25格×16格的血球计数板使用方法介绍
细胞计数方法------细胞计数板法..
实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1.将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2.将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min ,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3.计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16 个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m × 16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:33 1.0mm(长)× 1.0mm(宽)× 0.1mm(高)=0.1mm 3而1ml=1000ul=1000mm 3注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)细胞计数板的使用一、血球计数板 -基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16 个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25 个小方格;另一种是一个计数区分成25 个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16 个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400 个小方格组成。
计数区边长为1mm ,则计数区的面积为1mm 2,每个小方格的面积为1/400mm 2。
血球计数板使用及相关计算
总结:2mm×2mm方格的计数
2mm×2mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长。 由于计数室厚度为0.1mm,所以计数区的总体积为0.4mm3。 计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,另一种是 25×16型。
1.16×25型的计ຫໍສະໝຸດ 公式为:推导:1mm×1mm方格的计数
1mm×1mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长。由于 计数室厚度为0.1mm,所以计数室的总体积为0.1mm3。
1.16×25型的计数公式: 酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/ 100
×400×10000×稀释倍数
2.25×16型的计数公式: 酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/ 80
血球计数板 使用及相关计算
计数板是一块特制的厚玻璃片,玻片上有四个槽构成三个平 台,中央平台又由一短槽隔成两半其上各刻有一小方格网, 每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为 计数室。
16格×25格
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25格x16格
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血球计数板的使用方法步骤
1.镜检。在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物, 则需清洗,吹干后才能进行计数; 2.加样。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻 片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液,滴于盖玻片边缘,让培 养液自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防止产生气泡,多余 培养液可用滤纸吸去; 3.计数。稍待片刻(约5min),待酵母菌细胞全部沉降到计 数室底部后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下找到 计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。 4.清洁。血球计数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷, 洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇、无水乙醇、 丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残 留菌体或其他沉淀物。若不干净,则必须重复清洗直到干净为 止。
细胞计数方法------细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m ×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
血球计数板的使用
血球计数板生物实验用具血球计数板是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量.血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.实验六微生物的显微直接计数法一、实验目的了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,掌握显微镜下直接计数的技能。
细胞计数方法
图为:25中格X16小格的细胞计数板血球计数板血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数;如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.血细胞计数板的使用改良牛鲍氏血细胞计数板的使用血细胞计数板的规格较多,在我国多采用改良牛鲍氏血细胞计数板,用于目视法细胞计数。
血球计数板16x25公式
血球计数板16x25公式血球计数板是临床常见的一种实验用具,主要用于进行血液检查。
其尺寸为16x25,板面上通常有两个棱形池,分别为大池和小池,用来盛放血液样本以及进行计数。
在进行血球计数时,需要按照一定的规律来进行计数。
具体计数方法为:在显微镜下观察大池和小池中的血细胞,以小池中的九宫格为单位进行计数。
记下每个九宫格中红细胞和白细胞的数量,然后利用公式进行计算,最后得出血球计数结果。
下面是血球计数板16x25的计算公式:1. 红细胞计数红细胞计数采用的是五格法,公式如下:每个小方格内红细胞的数量 ÷ 5 × 10^4 = 红细胞计数(/μL)其中,10^4是因为血球计数板的九宫格面积为1/25mm^2,而10^4是将其转换为1mm^2的常数。
2. 血红蛋白计量血红蛋白计量的公式为:血红蛋白浓度(g/dL)= 小池中红细胞总量(个)×每个红细胞的血红蛋白含量(pg)÷ 10^6其中每个红细胞的血红蛋白含量为血红蛋白浓度(g/dL) ÷红细胞计数(/μL) × 10。
3. 白细胞计数白细胞计数需要在小方格内计算白细胞的数量,并根据计数结果乘以适当的倍数进行计算。
常用的倍数为20或25。
因此白细胞计数的公式为:小池中白细胞计数(/μL)= 当前小方格内白细胞数 ÷小方格总数 ×每个立方毫米的血液样本(0.1mm)÷ 20或25其中0.1mm是指使用血球计数板进行血液检测时,通常使用的显微镜目镜的倍数。
以上是血球计数板16x25所使用的计算公式,按照规定的步骤和方法进行计算,可以得出准确的血球计数结果。
但需要注意的是,由于血球分布的不均匀性,计算结果存在误差,所以需要根据实际情况进行调整。
同时,在进行计数过程中需要严格遵守操作规程,避免操作中的误差对结果产生影响。
细胞计数方法------细胞计数板法..
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板与盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m ×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm〔长〕×1.0mm〔宽〕×3而 1ml=1000ul=1000mm3〔注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,假如细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
〕================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-根本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格〔大方格用三线隔开〕,而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格〔大方格之间用双线分开〕,而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
细胞计数方法-细胞计数板法
细胞计数方法--—--—细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中得细胞得数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞得细胞数目。
具体操作:1、将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板.2、将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片与计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3、计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧与上方得。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×10个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均得小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧与上方得细胞数,求出每小格得细胞数,取平均值m,m×16即每个格得平均值。
所以,细胞密度=m×16×10个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格得细胞数。
公式中乘以10因为计数板中每一个大格得体积为:1、0mm(长)×1、0mm(宽)×0、1mm(高)=0、1mm 而1ml=1000ul=1000mm(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成得细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板得使用一、血球计数板-基本构造血球计数板就是一块特制得厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间得平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央得一大格作为计数用,称为计数区.计数区得刻度有两种:一种就是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种就是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但就是不管计数区就是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
血球计数板16x25公式
血球计数板16x25公式血球计数板,也称为血球计数器,是一种常见的临床实验室设备,用于测定人体中各种血球的数量。
在血球计数板16x25公式中,"16x25"表示板子上的乘法计数格数,即横向有16个小方格,纵向有25个小方格。
下面是关于血球计数板16x25计算的一些参考内容。
血球计数板是一种典型的带有刻度的九宫格板,可以通过镜片放大细胞的形态,在格子内计算细胞的数量。
血球计数板上通常有4个大方格,每个大方格的边长为1mm,大方格内部又细分为16个小方格,每个小方格的边长为0.05mm。
根据这些尺寸信息,我们可以进行以下计算:1. 小方格内细胞数计算:每个小方格的面积为(0.05mm)^2 = 0.0025mm^2。
假设在某个小方格内观察到细胞数为N,则小方格的细胞浓度为N/0.0025。
2. 大方格内细胞数计算:每个大方格的面积为(1mm)^2 = 1mm^2,即相当于400个小方格的总面积。
假设在某个大方格内观察到细胞数为M,则该大方格的细胞浓度为M/(0.0025x400)。
3. 整个血球计数板内的细胞数计算:在整个血球计数板中,观察到的细胞数为P。
假设观察到的细胞分布均匀,则整个血球计数板内的细胞数为P/(0.0025x400x16x25)。
综上所述,血球计数板16x25公式可以表示为:整个血球计数板内的细胞数 = P/(0.0025x400x16x25)需要注意的是,上述公式假设细胞分布均匀,而实际上在观察细胞时细胞的分布往往是不均匀的,因此计算出来的数量只是一个近似值。
为了提高计数的准确性,通常需要在多个大方格或多个区域内进行观察和计数,并取平均值。
另外,血球计数板的使用需要高度的实验室技能和经验,操作者需要进行充分的培训和熟练掌握技巧,以确保计数的准确性和可靠性。
血球计数板是临床和科研领域中常用的工具,可以帮助医生和科研人员了解患者的血细胞情况,对疾病的诊断和治疗起到重要的作用。
细胞计数板的使用方法
细胞计数板的使⽤⽅法⾎球计数板-基本构造⾎球计数板是⼀块特制的厚型载玻⽚,载玻⽚上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间⼜被⼀短横槽分隔成两半,每个半边上⾯各刻有⼀⼩⽅格⽹,每个⽅格⽹共分九个⼤格,中央的⼀⼤格作为计数⽤,称为计数区。
计数区的刻度有两种:⼀种是计数区分为16个⼤⽅格(⼤⽅格⽤三线隔开),⽽每个⼤⽅格⼜分成25个⼩⽅格;另⼀种是⼀个计数区分成25个⼤⽅格(⼤⽅格之间⽤双线分开),⽽每个⼤⽅格⼜分成16个⼩⽅格。
但是不管计数区是哪⼀种构造,它们都有⼀个共同特点,即计数区都由400个⼩⽅格组成。
计数区边长为1mm,则计数区的⾯积为1mm2,每个⼩⽅格的⾯积为1/400mm2。
盖上盖玻⽚后,计数区的⾼度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个⼩⽅格的体积为1/4000mm3。
使⽤细胞计数板计数时,先要测定每个⼩⽅格中微⽣物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微⽣物细胞的数量。
细胞计数板-使⽤⽅法1.视待测菌悬液浓度,加⽆菌⽔适当稀释(斜⾯⼀般稀释100倍),以每⼩格的菌数可数为度。
2.取洁净的细胞计数板⼀块,在计数区上盖上⼀块盖玻⽚。
3.将菌悬液摇匀,⽤滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻⽚的下边缘滴⼊⼀⼩滴(不宜过多),让菌悬液利⽤液体的表⾯张⼒充满计数区,勿使⽓泡产⽣,并⽤吸⽔纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻⽚后,造成计数区深度的升⾼),然后加盖盖玻⽚(勿使产⽣⽓泡)。
4.静置⽚刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换⾼倍镜观察并计数。
由于⽣活细胞的折光率和⽔的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。
5.计数时若计数区是由16个⼤⽅格组成,按对⾓线⽅位,数左上、左下、右上、右下的4个⼤⽅格(即100⼩格)的菌数。
细胞计数方法---细胞计数板法
细胞计数方法--细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m ×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
细胞计数方法------细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m ×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm〔长〕×1.0mm〔宽〕×0.1mm〔高〕=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3〔注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,假设细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
〕================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-根本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格〔大方格用三线隔开〕,而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格〔大方格之间用双线分开〕,而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
图为25中格X16小格的细胞计数板
图为:25中格X16小格的细胞计数板血球计数板血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数;如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.血细胞计数板的使用改良牛鲍氏血细胞计数板的使用血细胞计数板的规格较多,在我国多采用改良牛鲍氏血细胞计数板,用于目视法细胞计数。
1625的血球计数板计算公式
16×25的血球计数板计算公式
血球计数板是用于计算血液中不同类型血细胞数量的工具。
它通常由一个16×25的方格组成,每个小方格中有9个小格子。
下面是一种常见的血球计数板计算公式:
1.计算因子:
每个小格子的体积(V)= (1/16) ×(1/25) = 0.0016 mm3
每个大格子的体积(Vd)= 9 × 0.0016 mm3 = 0.0144 mm3
2.计算步骤:
a. 选择一个适当的倍数来计数细胞(例如,1:100倍)。
b.
使用显微镜在计数板上选择一个大格子,并计数其中的细胞数量。
c. 将计数的细胞数量乘以计算因子(体积倍数)。
d.
将乘积除以所选择的倍数,得到每升(L)血液中细胞的数量。
示例:
假设在一个大格子中计数到红细胞(RBC)的数量为150个,计算血液中红细胞的数量。
计算步骤:
a. 假设倍数为1:100。
b. 计数到的红细胞数量为150个。
c. 乘以计算因子(0.0144 mm3):150 × 0.0144 = 2.16
d. 除以倍数(100):2.16 / 100 = 0.0216
结果:
每升(L)血液中红细胞的数量为0.0216 × 10^12
(约等于21.6 × 10^9)。
请注意,这个计算公式是基于常见的血球计数板的结构和体积,具体的计算方法可能会因不同的血球计数板而略有差异。
在实际使用时,请参考您所使用的具体血球计数板的说明或相关实验室标准操作规程。
细胞计数方法细胞计数板法
细胞计数⽅法细胞计数板法细胞计数⽅法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定⼀定体积悬液中的细胞的数⽬,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数⽬。
具体操作:1. 将计数板及盖⽚擦拭⼲净,并将盖⽚盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖⽚边缘,使悬液充满盖⽚和计数板之间,静置3min,注意盖⽚下不要有⽓泡,也不能让悬液流⼊旁边槽中。
3. 计算板四⼤格细胞总数,压线细胞只计左侧和上⽅的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四⼤格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个⼤格中选⼀定数⽬较平均的⼩格,由于每⼤格中有16个⼩格,然后对选定的⼩格计左侧和上⽅的细胞数,求出每⼩格的细胞数,取平均值m,m×16即每个⼤格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml) 说明:公式中除以4,因为计数了4个⼤格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每⼀个⼤格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(⾼)=0.1mm3⽽1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使⽤⼀、⾎球计数板-基本构造⾎球计数板是⼀块特制的厚型载玻⽚,载玻⽚上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间⼜被⼀短横槽分隔成两半,每个半边上⾯各刻有⼀⼩⽅格⽹,每个⽅格⽹共分九个⼤格,中央的⼀⼤格作为计数⽤,称为计数区。
计数区的刻度有两种:⼀种是计数区分为16个⼤⽅格(⼤⽅格⽤三线隔开),⽽每个⼤⽅格⼜分成25个⼩⽅格;另⼀种是⼀个计数区分成25个⼤⽅格(⼤⽅格之间⽤双线分开),⽽每个⼤⽅格⼜分成16个⼩⽅格。
25格×16格的血球计数板使用方法介绍
25格×16格的血球计数板使用方法介绍血球计数板介绍用优质厚玻璃制成。
每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。
计数池两侧各有一支持柱,将特制的专用盖玻片覆盖其上,形成高0.10mm的计数池。
计数池画有长、宽各3.0mm的方格,分为9个大方格,每个大格面积为 1.0mm。
容积为0.1mm(ul),其中,中央大方格用双线分成25个中方格,位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域,用单线划分为16个小方格。
四角的4个大方格是白细胞计数区域,用单线划分为16个中方格。
根椐国际标准局(NBS)规定,大方格每边长度允许误差为±1%。
使用方法:1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍),以每小格的菌数可数为度。
2.取洁净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片。
3.将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。
4.静置片刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。
将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数。
由于细胞的折光率和水的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。
5.25个大方格组成的计数区,除数上述四个大方格外,还需数中央1个大方格的菌数(即80个小格)。
为了保证计数的准确性,避免重复计数和漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。
如菌体位于大方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。
即位于本格上线和左线上的细胞计入本格,本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。
6.对于出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。
血球计数板及其使用方法
血球计数板及其使用方法1、血球计数板的构造血球计数板是一种生物学或医学仪器,用以对人体血液中红细胞、白细胞进行显微计数,也常用于一些细菌、真菌、酵母菌等较大细胞或微生物的计数。
血球计数板的形状如图1所示,血球计数板是一块特制的厚载玻片,载玻片上由4个槽构成3个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一方格网,每个方格网共分9个大方格(大方格用三线隔开),中央的一大方格作为计数用,称为计数室,如图2所示。
计数室的规格常有两种:一种叫希利格式(16×25型),是一个计数室分为16个中方格(中方格之间用双线分开),而每个中方格又分成25个小方格;另一种叫汤麦式(25×16型),是一个计数室分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。
但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数室都由400个小方格组成。
计数室的边长常为1mm,则计数室的面积为1mm2,盖上盖玻片后,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数室的容积为0.1mm3,每个小方格的边长为0.05mm,每个小方格的容积为1/4000mm3、16×25型的每个中方格的边长为0.25mm,每个中方格的容积为1/160mm3,25×16型的每个中方格的边长为0.2mm,每个中方格的容积为1/250mm3,如图3所示。
另外,有血球计数板规格为计数室边长为2mm,则计数室的面积为4mm2,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数室的容积为0.4mm3,每个小方格的边长为0.1mm,每个小方格的容积为1/1000mm3。
16×25型的每个中方格的边长为0.5mm,每个中方格的容积为1/40mm3;25×16型的每个中方格的边长为0.4mm,每个中方格的容积为2/125mm3。
2、血球计数板的使用方法(以计数酵母菌为例)(1)用血球计数板计数培养液中的酵母菌个数。
细胞计数方法------细胞计数板法
细胞计数方法——细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 吸出稀释好一定倍数的均匀密度的细胞悬液少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,不能让悬液流入旁边槽中。
3. 记录板四角大方格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞悬液密度=(四大方格细胞总数/4)×104×稀释倍数个/ml=每大方格数目/1×104 ×稀释倍数个/ml(注意:在细胞计数板上,每大格有16个小方格。
当细胞很多时,可在四个方大格中选定不同区域的组合方格,或单独小方格记数,或四个小方格组合的区域来记数。
已知每个小方格的体积为1/16×10-4ml,然后记数选定小方格计左侧和上方压线细胞数和小方格区域内的细胞数,记录出每小方格的细胞数,然后取平均值m,m×16即每个大方格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104×稀释倍数个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大方格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大方格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3而 1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
细胞计数方法细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1、将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2、将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片与计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3、计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧与上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧与上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1、0mm(长)×1、0mm(宽)×0、1mm(高)=0、1mm3而1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板就是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种就是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种就是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但就是不管计数区就是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
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25格×16格的血球计数板使用方法介绍
血球计数板介绍用优质厚玻璃制成。
每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。
计数池两侧各有一支持柱,将特制的专用盖玻
片覆盖其上,形成高0.10mm的计数池。
计
数池画有长、宽各3.0mm的方格,分为9个
大方格,每个大格面积为 1.0mm。
容积为
0.1mm(ul),其中,中央大方格用双线分
成25个中方格,位于正中及四角5个中方
格是红细胞计数区域,用单线划分为16个
小方格。
四角的4个大方格是白细胞计数区域,
用单线划分为16个中方格。
根椐国际标准
局(NBS)规定,大方格每边长度允许误差
为±1%。
使用方法:
1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍),以每小格的
菌数可数为度。
2.取洁净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片。
3.将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的
下边缘摘入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。
4.静置片刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。
将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜观察并计数。
由于细胞的折光率和水的折光率相近,观察时应减弱光照的强度。
5.25个大方格组成的计数区,除数上述四个大方格外,还需数中央1个大方格的菌数(即80个小格)。
为了保证计数的准确性,避免重复计数和漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。
如菌体位于大方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。
即位于本格上线和左线上的细胞计入本格,本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。
6.对于出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算。
每个样品重复计数2-3次(每次数值不应相差过大,否则应重新操作),按公式计算出每mL(g)菌悬液所含细胞数量。
7.测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗干净,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。
洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存。
计数公式:
25格×16格的血球计数板计算公式:
细胞数/ml=80小格内细胞个数/80×400×10000×稀释倍数。