瑞氏染色液配制及使用方法

瑞氏染色操作步骤

瑞氏染色操作步骤瑞氏染色是一种常见的染色技术，用于细胞、组织和生物样本的研究中。

该技术可用于确定细胞形态、染色体数量和形态、染色体变异等。

以下是瑞氏染色的操作步骤：1.样本处理：样本一般采用新鲜的、保存良好的细胞或组织样本。

在处理之前，需要检查样本是否符合要求。

例如，细胞样本应具有充足的数量和活力，组织样本应达到一定的厚度和大小。

此外，需要对样本进行预处理，如固定处理、去除上皮细胞等。

2.制片：制作干片是瑞氏染色的重要步骤。

首先，用无菌的玻片将样本涂抹均匀。

有时还需要使用刮片等工具辅助涂抹。

然后，制片需通过加热、干燥等过程。

这使得细胞或组织与玻片表面相关联，以便在后续染色过程中处理。

3.染色：将制片进行染色是瑞氏染色的核心步骤。

瑞氏染色使用吉姆萨染色（Giemsa stain）或艾因染色（Ehrlich stain）方法。

在吉姆萨染色中，可以使用不同的吉姆萨组合来改变细胞或染色体染色的颜色。

在艾因染色中，使用配制艾因染液进行染色。

两种方法的染色时间和温度也有所不同。

在染色过程中，需要控制好样本的染色时间和温度，以避免染色过度或过轻。

4.显微镜观察：经过染色后，制片需要用显微镜观察。

观察时要准确、认真、耐心、细致。

需要注意的是，显微镜的放大倍数和焦距要调整到合适的位置，以获得清晰的细胞或染色体图像。

5.结果分析：根据显微镜观察得到的图像，可以对样本进行分析和判断。

主要从细胞形态、染色体数量和形态、染色体变异等方面进行评估，并与常模比较，以便对生物样本进行分类、鉴定和研究。

总的来说，瑞氏染色是一种简单、常用的染色技术，适用于细胞、组织和生物样本的研究。

操作过程中需要注意样本处理、制片、染色、显微镜观察和结果分析等关键步骤。

只有仔细、细致地操作，才能获得高质量的实验数据。

瑞氏染液使用说明

瑞氏染液使用说明货号：G1040规格：50ml/100ml保存：室温避光保存，有效期至少2年。

产品说明：瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料伊红（Eostm Y）组成的复合染料，溶于甲醇。

伊红通常为钠盐，有色部分为阴离子。

美蓝通常为氯盐，有色部分为阳离子。

甲醇的作用：一是溶解美蓝和伊红，使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。

后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色；二是固定细胞形态，加速染色反应，增强染色效果。

使用方法：本产品可作为多种组织或细胞的染色使用，不同组织、细胞，不同的用途可以有不同的使用方法。

具体方法请根据自己需求参考既有文献，本产品以涂片为例，举例说明，仅供参考。

1、取涂片、自然干燥。

2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醇所固定。

3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,与瑞氏染色液混匀，静置5分钟。

4、水洗、吸干、镜检。

5、细菌染成蓝色，组织细胞胞浆红色，细胞核蓝色。

注意事项：1、涂片厚薄适宜，涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。

2、所加染液不能过少，以免蒸发而使染料沉淀。

冲洗时间不能过久，以防脱色。

3、染色对pH十分敏感，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应接近中性，否则可能会导致细胞染色异常，形态难以识别，甚至错误。

4、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。

染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。

相关试剂：P210010×多聚赖氨酸G1010姬姆萨染色液G1100伊红染色液G1140苏木素染色液(常规染色)G1120H-E染色试剂盒。

瑞氏染色操作步骤

瑞氏染色操作步骤瑞氏染色是一种常用的细胞染色方法，主要用于观察细胞核形态和染色体结构。

下面将详细介绍瑞氏染色的操作步骤。

一、实验前准备1.1 材料准备瑞氏染色所需的材料有：0.075mol/L KCl、甲醛、乙酸、96%乙醇、苯酚红溶液、甲基绿溶液和天然丝。

1.2 设备准备实验所需的设备有：离心机、恒温水浴器和显微镜等。

二、样品制备2.1 细胞培养首先需要培养好待检测的细胞，使其达到适当生长状态。

在培养过程中，应注意避免污染和过度生长等问题。

2.2 细胞处理将待检测的细胞收集到离心管中，并加入0.075mol/L KCl缓冲液进行离心。

将上清液倒掉，再加入甲醛进行固定处理。

2.3 固定处理将含有甲醛的离心管放置在恒温水浴器中，在37℃下固定处理30分钟，使细胞膜破裂并释放染色体。

2.4 滴定染色将固定后的细胞加入苯酚红溶液，再滴入甲基绿溶液，使染料均匀地覆盖在细胞上。

三、显微镜观察将染好色的细胞片放置在显微镜下进行观察。

可以通过调节显微镜的焦距和光源亮度等参数来获得更清晰的图像。

四、实验注意事项4.1 操作过程中应注意保持无菌环境，避免污染样品。

4.2 在固定处理时，应控制好温度和时间，避免过度固定或过短固定导致样品失真。

4.3 在滴定染色时，应注意均匀地覆盖在细胞上，并避免出现气泡等问题。

总结：瑞氏染色是一种常用的细胞染色方法，其操作步骤包括实验前准备、样品制备、显微镜观察和实验注意事项等方面。

在操作过程中需要注意保持无菌环境、控制好温度和时间、均匀地覆盖染料等问题，以获得更准确的实验结果。

瑞氏染色(专业知识)

瑞氏染色瑞氏染色是目前最常用而又最简单的染色方法。

1原理：瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美篮混合经化学作用后，变成中性之伊红化美蓝，久置后，经氧化而含有天青。

此三种染料分别和细胞核及浆中的NH3+和COO-等结合，使细胞核及胞浆着色。

由于系中性染料，又有缓冲液调节酸碱度，所以细胞受染后，蓝红等颜色都较适中，核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚。

2 试剂配制：1、瑞氏试剂瑞氏染料（粉）1克，加不含醋酮之甲醇600毫升溶解过滤后即成。

混合方式可将瑞氏染料置于研钵内，加适量甲醇混合研磨，使染料溶解，将已溶解的液体倒入清洁玻瓶，再放入甲醇继续溶解剩下染料，直至染料及甲醇均用完为止，然后过滤，以深色中性之玻璃瓶储备待用。

亦可将1克染料一次加入600毫升甲醇中，盛深色玻璃瓶内，塞好瓶口，置于温暖而黑暗之处或37度温箱内，每日振荡5min，连续7天以上，然后过滤储备用。

染液宜久置后使用，通常存放愈久，染色效果愈好。

2、缓冲液由1%的磷酸氢二钠和1%的磷酸二氢钾各30毫升加蒸馏水1000毫升配成，或以上两药各1克加2500毫升左右蒸馏水制成。

以石蕊试纸检验、调整酸碱度，使PH在6.5-7之间即可。

缓冲液亦可永新鲜蒸馏水或煮沸后密闭保存的蒸馏水。

如蒸馏水与空气过多接触，则可因吸收空气中之二氧化碳而使PH值变低，影响染色，故不宜使用。

3、染色步骤1 将已编号之涂片水平置于染色板或者染色架上，涂片两端各划一道蜡笔线，主要防止染液外溢。

2 滴加瑞氏染色液。

其多少依标本所占面积大小而定，一般为4-8滴，至染液将标本完全盖住为止。

染液不宜过少，否则，甲醛挥发后，易产生沉淀；不可过多，以免因过盛而流失，影响染色。

3 1-2分钟后，滴入缓冲液（染液与缓冲液的比例约为1：1.5，冬季1：1，夏季1：2）。

以气囊向玻璃片上轻轻打气，使染液和缓冲液混合均匀，一般不宜口吹起，以免呼出二氧化碳改变缓冲液酸碱度而影响染色。

4 自缓冲液滴入10-15分钟后，用自来水冲洗。

瑞氏染色操作流程

瑞氏染色操作流程一、瑞氏染色实验前准备1.1准备染色液和显影液针对瑞氏染色实验，首先要准备染色液和显影液，染色液由25mL的瑞氏染料，90mL的盐酸溶液（浓度为5％），以及1mL的激发剂混合而成。

而显影液则是在10mL的9N的硫酸、10mL的5％的NaOH溶液、10mL的1％的苯甲醇和10mL的1％的芳香族醇基乙醇混合而成。

1.2准备染色木质菌梗在预先准备瑞氏染色液和显影液后，接下来要准备染色用的木质菌梗才能开始瑞氏染色实验。

首先，用洗碗笠将要染色的木质菌梗洗淨，然后用医用刀在木质菌梗中切出厚约2mm的薄片，最后用蒸汽–水泼淋法将木质菌梗片浸湿，方可准备瑞氏染色实验。

二、瑞氏染色实验操作2.1放置染色片在准备好染色液和显影液，以及木质菌梗薄片后，此时要把准备的的木质菌梗薄片放置在染色槽内，以留出表面空间，方便染色液充分浸渍。

2.2加入染色液之后将准备的瑞氏染色液加入染色槽，在实验室内控制温度为37℃，放置20分钟后，可以观察菌梗表面是否呈染色，一般都可以看到浅色到深色之间的蓝色或紫色染色，这说明瑞氏染色已经取得成功。

2.3加入显影液如果瑞氏染色实验成功，那么接下来可以准备将木质菌梗片洗净后加入显影液了，而此时温度需要将控制在22℃，放置5-10分钟后，可以发现菌梗片变淡，并且半透明，证明显影液已经取得成功。

2.4用x网影像再接着，用X网影像观测染色后的木质菌梗，当观测到菌梗表面开始出现斑斑点点发亮时，这表明染色实验结束，在此基础上对木质菌梗进行另一个体系的判断，也就是对菌梗的形态和染色的准确性进行分类、认定和鉴定。

三、瑞氏染色实验结束完成上述瑞氏染色实验操作后，就可以对经过染色后的木质菌梗进行分析、鉴定，完成木质菌梗的离子吸收率、分子斑点和染色效果等等内容，通过瑞氏染色实验把细菌聚集在一起，以便进行实验分析，这正是瑞氏染色实验取得成功的原因。

瑞氏染液

新离解。 ○缓冲液须保持一定的 pH 使染色稳定，PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8， ○偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用，使
pH 恒定。缓冲液配制
（pH6.4~6.8，弱酸性）：配方 1 ：配方 2： 1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml 1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml H2O(新鲜) 加至 1000ml 置室温黑暗处，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污染则应报废。姬姆萨（Giemsa's stain；天青-伊红）染色 1．姬姆萨染料是伊红(AzurII Eqsin)和天青（蓝）2 号合成的。 2．姬姆萨染料（ Giemsa, 天青-伊红）染液配制：姬姆萨染料（粉末） 0.5g 或 7.5g 甲醇（AR） 33ml 或 500ml 甘油（AR） 33ml 或 500ml ●先将姬姆萨染料放入乳钵中，逐渐倒甘油研磨溶于甘油中，置于 56℃水温箱内，90～120 分钟，然后加入甲醇，摇匀后放置数天，过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处，时间越长越好。 ●使用染液可临时配置）：姬姆萨染液 1ml，加 DDH2O10ml 混匀。即可使用。染色步骤（1）先用甲醇固定 2～3 分钟。（2）将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液 15～30 分钟。（3）涂片用自来水冲洗，在室温中干燥待查。染液鉴定瑞氏或姬姆萨染色液鉴定：刚配好或放置一个月以上的染液可进行下列鉴定： 1．取 1 滴染液于乳白玻板上，自行迅速扩散开，其颜色变紫红色，且有伪足形成。 2．取 1 滴染液加 1 滴缓冲液，染液由深蓝色立即变为紫红色。 3．取血片或骨髓片进行试染检查，观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色情况，pH 是否合适及染色合适时间。如有上述变化，表明染液合格，可供使用。混合染色瑞氏染色(Wright's)-姬姆萨（Giemsa's）混合染色： ●瑞氏染色的染料配方浓度对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色偏酸,色泽偏红,对细胞浆内颗粒特别是嗜天青颗粒及嗜中性颗粒着色较差。 ●姬姆萨染色对胞浆着色能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒着色较清晰, 色泽纯正,而对胞核着色偏深,核结构显示较差。 ●故采用以瑞氏染液为主，姬姆萨染液为辅的混合染色。染色步骤： 1. 先用瑞氏染液将涂膜面充分覆盖； 2. 稍等片刻再加姬姆萨染液 2-3 滴加减(根据涂片上细胞多少及增升程度酌情而定)； 3. 稍等 1-2 分钟后,再加磷酸盐缓冲液,加时应缓慢地一滴一滴加在涂片膜上,直至膜面上染色液形成表面张力而终止染色液加入； 4. 染色 30-40 分钟； 5. 分色：用自来水缓缓冲洗至少 3 分钟以上,待干，勿用滤纸吸干,以免滤纸纤维污染涂片。

瑞氏染液配制、使用方法及注意事项

瑞氏染液配制、使用方法及注意事项南宁市二医院检验科马升俊1.瑞氏染色的原理：瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。

瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物（天青）组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。

各种细胞由于其所含化学成分不同，对染料的亲和力也不一样，因此，染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。

2.试剂的配制：2.1 瑞氏染液的配制：2.1.1 自配染液:瑞氏染粉0.1g，甲醇（AR）60ml。

将瑞氏染粉放入清洁干燥研钵中，先加少量甲醇，充分研磨使染料溶解，将巳溶解的染料倒入棕色试剂瓶中，未溶解的再加少量甲醇研磨，直至染料完全溶解，甲醇全部用完为止。

染液配好后放于室温下，一周后即可使用。

新配制染液效果较差，放置时间延长，染色效果越好。

久置应密封，以免甲醇挥发或氧化成甲酸。

染液中也可加中性甘油2～3ml，除可防止甲醇过早挥发外，也可使细胞着色清晰。

2.1.2 成品瑞氏染液:现巳有成品瑞氏染液，如四川迈克科技公司出的快速瑞氏染色试剂（500ml/瓶）其只需室温密闭储存，可长期稳定，染色效果好。

2.2 缓冲液的配制: 称取磷酸二氢钾（无水）0.3 g，磷酸氢二钠（无水）0.2 g；加蒸馏水至1000 ml使其溶解。

配好后磷酸盐缓冲溶液应校正PH值，其范围在PH6.4～6.8即可，后塞紧瓶口备用。

3. 瑞氏染色的使用方法：（以血涂片为例）：3.1把制好的血涂片编好号，然后将血片平放在染色架上；3.2加瑞氏染液数滴，使其覆盖整个血膜，固定细胞约1分钟；3.3滴加等量或稍多的缓冲液（可按1：2滴加），使染液充分混匀，染色5～10分钟；3.4用流水冲洗去染液,待干后镜检。

4.染色结果判断：在正常情况下，血膜外观染成淡紫红色。

显微镜下，红细胞呈粉红色，在厚薄均匀处，略有碟状感。

白细胞浆中颗粒清楚，并显示出各种细胞特有的色彩。

细胞核染紫红色，核染色质结构清楚。

5.注意事项:5.1 PH对细胞染色有影响。

瑞氏染色

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传真：021-60853530
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
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产品号 403001 403002 403003 403004 403005 403097 403098 403099
产品 TRAP 染色试剂盒 Masson 染色试剂盒革兰氏染色试剂盒瑞氏染色试剂盒姬姆萨染色试剂盒亚甲基蓝染色试剂盒碱性磷酸酶染色试剂盒酸性磷酸酶染色试剂盒
产品说明书
产品号 403022 403023 403091 403092 403093 403094 403095 403096
结果分析：细菌染成蓝色；细胞核呈蓝色；血红蛋白、嗜酸性颗粒染成粉红色；淋巴细胞胞浆、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝色；组织细胞的细胞质呈红色；完全成熟的红细胞呈粉红色。
注意事项： 1、推片方法：取全血 3ul 左右置载玻片上，将推玻片保持与载玻片 30 度角，置于血滴正前方，稍往后移与血滴接触，即可见血液沿推片下缘散开，再均匀沿载玻片平面平稳向前滑动，至血液铺完血膜为止。 2、涂片时不要太厚也不要太薄。 3、用蜡笔在血膜两头划线，平放于染色架上。血膜要干透后才能染色，否则染色时血膜易脱落。 4、染色过深或过浅应调整染色时间。 5、染色过深可用水冲洗或浸泡，还可用 75%乙醇脱色 3-5 秒。 6、染色液可重复使用。

简述瑞氏染色法的步骤

简述瑞氏染色法的步骤
瑞氏染色法是一种常用的染色技术，可以用于细胞和组织的染色。

它
是由丹麦科学家汉斯·克里斯蒂安·瑞氏于1884年首次提出的。

该方法
通过使用甲苯和乙醇的混合物处理样本，然后用胰蛋白酶去除细胞膜上的
脂肪，最后用甲苯溶液进行染色，以显示细胞的核和胞质细胞器。

具体步
骤如下：
1.处理样本：首先，将待染色的细胞或组织样本置于甲苯中，以去除
样本中的脂肪。

2.脱水：将样本放入一系列乙醇浓度不断增加的溶液中，以脱水样本。

这一步骤有助于防止样本的脂肪重新进入细胞。

3.清洗：用清洁的甲醇或二甲苯清洗样本。

这一步骤有助于去除残留
的脂肪和乙醇。

4.染色：将样本放入瑞氏染色剂中。

瑞氏染色剂是一种由甲苯、酸性
染料（如酸性果胶酸和酸性红G）和邻苯二甲酸二丁酯组成的溶液。

该溶
液可以染色细胞核和胞质细胞器。

5.清洗：将样本从染色剂中取出，用甲醇或二甲苯轻轻洗涤，以去除
多余染料。

6.干燥：用空气吹干样本或者放置在加热器中干燥。

7.盖片：将样本置于玻璃盖片上，加入合适的封片剂（如硬脂酸树脂），然后覆盖另一块盖片。

8.固定：将盖片置于120°C的烘箱中固定，使其更加耐久。

使用瑞氏染色法可以染色细胞核为蓝色或紫色，并使胞质细胞器以深红色或橙色显现。

这种染色方法在生物学、医学和组织学等领域被广泛使用，它可以帮助研究人员观察细胞和组织的结构与功能，提供有关细胞和组织的信息。

瑞氏-姬姆萨染液说明书

瑞氏-姬姆萨染液说明书货号：G1020规格：100ml/500ml保存：室温避光保存，有效期至少2年。

产品说明：瑞氏-姬姆萨染液是一种复合染液，兼有瑞氏和姬姆萨染液二者优点，主要应用于血液和骨髓涂片染色。

各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同，对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料和碱性染料的亲和力也不同，因此，标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后，相应各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。

瑞氏染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，着色清晰，色泽纯正，但是对胞核着色偏深,核结构显示较差。

姬姆萨染色对细胞核着色程度适中，细胞核结构和色泽清晰艳丽，对核结构的识别较佳，但对胞浆着色较差，故采用瑞氏姬姆萨混合染色，具有染色效果好，对比清晰，操作简便等特点。

使用方法：本产品可作为多种组织或细胞的染色使用，不同组织、细胞，不同的用途可以有不同的使用方法。

具体方法请根据自己需求参考既有文献，本产品以涂片为例，举例说明，仅供参考。

1、取涂片、自然干燥。

2、滴加瑞氏-姬姆萨染液2-3滴覆盖整个标本涂片，染1-2分钟。

3、滴加等量的0.01M磷酸盐缓冲液（PH6.4-6.8），轻轻晃动玻片,与瑞氏-姬姆萨染色液充分混匀，染色3-5分钟。

4、水洗、吸干、镜检。

5、染色后胞浆和胞核的染色清晰分明，细胞核着色呈深浅不同的紫红色，胞浆呈浅红色，胞浆中颗粒区分明显。

注意事项：1、涂片厚薄适宜，涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。

2、所加染液不能过少，以免蒸发而使染料沉淀。

冲洗时间不能过久，以防脱色。

3、染色对pH十分敏感，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应接近中性，否则可能会导致细胞染色异常，形态难以识别，甚至错误。

4、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。

染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。

瑞氏染色液(Wright Stain)

南京森贝伽生物科技有限公司网址：/仅供科研版本号：180601瑞氏染色液(Wright Stain)【产品组成】【保存条件】室温,24个月【产品概述】瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料,对原生质的染色有很好的区别作用。

各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样，如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料结合后，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质。

原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。

瑞氏染液为蓝色澄明液体，有甲醇特异香味，主要由美蓝、伊红、甲醇等组成，其中甲醇的作用是溶解美蓝和伊红以及固定细胞形态。

Wright Stain 以进口瑞氏色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。

该染液的特点：由Wright Stain 和磷酸盐缓冲液组成，直接使用，无需任何配制过程，染液中加微量中性甘油，防止甲醇挥发或氧化，同时也可使血细胞染色较清晰。

经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。

细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。

【使用方法】1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片，待涂片自然干燥。

2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。

3、滴加适量Wright Stain 覆盖涂片，室温染色1～2min 。

4、涂片滴加等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动玻片或采用其他方式混合，使磷酸盐缓冲液与Wright Stain 混匀，室温静置3～10min 。

5、用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。

(注:也可先用磷酸盐缓冲液冲洗玻片，时间控制在30s 左右。

瑞氏染色液(Wright Stain)使用说明书

仅供科研使用版本号：170303瑞氏染色液(Wright Stain)【产品组成】Component SBJ-0519S2×100mlSBJ-0519M2×500mlStore at试剂(A):Wright Stain 100ml 500ml 室温,避光试剂(B):磷酸盐缓冲液100ml 500ml 室温【保存条件】室温,24个月【产品概述】瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料,对原生质的染色有很好的区别作用。

各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样，如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料结合后，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质。

原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。

瑞氏染液为蓝色澄明液体，有甲醇特异香味，主要由美蓝、伊红、甲醇等组成，其中甲醇的作用是溶解美蓝和伊红以及固定细胞形态。

Wright Stain以进口瑞氏色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。

该染液的特点：由Wright Stain和磷酸盐缓冲液组成，直接使用，无需任何配制过程，染液中加微量中性甘油，防止甲醇挥发或氧化，同时也可使血细胞染色较清晰。

经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。

细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。

【使用方法】1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片，待涂片自然干燥。

2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。

3、滴加适量Wright Stain覆盖涂片，室温染色1～2min。

%8d快速瑞氏姬姆萨染色液的配制和应用

８２８晦学理沧与实践２（３０２年第１５巷第７期ＪＭｅｄ＇１３１ｃｏｒ＆ＰｒａｃＶｏｌ１５，Ｎｏ７－Ｊｕｌｙ２００２———一————一———一———————————一—————正确，耗时ｊ３～１５１。

，一Ｆ均鉴定值为８７８％．比常规鉴定法快些，但细菌鉴定的符音率相对低些。

刈链球菌鉴定的符台率为７ｌ４％，耗州３。

１５ｈ．其中，化脓性链球菌、Ｂ群链球菌在３ｈ即可鉴定出米，鉴定值均在９２％以上。

从对肺炎链球荫的鉴定情况束看，卫生部一北发了３次（（９７０４、９８１０、２００６），Ｈ有第３次鉴定出来．＝分析原因有：链球菌不易乳化，而且很难混匀．存实际操作叫，可将菌液浓度词到１＃＃”麦氏单位；另一方面，所发质控菌株来自呼吸道感染，多为混台菌，婀不能丹纯，会影响鉴定结果。

３．３革兰氏阳｝生杆蔺一一共发了５株，Ｖｉｔｅｋ一３２对ｃ＋ｂ的鉴定不如Ｇ＋ｃ．在做ｃ＋ｃ的鉴定时需注意：①正确观察细菌溶血情况和操作触酶试验；②注意镜下细菌的形态和排列方式；③将Ｖｉｉｅｋ一３２的生化档定结果采用双歧检索表进行鉴定。

在所发的５株荫巾．笔者根据Ｖｉｔｅｋ一３２的生化反应结果．结台荫落颜色、形态、溶血情况，触酶试验，完成ｒ９７０１、９８０５、９８０７、９９０１、２００２这５株菌的鉴定．且完全正确。

３４时真菌的鉴定，除９７０２鉴定与质控菌株不符外，其余５株垒部鉴定正确．ｊ：ｌ鉴定值均在９９％以上，耗肘２４～４８ｈ，较传统方法提前２４—４８ｈ，总结４年中Ｖｌｔｅｋ一３２对真菌的鉴定情毗，应注意：①在用Ｖｉｌｅｋ一３２测试时，应适当结合形态学观察；②应注意孵育时间：有的真菌在３０℃培养２４ｈ后．ＹＢＣ卡上机读数可直接鉴定出来，但有的需再孵育２４ｈ再次读数，切记不能将ＹＢＣ昔直接孵育４８ｈ再读数，因为ＹＢＣ暑培养２４ｈ和培养４８ｔ．后．判断备生化反应孔陌性界值是不同的。

综上所述，Ｖｉｔｅｋ．３２的运用，有勘于实验室快速诊断，提高工作效率，但同时，检验人员应加强微生物基础知识和技能的培训，加强对仪器原理的理解，严格按仪器操作规程操作，怍好室内质控工作．只有这样，才能更快，更好地为临床提供可靠的诊断和治疗依据。

瑞氏染色操作流程

瑞氏染色操作流程
1.实验准备
- 收集需要染色的细胞或组织样本，并固定在载玻片或试管中。

常用的固定方法包括用乙醇、甲醛、Perfix等。

-根据样品的特性和染色目的，选择适当的瑞氏染色方法和试剂。

常用的瑞氏染色方法包括瑞氏-厄利染色法、瑞氏-黛染色法等。

2.染色步骤
-将固定的细胞或组织样本浸入去离子水中，使其恢复至自然状态。

-准备适当浓度的染色试剂。

瑞氏染色试剂一般包括硒铁酸盐和酸性柠檬酸溶液。

-将样本浸入硒铁酸盐溶液中，浸泡时间根据实验需要和染色方法而定。

染色时间过长可能导致染色物质过量或染色效果不佳。

-用去离子水或PBS缓冲液冲洗样本，使其清洁并去除多余的染色试剂。

-将样本浸入酸性柠檬酸溶液中，去除多余的染色物质并增强染色效果。

-再次用去离子水或PBS缓冲液冲洗样本。

3.结果观察和分析
-将处理后的样本进行显微镜观察。

瑞氏染色可以用于可视化染色物质（如核酸和蛋白质）或细胞器结构（如核、线粒体等）。

-在显微镜下观察样本时，可以调整镜头焦距、曝光时间等参数，以获得清晰且准确的图像。

-观察到的染色结果可以进行进一步的分析和解释。

例如，可以量化染色强度或比较不同样本之间的染色差异。

总结：
瑞氏染色是一种常用的细胞和组织染色技术，可以用于生物学实验室的各种研究和应用。

该操作流程包括样本固定、染色步骤和结果观察与分析。

通过瑞氏染色，可以可视化并研究细胞和组织中的特定结构和分子，为生物学研究提供重要的实验基础。

瑞氏-姬姆萨染液使用说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司
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瑞氏-姬姆萨染液
瑞氏-姬姆萨染液（Wright's-Giemsa Staining Solution）
瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料，血红蛋白，嗜酸性颗粒
为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色。细胞核蛋白为间。冲洗前，应先在低倍镜下观察有核细胞是否染色清
楚，核质是否分明。应该在具体实践中摸索合适的时间，特别是在更换染液时。每批染色液，
均需试染，以便掌握染色时间。
2. 冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲洗，否则会使染料沉着在载片上。
3. 冲洗完的载片应立放于支架上，防止剩余水分浸泡而导致脱色。
或天青结合，染紫蓝色。中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色。
吉姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同。吉姆萨染液
对胞质和中性颗粒则着色较差。
为兼顾二者之长，选用复合染色法。即瑞氏-吉姆萨染液。
染色步骤
1、涂片并固定：将细胞均匀的涂布于洁净的载玻片上，待其干燥后进行固定。
固定液的选择视具体情况而定，多数细胞可用甲醇固定。甲醇固定：涂片干燥后浸入甲醇内，
固定时间 15-30min。
2、染色：
1）固定后，室温下通风晾干。将载片置于染缸内准备染色；
2）将瑞氏-吉姆萨染液倒入染缸内，使染液覆盖载片上的细胞。具体染色时间视细胞而定，
一般 3~30min，染色时最好在镜下观察；
温馨提示
为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，带手套等。
储存温度
避光储存于室温。
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包装
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瑞氏-姬姆萨染液

改良瑞氏吉姆萨快速染色液的配制及应用

改良瑞氏吉姆萨快速染色液的配制及应用【摘要】目的：通过改良瑞氏吉姆萨染色液配方和方法实现一步快染；用于白带常规检测，确认染色效果及结果。

方法：自配瑞氏吉姆萨染液，对360例白带样本采用常规染液和改良后染液检验，分析改良前后效果、结果差异。

结果：改良瑞氏吉姆萨快速染色在滴虫、真菌、线索细胞及清洁度等，与常规瑞氏吉姆萨染色检测结果无显著差异（P＞0.05）。

结论：改良瑞氏吉姆萨染色液在15-25s对白带样本进行染色，效果、结果较常规染液无显著性差异；改良染液操作便捷，利于使用。

【关键词】表面活性剂；瑞氏吉姆萨染色液；白带；瑞氏吉姆萨染色是一种常用染色方法，可对血液、体液细胞染色检查，如对白带的染色检查【1】，是对妇科疾病常用的手段之一。

常规瑞氏吉姆萨染色流程为A液染色、B液染色、水洗，需要4-30min。

本文在常规染剂上优化配方及流程【3-4】，对白带样本进行15-25秒快速染色，观测效果、检测结果与常规染色方法的差异。

1材料与方法1.1瑞氏吉姆萨试剂及染色方法珠海贝索生物技术有限公司，批号20220216。

使用方法如下：①白带于玻片上烤干或烘干，滴加染色A液(约0.5ml-0.8ml)覆盖整个标本染色约2min；②加A液2-3倍量的缓冲液B液于A液上，两液混合，染色3-10min后水洗，干燥、镜检。

1.2改良瑞氏吉姆萨试剂及染色方法改良试剂配制：染液A配制：瑞氏吉姆萨染料 0.83g，甲醇0.5L，甘油50mL，曲拉通X-100 5mL，吐温-80 10mL；染料放乳钵内研磨至细粉末，加甘油、甲醇研磨，再加入曲拉通、吐温继续研磨，最后转移加甲醇定量，摇匀待用。

缓冲液B液配制：1%KH2PO4 30mL；1/15M KH2PO4 73.5 mL，结晶紫0.5g，纯化水定量至1L。

使用方法如下：①将A液与B液约按3:1混合，得到可直接使用混合染液。

②白带于玻片上烤干或烘干，滴加混合染液(约0.5ml-0.8ml)覆盖整个标本染色约15-25S后水洗，干燥、镜检。

瑞氏染液制作血涂片

清洁液（洗液）重铬酸钾（工业品纯）300g浓硫酸（工业品纯）300ml自来水3000ml实际上重铬酸钾、硫酸和自来水之比为1：1:10。

先将重铬酸钾溶于水，如加热须待冷后，再缓慢加入浓硫酸，边加边搅。

不准将水倒入浓硫酸内！！！另外，清洁液只能用于玻璃仪器的清洗，不能浸泡金属器械。

血涂片的制备：1、载玻片及盖玻片泡酸时间大于24小时，一张一张放，保证每一张都浸湿2、冲洗，先用自来水冲净至没有颜色，再用流水冲洗一夜3、放在95%的酒精中浸泡过夜4、取出后用棉布擦干，涂片，并用甲醇固定，竖直干燥。

Wright染色法制作血涂片1、取涂好的血片，用玻璃笔划出染色区，以防染液滴落后溢流。

2、将涂片平放桌上或者架上，滴加Wright染液至恰好布满所划范围的血膜，混动使混匀，染色约3分钟。

Wright染液配法:Wright粉剂0.1g，加甲醇60毫升。

将Wright粉剂放在乳钵内，充分研磨，越细越好。

然后取甲醇逐步加入乳钵内，边加边研磨，直至染料全部溶解，置试剂瓶中密封，以后走后可用，以放置一个月后再用最佳。

3、加入等量磷酸盐缓冲液（pH6.8~7)，不断晃动，染色约12分钟，直接放与流水下冲洗。

4、染色后甩干或者直立晾干，用中性树胶或者合成树脂或香柏油封片，或不封片直接镜检。

时间：温度较低时约15分钟（染3分钟，加缓冲液不断晃动12分钟。

温度较高时，总时间约5分钟。

剂量：染液与缓冲液剂量之比为1:1如果染色不够，蒸馏水冲洗后，在按照原步骤重新染封片：干燥后的血涂片，浸入二甲苯中后在其干燥前，擦去蜡线，滴明胶与血涂片的一边（半滴至一滴），眼科镊捏住盖玻片正面在酒精灯上烘烤一下后反面贴于载玻片上。

结果：红细胞呈橘红色；中性粒细胞颗粒蓝紫色至紫红色；嗜酸性粒细胞鲜红色至橘红色；嗜碱性粒细胞颗粒深蓝紫色；淋巴细胞核深蓝紫色，胞质天蓝色；单核细胞核蓝紫色，胞质灰蓝色。

、注：①Wright染料对pH较敏感，因此用缓冲液稀释染液，可使染色作用稳定，便于识别和比较细胞的变化。