原始记录 026 粪大肠菌群检验原始记录表
总大肠菌群原始记录表
总大肠菌群检验数据原始记录
委托书编号:委托单位:
检测项目:总大肠菌群检测依据:GB/T 5750.12-2006 2.1多管发酵法
样品名称:样品数量:
样品编号:样品状态:
收样日期:检测日期:
环境温度:环境湿度:
操作方法:
一、乳糖发酵实验
1、取10ml水样接种到10ml二倍乳糖蛋白胨培养液中,取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中,另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中,混匀后吸取1ml (即0.1ml水样)注入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中,每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水,需经常检验或每天检验一次的,可直接种5份10ml水样双料培养基,每份接种10ml水样。
培养温度
培养时间
二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液
36±1°C
24h±2h
乳糖蛋白胨培养液
36±1°C
24h±2h
EMB
36±1°C
24h±2h
观察结果
序号
样品编号
乳糖发酵
复发酵
结果报告(MPN/100mL)
10ml
1ml
0.1ml
10ml
1ml
0.1ml
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
操作人:复核人:二、分来自培养:经培养24h后,将产酸产气的发酵管,分别接种于伊红美蓝平板上,36±1°C恒温培养8h-24h,观察形态,挑取数个可疑菌落进行涂片、革兰氏染色、镜检。
大肠菌群检测原始记录(平板法)
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
煌绿乳糖胆盐肉汤、
大肠菌落数CFU/ml(g)
检测人:
检验日期: 年 月 日
验讫日期: 年 月 日
微生物检验原始记录
检测项目: □大肠菌群
样品名称
样品编号
样品状态和特性
生产单位
使用仪器设备及实验环境
生化培养箱、压力蒸汽灭菌器
依据
GB4789.3
检测项目
培养基
100
10-1
10-2
10-3
10-4
空白
平板计数
结晶紫中性红胆盐琼脂
证实试验
选择的平板可疑菌落数
稀释倍数
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
煌绿乳糖胆盐肉汤、
大肠菌群计数平板法检验原始记录
样品名称
样品编号
检验项目
大肠菌群平板计数法
检验日期
检验地点
□BSL-2实验室
□洁实验净室
检验依据
判定依据
检验仪器
□生化培养箱□均质器□菌落计数仪
□生物安全柜□超净台□电子天平
□恒温振荡器□冰 箱□冰 箱
检验试剂
VRBA琼脂、BGLB肉汤、磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水等。
h
稀释度
空白
2
25g(mL)样品+225mL稀释液均质(或原液直接检验);
平板A1
平板A2
3
10倍系列稀释;
结果
平板B1
4
选2-3个适宜稀释度样品匀液;每梯度接种VRBA平板2个;
平板B2
结果
5
36±1℃,18-24h培养,计数典型和可疑菌落;
平板C1
平板C2
6
挑10个可疑菌落接种于BGLB肉汤管36±1℃,24-48h;
结果
平板D1
7
若BGLB肉汤管产气则阳性;
平板D2
结果
8
按比例记录结果,报告。
平板E1
平板E2
温度(℃)
相对湿度(%RH)
结果
证实实验比例
结果
报告
检验员: 审Βιβλιοθήκη 员:样品制备□固体和半固体样品:无菌称取25g,置于盛有225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌灭菌袋内,进行均质处理。
□液体样品:吸取25mL于样品于225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水中,混匀。
检验程序
大肠菌群计数[ CFU/g (mL ) ]
1
实验采集抽样方案来自GB4789.1;
总大肠菌群原始记录表
3、将接种管置36±l°C培养箱内,培养24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸,则可报告为总大肠菌群阴性,如有产酸产气者,则按下列步骤进行。
二、分离培养:
经培养24h后,将产酸产气的发酵管,分别接种于伊红美蓝平板上,36±1°C恒温培养8h-24h,观察形态,挑取数个可疑菌落进行涂片、革兰氏染色、镜检。
三、证实试验:
挑取可疑管接种乳糖蛋白胨培养液中,置于36±1°C愠温箱中培养24h ±2h,有产酸产气者,即证实有总大肠菌群存在。
培养基
19
20
操作人:复核人:
培养温度
培养时间
二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液
36±1°C
24h±2h
乳糖蛋白胨培养液
36±1°C
24h±2h
EMB
36±1°C
24h±2h
观察结果
序号
样品编号
乳糖发酵
复发酵
结果报告(MPN/100mL)
10ml
1ml
0.1ml
10ml
1ml
0.1ml
1
2
3
4
5
6
7
8
9பைடு நூலகம்
10
11
12
13
14
15
16
17
18
总大肠菌群检验数据原始记录
委托书编号:委托单位:
检测项目:总大肠菌群检测依据:GB/T 5750.12-2006 2.1多管发酵法
大肠菌群检测原始记录
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
审核:
年月
日
编号: 样品名称:
检验依据:GB/T4789.3-2016 培养开始时间: 年 月 培养结束时间: 年 月
稀பைடு நூலகம்度
1
稀释度
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
2
稀释度
3
稀释度
4
稀释度
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1 2 3 1 2 3 1 2 3
项目 管号
1
2
3
5
1
2
3
1
2
3
检验员:
大肠菌群检测原始记录
批次:
日时
日时
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
恒温时间: h 恒温温度:36℃±1℃
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
发酵试验
阳性管数
报出值 MPN/ml
LST肉汤管初 BGLG肉汤管复
发酵试验
水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定原始记录
年 月 日颁布
- -J177 水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定原始记录 第 页共 页
项目编号
温度(℃)
湿度(%RH)
分析方法 水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定 纸片快速法 HJ 755-2015[检出限:20MPN/L]
仪器名称
检测仪器
恒温培养箱 恒温培养箱
压力蒸汽灭菌器
仪器型号
仪器编号
备注
葡萄球菌,粪大肠菌群阳性对照为大肠埃希氏菌,阴性对照为产气肠杆菌。
[+阳性 -阴性]
检测:
复核:
日期:
年月日
测定样品信息[样品种类:废水 地表水 其他
]
样品编号 样品接种量 Q
ห้องสมุดไป่ตู้样品
样品包装 密封良好 其他
总大肠菌群 阳性对照 阴性对照
粪大肠菌群 样品 阳性对照 阴性对照
空白 对照
mL×5
mL×5
mL×5
MPN 值 M -
(MPN/100mL)
报告值 C -
(MPN/L)
空白对照为纯水,总大肠菌群阳性对照为大肠埃希氏菌,阴性对照为金黄色
公式:
式中:
C 100 M Q
C:水样总大肠菌群或粪大肠菌群
浓度(MPN/L);
M:查 MPN 表得到的 MPN 值
(MPN/100mL);
Q:实际水样最大接种量(mL);
100:为 10×10mL,其中,10 将 MPN 值
的单位 MPN/100mL 转换为 MPN/L,
10mL 为 MPN 最大接种量。
大肠菌群检验原始记录
初发酵(月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤,)支)
产气管数(支)
复发酵(煌绿乳糖胆盐
肉汤,
37℃,,48h)
产气管数(支)
10-1
10-2
10-3
检验结果
(MPN/100g)
检验人:复核人:
大肠菌群检验检验原始记录
样品名称
明胶
样品编号
样品状态
生产日期
检验依据
GB4789.3-2010
检验日期
大肠菌群检验过程:
1、称取样品25g样品放入盛有225ml灭菌的生理盐水中,制成1:10的样品匀液,用1ml无菌吸管吸取1:10的样品匀液1ml,沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中,制成1:100的样品均液,用1ml无菌吸管吸取1:100的样品匀液1ml,沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中,制成1:1000的样品均液。
2、初发酵试验:大肠菌群每个样品,选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液,每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤(大肠菌群测定:如果超过1ml,则用双料LST肉汤),36℃±1℃培养24h±2h,观察倒管内产气情况。如未产气,培养至48h±2h,如产气着进行复发酵试验。
三、复发酵试验:(大肠菌群的测定)用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环,移种于煌绿糖胆盐肉汤(BGLB)管中,36℃±1℃培养48h±2h,,观察产气情况。
大肠菌群检验原始记录-MPN法
检验单位
xxxx公司 检验室
检验员
张xx
检验日期
2022-xx-xx至2022-xx-xx
环境条件
温度xx℃,相对湿度(RH)xx%
检验依据
GB4789.2-2016 《食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数》第一法
检验编号
20220606xxx
样品名称
xxxx
样品批次
2022xxxx
仪器设备及耗材:
天平:(xxxx)洁净工作台: (xxxx)培养箱:ຫໍສະໝຸດ (xxxx)培养基及试剂:
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST):xxxx配制日期2022/xx/xx
煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB):xxxx配制日期2022/xx/xx
磷酸盐缓冲液:xxxx配制日期2022/xx/xx
-
阴性
报告人
报告日期
复核人
复核日期
将以上 LST置于 36.0 ±1℃,培养24h±2h(2022/xx/xxxx时~2022/xx/xxxx时),观察导气管内是否有气泡产生。如产气,进行证实实验,如未产气继续培养至48h±2h(2022/xx/xxxx时~2022/xx/xxxx时),产气,进行复发酵实验,不产气报告结果为阴性。
4.证实试验(接种BGLB)
实验过程:
1.样品处理和稀释:
1.1如需要,使用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸将样品调整pH在6.5~7.5之间。
1.2 制备样品稀释液
无菌操作,称取/吸取 25g(mL)样品,加入到 225mL 无菌磷酸盐缓冲液中均质(混匀),制成 1:10 样品匀液。吸取1:10样品匀液1mL,沿试管壁注入盛有9mL无菌磷酸盐缓冲液的试管中, 涡旋混匀,制成1:100的样品匀液。根据对样品污染情况的估计,按上述操作将样品稀释至所需浓度。
大肠菌群-原始记录
检测项目:菌落总数大肠菌群
样品名称
样品编号
样品状态和特性
生产单位
型号规格
使用仪器设备及试验环境
生化培养箱;压力蒸汽消毒锅
菌落总数
GB4789.2-2010
操作过程:
培养基
100
10—1
10—2
10—3
10—4
空白
cfu/ml(g)
平板计数琼脂培养基
注解:为进行此项目测试;+:阳性—:阴性(不产气)
微生物检验原始记录
检测项目:菌落总数大肠菌群
样品名称样品编号样品状态和来自性生产单位型号规格
使用仪器设备及试验环境
生化培养箱;压力蒸汽消毒锅
菌落总数
GB4789.2-2010
操作过程:
1、配制200mL平板计数琼脂培养基于250mL三角烧瓶中,配制0.85%的生理盐水300mL,分别吸取9mL生理盐水置于2个试管中,将三角瓶、试管加塞棉塞,用报纸包好。
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
MPN/ml(g)
注解:为进行此项目测试;+:阳性—:阴性(不产气)
主检:检验日期:年月日验讫日期:年月日
6、选择样品匀液10-1、10-2、10-3,分别吸取1ml加入无菌平皿内,分别吸取1mL稀释液(无菌生理盐水)加入平皿内做空白。
7、将15-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养就倾注平板内,并转动平皿,使其混合均匀,待琼脂凝固后将平皿翻转。
8、将平皿于36±1℃的生化培养箱内培养48h±2h,计数。
培养基
100
10—1
大肠菌群检验原始记录表
从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落,分别移种于BGLB肉汤管内,36℃±1℃培养24-48h,观察产气情况
。凡是BGLB肉汤管产气,即可报告为大肠菌群阳性。
操作依据
GB4789.3-2010
稀释倍数
a-10倍
b-100倍
c灭菌生理盐水对照
/6.1
VRBA平板
操作依据 GB4789.3-2010
检验日期:
2016 年 月 日
采样依据 GB4789.12010/4.1、 4.2.1二级 采样方案 (n、c、m值 5、0、0)
10的均匀稀释液,编号a 灭菌生理盐水,编号c做
、b2、c1。向上述5个平 ,依次置于36℃±1℃培
养24-48h,观察产气情况
操作依据 B4789.3-2010
/6.1 操作依据 B4789.3-2010
/8.2 操作依据 B4789.3-2010
/8.3
实试验及观察结果 依据
B4789.3-2010 /8.4
肠菌群数的计算 据GB4789.3-2010
/8.5 数据修约依据 789.来自-2010/7.2报告依据 B4789.3-2010
/8.5
培养基)
年月日
。用灭菌吸管取1mla,加入9ml灭菌生理盐水中,混合均匀做成1:100的均匀稀释液,编号b。取1ml灭菌生理盐水,编号c做
为空白对照。
从a、b、c液中,分别前后2次,各吸取1ml移液到2个灭菌平皿中,平皿编号分别为a1、a2、b1、b2、c1。向上述5个平
皿中分别注入凉至46℃的VRBA15ml,混匀待VRBA凝固后,再加3mlVRBA覆盖平板表层,翻转平板后,依次置于36℃±1℃培 养箱中,培养20h。
食品大肠菌群检验原始记录表
食品大肠菌群检验原始记录样品编号:检验开始时间:年月日样品名称:检验完成时间:年月日检测项目:大肠菌群检测依据:GB4789.3-2016(第二法)平板计数法,按菌落总数测定方法制备l00、10-1、10-2、10-3、10-4……稀释液。
选择2-3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种2个无菌平板,每皿1ml,同时取1ml生理盐水加入两个无菌平皿内作空白对照,及时将15-20ml冷至46℃的VRBA倾注平皿,小心旋转平皿混合均匀,待琼脂凝固再加3-4mlVRBA覆盖,36±1℃培养18-24h,观察,可疑菌落分别移种BGLB肉汤管中,进行证实实验,36±1℃培养24-48h,观察,产气者记为大肠菌群阳性。
注:○+产气;+有可疑菌落;-不产气或无可疑菌落;电子天平编号:使用状况试验前:试验后:培养箱编号:使用状况试验前:试验后:检测人:校核人:审核人:食品菌落总数检验原始记录样品编号:检验开始时间:年月日样品名称:检验完成时间:年月日检测项目:菌落总数检测依据:GB4789.2-2016无菌操作称(量)取样品25g或ml加入225ml的无菌生理盐水中,均质2分钟,做成1℃10样品液。
取1℃10稀释液1ml加入到9ml生理盐水中,混匀,做成1℃100样品均液。
以上法制备10倍系列稀释样品均液。
选择2-3个适宜稀释度的样品均液,吸取1ml样品均液于无菌平皿内,每个稀释度做2个平皿。
同时,分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照,及时将15-20ml冷至46℃的平板计数培养基倾注平皿,转动平皿使其混合均计算及结果:菌落总数(CFU/g,ml):电子天平编号:使用状况试验前:试验后:培养箱编号:使用状况试验前:试验后:检测人:校核人:审核人:。
大肠菌群计数原始记录
检测起止日期
检 测 依 据 □GB 4789.3-2010 第一法
□GB 4789.3-2010 第二法 □GB14934-94 次/秒 时间□1min□2min□3min mL □BGLB mL □VRBA □生化培养箱 36±1℃
检 测 仪 器 □电子天平 □拍击式无菌均质器 培 养 基
□LST(双料) mL □LST(单料)
大肠菌群计数原始记录
样 品 名 称 样 品 状 态 检 测 环 境 检 测 地 点
□常温 □冷藏 □ 第1页
样 品 编 号 样 品 数 量 接 样 日 期
月 250g 年 日~ 月 月 日 日
温度(T) : □净化室 1
℃ ;相对湿度(RH) :
□净化室 2 □BSL-2
检验 结果
样品中大肠菌群计数结果为:
纸片颜色及结果 均匀紫色 未检出 黄色背景上红点或红晕 检出
。
餐 饮 具
检测者: 日 期:
可以结果确证(发酵法) 异常颜色反应 需确证 未检出 检 出
复核者: 日 期:
审核者: 日 期:
mL □测试纸片
固体和半固体样品:无菌称取 25g,放入盛有 225ml□生理盐水/□磷酸盐缓冲液的无菌均质袋内,进 行均质处理。 液体样品:吸取 25ml 样品置盛有 225ml□生理盐水/□磷酸盐缓冲液的无菌丝口试剂瓶(含适量无菌 玻璃珠)中,混匀。 样 品 制 备 液体样品:直接吸混匀后的原液检验。 冷冻样品:45℃, min 解冻。 调节 pH。 餐饮具 检样量
10
1
0.1
0.01
0.001
0.0001
第 一 法
初发酵
阳性管数目 (24h) 阳性管数目 (48h) 阳性管数目
40粪大肠菌群分析原始记录
培养温度(℃)
温度(℃)
湿度(%)
检出限
培养结束时间
月日时分
样品编号
稀释倍数
接种体积(ml)
初发酵产酸产气管数
有典型菌落平板数
复发酵阳性管数
MPN值()
备注
粪大肠菌群分析原始记录(续表)
项目编号:第 页 共 页
样品编号
稀释倍数
接种体积(ml)
初发酵产酸产气管数
有典型菌落肠菌群分析原始记录
项目编号:第 页 共 页
来(采)样日期
年月日
检测日期
年月日
分析方法
仪器型号、名称及编号
仪器溯源方式
检定 □校准
仪器有效期
年月日
检定 □校准
年月日
检定 □校准
年月日
初发酵培养时间
月日时分——月日时分
培养温度(℃)
分离培养时间
月日时分——月日时分
培养温度(℃)
复发酵培养时间
月日时分——月日时分
347.2粪大肠菌群数分析原始记录
粪大肠菌落分析原始记录(续表)
样品编号
稀释
倍数
D
初发酵阳性管数
复发酵阳性管数
MPN/100mL
空白测定MPN/L
报告值
(MPN/L)
平均值
(MPN/L)
水样接种量(mL)/接种管数
Hale Waihona Puke mL× 5管mL× 5管mL× 5管
mL×5管
mL×5管
mL×5管
(4)备注:方法检出限为:20 MPN/L,当检测结果低于方法检出限时,用“ND”表示 。
样品编号
稀释倍数D
初发酵阳性管数
复发酵阳性管数
MPN/100ml
空白测定
(MPN/L)
报告值
(MPN/L)
平均值
(MPN/L)
水样接种量(mL)/接种管数
mL× 5管
mL× 5管
mL× 5管
mL×5管
mL× 5管
mL× 5管
(1)备注:方法检出限为:20 MPN/L,当检测结果低于方法检出限时,用“ND”表示 。
报告编号
粪大肠菌群数分析原始记录
检测项目
粪大肠菌群
检测依据
水质粪大肠菌群的测定多管发酵法HJ 347.2-2018
环境条件
温度:℃;相对湿度:%
检测起止时间
初发酵:年月日时到日时温度℃
复发酵:年月日时到日时温度℃
试剂和培养基及生产批号
仪器设备
样品预处理
样品充分混匀后,选取3个适宜的稀释度,按无菌操作要求加入相应的样品量。
(2)接种15份样品时,查HJ347.2-2018附录A中表A.2得到MPN值,再按公式(1)换算样品中粪大肠菌群数(MPN/L):
粪大肠菌群检验记录
粪大肠菌群检验记录粪大肠菌群检查实验记录品名批号物料编码规格来源取样日期代表量检验日期报告日期检验编号检验依据1、粪大肠菌群检验记录仪器设备名称:电热恒温培养箱仪器设备型号:DHP-500生理盐水的配制:8.5g氯化钠加1000ml蒸馏水溶解待用(121℃灭菌30min)。
(1)恒温培养箱:36℃±1℃。
(2)冰箱:2℃~5℃。
(3)恒温水浴箱:46℃±1℃。
(4)天平:感量0.1g。
(5)无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。
(6)无菌锥形瓶:容量500mL。
(7)无菌培养皿:直径90mm。
(8)pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
1、操作步骤(1)初发酵选择适宜的三个连续稀释度的样品匀液。
每个稀释度接种三管月桂基磺酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管接种1mL(如接种量需要超过1mL,则用双料LST肉汤)。
36℃±1℃培养24h±2h,检查倒管内是否有气泡产生或轻摇试管时是否有密集连续的细小气泡从管底逸出,如未产气则继续培养至48h±2h。
记录在24h和48h内产气的LST肉汤管数。
未产气者为粪大肠菌群阴性;对产气者,则进行复发酵试验。
(2)复发酵用接种环从所有48h±2h内发酵产气的LST肉汤管中分别取培养物1环,移种于已提前预温至45℃的EC肉汤管中。
将所有接种的EC 肉汤管放入于带盖的44.5℃±0.2℃恒温水浴箱内,水浴的水面应高于肉汤培养基液面,培养24h±2h,记录EC肉汤管的产气情况。
产气管为粪大肠菌群阳性,不产气为粪大肠菌群阴性。
(1)取225ml生理盐水于标签为1:10的300ml锥形瓶中,取9ml生理盐水于标签为1:100的50ml锥形瓶中。
(2)LST溶液的配制:取LST7.1g加水100ml(双料),溶解至透明,倒入10ml于3只标有1g的并放有聚气管的试管中; 剩余溶液加一倍水配成单料倒入标有0.01g,0.001ml的6只试管中,每只10ml,并放有聚气管(试管要求180×18mm)。