Weigert铁苏木素染色液
软骨染色液（番红O法）步骤及注意事项
软骨染色液（番红O法）步骤及注意事项软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项货号：G2540规格：100ml有效期：12个月有效产品简介：软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。
软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。
软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。
番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。
番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。
自备材料：10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。
操作步骤（仅供参考）：1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2.常规脱蜡至水。
3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。
4.酸性乙醇分化液分化15s。
5.蒸馏水洗10min。
6.（可选）在固绿染色液内浸染5min，蒸馏水洗1min。
7.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。
8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
9.二甲苯透明，光学树脂封固。
染色结果：软骨基质深红色软骨细胞核蓝色软骨细胞浆红色细胞核灰黑色注意事项：1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。
2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h 失去染色能力。
3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。
5.95%乙醇脱水时间不宜过长。
6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
马松三色染色法
马松三色染色法马松三色染色法是一种用于显示组织中纤维的染色技术，特别适用于结缔组织的染色。
该方法使用三种染料：苏木精、酸性品红和丽春红，分别染色细胞核、肌纤维和胶原纤维。
首先，切片需要经过常规脱蜡至水的过程，以确保染色剂能够充分渗透到组织中。
然后，使用配制好的Weigert氏铁苏木素染色液对组织进行染色，以突出显示细胞核。
染色完成后，需要充分水洗，以去除未结合的染料。
接下来是酸性品红染色，用于标记肌纤维。
这个步骤需要在弱酸环境中进行分化处理，以将染色剂与组织中的碱性物质区分开来。
弱酸还能帮助酸性品红更好地渗透到组织中。
最后，使用丽春红品红染色液对胶原纤维进行染色。
在这个步骤中，需要使用弱酸工作液来洗去未结合的染料。
在整个染色过程中，组织固定起着非常重要的作用。
不同的固定液会影响染色时间，因此需要根据具体情况进行调整。
在完成染色后，需要进行常规脱水、透明和封固处理，以便在显微镜下观察。
马松三色染色法的优点在于它能够清晰地显示结缔组织中的胶原纤维和肌纤维，特别是在病理情况下，如器官硬化性疾病和瘢痕组织的鉴别诊断中，该方法能够提供有价值的信息。
此外，该方法具有较高的特异性和灵敏度，能够检测出病理变化中较小的差异。
然而，该方法也有一些局限性。
首先，该方法需要使用多种染料和化学试剂，这使得操作过程相对复杂。
其次，某些组织可能需要特定的处理步骤，例如脱蜡、脱水和固定等。
这需要技术人员具备一定的经验和技术水平。
尽管存在这些局限性，马松三色染色法仍是一种非常重要的病理学技术。
它可以提供关于组织结构和功能的重要信息，有助于病理医生做出准确的诊断和制定治疗方案。
胶原纤维染色
胶原纤维胶原纤维是三种纤维中分布最广泛，含量最多的一种纤维。
广泛分布于各脏器内。
在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。
胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。
一、苦味酸—酸性品红法 (Van Gieson，1889)试剂配制：(一)Weigert氏铁苏木素液A液：苏木素 1g无水酒精 100m1B液：30％三氯化铁液 4ml蒸馏水 100ml纯盐酸 lmlA、B两液需分瓶盛放，A液配制后数天即可用，不宜配制过多，如保存时间过长则染色不良。
平时应密封保存，B液配制后立即可用。
临用前将A、B两液等量混合。
(二)Van Gieson氏染液A液： 1％酸性品红水溶液B液：苦味酸饱和水溶液(约1.2％)A、B两液分瓶盛放。
临用前取A液1份，B液9份混合后使用。
操作方法：1. 组织固定于10％甲醛液，常规脱水包埋。
2．切片脱蜡至水。
3．用Weigert氏铁苏木素液染5～10分钟。
4. 流水稍洗。
5．1％盐酸酒精迅速分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7．用Van Gieson氏液染1～2分钟。
8．倾去染液，直接用95％酒精分化和脱水（可放入温箱烤干后，直接透明封片）。
9. 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果:胶原纤维呈鲜红色，肌纤维，胞质及红细胞黄色，胞核蓝褐色。
（二）、Masson 三色染色法丽春红酸性品红液：丽春红 0.7 g ，酸性品红0.3 g，蒸馏水99ml，冰醋酸1 ml苯胺蓝液: 苯胺蓝2 g ，蒸馏水98 ml，醋酸2 ml亮绿液：亮绿0.2g ，蒸馏水100 ml，冰醋酸0.2 ml染色步骤：1. 切片脱蜡至蒸馏水2. 苏木素染5～10分钟3. 盐酸酒精分化4. 流水蓝化，蒸馏水洗(苏木素可不染)5. 丽春红酸性品红液中染5～8分钟6. 蒸馏水洗7. 1% 磷钼酸中染1～3分钟8. 不用水洗直接入苯胺蓝液或亮绿液5分钟 (如染色效果不佳,可在冰醋酸内脱色后重染)9. 水速洗，置60℃温箱中烘干，二甲苯透明,封固结果:胶原纤维蓝色（苯胺蓝复染）或绿色（亮绿复染）,肌纤维、纤维素红色。
masson染色结果分析
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号：DC0032套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋；2、切片常规脱蜡至水；3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗；4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟；5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟；6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗；7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片；8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)；10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)；11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。
百度文库-Masson染色液说明书
广州市外显子生物技术有限公司Http//Masson染色液说明书货号：S-1518规格：20ml产品组成：名称规格保存Weigert铁苏木素A液20ml RT避光Weigert铁苏木素B液20ml RT避光丽春红酸性品红染液20ml 2-4℃低温环境磷钼酸溶液20ml 2-4℃低温环境苯胺蓝染液20ml 2-4℃低温环境盐酸酒精分化液1%冰醋酸溶液20ml 2-4℃低温环境20ml 2-4℃低温环境简介：利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色，与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关，根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。
储存条件：本试剂盒应贮存于2-4℃低温环境。
有效期：原包装未开封试剂有效期为12 个月，在有效期内的已开封试剂应在开封后 6 个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
操作步骤：1.切片脱蜡至水。
2.Weigert铁苏木素使用前Weigert铁苏木素A、B 液等比例混合。
染10-20分钟，流水稍洗。
3.盐酸酒精分化，流水冲洗数分钟。
4.丽春红酸性品红染液染5-10分钟，蒸馏水稍冲洗。
5.磷钼酸溶液处理约5分钟，去掉溶液，不用水洗，直接用苯胺蓝染液复染5分钟。
6.1%冰醋酸处理1分钟，95%酒精脱水。
7.无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树脂封固。
注意事项：1.Weigert铁苏木素分A、B两液，应于临用前将两液等份混合使用，而不宜预先混合，否则容易氧化沉淀而逐渐失去染色力。
2.磷钼酸处理时可在镜下控制，见肌纤维呈红色，胶原纤维呈淡红色即可。
染色结果：骨组织×200 结果判定：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，弹力纤维呈棕色，肌纤维、纤维素和红细胞染红色，细胞核染蓝黑色。
Masson三色法
Masson三色法（根据Masson,1929）一、试剂配制（一）Weigert氏铁苏木素液（可用Herris苏木素代替）甲液：苏木素1g无水酒精（或95％酒精）100ml乙液：29％三氯化铁水溶液4ml蒸馏水95ml （30%三氯化铁溶液则为100ml）盐酸1ml临用时，取甲、乙液等量混合即可应用。
混合时应将乙液加人甲液内，染液呈紫黑色。
铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。
由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。
能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。
（二）丽春红酸性品红液丽春红（Ponceau 2R）0.7g酸性品红（acid fuchsin）0.3g蒸馏水99ml冰醋酸(glacial acetic acid) 1ml（三）1%磷钼酸水溶液磷钼酸（phosphomolybdic acid）1g蒸馏水加至100ml（四）2%苯胺蓝液苯胺蓝（aniline blue）2g冰醋酸（glacial acetic acid ）2ml蒸馏水加至100ml（五）亮绿液亮绿（light green）1g蒸馏水99ml冰醋酸（glacial acetic acid ）1ml（六）Bouin氏液苦味酸饱和液（1.22％）75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml此液一般在临用时配制，对皮肤及肌腱有软化作用。
二、操作方法1．组织固定于Bouin氏液，流水冲洗一晚，常规脱水包埋。
2．切片脱蜡至水：（1）二甲苯中脱蜡10分钟×3次，用吸水纸吸干液体；（2）100%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；（3）95%乙醇5分钟×2次，用吸水纸吸干液体；；（4）流水2分钟，用吸水纸吸干水分；3．Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
HE、Masson、VG、pas、免疫组化、TUNEL染色步骤
包埋，就是将已经经过固定，脱水，透明，浸蜡的组织块从最后的蜡浴取出置入充满熔融石蜡的包埋框内，包埋成块，使组织和包埋剂相熔一体并迅速冷却，这个程序称为包埋。
包埋剂凝固后，进一步加强了组织的硬度和韧度而便于进行切片。
一．石蜡包埋法石蜡包埋法是制作光学显微镜切片的常规方法，它有许多优点，操作简易便于掌握，可进行连续切片，包埋后的组织可以长期保存。
包埋的方法有自动包埋机包埋和手工包埋两种。
手工包埋的步骤如下：1.组织浸入石蜡后，包埋前将组织移入包埋用石蜡杯内。
从恒温箱取出置于三角架上，其下点燃酒精灯，以保持石蜡的溶解状态。
2.准备好包埋框，将包埋用的镊子在酒精灯上加温（防止镊子粘蜡）后，左手持蜡杯，右手把加温的镊子放在蜡口（直立状）倒蜡时让石蜡沿镊子注入包埋框内。
3.迅速镊取组织块放入包埋框石蜡内，切面朝下放正置入框底并轻轻压平，以保证不再有气泡。
4.待石蜡表面凝固前将标签贴于其上，需注意勿使标签与标本混淆，当蜡块冷至蜡面有一层透明蜡膜时，浸入冷水中迅速使其冷却，否则蜡内常形成结晶。
5.蜡块完全硬固后除去铜框，以保证蜡彻底凝固，立即修切，准备制成切片或储藏备用。
二．石蜡包埋的注意事项1.作为包埋组织使用的石蜡不仅由于气候的不同需要加以选择，而且与组织的硬度也有密切关系，过硬的组织最好用硬度较高的石蜡包埋，反之，软组织则应以硬度较低的石蜡包埋。
其熔点一般要求再60。
C左右。
2.包埋用石蜡加温不可过高，以保持其不凝固为度，温度过高容易将组织烫坏，使得组织变硬，变脆，并发生卷曲，收缩变形而不利于切片，甚至影响诊断。
另外注意埋蜡的温度和组织本身的温度，两者是否合适，温度不一致常可造成组织与周围石蜡脱裂的现象，而达不到包埋的作用。
3.包埋用石蜡应掌握用量，以组织全部包埋完毕，石蜡也恰好用完为宜。
4.包埋应注意组织病变面放在下面，并尽可能使组织放平，在不损伤组织的情况下可用镊子轻压。
5.囊壁和消化道等组织包埋时更应注意组织方位，应将组织块直立拉平，不要卷曲。
百度文库-苯胺蓝染色液说明书
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苯胺蓝染色液
产品说明：
苯胺蓝染色液是 Masson 三色染色试剂盒的组成之一。
苯胺蓝染色液主要有苯胺蓝、弱酸等组成，呈酸性，常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
产品组成：
货号 产品 规格 储存条件 S-1528 苯胺蓝染液 100ml
2-4℃ -- 说明书
1份
有效期：12个月 操作步骤(仅供参考)： 以Masson 三色染色为例 1.切片脱蜡至水。
2.Weigert 铁苏木素使用前（Weigert 铁苏木素 A 、 B 液等比例混合）。
染 10-20 分钟，流水稍洗。
3.盐酸酒精分化，流水冲洗数分钟。
4.丽春红酸性品红染液染 5-10 分钟，蒸馏水稍冲 洗。
5.磷钼酸溶液处理约 5 分钟，去掉溶液，不用水洗， 直接用苯胺蓝染液复染 5 分钟。
6.1%冰醋酸处理 1 分钟，95%酒精脱水。
7.无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树脂封固。
注意事项：
1. 切片脱蜡应尽量干净。
2. 切片入苯胺蓝染色液染色前不要水洗，否则可能出现不着色。
3. 不同染色参照具体的实验要求。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作 染色结果：
神经节组织×400 结果判定：主要用于神经组织、细胞、结缔组织的染色，使胶原纤维呈蓝色。
苏木精、苏木素染色液溶液配制方法
华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：华越洋苏木素染色液：500ml1) Harry`s苏木素苏木素 1g 无水酒精 10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g 用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素 1g无水酒精 50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水 50ml冰醋酸 5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。
B液： 29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水 95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。
masson染色结果分析
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号：DC0032套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋；2、切片常规脱蜡至水；3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗；4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟；5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟；6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗；7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片；8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)；10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)；11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。
改良Gomori三色染色液使用说明书
改良Gomori三色染色液使用说明书货号：G3510规格：4×50ml/4×100ml保存：RT避光，6个月有效。
产品内容：名称4×50ml4×100ml Storage试剂(A):Weigert铁苏木素A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT避光临用前，取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染色液，不宜提前配制。
试剂(B):酸性分化液50ml100ml RT试剂(C):Gomori染色液50ml100ml RT避光试剂(D):Gomori分化液50ml100ml RT产品简介：Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
Gomori染色液采用媒染剂和促染剂同时染色，可使结缔组织中的多种成分着色。
改良Gomori三色染色液可将胶原纤维染成绿色，肌纤维染成红色，细胞核染成蓝色。
操作步骤(仅供参考)：1、新鲜肌肉组织取材后立即进行冰冻切片，切片厚度为10-15µm。
2、用配制好的Weigert铁苏木素染色5-10min。
水洗。
3、流水冲洗5-10min，镜下观察。
如果染色过深，可用酸性分化液分化数秒（镜下观察）。
4、水洗返蓝，蒸馏水洗2-3次。
5、加入Gomori染色液染色20-40min，流水冲洗。
6、在上述操作过程中按蒸馏水：Gomori分化液=4:1比例配制Gomori分化工作液。
7、用Gomori分化工作液洗30s-90s，以镜下观察适当为宜，流水冲洗。
8、95%乙醇快速脱水，无水乙醇脱水3次，每次5-10s。
masson染色结果分析
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号：DC0032套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋；2、切片常规脱蜡至水；3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗；4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟；5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟；6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗；7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片；8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)；10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)；11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。
百度文库VanGieson染色液说明书
广州市外显子生物技术有限公司Http//Van Gieson染色液说明书货号：S-1515规格：50ml产品组成：名称规格保存Weigert铁苏木素Weigert A 25ml RT避光Weigert B 25ml RT 酸性分化液50ml RT VG染色液酸性品红染液5ml RT避光PA溶液45nl RT避光简介：胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维，广泛分布于各种脏器，其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。
Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱纤维；Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原；Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道；Ⅳ型胶原纤维主要在基膜中。
Van Gieson胶原纤维染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。
分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
PA分子量小，丽春红和复红次之，淡绿分子量最大。
VG染色后，肌纤维呈黄色，胶原纤维呈红色。
储存条件：本试剂盒应贮存于相对湿度不大于80％，无腐蚀性气体和通风良好的5℃～30℃室温环境。
有效期：原包装未开封试剂有效期为12 个月，在有效期内的已开封试剂应在开封后 6 个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
操作步骤：1.组织用10%甲醛液固定，常规脱水包埋。
2.切片脱蜡至水。
3.用Weigert铁苏木素液（使用前Weigert铁苏木素A、B两液等比例混合），染5-20分钟，稍水洗。
4.酸性分化液迅速分化，流水冲洗，蒸馏水洗数分钟。
5.用VG染液（使用前酸性品红染液与PA溶液1:9混合均匀，现配现用。
）染1-2分钟。
6.去掉染液，直接用95%酒精急速分化。
7.迅速脱水，二甲苯透明，中性树脂封固。
注意事项：1.Weigert铁苏木素分A、B两液，应于临用前将两液等份混合使用，而不宜预先混合，否则容易氧化沉淀而逐渐失去染色力。
2.VG染色后，经95%酒精分化时要迅速。
马松三色染色原理masson1
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一 Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
苏木精苏木素染色液溶液配制方法
苏木精苏木素染色液溶液配制方法Revised by BLUE on the afternoon of December 12,2020.华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：1) Harry`s苏木素苏木素 1g 无水酒精 10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛5g用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素 1g无水酒精 50ml甘油50ml硫酸铝钾蒸馏水 50ml冰醋酸 5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。
苯胺蓝染色液使用说明
苯胺蓝染色液使用说明
货号：G1350
规格：100ml
保存：室温避光保存，有效期24个月。
产品说明：
苯胺蓝染色液是Masson三色染色试剂盒的组成之一。
主要有苯胺蓝、弱酸等组成，呈酸性，常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
操作步骤(仅供参考)：
以Masson三色染色为例：
1、切片常规脱蜡至水。
2、用配制好的Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。
3、酸性乙醇分化液分化、水洗。
4、Masson蓝化液返蓝、水洗。
5、蒸馏水洗1min。
6、丽春红品红染色液染色5-10min。
7、磷钼酸溶液分化1-2min
8、倒掉分化液，直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min。
9、用弱酸工作液洗1min。
10、95%乙醇快速脱水。
11、无水乙醇脱水3次，每次5-10s。
12、二甲苯透明3次，每次1-2min。
13、中性树胶封固。
注意事项：
1.切片脱蜡应尽量干净。
2.切片入苯胺蓝染色液染色前不要水洗，否则可能出现不着色。
3.不同染色参照具体的实验要求。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
组织中成纤维细胞染色
组织中成纤维细胞染色
组织中成纤维细胞的染色可以通过多种染色方法实现，其中一种常用的染色方法是Masson三色染色法。
以下是其染色步骤：
1. 脱蜡至水：二甲苯Ⅰ5min，二甲苯Ⅱ5min，二甲苯Ⅲ5min，无水乙醇
1min，95%乙醇1min，75%乙醇1min，自来水冲洗数秒。
2. 用配置好的Weigert铁苏木素染色液染色8分钟。
3. 酸性乙醇分化液分化15秒，水洗。
4. Masson蓝化液返蓝5分钟，水洗。
蒸馏水洗1分钟。
5. 丽春红品红染色液染色5分钟。
6. 弱酸工作液洗1分钟。
7. 磷钼酸溶液洗1分钟，弱酸工作液洗1分钟。
8. 苯胺蓝染色液染2分钟，弱酸洗1分钟。
9. 脱水透明：95%乙醇快速脱水2-3秒，无水乙醇脱水3次，每次5-10秒，二甲苯透明3次，每次1-2分钟，中性树胶封固。
通过这种染色方法，成纤维细胞会呈现灰蓝色，核为蓝色。
此外，胶原纤维、黏液、软骨会呈蓝色（如亮绿液染色为绿色），胞质、肌肉、纤维素、神经胶质会呈红色，胞核为黑蓝色。
以上信息仅供参考，如需了解更多信息，建议查阅组织学相关书籍或咨询专业医师。
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北京吉美生物技术有限公司
Weigert 铁苏木素染色液
产品简介：
胶结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维，而胶原纤维（collagen fiber ）是分布最广、含量最多的一种纤维。
Weigert 铁苏木素染色液是染色力较为强的染色液，主要由苏木素和三氯化铁组成，临用前混合，多用于结缔组织的染色，如masson 三色染色、Van Gieson 染色等。
操作步骤（仅供参考）
1、 根据实验具体要求操作。
2、 一般Weigert 铁苏木素染色液染色1~5min.
注意事项：
1、 临用时配制Weigert 铁苏木素染色液，不可预先配制后放置，不宜长久保存。
2、 上述试剂均有刺激性，请小心操作。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
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