微生物的实验室培养导学案(含答案)教学文案
【人教版】选修一生物：2.1《微生物的实验室培养》导学案
专题2课题1 微生物的实验室培养一基础知识1.培养基（1）培养基的种类包括培养基和培养基等。
（2）培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分，（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件【思考】为什么各种营养基的具体配方不同，但一般都有水、无机盐、碳源和氮源？2.无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①②③④（2）消毒是指灭菌是指【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？（3）实验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。
常用的灭菌方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。
二实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤：→→→→倒平板【思考】⑴培养基灭菌后，需要冷却到50左右，才能用来倒平板。
你用什么方法来估计培养基的温度？⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？⑶平板冷凝后，为什么要将平板倒置？⑷在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？2.纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法中最常用的是和。
平板划线法是指。
稀释涂布平板法是指。
【思考】①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？②在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？③在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？（3）平板划线法和稀释涂布平板法的优缺点：（4）平板划线法和稀释涂布平板法的适用范围：1.菌种的保存为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。
对于频繁使用的菌种，我们可以采用法；对于需要长期保存的菌种，可以采用法。
高中生物 专题二 微生物的实验室培养导学案新人教版选修1
高中生物专题二微生物的实验室培养导学案新人教版选修1微生物的培养与应用课题：微生物的实验室培养【本节目标解读】【课程目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。
【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作【基础知识】一、培养基1、概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2、分类方式：分类标准类型备注培养基的培养基、培养基和半固体培养基培养基中加入凝固剂（有琼脂、明胶、硅胶等）即为培养基。
培养基实验室中最常用的培养基之一微生物的种类细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养培养基的特殊用途基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
鉴别培养基：是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。
如鉴别大肠杆菌的伊红美蓝培养基，鉴别纤维素分解菌的刚果红培养基。
3、营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
4、培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
5、E、coli指。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
二、无菌技术：1、关键防止的入侵。
围绕如何避免杂菌的污染展开。
2、无菌技术（1）对实验操作的、操作者的和进行。
（2）将用于微生物培养的、和等器具进行。
（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
河南省林州市第一中学高二人教版生物选修一导学案：21（第三课时）微生物的实验室培养
2.1微生物的实验室培养（第3课时）【导】（2分钟）“在借助显微镜第一次直面微生物之后，一代又一代科学家建立、发展和完善了微生物技术。
课题1将带领我们学习这些技术中最基本、最核心的微生物培养技术。
”【学习目标】阅读18—20页，掌握纯化大肠杆菌的操作。
【重、难点】学会纯化大肠杆菌的方法。
【思】（10分钟）1.微生物的接种方法有哪些？最常用的是什么方法？这些技术的核心是什么？在书上勾画出来。
2.在书上找出菌落的概念并勾画。
3.如何纯化大肠杆菌？说说原理。
4.看课本18页“平板划线操作”，思考：（1）找出平板划线法的概念并勾画。
（2）为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？（3）在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？（4）在作第二次以及其后的划线操作是为什么总是从上一次划线的末端开始划线？（5）除了上述，你觉得平板划线操作还需要注意哪些？5.看课本19页“稀释涂布平板法”，思考：（1）找出稀释涂布平板法的概念并勾画。
（2）涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行，结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，涂布平板操作的第2步应如何进行无菌操作？6.接种完成后，如何培养大肠杆菌？纯化大肠杆菌操作成功的标准是什么？7.讨论完成20页“结果分析与评价”中的问题。
8.看课本20页“课题延伸”，想一想为什么要对菌种保藏？保藏方法有哪些？试着简要说明。
【议】（5分钟）小组成员起立、聚首、讨论，并解决自学中的疑惑和发现的问题。
【展】（10分钟）各组展示讨论成果，其它小组可以大胆质疑、挑战、补充和完善。
【评】(8分钟）教师点评总结，学生记录重要知识点，并动手构建本节知识框架：【检】（5分钟）1.有关平板划线操作的叙述，正确的是（）A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C.把皿盖打开，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置，放入培养箱中培养2.下列有关平板划线接种法的操作错误的是（）A.将接种环放在火焰上燃烧B.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D. 接种环划线要将最后一区的划线与第一区的划线相连3.有关稀释涂布平板法的叙述错误的是()A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面C.适宜条件下培养。
高中生物 2.1微生物的实验室培养导学案 新人教版选修1
高中生物 2.1微生物的实验室培养导学案新人教版选修11、掌握培养基的配制、分装方法,简述有关培养基的基础知识。
2、说出灭菌和消毒的概念及两者的区别。
3、简述常用的消毒与灭菌方法。
4、掌握实验室灭菌方法及技术,进行无菌技术操作。
预学案一、培养基1、概念:人们按照微生物对①营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质叫培养基。
可分为液体培养基和②固体培养基。
2、营养构成:各种培养基一般都含有水、③碳源、氮源和无机盐,此外还要满足微生物生长对④pH 、特殊营养物质以及氧气的要求。
二、无菌技术1、获得纯净培养物(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行⑤清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行⑥灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在⑦酒精灯火焰附近进行。
(4)实验操作时应避免⑧已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2、消毒和灭菌(1)消毒是指使用较为⑨温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部⑩一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。
常用的方法有煮沸消毒法和巴氏消毒法。
(2)灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物。
常用的方法有:灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
四、纯化大肠杆菌1、微生物接种最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
2、平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
3、稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
探究案知识点一:培养基1、培养基的组成成分有哪些?你知道培养微生物时,除必需的营养成分外,还需要怎样的条件?2、培养基的分类依据有哪些?分为哪些种类?3、如何区分选择性培养基、鉴别培养基?分别有何作用?4、配制培养基需要遵守哪些原则?知识点二:无菌技术与大肠杆菌的纯化培养1、请你为以下器皿或材料选择恰当的灭菌方法。
高中生物2.1微生物的实验室培养导学案新人教版选修
高中生物2.1微生物的实验室培养导学案新人教版选修预习案学习目标11、了解有关培养基的基础知识。
2、进行无菌技术的操作。
3、进行微生物的培养。
4、实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌;常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法。
方法条件作用对象消毒煮沸消毒法100 C ，煮沸5〜6 min杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢巴氏消毒法70〜75 ℃煮30 min 或80℃煮15 min不耐高温的液体化学药剂法体积分数为70%的酒精对双手消毒质量分数为50%的石炭酸、来苏水对空气消毒一定浓度的乳酸、食醋通过熏蒸对空气进行消毒紫外线法紫外线照射30 min物体表面或空气中的微生物灭菌灼烧灭菌在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧对接种环、接种针或其他金属工具灭菌，也可以对试管口、瓶口灭菌干热灭菌在干热灭菌箱内，160〜170 "条件下，加热1〜2 h耐高温且需保持干燥的物品，如玻璃器皿和金属用具等高压蒸汽灭菌在高压蒸汽灭菌锅内，121℃,100 kPa，灭菌15〜30 min主要是耐高温物品，如金属器械、玻璃、塘瓷、橡胶及一些药物等紫外线30 W照射30 min 小型接种室、接种箱等自主梳理11、培养基(1)概念：人们按照微生物对________的不同需求，配制出供其________的营养基质。
(2)培养基的种类(3)成分：a、主要成分：水、________、氮源、________。
b、其他成分：还需要满足微生物对________、特殊营养物质以及________的要求。
c、请连线表示牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成：①牛肉膏a、碳源、氮源和维生素②蛋白胨b、碳源、氮源、磷酸盐和维生素③NaClc、氢元素和氧元素④H2Od、无机盐d、请连线完成其他培养基的特殊要求：①培养乳酸杆菌a、将pH调至酸性②培养霉菌b、pH调至中性或微碱性③培养细菌c、培养基中添加维生素④培养厌氧微生物d、需提供无氧条件2、无菌技术(1)目的：获得________培养物。
高中微生物的实验室培养学案及答案教案
高中微生物的实验室培养学案及答案教案SANY GROUP system office room 【SANYUA16H-课题1微生物的实验室培养【课程目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。
基础知识一、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？【补充1】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：(一)获得纯净培养物的关键是，具体操作如下：1．对实验操作的、操作者的和进行。
2．将用于微生物培养的、和等器具进行。
3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
(二)消毒和灭菌1．消毒是指。
常用的方法有、、消毒法。
2．灭菌是指。
常用的方法有：、、灭菌。
分别适用于那些用具？〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止实验操作----大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。
微生物的实验室培养导学案（含答案）
微生物的实验室培养导学案（含答案）课题1 微生物的实验室培养基础知识一、培养基1．概念：人们按照微生物对__营养物质_的不同需求，配制出的供其___生长繁殖___的营养基质。
2.种类：按照培养基的物理性质划分（1）___液体____培养基：配制成的____液体___状态的基质。
（2）__固体______培养基：在_____液体___培养基中加入___凝固剂__，如琼脂后，配制成的____固体___状态的基质，是实验室中最常用的培养基之一，微生物在其上面生长，可形成肉眼可见的_____菌落____。
3.组成成分：各种培养基的具体配方_不同____，但一般都有_____水______、_____碳源______、_____氮源______、____无机盐_______，此外培养基还需要满足微生物生长对___PH________、_ ___特殊营养物质_______ 以及____氧气_______的需求。
二、无菌技术获得纯净培养物的关键是_____防止外来杂菌的入侵________。
1．消毒是指使用____较为温和_____的物理方法或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分__ __对人体有害______的微生物（不包括__芽孢__和__孢子____）。
实验室常用的消毒方法有____煮沸消毒法______、____巴氏消毒法_____、____化学药剂消毒法____。
2.灭菌是指使用____强烈_____的理化因素杀死___物体内外所有_____的微生物，包括_____芽孢_____和_____孢子_____。
常用的灭菌方法有____灼烧灭菌___、__干热灭菌__、___高压蒸汽灭菌____。
3.实验操作中避免杂菌的污染，主要包括四方面的内容：（1）对实验操作的__空间____、操作者的___衣着和手_____进行清洁和消毒。
（2）将用于微生物培养的__器皿__、___接种用具____和___培养基____等进行灭菌。
(完整版)选修1_专题2_课题1微生物的实验室培养导学案及答案
中学高效课堂高二生物选修1导学案课题专题2 课题1 微生物的实验室培养导学案备课时间授课时间编号备课教师备课组长课型学习目标1.了解培养基的用途、种类及一般成分，2.掌握培养基制作的一般的步骤，3.掌握微生物分离中的划线法和涂布法。
4.学会一般的消毒、灭毒的方法，进行无菌技术的操作。
德育渗透通过本节学习，了解和掌握生物技术在日常生活中的应用，所以要认真学好生物知识。
学习重点培养基的制备、微生物的培养的操作。
学习难点培养基的制备和微生物的分离。
学法指导课前预习，完成自主学习内容。
课前阅读教材，完成自主学习部分，为课上合作探究作好准备。
自主学习内容教师活动（一）培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其营养基质称为培养基。
可分为培养基和培养基。
2．营养构成：各种培养基一般都含有水、、和无机盐，此外还要满足微生物生长对、特殊营养物质以及氧气的要求。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
（二）无菌技术A、获得纯净培养物的关键是防止外来的人侵，具体操作如下：1．对实验操作的、操作者的和进行清洁和消毒。
2．将用于微生物培养的、接种用具和培养基等器具进行。
3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
B、消毒和灭菌1．消毒是指使用较为的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。
常用的方法有消毒法和消毒法。
2．灭菌是指使用的理化因素杀死物体内外的微生物。
常用的方法有：灭菌、灭菌、灭菌。
（三）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板1.计算：根据比例，计算100mL培养基各成分用量。
2.称量：牛肉膏较黏稠，可用玻棒挑取，同一同称量。
称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
3.溶化：加水加热熔化牛肉膏与称量纸→取出称量纸→加入蛋白胨和氯化钠继续加热→加入→用蒸馏水定容到100mL（整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）。
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新都一中
灭菌的方法：
①、灼烧灭菌：如接种针。
②、干热灭菌：160-170 ℃ 下加热1-2h。如玻璃器皿。
③、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 ℃下维持1530min.如培养基、
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禁止外传
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禁止外传
最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀 灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体 ，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。
有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防 止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧 瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也 可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气 通过，而空气中的其他微生物不能通过。
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新都一中
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1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他 外来微生物污染外，还有什么目的？
工业生产 分类、鉴定
新都一中
知识拓展
禁止外传
划分 培养基 标准 种类
特点
用途
化
天然培 养基
含化学成分不明确的 天然物质
工业生产
学 成 分
合成培 养基
培养基成分明确(用 化学成分已知的化学 物质配成)
划分 标准
培养基种类
特点
禁止外传
用途
液体培养基 不加凝固剂
工业生产
物理 半固体培养 性质 基
固体培养基
加凝固剂，如琼脂
观察微生物的运动、 分类、鉴定
微生物分离、鉴定、 活菌计数、保藏菌种
化学 成分
天然培养基 合成培养基
含化学成分不明确 的天然物质
培养基成分明确 (用化学成分已知 的化学物质配成)
微生物实验室培养导学案3
课题1微生物的实验室培养（3）导学案
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一纯化培养大肠杆菌
(1)纯化培养的原理：设法在培养基上得到由繁殖而来的肉眼可见的。
(2)纯化培养方法：最常用的方法有和。
(3)稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的，然后将不同稀释度的菌液分别到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
操作步骤是：①系列稀释(梯度稀释)操作：
②涂布平板操作：
将接种后的培养基与未接种的培养基都放入37℃恒温箱中，培养12h和24h后，分别观察并记录结果。
1培养未接种培养基的作用是，若有菌落形成则说明了。
2如果培养基上生长的菌落的一致，并符合菌落的特点，则说明实验过程中无菌操作基本符合要求。
培养12h和24h后的菌落大小不同，菌落位置基本
3如果在培养基上出现了2种特征不同的菌落，其可能原因是什么？
二菌种的保藏
①对于频繁使用的菌种，可以采用的方法
首先，将菌种接种到试管的上，在合适的温度下培养，长成菌落后，放入℃的冰箱中保藏。
以后每个月都要将菌种从旧培养基上转移到新培养基上。
缺点：。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用的方法。
菌液与灭菌后的甘油混合均匀后放在℃的冷冻箱中保存。
开始视频学习，然后完成相关练习，按时按要求在班级群中提交作业
单细胞菌落的获得
(1)利用平板划线法接种时，单细胞菌落从后划线的区域挑取。
(2)利用稀释涂布平板法接种时，只有合适的稀释度才能得到单细胞菌落。
微生物实验室培养导学案
说明： 1.本导学案依据“三三五高效课堂”教学模式设计，突出指导、组织学生学习的方法和过程。 2.导学五环节在此表中的展现要求写成提纲式，简明扼要。 3.在附页中执教老师依据本导学案五个环节进行具体、个性化的复备。
说明： 1.本导学案依据“三三五高效课堂”教学模式设计，突出指导、组织学生学习的方法和过程。 2.导学五环节在此表中的展现要求写成提纲式，简明扼要。 3.在附页中执教老师依据本导学案五个环节进行具体、个性化的复备。
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训 内容及反馈设计： 课堂训练练习册P22页当堂双基达标。 练 课后作业：课时作业（四） 训 反 练 馈 案 归 纳
探 展 究 示 点 案 评 提 升 合 作 探 究 ) 合 作 探 究 延 伸 课 后 反 思 总 结
内容要点及组织设计：同学们结合课本图片及文字展开激励的讨 论，每组选派成员陈述讨论结果。教师播放实验视频，总结。 (一) 基础知识 1:琼脂是从红藻中提取的多糖,在配制培养基中用作为凝固剂 。 2:C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素。 3:牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖,维生素和有机氮等营养物 质。 4:培养乳酸杆菌时需要添加维生素,培养霉菌时需要将培养基pH调 节为酸性 ，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性 。 5:无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是防止感染实 验操作者 。 （二）实验操作 1：锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是消灭瓶口的杂菌，防止杂菌感 染培养基。 2：倒平板的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基 表面。 3：不能。空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培 养基。 4：配制斜面培养基中，试管要加塞棉塞的目的是保持通气并防止 杂菌感染. 内容要点及组织设计： １、收集生活中与微生物有关的实例，并通过所学知识对其进行 解释 ２、我们打针输液时，首先要用酒精擦拭针刺处，为什么？
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微生物的实验室培养导学案(含答案)课题1 微生物的实验室培养基础知识一、培养基1．概念：人们按照微生物对__营养物质_的不同需求，配制出的供其___生长繁殖___的营养基质。
2.种类：按照培养基的物理性质划分（1）___液体____培养基：配制成的____液体___状态的基质。
（2）__固体______培养基：在_____液体___培养基中加入___凝固剂__，如琼脂后，配制成的____固体___状态的基质，是实验室中最常用的培养基之一，微生物在其上面生长，可形成肉眼可见的_____菌落____。
3.组成成分：各种培养基的具体配方_不同____，但一般都有_____水______、_____碳源______、_____氮源______、____无机盐_______，此外培养基还需要满足微生物生长对___PH________、_ ___特殊营养物质_______ 以及____氧气_______的需求。
二、无菌技术获得纯净培养物的关键是_____防止外来杂菌的入侵________。
1．消毒是指使用____较为温和_____的物理方法或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分__ __对人体有害______的微生物（不包括__芽孢__和__孢子____）。
实验室常用的消毒方法有____煮沸消毒法______、____巴氏消毒法_____、____化学药剂消毒法____。
2.灭菌是指使用____强烈_____的理化因素杀死___物体内外所有_____的微生物，包括_____芽孢_____和_____孢子_____。
常用的灭菌方法有____灼烧灭菌___、__干热灭菌__、___高压蒸汽灭菌____。
3.实验操作中避免杂菌的污染，主要包括四方面的内容：（1）对实验操作的__空间____、操作者的___衣着和手_____进行清洁和消毒。
（2）将用于微生物培养的__器皿__、___接种用具____和___培养基____等进行灭菌。
（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在____酒精灯火焰____附近进行。
（4）实验操作时应避免______已经灭菌处理____的材料用具与周围物品相接触。
4.在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被_____微生物污染____。
使用后的培养基丢弃前一定要进行____灭菌____处理，以免污染环境。
三、分离纯化大肠杆菌本实验使用的培养基为_____牛肉膏蛋白胨_____培养基。
进行大肠杆菌的纯化培养，可分为__ _制备培养基_____和______纯化大肠杆菌_________两个阶段。
1.制备培养基的一般步骤为：_____计算_____、____称量___、_____溶化_____、____灭菌______、_____倒平板______。
2.纯化大肠杆菌：微生物接种最常用的方法是____平板划线法_____和____稀释涂布法____。
收集于网络，如有侵权请联系管理员删除（1）平板划线法通过_____接种环______在琼脂固体培养基表面连续___划线____的操作，将_____聚集_____的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
（2）稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的_____梯度稀释______，然后将不同稀释度的菌液_____分布涂布______到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
3.菌落的概念：_____由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体________。
4.结果分析：（1）如果接种了大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，说明_______接种符合要求_______；（2）若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中_______有杂菌未消化___________；（3）未接种大肠杆菌的空白对照的培养基在培养过程中若长出菌落，则说明____培养基灭菌______不彻底，实验失败。
四、菌种保存1.对于频繁使用的菌种，可以采用_______临时保藏________的方法。
（1）过程：首先将菌种接种到试管的_______固体斜面培养基上_____，合适温度下培养，菌落长成后，放于____4℃__冰箱中保藏，每隔3—6个月，都要将菌种从旧的培养基上转移到新的培养基上。
（2）缺点：保存时间_____短________，菌种容易被___污染________或产生_____变异____。
2.对于需要长期保存的菌种，可以采用______甘油管藏_______的方法，将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混匀于____-20℃____的冷藏箱内保存。
随堂练习1．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时(C)①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①②B．③④ C．①③D．②④2．下列有关微生物培养与应用的说法正确的是(C)A．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源3．下列对灭菌和消毒的理解不正确的是(B)A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B．消毒和灭菌实质上是完全相同的C．接种环用灼烧法灭菌 D．常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是(C)A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D．接种了的选择培养基5．下列关于微生物的分离和培养的有关叙述，错误的是 (A)A．微生物培养前，需对培养基进行消毒 B．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度C．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源6．三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。
培养36 h后，计算菌落数，结果如下表。
下列选项正确的是(D)收集于网络，如有侵权请联系管理员删除A. 该实验采用的是液体培养基 B．该实验采用平板划线法接种C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖7.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( C )A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板8.有关倒平板的操作错误的是…………(C )A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置9.有关平板划线操作正确的是…………(D )A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞c．将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放人培养箱中培养10.关微生物营养物质的叙述中，正确的是( D )A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量8．下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。
请回答：(1)__氮源__中能充当碳源的成分是_牛肉膏和蛋白胨__。
培养基配制完成以后，一般还要调节pH，并对培养基进行__灭菌_处理。
该培养基从物理性质上分类属于_固体培养基_。
(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__平板划线法_和__稀释涂布平板法_。
(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)___稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染。
____。
9.葡萄酒是具有多种营养成分的高级饮料。
某同学制作葡萄酒的过程大致如下：将冲洗过并晾干的成熟葡萄捏烂，与糖按10∶3的比例放入发酵瓶，搅拌密封后发酵。
初期，泡沫不断增多，随着时间的延长，泡沫逐渐减少，待基本不产生气泡后，结束发酵。
根据上述过程，回答以下问题。
(1)发酵所需的酵母菌菌种的来源是__葡萄表皮上附着的野生型酵母菌______。
(2)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种。
若想筛选出这样的菌种，步骤如下：①获得野生菌：从酵母菌的生存环境中获得野生菌；②制备__选择_培养基：在基本培养基的基础上，注意添加_适量的糖(蔗糖或葡萄糖)___并__调整pH__，灭菌后制成平板；③接种：采用_稀释涂布平板(或平板划线)_法将野生菌接种在平板上；④培养：在适宜条件下培养一定时间；⑤选种：从__生长良好的菌落_中筛选出所需要的菌株。
(3)增大接种量能缩短发酵时间。
为增加菌种的量，在上述⑤中获得所需菌株后，可以采取的措施是_扩大培养(或多次培养)_。
(4)酿酒过程中，经检测发现活菌数量适宜却不产生酒精。
在酿酒初期应采取的措施是__隔绝空气(或加强密封)_。
(5)葡萄汁中加入糖的目的是_酵母菌提供碳源，促进发酵_。
(6)密封发酵后泡沫增多，这时应该采取的措施是_松盖放气__。
(7)为研究发酵瓶中酵母菌的生长状况，常进行取样统计分析。
一般用显微计数法测定酵母菌数量时常常需要借助一种特制的载玻片——__血球计数板_来完成。
13． (2009·上海卷)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。
某研究小组依照下图所示的实验方案，筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。
培养基配方如表。
表培养基的组成__琼脂____(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是__先调pH，后灭菌_。
(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于____基本(通用)___培养基和____选择_培养基。
在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是____硝酸铵__。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为_芽孢_。
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