平分型GlcNAc糖基化修饰的生物学功能
蛋白质糖基化的基本类型,功能定位及生物学意义
蛋白质糖基化的基本类型,功能定位及生物学意义
蛋白质糖基化是一种常见的修饰方式,它是指在蛋白质分子上的氨基酸残基与糖分子(如葡萄糖、甘露糖等)发生结合,形成糖基化产物。
根据糖基化的位置和类型,可以将其分为三种基本类型:N-
糖基化、O-糖基化和C-糖基化。
N-糖基化:是指糖基团结合在蛋白质分子N-末端的氨基上,这种糖基化被称为N-糖基化,它是最常见的糖基化形式。
N-糖基化对蛋白质的结构和功能有着重要的影响,参与了蛋白质修饰、识别和信号转导等生物学过程。
O-糖基化:是指糖基团结合在蛋白质分子的羟基上,形成O-糖基化产物。
O-糖基化参与了许多生物学过程,如细胞表面的信号转导、内部蛋白质的定位和分泌等。
C-糖基化:是指糖基团结合在蛋白质分子的半胱氨酸残基上,形成C-糖基化产物。
C-糖基化在真菌和植物中较为常见,它参与了蛋白质的结构和功能。
总之,蛋白质糖基化是一种重要的蛋白质修饰方式,通过糖基化产物的形成和分布,发挥了重要的生物学功能,如信号转导、细胞定位、蛋白质的稳定性和调节等。
因此,对蛋白质糖基化的研究可以为深入理解蛋白质功能提供新的思路。
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氨基葡萄糖的代谢产物
氨基葡萄糖的代谢产物1.引言1.1 概述氨基葡萄糖是一种重要的生物分子,它是由葡萄糖经过一系列酶催化反应转化而来。
氨基葡萄糖在生物体内广泛存在,不仅是多糖和蛋白质的构成单位,还是一些生物活性物质的前体。
在代谢过程中,氨基葡萄糖会经历一系列反应,产生一些重要的代谢产物。
氨基葡萄糖的代谢产物不仅具有重要的生理功能,而且与一系列疾病的发生和发展密切相关。
了解和研究氨基葡萄糖的代谢产物,对于深入理解生物体的代谢过程和疾病的发生机制具有重要意义。
本文将重点介绍氨基葡萄糖的代谢产物,并探讨其在生物体内的代谢途径及其生理功能。
在此基础上,结合已有的研究成果,将对氨基葡萄糖的代谢产物在疾病诊断和治疗方面的应用进行展望。
通过深入的研究和分析,有望为开发新的治疗方法和药物提供理论依据。
同时,本文还将对目前研究中存在的问题进行总结,并提出未来研究的方向和展望。
通过对氨基葡萄糖的代谢产物进行深入研究,将为我们进一步探索生命的奥秘和人类健康提供重要的科学依据。
这也将促进医学领域的发展,为人类的健康福祉作出贡献。
1.2 文章结构文章结构是指文章的整体框架和组织方式,它可以帮助读者更好地理解和掌握文章的内容。
本文按照以下结构进行组织和阐述:1. 引言:介绍氨基葡萄糖的基本概念、重要性以及当前研究的背景和意义。
通过引入氨基葡萄糖的代谢产物来引起读者的关注。
2. 正文:2.1 氨基葡萄糖的代谢产物要点1:详细介绍氨基葡萄糖在人体内代谢产生的具体物质和过程。
包括代谢途径、酶的参与、反应产物等方面的内容。
重点关注氨基葡萄糖代谢产物在生物体内的功能和作用,以及与相关疾病的关系。
2.2 氨基葡萄糖的代谢产物要点2:进一步探讨氨基葡萄糖代谢产物在不同生理、病理状态下的变化及其对人体健康的影响。
可以结合近期研究成果,分析不同代谢通路的调控机制和关键因子,解释代谢产物的分子机理。
3. 结论:3.1 总结:概括氨基葡萄糖的代谢产物的研究现状和取得的进展,强调相关发现的重要性和价值。
O-GlcNAc转移酶在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义
O-GlcNAc转移酶在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义崔银星;孔菲;赵旭;高普均【摘要】目的:探讨氧连氮-乙酰葡萄糖胺转移酶(OGT)在原发性肝细胞癌(HCC)组织、细胞及血清中表达情况,阐明OGT在HCC的诊断和治疗中的意义.方法:采用Western blotting法分别检测20例HCC组织和癌旁组织中以及8例肝癌细胞株和正常人肝细胞裂解物中OGT蛋白表达水平,采用直接酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测20名健康志愿者、肝硬化(LC)、HCC患者血清中OGT蛋白表达水平,分析HCC组织、细胞、血清中OGT蛋白表达水平与肿瘤发生发展的关系.结果:Western blotting检测,OGT在HCC肿瘤组织及相对应癌旁组织中均有表达,HCC患者肿瘤组织中OGT阳性表达率高于相对应癌旁组织(P<0.05);同时OGT在肝细胞癌株及正常人肝细胞裂解物中均有表达,而肝细胞癌株中阳性表达率高于正常人肝细胞裂解物(P<0.05).ELISA法检测,HCC和LC患者血清中OGT表达水平均高于健康志愿者(P<0.05).结论:OGT在HCC肿瘤组织中表达升高,OGT 有望成为HCC新的诊断靶点.%Objective:To investigate the expressions of O-GlcNAc transferase (OGT) in the hepatocellular carcinoma (HCC) tissue,cells and serum,and to clarify the significance of OGT in diagnosis and treatment of HCC.Methods:Western blotting method was used to detect the expression levels of OGT in 20 samples of HCC tissue and matched non-tumor tissue,8 hepatoma cell lines and normal liver (human) cell lysate.The expression levels of serum OGT were detected by direct ELISA in 20 liver cirrhosis (LC) patients,20 HCC patients and 20 healthy volunteers.The relationship between the expression levels of protein in HCC tissue,cells and serum and the occurrence and development of tumorwere analyzed.Results:The Western blotting results showed there were expressions of OGT in both HCC tissue and matched non-tumor tissue;The positive expression rate of OGT in HCC tissue was significantly higher than that in non-tumor tissue (P<0.05).There were expressions of OGT in both hepatoma cell lines and normal liver (human) cell lysate;the positive expression rate of OGT in HCC cell lysate was significantly higher than that in the normal liver cell lysate (P<0.05).The result of direct ELISA showed that the serum OGT levels of the LC and HCC patients were equally higher than that of the healthy volunteers (P<0.05).Conclusion:OGT highly expresses in HCC tissue and OGT is a promising biomarker for the diagnosis of HCC.【期刊名称】《吉林大学学报(医学版)》【年(卷),期】2017(043)005【总页数】5页(P980-984)【关键词】氧连氮-乙酰葡萄糖胺;氧连氮-乙酰葡萄糖胺转移酶;肝细胞癌;蛋白免疫印迹法;酶联免疫吸附测定法【作者】崔银星;孔菲;赵旭;高普均【作者单位】吉林大学第一医院康复医学科,吉林长春130021;吉林大学第一医院肝胆胰内科,吉林长春130021;吉林大学第一医院肝胆胰内科,吉林长春130021;吉林大学第一医院肝胆胰内科,吉林长春130021【正文语种】中文【中图分类】R575原发性肝癌是常见恶性肿瘤,原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是其最常见的病理类型,约占原发性肝癌90%以上,其发病率居全球恶性肿瘤发病率第6位,病死率居全球恶性肿瘤死亡率的第3位[1]。
RNA修饰的发展及其生物学功能解析
RNA修饰的发展及其生物学功能解析RNA修饰是近年来在RNA生物学领域中不断突破的一个新领域,在这个领域,科学家们不断发现各种各样的RNA修饰方式,并深入研究它们在生物体内的作用以及分子机制。
这些研究的结果表明,RNA修饰在生物学中具有很重要的生物学功能。
一、 RNA修饰的基本概念RNA是一类重要的生物分子,在生物学中起到了很多重要的生物学功能。
RNA修饰是指RNA分子中的RNA核酸序列上发生的各种化学修饰。
目前已经发现有一千多种RNA修饰方式。
RNA修饰的产生是通过一些化学反应来实现的,这些化学反应包括脱氧核糖核酸(DNA)修饰反应、转化反应和降解反应等。
RNA修饰的种类主要包括甲基化、糖基化、酰基化、磷酸化、烷基化、硝化等,在不同的修饰方式中,每一种修饰方式都有其特定的生物学功能。
二、 RNA修饰的分类RNA修饰主要包括以下七类:1.甲基化:m6A代表N6-甲基腺苷。
该方式是目前已知最常见的RNA修饰方式。
2.二甲基化:m1A代表1-甲基腺苷。
3.硝化:类似于蛋白质硝化,由一氧化氮或另外一些反应物通过化学反应生成RNA上的硝基基团。
4.糖基化:包括样式的年轻(GlcNAc或GlcN)修饰和其他糖基化方式。
5.磷酸化:目前已知的主要是两种磷酸化卡痕标记,5'端的磷酸标记和3'端的磷酸标记。
6.酰化:是指腺苷上连接一种酰基。
7.乙酸化:在RNA中加入乙酰辅酶A。
以上七类RNA修饰至今还在不断新增,这些新的RNA修饰方式都极具科学研究价值。
三、 RNA修饰的生物学功能RNA修饰作为RNA生物学领域新兴的研究领域,具有很多重要的生物学功能:1. 影响RNA稳定性和降解,在RNA不断塑形的过程中,RNA修饰会对RNA的稳定性和降解速度产生重要影响。
2. 影响RNA二级和三级结构形成,在RNA的折叠中,RNA修饰会影响其二级和三级结构的形成过程。
3. 影响可识别性与RNA与其它生物分子的互作性。
(整理)南农细胞生物学6.
第八章细胞核与染色体细胞核是真核细胞内最大、最重要的细胞器,是细胞遗传与代谢的调控中心。
自1831年R.Brown首次命名细胞核(nucleus)以来,对于细胞核的研究始终倍受重视。
所有真核细胞,除高等植物韧皮部成熟的筛管和哺乳动物成熟的红细胞等极少数例外,都含有细胞核。
一般说来,真核细胞失去细胞核后不久即导致细胞胞核直径一般为5~20 μm,低等植物细胞核直径约1—4μm。
细胞核主要由核被膜、染色质、核仁及核骨架组成(图8—1)。
细胞核是遗传信息的贮存场所,在这里进行基因复制、转录和转录初产物的加工过程,从而控制细胞的遗传与代谢活动。
第一节核被膜与核孔复合体核被膜(nuclear envelope)位于间期细胞核的最外层,是细胞核与细胞质之间的界膜。
由于它的特殊位置决定了它有两方面的功能,一方面核被膜构成了核、质之间的天然选择性屏障,它将细胞分成核与质两大结构与功能区域:DNA复制、RNA转录与加工在核内进行,蛋白质翻译则局限在细胞质中。
这样就避免了彼此相互干扰,使细胞的生命活动更加秩序井然;同时核被膜还能保护核内的DNA分子免受由于细胞骨架运动所产生的机械力的损伤。
另一方面,核被膜并不是完全封闭的,核质之间有频繁的物质交换与信息交流,这主要是通过核被膜上的核孔复合体进行的。
核被膜在普通光学显微镜下难以分辨,在相差显微镜下,由于细胞核与细胞质的折光率不同,可以看出核被膜的界限,只有在电子显微镜下才能看清核被膜的细微结构。
关于核被膜的结构组成,目前有两种看法,一种意见认为核被膜有三种结构组分,即双层核膜、核孔复合体与核纤层(图8—1)。
核纤层(nuclear lamina)紧贴内层核膜下,是一层由纤维蛋白构成的网络结构,它与胞质中间纤维、核内骨架有密切联系。
当真核细胞用非离子去垢剂、核酸酶及高盐溶液等分级抽提后,核纤层往往与核孔复合体、胞质中间纤维、核内骨架一起被保存下来,成为贯穿于细胞核与细胞质的骨架结构体系;由此又有人认为核纤层不应该属于核被膜的一种结构组分。
核酸修饰的生物学意义和临床应用
核酸修饰的生物学意义和临床应用核酸是生命体中重要的分子,它们承担着基因信息的传递和蛋白质合成的功能。
为了使核酸在细胞内发挥更为灵活多样的生物学功能,生物体通过对核酸进行化学修饰来扩展其多样性和复杂性。
对核酸的化学修饰已经成为生命科学领域的研究热点,其在生物学及临床医学中的应用前景广阔。
1.核酸修饰的生物学意义核酸修饰是指在核酸分子中特定位置上引入不同的化学基团,改变其化学结构和生物学性质。
核酸修饰在基因表达、RNA加工、翻译和调控等方面发挥着重要作用。
下面我们来介绍几个常见的核酸修饰类型及其生物学意义。
(1)糖基化糖基化是指在核酸的糖基上修饰一些糖分子,如甲基化、羟甲基化、乙酰化、葡萄糖基化等。
这些糖基因素影响核酸的结构和功能,进而影响基因表达。
例如,糖基化可以使DNA变得更加致密,使染色体产生更强的紧密度,保护基因不受外界的损伤。
(2)甲基化甲基化是指通过向DNA链上添加甲基基团来修饰DNA。
这种修饰可以改变DNA双链的结构,进而影响基因表达。
这种修饰还可以通过调节DNA结构来控制DNA复制和维持每个细胞中DNA的相对稳定性。
(3)氧化修饰氧化修饰是指通过对DNA链进行氧化处理,并引入一些有机基团进行修饰。
这种修饰可以抑制DNA的复制,减少遗传变异等,同时还可以参与细胞信号传递等功能。
(4)RNA修饰RNA修饰是指在RNA分子中加入一些化学基团,如甲基、脱氧核苷酸、二硫键等。
这些修饰可以影响RNA的结构、稳定性和功能。
例如N6-methyladenosine(m6A)修饰是RNA修饰中最为常见的一种。
m6A修饰通过介导RNA的裂解和降解来调节RNA 的稳定性和转录后修饰。
2. 核酸修饰在临床中的应用随着对核酸修饰的研究不断深化,核酸修饰已经成为生物医学领域的新热点。
下面我们来看看核酸修饰在临床医学中的应用。
(1)RNA修饰在肿瘤生物学中的应用m6A修饰在癌症中的发生和发展中扮演着重要的角色。
一旦m6A修饰失调,会影响RNA的稳定性、可读性和翻译效率,进而促进癌细胞的生长和转移。
n-乙酰-d氨基葡萄糖的功能
n-乙酰-d氨基葡萄糖的功能
N-乙酰-D-氨基葡萄糖(简称GlcNAc)是一种重要的生物分子,具有多种功能和作用。
首先,它是葡萄糖的衍生物,是细胞内重要
的代谢产物,参与糖代谢途径。
其次,GlcNAc在生物体内具有糖基
化修饰作用,可以修饰蛋白质、脂质和核酸,参与细胞信号传导、
细胞黏附和免疫应答等生物过程。
此外,GlcNAc还是壳多糖和凝集
素的组成单位,参与细胞外基质的形成和细胞间相互作用。
在免疫
系统中,GlcNAc也参与调节免疫细胞的功能,如在炎症反应和过敏
反应中发挥重要作用。
另外,GlcNAc还参与了细胞凋亡、细胞增殖
和肿瘤发生等生理和病理过程。
总的来说,N-乙酰-D-氨基葡萄糖在
细胞代谢、信号传导、免疫调节等多个方面都发挥着重要的功能和
作用。
O-GlcNAc糖基化修饰和Akt1对胃癌细胞体外增殖及侵袭力的影响
O-GlcNAc糖基化修饰和Akt1对胃癌细胞体外增殖及侵袭力的影响章诺贝;陈新【摘要】目的探讨O-连接N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)糖基化修饰对胃癌细胞体外增殖及侵袭力的影响,并评价Akt1在O-GlcNAc糖基化促进胃癌细胞体外增殖及侵袭过程中的作用.方法通过使O-GlcNAc转移酶(OGT)过表达(过表达OGT组)或沉默表达(沉默OGT组)及使用O-GlcNAc水解酶(OGA)特异性抑制剂Thiamet-G(抑制剂组)下调O-GlcNAc水解酶活性(抑制剂组)等构建O-GlcNAc糖基化水平升高或降低的细胞模型;采用MTT法检测各组胃癌细胞增殖活力;软琼脂集落形成实验观察各组胃癌细胞集落形成;Transwell细胞迁移实验各组胃癌细胞体外迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组胃癌细胞Akt1活性;Thiamet-G处理Akt1表达沉默(沉默Akt1组)的胃癌细胞以评价Akt1在O-GlcNAc糖基化促进胃癌细胞侵袭中的作用;利用Thiamet-G处理Akt1过表达(过表达Akt1组)的胃癌细胞以进一步验证Akt1在O-GlcNAc糖基化调控胃癌细胞侵袭性过程中的作用.结果 O-GlcNAc糖基化水平升高可促进胃癌细胞增殖并显著提高细胞集落形成、体外迁移和侵袭的能力;Akt1活性被由O-GlcNAc糖基化水平升高所介导的Ser473磷酸化上调而激活;Thiamet-G诱导的细胞侵袭性被Akt1 shRNA所抑制;Akt1高表达可进一步促进由Thiamet-G诱导的细胞侵袭性增强.结论 O-GlcNAc糖基化可部分通过Akt1途径增强胃癌细胞的体外增殖及侵袭力.%Objective To study the influence of O-GlcNAcylation on on proliferation and invasion of gastric cancer cells and evaluate the role of Aktl on O-GlcNAcylation promotting cells proliferation and invasion in gastric cancer.Methods Build the cell model:O-GlcNAc glycosylation levelsrise or fall.The cell viability was determine by MTT.To investigate whether O-GlcNAcylation affected colony formation ability of gastric cancer cells,soft agar colony assays were carried out.Cell migration or invasion was using transwell chambers.The expression of Akt1 was detected through Western blot.Thiamet-G was used to eualuate the role of Akt1 on O-Gcnac cylation regulating invasion in gastric Cancei.Results O-GlcNAcylation was increased the gastric cancer cells proliferation ability,colony formation ability,migration and invasion ability in vitro.Akt1 was activated by Ser473 phosphorylation upregulation though O-GlcNAcylation.Akt1 shRNA was inhibition the cell invasive which induced by Thiamet-G.Akt1 overexpression was promoted by Thiamet-G-induced cell invasion.Conclusion O-GlcNAcylation enhanced oncogenic phenotypes possibly partially involving Akt1.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2017(046)008【总页数】6页(P1027-1031,1035)【关键词】胃肿瘤;肿瘤侵润;细胞增殖;O-GlcNAc糖基化;Akt1【作者】章诺贝;陈新【作者单位】南昌大学第二附属医院消化科 330006;南昌大学第二附属医院核医学科 330006【正文语种】中文【中图分类】R735.7O-连接N-乙酰氨基葡萄糖(O-Linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)糖基化是细胞核与细胞质蛋白的丝氨酸和苏氨酸残基以O-GlcNAc修饰的一种高丰度可逆性翻译后修饰方式,它被认为能够调节细胞内蛋白质的功能及活性[1]。
O-GlcNAc糖基化
百泰派克生物科技
O-GlcNAc糖基化
糖基化修饰是一种重要的蛋白质翻译后修饰,旨在蛋白质合成时或合成后在特定的糖基化位点加上短链的碳水化合物残基(寡糖或聚糖)的过程。
糖蛋白中糖与肽链以糖苷键共价连接,有3种主要的类型:N-连接糖基化、O-连接糖基化和糖基磷脂酰肌醇锚。
O型糖与肽链上的Ser或Thr的自由羟基形成O-型糖苷键共价结合的过程就称为O-GlcNAc糖基化或O-连接糖基化、O-糖基化。
该过程中糖基转移酶OGT利用核糖UDP-GlcNAc上的N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)在蛋白的丝氨酸或苏氨酸羟基上形成O-GlcNAc修饰。
研究表明O-GlcNAc修饰在很多重要的生物学过程中起调控作用,如基因转录和细胞代谢等。
百泰派克生物科技提供O糖修饰及修饰位点分析服务,可对修饰位点、特定的聚糖种类进行鉴定,对O糖修饰类型及修饰位置进行分析,解析O糖的结构及位置,且可实现聚糖修饰定量分析,欢迎免费咨询。
蛋白糖基化修饰和疾病研究进展
蛋白糖基化修饰和疾病研究进展摘要:糖类、蛋白质、核酸是构成生物体的三类大分子物质。
糖类除了供能和作为结构物质基础,还在细胞和蛋白质功能方面扮演着十分重要的角色。
在多种多样的生物过程中,从胚胎发育,细胞分裂,到蛋白质结构调控,糖基化都发挥作用。
在正常的生理活动和疾病过程中,多种不同蛋白质的糖基化状态发生显著变化。
因此,检测蛋白质糖基化的实验,有助于疾病预后和治疗目的的研究。
蛋白质糖基化是一种丰度高、结构类型特别复杂的蛋白质翻译后修饰类型,具有很强的宏观不均一性和微观不均一性。
据估计,细胞表达的蛋白质有50%以上为糖蛋白。
但目前为止,只有不到20%的蛋白质糖基化得到了实验证实。
蛋白质的糖基化酶促反应是一个复杂且精密的过程。
通过对蛋白质进行复杂而精确的糖基化修饰,细胞内可以产生丰富的蛋白质类型;通过对各类糖基化信号途径的精密调控,细胞中蛋白质的功能得到了极大的拓展。
丰富多样的糖蛋白在细胞内/间的信号转导、免疫调控、蛋白质稳定性维持等过程中都发挥着重要作用。
一、蛋白质糖基化主要类型与特点蛋白质糖基化修饰是在糖基转移酶的催化作用下糖链分子与蛋白质氨基酸侧链活性基团反应生成糖苷键,从而使糖链连接到蛋白质上。
根据糖基化发生的化学键类型,可将蛋白糖基化修饰主要分为N-糖基化和O-糖基化。
(一)N-糖基化修饰N-糖基化修饰发生在肽链的天冬酰胺(Asn)上,是最常见的糖基化修饰类型。
N-糖基化具有两个重要特点,第一个是具有位点特异性,N-糖基转移酶能识别特定的氨基酸基序Asn-X-Thr/Ser,(X可以是除脯氨酸之外任何氨基酸)进行修饰。
第二个是五糖核心,N-糖基化糖链都包含一个五糖核心,该核心由2个乙酰葡糖胺和3个甘露糖组成,五糖核心可进一步被修饰上其他糖,形成复杂的N-糖链结构[1]。
这两个特点为N-糖蛋白/糖肽的解析提供了重要依据。
(二)O-糖基化修饰O-糖基化修饰通常发生在肽链的丝氨酸/苏氨酸(Ser/Thr)上,糖链与Ser/Thr侧链羟基在酶催化下产生O-糖苷键。
o-glcnac糖基化修饰nav1.5蛋白参与糖尿病心肌损伤所致心律失常
中文摘要中文摘要研究背景:糖尿病已经成为威胁全球人类健康的主要威胁之一,并且其心血管并发症是糖尿病患者死亡的重要原因。
糖尿病性心脏损伤(diabetic heart injury,DHI)是糖尿病的常见心血管并发症,其定义为在无冠状动脉硬化和高血压等疾病情况下,单纯由糖尿病长期发展而诱发的心肌结构和功能的损伤。
DHI早期的临床表现以心肌舒张功能障碍为主,晚期以心肌收缩功能障碍为主。
长期不可逆的DHI最终导致多种心律失常的发生,如:室性早搏(室早)和室性心动过速(室速),甚至心源性猝死。
上述疾病进程中的详细分子机制以及涉及的相关信号通路十分复杂。
DHI诱发的心律失常其可能的分子机制如下:内质网应激、细胞内钙稳态失衡和细胞内离子稳态的离子通道功能及表达异常等。
尤其是离子通道蛋白和功能在其中的作用及相关调控机制仍然知之甚少。
最新研究显示,O-GlcNAc糖基化通过参与调控心肌细胞内代谢和细胞的昼夜节律,从而促进了心律失常的易感性增加。
我们前期结果发现,链脲佐菌素(STZ)诱导的DHI 表型中的心肌细胞胞浆内钠离子通道蛋白Nav1.5表达增加,蛋白的O-GlcNAc 糖基化水平升高。
然而,O-GlcNAc糖基化Nav1.5蛋白在DHI诱导的心律失常中的作用及其具体分子机制尚未阐明。
研究目的:尽管研究发现O-GlcNAc糖基化在DHI的发生和发展中发挥重要作用,然而其在DHI诱导的心律失常的分子机制仍不明确。
为了研究O-GlcNAc糖基化及钠离子通道蛋白Nav1.5在DHI诱导的心律失常中的作用,我们通过在体动物和离体细胞实验证实O-GlcNAc糖基化Nav1.5参与DHI诱导的心律失常,并探讨其潜在的分子机制,为将来防治糖尿病患者发生心律失常的干预靶点提供理论依据。
研究方法:本研究动物实验所采用实验方法包括:血糖和无创血压测定、超声心动图中文摘要(Vevo2100)、心电图(ECG)采集与分析(TA11CTA-F40)、程序性电刺激实验(Model 2352 Programmable Stimulator)、real-time RT-PCR、Western Blot、免疫共沉淀、免疫荧光标记和组织学染色等。
蛋白质糖基化的功能定位及生物学意义
蛋白质糖基化的功能定位及生物学意义
蛋白质糖基化是指糖类分子与蛋白质分子共价结合的过程。
在这
个过程中,糖类分子(如葡萄糖和半乳糖)会与蛋白质的氨基酸或羟
基分子结合,形成糖基化蛋白质。
这种化学修饰过程在生物学中扮演
着重要的角色,影响蛋白质的功能、稳定性和亲和性。
以下是蛋白质
糖基化的功能定位及生物学意义。
1. 结构功能:蛋白质糖基化可以改变蛋白质的结构,影响蛋白
质的稳定性、抗原性和机械强度等。
在一些蛋白质中,糖基化可以增
加蛋白质的表面积,促进与其他分子的相互作用,从而实现生物学过
程中的多种信号传递和识别。
2. 保护作用:糖基化可以保护蛋白质免受降解或氧化的损害,
从而保持蛋白质的结构和功能。
糖基化还可以增加蛋白质在细胞外的
存活时间,在一些病毒和细菌中,糖基化还可以抵御免疫系统的攻击。
3. 调节过程:蛋白质糖基化可以调节蛋白质的功能和亲和性。
糖基化可以影响蛋白质结构,从而影响其酶活性、受体结合能力和信
号转导,例如葡萄糖转运蛋白的糖基化可以影响其对葡萄糖的运输速
率和亲和性。
4. 疾病相关:在许多疾病中,蛋白质糖基化会影响其功能和稳
定性,导致疾病的发生和发展。
例如,糖基化过程可能参与癌症的诱导、增殖和转移。
总之,蛋白质糖基化在生物学中扮演着重要的角色,其功能定位
涉及结构功能、保护作用、调节过程和疾病相关。
随着对蛋白质糖基
化的深入研究,我们可以更好地理解生物学过程中蛋白质的功能和稳
定性,为疾病治疗和新药研发提供更精细的方案和思路。
O-GlcNAc_糖基化修饰在恶性肿瘤中作用的研究进展
O-GlcNAc糖基化修饰在恶性肿瘤中作用的研究进展彭佳欣,张自辉,刘婧纯,洪莉武汉大学人民医院妇产科,武汉430060摘要:O连接N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)糖基化修饰是一种动态可逆的蛋白质翻译后单糖修饰,通过β-糖苷键将GlcNAc连接到蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上,对维持正常的细胞功能至关重要。
近年研究发现,在结肠癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌等实体肿瘤中O-GlcNAc糖基化修饰异常。
O-GlcNAc糖基化修饰异常是肿瘤细胞的重要特征之一,不仅能促进肿瘤细胞恶性增殖、侵袭、迁移以及血管生成和免疫逃逸,增强干细胞特性和耐药性,还能干扰细胞内葡萄糖、脂质和氨基酸代谢。
但目前O-GlcNAc糖基化修饰在恶性肿瘤中的确切作用机制尚不完全清楚,还有待于进一步研究。
关键词:恶性肿瘤;蛋白质翻译后修饰;糖基化修饰;O连接N-乙酰氨基葡萄糖doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2024.13.024中图分类号:R73 文献标志码:A 文章编号:1002-266X(2024)13-0098-05随着人口老龄化加剧,恶性肿瘤的疾病负担在全球范围内持续上升,恶性肿瘤的防控形势非常严峻。
因此,深入研究恶性肿瘤的发病机制,制定符合卫生经济学要求的预防和控制策略仍是当务之急[1]。
蛋白质翻译后修饰是指翻译后的蛋白质以共价方式在氨基酸残基上添加或移除特定基团,继而改变蛋白质构象、定位、功能等的化学修饰过程。
常见的蛋白质翻译后修饰有磷酸化、乙酰化、泛素化、甲基化和糖基化等[2],这些修饰方式在诸多生命活动调控中扮演至关重要的角色。
O连接N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)糖基化修饰是一种动态可逆的蛋白质翻译后单糖修饰,通过β-糖苷键将GlcNAc连接到蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上。
O-GlcNAc 糖基化修饰可在多个水平上调节蛋白质功能,如酶活性、能量代谢、亚细胞定位、分子间相互作用等,参与调控细胞内多种重要的生物学过程[3]。
脂多糖预处理通过升高糖基化修饰减轻小鼠心肌缺血再灌注损伤
doi:10.16252/j.akV imn1004-0501-2021.04.004化脂多糖预处理通过升高糖基化修饰减轻小鼠心肌缺血再灌注损伤卿羽1>2,钟婷1,刘汉林1,刘英海2,林露2,吴畏1>2!(1.西南医科大学临床医学院,四川泸州646000;2.中国人民解放军西部战区总医院麻醉科,四川成都610083)!摘要】目的探讨脂多糖预处理通过升高糖基化修饰对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。
方法将30只雄性C57BL6小鼠随机分为对照(NC)组、脂多糖预处理(NL)组(n=15)。
NL组连续7d腹腔注射脂多糖(LPS)1.5mg/ kg•d对小鼠进行脂多糖预处理,两组小鼠分别处理14d后予以结扎冠状动脉左前降支(LAD)30min,而后恢复血流灌注24h从而建立心肌缺血再灌注(I/R)损伤模型"通过监测一般情况、体质量变化、空腹血糖变化评估小鼠状态,WesWrn Blot法检测心肌组织炎症因子TNF-#糖基化修饰(O-GlcNAc)的表达变化,伊文氏蓝-氯化三苯基四氮哇(TTC)双染色法测定小鼠心肌梗死面积"结果与NC组相比,NL组小鼠从注射LPS开始体质量呈现先下降后缓慢回升趋势,两组小鼠空腹血糖变化差异无统计学意义"与NC组相比,NL组小鼠心肌组织炎症因子TNF-水平升高(P<0.05)"与NC组相比,NL组小鼠心肌I/R处理后其梗死面积减小(P<0.05)o与NC组相比,NL组小鼠心肌组织总体糖基化修饰水平升高(P<0.05)o结论脂多糖预处理可以通过升高心肌组织蛋白质糖基化修饰水平对小鼠心肌缺血再灌注损伤产生保护作用"!关键词】脂多糖预处理;心肌缺血再灌注损伤&糖基化修饰!中图分类号】R322.1T[文献标志码】A[文章编号】1004-0501(2021)04-338-04Lipopolys*cch*dbe Preconditionin+to Alleviate Myoc*rdi*l Ischemn-Reperfiision Injury&Mice by Incre*sin+Gly-cosyl*Uon.Qing Yu1,2,Zhong Ting1,Liu Hanlin-,et al.1.Southwest Medical University ScCool l Clinical Meeicine,Luzhoo,Sichuan646000;2.DepaSment cf Anesthesiology,Gneral Hospital o U Western Theater Command l Chinese People's Liberahoo Army, Chengdu,Scchuan610083,Chcna.$Abstract]Objective To investigate protective effect of lipopolysaccharide preconditioning on myocardial ischemig-reper-fusion injury in micc by increasing glycosylation.MetUods30male C57BL/6micc were randomly divided into control group (CG,n=15)and lipopolysaccharide group(TG,n=15).Lipopolysaccharide preconditioning was performed on micc in TG group by intraperitoneal injection of lipopolysaccharide(LPS)1.5mg/kg•d for7d and left anterior descending coronara ar-tery(LAD)was ligated for30min after14days of treatment respectively.Blood perfusion was restored for24h to establish myocardial ischemia reperfusion(I/R)injure model.State of micc was assessed by monitoring general conditions,changes of body weight and fasting blood glucose.Expressions of inflammatora factor TNF-d and protein glycosylation modification(O-GLCNAC)in myocardial tissue were detected by western blot.Myocardial infarction area was determined by Evan's blue-triphenyl tetrazolium chloride(TTC)double staining.Results Compared with CG group,micc weight in TG group decreased first and then slowly rose after LPS injection with no significant dVerenco in fasting blood glucose.TNF-d in myocardium was increased(P<0.05).Myocardial infarction area【基金项目】四川省省级科技计划项目(编号:2018RZ0135)△通信作者,E-mgl:wuweizj@[10]Xiao B,Kuper H,Guan C,et al Rapid assessment of avoidable b/nd-nes s in three counties,Jian/al Provincc,China*J+.Bitish J Ophthal-moy,2010,94(11):1437-14422[11]Pradhan S,Deshmukh A,Shrestha PG,et al Prevalencc of b/ndnvsand cataract surgical ccverayv in Narayani zone,Nepal:A rapid assess-2018,102:291-294.[12]雷春涛,乔利峰,樊映川,等.四川省安岳县可避免盲白内障的快速评估调查分析*J]•中华医学杂志,2013,47(93):3471D473. [13]乔利峰,雷春涛,樊映川,等.四川省冕宁县可避免盲快速评估调查分析*J]•实用防盲技术实用防盲技术,2018,13(3)&125-129.ment of avoidable b/ndnv s(RAAB)study[J+.BOtish J Ophthalmol,(收稿时间:2020-12-23)decreased after ER treatment!?<0.05).Total glycosylation of myocardial tissue was increased(?<0.05).Conclusion Lipopo-JsacchaWde preconditioning could protect mico from myocardial ischemia-reperfusion injury by increasing protein glycosylation in myocardial tissue.$Key words]lipopolysacchaWde;myocardial ischemia-reperfusion injum;glycosylation modification心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-repeVu-sion injuy,MIRI)是指心肌组织细胞低灌流缺血后获得血液再供应时,不但未使组织细胞缺血性损害减轻或恢复,反而会使缺血性损伤加重的反应[1]。
O-GlcNAc糖基化修饰诱导髓核细胞自噬作用机制的体外实验
O-GlcNAc糖基化修饰诱导髓核细胞自噬作用机制的体外实验孙鹏霄;胡洪波;李政;李玉民【摘要】目的:观察髓核(NP)细胞O-GlcNAc糖基化修饰对其自噬的调节作用。
方法:选取12周龄健康雄性SD大鼠,提取NP细胞进行分离和培养,取第二代SD大鼠NP细胞分为对照组和实验组;对照组和实验组均经过压力培养的第二代SD大鼠髓核细胞,实验组分别选用氧联乙酰葡萄糖胺转移酶(OGT组)和氧联乙酰葡萄糖胺水解酶(OGA组)进行干预;采用流式细胞技术定量分析NP细胞在OGT/OGA作用后细胞存活比例,采用实时荧光定量PCR于在0 h、12 h、 24 h、36 h及48 h时对NP细胞自噬相关基因LC3B、Beclin-1和凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2及Bax的表达。
结果:随着培养时间延续,自噬空泡阳性细胞数目逐渐增加,36 h时达峰值,48 h后减少;OGA组与对照组比较,24 h、36 h及48 h时的阳性细胞比例高于对照组,凋亡细胞比例低于对照组,存活细胞比例高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);SD大鼠NP细胞内随着培养时间的延续,NP细胞中Bcl-2基因的表达减少,Caspase-3及Bax基因的表达增多,差异有统计学意义(P<0.05);随着培养时间的延续,NP细胞中LC3B与Beclin-1基因的表达增加,36 h达峰值,48 h降低,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:OGA能够通过抑制O-GlcNAc糖基化修饰过程来促进NP细胞自噬过程的发生,进而对NP细胞凋亡过程发挥抑制作用。
【期刊名称】《贵州医科大学学报》【年(卷),期】2019(044)004【总页数】7页(P453-458)【关键词】脊髓肿瘤;细胞凋亡;自噬;N-乙酰葡萄糖胺;椎间盘退行性变【作者】孙鹏霄;胡洪波;李政;李玉民【作者单位】[1]渭南市中心医院骨外科,陕西渭南714000;[1]渭南市中心医院骨外科,陕西渭南714000;[1]渭南市中心医院骨外科,陕西渭南714000;[1]渭南市中心医院骨外科,陕西渭南714000;【正文语种】中文【中图分类】R739.42椎间盘退化性病变(intervertebral disc degeneration,IVD)是造成下腰痛的主要原因,其病理机制是衰老的髓核(nucleus pulpous,NP)细胞凋亡促进炎性细胞因子的分泌、细胞内免疫细胞的聚集以及细胞外基质的数量减少,同时增加的降解酶会进一步消化细胞外基质组织、合成不足的细胞外基质发生结构变化容易导致椎间盘的异常负荷,从而进一步导致细胞外基质分解,最终导致椎间盘结构破坏。
糖基化反应机理
糖基化反应机理糖基化是在酶的控制下,蛋白质或脂质附加上糖类的过程,起始于内质网,结束于高尔基体。
在糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键。
蛋白质经过糖基化作用,形成糖蛋白。
糖基化是对蛋白的重要的修饰作用,有调节蛋白质功能作用。
N-连接的糖链合成起始于内质网,完成于高尔基体。
在内质网形成的糖蛋白具有相似的糖链,由Cis面进入高尔基体后,在各膜囊之间的转运过程中,发生了一系列有序的加工和修饰,原来糖链中的大部分甘露糖被切除,但又被多种糖基转移酶依次加上了不同类型的糖分子,形成了结构各异的寡糖链。
糖蛋白的空间结构决定了它可以和那一种糖基转移酶结合,发生特定的糖基化修饰。
许多糖蛋白同时具有N-连接的糖链和O-连接的糖链。
O-连接的糖基化在高尔基体中进行,通常第一个连接上去的糖单元是N-乙酰半乳糖,连接的部位为Ser、Thr和Hyp的羟基,然后逐次将糖基转移到上去形成寡糖链,糖的供体同样为核苷糖,如UDP-半乳糖。
糖基化的结果使不同的蛋白质打上不同的标记,改变多肽的构象和增加蛋白质的稳定性。
在高尔基体上还可以将一至多个氨基聚糖链通过木糖安装在核心蛋白的丝氨酸残基上,形成蛋白聚糖。
这类蛋白有些被分泌到细胞外形成细胞外基质或粘液层,有些锚定在膜上。
糖基化是在酶的控制下,蛋白质或脂质附加上糖类的过程,发生于内质网。
在糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键。
蛋白质经过糖基化作用,形成糖蛋白。
糖基化是对蛋白的重要的修饰作用,有调节蛋白质功能作用。
糖基化指的是什么?糖基化是指碳水化合物(或"糖"),即糖基供体,与另一分子(糖基受体)的羟基或其他官能团相连,以形成糖共轭物的反应。
在生物学中(但并不总是在化学中),糖基化通常指的是酶催化的反应,而糖化(也有"非酶促糖化"和"非酶促糖基化")可能指的是非酶促反应(尽管在实践中,"糖化"通常更具体地指的是Maillard型反应)。
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万方数据万方数据·140·董方,等.平分型G1cNAc糖基化修饰的生物学功能蛋白分选的负性调节信号n21。
3.3生殖发育调控人类精子缺乏MHCI类分子,使其易于被NK细胞溶解。
而MHcI阴性的肿瘤细胞通过在肿瘤细胞表面表达足量的平分型N一聚糖,而阻断NK细胞的溶解作用。
因此,精细胞也可能通过同样的机翩选避NK的细胞溶解作用。
利用超敏质谱仪对精细胞N一聚糖测序可以检测到3类N一聚糖:①高甘露糖塑;②二天线平分型;③以hisx和IJewis丫作为终端修饰的二天线、三天线、四天线型。
糖蛋白染色显示,携带呐穿列糖蛋白分布于顶体莉不是位于浆膜;丽功能缺陷的精子则表现为抗娜抗体分布异常(图2)。
推测惨饰聚糖可以抑制生殖道内计对精子糖蛋白的抗原特异性免疫反嘘。
嘲』III匕,人类精子哟主要聚糖与先天性及获得性免疫反瘟哟抑制有关。
这些结果支持哺乳类动物表邀碳水化合物与|配子《耨删魄哆保护及人类在子宫棚哟发育有关。
某些特殊类型的细胞表达特异性糖姐模式,惜此发挥相嘘睡句生物学功能‘引。
嘲2久类储子表达的主要N-聚糖k:高甘露糖型(Ma呜9tol湖舢:);瞻::件有或不件宥核心者澡糖者藻糖修饰哟平分型二天线结构;lO:盖、兰、嘲毙线聚糖,板心砻澡糖岩藻糖修饰,镌带呱嫡毋致/或蜥r谬饰赃娠lf目关糖蜚囟【(畔e粤l堋呀啪舯幽峨硼挈蜘o_删坩i拣,‰9是反刍勘物滋养层细胞分泌韵主要蛋白。
,遨些蛋白储存在滋养屡巨大细胞分秘颗粒恂.,与母体子宫止发细胞融合后释放进入母体器。
雷。
妊娠串期Ip黻最丰寓的弘聚糖是四无线核心绪!藻糖基眈修饰辅构’,并连接有平分型蛾Nk。
组成湖8航塬[№№娆.,3(·G姗№鲫、49l创必.,删l渊№]哟聚糖均为删天线型。
采用识别铷薯睨原的单克糟醐谢:(心埴ll9对分泌颗粒染色,分断:显示、,鳃娠.娩出话歪分娩前数天.,可以检测判黜a航原的存在。
I山褴凝集素t(t脚溅i珏删脚I卜sislectin)(该凝集素可以与a2,3·唾液酸修饰的乳糖氨)组织化学分析显示,该分泌颗粒在妊娠32d及分娩前呈阳性。
提示在妊娠不同阶段PAGs的N一聚糖修饰模式有相应的改变,这些聚糖的不同糖型可能介导不同妊娠阶段的不同生理功能【l引。
平分型N一聚糖在发育调控中的具体功能虽然还不明确,但在进化上高度保守。
对斑马鱼的胚胎发育过程中N一聚糖表达动态分析显示,受精后4~7hN.聚糖仅仅可以检测到,但12—15hN一聚糖表达显著增加。
对这些聚糖的结构分析表明,含有或不含有岩藻糖和(或)平分型GlcNAc残基的复合型二天线N一聚糖是主要的表达聚糖¨5I。
3.4神经发育及再生与三甘露糖核心上Bl,4甘露糖相连接平分型GkNAc残基修饰的双天线N.聚糖在脑组织内含量丰富,被认为是脑型糖链。
脑组织来源的神经细胞系CG4半乳糖基转移酶I表达活性增强,即导致该脑型糖链合成的减少;该型糖链表达水平的高低决定于半乳糖基转移酶I活性的强弱。
半乳糖基转移酶活性表达增强也导致CG4细胞生长停滞及表型异常,并伴有细胞死亡率的增加,即便是半乳糖基转移酶I活性中等程度的增加,也会导致N.聚糖合成途径的中断,对CG4细胞是致死性的结局.1引。
提示中枢神经系统N.聚糖的平分型GlcNAc修饰在神经系统发育过程中具有重要调节作用。
在血清饥饿反应条件下,Neum2a细胞转染GnT.Ⅲ后可以诱导轴突样反应,整合素B1分布部位伴有神经突和突起形成。
这种神经纤维生成增强效应可被添加包含平分型GlcNAc的N.聚糖或植物血凝素(印曲I岫路l瓶na£iIlgph)rtohemaggluhin,E4一PHA)所抑钶,该凝集素主要识别平分型GlcNAc【4]。
Gnr.一的促神经纤维生成作用也可以被抗Bl整合素功能阻断抗体显著抑制。
事实上,pl整合素也是GnT一■的靶蛋白之一,也已经通过E4.PHA的础—曲帆船s啊分析所证实。
提示携带平分型Glc—NAc的N·聚糖对神经纤维再生具有一定调节作罔㈣。
大鼠嗜铬细胞瘤细胞系转染GIlT.Ⅲ,可抑制瞰F及整合素刺激神经突的生长。
这种神经突生长抑制作用可被丝裂原或细胞外信号调节激酶激酶.噩(趣缈小艘删蚰砌-【i嘲seki岫se_l,MEK.1>所逆转。
与此一致韵是,EGFR介导的ERK激活也可被舶BⅡ转染所阻滞;GnT一■突变(D32lA)则难以抑制神经突起韵生长;凝集素印迹分析显示,野生型GmB■转染细胞的EGnt的N一聚糖结万方数据万方数据万方数据万方数据平分型GlcNAc糖基化修饰的生物学功能作者:董芳, 肖凡, 魏红山, DONG Fang, XIAO Fan, WEI Hongshan作者单位:北京地坛医院,首都医科大学传染病研究所,北京市,100015刊名:医学分子生物学杂志英文刊名:JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY年,卷(期):2009,6(2)被引用次数:0次1.ZHAO Y.SATO Y.ISAJI T Branched N-glycans regulate the biological functions of integrins and cadherins 2008(09)2.KARIYA Y.KATO R.ITOH S N-glycosylation of laminin-332 regulates its biological functions:A novel function of the bisecting GlcNAc 2008(48)3.FREY A D.KARG S R.KALLIO P T Expression of rat beta(1,4)-N-acetylglucosaminyltransferase Ⅲ in Nicotiana tabacum remodels the plant-specific N-glycosylation 2008(01)4.FERRARA C.BRüNKER P.SUTER T Modulation of therapeutic antibody effector functions by glycosylation engineering:influence of Golgi enzyme localization domain and co-expression of heterologous beta1,4-N-acetylglucosaminyltransferase Ⅲ and Golgi alpha-mannosidase Ⅱ 2006(05)5.ANDR S.KOZR T.SCHUBERTH R Substitutions in the Ng-lycan core as regulators of biorecognition:the case of core-fucose and bisecting GlcNAc moieties 2007(23)6.MIYOSHI E.IHARA Y.HAYASHI N Transfection of Na-cetylglucosaminyltransferase Ⅲ gene suppresses expression of hepatitis B virus in a human hepatoma cell line,HB611 1995(47)7.KANG S K.CHUNG T W.LEE J Y The hepatitis B virus X protein inhibits secretion of apolipoprotein B by enhancing the expression of N-acetylglucosaminyl-transferase Ⅲ 2004(27)8.GAO C X.MIYOSHI E.UOZUMI N Bisecting GlcNAc mediates the binding of annexin V to Hsp47 2005(11)9.HASHII N.KAWASAKI N.ITOH S Glycomic/glycoproteo-mic analysis by liquid chromatography/mass spectrometry:analysis of glycan structural alteration in cells 2005(18)10.RAJU T S Terminal sugars of Fc glycans influence antibody effector functions of IgGs 2008(04)11.LI W.TAKAHASHI M.SHIBUKAWA Y Introduction of bisecting GlcNAc in N-glycans of adenylyl cyclaseIII enhances its activity 2007(06)12.SULTAN A S.MIYOSHI 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