人参皂苷提取工艺的研究

人参皂苷提取工艺的研究

【摘要】为提高人参皂苷的提取率和纯度，本文以人参皂苷re

和rb1为指标，比较了回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法3种不同方法提取人参皂苷的优劣。结果表明：回流提取法、超声水提法湿法、湿法粉碎提取法人参皂苷re提取率分别为83.38％、90.23％、96.78％；人参皂苷rb1提取率分别为73.34％、80.11％、90.71％。综合分析，说明湿法粉碎提取法艺效果最佳，超声水提法次之，回流提取法效果最差。本研究为工业化提取人参皂苷提供了新途径。

【关键词】人参皂苷re、rb1；回流提取法；超声水提法；湿法粉碎提取法

人参为五加科植物人参(panaxginsengc.a.mey)的干燥根，别名山参、鬼盖、棒槌、土精、神草、棒槌等。是多年生草本植物，喜阴凉、湿润的气候。人参被人们称为“百草之王”，是闻名遐迩的“东北三宝”之一，历来是我国中医的名贵药材。味甘、微苦、微温，可补气、生津安神、增强免疫力。其主要活性成分为人参皂苷，目前为止共分离出30余种，其中主要为人参皂苷ra1、ra2、ra3、rb1、rb2、rb3、rc、rd、re、rf、rgl、rg2、rg3、rhl等。人参皂苷提取方法较多，如浸渍法［1］、回流提取法［2］、超声波提取法［3-4］、醇-吸附树脂法［5］和微波法［6］等。本文对回流提取法、超声水提法、湿法粉碎提取法进行了比较。

1实验材料与仪器

日本岛津lc-2010aht型高效液相色谱仪；天孚牌电子计数天平由金羊天平仪器公司生产；3l超声波提取器(上海超声波仪器厂)；高速组织捣碎机(上海标本模型厂)；101-3c型烘箱(上海实验仪器厂)；人参购于吉林市药材站；人参皂苷re和人参皂苷rb1标准对照由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。

2实验方法

2．1人参皂苷的提取方法

2．1．1超声水提法

参照文献［7］的方法，称取人参粉末40g，加定量水浸泡过夜，常温超声提取3次，超声时间每次40min，抽滤，合并滤液，上d101大孔吸附树脂柱，去除杂质，水洗脱至流出液为无色，再用80％乙醇洗脱至洗脱液tlc检查无皂苷反应为止，乙醇洗脱液减压回收至干，残渣即为人参皂苷粗品，定容至200ml量瓶中，摇匀备用。2．1．2湿法粉碎提取法

称取人参粉末40g，将人参粉末分别用60％乙醇和70％乙醇溶解，于10000r·min-1高速粉碎提取2次，粉碎后药液于5000r·min-1离心10min，取上清液，合并2次提取液，定容至200ml量瓶中，摇匀备用。

2．1．3回流提取法

称取人参粉末40g，置于500ml圆底烧瓶中，加入50%甲醇溶液100ml，回流提取4h，用微孔滤膜(0.45um)滤过，滤液用50%甲醇

溶解转移至200ml容量瓶中并定容至刻度。取滤液适量，

10000r·min-1离心10min，取上清液定容至200ml量瓶中，摇匀备用。

3实验结果

3．1出膏率测定

从每份人参皂苷提取液中精确量取20ml，置于蒸发皿中，先用水浴蒸干，后于100℃干燥3h，取出置于干燥箱中，30min后取出称重，计算出膏率。

3．2色谱条件

色谱柱：hypersilc18色谱柱(4.6mm×150mm，5um)；流动相：水-乙腈；梯度洗脱：0-40min：18％-29％乙腈，40-60min：29％-35％乙腈，60-65min：35％-100％乙腈，65-70min：100％-18％乙腈；流速为0.8ml·min-1；进样量20ul；柱温：室温；检测波长是205nm。3．2对照品溶液的制备

分别精密称取人参皂苷re、rb1对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷0.41mg，摇匀，作为对照品贮备液。

3．3供试品溶液的制备

精密称取上述各人参皂苷提取液10ml，置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣用适量甲醇溶解并用甲醇定容于10ml量瓶中，摇匀，用微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。分别吸取20ul供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，计算各提取方法所得人参皂苷的提取率。结果回流提取法、超声水提法湿法、湿法粉碎提取法人参皂苷re提

取率分别为83.38％、90.23％、96.78％；人参皂苷rb1提取率分别为73.34％、80.11％、90.71％。

4讨论

传统的人参皂苷提取多采用传统的加热回流提取方法，但弊端很多，近年来湿法粉碎提取法和超声波提取法被应用于中药化学成分提取，其中超声波法提取时间短、收率高。湿法粉碎提取法用于中药有效成分的提取，有效成分提取率显著增高，出膏率高，提取时问明显缩短。

本文分别探讨了采用回流提取法、超声水提法湿法、湿法粉碎提取法对人参皂苷re和rb1提取率的影响，各组人参皂苷提取率相差较明显，回流提取法、超声水提法湿法、湿法粉碎提取法人参皂苷re提取率分别为83.38％、90.23％、96.78％；人参皂苷rb1提取率分别为73.34％、80.11％、90.71％。三种提取方法所用的时间却相差较大，回流提取时间为4h，超声波提取时间为120min，湿法粉碎提取法为40min。从提取时间及能源损耗等方面比较，后2种方法操作简单快捷，有着比传统回流提取方法更高的提取率，可替换回流提取，广泛应用于工业化生产。通过几种工艺的比较及最后的综合分析，说明湿法粉碎提取法艺效果最佳，超声水提法次之，回流提取法效果最差。

参考文献

［1］张春红,张崇禧,郑友兰,翟爱龙,胡昊,王茂义.浸渍法提取人参皂苷最佳工艺的研究［j］.吉林农业大学学报.2003,25(1)：

73-74.78.

［2］黄新生.人参茎叶生产提取方法及其含量测定［j］中成药研究.1983(5)：7．

［3］李化.超声波在中草药成分中的应用［j］中药

材.2001,24(4)：299-300.