ADF,NDF测定方法

饲料中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）的测定

A)原理:

采用范氏（V an Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）。植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。中性洗涤纤维经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。

B)所需试剂及仪器：

十二烷基硫酸钠、乙二胺四乙酸二钠（EDTA，化学纯）、四硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）、无水磷酸氢二钠、乙二醇乙醚、十六烷基三甲基溴化铵、硫酸、丙酮，无水亚硫酸钠，十氢化萘所需仪器：直筒烧杯、电炉、抽滤装置、玻璃坩埚、烘箱

C)试剂的配制：

1. 30g/L十二烷基硫酸钠（中性洗涤剂）溶液。称取18.61g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，化学纯）和6.81g四硼酸钠（Na2B4O7.10H2O）放入1000mL烧杯中，加入少量水加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠和10mL乙二醇乙醚。称取4.65g无水磷酸氢二钠，置于另一烧杯中，加入少量水，微微加热溶解后倾入第一个烧杯，稀释至1000mL。此溶液PH在6.9-7.0 2． 20g/L十六烷三甲基溴化铵（酸性洗涤剂）溶液。称取20g十六烷基甲基溴化铵，溶于1000mL已经标定过的0.5mol/L硫酸溶液中，搅动溶解，必要时过滤。3.0.5mol/L硫酸溶液。称取49g（27.87mL）浓硫酸，慢慢加入已有500mL水的烧杯中，冷却后注入1000mL容量瓶中，定容，标定。

D)操作步骤：

NDF的测定

1. 准确称取40目筛饲料样品0.5-1.0g（m）,置无嘴高型烧杯中，加入中性洗涤剂溶液100ml 和2ml十氢化萘和0.5g无水亚硫酸钠。 2 .装上冷凝装置，立即置于电炉上煮沸（5-10min）,并微沸1h. 3 .煮沸完毕，冷却10min，将已知质量的玻璃坩埚（m1）安装于抽滤瓶上，将残渣全部移入，抽滤，并用沸水冲洗，再抽滤。再用20ml丙酮冲洗，抽滤。

4 .取下坩埚，105℃烘干，称重（m2） ADF的测定

1. 准确称取样品，0.5-1.0g（m）,置无嘴烧杯中，加入酸性洗涤剂溶液100ml和数滴十氢化萘。

2. 同NDF测定。

3 .用已知质量的玻璃坩埚（m3）,在抽滤瓶上抽滤残渣，并用沸水洗涤残渣，抽滤反复3次，然后用少量丙酮洗涤残渣，反复冲洗至滤液无色为止，抽净全部丙酮。

4 .同NDF测定，坩埚+残渣质量为（m4）。

E)计算：

W(NDF)：=(m2-m1)/m

W(ADF) =(m4-m3)/m

原理

采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）原理:

植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。

基于Van Soest原理的纤维素含量分析系统

Fibertec 纤维分析系统

2试剂的配制

中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，

C10H14O8Na2·2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7·10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）；1N硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤；

3操作步骤

中性洗涤纤维测定

准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。用20ml丙酮冲洗二次，抽滤。

酸性洗涤纤维测定

准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100 ml酸性洗涤剂和数滴十氢化萘及趁热用已知重量的玻璃坩埚抽滤，并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。用少量丙酮冲洗残渣至抽下的丙酮液呈无色为止，并抽净丙酮。将玻璃坩埚置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷却30 min称重，直称至恒重。

酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定将酸性洗涤纤维加入72%硫酸，在20℃消化3h后过滤，并冲洗至中性。消化过程中溶解部分为纤维素，不溶解的残渣为酸性洗涤木质素和酸不溶灰分，将残渣烘干并灼烧灰化后即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量。

4结果计算

中性洗涤纤维含量的计算：NDF（%）=（W1－W2）/ W×100

式中：

W1—玻璃坩埚和NDF重（g）W2—玻璃坩埚重（g）W—试样重（g）

酸性洗涤纤维含量的计算：ADF（%）=（G1－G2）/G×100

式中：

G1—玻璃坩埚和ADF重（g）G2—玻璃坩埚重（g）W—试样重（g）

半纤维素含量的计算：半纤维素（%）=NDF（%）－ADF（%）

纤维素含量的计算：纤维素=ADF（%）－经72%硫酸处理后的残渣（%）

酸性洗涤木质素（ADL）含量的计算：ADL（%）=残渣（%）－灰分（硅酸盐,%）5范式分析法图

范式分析法图示：