凝胶回收试剂盒

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DNA凝胶回收试剂盒产品说明书

DNA凝胶回收试剂盒产品说明书

北京四正柏生物科技有限公司网站: 客服热线:400-7060-959技术支持:DNA 凝胶回收试剂盒产品编号规格MDN3066-5050次MDN3066-100100次保存条件及效期:常温运输和保存,保质期一年。

产品描述:本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA 反应体系中(如PCR 反应)回收DNA 片段。

试剂盒采用可以高效、专一结合DNA 的硅胶膜和独特的溶胶体系,或DNA 反应体系中回收的单链、双链及环状DNA ,回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。

得到的DNA 可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。

产品组分:使用方法:1.凝胶回收:切取含DNA 片段的琼脂糖凝胶(100mg 左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入一干净的1.5ml 塑料离心管(自备)中,用移液枪头捣碎,按重量比为1:3到1:5的比例加入通用溶胶液(100mg 琼脂糖凝胶需要加入300μl-500μl 通用溶胶液)。

PCR 产物回收:直接在PCR 反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液,混匀,然后跳过第2步、直接从第3步做起。

如果PCR 反应中使用了石蜡,需要预先去除。

2.50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟),其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。

如果片段长度在300bp 成份50次包装100次包装通用溶胶液25ml 50ml 吸附柱活化液25ml 50ml 通用洗柱液50ml 100ml 离心吸附柱50套100套DNA 洗脱液10ml 10ml 说明书1份1份以下,建议不要加热,以免DNA变性,影响回收率。

3.在等待期间,活化离心吸附柱。

在离心吸附柱中加入0.5mL吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12,000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。

活化后的离心吸附柱必须在当天使用。

4.在上柱前,在溶化的胶中加入相当于胶块体积1/2的异丙醇(对100mg胶块,加50uL),快速振荡10秒混匀。

凝胶回收

凝胶回收

AxyPrep DNA 凝胶回收试剂盒本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中回收多至8μg DNA(70bp-10Kb),回收率为60-85%。

琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中熔化,其中的保护剂能防止线状DNA 在高温下降解,然后在DE-B 溶液的作用下使DNA 选择性结合到膜上。

纯化的DNA 纯度高,并保持片断完整性和高生物活性,可直接用于连接、体外转录、PCR 扩增、测序、微注射等分子生物学实验。

一、试剂盒组成、贮存、稳定性2ml离心管1.5ml离心管说明书Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含DNA 保护剂,防止DNA 在高温下降解。

室温密闭贮存。

Buffer DE-B:结合液(促使大于70bp 的DNA 片段选择性结合到DNA 制备膜上)。

室温密闭贮存。

Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。

Buffer W2 concentrate:去盐液,使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。

Eluent:洗脱液,室温密闭贮存。

二、注意事项1. Buffer DE-A(含有β-巯基乙醇)、Buffer DE-B 和Buffer W1 含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。

若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。

2. 在步骤1 中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间(线型DNA 长时间暴露在高温条件下易于水解),从而提高回收率。

勿将含DNA 的凝胶长时间地暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA造成的损伤。

3. 在步骤2 中凝胶必须完全熔化,否则将严重影响DNA 回收率。

4. 将Eluent 或去离子水加热至65°C,有利于提高洗脱效率。

5. DNA 分子呈酸性,建议在2.5 mM Tris-HCl,pH 7.0-8.5 洗脱液中保存。

三、实验准备1. 第一次使用前,Buffer W2 concentrate中加入指定体积的无水乙醇。

胶回收试剂盒成分及作用

胶回收试剂盒成分及作用

胶回收试剂盒成分及作用
小伙伴们!今天咱们来唠唠胶回收试剂盒的那些事儿。

首先呢,胶回收试剂盒里有结合缓冲液。

这东西可重要啦!它的作用就是为了让咱们从琼脂糖凝胶里切下来的DNA片段能够很好地结合到硅胶膜上。

你想啊,如果没有这个结合缓冲液,那DNA片段就像没头的苍蝇似的,到处乱飘,根本没法好好进行下一步回收工作呢!我感觉这个结合缓冲液的量得控制好,不过具体多少有时候也得根据实际情况来定,多一点少一点可能不会有太大影响,但也别太离谱啦。

还有洗脱缓冲液。

这是干啥用的呢?它就是把吸附在硅胶膜上的DNA给洗下来。

我就这么跟你说吧,要是没有洗脱缓冲液,咱们千辛万苦把DNA吸附上去了,结果却拿不下来,那不是白忙活了嘛!一般来说按照试剂盒的说明加就好,但是呢,我试过稍微改变一点洗脱缓冲液的量,好像也能得到不错的结果,当然啦,这只是我的一点小经验哈。

另外,试剂盒里肯定有硅胶膜啦。

这个硅胶膜就像是一个小小的“DNA捕捉器”。

DNA片段经过结合缓冲液的作用后,就乖乖地被吸附在这个硅胶膜上了。

不过要注意哦,在操作的时候千万别把硅胶膜弄破了,一旦破了,那整个回收过程可能就会出问题啦!这一步一定要小心谨慎呀!
有些胶回收试剂盒可能还含有一些特殊的试剂成分,虽然我不太清楚具体每一个都是干啥的,但是它们肯定都是为了让胶回收这个过程更加顺利而存在的。

PCR 或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书

PCR 或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书

PCR或酶切产物凝胶回收试剂盒说明书
【试剂盒简介】
本试剂盒将可以特异结合DNA的高性能磁性复合微球与独特的溶液系统有机结合在一起,适合从各种电泳凝胶(TAE或TBE)中提取线性DNA(70 bp-10 Kb),回收率在60-90%以上,本试剂盒还可从凝胶中回收质粒。

纯化后的线性DNA保持完整的生物活性,适用于多种用途,如:连接、体外转录、PCR、测序、Southern 杂交、微注射等分子生物学研究。

本试剂盒结合自动化设备,可以实现DNA琼脂糖凝胶回收的高通量、自动化提取。

【试剂盒组成】
Cat. No. YR03009-01YR03009-02YR03009-03
制备次数 50次100次200次
Lysis-Binding Buffer 20mL40mL120mL
Wash Buffer W1 70mL140mL400mL
Magnetic beads 1mL2mL4mL
Elution Buffer 2.5mL5mL10mL
使用说明书1份1份1份
【贮藏与有效期】
所有试剂室温保存,有效期为一年。

【操作步骤】请与我公司联系。

【经销商】深圳市易瑞生物技术有限公司
Shenzhen Bioeasy Biotechnologies Co., Ltd.
地址:深圳市宝安区西乡街道桃花源科技创新园11号研发中心邮编:518102
电话:**************************传真:*************
电子邮件:********************公司主页:。

片段凝胶回收试剂盒(离心柱型).

片段凝胶回收试剂盒(离心柱型).
三、试剂盒特点
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜 ,柱与柱之间吸附量差异极小,可 重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反 应。
3. 独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖 DNA 回收,也可以 PCR 产物清洁纯化,酶切产物纯化回收等多种功能。
2. 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在 37℃水 浴加热几分钟,即可恢复澄清。使用前应该恢复到室温。
3. 储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃- 25℃)进行。
4. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
24 ml
48 ml
120×2 ml
第一次使用前按说明加指定量乙醇
1ml
5 ml
10 ml
50 ml
5个
50 个
100 个
500 个
收集管(2ml) 室温
说明书
ห้องสมุดไป่ตู้室温
5个 1份
50 个 1份
100 个 1份
500 个 1份
本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。
注意事项
1. 第一次使用前在漂洗液 W 中按 4:7 的比例加入无水乙醇,如包装为 24ml 漂洗液 W 中,应加入 42ml 无 水乙醇。加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入 !
如果凝胶浓度大于 2%,应加入 6 倍体积溶胶液。凝胶块最大不能超过 400mg,如果超过 400mg,请 用多个离心柱进行回收。 4.50-60℃水浴放置 10 分钟(或直至胶完全溶解)。每 2-3 分钟涡旋振荡一次或颠倒离心管 2 次帮助 加速溶解。

TaKaRa 凝胶回收说明书.

TaKaRa 凝胶回收说明书.

Code No. 9762 研究用TaKaRa MiniBEST AgaroseGel DNA Extraction Kit Ver.4.0说明书v201306Da目录内容页码●制品说明1 ●制品内容1 ●保存与运输1 ●使用前的准备事项1 ●操作方法1 ●使用例3 ●注意事项3 ●Q&A 4●制品说明本试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段的试剂盒。

试剂盒采用了独特的凝胶溶解Buffer,其具有较强的缓冲性能并含有pH指示剂,方便判断溶液的pH值是否适合与DNA制备膜结合,其溶胶能力很强,无需加热,在室温(15-25℃条件下即可快速溶解凝胶。

本试剂盒结合DNA制备膜技术,具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需20分钟便可完成。

使用本试剂盒每次可纯化得到多至20 μg以上的DNA片段(50 bp~20 kb,回收率高达50~80%,20~50 kb的DNA片段回收率略低。

经本试剂盒回收纯化的DNA片段纯度高,完整性好,可直接用于连接反应、PCR扩增、DNA测序等各种分子生物学实验。

●制品内容(50次量每次处理的胶块量约为300 mg(1%凝胶浓度时,本试剂盒可使用50次。

本试剂盒分试剂Set与Column Set两部分。

■试剂SetBuffer GM*1 50 mlBuffer WB*2 24 mlElution Buffer 2 ml ×2*1含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。

若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。

*2首次使用前,向Buffer WB中添加56 ml的100%乙醇。

■Column SetSpin Columns 50支Collection tubes 50支【试剂盒之外所需准备试剂】◆无水乙醇◆灭菌水或Tris-HCl(pH8.0◆ 3 M醋酸钠溶液(pH5.2●保存与运输1. 本试剂盒可以在室温下(15-25℃保存。

2. 本试剂盒于室温下(15-25℃运输。

Geneaid GenepHlowTM Gel PCR 通用型DNA 纯化回收试剂盒说明书

Geneaid GenepHlowTM Gel PCR 通用型DNA 纯化回收试剂盒说明书

完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书一、从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段1. 凝胶融解将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作。

如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入400 μl 漂洗液W1,以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书二、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 (回收DNA进行测序实验)1. 凝胶融解 将单一的目的DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分,凝胶重量不超過300 mg )放入干净的离心管中. 向胶块中加入500 μl 溶液Gel/PCR, 55-60ºC 水浴放置10-15分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解.注意:凝胶完全融解后应呈现黄色,即可进行后续操作.如果胶完全融解后溶液的颜色为紫色,请使用10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作.(溶液Gel/PCR 中含有pH 指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA 才能够有效的与膜结合,当pH 值偏高时溶液的颜色变为紫色,需要进行调整.)2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 待溶液温度降至室温后,将所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 重复向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),以14-16,000 ×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中,以14-16,000 ×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除.注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download完整说明书(英文)下载如果您是第一次使用本产品或对本产品的操作步骤不熟悉,请您经由扫描QR code 下载并详阅完整说明书三、从PCR 反应液或酶切反应液中回收DNA 1. 样品前处理取20-100 μl PCR 反应液或酶切反应液加入1.5 ml 离心管中,向其中加入五倍体积溶液Gel/PCR ,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油). 注意: 如PCR 反应体系为50 μl (不包括石蜡油体积),则加入250 μl 溶液Gel/PCR . 樣品混匀后溶液应呈现黄色,即可进行后续操作. 如果溶液的颜色为紫色,请加入10 μl 3M 乙酸钠(pH 5.0)将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作. 2. 吸附将吸附柱DFH 放入2 ml 收集管中. 将上一步所得溶液加入吸附柱DFH 中,以14-16,000 ×g 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放入收集管中. 注意:吸附柱容积为750 μl ,若样品体积大于750 μl 可分批加入.3. 漂洗向吸附柱DFH 中加入600 μl 漂洗液Wash (使用前请先检查是否已加入无水乙醇),静置1分钟后以14-16,000×g 离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DFH 放入收集管中. 以14-16,000×g 离心3分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除. 注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切,PCR 等)实验.4. 洗脱将吸附柱DFH 放入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加20-50 μl 洗脱缓冲液EB ,(如果回收的目的片段>5 kb ,则洗脱缓冲液EB 应置于60ºC 水浴预热),室温放置2分钟. 以14-16,000 ×g 离心2分钟收集DNA 溶液.注意:1. 为了增加DNA 回收率,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,室温放置2分钟,以14-16,000×g 离心2 分钟,将DNA 溶液收集到离心管中. 2. 如果使用ddH 2O 做洗脱液,需保证其pH 值≥8.0,pH 值低于8.0会降低洗脱效率.Instruction Manual Download。

胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理

胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理

胶回收DNA试剂盒的原理和方法一原理胶回收DNA试剂盒是一种常用的分子生物学实验工具,用于从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA的方法。

其原理主要基于琼脂糖凝胶电泳的分离特性和DNA与硅胶膜亲和吸附的原理。

下面将详细介绍胶回收DNA试剂盒的原理和方法。

1.原理:1.1琼脂糖凝胶电泳分离:首先,将DNA样品与琼脂糖混合并加热使其溶解后,将混合物加入琼脂糖凝胶槽中,随后进行电泳。

由于琼脂糖具有分子筛的特性,DNA分子根据大小被分离在凝胶中的不同位置。

1.2硅胶膜吸附:电泳结束后,将琼脂糖凝胶取出,然后将硅胶膜放置在凝胶表面,使其与DNA分子接触。

由于硅胶膜具有强烈的亲和吸附性,它能够有效地吸附DNA分子。

1.3洗脱纯化:在硅胶膜上吸附的DNA分子可以通过洗脱的方式从硅胶膜上释放出来。

一般情况下,通过使用适当的缓冲液可以将DNA洗脱出来,得到纯化的DNA样品。

2.方法:2.1样品制备:将待分离和纯化的DNA样品进行适当的制备处理,如酶切产生的片段、PCR扩增产生的产物等。

根据需要,可以使用酶切缓冲液、PCR停止液等添加剂来优化样品的制备。

2.2琼脂糖电泳:将样品加入琼脂糖凝胶槽中,通过电泳操作进行DNA分离。

根据需要,使用适当的电泳缓冲液和电泳条件来获得所需的分离效果。

2.3硅胶膜吸附:电泳结束后,取出琼脂糖凝胶,将硅胶膜放置在凝胶表面,使其与DNA分子接触。

根据实验要求,可以根据需要对硅胶膜进行预处理,如加热、孵育等。

2.4洗脱纯化:通过使用适当的洗脱缓冲液,将硅胶膜上吸附的DNA 洗脱出来。

通常,洗脱缓冲液中包含盐和其他成分,以提高DNA的纯度和回收率。

2.5最终保存:将洗脱的DNA样品进行适当的保存和处理。

根据实验需求,可以进行浓缩、冻干或直接用于后续实验。

总结:胶回收DNA试剂盒通过利用琼脂糖凝胶电泳分离DNA,并利用硅胶膜的亲和吸附性,实现了从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA的目的。

这种方法简便易行,能够在短时间内获得高质量的DNA样品,广泛应用于分子生物学研究和实验室应用中。

凝胶DNA回收试剂盒使用说明

凝胶DNA回收试剂盒使用说明

DNA凝胶回收试剂盒50TCat#:GV-GX-50本试剂盒可从各种浓度琼脂糖凝胶中回收DNA片段,不含盐、蛋白质、RNA等杂质。

500bp以上片段,回收率80%以上,200bp~500bp回收率70%以上,100bp~200bp回收率60%。

可回收单链、双链DNA 片段以及环状质粒DNA。

本试剂盒采用一种独特的平衡液处理吸附膜,该试剂能够激活硅基质膜,改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,专一吸附DNA的作用,同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。

1试剂盒组成、储存、稳定性成分规格注意事项Buffer GA60mlBuffer BL12mlWash buffer13ml使用前加入52ml无水乙醇Elution4ml离心柱50个单个最大吸附量20μg1.5ml离心管50个说明书1份Buffer GA:溶胶液。

室温密闭贮存。

若出现沉淀,应于65℃温浴溶解并冷却至室温后再使用。

Buffer BL:平衡液,平衡液的加入能够激活硅基质膜,改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,专一吸附DNA的作用,同时还可消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。

Wash buffer:去盐液。

使用前,第一次使用前根据瓶上指定的体积加入无水乙醇,混合均匀,室温密闭贮存。

Elution:10mM Tris-HCl,pH8.0。

室温密闭贮存。

二、注意事项1:将洗脱液或双蒸水加热至65℃,有利于提高洗脱效率2:DNA呈酸性,建议在10mM Tris-HCl,pH8.0洗脱液中保存3:用平衡液处理过的柱子最好当天使用,放置时间过长会影响效果4:在步骤1中,将凝胶切成细小的碎块可大大缩短溶胶时间(线型DNA长时间暴露在高温条件下易水解),从而提高回收率。

勿将含有DNA的凝胶长时间暴露在紫外灯下,减少紫外线对DNA造成的损伤。

三、实验前试剂准备Wash buffer第一次使用前加入52ml无水乙醇。

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书如下:琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒是用于从混合物中纯化和回收琼脂糖凝胶的试剂盒。

下面是具体的操作方法及步骤说明:1. 准备工作:a. 将琼脂糖凝胶样品放置于冷室中,在4℃下保存。

b. 准备所需的琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒及其附件。

2. 细胞破碎:a. 将琼脂糖凝胶样品加入细胞破碎试剂,并将细胞破碎试剂与样品混合均匀。

b. 在室温下,将样品放置于振荡器中,并在高速摇床上以600 rpm摇动60分钟。

3. 退火:a. 将样品加热至70℃,并在水浴保温器中保温5分钟。

b. 然后快速将样品冷却至室温。

4. 离心:a. 将样品离心15分钟,以去除细胞碎片和残留杂质。

b. 将上清转移到干净的离心管中,并避免沉淀。

5. 琼脂糖凝胶回收:a. 向离心管中加入等体积的琼脂糖凝胶凝胶缓冲液,并将样品与凝胶缓冲液混合均匀。

b. 将混合物加热至65℃,并保温10分钟。

c. 快速冷却混合物至室温,并离心10分钟,从而使琼脂糖凝胶沉淀。

d. 将上清倒掉,并保留沉淀。

6. 洗涤:a. 向琼脂糖凝胶沉淀中加入1 mL 75%乙醇,然后轻轻颠倒离心管,使乙醇与琼脂糖凝胶充分混合。

b. 离心琼脂糖凝胶沉淀和乙醇混合物10分钟,并将上清倒掉。

c. 重复上述步骤一次。

7. 干燥:a. 向琼脂糖凝胶沉淀中加入1 mL无水乙醇,然后快速颠倒离心管,使无水乙醇与琼脂糖凝胶充分混合。

b. 离心琼脂糖凝胶沉淀和无水乙醇混合物10分钟,并将上清倒掉。

c. 重复上述步骤一次。

8. 最终回收:a. 将琼脂糖凝胶沉淀放置在干燥器中,将温度设置为50℃,并将它们完全干燥。

b. 最后,将琼脂糖凝胶沉淀转移到干净的容器中,并储存于冷室中。

请注意,以上操作步骤仅供参考。

在使用试剂盒之前,务必阅读和按照试剂盒的详细说明书执行实验。

E.Z.N.AGelExtractionKit琼脂糖凝胶回收试剂盒中文说明书

E.Z.N.AGelExtractionKit琼脂糖凝胶回收试剂盒中文说明书

琼脂糖凝胶回收试剂盒 E.Z.N.A Gel Extraction Kit适合于D2501-**,D2500-**&D2502-**准备工作1.浓缩的 SPW Buffer 需用乙醇按如下稀释 :D2500-00&D2501-00&D2502-00 加入 20ml 100% 的乙醇 ; D2500-01/02&D2501-01/02&D2502-01/02 每瓶加入100ml 100% 的乙醇 ; 注意:稀释后的DNA Wash Buffer 需室温保存;所有步骤必须在室温下进行.操作方案配制琼脂糖EB 凝胶,电泳以分离DNA 片段.任何类型或等级的琼脂糖都可以使用.我们强烈的推荐使用新鲜的TAE/TBE 电泳缓冲液.不要重复使用电泳缓冲液,旧的电泳缓冲液PH 会增加而降低DNA 的回收产量;2.电泳足够时间后,在紫外灯下小心地把所需的DNA 片段切下来.并尽量去除多余的凝胶.注意:DNA在紫外灯下的曝光的时间不要超过30秒,同时在紫外灯下操作的时候一定要戴保护眼镜.3.称取空离心管的重量,切下带目的片段的凝胶装在 1.5ml 离心管中并称其重量,求出凝胶块的重量,近似地确定其体积.一般情况下,凝胶的密度为1g/ml,于是凝胶的体积与重量的关系可按下面换算:凝胶薄片的重量为0.2g则其体积为0.2ml;加入等倍凝胶体积的Binding Buffer,把混合物置于55 C ~65C水浴中温浴7min至凝胶完全融化,其间每隔2-3 分钟混匀一次;重要提醒:在凝胶完全溶解之后,注意凝胶-Binding Buffer混合物的pH值.如果其pH值大于8的话,DNA的产量将大大减少.观察混合物的颜色,如果是橙色或红色,则要加入5卩1浓度为5 M,pH为5.2的醋酸钠,以调低其pH值.经过这一调节,该混合物的颜色将恢复为正常的浅黄色.一般情况下,使用新鲜的电泳缓冲液,凝胶-Binding buffer混合物的PH值的不会升高;4•转移700卩的DNA-琼脂糖溶液到一个HiBindTM DNA柱子,并把柱子装在一个干净的2ml收集管内,室温下,10,000 >g离心1min,弃去液体.一个HiBind DNA柱子最多可容纳700g 的溶液,如果DNA-琼脂糖混合物的体积大于700卩1可先转移700卩溶液至柱子,离心完后,将余下的溶液继续加上柱子上•但是每一个HiBindTM柱子最多可以结合25~30g g DNA.如果预期产量较大,则把样品分别加到合适数目的柱中.5.将柱子重新套回收集管中,加300 g Binding Buffer至HiBind DNA 柱子中;室温下,10,000 >离心1 分钟,去弃滤出液;这一步相当关键,不要忽略此步.6.将柱子重新套回收集管中,加入700 g l SPW Wash buffer至HiBind DNA 柱子中屋温下,10,000 >离心1分钟,去弃滤出液;注:SPW Wash buffer在使用前必须按瓶子标鉴要求用无水乙醇进行稀释7.将柱子重新套回收集管中,重复加入700g lSPW Wash buffer 至HiBind DNA 柱子中,室温下,10,000 >离心1分钟,弃去滤出液;,将空柱子重新套回收集管中,10,000 >离心1min以甩干柱基质残余的液体.这步可以去除柱子基质上残余的乙醇,不要省略此步――― 对得到好的DNA 产量是十分重要的.8.把柱子装在一个干净的 1.5ml离心管上,加入30~50 g洗脱液或灭菌水上柱子膜上,10,000 >离心1分钟,离心管中的溶液就是纯化的DNA 产物,保存于-20 度.如果再洗脱一次的话可以把残余的DNA 洗脱出来,不过那样的浓度就会较低.DNA的产量及质量:把纯化产物的样品稀释一定的倍数后,分别在260nm和280nm下测其光吸收值,回收得到的DNA的浓度可按以下公式来计算:DNA浓度=光吸收260X50X稀释倍数g g/ml长度大于500bp的片段通常能纯化得到80%的产量. 而50bp~500bp 的带则可达到55%~80%的回收率.(光吸收260/光吸收280)的比率是核酸纯度的一个标记.如果此值1.8,则意味着核酸的纯度>90%.另一方面,如果纯化产物的产量较低时,可以用琼脂糖EB 电泳估算产物的浓度.载体。

琼脂糖凝胶 dna 回收试剂盒说明书

琼脂糖凝胶 dna 回收试剂盒说明书

琼脂糖凝胶货号:D1200规格:50T/100T保存:常温干燥保存,复检期为一年。

试剂盒内容:产品说明:本试剂盒采用可以高效、专一结合的DNA硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。

可回收100bp-10kb大小的片段,回收率大于80%(小于100bp和大于100kb的DNA片段回收率为30-50%)。

使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。

注意事项:在使用本试剂盒前请阅读此注意事项。

1.电泳前最好更换成新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。

2.如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。

3.切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。

4.回收小于100bp和大于100kb的DNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。

5.回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。

6.如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

操作步骤:(使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。

)1、琼脂糖凝胶电泳后,将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入干净的离心管中,称取重量。

2、向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100ul,则加入300ul溶胶液),50-55℃水浴放置10min,期间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。

注意:溶胶时,如果溶胶液变为红色(正常情况下为淡黄色),可向含有DNA的胶溶液中加入10-30ul 3M醋酸钠(pH5.2)将胶溶液调为淡黄色,否则将会影响DNA与吸附柱的结合,影响回收效率。

3、将上一步所得溶液加入一个吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。

Viagene Biotech DNA 凝胶回收试剂盒 说明书

Viagene Biotech DNA 凝胶回收试剂盒 说明书

宁波保税区西区创业大道7号2C-1,315800, 电话:+86-574-86822306 传真:+86-574-26893101, sales@ DNA 凝胶回收试剂盒使用说明书产品编号产品名称 包装 DNAG001 DNA 凝胶回收试剂盒50×包装清单Solution I (溶液I )16 ml Solution Ⅱ(溶液Ⅱ)0.6ml Wash Solution (清洗液)27.5ml Elution Buffer (洗脱液)1ml Instruction (说明书) 1份本试剂盒适用于从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段,而不必采用低熔点的琼脂糖。

回收的DNA 片段纯度高,可以直接应用于DNA 克隆、各种酶促反应等实验。

操作说明:一,回收DNA 片段1. 将空小离心管称重。

将回收的带DNA 片段的凝胶放入其中、再次称重,确定凝胶净重。

2. 将离心管中的凝胶捣碎以助于凝胶溶解。

按胶的重量加入三倍体积的Solution I (1mg 凝胶加3μl solution I )。

3. 加入10μl 的Solution Ⅱ。

4. 55℃恒温加热直到凝胶完全融化(5-15分钟),每隔2-3分钟需将管内混悬液混匀一次。

5. 在室温、6000-13000rpm 离心1 分钟,弃上清液。

6. 加入500μl Wash Solution ,6000-13000rpm 离心1分钟,弃上清液。

7. 重复步骤6一次。

8. 将有白色沉淀的离心管再离心1分钟后,小心去除残留的液体。

9. 打开离心管盖子、室温干燥10分钟。

10. 加入10-20μl 的Elution Buffer ,37℃孵育5分钟,离心回收DNA 样品。

或者按下面操作进行酶连接。

二,连接酶连接DNA 片段1. 加入12.5μl 的Elution Buffer 。

振动样品管使沉淀颗粒完全悬浮。

2. 加1.5μl 的10× DNA 连接酶缓冲液,混匀。

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

琼脂糖凝胶DNA 回收试剂盒说明书修订日期说明书修订日期::2015.07.13Cat Number :KGA3050/KGA30100 Store at RT/ 4for 24 months ℃For Research Use Only (科研专用)一、 试剂盒说明凯基琼脂糖凝胶DNA 回收试剂盒采用机械切割的硅胶膜吸附材料作为离心吸附柱,在优化的指定缓冲液提供的条件下,可选择性结合回收目标DNA ,去除污染杂质;溶胶液的溶胶效率高,并含特有成分消除硼酸对吸附的干扰,适用于TAE 和TBE 缓冲液;回收40bp-50kb 片段效果佳。

回收的产物可用于PCR 、酶切、连接反应、测序等工作。

产品特点与经典的凝胶回收、纯化方法相比较,本试剂盒具有以下特点:·快速――在≤120min 内就可以从凝胶中回收DNA ; ·可靠――最适的缓冲液保证了高纯度的DNA ; ·安全――这是无有机物的抽提;·质量――纯化得的DNA 可做任何下游应用。

二、 试剂盒组份组 份 KGA3050 50T KGA30100 100T 储存 离心吸附柱50个 100个 RT 溶胶液 25ml 50 ml RT 漂洗液 50ml 100ml RT 洗脱液 5ml 10ml RT pH 调节剂0.6ml1.2 mlRT三、 操作步骤操作步骤((所有离心步骤都在室温下进行所有离心步骤都在室温下进行))1. 在琼脂糖凝胶-EB 电泳后,在紫外灯上小心的把所需的DNA 片段切下来,尽量去除多余的凝胶并尽量少带电泳缓冲液,称重,装入1.5ml 离心管,用Tip 头捣碎。

2. 按照凝胶的重量可近似地确定其体积。

假设其密度为1g /ml ,于是凝胶的体积便可通过如下方法得到:凝胶薄片的重量为0.2g 则其体积为0.2ml 。

3.加入3倍凝胶体积的溶胶液于50℃保温10min ,或直至凝胶完全融化。

期间可振荡促融。

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒操作方法及步骤说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://AidQuick Gel Extraction Kit琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒目录号:DR01❖适用范围:适用于琼脂糖凝胶DNA回收❖试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(DR0101)100次(DR0102)200次(DR0103)平衡液室温5ml 10ml 20ml 溶胶液DD 室温50 ml 50ml×2 200 ml漂洗液WB 室温15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10 ml 15 ml 15 ml吸附柱EC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项:1.所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。

使用前应该恢复到室温。

2.储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。

3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

❖产品介绍:在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。

❖产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。

克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。

2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。

3.溶胶液加酚红调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。

4.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。

凝胶DNA回收试剂盒使用说明

凝胶DNA回收试剂盒使用说明

凝胶DNA回收试剂盒使用说明一、试剂盒组成1.碱性ELUTION缓冲液:用于回收DNA片段。

2.DNA绑定胶柱:用于吸附DNA片段。

3.洗涤缓冲液:用于去除琼脂糖凝胶残渣和其他杂质。

4.电子式试剂盒设备:用于快速洗脱DNA片段。

二、凝胶DNA回收试剂盒使用步骤1.准备工作:a.将碱性ELUTION缓冲液加热至65℃,并保存在试剂盒中。

b.手套和面具是使用过程中必需的,以确保实验环境的干净。

c.严格遵守实验室的安全操作规程。

2.凝胶切割:a. 切割需回收的DNA片段:将琼脂糖凝胶切割为片段大小约为50-5000 bp的目标DNA。

b.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入微量离心管中,注意不要弄混不同大小的DNA片段。

c.记录每个DNA片段的位置和大小。

3.DNA回收:a.将切割好的琼脂糖凝胶片段放入DNA绑定胶柱中。

b.将绑定胶柱放入收集管中,通过离心将DNA片段吸附到胶柱上。

c.倒掉废液,并使用洗涤缓冲液洗脱胶柱上的残驻琼脂糖凝胶和其他杂质。

重复此步骤1-2次以确保彻底洗脱。

4.DNA洗脱:a.将洗柱放回空的收集管中。

b.加入预热的碱性ELUTION缓冲液(65℃),封闭试管盖,并放入电子式试剂盒设备中。

c.按照设备操作说明进行启动,并设置相应的洗脱温度和时间。

d.在洗脱完成后,将洗脱液转移到新的离心管中。

可以使用适当的方法(如乙醇沉淀或其他纯化方法)进一步纯化DNA。

5.质量检测:a.使用电泳进行质量检测,以确认回收的DNA片段大小和纯度。

b.如果需要,可以定量将DNA溶液保存在冰箱中以备后续实验使用。

三、注意事项1.使用前确保熟悉试剂盒的组成和使用步骤。

2.使用过程中务必佩戴手套和面具,确保操作环境的洁净。

3.严格按照试剂盒的说明进行操作,并遵循实验室的安全操作规程。

4.需要注意的是,琼脂糖凝胶切割和回收过程极易受到外源DNA污染,因此要确保实验环境的洁净,并尽量避免不必要的接触。

5.回收的DNA片段应尽快进行下一步的实验处理,以避免DNA降解和污染。

DNA凝胶回收试剂盒

DNA凝胶回收试剂盒

产品简介:碧云天2005年底最新推出的DNA凝胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit),是世界上最先进的DNA凝胶回收试剂盒之一。

本产品采用了融胶液,可以使琼脂糖凝胶完全融化。

同时采用了一种新型的离子交换柱,在特定条件下,使DNA能在离心过柱的瞬间,结合到DNA纯化柱上,在一定条件下又能将DNA充分洗脱,从而实现DNA的快速纯化。

无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,通常12个样品只需不足20分钟即可完成。

DNA纯化柱的容量约为15微克。

适用于PCR反应后去除引物,酶,矿物油,甘油,盐等杂质;也同样适用于酶切,连接,磷酸化,补平或切平,随机引物等反应后的DNA纯化。

所得的DNA可直接用于酶切,连接,转化细菌,测序,PCR,杂交等后续操作。

本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA。

长至30个碱基的引物均可被完全去除。

DNA回收效率通常为60-90%。

接近100bp或10kb的DNA片断回收效率要略低一些,大于10kb的DNA回收效率迅速下降。

另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。

每个试剂盒足够用于50个平均重量不超过400微克的凝胶样品。

包装清单:保存条件:室温保存,一年有效。

注意事项:第一次使用前在溶液II (洗涤液)中加入39ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。

溶液I对人体有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。

本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。

所有离心也均在室温进行。

废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:1. 切胶回收后,称重,将胶切碎或在离心管内用1ml枪头捣碎。

2. 加入等体积的溶液I(如胶为100mg,则加100微升溶液I),vortex或颠倒混匀。

3. 50-60℃水浴加热约10分钟至胶全融,期间,需vortex或颠倒混匀3-4次,以加速凝胶融解。

若果胶碎片较小,3-5分钟即可全融;凝胶碎片较大则需较长时间,胶全融后至少再在50-60℃水浴加热2分钟。

凝胶回收目的片段

凝胶回收目的片段

一,凝胶回收试剂盒分别回收各目的片段:1.试剂,耗材及设备:(1)QIAquick® Gel Extraction Kit(#28704)# 回收70bp-10Kb# 使用前向Buffer PE加无水乙醇(96–100%)(按瓶指示)# 每柱最大可处理400 mg agarose胶溶解液# 把灭菌蒸馏水或Elution Buffer加热至60℃使用时有利于提高洗脱效率。

# 所有离心步骤均在室温17,900 x g (13,000 rpm)column.Buffer PEBuffer QGBuffer EBQIAquick spin column2mL收集管(2)异丙醇(100%)(3) 3 M醋酸钠(pH 5.0)(4)金属浴/水浴(50°C)(5)涡漩振荡仪(6) 1.5/5 mL EP管(干净/高压)(7)分光光度计/凝胶成像仪(8)高速离心机(9)其它2. 步骤:(1)尽量小地切胶(不要多余的不含目的条带的胶),根据目的胶条的重量(100 mg=100 μl),向装有胶条的1.5 mL EP管中加入3 倍体积的Buffer QG,50°C金属浴/水浴10 min,期间可每2-3 min取出涡漩振荡。

(直至胶条完全溶解)(2)完全溶解后,检查溶解混合液颜色是否为黄色(或与Buffer QG同色)。

如为橙或紫色,加入10 μl 3 M醋酸钠(pH 5.0)混合, 则颜色变黄。

(3)加入一胶体积的异丙醇(100%),涡漩振荡混合。

(4)取QIAquick spin column,侧顶标号,放入配套的2mL收集管。

(5)将完全溶解后液样加入QIAquick spin column中(如体积大,>800 μl,,可分次上样),离心1 min。

弃掉收集管中液体,将空柱放回对应收集管。

(6)加0.75 ml Buffer PE于空柱(静置2–5 min),离心1 min,弃掉收集管中液体,将空柱放回对应收集管。

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DNA Gel Extraction Spin Protocol
The DNA Gel Extraction Kit employs optimized reagents in combination with a convenient Miniprep column to purify DNA fragments from either TAE or TBE agarose gels (regular and low-melt), and impurities including proteins, other organic compounds, salts, et al. are discarded in the process. DNA fragments in a size range of 70 bp to 10 kb can be efficiently recovered. Depending upon the length of the DNA fragments, the recovery rate is approximately 60-85%. DNA fragments purified by this method are full-length with high biological activity. These fragments are suitable for all routine molecular biology applications, such as ligation, PCR, sequencing, etc.
1.Excise the agarose gel slice containing the DNA fragment of interest with a clean,
sharp scalpel under ultraviolet illumination. Transfer the gel slice to an EP tube and weigh. In this application, the weight of gel is regarded as equivalent to the volume. For example, 100 mg of gel is equivalent to a 100 μl volume.
2.Add a 3× sample volume of Gel solubilization buffer (溶胶液). Heat at 50-55°C
for 10 min until the gel is completely dissolved, Intermittent vortexing will accelerate gel solubilization.
Note: If the solution becomes red (yellow for normal), add 10-30ul NaAc (3M, pH5.2) to adjust the color to yellow.
3.Transfer the solubilized agarose into a Miniprep column. Centrifuge at 12,000xg
for 1 minute. Discard the filtrate.
4.Add 700 μl washing buffer. Centrifuge at 12,000xg for 1 min. Discard the filtrate.
Note: Make sure that 100% ethanol has been added into washing buffer concentrate. Make a notation on the bottle label for future reference.
5.Add 500 μl washing buffer. Centrifuge at 12,000xg for 1 min. Discard the filtrate.
6.Place the Miniprep column back into the 2 ml microfuge tube. Centrifuge at
12,000xg for 2 minute.
7.Transfer the Miniprep column into a clean 1.5 ml microfuge tube, evaporate the
ethanol for several minutes at room temperature.
8.To elute the DNA, add 30 μl of Eluent(洗脱缓存液) to the center of the
membrane. Let it stand for 3 minute at room temperature. Centrifuge at 12,000xg for 2 minute.
Note: Pre-warming the Eluent at 65°C will generally improve elution efficiency.
Note: Deionized water can also be used to elute the DNA fragments.
9. Store the DNA at -20°C。

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