输血前免疫血清学检查PPT课件
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免疫血液学一精品PPT课件
能反应 能
ABO抗体的产生及存在部位
• 人在出生前尚未产生抗体.
• ABO抗体出生后3-6个月出现，5-6岁时达高峰 ; 成人随年龄增长而降低。
• 新生儿血清中抗体常是来自母体的IgG，偶尔 也有胎儿自身产生的IgM。由于新生儿血型抗原 位点少，抗体效价低，为此检测血型时应十分 慎重，可因抗原少或抗体效价低而凝集不明显 而误定血型。
• 白血病 • 消化道疾病 • 多发性骨髓瘤 • 冷凝集素病 • 大量输血输液患者
• 区分自身抗体和同种抗体 • 分离自身和输入的红细胞 • 正确鉴定血型 • 正确鉴定抗体 • 血浆置换 • 交换输血
1818年英国妇产科医生布伦德尔成功地用输血 救活了一名产后大出血的产妇，成为人类历史 上成功输血的第一例。
• 通常情况下O型红细胞加AB血浆可以解决
问题，但不总是这样。
?
• 孟买型和类孟买型常常不能输O型血
• Rh阴性的患者输什么样的血？输什么样 的血成分？
• RhD亚型问题（弱D，不完全D，Del） • Rh系统抗D、C、c、E、e抗体及其联合 • Rh血型错误输血的后果
• 常见红细胞同种抗体有那些？
决定簇
抗原
分布
糖分子
ABH，Lweis Ii，T／Tn
存在多种细胞表面 体液和分泌液中
多肽
MNSs，Rh， Kell，Kidd
只分布于红细胞膜 其他血细胞膜上
组织血型抗原可以表示细胞分化和成熟的标志，
胎儿和新生儿红细胞表达强i抗原，弱I抗原，而 成人则为强I抗原，弱i抗原。
IgG
• 相对分子量为15万，由2条重链及2条轻链构 成，根据重链恒定区氨基酸序列的差异， 分为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4四种亚类。
输血前有关检查PPT课件
• 抗HBs假阳性； • 编码HBsAg的基因变异使得HBsAg
抗原性改变，原型抗HBs不能将其 清除。
3. 乙型肝炎病毒e抗原测定
乙型肝炎病毒e抗原是HBV核心颗粒中的一种可 溶性蛋白质，具有抗原性。
[参考值]ELISA法为阴性（P/N≤2.1）；
★[临床意义]HbeAg阳性表明乙型肝炎处于活动 期，并有较强的传染性。孕妇阳性可引起垂直传 播，致90%以上的新生儿呈HbeAg阳性。HbeAg 持续阳性，表明肝细胞损害较重，且可转化为慢 性乙型肝炎或肝硬化。
输血前检测
第一节 病毒性肝炎 第二节 艾滋病 第三节 梅毒
第一节 病毒性肝炎
血清标志物检测
病毒性肝炎的实验诊断
我国属病毒性肝炎高发区，全国有肝炎 病人2700万人，每年新发病例900万人， HBsAg携带者达一亿二千万人。慢性肝炎 中有50～70％有活性性病毒复制，30％发 展为肝硬化，5～10％发展为肝癌，故我国 又是原发性肝细胞癌的高发国家，慢性 HBV携带者患肝癌危险性较非携带者高 100倍。
血清抗－HBs检测的意义
（3） 乙型肝炎的诊断和鉴别诊断, 在HBV 感染后3个月, 血清中出现抗－HBs。采集双 份血清（急性期和恢复期）同时检测, 抗－ HBs阳转，或恢复期与急性期比较, 抗体滴 度有4倍或4倍以上增长, 表示这次感染为 HBV感染。
血清抗－HBs检测的意义
（4）乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免 疫前后, 采集血清检测抗－HBs, 如抗－HBs 阳转或抗体滴度明显提高, 表示疫苗免疫效果 良好。否则免疫效果不佳。 （5）对乙型肝炎预后的判断。抗－HBs的出 现表示疾病处于恢复期，预后较佳。
乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）呈 双股环形，是HBV的基因物质，也是 乙型肝炎的直接诊断证据。
抗原性改变，原型抗HBs不能将其 清除。
3. 乙型肝炎病毒e抗原测定
乙型肝炎病毒e抗原是HBV核心颗粒中的一种可 溶性蛋白质，具有抗原性。
[参考值]ELISA法为阴性（P/N≤2.1）；
★[临床意义]HbeAg阳性表明乙型肝炎处于活动 期，并有较强的传染性。孕妇阳性可引起垂直传 播，致90%以上的新生儿呈HbeAg阳性。HbeAg 持续阳性，表明肝细胞损害较重，且可转化为慢 性乙型肝炎或肝硬化。
输血前检测
第一节 病毒性肝炎 第二节 艾滋病 第三节 梅毒
第一节 病毒性肝炎
血清标志物检测
病毒性肝炎的实验诊断
我国属病毒性肝炎高发区，全国有肝炎 病人2700万人，每年新发病例900万人， HBsAg携带者达一亿二千万人。慢性肝炎 中有50～70％有活性性病毒复制，30％发 展为肝硬化，5～10％发展为肝癌，故我国 又是原发性肝细胞癌的高发国家，慢性 HBV携带者患肝癌危险性较非携带者高 100倍。
血清抗－HBs检测的意义
（3） 乙型肝炎的诊断和鉴别诊断, 在HBV 感染后3个月, 血清中出现抗－HBs。采集双 份血清（急性期和恢复期）同时检测, 抗－ HBs阳转，或恢复期与急性期比较, 抗体滴 度有4倍或4倍以上增长, 表示这次感染为 HBV感染。
血清抗－HBs检测的意义
（4）乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免 疫前后, 采集血清检测抗－HBs, 如抗－HBs 阳转或抗体滴度明显提高, 表示疫苗免疫效果 良好。否则免疫效果不佳。 （5）对乙型肝炎预后的判断。抗－HBs的出 现表示疾病处于恢复期，预后较佳。
乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）呈 双股环形，是HBV的基因物质，也是 乙型肝炎的直接诊断证据。
免疫血清学实验ppt课件
原之间的异同点
两个样品为同一抗原
存在三种不同的抗原 两个样品部分相同
二、凝集反应
原理
颗粒性抗原(完整的病原微生物或红细胞等)与相应抗 体特异性结合，在有电解质存在的条件下，形成肉眼可见 的凝集团块。
基本类型
直接凝集反应、间接凝集反应、凝集抑制反应等。
直接凝集实验（ABO血型鉴定）
主要材料
A 抗
A
B 抗
B
结果判断
血型 抗A试剂
抗B试剂
A
Байду номын сангаас
+
-
B
-
+
0
-
-
AB
+
+
注意事项
• 注意无菌操作 • 滴加血液时，不要使枪头尖触及试剂
感谢下 载
64100l100l100l100l100l100l100l检查抗原和免疫血清的特异性纯度或浓度比较抗原之间的异同点两个样品为同一抗原存在三种不同的抗原两个样品部分相同二凝集反应原理颗粒性抗原完整的病原微生物或红细胞等与相应抗体特异性结合在有电解质存在的条件下形成肉眼可见的凝集团块
双向免疫扩散试验 直接凝集试验
g
3
间孔加入抗原
• 琼脂板放入湿盒内，置4℃，24-48小时后
4
观察结果。
倍比稀释法
样品 100管µL第一 管
10管0µL第二
100µ L
100µ L
100µL
1:4
1:8
1:16
100管µL第四
100µ L 1:64
结果判断
1
6
2
5
3
4
应用
• 测定抗体的效价 • 用特异性抗体检测抗原 • 检查抗原和免疫血清的特异性、纯度或浓度，比较抗
两个样品为同一抗原
存在三种不同的抗原 两个样品部分相同
二、凝集反应
原理
颗粒性抗原(完整的病原微生物或红细胞等)与相应抗 体特异性结合，在有电解质存在的条件下，形成肉眼可见 的凝集团块。
基本类型
直接凝集反应、间接凝集反应、凝集抑制反应等。
直接凝集实验（ABO血型鉴定）
主要材料
A 抗
A
B 抗
B
结果判断
血型 抗A试剂
抗B试剂
A
Байду номын сангаас
+
-
B
-
+
0
-
-
AB
+
+
注意事项
• 注意无菌操作 • 滴加血液时，不要使枪头尖触及试剂
感谢下 载
64100l100l100l100l100l100l100l检查抗原和免疫血清的特异性纯度或浓度比较抗原之间的异同点两个样品为同一抗原存在三种不同的抗原两个样品部分相同二凝集反应原理颗粒性抗原完整的病原微生物或红细胞等与相应抗体特异性结合在有电解质存在的条件下形成肉眼可见的凝集团块
双向免疫扩散试验 直接凝集试验
g
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间孔加入抗原
• 琼脂板放入湿盒内，置4℃，24-48小时后
4
观察结果。
倍比稀释法
样品 100管µL第一 管
10管0µL第二
100µ L
100µ L
100µL
1:4
1:8
1:16
100管µL第四
100µ L 1:64
结果判断
1
6
2
5
3
4
应用
• 测定抗体的效价 • 用特异性抗体检测抗原 • 检查抗原和免疫血清的特异性、纯度或浓度，比较抗
输血前血型血清学检查
输血后的抗体检测
输血后抗体检测的目的是检测受血者体内是否产生了针对供血者的特异性抗体， 以评估输血的安全性和有效性。
抗体检测的方法包括直接抗球蛋白试验（DAT）和血清学检测，通过检测受血者 血清中是否存在针对供血者红细胞的抗体，判断是否存在免疫反应。
输血不良反应的预测
输血不良反应是指在输血过程中或输血后发生的与输血相关的反应，如发热、过敏 、溶血等。
02
CATALOGUE
血型血清学检查的流程
采集样本
采集时间
通常在输血前进行，以确 保血型匹配。
采集方法
通过静脉采血的方式，采 集受检者的血液样本。
样本标识
对每个受检者的血液样本 进行唯一标识，以便后续 识别和追踪。
样本处理
离心分离
将采集的血液样本进行离心分离 ，以分离出血浆和红细胞。
血浆处理
将分离出的血浆进行适当的处理， 如灭活补体、去除血小板等。
结果报告
将检测结果以书面报告的形式提交给 医生或相关医疗机构，以便进行后续 的输血治疗或手术。
03
CATALOGUE
血型血清学检查的临床应用
输血前的血型匹配
输血前血型血清学检查是确保输血安 全的重要环节，通过检查受血者和供 血者的ABO血型和Rh血型，以避免 因血型不匹配导致的输血反应。
除了ABO血型和Rh血型，其他稀有血 型如MNS、KELL、LU、YT等也需要 进行匹配，以降低输血风险。
红细胞处理
将分离出的红细胞进行适当的处理 ，如洗涤、标记等。
检测方法
抗体检测
通过检测受检者血清中的抗体， 确定受检者的血型。
交叉配血试验
通过将受检者的红细胞与已知血 型的标准红细胞进行混合，检测 是否存在红细胞凝集反应，以确 定是否可以进行输血。
产前血型血清学检 ppt课件
ppt课件 6
流程图示： 院 常 规 不 规 则 抗 体 筛 查
（
需时间2h）
阳性
血 站 （常见抗体1h,复杂的要几小时）
鉴 定 不 规 则 抗 体
血站对相应标本进行筛选备血（备存1周）
临床该患者急需输血直接取相应备血进行配血
ppt课件
7
综上所述，输血前的不规则抗筛检查 应作为常规检查项目，有助于血液的选择， 从而防止输血反应的发生，提高治疗效果， 保证输血的安全，这也是现代输血发展的必 然趋势。对所有申请输血者，均应进行不规 则抗体筛选。尤其对产妇和新生儿的生命安 全有很好的保障，为了防患于未然，建议常 规做抗体筛查。 不规抗体筛选 （ 收费码260000007 60元）
ppt课件
Байду номын сангаас
14
对于产前夫妇血型血清检查可能发生 HDN 的孕妇，应采取 预防和治疗相结合的原则，具体措施如下： 1、ABO 系统溶血病的预防方法是：防止 IgG 抗A(B) 效价升 高，具体可采用中药治疗，以降低IgG抗体的效价。
ppt课件
15
2、Rh系统溶血病最有效的办法是预防 Rh阴性妇女发生同 种免疫，具体地说，即避免输Rh阳性血液，防止人工流产， 尽可能保证第一胎存活。如果孕妇体内巳有Rh抗体，并且 效价>1：32，可采用单采孕妇血浆，以降低Rh抗体的效价， 或者尽可能提早分娩，给婴儿换血，蓝光照射、输白蛋白 等方法治疗。
ppt课件
11
如果在孩子出生后24小时内出现皮肤黄 疸，进展迅速，甚至发展到全身，颜色由 浅黄变成金黄色、橘黄，这个时候就应该 引起足够的警惕。当溶血比较严重时，孩 子会出现贫血，甚至“核黄疸”即胆红素 脑病，这是由于红细胞破坏后产生的一种 名为胆红素的物质进入了大脑后，引起手 足残疾、视力障碍、耳聋、牙齿发育不良、 智力低下、癫痫等后遗症，这是最严重的 后果。
流程图示： 院 常 规 不 规 则 抗 体 筛 查
（
需时间2h）
阳性
血 站 （常见抗体1h,复杂的要几小时）
鉴 定 不 规 则 抗 体
血站对相应标本进行筛选备血（备存1周）
临床该患者急需输血直接取相应备血进行配血
ppt课件
7
综上所述，输血前的不规则抗筛检查 应作为常规检查项目，有助于血液的选择， 从而防止输血反应的发生，提高治疗效果， 保证输血的安全，这也是现代输血发展的必 然趋势。对所有申请输血者，均应进行不规 则抗体筛选。尤其对产妇和新生儿的生命安 全有很好的保障，为了防患于未然，建议常 规做抗体筛查。 不规抗体筛选 （ 收费码260000007 60元）
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14
对于产前夫妇血型血清检查可能发生 HDN 的孕妇，应采取 预防和治疗相结合的原则，具体措施如下： 1、ABO 系统溶血病的预防方法是：防止 IgG 抗A(B) 效价升 高，具体可采用中药治疗，以降低IgG抗体的效价。
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15
2、Rh系统溶血病最有效的办法是预防 Rh阴性妇女发生同 种免疫，具体地说，即避免输Rh阳性血液，防止人工流产， 尽可能保证第一胎存活。如果孕妇体内巳有Rh抗体，并且 效价>1：32，可采用单采孕妇血浆，以降低Rh抗体的效价， 或者尽可能提早分娩，给婴儿换血，蓝光照射、输白蛋白 等方法治疗。
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11
如果在孩子出生后24小时内出现皮肤黄 疸，进展迅速，甚至发展到全身，颜色由 浅黄变成金黄色、橘黄，这个时候就应该 引起足够的警惕。当溶血比较严重时，孩 子会出现贫血，甚至“核黄疸”即胆红素 脑病，这是由于红细胞破坏后产生的一种 名为胆红素的物质进入了大脑后，引起手 足残疾、视力障碍、耳聋、牙齿发育不良、 智力低下、癫痫等后遗症，这是最严重的 后果。
输血前血液学检查 ppt课件
操作步骤
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1. 取试管两支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆） 2滴，加供血者3%~5%红细胞悬液1滴，次侧管反之。 2. 各加低离子溶液 0.65ml，混合均匀后，再各加聚凝 胺溶液2滴，并混合均匀。 3. 用离心机 3400 转 / 离心 10 秒，然后把上清液倒掉， 不要沥干，让管底残留0.1ml液体。 4. 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集， 则必须重做。 5. 最后加入悬浮液2滴，轻轻摇动试管混合并同时观察 结果。如果在 60 秒内凝集散开，代表是由聚凝胺溶液引 起的非特异性聚集，配血结果相合；如果凝集不散开， 则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相 合。如反应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
操作步骤
1. 离心供血者、受血者血液标本，使红细胞与血清分离。用生理 盐水洗涤供血者及受血者红细胞 3次，配成3%~5%的生理盐水红细 胞悬液。 2. 取洁净小试管2支，分别标记为主侧及次侧管。 3. 主侧管内加受血者血浆或血清2滴及供血者红细胞悬液1滴；次 侧管加供血者血清2滴及受血者红细胞悬液1滴，立即混匀。 4. 将2支试管放入离心机内，以1000×g离心15秒。 5. 取出试管，首先用肉眼观察试管上清液有无溶血现象，再轻轻 摇动试管，直至红细胞成为均匀的混悬液后，观察有无红细胞凝集。 6. 取1 张玻片，用滴管分别从主侧管和次侧管内吸取红细胞悬液 各1滴，均匀滴放在载玻片上，用显微镜观察并记录结果。
四、 交叉配血试验
完整的交叉配血试验应包括： 1. 复查收到的受血者血样的ABO、Rh血型以及 抗体筛查的结果。 2. 查阅受血者以前的血型检查记录，如与此次 结果不服，应及时分析原因。 3. 选择预先进行血型检查的合格献血者作交叉 配血试验。 交叉配血体系均应在37℃孵育。使用能检出不完 全抗体的配血方法进行交叉配血。除了盐水介质 法外，还应使用能检出其他血型系统抗体的方法， 例如：抗球蛋白试验，酶技术、聚凝胺法、微柱 凝胶卡式检测法等
《输血前检查》PPT课件
自身对照 判定解 释
酶法和抗 酶 抗人 人球法 法 球法
1 － － － － 适合
Ⅰ
2 ＋ － － － 不适合
Ⅱ
3 － ＋ － － 不适合
Ⅲ
4 ＋ ＋ － － 不适合
Ⅳ
5 － ＋ ＋ ＋ 保留Ⅴ
6 ＋ － ＋ － 保留Ⅵ
7 ＋ ＋ ＋ ＋ 保留Ⅶ
Ⅴ 保留
不能终止输血的情况下，严密监
视的情况下进行，如有异常，。
.
63
▪ 敏感
优点
在凝胶试验中常能发现其它试验不易发现的问题。
▪ 结果可保存
凝胶试验的结果可在冰箱中保存数日，并且较
容易被拍成照片。
▪ 操作技术要求较低
凝胶试验的操作主要是简单的加样和判读，孵育
离心过程都有专门的设备。其中能被人为改变的因
素较少。
▪ 无需洗涤的抗球蛋白试验
.
64
缺点
▪ 凝胶试验方法成本较高，需要特殊设
.
23
抗体鉴定试验内容
▪ 使用谱红细胞检测患者的血清 ▪ 自身红细胞检查
.
24
.
25
确定抗体特异性时可以综合运用的资料
▪ 观察受检血清与每一个谱细胞的反应结果。 ▪ 观察受检血清与自身红细胞的反应结果。 ▪ 观察受检血清与酶处理红细胞的反应结果。 ▪ 观察反应的格局，检查各个反应相的结果。 ▪ 有否溶血现象。 ▪ 在阳性反应的细胞中，反应强度有否不同，
▪ 尽可能是纯合子
▪ 用于献血者的血清筛选时，可将两个筛选
红细胞混合使用，用于患者血清筛检时必
须与两个筛选红细胞分别进行试验。
.
22
抗体鉴定
▪ 用于抗体鉴定的配组红细胞由8～16已知血型
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- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
序 Rh-hr Kidd MNSs Duffy Diego Kell Lewis P
号 D C E c e JKa JKb M N S s Mur Fya Fyb Dia Dib K k Lea Leb P1 1 ++00+ 0 + ++0+ 0 + + 0 + 0 +0 + 0
2 +0++0 + + 0+0+ / + 0 0 + 0 +0 + 0
输血前免疫学检查
三项检查： ● 血型的鉴定 ● 抗体筛选和鉴定 ● 交叉配血试验
三者互为补充，缺一不可
目的： 使输入的血液成分有效存活 不会引起受血者的红细胞发生破坏
血型鉴定
常规ABO血型鉴定应包括正、反定型，二者起到互相 验证和质控的作用。
反定型要用试管法，不用玻片法
我国已规定常规血型鉴定还应包括Rh（D）定型。
在冷凝集素或ABO系统以外的同种抗体影响定型；自 身对照用于是否存在自身抗体影响定型。
ABO定型不一致的原因
一、人为因素 试剂不标准、失效或污染 操作中加错样本或试剂 离心速度不足或过度 细胞与血清比例不当，结果判断错误等 人工判读结果有可能发生书写错误
二、客观因素 因某种疾病（如白血病）导致抗原减弱 红细胞发生多凝集现象或产生类B物质 抗体效价低（如婴幼儿、老年人、低免疫球蛋白血症） 血清中有意外抗体，某些药物干扰等 可溶性血型物质过多 血浆蛋白异常导致红细胞缗钱状凝集或假凝集 嵌合体血型或近期输入异型血造成混合外观凝集
侧
者红细胞进行试验
次
献
侧
• 次测配血
血
供血者血清与患 者红细胞进行试验
3 +++++ + 0 ++0+ 0 + 0 0 + 0 ++ + +
抗体鉴定
用于抗体鉴定的谱细胞由8～16已知血型的O型红细胞 配套组成
每个红细胞具有各自不同的抗原成分 每套红细胞均附有相应的红细胞抗原谱 根据谱细胞的反应格局可以鉴定常见的抗体 自身细胞检查：确定患者血清内是否有自身抗体或自
在观察定型结果时，既要观察有无凝集，也要观察凝 集强度，这有助于A、B亚型、类B等的发现。
正反定型不一致，需进一步鉴定
在正定型试剂中增加抗-AB、抗-A1及抗-H 抗-AB用来确认弱A和弱B抗原；抗-A1用来鉴定A
亚型；抗-H用于鉴定亚型及孟买型。
在反定型试剂中增加A2、O及自身红细胞 A2细胞用于鉴定A2亚型；O细胞用于鉴定是否存
我国规定凡遇下列情况之一必须做抗体筛选试验： ✓血者
如抗体筛选试验阳性，缺乏谱细胞鉴定其特异性时， 可送有条件的单位鉴定。
交叉配血试验
输血前必须严格交叉配血，这是防止输血前检验程序 中发生差错的最后一道“安全岗”。
所谓“严格”是指，所采用的方法必须能检出ABO 不相容及ABO系统之外的有临床意义的抗体（IgG抗 体）。
ABO正定型采用单克隆抗-A、抗-B血型试剂，抗-B 试剂不应该与获得性B抗原反应。
采用A1和B试剂细胞进行反定型检测；新生儿和以前 做过反定型可省略。
只有正反定型结果相符才能正确判定ABO血型；单 纯正定型O型不可靠，单纯反定型AB型也不可靠。
日常工作中需要定期做阳性/阴性对照，在可能的情 况下，最好每天在使用定型试剂前作阳性/阴性对照， 以检测其活性。
目的：检出有临床意义的抗体，并可在配血前有足 够的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的血液，避免 盲目配血。
方法：用受检者血清与试剂红细胞起反应，以发现 在37℃有临床意义的抗体。
“有临床意义”的抗体：
如果某种特异性抗体曾引起新生儿溶血病、 明显的溶血性输血反应或使输入的红细胞存活 时间太短，即认为该种抗体有临床意义
抗体筛选的原则
抗体筛选试验应尽可能使用包含所有主要血型抗原的 筛选红细胞
试验应包括完全抗体和不完全抗体的检测 抗体筛选阳性标本继续用相同的试验方法做抗体鉴定 确定抗体特异性后，应该确定患者的相应抗原为阴性
筛选红细胞的要求
由2～3人份的O型红细胞组成 具有尽可能多的抗原，包括：D C E c e M
输血前免疫血清学检查
在检验医学中，没有几项检验像输血前检验一样， 临床医生几乎完全依赖其结果的正确性。
输血前检验的每一个环节均可能发生差错，标本搞 错最为常见。
患者输入不相容的血液成分可导致严重不良后果：
急性溶血反应：多由ABO血型不相容输血引起，人 为差错是其主要原因。 迟发性溶血反应：多由ABO以外血型不相容输血所 致，输血前检验不规范是其主要原因。
出现异常结果的处理办法
正反定型不一致应重新检测（应使用洗涤红细胞） 如果重新检测结果仍然异常，请资深工作人员协助 当检测结果与以往记录不一致时，应重新采集血标本 再一次检测
如果一时无法找到正反定型结果不一致的原因，患者 又需紧急输血，此时可输注Rh（D）同型的O型红细胞
不规则抗体的筛选和鉴定
身抗体与同种抗体并存
抗体筛选试验的方法很多，国外以间接抗球蛋白法 为金标准，国内中小医院多采用凝聚胺法，大医院多 采用微柱凝胶技术。
微柱凝胶法是简单、有效检测不规则抗体的方法， 但无法排除无临床意义抗体的干扰。
抗体筛选用的红细胞一定要保存在4℃环境中，以防 红细胞上抗原丢失。
国外对所有受血者常规作抗体筛选试验，并认为抗体 筛选是检测不规则抗体最可靠、最敏感的方法。
交叉配血的内容
主侧交叉：由患者血清和供者红细胞组成
次侧交叉：由患者红细胞和供者血清（浆）组成（由 于我国尚未对供者进行抗体筛选，故次侧交叉是有必 要的，尤其是输全血时）
自身对照：由患者自身血清和自身红细胞组成（自身 对照有助于分析解释交叉配血试验中出现的阳性结果）
患
者
• 主侧配血
主
用患者血清与供
N P1 S s Lea Leb K k Fya Fyb Jka Jkb 尽可能是纯合子 用于献血者的血清筛选时，可将两个筛选红细胞混
合使用，用于患者血清筛检时必须与两个筛选红细 胞分别进行试验。
试剂筛选红细胞： ——特定的O型红细胞，通常为2-3人份的O型红细胞成为一套。
每套试剂筛选红细胞中必须有下列抗原：
号 D C E c e JKa JKb M N S s Mur Fya Fyb Dia Dib K k Lea Leb P1 1 ++00+ 0 + ++0+ 0 + + 0 + 0 +0 + 0
2 +0++0 + + 0+0+ / + 0 0 + 0 +0 + 0
输血前免疫学检查
三项检查： ● 血型的鉴定 ● 抗体筛选和鉴定 ● 交叉配血试验
三者互为补充，缺一不可
目的： 使输入的血液成分有效存活 不会引起受血者的红细胞发生破坏
血型鉴定
常规ABO血型鉴定应包括正、反定型，二者起到互相 验证和质控的作用。
反定型要用试管法，不用玻片法
我国已规定常规血型鉴定还应包括Rh（D）定型。
在冷凝集素或ABO系统以外的同种抗体影响定型；自 身对照用于是否存在自身抗体影响定型。
ABO定型不一致的原因
一、人为因素 试剂不标准、失效或污染 操作中加错样本或试剂 离心速度不足或过度 细胞与血清比例不当，结果判断错误等 人工判读结果有可能发生书写错误
二、客观因素 因某种疾病（如白血病）导致抗原减弱 红细胞发生多凝集现象或产生类B物质 抗体效价低（如婴幼儿、老年人、低免疫球蛋白血症） 血清中有意外抗体，某些药物干扰等 可溶性血型物质过多 血浆蛋白异常导致红细胞缗钱状凝集或假凝集 嵌合体血型或近期输入异型血造成混合外观凝集
侧
者红细胞进行试验
次
献
侧
• 次测配血
血
供血者血清与患 者红细胞进行试验
3 +++++ + 0 ++0+ 0 + 0 0 + 0 ++ + +
抗体鉴定
用于抗体鉴定的谱细胞由8～16已知血型的O型红细胞 配套组成
每个红细胞具有各自不同的抗原成分 每套红细胞均附有相应的红细胞抗原谱 根据谱细胞的反应格局可以鉴定常见的抗体 自身细胞检查：确定患者血清内是否有自身抗体或自
在观察定型结果时，既要观察有无凝集，也要观察凝 集强度，这有助于A、B亚型、类B等的发现。
正反定型不一致，需进一步鉴定
在正定型试剂中增加抗-AB、抗-A1及抗-H 抗-AB用来确认弱A和弱B抗原；抗-A1用来鉴定A
亚型；抗-H用于鉴定亚型及孟买型。
在反定型试剂中增加A2、O及自身红细胞 A2细胞用于鉴定A2亚型；O细胞用于鉴定是否存
我国规定凡遇下列情况之一必须做抗体筛选试验： ✓血者
如抗体筛选试验阳性，缺乏谱细胞鉴定其特异性时， 可送有条件的单位鉴定。
交叉配血试验
输血前必须严格交叉配血，这是防止输血前检验程序 中发生差错的最后一道“安全岗”。
所谓“严格”是指，所采用的方法必须能检出ABO 不相容及ABO系统之外的有临床意义的抗体（IgG抗 体）。
ABO正定型采用单克隆抗-A、抗-B血型试剂，抗-B 试剂不应该与获得性B抗原反应。
采用A1和B试剂细胞进行反定型检测；新生儿和以前 做过反定型可省略。
只有正反定型结果相符才能正确判定ABO血型；单 纯正定型O型不可靠，单纯反定型AB型也不可靠。
日常工作中需要定期做阳性/阴性对照，在可能的情 况下，最好每天在使用定型试剂前作阳性/阴性对照， 以检测其活性。
目的：检出有临床意义的抗体，并可在配血前有足 够的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的血液，避免 盲目配血。
方法：用受检者血清与试剂红细胞起反应，以发现 在37℃有临床意义的抗体。
“有临床意义”的抗体：
如果某种特异性抗体曾引起新生儿溶血病、 明显的溶血性输血反应或使输入的红细胞存活 时间太短，即认为该种抗体有临床意义
抗体筛选的原则
抗体筛选试验应尽可能使用包含所有主要血型抗原的 筛选红细胞
试验应包括完全抗体和不完全抗体的检测 抗体筛选阳性标本继续用相同的试验方法做抗体鉴定 确定抗体特异性后，应该确定患者的相应抗原为阴性
筛选红细胞的要求
由2～3人份的O型红细胞组成 具有尽可能多的抗原，包括：D C E c e M
输血前免疫血清学检查
在检验医学中，没有几项检验像输血前检验一样， 临床医生几乎完全依赖其结果的正确性。
输血前检验的每一个环节均可能发生差错，标本搞 错最为常见。
患者输入不相容的血液成分可导致严重不良后果：
急性溶血反应：多由ABO血型不相容输血引起，人 为差错是其主要原因。 迟发性溶血反应：多由ABO以外血型不相容输血所 致，输血前检验不规范是其主要原因。
出现异常结果的处理办法
正反定型不一致应重新检测（应使用洗涤红细胞） 如果重新检测结果仍然异常，请资深工作人员协助 当检测结果与以往记录不一致时，应重新采集血标本 再一次检测
如果一时无法找到正反定型结果不一致的原因，患者 又需紧急输血，此时可输注Rh（D）同型的O型红细胞
不规则抗体的筛选和鉴定
身抗体与同种抗体并存
抗体筛选试验的方法很多，国外以间接抗球蛋白法 为金标准，国内中小医院多采用凝聚胺法，大医院多 采用微柱凝胶技术。
微柱凝胶法是简单、有效检测不规则抗体的方法， 但无法排除无临床意义抗体的干扰。
抗体筛选用的红细胞一定要保存在4℃环境中，以防 红细胞上抗原丢失。
国外对所有受血者常规作抗体筛选试验，并认为抗体 筛选是检测不规则抗体最可靠、最敏感的方法。
交叉配血的内容
主侧交叉：由患者血清和供者红细胞组成
次侧交叉：由患者红细胞和供者血清（浆）组成（由 于我国尚未对供者进行抗体筛选，故次侧交叉是有必 要的，尤其是输全血时）
自身对照：由患者自身血清和自身红细胞组成（自身 对照有助于分析解释交叉配血试验中出现的阳性结果）
患
者
• 主侧配血
主
用患者血清与供
N P1 S s Lea Leb K k Fya Fyb Jka Jkb 尽可能是纯合子 用于献血者的血清筛选时，可将两个筛选红细胞混
合使用，用于患者血清筛检时必须与两个筛选红细 胞分别进行试验。
试剂筛选红细胞： ——特定的O型红细胞，通常为2-3人份的O型红细胞成为一套。
每套试剂筛选红细胞中必须有下列抗原：