生态学实验的方案(元素类)

生态学实验方案(元素类) 南方林业生态应用技术国家工程实验室

前言

为科研工作提供参考，提高效率，规范实验方法，制定此实验方案。

本实验方案是在中科院南土所及田大伦教授研究的基础上，经多次实践检验，结合本实验室实际情况，加以补充完善而成，可确保其正确指导性及实际可操作性；实验步骤在保证完整充实的基础上，力求简化、层次清晰、一目了然；对容易忽视或误操作部分予以划线突出显示。

由于个人研究范围限制，本材料重点偏向于土壤/植物元素测定，未涉及其他方面，如水、微生物等，希望得到相关研究人员的支持补充！

欢迎大家提出宝贵建议和意见！

目录

1.土壤/植物有机碳测定

2.土壤/植物全氮测定

3.土壤全磷测定

4.土壤速效氮测定

5.土壤速效钾测定

6.土壤速效磷测定

7.土壤硝态氮测定

8.土壤铵态氮测定

9.待测液制备

10.大量元素测定

11.微量元素测定

土壤/植物有机碳测定精简 (重铬酸钾水合加热法)

1：溶液配制

（1）1mol/L 重铬酸钾：重铬酸钾105度烘干2小时，用1L 烧杯称取49.04g ，搅拌完全溶解，容量瓶定容1L ；

（2）0.5mol/L 硫酸亚铁：用1L 烧杯称取140.0g 硫酸亚铁溶于400ml 水中，加15ml 浓H 2SO 4，冷却后容量瓶定容1L ；

（3）硫酸亚铁标定：抽取重铬酸钾10毫升放入三角瓶中，加10毫升水，加浓硫酸3毫升和指示剂2滴，用硫酸亚铁溶液标定，M FeSO4 =（1.0×10）/V FeSO4 .

2：实验步骤

（1）用500毫升三角瓶称0.5g 左右土样（精确到0.0001）（植物样品0.0200g ）；

（2）加入10 毫升重铬酸钾溶液，摇晃均匀；

（3）加入20毫升浓硫酸 ，小心摇晃均匀；（小心缓慢加；可以用25毫升量筒）

（4）静置30分钟；

（5）加入220毫升蒸馏水；

（6）加3-4滴邻菲罗啉指示剂，用硫酸亚铁滴定，橙黄至蓝绿至终点砖红；记录硫酸亚铁体积；

3：结果计算

C 有机碳（%）=%10033.1003.0100.100⨯⨯⨯-⨯⨯泥土干重

）（V V V [V 0 ：滴定空白用去FeSO 4体积（一般20毫升左右）；V ：滴定样品用去FeSO 4体积；]

土壤/植物全氮测定精简(凯氏定氮)

1：溶液配制

（1）混合加速剂：硫酸钾： 硫酸铜：硒粉=100:10:1混合研细，过80网筛；

（2）指示剂：0.5g 溴甲酚绿和0.1g 甲基红溶于100毫升酒精；

（2）40%氢氧化钠：一瓶500g 氢氧化钠溶于1250毫升蒸馏水；（无需称量）

（3）20g/L 硼酸：20g 硼酸溶于1L 水中；加上述指示剂10毫升；

（4）0.02mol/L 盐酸：84毫升浓盐酸稀释至1升配置1mol/L 盐酸；取1mol/L 盐酸20毫升稀释至1升，即0.02mol/L ；

2：实验步骤

（1）称土2g （植物是0.02g ）（精确万分之一）至凯氏管；加2g 左右加速剂（无需精确）；加5毫升浓硫酸（植物是3毫升）；（做空白2份，不加土，其他均同）

（2）消煮：380度150分钟；（开机长安最左侧按钮几秒钟，闪动界面，设置成150，其他任何参数勿动！水龙头打开）

（3）蒸馏：开机，选择自动，参数设置，逐项修改；稀释水10毫升；硼酸20毫升；氢氧化钠30毫升（植物20毫升）；时间4:30；淋洗水5毫升；关防护门，确认开始；

（4）滴定：0.02mol/L 滴定，蓝绿至无色，微红终点，记录盐酸体积；

3：结果计算 N(%)=100014.0)(0⨯⨯⨯-烘干土重

C V V [C 为盐酸浓度；V 为滴定盐酸体积；V 0为空白]

土壤全磷测定精简(钼锑显色)

1：溶液配制

（1）指示剂：0.2g 2,6-二硝基酚溶于100毫升蒸馏水；

（2）酒石酸锑钾溶液：小烧杯称酒石酸锑钾0.5g，加100毫升水溶解；

（3）钼酸铵溶液：1升烧杯加300毫升水，加热60度，加10g钼酸铵；

（4）硫酸溶液：1升大烧杯加400毫升水，加126毫升浓硫酸；

（5）硫酸钼锑储备液：3和4均冷却后，4加入3，再加入2（顺序不能颠倒）；稀释1升；（6）钼锑抗显色剂：称取15g抗坏血酸溶于1升钼锑贮备液中；（现配现用）；

（7）磷标准贮备液：准确称取105℃下烘干两小时的磷酸二氢钾0.4390g，用水溶解后，加入5毫升浓硫酸，定容1升，即100ppm，冰箱保存；

（8）5ppm磷标准溶液：准确吸取5毫升磷贮备液至100毫升容量瓶。

2：实验步骤

（1）P标准曲线配置：抽取5ppm磷标液0、2、4、6、8、10ml于50毫升容量瓶；加2滴二硝基酚指示剂；加容量瓶大约1/2水；加5毫升钼锑抗显色剂，定容摇匀；

（2）样品：抽取2毫升至50毫升容量瓶，后加溶液同上；

（3）表曲及样品静置显色20分钟，可见分光光度计700nm处比色；记录。

3：结果计算

（1）通过标准曲线得出方程（仅供参考A=2.264C-0.516）A吸光度C浓度；

（2）全P（mg/kg）=（C*比色体积*分取倍数）/（母液土重*K2系数）K2为烘干系数

土壤速效氮测定(定氮仪)

1：溶液配制

(1)指示剂：0.1g甲基红+0.5g溴甲酚绿+100ml酒精，棕色试剂瓶；

(2)还原剂：Zn:FeSO4=1:5

(3)20%氯化钠：200g氯化钠+1L蒸馏水；

(4) 40%氢氧化钠：一瓶500g氢氧化钠+1250毫升蒸馏水；

(5)2%硼酸溶液：20g硼酸+1L蒸馏水+10ml 甲基红—溴甲酚绿指示剂。

2：实验步骤

(1)凯氏管里各加1.2g还原剂；

(2)称取5g风干土到250ml三角瓶中，加入20%氯化钠125毫升，振荡30分钟，过滤至100毫升三角瓶，抽取滤液30毫升至凯氏管，蒸馏；（设定稀释水0，硼酸10ml，NaOH5ml,淋洗水10ml）。(3)用0.02mol/L盐酸滴定；备注：做空白，计算方法同全N

土壤速效钾测定精简版(浸提+原子吸收)

1:溶液配制

1mol/L醋酸铵溶液： 77.09g醋酸铵1L水中；

2:实验步骤

(1)称取土样5.0000g至塑料瓶中，加醋酸铵50ml，将塑料瓶放至振荡器中振荡30分钟；

(2)振荡结束过滤至三角瓶中；

(3)原子吸收光谱仪测定。

3:结果计算

速效K(mg/kg)=（比色浓度*浸提体积）/（土重*K2系数）