11 尿液显微镜检查

有形成分形态清晰，易于识别，尤其是透 明管型及各种形态的红细胞、上皮细胞； 能区别存活及死亡的中性粒细胞和检出闪 光细胞； 有助于其他有形成分的观察及标本保存
第五章 尿液一般检验
尿液有形成分定量分析方法评价
方法
标准化定量分析板法
优点
避免主观因素影响，重复性好，便于临床动态观察； 定量计数，标准化的器材符合CLSI和CCCLS要求，为推荐方法 ；
2．标准化沉渣定量计数板法
FAST-READ10尿液标准 化沉渣定量计数板具有 耐高温、高压，清晰度 极高的性能。每个计数 室体积为1μ l，充满尿 液后所计得有形成分数 量为细胞或管型数/μ l。
检测： ①标本离心浓缩50倍，充入计数室； ②计数方法与报告方式同牛鲍计数板法； ③若标本中有形成分含量较多，也可采用未离心标本直接计数。
管型数。⑤计算1小时细胞（管型）排泄率。
1小时细胞数＝10大格细胞总数 1000 3小时尿总量 ml 数 10 3
1小时管型数＝
20大方格管型总数 1000 3小时尿总量 ml 数 2 10 3
式中：1000为ml换算成μl 数；10为尿液浓缩倍数。 改良牛鲍氏计数板定量检查法还可用于Addis计数。
（二）尿液有形成分定量检查法
1. 改良牛鲍氏计数板定量检测法：
混匀的非离心尿直接充入计数池，低倍镜计数10个大方格 的管型数，高倍镜计数10个大方格的红、白细胞数，得出尿
液有形成分数量／μl。
倒置显微镜检查法：将未离心的混匀尿液定量放入酶标板 小孔中，静置规定时间后有形成分自然下沉至孔底，在倒置 显微镜下用高倍镜计数10个视野或规定区域中的细胞和管型 数。报告尿液有形成分数量／μl 。
溶液Ⅱ：1.5％派若宁B水溶液。
两液过滤，按2:1比例混合，棕色瓶贮存，冷藏。 （2）操作：①在0.2ml沉渣中加入1～2ｄ染色液； ②混合5～10min后镜检。 或2d沉渣+1ｄ染液混合后镜检。
（3）染色后的有形成分形态为： 1）红细胞：粉红、红色或不着色。 2）多形核白细胞：核呈蓝色，胞质呈红色。可分辨浓染细 胞、淡染细胞和闪光细胞。 3）管型：基质染蓝色。①透明管型---少许红色颗粒。②颗 粒管型---有粗大的紫红色颗粒。③细胞管型---细胞核淡或 深蓝色，细胞质红色。④蜡样管型---红色或紫色。⑤脂肪 管型---无色或黄色 4）其他：鳞状上皮细胞---淡粉红或紫红色，移行上皮细胞 肾小管上皮细胞---紫红色。
检查期间不能大量饮水，计数板清洗、消毒不方便， 盖玻片上的杂物可干扰计数
尿液有形成分定量 计数仪法 尿中颗粒计数参考 方法
许多步骤仍为人工操作，存在人为误差； 显微镜检查仍必不可少
非离心标本倒置显 微镜定量计数法
有形物沉淀易受尿比密影响。 仪器器材要求较高：①倒置显微镜与 酶标板必须配套。②酶标板的光洁度 、深度、底面积等均有严格规定。③ 需严守操作规程。不便于临床推广
第六章 尿液一般检验
2. 离心尿液直接涂片镜检法
①取混匀尿10ml于刻度离心管中； ②离心1500r/min×5 min； ③保留沉淀物0.2ml； ④混匀，取约20μl于载玻片，加18mm×18mm盖玻片覆盖； ⑤观察方法及结果报告同未离心尿未染色直接涂片镜检法。
报告时须注明“离心取沉渣”。
第六章 尿液一般检验
• 4. 尿液有形成分定量计数仪法
由自动进样系统、流动计数池、显微镜和计算机控制系统组成。 流动计数池大小与标准载玻片相同，有4个大格，总容积1μl，每 个大方格又分为25个小方格，每个小方格容积为0.01μl。 ①标本离心浓缩50倍。 ②进样。
③观察流动计数池中央视野中的有形成分；计数1个小方格内细胞数，结
1．未离心未染色尿直接涂片镜检法
混匀新鲜尿液直接涂片，低倍镜观察管型（至少20个视野）；
高倍镜观察细胞（至少10个视野）及其他成分（如细菌、原虫、
真菌病毒包含体和肿瘤细胞等）并对管型种类进行鉴定。 报告细胞：最低数～最高数/HP；管型：最低数～最高数/LP；
结晶‘细菌、真菌、寄生虫，按高倍镜视野中分布范围估计报告， 用“+”表示。
3.固定染色法
瑞-吉染色、H-E染色、巴氏染色、苏丹Ⅲ染色等方法
第五章 尿液一般检验
（四）尿液颗粒计数参考方法
• Fuchs-Rosenthal（菲斯-罗森塔）血细胞计数板
每侧计数池划线格面积16mm2，计
数室深度为0.2mm，总容量为3.2 mm3；分为16个中方格，每个中方
格面积为1mm2，容积为0.2mm3。
第六章 尿液一般检验
• 2.非染色尿液和染色尿液显微镜检查的方法评价
非染色尿液和染色尿液显微镜检查的方法评价
方法 非染色尿液 直接涂片法 染色尿液显 微镜检查法 优点 简便、经济 缺点 非染色的红细胞、透明 管型等成分不易观察， 导致漏检
繁琐、费时； 染液污染的器材不容易清洗 ，析出的染液沉渣易导致背 景不清晰
③任何一项理学、化学检验结果异常。
国内大多数学者认同的复检要求：白细胞、尿隐血（或红细 胞）蛋白质、亚硝酸盐四项结果，任何一项异常均需要做显
微镜复检。
三、尿液主要有 形成分的形态和临床应用
第五章 尿液一般检验
（一）细 胞
红细胞 均一性红细胞 非均一性红细胞
细 白细胞：主要介绍形态完整的中性粒细胞：脓细胞、闪光细胞 胞 种 类 吞噬细胞：大吞噬细胞、小吞噬细胞
果 乘以100，或计数10个小方格内的细胞总数乘以10，换算出1μl尿液中 的细胞数。计数1个大方格内管型数，结果×4，即得出1μl尿液中的管型
数。
④若有形成分含量较多，也可采用未离心标本直接计数。 ⑤结果报告方式同尿液有形成分定量计数板法。
⑥注明标本是否离心。
（三）尿液有形成分染色检查法
1.结晶紫-沙黄（Sternheimer-Malbin，S-M）染色法
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少见
难于检出 难于检出
少见
难于检出 难于检出
极少见
难于检出 难于检出
尿液有形成分 显微镜检查的临床应用
1．泌尿系统疾病的定位诊断、鉴别诊断及预后判断。
2. 尿液干化学检验以及自动分析结果的复检手段。 NCCLS规定，凡有下述情况的应进行显微镜检查：
①医生提出镜检要求。
②因患者病种、病情或其他检查结果而要求（如肾病、糖尿 病、应用免疫抑制剂患者及妊娠妇女）时。
肾小管上皮细胞、复粒细胞和含铁血黄素细胞 上皮细胞 移行上皮---表层（大圆）、中层（尾形）、底层 鳞状上皮细胞
第六章 尿液一般检验
红细胞
双凹圆盘状，浅黄色，直径约8μm， 厚约3μm，中度折光性，侧面观呈沙漏状。高渗尿中 ，呈锯齿形，有时可见表面呈颗粒状。低渗尿中，为 无色的影细胞。 每升尿液中含血液在1ml以上时，能见到不同程度 的红色称为肉眼血尿； 每升尿液中含血液在1ml以下时，只能用隐血试验 或沉渣镜检发现，称隐血或镜下血尿。
每个中方格又划分为16个小方格， 边长为0.25mm，面积为0.0625 mm2。
•①标本离心浓缩50倍；②混匀后充入计数室；③显微镜计数与 报告方法同标准化沉渣定量计数板法；④最好采用非离心尿液
特别适用于病理性有形成分较少的特殊标本，为提高准确性，推荐采用 Sternheimer（S）活体染色法相差显微镜计数
尿液有形成分 定量计数仪法 1h尿有形成分 计数（成人）
男0～5个/μl 女0～24个/μl
男0～4个/μl 女0～5个/μl 男性＜3万/h， 女性＜4万/h
男0～12个/μl 女0～26个/μl
男0～5个/μl 女0～10个/μl 男性＜7万/h， 女性＜14万/h
0～1个/μl， 不分性别
0～1个/μl， 不分性别 ＜34O0个／h ，不分性别
第五章 尿液一般检验
第五章
尿液一般检验
第五章 尿液一般检验
主 要 内 容
第一节 尿液理学检查
第二节 尿液化学检验
第三节 尿液有形成分显微镜检验
第五章 尿液一般检验
第三节 尿液有形成分显微镜检验
第五章 尿液一般检验
本节内容
一、概述 二、主要检验方法 三、尿液主要有形成分的形态和临床应用
四、尿液显微镜检验的质量保证
可根据情况采用离心非离心尿液进行检测，是尿液有形成分检查的“金标准”
缺点
成本高，耗时； 计数板为聚乙烯材料，焚毁时易污染环境
1h细胞排泄率试验
采用改良牛鲍氏计数板定量检查，无需特殊器材，经济 对有形成分影响小，不需严格限制饮食，适用于门诊及住院患者 的连续检查。 反映单位时间内尿液中所排出的细胞、管型数量。 在规定时间内留取尿液，属真正意义上的定量计数，更准确地反 映泌尿系统状况 自动进样，重复性好，准确定量、视野清晰、操作简单、速度快 捷,节省成本,有助于尿液分析特别是尿沉渣检查的规范化,标准化 采用不离心的新鲜尿液进行测定，对有形成分影响小。 适合含有少量细胞、特别是管型的尿液有形成分检测；也常用于 脑脊液及其他体液的细胞计数。 精密度、准确度显著提高。 符合体外诊断产品（in vitro diagnostic products，IVD）98/79 指令要求，拥有欧盟CE标志。 2003年，被ISLH作为尿中红细胞、白细胞、透明管型和鳞状上 皮 细胞的参考计数方法 操作简单、快捷、减少因离心造成的有形物损失 阳性率和精确度与定量尿液有形成分分析板法相关性较好
缺点
重复性差，易漏诊，阳性率低； 不适用于外观清晰、有形成分较少 的尿液标本检测； 难于标准化和准确定量； 不推荐作为常规检查方法
离心尿未染色 镜检法
阳性率提高，适用于外观清晰、有形成分较 少的尿液标本检测； 常规推荐方法； 是尿液有形成分检查标准化的基础，若按操 作规程进行，可获得较满意的结果
操作繁琐费时； 离心易造成有形成分破坏或丢失； 难于标准化和准确定量，逐渐被标 准化定量分析板法取代
②0.2ml沉渣+染液20μl； ③3min后制片镜检；
若标本中有形成分含量较多，也可采用未离心标本直接染色。
第五章 尿液一般检验
（3）染色后的有形成分形态为
第五章 尿液一般检验
结晶紫-沙黄（S-M）染色法
2．Sternheimer（S）染色法
阿利新蓝将细胞核和管型基质染成蓝色，哌若宁能将胞质 及核糖核酸染成红色。易于对比，更易辨认病理成分。 （1）Sternheimer染色液： 溶液Ⅰ：2％阿利新蓝8GS水溶液。
第六章 尿液一般检验
参考区间
尿液有形成分的参考区间
方法 混匀一滴尿法 离心非定量法 红细胞 0～偶见/HPF 0～3个/HPF 白细胞 0～3个/HPF 0～5个/HPF 透明管型 0～偶见/LPF 0～偶见/LPF 上皮细胞 少见 少见 结晶 少见 少见 细菌和真菌 － －
标准化定量分 析板计数法
1．红细胞
（1）均一性红细胞：形态及血红蛋白含量正常。平均大
小及红细胞体积分布宽度接近血液中的红细胞，多来自肾
第六章 尿液一般检验
方法评价
• 1.未染色非定量尿液显微镜检查的方法学评价
未染色非定量尿液显微镜检查的方法学评价
方法 混匀一滴尿法 优点
简便、快捷、标本用量少、成本低； 能最大限度保持各类有形成分的原始状态； 适用于尿液外观明显混浊、尿液有形成分明 显增多的标本如肉眼血尿、脓尿等，尤其适 用于急诊患者检查
• 3. 一小时细胞（管型）排泄率测定
• 采用改良牛鲍氏计数池，计数3小时尿中细胞、管型排出的数量，再换算
出1小时排出的数量。
• ①受检者排空膀胱后，收集3小时尿液。②测定尿量。③取10ml混匀尿液 1500r/min离心10min，弃去上清液，留1ml沉淀液。④混匀沉淀液充入计
数池，高倍镜计数10个大方格中的各种细胞数，低倍镜计数20个大方格的
一、概 述
• 尿液有形成分是指通过尿液排出体外并能在显微
镜下检查到的成分。包括细胞、管型、结晶及某 些病原体等。也被称为“肾的体外活检”。 • 可利用显微镜或尿液有形成分分析仪进行识别与 计数。 • 标准化尿液显微镜检查法是尿液有形成分检查的 “金标准”。
二、主要检验方法
（一）尿液有形成分非染色非定量镜检法
（1）S-M染色液 Ⅰ液：结晶紫3.0g，草酸铵0.8g，95%乙醇20.0ml，溶解后加蒸 馏水80.0ml， 冷藏保存。 Ⅱ液：沙黄0（safranin 0）0.25g，95%乙醇10.0ml，溶解后加 蒸馏水至100.0ml，冷藏保存。 应用液： Ⅰ、Ⅱ液按3:97比例混合过滤，贮棕色瓶，室温保存 （2）操作：①标本离心、沉淀、浓缩50倍混匀；