第三章 生物化学检验常用技术
生物化学检验常用分析技术
待测管 2 待测管 1 标准管 试剂空白管
物质颜色和吸收光颜色的关系
物质颜色
黄绿 黄 橙 红
紫红 紫 蓝
绿蓝 蓝绿
吸
颜
色
紫 蓝 绿蓝 蓝绿 绿 黄绿 黄 绿 红
收 波
光 长(nm)
400 ~ 450 450 ~ 480 480 ~ 490 490 ~ 500 500 ~ 560 560 ~ 580 580 ~ 600 600 ~ 650 650 ~ 750
Lambert-Beer定律要求条件 • 1、入射光必须是单色光 • 2、被测样品必须是均匀介质 • 3、吸收过程中，吸收物质之间不发生相互作用
4、Lambert-Beer定律的偏离现象
• 1. 吸收定律本身的局限性 • L-B 定律是一个有限的定律，只有在稀溶液中才能成立。 • 2、仪器因素(非单色光的影响) • 3、化学因素 • 溶液中的溶质可因 c 的改变而有离解、缔合、配位以及与溶剂间的作用等原因而发
最大吸收波长
吸 光 度
波长范围
0.80
Ax 0.60
0.40
0.20
0.00
cx
0 1.0 2.0 3.0 4.0 c(mg/mL)
（二）原子吸收分光光度法 原子吸收分光光度法是基于元素所产生的原子蒸 气中待测元素的基态原子，对所发射的特征谱线的吸收作用进行定量分析的一种技术。 即在一定条件下，原子的吸光度同原子蒸气中待测元素基态原子的浓度成正比。 常用的定量方法有： 标准曲线法、标准加入法、内标法。
如果溶液浓度以质量体积比表示时，此常数称为比吸光系数（ ），它 表示当溶液浓度为1g/L、液层厚度为1cm时，在一定波长下测得的吸光度 值。摩尔吸光系数ε和比吸光系数 可相互换算。
《临床生物化学检验技术》第三章练习题及答案
《临床生物化学检验技术》第三章练习题及答案第三章临床生物化学检验项目临床应用性能评价A型题1.检验结果临床意义的判断依据不包括（）A.参考区间B.分界值签歌陈好微告娇C.医学决定水平D. 危急值E.分析准确性2.试验结果与患病情况之间的关系是（）A.真阳性(TP)B. 假阳性(FP)C.真阴性(TN)D.假阴性E. 以上都是3. 下列哪项不属于检验项目诊断性能评价的内容（）A.诊断敏感度B. 诊断特异度C.预测值C似然比E线性范围4. 确定参考区间的理想方法是（）A.正态分布法C.极差法D. ROC曲线E.引用文献5. 参考区间的理想范围是（）A.2.5%~97. 5%B.0.0%-95.0%C.5. 0%~ 100%D. 1. 0%~99.0%E. 1.25%~98.5%6.参考区间转移过程涉及的主要问题不包括（）A.检测系统的可比性B.测试对象人群的可比性C.样本类型的可比性D.操作程序的可比性E.检验项目的可比性7.分界值指（）A划分检验项目结果正常与异常，或阴性与阳性的界值B.提示需要制订进一步检查计划的阈值C.提示需要采取治疗措施的界值D.提示预后或需要紧急处理的界值E.生物参考区间上限8. 分界值确定的理想方法是（）A.正态分布法B.百分位法D. ROC曲线E.引用文献9. 检验项目常见的医学决定水平不包括（）A提示需要制定进步检查计划的调值B. 提示需要采取治疗措施的界值C. 提示需要紧急处理的界值D. 提示预后的界值E. 生物参考区间10. 危急值是指（）A.提示需要制定进步检查计划的阈值B. 提示需要采取治疗措施的界值C.提示预后或需要紧急处理的界值D.生物参考区间上限E.生物参考区间下限11. 反映检验项目的准确性评价指标，除外（）A.灵敏度B. 特异度C.诊断准确度D.正确指数E.变异系数12. 诊断敏感度指的是（）A.真阳性/(真阳性+假阳性)B. 真阳性/(真阴性+假阳性)C.真阳性/(真阳性+假阴性)E.假阳性/(真阴性+假阳性)13.诊断特异度指的是（）A. 真阳性/(真阳性+假阳性)B.真阳性/(真阴性+假阳性)C. 真阳性/(真阳性+假阴性)0. 真阳性/(真阳性+真阴性)E.真阴性/(真阴性+假阳性)14.鉴别诊断时宜选用下列哪种类型的试验（）A. 特异度高的试验B.特异度低的试验C.敏感度高的试验D.敏感度低的试验E.都可以15. 反映检验项目的诊断概率评价指标，除外（）A.验后概率B.预测值C.似然比D. 灵敏度E.患病率16. 阳性预测值指的是（）A. 真阳性(真阳性+假阳性)C. 真阳性/(真阳性+假阴性)B.真阳性/(真阴性+假阳性)E真明性/(真阴性+假阳性)17.阴性预测值指的是（）A真阳性/( 真阳性+假阳性)C.真阳性/(真阳性假阴性)B. 真阳性(真阴性+假阳性)E真阴性/(真阴性，假阴性)D.真阳性(真阳性+真阴性)18. 检验项目阳性时，患该病与不患该病的比值称为（）A诊断指数B.诊断效率C. 似然比D. 验后概率E诊断敏感度19. 反映检验项目的重复性评价指标不包括（）A.标准差B.变异系数C.总复合率D. Kappa 指数E.灵敏度20. 检验项目的诊断性能评价内容除外（）A真实性B.先进性C.可靠性D.实用性E线性A. 四格表盲法比较B. 标准诊断比较法C. 随机抽样法D. 临床病例比较法E.临床试验22. 检验项目的诊断性能评价方案设计要点不包括（）A.选择研究对象B.诊断标准确立C. 估算样本含量D.确定测量方法E.检验项目选择123. 检验项目的诊断性能评价方案设计要点不包括（）A.防止偏倚B.诊断标准确立C. 估算样本含量D.选定截断点E.检验项目选择24.选择研究对象时应注意的内容除外（）A.确定纳人和排除标准B.根据金标准将用于评价检验项目的受试对象分为病例组和对照组C. 检验项目评价属于内对照设置，在检验前不分组，整理资料时才按金标准分组D.确定抽样方法E. 测量方法25.可能影响病例组试验结果的生物因素不包括（）B.年龄C.疾病类型D.病情E测量程序26. 选择研究对象时，病例组疾病的类型不包括（）A.典型和不典型病例B. 早、中晚期病例C.轻、中、重病病例D,有、无并发症病例E.死亡病例27.下列不属于金标准的是（）A.诊断肿瘤的金标准一般是病理学检查B.诊断冠心病的金标准是CKMB活性检查C.诊断肾炎的金标准是肾活检D.诊断胆结石的金标准是手术所见E.诊断心肌病的金标准是心肌活检28. 关于样本含量估算，不正确的是（）A.检验项目需要有足够的样本含量B.病例组或对照组的样本含量可用公式计算法或查表法估计C可参照下列参数估算:显著性水平值α一般取0.05 、容许误差值W（或δ）一般在0.05~0.10之间、率的估计值p由灵敏度（病例组）和特异度（对照组）估计D.一般诊断性研究的样本量不小于100例.特殊情况情况下样本量不小于30例E.依据临床情况决定29. 不属于选择检验项目评价的测量指标和测量方法时的注意事项内容是（）B. 观察指标要客观特异，判断结果要标准明确、具体c.测量方法应标准化D.同步盲法测量E.金标准30.目前推荐的分界值选定方法是（）A.正态分布法B.百分位数法C.两组分布交叉法D.尤登指数计算法E.受试者工作曲线( ROC曲线)法31. 检验项目研究结果的常见内容不包括（）A. 确定分界值B.计算诊断准确性c. 比较不同检验项目诊断性能的差异D. 检验项目诊断性能分析结论E. ROC曲线的绘制方法32.与传统评价方法比较,不属于ROC曲线特点的是（）A.传统的检验项目评价方法普遍采用是点图和频数分布直方图的方法B:传统的检验项目评价方法共同的特点是必须将试验结果分为两类，再进行统计分析C.ROC曲线允许有中间状态，采用多个分界值把试验结果划分为多个有序分类再进行统计分析D. ROC曲线的有序分类包括正常、大致正常、可疑、大致异常和异常五个等级E.为单一的二分类33. ROC 曲线是根据一系列不同的二分类方式，以下列指标绘制的曲线（）B. 特异度为纵坐标，灵敏度为横坐标C.真阳性率为纵坐标，假阳性率为横坐标D. 假阳性率为纵坐标，真阳性率为横坐标E. 真阳性率为纵坐标，真阴性率为横坐标34.不属于最常见的ROC曲线的类型是（）A.最理想诊断价值的ROC曲线B.无诊断价值的ROC曲线C.低诊断价值的ROC曲线D.高诊断价值的ROC曲线E.反向诊断价值的ROC曲线35. ROC曲线的主要作用不属于（）A.查出任意界限值时对疾病的识别能力B. 选择最佳的诊断界限值C.两种或两种以上不同检验项目对疾病识别能力的比较D.单个检验项目对疾病识别能力的评估E.使用方便36.关于ROC曲线统计量，不正确的是（）A.ROC曲线下面积(AUC)统计学方法可用Wilcoxon非参数方法进行推算B. ROC曲线下的面积值在1.0和0.0之间C.在AUC>0.5的情况下,AUC越接近于1,说明诊断效果越好D.AUC=0.5时，说明诊断方法完全不起作用，无诊断价值E.AUC<0.5不符合真实情况，在实际中极少出现37.根据检验项目的ROC曲线，可以比较两种或两种以上不同检验项目对诊断同种疾病的可靠性,其直观的方法是（）B.统计量比较法C.四格表比较法D.临床病例比较法E.随机抽样法38.检验项目诊断性能系统评价的内容除外（）A.内在真实性B. 临床价值C.适用性D. 外在真实性E.测量准确性39. 临床问题分解的PICO格式内容不包括（）A.研究对象B.干预措施或暴露因素C.对照设计D.研究结果E.检测方法40.解释系统评价结果的内容不包括（）A.系统评价的论证强度B. 推广应用性C.干预措施对患者的利弊和费用D. 实用价值及其对今后研究的指导意义E.检测的准确性41.几种试验联合应用时,提高敏感度、降低特异度的方法是（）A.并联试验C. ROC曲线D.回收试验E.并联试验和串联试42.几种试验联合应用时，提高特异度、降低敏感度的方法是（）A.并联试验B.串联试验C. ROC曲线D. 回收试验E.并联试验和串联试验B型题(1-4题共用备选答案)A. 指经试验而被正确分类的患者的数目B指经试验而被错误分类的非患者的数目C指经试验而被正确分类的非患者的数目D指经试验而被错误分类的患者的数目E指经试验而被正确分类的总数目1.真阴性（）2.假阳性（）3.真阴性（）4. 假阴性（）(1-4题共用备选答案)A. 参考个体B.参考群体C.参考值D. 参考分布E. 参考区间5. 依据临床要求确定选择原则，以此选择检测参考值的个体（）6. 所有参考个体的总和，人数通过估算获得（）7.一定数量的某种特殊类型的参考个体而获得的值或测量结果（）8.所有参考样品组的各个参考值的集合即为参考范围（）9. 介于参考上限和参考下限之间的值，包括上限和下限（）(10~14题共用备选答案)A.分界值B.待诊值C.确诊值D. 危急值E.医学决定水平10. 划分检验项目结果正常与异常，或阴性与阳性的界值（）11.提示需要制定进步检查计划的阈值（）12. 提示需要采取治疗措施的界值（）13.提示预后或需要紧急处理的界值（）14临床按照不同病情给予不同处理的指标阈值（）(15~19题共用备选答案)A.灵敏度B.特异度C.诊断准确度D. 阳性预测值E.可靠性15 指在患病者中，应用某检验项目检查得到阳生结果的百分比（）16.指在非某病者中，应用该试验获得阴性结果的百分比（）17指在患病和非患病者中用检验项目能准确划分患者和非患病者的百分比（）18表示在检验项目结果为阳性的人数中，真正患病者所占的百分率（）19.指检验项目在完全相同的条件下进行重复试验得到相同结果的稳定程度（）(20~24共用备选答案)A. ROC曲线下面积( AUC) =0.3B. AUC=0.5C. AUC=0.7D.AUC=0.9E. AUC=1.020.诊断效果好（）21.诊断效果般（）22.诊断效果无（）23.诊断价值最佳（）24.不符合真实情况（）。
生物化学的实验技术有哪些
生物化学的实验技术有哪些生物化学是一门研究生物体化学组成和生命过程中化学变化的学科，实验技术在生物化学的研究中起着至关重要的作用。
以下为您介绍一些常见的生物化学实验技术。
一、分光光度法分光光度法是一种基于物质对光的吸收特性来定量分析物质浓度的方法。
在生物化学中，常用于测定蛋白质、核酸、酶等生物大分子的浓度。
例如，通过测量蛋白质在 280nm 处的吸光度，可以估算蛋白质的浓度。
分光光度法操作简便、快速，且灵敏度较高。
二、电泳技术电泳是指带电粒子在电场中向与其所带电荷相反的电极移动的现象。
在生物化学中，常用的电泳技术有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
琼脂糖凝胶电泳常用于分离和分析 DNA 片段，根据 DNA 片段的大小不同，在凝胶中移动的速度不同，从而实现分离。
聚丙烯酰胺凝胶电泳则常用于分离蛋白质，能够分辨分子量差异较小的蛋白质。
三、层析技术层析技术是利用混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，从而实现分离的方法。
常见的层析技术有凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。
凝胶过滤层析根据分子大小进行分离，大分子先流出，小分子后流出。
离子交换层析基于分子所带电荷的不同来分离物质。
亲和层析则利用生物分子之间的特异性亲和力进行分离，具有很高的选择性。
四、离心技术离心是利用离心机旋转产生的离心力，使不同密度、大小的颗粒分离的技术。
在生物化学实验中，常用于分离细胞器、细胞组分、蛋白质复合物等。
差速离心通过逐渐提高离心速度，分步沉淀不同大小的颗粒。
密度梯度离心则是在离心管中形成密度梯度，使不同密度的颗粒在相应的密度区带中沉降，从而实现分离。
五、PCR 技术（聚合酶链式反应）PCR 技术是一种用于扩增特定 DNA 片段的分子生物学技术。
通过高温变性、低温退火和适温延伸的循环过程，使 DNA 片段呈指数级扩增。
PCR 技术在基因诊断、基因克隆、基因突变检测等方面有着广泛的应用。
六、酶联免疫吸附测定（ELISA）ELISA 是一种利用抗原抗体特异性结合进行检测的技术。
常见的生物化学实验方法
常见的生物化学实验方法生物化学实验是研究生物分子结构、功能和相互作用的重要手段，广泛应用于生物医学研究、药物开发和环境保护等领域。
本文将介绍一些常见的生物化学实验方法。
一、色谱技术色谱技术是一种分离和分析物质的方法，根据分子的化学性质和大小差异，将混合物分离成各个组分。
常见的色谱技术包括气相色谱（GC）、液相色谱（LC）和薄层色谱（TLC）等。
在生物化学实验中，色谱技术常用于对生物样品中的分子进行纯化和分析。
例如，气相色谱可用于分析氨基酸和脂肪酸等小分子化合物，液相色谱则可以用于分离蛋白质、核酸和多糖等生物大分子。
二、电泳技术电泳技术是利用电场作用下物质的电荷和大小差异，将混合物分离成各个组分的方法。
常见的电泳技术包括聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）、聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和凝胶过滤电泳等。
在生物化学实验中，电泳技术常用于分离和检测蛋白质和核酸等生物大分子。
例如，聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于分离和测定蛋白质分子量，SDS-PAGE则可以用于检测蛋白质的纯度。
三、质谱技术质谱技术是利用质量分析仪器对物质的质量和结构进行分析的方法。
常见的质谱技术包括质谱仪、飞行时间质谱（TOF-MS）和液相色谱质谱联用（LC-MS）等。
在生物化学实验中，质谱技术常用于鉴定和定量生物分子。
例如，利用质谱仪可以对蛋白质进行鉴定，通过测定样品中蛋白质的质量和碎片离子的质量谱图，确定蛋白质的氨基酸序列。
四、核酸杂交技术核酸杂交技术是利用互补的DNA或RNA序列进行结合，从而检测目标序列的方法。
常见的核酸杂交技术包括Southern blot、Northernblot和in situ hybridization等。
在生物化学实验中，核酸杂交技术常用于检测和定量特定DNA或RNA序列的存在。
例如，Southern blot可用于检测DNA片段在基因组中的分布和拷贝数，Northern blot则可用于检测特定mRNA的表达水平。
生化检验专科第三章临床生物化学检验常用技术
吸收光谱分析技术：紫外、可见光分光光度法，原子吸收分光光
度法和红外光谱法
散射光谱分析技术：比浊法
5
一、吸收光谱分析法
吸收光谱：物质由基态跃迁至激发态时，对辐 射能选择性吸收而得到的原子或分子光谱。
由于分子吸收紫外-可见光区的电磁辐射， 分子中价电子（或外层电子）的能级跃迁
32
离子选择电极分析法（ion selective electrode，ISE） 是利用电极电位和离子活度的关系来测定被测离子 活度的一种电化学分析法。
33
1.离子选择电极（ISE）的基本结构 离子选择电极
电极腔体
内参比 电极
内参比 溶液
敏感膜
特点：仅对溶液中特定离子有选择性响应。 34
2. 电极电位 膜内外被测离子活度的不同而产生电位差。
（3）其它分析方法
包括差示法、多组份混合物分析和利用摩尔吸光系数分
析等方法。
20
二、发射光谱分析法
发射光谱：分子、原子或离子在辐射能作用下，由
基态或低能级态跃迁到激发态，当返回基态或低能级
态时，以辐射形式释放能量，产生的光谱为发射光谱。
包括：原子发射光谱、原子或分子荧光光谱、分子磷
光光谱等。
M * 发光释放能量 M h 发射光谱
7
（一）分光光度法的基本原理 利用物质对光的 吸收作用对物质进行定性或定量分析。
1. 吸光度与透光度
当光线通过溶液时，一部分光被散射；
一部份光被吸收；
另有一部分光透过溶液。
设入射光强度为I0，透射光强度为I，I和I0之比称为透光 度，表示透过光强度与入射光强度的比值即：
T = I/I0
常用生物化学检验技术_百替生物
第五章 常用生物化学检验技术临床生化检验常用的分析技术有光谱分析技术、电化学分析技术、电泳分析技术、层析和离心分析技术及自动化分析技术。
其中光谱分析技术是最基本和最常用的技术，它具有灵敏、准确、快速、简便、选择性好等特点而被广泛应用。
第一节 光谱分析技术光谱技术是根据物质吸收或发射辐射能而建立起来的一类分析方法，因不同分子的原子团和原子，其发射光谱和吸收光谱不同，而相同的物质在一定条件下，其发射光谱和吸收光谱的强度与该物质的含量成正比关系。
因此可对物质进行定性和定量分析，此类技术称为光谱技术。
是一种最常用的生化检验测定技术，它主要包括吸收光谱（可见紫外、红外原子吸收光谱法）、发射光谱（荧光法、火焰发射光谱法）和散射光谱（比浊法）。
光是一种高速传播的电磁辐射，具有波、粒二象性，光的波长（λ）的常用单位纳米（nm ），可见光波长400～760nm ，＜400nm 称为紫外光，＞760nm 称为红外光，波长愈短，能量愈大。
可见，紫外吸收光谱是由于多原子分子的价电子在电磁辐射的作用下，由基态跃迁到激发态，这种因物质分子对辐射的选择性吸收而得到的光谱称为吸收光谱。
处于高能态的分子（激发态分子）是不稳定的，当返回基态时，便发射出相应的光谱，称为发射光谱。
可见，紫外吸收光谱用于定量分析的依据是光的吸收定律，即Lambert-Beer 是律，它是吸收光谱法的基本定律。
一、分光光度法的基本原理（一）吸光度与透光度当光线通过均匀、透明的溶液时，一部分光被散射，一部分光被吸收，另一部分光透过溶液。
设入射光强度为Io ，透射光强度为It ，It 与Io 之比称为透光度（T ），即IoIt =T ）透光度（T 常用百分数表示（T%），也称为百分透光度。
透光度的负对数称为吸光度（A ），又称为消光度（E ），光密度（OD ），即It Io lg =IoIt lg －=T lg －=A 吸光度与透光度的换算：T lg －100lg =T1lg=T lg －=A 如透光度=10％时 A = lg100－lg10 = 2－1 = 1透光度=20％时A = lg100－lg20 = 2－1.3 = 0.7（二）Lambert-Beer 定律1. Lambert 定律 当一束强度为Io 的单色光透过某种吸光溶液后，由于溶液吸收了一部分光，则透过的光线为It 。
生物化学检验常用技术
生物化学检验常用技术生物化学检验是医学领域中非常重要的一个环节，它通过对人体体液、组织和细胞中的化学成分进行分析和测定，为疾病的诊断、治疗和预防提供重要的依据。
在生物化学检验中，有许多常用的技术，下面我们就来一一介绍。
一、光谱分析技术光谱分析技术是利用物质对不同波长的光的吸收、发射或散射特性来进行分析的方法。
其中，最常见的是分光光度法。
分光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法。
它通过测量物质在特定波长下的吸光度，来计算物质的浓度。
这种方法操作简单、快速、灵敏度较高，广泛应用于测定蛋白质、核酸、糖类、酶等生物大分子的含量。
另外，原子吸收光谱法也是光谱分析技术中的一种重要方法。
它主要用于测定金属元素的含量，在生物化学检验中常用于检测血液、尿液等样本中的微量元素，如铁、锌、铜等。
二、电化学分析技术电化学分析技术是基于物质在溶液中的电化学性质而建立的分析方法。
其中，电位分析法是一种常见的电化学分析技术。
电位分析法通过测量电极电位来确定溶液中物质的浓度。
例如，在pH 测定中，使用玻璃电极和参比电极组成电池，根据测量的电位值计算溶液的 pH 值。
此外，电导分析法通过测量溶液的电导来确定物质的含量。
这种方法常用于水质分析和电解质浓度的测定。
三、色谱分析技术色谱分析技术是一种分离和分析混合物中各组分的有效方法。
常见的色谱技术包括气相色谱法和液相色谱法。
气相色谱法适用于分析挥发性和热稳定性较好的化合物。
在生物化学检验中，可用于检测血液中的药物浓度、脂肪酸组成等。
液相色谱法则适用于分析热不稳定、不易挥发的大分子化合物，如蛋白质、核酸等。
高效液相色谱法（HPLC）具有分离效率高、灵敏度高、分析速度快等优点，广泛应用于生物化学检验中的药物分析、激素测定等领域。
四、免疫分析技术免疫分析技术是利用抗原与抗体的特异性结合反应来进行检测的方法。
常见的免疫分析技术包括酶联免疫吸附测定（ELISA）、放射免疫分析（RIA）和化学发光免疫分析（CLIA）等。
生化检验课后练习题人卫第四版
第一章绪论一、A型选择题1、生物化学检验技术是哪些学科相结合的边缘学科A.生物学B.免疫学C.物理学D.数学E.以上都是正确答案:E2、临床生物化学的研究内容不包括A.阐述疾病的生化基础B.阐述疾病发展过程中的生化变化C.结合临床病例的研究D.开发临床生化检验方法与技术E.疾病治疗方案的研究正确答案:E3、临床生物化学为下列的医疗方面提供信息和理论依据，不包括A.疾病诊断B.病情监测C.疗效评估D.预后判断E.细胞形态学观察正确答案:E第二章基本知识一、A型选择题1离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为A低速离心B平衡离心C高速离心D超速离心E等密度离心正确答案:C2标本条码下有10个阿拉伯数字，其中第4～5位表示A标本号B标本类型C组合号D月份E日期正确答案:C3按照BEER定律，浓度与吸光度之间的关系应是条通过原点的直线，但实测中往往发生偏离，其主要原因为A入色光不是严格的单色光B溶剂效应C溶剂或溶质不纯净D吸收增强效应E吸收减弱效应正确答案:A4.某实验显色后，在不同波长分别测定A值，请在下述结果中找出应选波长A 520nm0.12B 540nm0.14C 560nm0.22D 580nm0.15E 600nm0.11正确答案:C5.电解质火焰光度分析时用何种离子作内标液A钾B钠C氯D钙E锂正确答案:E6 采血后，放置一天再分离血清，不能用于A血清钾离子测定B血清钠离子测定C血清氯离子测定D血清钙离子测定正确答案:A二、Ｘ型选择题7影响血标本成份变化的因素有A生理B饮食C药物D溶血E储存正确答案:ABCDE三、名词解释四、问答题1所谓光谱分析？影响光谱分析的主要因素有哪些？2什么叫摩尔吸光系数检测法？第三章常用技术一、A型选择题1琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带，由正极向负极数起它们的顺序是A白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白B白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白C白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白Dα1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白E白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白正确答案:B2在区带电泳中，能产生电荷效应和分子筛效应的固体支持介质有A醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B纤维素、淀粉、琼脂糖C硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶E醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素正确答案:C3关于醋纤膜电泳的说法错误的是A对蛋白有吸附作用弱B几乎无拖尾现象C基本不与染料吸附D区带分辨率不如滤纸电泳E具有电渗作用弱正确答案:D4如果样品基体对测定单色光有干扰吸收，为抵消这一影响应采用A平行操作空白B样品空白C试剂空白D溶剂空白E不做处理正确答案:A5火焰发射光谱的产生是由于A物质分子内电子由基态跃迁到激发态B物质分子内电子由激发态回到基态C基态原子中电子由基态跃迁到激发态D原子中电子由激发态回到基态E原子中电子由较高激发态回到较低激发态正确答案:D6.等电聚焦电泳特别适合分离A分子量不同的物质B扩散能力不同的物质C分子量相同而等电点不同的物质D吸附力不同的物质E吸附力相同的物质正确答案:C7 Southern印迹法中，使凝胶上的单链DNA片段原位地被吸印到硝酸纤维素薄膜上主要靠A扩散作用B电泳作用C滤纸的毛细管吸液作用D压力作用E渗透作用正确答案:C8.互补的两条DNA单链结合成DNA双链称为A变性B退火C复性D聚合作用E杂交正确答案:Cmber-Beer定律只适用于A单色光,非均匀,散射,低浓度溶液B白光,均匀,非散射,低浓度溶液C单色光,均匀,非散射,低浓度溶液D单色光,均匀,非散射,高浓度溶液E白光,均匀,非散射,高浓度溶液正确答案:C10原子吸收法分析法选择性好是因为A原子化效率高B光源发出的特征辐射只能被特定的基态原子所吸收C检测器灵敏度高D原子蒸气中基态原子数不受温度影响E 光源的能量高正确答案:B11.紫外可见吸收光谱的产生是由于A物质分子内电子由基态跃迁到激发态B物质分子内电子由激发态回到基态C基态原子中电子由基态跃迁到激发态D原子中电子由激发态回到基态E原子本身产生的辐射正确答案:A12.缓冲液pH值改变对电泳的影响主要表现为A偏离等电点越远，蛋白质带电越多，电泳速度越快B pH值改变蛋白质的等电点C pH值改变使支持物两端电压改变D缓冲液pH值的改变可使所有蛋白质的电泳速度加快E pH值改变使电泳速度减慢正确答案:A13.DNA双链变为互补的两条DNA单链等过程称为A变性B退火C连接作用D聚合作用E杂交正确答案:A14.可见分广光度计中的光源是A 低压汞灯B 氙灯C 氦灯D 钨丝灯E 氢灯正确答案:D15从结构上看能教好的避免交叉污染的自动生化分析仪是A流动式B分立式C离心式D单通道式E多通道式正确答案:B16原子吸收分广光度计其空心阴极灯作用是A 提供辐射能量B 提供共振线C 提供入射光D 提供原子化待测物质的能量E 以上都不是正确答案:B17关于浊度法正确的叙述是A 散射光强度与颗粒浓度成指数关系B 散射光强度与入射光波长成反比C 在一定范围内与质点半径呈正相关D 有颜色的悬浮液入射光选择其互补光E 红色光散射强度比紫色光大正确答案:C18按照BEER定律，浓度与吸光度之间的关系应是条通过原点的直线，但实测中往往发生偏离，其主要原因为A 入色光不是严格的单色光B 溶剂效应C 溶剂或溶质不纯净D 吸收增强效应E 吸收减弱效应正确答案:A二、Ｘ型选择题三、名词解释四、问答题第四章自动生化分析技术一、A型选择题1 早期的自动生化分析仪是：A 分立式自动生化分析仪B 离心式自动生化分析仪C 干化学式自动生化分析仪D 袋式自动生化分析仪E 连续流动式自动生化分析仪正确答案:E2 干化学自动生化分析仪的光学系统是：A 分光光度计B 反射光分析仪C 比色计D 浊度计E 原子吸收光谱仪正确答案:B3 下列哪项不属于NCCLS所规定的纯水等级标准的特性指标：A 微生物含量B 电阻率C 钙离子D PH值E 硅正确答案:C4 有关比浊测定法的描述哪项是错误的：A 比浊法不是比色分析B 比浊法分为化学比浊法和免疫比浊法C 免疫比浊法分为透射比浊法和散射比浊法D 分立式自动生化分析仪不能做散射比浊分析E 干片式生化分析仪不能做比浊分析正确答案:D5 具有空气分段系统的自动生化分析仪是：A 连续流动式自动生化分析仪B 离心式自动生化分析仪C 干化学式自动生化分析仪D 分立式自动生化分析仪E 袋式自动生化分析仪正确答案:A6 连续流动式自动生化分析仪去蛋白是利用：A 加热器B 去蛋白剂C 气泡D 透析器E 吸附剂正确答案:D7 自动生化分析仪常用的信号检测器是：A 硒光电池B 矩阵硅二级管C 光电管D 蓄电池E 固体闪烁计数仪正确答案:B8 自动化分析仪中采用同步分析原理的是：A 分立式自动生化分析仪B 干化学式自动生化分析仪C 离心式自动生化分析仪D 连续流动式自动生化分析仪E 高效液相层析仪正确答案:C9 为消除内源性干扰自动生化分析仪利用下列哪种方法：A 采用双试剂B 采用单试剂C 采用双波长D 采用单波长E 采用多通道正确答案:A10 临床生化实验室用水一般采用：A 一级水B 二级水C 三级水D 次级水E 自来水正确答案:B11 连续监测法测定ALT活性浓度，标本量10ul，试剂量350ul，比色杯光径1cm(NADHз＝6220)，经计算K值为：A 6508B 5788C 4920D 4127E 3915正确答案:B12 二级标准品主要用于：A 标准决定性方法B 为一级标准品定值C 校准实验室常规方法（终用户常规方法）D 校准参考方法E 校准常规标准方法（厂家选定方法）正确答案:E13 临床上所指的封闭式全自动生化分析仪主要是:A 质控物封闭B 试剂封闭C 环境封闭D 仪器封闭E 技术人员封闭正确答案:B14 全自动生化分析仪可分为小型、中型、大型，其依据是A 单通道和多通道数量B 仪器可测定项目多少C 测定程序可否改变D 仪器的复杂程序、功能和单位时间测试数量E 是否可同步分析正确答案:D15 自动生化分析仪比色分析常用的检测器是A 固体闪烁计数仪B 硒电池C 镍氢电池D 二极管E 光电倍增管正确答案:D16 可消除检测体系或样本浑浊的方法是A 单试剂B 单波长C 双波长D 双试剂E 单波长单试剂正确答案:C17 全自动与半自动生化分析仪共同之处为：A 取样B 加试剂混合C 检测波长D 孵育反应E 清洗系统正确答案:C18 自动生化分析仪自动清洗加样针主要为了：A 提高分析精密度B 提高分析准确度C 防止交叉污染D 提高反应速度E 提高分析的灵敏度正确答案:C19 临床生化实验室一般采用NCCLS所规定的二级纯水，其微生物菌落(CFU/ml)应低于：A 1B 10C 100D 1000E 10000正确答案:D20 干化学式自动生化分析仪所用的光学系统为：A 分光光度计B 原子吸光仪C 反射比色计D 固定闪烁计数器E 免疫比浊计正确答案:C21 大多数全自动生化分析仪比色杯的光径是：A 0.5-0.7B 0.8-1.0C 1.1-1.9D 2.0-3.9E ≧4正确答案:A22 如果L代表光源，M代表分光器，C代表比色杯，D代表检测器，在后分光光电比色过程中各反应元件的排列顺序为：A LCMDB LDCMC DLCMD LMDCE MLDC正确答案:A23 全自动生化分析仪抗交叉污染的措施不包括：A 自动清洗加样针和试剂针B 自动扫描比色杯剔除不合格者C 比色杯自动冲洗功能D 用酸、碱清洗液清洗E 将自动加完的标本移出正确答案:E24 全自动生化分析仪比色杯的材料常用：A 光学玻璃或一般塑料B 普通玻璃或硬质塑料C 隔热玻璃或普通塑料D 石英玻璃或优质塑料E 优质塑料或普通玻璃正确答案:D25 目前全自动生化分析仪最常用的光栅分光方式为：A 前分光B 中分光C 后分光D 前中后分光E 前后分光正确答案:C26 使用全自动生化分析仪前，操作者设置参数不包括：A 设置某个测试项目的名称B 设置样品量、试剂量C 机械操作D 设置反应时间E 设置测定波长正确答案:C27 全自动生化分析仪的试剂与样品的混合装置类型为：A 搅拌棒B 加温C 机械震荡D 加样针E 加混合液正确答案:A28 某实验室全自动生化分析仪近两天发现部分结果明显不稳定，仪器自检正常，测定过程没有错误的报警，如果是交叉污染因素，则首先应考虑：A 清洗试剂的类型是否正确B 冲洗用水是否符合要求C 管路冲洗是否彻底D 反应杯是否需要更新E 用校准品对仪器进行重新校正正确答案:C29 临床生化实验室用水一般采用：A 一级水B 二级水C 三级水D 次级水E 自来水正确答案:B30 全自动生化分析仪安装使用培训中可不包括：A 基本原理B 操作技能C 日常维护保养D 仪器维修E 常见问题及解决正确答案:D31 340nm波长属于：A 可见光B 紫外光C 红外光D 近红外光E 远红外光正确答案:B32 分光光度法中常用”A”表示：A 透光率B 散射光强度C 吸光度D 物质的浓度E 透光度正确答案:C33 自动生化分析仪中连续监测法读数方式为：A 在一定的时间范围内连续读各吸光度值B 反应尚未开始和反应终点时各读吸光度值C 终点附近读两个监测点取均值D 在终点附近读取两点，计算两点吸光度值的差值E 每经过比色窗口即读取一个吸光度值正确答案:A34 很多分析仪器采用双波长或多波长的光路技术，是为了减少：A 试剂的干扰B 样本中黄疸、溶血、脂血的干扰C 仪器光源的波动E 批内差异正确答案:B35 关于项目校准的叙述错误的是：A 校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂等造成的系统误差B 仪器维修后，要进行校准C 各仪器厂家均有自己的测量体系，校准品一般可以通用D 校准工作不是仅进行一次就可以，而必须定期进行校准E 改变试剂的种类，或者批号更换后必须进行校准正确答案:C36 世界上第一台自动生化分析仪产于A20世纪40年代B20世纪50年代C20世纪60年代D20世纪70年代E20世纪80年代正确答案:B37 流动式自动生化分析仪采用气泡来防止管道中的A样品干扰B试剂干扰C交叉污染D基底干扰E光源干扰正确答案:C38 干化学式自动生化分析仪所用的光学系统为A分光光度计B原子吸光仪C反射比色计D固定闪烁计数器E比浊计正确答案:C39 最早的自动生化分析仪是A分立式自动生化分析仪B离心式自动生化分析仪C干化学式自动生化分析仪D袋式自动生化分析仪E连续流动式自动生化分析仪正确答案:E40 以NAD+还原成NADH反应为基础的生化分析,采用的波长及吸光度变化为A 340nm,从小到大B405nm,从小到大C340nm,从大到小D405nm,从大到小E405nm到340nm41 具有空气分段系统的自动生化分析仪是A连续流动式自动生化分析仪B离心式自动生化分析仪c干化学式自动生化分析仪D分立式自动生化分析仪E薄片分析自动生化分析仪正确答案:E42 自动分析仪中采用同步分析原理的是A分立式自动生化分析仪B干化学式自动生化分析仪C离心式自动生化分析仪D连续流动式自动生化分析仪E高效液相层析仪正确答案:C43 自动生化分析仪自动清洗样品探针是为了A提高分析精度B防止试剂干扰C防止交叉污染D提高反应速度E提高加样速度正确答案:C44 自动生化分析仪的光源能量降低对单色光影响最大的波长是A 340nmB 405nmC 450nmD 500nmE 300nm正确答案:A45 离心式自动分析仪的待测样品在离心力作用下,在各自反应槽内与试剂混合并完成化学反应,这种测定模式称为A 离心分析B 同步分析c 顺序分析D 流动分析E 连续分析正确答案:B46 个别项目出现系统误差首先应考虑的因素为A 更改分析参数B 校准品是否变质C 比色灯是否需更换D 电源是否稳定E 试剂冷藏温度是否偏高正确答案:B47 下列哪项不属于NCCLS所规定的纯水等级标准的特性指标：A 微生物含量B 电阻率C 钙离子D PH值E 硅正确答案:C48 生化质控目的是A 使随机误差逐渐缩小B 消灭随机误差C 使随机误差得到监测和及时发现D 发现系统误差E 对系统误差及时校正、随机误差限制在允许范围正确答案:E49 系统误差的特点不存在的是:A 一系列结果与靶值间存在同一倾向的偏离B有明显的规律性C没有随机性D服从正态分布E可以预防正确答案:D50 目前应用最多的自动生化分析仪是：A 流动式B分立式C离心式D单通道式E 多通道式正确答案:B51.早期的自动生化分析仪是A分立式自动生化分析仪B离心式自动生化分析仪C干化学式自动生化分析仪D袋式自动生化分析仪E连续流动式自动生化分析仪正确答案:E52.干化学自动生化分析仪的光学系统是A.分光光度计B.反射光分析仪C.比色计D.浊度计E.原子吸收光谱仪正确答案:B53.下列哪项不属于NCCLS所规定的纯水等级标准的特性指标A.微生物含量B.电阻率C.钙离子D.PH值E.硅54.有关比浊测定法的描述哪项是错误的A.比浊法不是比色分析B.比浊法分为化学比浊法和免疫比浊法C.免疫比浊法分为透射比浊法和散射比浊法D.分立式自动生化分析仪不能做散射比浊分析Ｅ.干片式生化分析仪不能做比浊分析正确答案:D55.具有空气分段系统的自动生化分析仪是A.连续流动式自动生化分析仪B.离心式自动生化分析仪C.干化学式自动生化分析仪D.分立式自动生化分析仪E.袋式自动生化分析仪正确答案:A56.连续流动式自动生化分析仪去蛋白是利用A.加热器B.去蛋白剂C.气泡D.透析器E.吸附剂正确答案:D57.自动生化分析仪常用的信号检测器是A.硒光电池B.矩阵硅二级管C.光电管D.蓄电池E.固体闪烁计数仪正确答案:D58.自动化分析仪中采用同步分析原理的是A.分立式自动生化分析仪B.干化学式自动生化分析仪C.离心式自动生化分析仪D.连续流动式自动生化分析仪E.高效液相层析仪正确答案:C59.为消除内源性干扰自动生化分析仪利用下列哪种方法A采用双试剂B采用单试剂C.采用双波长D.采用单波长E.采用多通道正确答案:AC60.临床生化实验室用水一般采用B.二级水C.三级水D.次级水E.自来水正确答案:B61.流动式生化分析仪又可分为A空气分段系统和非分段系统B流动注入系统和间歇系统C空气分段系统和流动注入系统D非分段系统和间歇系统E分段系统和间歇系统正确答案:A62从结构上看能较好的避免交叉污染的自动生化分析仪是A流动式B分立式C离心式D单通道式E多通道式正确答案:B63.全自动生化分析仪比色杯常用的材料为A光学玻璃B隔热玻璃C不吸收紫外光的优质塑料D防爆玻璃E普通试管正确答案:A二、X型选择题64.自动生化分析的技术指标评价包括A.精密度B.互染率C.波长校正D.相关性正确答案:ABCD65.下面属于终点法的有A.双波长法B.比浊法C.回归法D.多点deta法正确答案:AB66.酶活性浓度测定时控制干扰因素最主要的方法是A.作试验空白B.采用单试剂C.调节仪器参数D.单试剂改为双试剂正确答案:ACD67.连续监测法中常见的干扰因素有B.底物不稳定C.沉淀形成D.分析容器污染正确答案:ABCD68.克服某些试剂不稳定引起的误差可以采用A.双波长法B.单试剂法C.双试剂单波长一点法D.双试剂两点法正确答案:CD69.生化自动分析中获得单色光的方式有Ａ.使用干涉滤光片Ｂ.采用单色光光源Ｃ.使用全息反射式光栅Ｄ.使用蚀刻式凹面光栅正确答案:ACD70.自动生化分析仪的精密度测试包括A.准确度B.批内重复性C.批间精密度Ｄ.总精密度正确答案:BC71.自动生化分析仪常用的分析方法主要有Ａ.终点分析法Ｂ.连续监测法Ｃ.比浊测定法Ｄ.反射光度法正确答案:ABC72.自动生化分析仪中光学系统产生的光信号Ａ.可直接检测并计算结果Ｂ.需转变成电信号加以传送Ｃ.可由光导纤维传送Ｄ.接受器多为硒光电池正确答案:BC三、名词解释１.自动生化分析仪２.连续监测法３.终点法４.两点校正法５.干化学式分析仪四、问答题1.简述自动生化分析仪的分类原则和特点。
常用生物化学检验技术
常用生物化学检验技术
目 录
• 生物化学检验技术概述 • 常用生物化学检验技术 • 生物化学检验技术的应用领域 • 生物化学检验技术的挑战与解决方案 • 生物化学检验技术的前景展望
01 生物化学检验技术概述
定义与特点
定义
生物化学检验技术是通过生物学 、化学等手段，对生物体或生物 样品进行检测和分析的技术。
详细描述
为了确保检测结果的准确性和可靠性，必须建立完善的标准化体系和质量控制体系。这包括制定统一 的检测标准和方法、建立完善的质控流程和质控标准、加强实验室管理等措施。同时，还需要加强国 际合作和交流，推动生物化学检验技术的标准化和质量控制。
05 生物化学检验技术的前景 展望
高通量自动化检测技术
签提供数据支持。
食品添加剂检测
02
通过检测食品中的添加剂种类和浓度，确保食品添加剂使用符
合国家规定。
食品中有害物质检测
03
利用生物化学检验技术检测食品中的有害物质，如农药残留、
重金属等，保障食品安全。
环境监测
水质检测
利用生物化学检验技术检 测水体中的有害物质，如 重金属、有机污染物等， 评估水质状况。
利用物质在紫外可见光激发下产生的 荧光特性，通过测量荧光信号，用于 检测物质的存在和含量。
气相色谱法
利用不同物质在色谱柱上的吸附或溶 解性能不同，通过测量各组分的保留 时间和峰高或峰面积，用于检测混合 物中各组分的存在和含量。
微生物学检验技术
01
02
03
细菌培养与鉴定
通过培养、分离、鉴定微 生物，用于检测感染性疾 病的病原体。
大气污染监测
通过检测大气中的有害气 体和颗粒物，了解大气污 染状况，为环境治理提供 依据。
生物化学资料
护士报告，并要求接、打电话双方都要有通话记录，通话记录最少包括危急值的项目、危
急值和接电话人姓名等内容。
2 简述生化检验的工作流程。
答：检验前阶段、检验中阶段、检验后阶段。
3 简述血液标本的采集方法及注意事项。
答：方法：毛细血管采血法、静脉采血法和动脉采血法。
注意事项：采血时必须严格注意消毒、无菌操作，确定采血部位......
8 枸橼酸钠的抗凝原理是（D）
A.阻止凝血酶的形成
B.阻止血小板聚集
C.除去球蛋白
D.与血液中的钙离子形成螯合物 E.除去纤维蛋白原
9 正常情况下，浆膜腔内有（B）
A.少量液体起保护作用
B.少量液体起润滑作用
C.没有液体
D. 大量液体起保护作用
E.大量液体起润滑作用
10 标本条码下有 10 个阿拉伯数字，其中第 4~5 位表示（C）.
A.电泳法 B.层析法 C.沉淀法 D.热失活分析法 E.蛋白酶水解法
10.患者，男，72 岁，进行性排尿困难 2 年。直肠指诊触及前列腺侧叶增大，中间沟左侧叶
有 2cm 大小硬结，怀疑为前列腺癌。临床常用来诊断前列腺疾病的酶学指标是（）
A.ALT
B.ACP
C.ALP
D.AST
E.AMY
二、问答题
1.酶学测定标本的采集、处理与储存的注意事项有哪些？
A.β-γ桥
B.M 蛋白带
C.Alb 区带颜色变深
D.Alb 区带缺失
E.γ-球蛋白区带颜色变浅
11.第一个被认定为急性时相反应蛋白的是（C）
A.α1-AT
B.α1-AG
C.CRP
D.CER
E.Fib
二、问答题
1.何为急性时相反应蛋白？急性时相反应蛋白有哪些？
常用生物化学检验技术
I0
It
用数学式表示为：
It 透光度T＝ I0
透光度随溶液厚度增加而减少，其关系 是透光度的负对数（－lgT，吸光度A）与溶 液厚度成正比，即
It I0 A lgT lg lg K L I0 It
2. Beer定律
当一束强度为Io的单色
光透过某种吸光溶液后，若液层厚度不变，
（二）标准曲线法
配制一系列浓度不同的标准液，按一 定操作方法显色后，用选定的波长分别测 定它们的吸光度，然后以吸光度为纵坐标， 标准液浓度为横坐标，在坐标纸上标出各 坐标点，通过连接各点，使其成一直线， 即A-C曲线。
A
0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1
·
·
· · ·
2 4 6 8 10 12
常用生物化学检 验技术
第一节 光谱分析技术 第二节 电化学分析
第三节 电泳技术
第四节 层析技术
第五节 自动生化分析
技术
光谱分析技术是根据物质吸收或发 射辐射能而建立起来的一类分析方法， 因不同分子的原子和原子团，其发射光 谱和吸收光谱不同，而相同的物质在一 定条件下，其发射光谱和吸收光谱的强 度与该物质的含量成正比关系。因此可 对物质进行定性和定量分析，此类技术 称为光谱分析技术。
C
注意事项
1. 测定条件发生变化时（如更换标准品 和试剂等），应重新绘制。 2. 标准品应有高的纯度，标准液的配制 应准确。
3. 当待测液吸光度超过线性范围时，应 将标本稀释后再测定。 4. 标本测定的条件应和标准曲线制作时 的条件完全一致。
五、紫外分光光度法
用波长 200 ～ 400nm 的紫外光谱测定无 色物质的方法称为紫外分光光度法。芳香族 类及含有共轭双键的烯烃、炔烃等不饱和烃 类，在200～400nm波长范围具备光吸收特性， 故不需经显色反应就能直接利用紫外分光光 度法测定，其选择性和灵敏度均高于比色分 析法。
第三章 生物化学检验常用技术
第二节 电化学分析技术
电极分析法的影响因素：
离子选择性电极对任何标本的测量，都可能存在离子强度、 络合本溶液中加入与待测离子无干扰的浓度 较大的电解质溶液，作为总离子强度调节缓冲液（total ionic strength adjustment buffer，TISAB）
TISAB可保持较大且相对稳定的离子强度，使活度系数恒定； 维持溶液在适宜的pH范围内，满足离子电极的要求；还能掩 蔽干扰离子
第二节 电化学分析技术
电极分析法在临床检验中的应用—电解质分析仪
第二节 电化学分析技术
二、电导分析法
电导分析法
将被分析溶液放在固定面积、固定距离的两个电极所构 成的电导池中，通过测定电导池中电解质溶液的电导值 来确定物质的含量
荧光的发射光谱
荧光光谱临床应用：大量具有生物意义的物质，都可采用荧 光分光光度法进行分析测定，如氨基酸、蛋白质、核酸、酶 和辅酶、嘌呤、嘧啶、卟啉、维生素等
第一节 光谱分析技术
三、散射光谱分析法
散射光谱分析法
利用悬浮颗粒混浊液的散射光强度或对入射光减弱的原 理进行定量分析的方法
（一）散射比浊法
（二）透射比浊法
8
第一节 光谱分析技术
溶剂空白 当显色剂及其它试剂均无 色，被测试样中又无其他 有色粒子时，选用空白溶 剂参比
样品空白 当样品基体溶液有颜色， 而显色剂无颜色且显色剂 也不与样品基体显色时， 选用样品空白 试剂空白 当显色剂或其它试剂有颜 色，而被测试样中又无其 他有色粒子时，选用试剂 空白参比
空白溶液 的选择
10
第一节 光谱分析技术
（1）标准曲线法
根据Lambert-Beer定律，液体的浓度在一定范围内与吸 光度成正比关系
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第三节 干化学分析技术
一、干化学分析技术的基本原理
• 干化学技术普遍采用多层膜固相试剂技术，即干式化学的 多层膜试剂载体，它集中现代化学、光学、酶工程学、化 学计量学和计算机技术于一体，已使其作为定量方法
基于反射光度法的多层膜
干式化学的多层膜试剂 载体
基于差示电位法的离子选择 电极的多层膜 基于荧光技术和竞争免疫技 术的荧光反射光度法多层膜
第一节 光谱分析技术
一、吸收光谱分析法 （一）分光光度法的基本原理 根据Lambert-Beer定律，当一束平行单色光通 过均匀的非散射样品时，吸光度与溶液层厚度和溶 液浓度成正比
入射光 I0 透射光 I
I0 I 1 A = -lgT = -lg = lg = lg = KLC I0 I T
第一节 光谱分析技术
检测红细胞压积 红细胞由于其具有脂质 双分子层的膜结构而被 认为是电的绝缘体
应用
血细胞计数 其原理基于血细胞的电 导率低于作为悬浮介质 的盐溶液的电导率 （“库尔特原理”）
第二节 电化学分析技术
三、电容量分析法
电容量分析法
根据滴定过程中电极电位的变化来确定滴定终点的分 析方法。滴定过程中，随着滴定剂的加入，发生化学 反应，待测离子或与之有关的离子活度（浓度）发生 变化，指示电极的电极电位（或电池电动势）也随着 发生变化，在化学计量点附近，电位（或电动势）发 生突跃，由此确定滴定的终点
• 式中A为吸光度；K为比例常数，称为吸光系数；L 为溶液层厚度，称为光径；C为溶液浓度 • 根据Lambert－Beer定律，当溶液层厚度单位为 1cm，浓度单位为1mol/L时，吸光系数K称为摩尔 吸光系数（ε ） • ε 是物质的特征性常数。在固定条件（入射光波 长、温度等）下，特定物质的ε 不变，这是分光 光度法对物质进行定性的基础
第一节 光谱分析技术
应用Lambert－Beer定律时必须符合3个条件：
一是入射光必须为单色光 二是被测样品必须是均匀介质
应用Lambert－Beer定律时必须符合3个条件： 三是在吸收过程中，吸收物质之间不能发生相互作用
第一节 光谱分析技术
Lambert－Beer定律的偏离现象：
溶液不是稀溶液时会引起偏离 非单色入射光会引起偏离 光的散射、折射引起的偏离 溶液本身发生化学变化引起的偏离 仪器因素引起的偏离
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第二节 电化学分析技术
常用的离子选择性电极（ISE）
玻璃膜电极 敏感膜由玻璃材料制成， 最常见为pH玻璃电极 气敏电极 气敏电极是基于界面化学 反应对气体敏感而设计的一类敏化电 极。如氨气敏电极 酶电极 酶电极是另一种敏化电极， 其原理是将含酶的凝胶涂布于离子选 择性电极的敏感膜上组成酶电极
第二节 电化学分析技术
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第二节 电化学分析技术
第二节 电化学分析技术
电化学分析技术 利用物质的电化学性质，测定化学电池的电流、电位、 电导、电量等物理量的变化，从而测定物质组成及含 量的分析方法
灵敏、准确 快速、简便 仪器简单 价格低廉
它是电化学和分析化 学学科的重要组成部 分
第二节 电化学分析技术
电位分析法 测定原电池电动势以求 物质含量的分析方法
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第一节 光谱分析技术
溶剂空白 当显色剂及其它试剂均无 色，被测试样中又无其他 有色粒子时，选用空白溶 剂参比
样品空白 当样品基体溶液有颜色， 而显色剂无颜色且显色剂 也不与样品基体显色时， 选用样品空白 试剂空白 当显色剂或其它试剂有颜 色，而被测试样中又无其 他有色粒子时，选用试剂 空白参比
空白溶液 的选择
TISAB可保持较大且相对稳定的离子强度，使活度系数恒定； 维持溶液在适宜的pH范围内，满足离子电极的要求；还能掩 蔽干扰离子
第二节 电化学分析技术
电极分析法在临床检验中的应用—电解质分析仪
第二节 电化学分析技术
二、电导分析法
电导分析法
将被分析溶液放在固定面积、固定距离的两个电极所构 成的电导池中，通过测定电导池中电解质溶液的电导值 来确定物质的含量
基于反射光度法的多层膜干片结构 示意图
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第三节 干化学分析技术
（二） 差示电位法 基于传统湿化学分析的离子选择电极原理，用于 测定无机离子
多层膜结构 （1）离子选择性敏感膜 （2）参比层 （3）氯化银层 （4）银层 （5）支持层
பைடு நூலகம்
第三节 干化学分析技术
二、干化学分析技术在临床检验中的应用 • 干化学自动分析仪已广泛应用于检验医学的各个 方面，检测的项目已多达70余项，包括常规生化、 内分泌激素、毒素、药物浓度分析以及特种蛋白 等免疫学检验
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第一节 光谱分析技术
（1）标准曲线法
根据Lambert-Beer定律，液体的浓度在一定范围内与吸 光度成正比关系
待测溶液测定吸光度后，从标准曲线上可查出其相应的 浓度
第一节 光谱分析技术
• 制作和应用标准曲线时应注意下面几点：
①当测定条件发生变化时（如更换标准品、更换光电池或光
源以及试剂批号不同时），标准曲线应重新绘制 ②标准品应有高的纯度，标准液的配制必须准确
Cx=(Ax×Cs)/As
其中Cx和Ax为标本管浓度和吸光度，Cs和As分别为标准 管浓度和吸光度。用标准品法定量时，标准品的浓度应尽量 和标本管浓度相近
（三）其它分析方法
包括差示法、多组分混合物分析和利用摩尔吸光系数分析 等方法
第一节 光谱分析技术
二、发射光谱分析法
发射光谱
分子、原子或离子在辐射能的作用下，由基态或低能态 跃迁到激发态，当它们返回基态或低能态时，以辐射的 形式释放出能量，由此而产生的光谱
第三章 生物化学检验常用技术
学习目标：
掌握分光光度技术、离子选择性电极分析技术、干 化学分析技术、电泳分析技术的基本原理
熟悉生化常规检验仪器的使用方法，及其影响因素 和有关注意事项
了解各种生化常用技术的临床应用，关注生物化学 检验常用技术的发展趋势
第一节 光谱分析技术
光谱分析技术 利用物质具有吸收、发射或散射光谱谱系的特点，对 物质进行定性或定量的分析技术
（一）火焰光度法
（二）荧光分光光度法
第一节 光谱分析技术
• 火焰光度法基本原理：指在一定条件下，以火焰 作为激发源提供热能，使样品中待测元素原子化， 由于原子能级的变化，产生特征的发射谱线
热能（火焰） 基态元素M E 特征辐射 激发态M*
• 火焰光度法临床应用：主要用于血清及尿液样品 中钠、钾的测定
平行操作空白 与样品分析完全相同的操 作步骤，用不含待测元素 的样品溶液进行平行操作
不显色空白 当显色剂和被测试样均有 颜色时，选用不显色空白
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第一节 光谱分析技术
一、吸收光谱分析法
（二）分光光度法在生化检验中的应用
1.对未知化合物进行定性分析 2.对待测物质进行定量测定 （1）标准曲线法 （2）比较法 （3）其它分析方法
电化学分析法
电导法 通过测定电阻以求物质含量 的分析法
电容量分析法 借助某些物理量的突 变作为滴定分析终点的指示
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第二节 电化学分析技术
一、电位分析法
电位分析法基本原理：利用电极电位和浓度之间的关系来确 定物质含量的分析方法，表示电极电位的基本公式是Nernst 方程式
E电池
2.303RT K lg i nF
离子选择性电极的分析方法：
标准曲线法
• 配置一系列 浓度的标准 溶液，对测 得的系列电 动势(E)值与 浓度对数 (lgC)作图， 得E－lgC标 准曲线
标准比较法
• 在相同条件下 测定标准溶液 和待测溶液的 Es和Ex值，由 于标准溶液浓 度Cs是已知的， 根据比较法即 可测出待测物 质浓度Cx
标准加入法
第三节 干化学分析技术
第三节 干化学分析技术
干化学分析
指将液态样品如血浆、血清、尿液等置于含有试剂的固 相载体上发生反应，依照反应结果定量测定样品中特定 成分的浓度或活度的一项技术 干化学分析仪 是一种专门使用固相载体试剂进行临床化学检验的分析 仪，它通过反射光度法、差示电位法等方法定量测出样 品中特定成分的浓度或活度
第二节 电化学分析技术
电极分析法的影响因素：
离子选择性电极对任何标本的测量，都可能存在离子强度、 络合剂及干扰物质的影响，不同的分析方法其影响的大小不 同
通常在标准溶液及标本溶液中加入与待测离子无干扰的浓度 较大的电解质溶液，作为总离子强度调节缓冲液（total ionic strength adjustment buffer，TISAB）
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第一节 光谱分析技术
三、散射光谱分析法
散射比浊法基本原理：一定 波长的光沿水平轴照射，通 过溶液时，遇到抗原抗体复 合物粒子，光线被粒子颗粒 折射，发生偏转，光线偏转 的角度与发射光的波长和抗 原抗体复合物颗粒大小和多 少密切相关，光强度与复合 物的含量成正比
透射比浊法基本原理：当光线 通过一定体积的溶液时，由于 溶液中存在颗粒（抗原－抗体 复合物）对光线的反射和吸收， 引起透射光的减少，透射光的 透光率和粒子的量成反比。通 过测定透射光的透光率来反映 粒子的量的方法即透射比浊法
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第三节 干化学分析技术
（一） 反射光度法 理论基础：遵从Kubelka-Munk理论 光反射率与固相层的厚度、单位厚度的光吸收系 数以及固相反应层的散射系数有关系，当固相层 厚度和固相反应层的散射系数固定时，光吸收系 数同待测物的浓度成正比
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第三节 干化学分析技术
多层膜干片结构 （1）样本扩散层 （2）反射层 （3）辅助试剂层 （4）试剂层 （5）透明支持层
灵敏、准确 快速、简便 选择性强 应用范围广
生物化学检验中最基本 和最常用的分析技术
第一节 光谱分析技术