶粉溶解在适量的水中，然后进行过滤，将过滤得到的液体放入离心机中离心分离，离心后可以得到酪蛋白的沉淀。

接着将沉淀洗涤干净，进行干燥。

2. 分离乳糖：将过滤后的液体进行浓缩，浓缩至一定程度后，加入酸进行酸化反应。

反应后得到沉淀，通过过滤分离并洗涤干净，得到乳糖。

3. 分离乳脂：将奶粉溶解在低温下的乙醇中，乙醇可以将脂肪分离出来。

随后过滤分离，去除固体部分。

最后用水或其他清洁剂洗涤干净，得到乳脂。

这样就可以将奶粉中的酪蛋白、乳糖、乳脂分离出来，进一步用于不同的食品制造和医药应用领域。

牛奶中酪蛋白和乳糖的分离及纯度测定

第21卷　第3期大学化学2006年6月牛奶中酪蛋白和乳糖的分离及纯度测定周夏衍　夏春兰　楚延锋　付晓平　邓立志　周鑫玉(武汉大学化学与分子科学学院　武汉430072) 摘要　分离牛奶中的酪蛋白和乳糖,并对其纯度进行测定。

以此作为物理化学设计实验的部分内容。

“牛奶中酪蛋白和乳糖的分离及鉴定”作为物理化学的设计实验,其主要实验内容包括:①通过调节pH分离牛奶中酪蛋白和乳糖;②试验酪蛋白和乳糖的鉴定方法;③通过酪蛋白电泳实验分离不同形态的酪蛋白。

实验综合了分离技术、分光光度法、旋光度测定、电泳等内容。

“牛奶中酪蛋白和乳糖的分离及纯度测定”作为其中的一部分,具体内容如下。

1　牛奶中酪蛋白的分离牛奶是一种乳状液,主要由水、脂肪、蛋白质、乳糖和盐组成。

酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质,是含磷蛋白质的复杂混合物。

蛋白质是两性化合物,当调节牛奶的pH达到酪蛋白的等电点(pH=4.8)时,蛋白质所带正、负电荷相等,呈电中性,此时酪蛋白的溶解度最小,会从牛奶中沉淀出来,以此分离酪蛋白。

因酪蛋白不溶于乙醇和乙醚,可用此两种溶剂除去酪蛋白中的脂肪。

取50mL新鲜牛奶,在恒温水浴中加热至40℃,边搅拌边慢慢加入10%醋酸溶液,使牛奶pH=4.8,放置冷却、澄清后,用尼龙布过滤酪蛋白。

(在滤液中加入少量粉状碳酸钙,留作乳糖的分离。

)依次用乙醇、乙醇和乙醚的等体积混合液、乙醚洗涤酪蛋白,去除脂肪,待酪蛋白充分干燥后称量其重量,并计算牛奶中酪蛋白的含量。

2　牛奶中乳糖的分离上的醇羟基乳糖是一种二糖,它由D2半乳糖分子C′上的半缩醛羟基和D2葡萄糖分子C4脱水通过β21,4苷键连接而成。

乳糖是还原性糖,绝大部分以α2乳糖和β2乳糖两种同分异构体型态存在,α2乳糖的比旋光[α]20=+86°,β2乳糖的比旋光[α]20D=+35°,水溶液中两种乳D糖可互相转变,因此其水溶液有变旋光现象。

乳糖也不溶于乙醇,当乙醇混入乳糖水溶液中,乳糖会结晶出来,从而达到分离的目的。