高中生物专题复习：基因工程和细胞工程

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高考生物专题复习专题16 基因工程和细胞工程

特别提醒 ①DNA 连接酶连接两个 DNA 片段，而 DNA 聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。 ②限制酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列，并使两条链在特定的位臵断开，而解旋酶是将 DNA 的两条链间的氢键打开形成两条单链。
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疑难点拨 1．从“基因表达”层面理解基因表达载体的必需元件 (1)基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因＋复制原点。 (2)启动子和终止子：启动子是 RNA 聚合酶结合位点，启动转录；终止子是终止转录的位点。插入的目的基因只是结构基因部分，其表达需要调控序列，因而用作载体的质粒的插入部位前需要有启动子，后需要有终止子。
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(3)基因表达载体的构建过程
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2. 区分一个至多个限制酶切点与每种酶一个切点 (1)一个至多个限制酶切点：作为载体必须具有一个至多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 (2)每种酶一个切点：每种酶的切点最好只有一个。因为某种限制酶只能识别单一切点，若载体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则进入受体细胞后便不能自主复制。一个载体若只有某种限制酶的一个切点，则酶切后既能把环打开接纳外源 DNA 片段，又不会丢失自己的片段。
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的功能是启动转录，因此其识别并结合的部位是基因的转录起始区或启动子区域。第(5)题中A项蛋白酶酶解核糖体中的蛋白质后，只剩下rRNA，利用了酶的专一性，A项正确；B项中用无水乙醇处理叶片，进行色素的提取和分离，是因为无水乙醇是有机物，可溶解各种色素，不属于特异性结合，B项错误；C项是用基因探针法，利用已知基因的碱基序列可与另一基因上的碱基进行互补配对的性质来进行基因定位，C项正确；D项中提到一种mRNA和另一种mRNA的互补，这种互补也遵循碱基互补配对原则，属于特异性结合。

2024年高考生物复习重点、难点、热点专项解析—细胞工程与基因工程

2024年高考生物复习重点、难点、热点专项解析—细胞工程与基因工程高考感知课标要求——明考向近年考情——知规律12.1植物细胞工程包括组织培养和体细胞杂交等技术12.2动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合和干细胞的应用等技术12.3对动物早期胚胎或配子进行显微操作和处理以获得目标个体12.4基因工程是一种重组DNA技术12.5蛋白质工程是基因工程的延伸12.6转基因产品的安全性引发社会的广泛关注12.7举例说出生殖性克隆人面临的伦理问题12.8世界范围内应全面禁止生物武器2023·湖南基因工程在农牧业、制药及环境等方面的应用2023·湖北DNA重组技术的基本工具、基因表达载体的构建、目的基因的检测与鉴定2023·广东DNA的粗提取及鉴定的方法2023·新课标DNA重组技术的基本工具、基因表达载体的构建2023·北京动物细胞融合与单克隆抗体的制备2023·山东植物细胞工程的实际应用2023·广东植物体细胞杂交技术2023·广东动物的体外受精、胚胎的体外培养、胚胎移植技术2023·浙江动物的体外受精、胚胎的体外培养2023·浙江生物技术的安全性和伦理问题综合2023·海南将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定、基因工程的应用2023·山东PCR扩增的原理与过程、DNA重组技术的基本工具、基因表达载体的构建2023·湖北动物细胞融合与单克隆抗体的制备2023·浙江动物细胞融合与单克隆抗体的制备、动物体细胞核移植技术和克隆动物2023·全国遗传信息的翻译、基因表达载体的构建、目的基因的检测与鉴定命题趋势1.细胞工程，胚胎工程的命题多以选择题呈现，基因工程的命题多以简答题呈现，属于年年必考的题目。

2.试题情境以下列几种居多：（1）以单克隆抗体为情境考查细胞工程。

高考生物二轮复习专题7 第1讲基因工程和细胞工程

(2)为达到相应的目的，产生抗人白细胞介素－8 抗体的杂交瘤细胞的筛选必须通过分子检测。(√)
(3)重组质粒的构建需要限制性核酸内切酶和 DNA 聚合酶参与。(×)
【提示】构建重组质粒需要限制酶和 DNA 连接酶。
(4)从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽 P1。目前在 P1 的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是依据 P1 氨基酸序列设计多条模拟肽。(√)
基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是浆细胞，Ⅲ代表的细
胞具有无限增殖和产生特异性抗体
的特点。
7．上述图示过程中涉及的生物工程技术有：基因工程、
动物细胞培养、单克隆抗体制备
等。
1．判断 (1)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因。(×) 【提示】载体质粒的标记基因一般用抗生素基因。
【答案】 AD
3．下面是将某细菌的基因 A 导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。
请据图回答： (1)获得 A 有两条途径：一是以 A 的 mRNA 为模板，在 ________ 酶的催化下，合成互补的单链 DNA ，然后在 ________作用下合成双链 DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的________序列，推测出相应的 mRNA 序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其 DNA 的________序列，再通过化学方法合成所需基因。
回答下列问题： (1) 理论上，基因组文库含有生物的 __)若要从植物甲中。 (3)将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物________的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的________，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的________是否得到提高。

高中生物二轮专题复习专题八专题八基因工程和细胞工程专题强化练

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5.根据资料回答下列问题：资料一 PCR(多聚酶链式反应)三个基本反应步骤是模板DNA在体外加热至90～95 ℃时解旋成单链，温度降至55 ℃左右，引物与模板单链按碱基互补配对的原则结合，再调至 72 ℃ 左右时， DNA 聚合酶沿 5′→3′(磷酸到五碳糖)的方向延伸引物合成互补链。三个步骤完成一次称为一个循环。
解析对胰岛素基因进行修饰，生产出不易被分解的高效胰岛素，这属于蛋白质工程的范畴。
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4.近年来，生物工程运用分子生物学的最新成就，发展出一系列的技术，可以为人类健康、生产、生活等提供服务。运用所学知识回答下列问题： (1)科学家为了建立生产干扰素的乳腺生物反应器，一般通过_显__微__注__射_技术导入哺乳动物的_受__精__卵_中，然后再将它送入母体内，最终发育成能生产干扰素的转基因哺乳动物。 (2)单克隆抗体具有特异性强、灵__敏__度__高__、可以大量制备等优点。制备单克隆抗体有两个重要的理论基础：一是在动物免疫反应的过程中每一个 B淋巴细胞_只__分__泌__一__种__特__异__性__抗__体_；二是小鼠骨髓瘤细胞能够_无__限__增__殖_。 (3)在胚胎工程中，通过对供体母羊注射促__性__腺__激__素__，促使其超数排卵，从而获得大量羊的卵母细胞。
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解析目的基因的两端都有BamHⅠ的识别序列，质粒的抗生素A抗性基因上也有BamHⅠ的识别序列，故应选用的限制酶是BamHⅠ，此时抗生素B抗性基因作为标记基因，故筛选时培养基中要添加抗生素B。若重组质粒已导入了受体细胞却不能表达，很可能是因为用同种限制酶切割后，目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能互补，可能出现目的基因反向连接在质粒上的情况。

生物选修三基因工程与细胞工程精简总结

基因提取方法鸟枪法
优点
操作简便广泛使用
缺点
工作量大，盲目，分离出来的有时并非一个基因
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？
主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物 2血、清为等什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？
成
的积累抑制谷氨酸脱氢酶的活性
意义
既保证代谢需要又避免浪费，增强微不会积累大量的代谢产物，保证
生物对环境适应能力
各种代谢经济高效进行
一基因工程的概念
• 基因工程生产人的胰岛素：
关键步骤一：胰岛素基因从人的细胞内提取出来
关键步骤二：
胰岛素基因与运载体DNA பைடு நூலகம்接
关键步骤三：人的基因导入受体(大肠杆菌)细胞
细胞工程
细胞的全能性
概念
应用的原理和方法研究的水平研究的目的
细胞生物学和分子生物学
细胞整体水平或细胞器水平
理论基础:细胞的全能性
按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品
植物细胞工程
技术手段植物组织培养植物体细胞杂交
分类
细胞工程
动物
技术手段
动物细胞培养核移植技术动物细胞融合
• 一、DNA的一级结构
无限传代
黑面绵羊去核卵细胞
克隆羊培育过程
细胞核移植重组细胞
电脉冲刺激早期胚胎
胚胎移植
另一头绵羊的子宫
妊娠、出生克隆羊多利
• 脱氧核糖核酸的排列顺序 – 可以用碱基排列顺序表示
• 连接键：3’，5’-磷酸二酯键 – 磷酸与戊糖顺序相连形成主链骨架 – 碱基形成侧链

高中生物二轮复习专题突破：第17讲基因工程与细胞工程

(5)已知YCF1特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析，转基因杨树比野生型能更好地适应高Cd环境的原因是________________________________。
相较于草本植物，采用杨树这种乔木作为 Cd 污染土壤修复植物的优势在于 _________(写出两点即可)。
6．愈伤组织的细胞排列整齐而紧密，且为高度液泡化、无定形态的薄壁细胞
( ×) 7．植物产生的种子能发育成新的个体，是种子细胞全能性的体现( × ) 8．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织细胞基因都
是相同的( × ) 9．在动物细胞培养与植物组织培养中，都需要对培养基灭菌，还都需要用到
注：目的基因插入位置：插入至启动子下游，终止子上游
(3)将目的基因导入受体细胞的“3 大方法” ①导入植物细胞——农杆菌转化法(花粉管通道法、基因枪法)。 ②导入动物细胞——显微注射法(一般导入受精卵)。 ③导入微生物细胞——使用 Ca2＋处理细胞。 (4)理清目的基因的检测与鉴定 ①导入检测：DNA 分子杂交技术(使用 DNA 探针)。 ②表达检测转录：分子杂交技术检测mRNA
4．(教材选修3 P36“小知识”)说出植物组织培养的培养基组成。大__多__数__都__是__由__ _无__机__营__养__成__分__、__有__机__营__养__成__分__、__激__素__、__琼__脂__四__部__分__组__成____ 。
5．(教材选修3 P52“生物技术资料卡”)病毒灭活的含义是什么？_灭__活__是__指__用__物__ _理__或__化__学__手__段__使__病__毒__或__细__菌__失__去__感__染__能__力__，__但__是__并__不__破__坏__这__些__病__原__体__的__抗__原__结__构__ 。

(高中段)专题十二基因工程和细胞工程

1．若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则一定有
利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定。 (2020·浙江 7 月选考，T24A)(×) 2．切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别 6 个核苷酸序列。 (×)
3．DNA 连接酶能将两碱基间通过氢键连接起来。
(×)
4．E·coli DNA 连接酶既可以连接平末端，又可以连接黏性末端。
DNA 序列(虚线处省略了部分核苷酸序列)
已知序列
PCR 引物
(4)对 PCR 产物测序，经分析得到了片段 F 的完整序列。下列 DNA 单链序列中(虚线处省略了部分核苷酸序列)，结果正确的是________。 A．5′AACTATGCG……AGCCCTT3′ B．5′AATTCCATG……CTGAATT3′ C．5′GCAATGCGT……TCGGGAA3′ D．5′TTGATACGC……CGAGTAC3′
解析：途径甲中，过程Ⅰ应将干扰素基因和乳腺蛋白基因的启动子重组，这样才能使目的基因只在乳腺组织中表达，A 正确；途径乙中，过程Ⅱ是将目的基因导入植物细胞，一般所采用的方法是农杆菌转化法，B 正确；途径丙中，过程Ⅱ是将目的基因导入微生物细胞，可用 Ca2＋处理大肠杆菌，以制备感受态细胞，使其容易吸收周围环境中的 DNA 分子，C 正确；三条途径中，过程Ⅲ 依据的生物学原理不完全相同，其中途径甲和途径乙的原理是细胞具有全能性，过程丙的原理是细胞增殖，D 错误。答案：D
解析：(1)根据题图可知，步骤Ⅰ是获取目的 DNA 片段，所用的 EcoR Ⅰ是一种限制酶，其能识别特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(2)步骤Ⅱ是将目的 DNA 片段连接成环状，其中 DNA 连接酶的作用是催化相邻核苷酸之间的 3′羟基和 5′磷酸间形成磷酸二酯键。 PCR 循环中，升高温度到 95 ℃是为了打开氢键使双链解旋，获得 DNA 单链； Taq DNA 聚合酶的作用是催化游离的脱氧核苷酸连接到引物 3′端，合成 DNA 子链。(3)引物的作用是使 DNA 聚合酶能够从引物的 3′端开始延伸 DNA 子链，因为 DNA 的合成方向总是从子链的 5′端向 3′端延伸，故为扩增未知序列，选择的与模板链相结合的引物应为 5′TCATGAGCGCATAGTT3′(引物④)和 5′GCAATGCGTAGCCTCT3′(引物②)。(4)分析题意可知，片段 F 的两端为限制酶 EcoRⅠ切割后产生的黏性末端，因此其 5′端序列应为 AATT,3′端序列应为 TTAA，B 正确。答案：(1)限制性核酸内切(或限制) 核苷酸序列 (2)磷酸二酯键 DNA 单链以 DNA 为模板的 DNA 链的延伸 (3)②④ (4)B

高中高考生物专题复习基因工程与细胞工程

1 2 3 4 5
解析
答案
(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1 和引物2)，为方便
限制性核酸内切酶位点。设构建重组质粒，在引物中需要增加适当的___________________ 碱基互补配对，而造成引物自连。计引物时需要避免引物之间形成_____________ 解析为方便构建重组质粒，宜在引
物中增加适当的限制酶位点，以便使
复制出的目的基因两端含限制酶切点；
设计引物时，需避免引物之间碱基互
补配对，以防引物间自连。
1
2
3
4
5
解析
答案
变性， (3) 图中步骤 1 代表 _____
步骤 2 代表退火，步骤 3 代
表延伸，这三个步骤组成
一轮循环。解析图中步骤 1 为高温
下实现DNA变性解链。
√
B.利用选择性培养基对构建的基因表达载体直接筛选 C.利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞 D.在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄植
解析
答案
3.(2017· 江苏，33)金属硫蛋白(MT)是一类
广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计
划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目
专题十六基因工程与细胞工程
知识体系构建
核心考点1 核心考点2 基因工程与蛋白质工程细胞工程
知识体系构建
细胞的全能性、细胞膜的流动性
DNA连接酶
基因表达载体的构建细胞增殖动物细胞核的全能性
基因
给小鼠注射抗原产生专一抗体的杂交瘤细胞
核心考点1
基因工程与蛋白质工程
1
要点整合
1.掌握基因工程的3种基本工具
(2)化学方法人工合成

人教版高中生物选修三必考知识点精编(基因工程+细胞工程)

人教版生物选修三必考知识点精编（基因工程+细胞工程）专题一1、生物的变异分为两类：①不可遗传的变异（遗传物质未发生改变，仅由于环境因素导致的）②可遗传变异（遗传物质发生改变）：突变：基因突变、染色体变异基因重组（有性生殖）2、DNA重组技术（基因工程）：通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

3、限制酶（全称：限制性核酸内切酶）用途：切割DNA的工具，切断两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

产生末端：粘性末端、平末端。

来源：主要在原核生物中别称：分子手术刀4、DNA连接酶用途：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

别称：分子缝合针种类（按照来源分类）：①E·ColiDNA连接酶：大肠杆菌，只能连接粘性末端。

②T4DNA连接酶：T4噬菌体，粘性末端和平末端。

5、DNA连接酶与DNA聚合酶的区别：DNA连接酶：无需模板，在2个DNA片段之间形成磷酸二酯键。

DNA聚合酶：以一条DNA链为模板，在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。

6、基因的运载体：别称：分子运输车①质粒：裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，具有自我复制能力的双链环状DNA分子，可以在细菌细胞间转换。

②λ噬菌体的衍生物。

③动植物病毒7、作为运载体应该具备的条件：①必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上。

②必需具备自我复制的能力（便于与外源基因结合）。

③必须带有标记基因（便于检测和筛选）。

④必需是安全的。

⑤大小应合适，以便提取和在体外进行操作。

8、载体的作用：①携带目的基因进入受体细胞②使目的基因在受体细胞内大量复制9、基因结构：非编码区：不能编码蛋白质，调控遗传信息的表达启动子：RNA聚合酶结合位点转录起始的信号终止子：终止RNA的合成编码区（外显子&内含子）：编码蛋白质的合成10、基因工程基本操作的4个步骤：①目的基因的获取（前提）②基因表达载体的构建（核心）③将目的基因导入受体细胞（关键）④目的基因的检测与鉴定（保证）。

高考复习(生物)专项练习：细胞工程和基因工程【含答案及解析】

专题突破练12细胞工程和基因工程一、单项选择题1.(2021山东济南联考)芥酸会降低菜籽油的品质。

油菜有两对独立遗传的等位基因(H和h,G和g)控制菜籽的芥酸含量。

下图是获得低芥酸油菜新品种(HHGG)的技术路线,已知油菜单个花药由花药壁(2n)及大量花粉(n)等组分组成,这些组分的细胞都具有全能性。

据图分析,下列叙述错误的是()A.①②过程均需要植物激素来诱导细胞脱分化B.与④过程相比,③过程可能会产生二倍体再生植株C.图中3种途径中,利用花粉培养筛选低芥酸油菜新品种(HHGG)的效率最高D.F1植株的细胞进行减数分裂时,H基因所在的染色体会与G基因所在的染色体发生联会2.(2021山东济南针对性训练)NRP-1是人体血管内皮生长因子的受体,在肿瘤新生血管形成与肿瘤细胞迁移、黏附、侵袭等方面起重要调控作用。

为探究NRP-1MAb(NRP-1的单克隆抗体)对乳腺癌的治疗作用,研究人员以兔子为实验材料进行了相关实验,得到如下图所示的结果。

下列叙述错误的是()A.据图推测,NRP-1MAb能够有效降低肿瘤的体积,中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的更显著B.NRP-1MAb的制备过程中利用灭活病毒诱导两细胞融合,其原理是利用了病毒表面的糖蛋白和相关酶能够与细胞膜表面的糖蛋白发生作用C.反复给兔子注射NRP-1,提取已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,再经选择培养基筛选获得的杂交瘤细胞都能产生NRP-1MAbD.治疗机理可能为NRP-1MAb与NRP-1特异性结合,阻止了NRP-1与血管内皮生长因子的结合,从而抑制了肿瘤血管的生成以及肿瘤细胞的分散和转移3.(2021山东滨州二模)细胞融合不仅在自然条件下常见,在现代生物技术中也经常应用。

下图表示细胞融合的简要过程。

下列说法正确的是()A.细胞融合过程都涉及细胞膜的流动性,常用聚乙二醇融合法、电融合法等进行处理B.若细胞a、b分别取自优良奶牛,则采集的卵母细胞和精子可直接体外受精C.若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞,则完成融合的标志为细胞核的融合D.若细胞d是杂交瘤细胞,则在选择培养基中筛选后即可大规模培养生产单克隆抗体4.(2021山东聊城二模)单克隆抗体可抑制病毒对宿主细胞的侵染。

2021届新高考生物专题复习基因工程和细胞工程【含答案】

第1讲基因工程和细胞工程[考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。

2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)。

3.基因工程的应用(Ⅱ)。

4.蛋白质工程(Ⅰ)。

5.植物的组织培养(Ⅱ)。

6.动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。

7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。

8.实验：DNA的粗提取与鉴定。

1．基因工程(1)基因工程的3种基本工具①限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。

②DNA连接酶：a.E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端；b.T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。

③载体：需具备的条件包括：a.能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；b.有一个至多个限制酶切割位点；c.具有特殊的标记基因，以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。

(2)获取目的基因的途径：①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③化学方法直接人工合成。

(3)基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子及标记基因等。

(4)将目的基因导入受体细胞①植物：体细胞或受精卵——常用农杆菌转化法(双子叶植物和裸子植物)、花粉管通道法、基因枪法(单子叶植物)。

②动物：受精卵——显微注射技术。

③微生物：细菌(常用大肠杆菌)——感受态细胞法(钙离子处理法)。

(5)目的基因的检测与鉴定方法①检测目的基因是否插入转基因生物的DNA上：DNA分子杂交技术。

②检测目的基因是否转录出mRNA：分子杂交技术。

③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原—抗体杂交技术。

④个体生物学水平鉴定：根据表达性状判断。

易混辨析①限制酶≠DNA酶≠解旋酶限制酶的作用是识别双链DNA分子上某种特定的核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断开；DNA酶的作用是将DNA水解为基本组成单位；解旋酶的作用是将DNA两条链间的氢键打开形成两条单链。

②DNA连接酶≠DNA聚合酶DNA连接酶能连接两个DNA片段，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。

高中选修3《现代生物科技专题》知识点总结

选修3易考学问点背诵专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指根据人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，给予生物以新的遗传特性，创建出更符合人们须要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分别纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区分：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

（2）最常用的载体是质粒,它是一种袒露的、结构简洁的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制实力的双链环状D NA分子。

（3）其它载体：入噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获得1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。

目的基因获得方法：从基因文库中获得; PCR技术扩增目的基因;人工化学干脆合成2.原核基因实行干脆分别获得，真核基因是人工合成。

高中生物专题复习知识点总结

高中生物专题复习知识点总结一、细胞的结构与功能1. 细胞膜：细胞的外层结构，主要由磷脂双层和蛋白质组成，具有选择性通透性，控制物质进出细胞。

2. 细胞核：细胞的控制中心，含有DNA，负责储存和传递遗传信息。

3. 细胞质：细胞内充满的半流体物质，包含各种细胞器和代谢物质。

4. 线粒体：细胞的能量工厂，负责进行有氧呼吸，产生ATP。

5. 叶绿体：植物细胞特有的细胞器，进行光合作用，转化光能为化学能。

6. 内质网和高尔基体：参与蛋白质的合成、加工和运输。

7. 细胞骨架：由微丝、微管和中间丝组成，维持细胞形态和提供运动能力。

二、遗传与进化1. DNA结构与复制：DNA的双螺旋结构，以及半保留复制的方式。

2. RNA转录与蛋白质翻译：基因表达的两个主要步骤，包括mRNA的生成和蛋白质的合成。

3. 基因突变与修复：基因突变的类型和修复机制，以及突变对生物的影响。

4. 遗传规律：孟德尔遗传定律，包括分离定律和自由组合定律。

5. 基因重组与染色体变异：在有性生殖过程中，基因重组的方式和染色体变异的类型。

6. 进化论：物种起源，自然选择和进化的证据，以及生物多样性的形成。

三、生物代谢1. 光合作用：光反应和暗反应的过程，以及光合作用的效率影响因素。

2. 呼吸作用：有氧呼吸和无氧呼吸的过程，以及ATP的生成。

3. 糖类、脂类和蛋白质代谢：三大营养物质的代谢途径和相互转化。

4. 酶的作用与调节：酶的特性，以及影响酶活性的因素。

5. 细胞呼吸与能量代谢：细胞如何通过代谢过程释放和储存能量。

四、生态环境与人体健康1. 植物激素与生长发育：植物激素的种类和作用，以及对植物生长发育的影响。

2. 神经系统与信息传递：神经系统的结构和功能，以及信息传递的方式。

3. 免疫系统与疾病防御：免疫系统的组成和功能，以及疾病防御机制。

4. 内分泌系统与激素调节：内分泌系统的工作原理，以及激素对生理功能的影响。

5. 环境因素与健康：环境污染物对人体健康的影响，以及环境保护的重要性。

高考生物总复习(一)基因工程与细胞工程课件

答案：(1)能自我复制、具有标记基因(答出两点即可) (2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒) 二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长四环素 (3) 受体细胞
5．(2014·高考全国卷Ⅱ)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关，若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。
(1)在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的 mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是 ________________。提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是________________________________________。
(2)以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是___________。
(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA 复制所需的原料来自于________。
解析：(1)质粒作为载体，应具备的基本条件有：有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段(基因)插入其中；在受体细胞中能自我复制，或能整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制；有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择；等等。
(2)若用家蚕作为表达基因A的受体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用________作为载体，其原因是_____________。
(3)若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比，大肠杆菌具有________(答出两点即可)等优点。
(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是 ________(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。