超声波提取植物总黄酮
超声波辅助提取鱼腥草总黄酮的工艺研究
1
1∶5
60
15
40
2
1∶10
70
30
50
3
1∶15
80
45
60
2 结果与分析 2.1 因素试验结果 2.1.1 料液比对鱼腥草总黄酮提取的影响
根据图 1 可知，当料液比为 1∶5 至 1∶10 时，提取所获的总黄酮得率逐渐增大，当料液比为 1： 10 时总黄酮得率最大，随后慢慢降低，故正交试验设计中选取提取料液比为 1∶5 ~ 1∶15.
根据图 4 可知，当提取温度在 40℃ ~ 50℃时，提取所获的总黄酮得率逐渐增大，当提取温度 达 50℃时，这时总黄酮得率最大，50℃后总黄酮得率逐渐降低 . 故正交试验设计中选取提取时间 为 40℃ ~ 60℃.
图 4 提取温度不同对总黄酮提取的影响 2.2验结果的基础上设计正交试验方案，选取各因素中鱼腥草总黄酮得率较高 3 个 水平进行正交试验，正交实验结果见表 2.
根据图 3 可知，当超声提取时间为 15 ~ 30 min 时，提取所获的总黄酮得率逐渐增大，当超声 提取时间达 30 ~ 45 min 时，总黄酮得率没有变化，这时得率最大，45 min 后总黄酮得率逐渐降低，
·31·
故正交试验设计中选取提取时间为 15 ~ 45 min.
图 3 提取时间不同对总黄酮提取的影响 2.1.4 提取温度对鱼腥草总黄酮提取的影响
C 提取时间/min 1（15） 2（30） 3（45） 3 1 2 2 3 1 2.010 1.990 2.130 0.140
D 提取温度/℃ 1（40） 2（50） 3（60） 2 3 1 3 1 2 2.010 2.057 2.063 0.053
总黄酮得率/% 1.87 1.92 2.03 2.13 2.24 2.13 2.12 2.03 1.92
超声波辅助提取芙蓉花中总黄酮的研究
超声波辅助提取芙蓉花中总黄酮的研究摘要:用单因素试验方法探讨超声波辅助提取芙蓉花中总黄酮的最佳提取条件,考察了提取温度､乙醇体积分数､提取时间､超声功率对提取结果的影响｡结果表明,在提取温度60 ℃,乙醇体积分数80%,提取时间20 min,超声功率400 W时,芙蓉花中总黄酮的提取率为2.95%,提取效果最好,且优于回流提取法｡关键词:芙蓉花;总黄酮;提取;测定Ultrasonic-assisted Extraction of Flavonoids from Flos Hibisci Mutabilis Abstract: Single factor tests were adopted to optimize the ultrasonic assisted extraction of flavonids from flower of Hibiscus mutabilis (Flos Hibisci Mutabilis). The effects of extaction temperature, time, enthanol concentration and ultrasonic power on extraction ratio were studied. The results indicated that the best extraction efficiency could be achieved if extracting at 80 ℃for 20 min when ethanol concentration was 80%; and ultrasonic power was 400 W. The yield of total flavonoids under these conditions was 2.95%; and it was superior to the heating recirculation method.Key words: Flos Hibisci Mutabilis; total flavonoids; extraction; determination芙蓉花为锦葵科(Malvaceae)植物木芙蓉(Hibiscus mutabilis L.)的花,别名叫拒霜花,分布于四川､云南､山东等地｡近年来研究证明,芙蓉的花､叶中含有芸香甙等黄酮类化合物[1,2],因此芙蓉花可入药,主治肺热咳嗽､吐血､目赤肿痛等｡但芙蓉花的药用成分分析尚未见报道｡黄酮类化合物是一类重要的天然有机化合物,广泛存在于植物中,具有抗炎､抗菌､抗病毒､抗氧化､抗肝毒等多种生理活性,一直受到国内外的广泛重视,研究进展很快[3-6]｡为进一步扩展芙蓉花的药用价值,对芙蓉花中总黄酮进行了提取与测定｡1材料与方法1.1材料芙蓉花:采摘于成都市区｡仪器:722N分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),KQ-400KDB型高功率数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),AE240电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多)｡试剂:无水乙醇､亚硝酸钠､硝酸铝､氢氧化钠,均为分析纯;芦丁标准溶液(0.2 mg/mL)｡1.2方法1.2.1样品溶液的制备将芙蓉花洗净后烘干,研磨成粉末后准确称取1.250 0 g粉末,加入乙醇溶液10 mL,经提取,冷却,过滤,从滤液中移取0.7 mL于50 mL容量瓶中用30%(V/V,下同)的乙醇定容｡1.2.2标准曲线的绘制吸取芦丁标准溶液1.0､2.0､3.0､4.0､5.0､6.0 mL于25 mL 比色管中,各加入50 mg/mL亚硝酸钠溶液1.0 mL､100 mg/mL硝酸铝溶液各1.0 mL､40 mg/mL氢氧化钠试液6.0 mL,用30%的乙醇定容至刻度,摇匀,静置后,在510 nm波长处测定其吸光度[7-9]｡以吸光度(A)为纵坐标,浓度(C//μg/mL)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程为■=0.011 3C+0.012 1,相关系数r=0.999 2｡2结果与分析2.1超声波辅助提取法单因素试验结果2.1.1乙醇体积分数对芙蓉花中总黄酮提取率的影响准确称取1.250 0 g芙蓉花粉末5份,分别加入不同体积分数的乙醇溶液10 mL,在提取温度50 ℃､超声功率400 W下提取30 min后,按前述方法测定吸光度,考察乙醇体积分数对芙蓉花中总黄酮提取率的影响,结果见表1｡结果表明,总黄酮提取率随乙醇体积分数的增加而先增加,但增加到80%后又随乙醇体积分数的增加而降低,因此选择80%的乙醇溶液为浸提剂｡2.1.2提取温度对芙蓉花中总黄酮提取率的影响称取质量为1.250 0 g芙蓉花粉末5份,分别加入80%(V/V,下同)的乙醇溶液10 mL,分别在超声功率400 W､不同提取温度下(30､40､50､60﹑70 ℃)提取30 min后抽滤,滤液用30%的乙醇定容至50 mL｡分别精密移取0.7 mL提取液于50 mL比色管中,按前述方法测定吸光度,考察提取温度对芙蓉花中总黄酮提取率的影响,结果(表2)表明,总黄酮提取率随提取温度的增加而增加,但是在60､70 ℃之间增加已经不明显了,考虑到仪器损耗及仪器最大温度的限制等方面因素(仪器最高温度为70 ℃),因此最佳提取温度为60 ℃｡2.1.3超声功率对芙蓉花中总黄酮提取率的影响按前面的单因素试验方法,在提取温度50 ℃,不同超声功率下提取30 min后抽滤,考察超声功率对芙蓉花中总黄酮提取率的影响,结果(表3)表明,随着超声功率的提高,提取率不断上升,试验中最佳超声功率为400 W｡2.1.4提取时间对芙蓉花中总黄酮提取率的影响按前述方法,分别在提取温度50 ℃､超声功率400 W､不同提取时间下提取后抽滤,考察提取时间对芙蓉花中总黄酮提取率的影响｡结果(表4)表明,随着提取时间的延长,提取率先上升后下降,在提取时间为20 min时提取率最大,因此最佳提取时间是20 min｡2.2单因素综合试验结果按相同的试验方法,用80%的乙醇,提取温度60 ℃,提取时间20 min和超声功率400 W提取,得到提取率为2.95%｡2.3回流提取试验结果称取1.250 0 g芙蓉花粉末,加入80%的乙醇溶液10 mL,常压下水浴加热至60 ℃回流提取20 min后,测定吸光度,结果得到总黄酮提取率为2.80%｡而超声波辅助提取总黄酮的提取率为2.95%,所以超声波辅助提取法提取效率更高｡2.4精密度试验结果准确移取0.7 mL芙蓉花样品稀释液,连续测定5次吸光度,计算其变异系数｡由数据得到其S为0.290 0%,CV为0.75%,说明该试验方法精密度较好｡2.5重复性试验结果取芙蓉花粉末5份,按超声波辅助提取法制备样品溶液,测定吸光度,计算其变异系数得S为0.360 4%,CV为0.98%,说明其重复性较高｡2.6加标回收试验结果移取芦丁标准溶液1.0､2.0 mL各两份于4个50 mL比色管中,向加入了1.0 mL 标准溶液的两个比色管中分别加入0.6~0.7 mL样品稀释液,同样于有2.0 mL标准溶液的两个比色管中分别加入0.6､0.7 mL样品稀释液,按试验方法操作｡结果表明,芦丁回收率是102.36%~108.47%,平均回收率为105.84%,CV为2.66%,说明采用本方法对芙蓉花中总黄酮含量进行定量分析是可行的,结果稳定可靠｡3小结通过超声波辅助提取法对芙蓉花中总黄酮进行提取,利用单因素条件法,考察了乙醇体积分数､提取温度､超声功率､提取时间对提取率的影响,从而得出:乙醇体积分数﹑提取温度﹑超声功率﹑提取时间均会对芙蓉花中总黄酮含量的提取有影响｡其中最佳的试验条件为提取时间20 min,乙醇体积分数80%,提取温度60 ℃,超声功率400 W｡此条件下总黄酮提取率为2.95%｡超声波辅助提取法与回流提取法相比较,超声波辅助提取法对芙蓉花中总黄酮的提取要优于回流提取法｡芙蓉花中总黄酮的提取结果与大豆总黄酮含量对比,大豆中总黄酮含量一般为0.24%和0.22%[10],或者更低,比芙蓉花中总黄酮含量低,所以芙蓉花中总黄酮具有潜在的开发价值｡参考文献:[1] 姚莉韵,陆阳,陈泽乃. 木芙蓉叶化学成分研究[J]. 中草药,2003,34(3):201-203.[2] 陈仁通,陈玲. 木芙蓉中的化学成分[J].中草药,1993,24(5):227-229.[3] 汤容,樊瑞霞. 大豆异黄酮抗癌作用的研究进展[J]. 中国药学杂志,1999,34(7):435-437.[4] 吴立军. 天然药物化学[M]. 北京:人民卫生出版社,2004.[5] JANKUN J,SELMAN S H,SWIEREZ R,et al. Why drinking green tea could prevent cancer[J]. Nature,1997,387(6633):561.[6] 侯艳宁,朱秀媛,程桂芳. 黄芩苷的抗炎机理[J]. 药学学报,2000,35(3):161-164.[7] 黄德娟,黄德超,陈毅峰. 水蕹菜总黄酮含量的测定[J]. 食品科技,2008,33(11):219-221.[8] 毕和平,韩长日,张连华,等. 海南木莲总黄酮含量的测定[J]. 自然科学,2005,18(4):348-350.[9] 陈登丰,李烈辉,罗茂玉. 正交设计法优选银杏叶黄酮类化合物提取工艺的研究[J]. 制剂与技术,2010,17(16):134-135.[10] 魏福华,张永忠,井乐刚,等. 紫外分光光度法测定大豆中大豆异黄酮[J].理化检验-化学分册,2006,42(6):461-463.。
超声波法优化瓜蒌根中总黄酮的工艺提取
超声波法优化瓜蒌根中总黄酮的工艺提取摘要：采取新鲜瓜蒌根为原料，利用超声波法提取瓜蒌根中的总黄酮。
通过正交试验方法确定了最佳优化工艺条件；最后表明，精密称取5g瓜蒌根干燥粉末，以体积分数为85%的乙醇作为溶剂，确定瓜蒌根中的黄酮的最佳提取工艺为：超声时间20min，超声功率40w，超声温度40℃，瓜蒌根中总黄酮提取率可达2.13%左右。
AbstractUsing fresh Trichosanthes root as raw material, the totalflavonoids in Trichosanthes root were extracted by ultrasonic method. The optimum process conditions were determined by orthogonal test. The results showed that, by accurately weighing 5g dried powder of Trichosanthis root and using 85% ethanol as solvent, the optimal extraction process of protein in Trichosanthis root was determined as follows: ultrasonic time of 30min, ultrasonic power of 40w, ultrasonic temperature of 35℃, the extraction rate of t otal flavonoids in Trichosanthis root could reach about 2.13%.天花粉属葫芦科植物瓜蒌（Trich-osanthes kirilowii Maxim）或双边瓜蒌（Trichosanthes rosthornii Harms）的干燥根。
响应面法优化牛蒡根总黄酮超声波提取工艺
响应面法优化牛蒡根总黄酮超声波提取工艺牛蒡（Arctium lappa L.）是一种常见的中草药材，被广泛应用于中药和保健品领域。
牛蒡根中含有丰富的总黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种生物活性。
牛蒡根总黄酮的提取工艺对其有效成分的提取率和品质具有重要影响。
超声波提取技术因其高效、节能、环保等特点，被广泛应用于中草药中有效成分的提取工艺优化。
在本研究中，我们将采用响应面法对牛蒡根总黄酮的超声波提取工艺进行优化，以提高提取率和品质。
一、材料与方法1.实验材料牛蒡根由当地市场购得，并经过鉴定确认为Arctium lappa L.采集地点为XX省XX市XX县，采集季节为XX月。
牛蒡根干燥后粉碎成细粉备用。
2.超声波提取在实验室条件下，取一定量的牛蒡根粉末，加入适量的乙醇为提取溶剂，在一定的温度和时间条件下进行超声波提取。
在实验中，我们将考察不同因素（如料液比、提取温度、超声功率、提取时间等）对牛蒡根总黄酮提取率的影响，以找出最佳的超声波提取工艺条件。
3.总黄酮含量分析采用高效液相色谱法（HPLC）测定牛蒡根总黄酮的含量。
通过标准曲线法计算牛蒡根总黄酮的含量，并根据提取率计算提取效果。
二、结果与讨论经过优化后，最终得到的牛蒡根总黄酮提取率为3.25%，总黄酮含量为18.5mg/g。
与未优化的工艺条件相比，总黄酮提取率和含量分别提高了27.5%和18.2%。
可见，响应面法优化的超声波提取工艺能够显著提高牛蒡根总黄酮的提取效果，提高了其经济效益和市场竞争力。
在实际工程中，超声波提取技术已经被广泛应用于中药材的有效成分提取工艺中。
通过对实验数据的统计分析和多因素交互影响的研究，采用响应面法可以有效地优化提取工艺条件，提高有效成分的提取率和品质。
超声波提取技术与响应面法的结合在中药材提取工艺优化中具有广阔的应用前景。
本研究通过响应面法优化了牛蒡根总黄酮的超声波提取工艺，得到了最佳的提取工艺条件，并取得了良好的提取效果。
超声波提取植物总黄酮
实验一植物材料中总黄酮分离提取--超声波提取植物总黄酮一、实验目的为充分利用天然植物资源，避免资源的浪费，探讨植物总黄酮的提取及鉴别方法。
二、实验原理采用超声波乙醇浸提法从植物材料（黄芩、银杏叶、枇杷叶）中提取黄酮类物质，并用分光光度法测定含量。
利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响。
三、实验材料原料：黄芩、银杏叶、枇杷叶试剂：95%乙醇AR；无水乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；芦丁标准品、蒸馏水其它：滤纸、吸管、容量瓶、漏斗、试管四、实验仪器超声波清洗器（超声工作频率40kHz）；紫外可见分光光度计；抽滤机电炉子水浴锅五、实验步骤（一）试剂配制a.硝酸铝（10%）：称取20 g硝酸铝溶于蒸馏水中，定容至200 mL，混匀，贴标签备用。
b.亚硝酸钠（5%）：称取10 g亚硝酸钠溶于蒸馏水中，定容至200 mL，混匀，贴标签备用。
c.芦丁标准溶液（2 mg/ml）：称取芦丁2 g于1000 mL容量瓶中，加蒸馏水溶解并定容至刻度，混匀，贴标签备用。
d.乙醇溶液（60%）：600ml无水乙醇，溶于蒸馏水，定容至1000 ml容量瓶中，混匀，贴标签备用。
e.氢氧化钠溶液（4%）：40 g氢氧化钠溶于水，定容至1000 ml容量瓶中，混匀，贴标签备用。
（二）总黄酮成分提取取干燥植物材料（黄芩、银杏叶、香樟叶），粉碎。
称取约5 g，加80 ml 95%乙醇，浸泡20min，超声波提取30 min，抽滤。
滤渣再加80 ml 95 %乙醇，浸泡20min，再次超声波提取30 min，抽滤，合并两次滤液，减压回收（水浴加热）乙醇至滤液仅剩5～7 ml为止，放置100 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。
（三）定量实验-总黄酮的含量测定1. 波长的选择取样品液适量，在0.30 ml 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420～700 nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510 nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。
总黄酮的提取方法
总黄酮的提取方法总黄酮是一类在植物中广泛存在的生物活性物质，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗菌等多种生物活性。
总黄酮的提取方法主要分为常规提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超临界流体提取法等。
下面将详细介绍这些方法的原理和操作步骤。
1. 常规提取法：常规提取法是最常用的总黄酮提取方法之一。
该方法的原理是将植物样品与某种适合的溶剂进行浸提，溶剂中的总黄酮溶解出来，然后通过过滤和浓缩得到黄酮提取物。
操作步骤：(1) 将研磨后的植物样品与适量的溶剂加入烧瓶中，一般常用的溶剂有乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。
(2) 将烧瓶放入提取装置中，加热浸提，提取时间一般为1-3小时，提取温度根据溶解度可在25-60之间选择。
(3) 提取结束后，使用滤纸、膜过滤或离心等方式分离固液，将液相收集到锥形瓶中。
(4) 将液相进行浓缩，可采用旋转蒸发、真空浓缩或减压浓缩等方法。
(5) 最后得到的黄酮提取物可在低温下保存或进行进一步的分离和纯化。
2. 超声波辅助提取法：超声波辅助提取法是在常规提取法的基础上结合超声波技术进行提取。
超声波的作用可以通过物理振荡和微压力变化，促使溶剂渗透进入植物细胞中，增加提取效率。
操作步骤：(1) 将样品与适量的溶剂放入超声波提取仪中，超声波输出频率一般在20-100 kHz之间。
(2) 开始超声波处理，提取时间一般较短，通常为10-30分钟。
(3) 提取完成后，进行过滤和浓缩等步骤，得到黄酮提取物。
3. 微波辅助提取法：微波辅助提取法是一种利用微波辐射能量加热样品，从而促进溶质的溶解和渗透的方法。
操作步骤：(1) 将植物样品与适量的溶剂放入微波辅助提取系统中。
(2) 设置合适的微波功率和时间，一般微波功率选取在200-1000 W之间，时间一般为5-20分钟。
(3) 提取完成后，进行过滤和浓缩等步骤，得到黄酮提取物。
4. 超临界流体提取法：超临界流体提取法是在超临界温度和压力条件下利用超临界流体作为溶剂进行提取的方法。
超声波法提取山竹皮中总黄酮的研究
无水 乙醇 、 甲醇 、 乙醚 、 酮 、 酸 铝 、 硝 酸 丙 硝 亚
钠、 氢氧 化 钠 均 为分 析 纯 ， 售 ； 市 山竹 皮 ： 购 ； 市 芦
丁（ 工作对 照品 ： 质量分数 为 ９． ） 天津一方 ０５ ：
科技 有 限公 司 。 ＵＳ２５ 紫外一 见分 光 光 度计 ： ５０型 可 Ｈ本 岛津
公 司 ；２ ７ ２型可 见 分 光 光 度 计 ： 海 光 学 仪 器 厂 ； 上
１ｍＬ， 匀 ， 止 ； 硼 （ 氧 化 钠 ） ４ 溶 液 摇 静 加 氢 一
１ 再 加水 至 刻 线 ， 匀 ， 止 放 置 。采 用 紫 ０ｍＬ，ห้องสมุดไป่ตู้摇 静
外分光光度法确定芦 丁的最大吸收波长 ， 供试品
摘
要： 为获取 山竹 皮 中总黄酮的最佳提 取工 艺， 用超 声波提 取法 对山竹皮 总黄酮进行 提取 ， 采 以
芦 丁 为 标 准 品 ， 波 长 ５ ０ｎ 处 测 定 吸 光 度 ， 回 归 方程 Ｙ＝０ ０ ０９Ｘ— Ｏ ０ ７ ｒ ． ９ ）。 实验 在 ０ ｍ 得 ． １ ． ２ —Ｏ ９ ７ ８（ ８
司； ＡＵＸ ３０型 电子 天平 ： －２ 日本 岛津制 作所 。
１２ 样 品的制 备与检 测 ．
１２ １ 总黄酮 的提 取 ．．
称取 ２ ｇ山竹 皮 ， 用 （ 乙醇 ） ０ 的 乙 醇 一８
处理 ， 山竹 皮与 乙醇溶 液 的 比 （ 以下 简 称 料液 比） 为 １： ０ ｇｍＬ ， 超 声 波 提 取 １ｈ 过滤 ， 容 １ （／ ） 用 ， 定 至过 滤前 体积 ， ５ｍＩ样 品 （ 黄 ） ２ 取 淡 置 ５ｍＩ量 瓶中， 各加 水 至 ６０ｍＬ， ． 加 （ 硝 酸钠 ） 溶 亚 一５ 液 １ 混匀 ， 止 （ ， ｍＩ 静 无颜 色 变化 ）加 叫（ 酸铝 ） ； 硝
超声波辅助酶法提取牡丹皮总黄酮的工艺流程
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牡丹皮是一种具有丰富药用价值的植物材料，其中含有丰富的黄酮类化合物，具有多种药理活性。
总黄酮的提取方法
总黄酮的提取方法1、熔剂法热水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法2、 2.1 微波提取法微波提取是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异，使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热，从而使被提取物质从基体或体系中分离，进入介电常数较小,微波吸收能力相对差的提取剂［1］。
这种方法的优点是对提取物具有较高的选择性、提取率高、提取速度快、溶剂用量少、安全、节能、设备简单3、2。
2 超声波提取法用超声波提取法提取黄酮类物质，是目前比较新的方法.原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取,另外，还利用其次效应，如机械振动、扩散、击碎等,使其加速被提取成分的扩散、释放。
超声波提取法具有设备简单,操作方便,提取时间短，产率高，无需加热，同时有利于保护热不稳定成分,省时,节能，提取率高的优点。
4、2。
3 超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是利用超临界流体处于临界温度和临界压力以上，兼有气体和液体的双重特点，对物质具有良好的溶解能力,从而作溶剂进行萃取分离.可做超临界流体的物质很多，一般为低分子量的化合物,如CO2、C2H6、NH3、N2O 等。
目前多采用CO2 做萃取剂,因为它具有密度大、溶解能力强、临界压力适中、临界温度接近常温、不影响萃取物的生理活性、无毒无味、化学性质稳定、生产过程中容易回收、无环境污染、价格便宜等一系列优点。
但单一的CO2作萃取剂只对低极性、亲脂性化合物有较强的溶解能力,对大多数极性较强的组分则不起作用，因此，在其中加入夹带剂,通过影响溶剂的密度和溶质与夹带剂分子间的作用力来影响溶质在二氧化碳流体中的溶解度和选择性[15］。
超临界流体萃取技术有许多传统分离技术不可比拟的优点：过程容易控制、达到平衡的时间短、萃取效率高、无有机溶剂残留、对热敏性物质不易破坏等［16］。
但它所需要的设备规模较大，技术要求高，投资大，安全操作要求高,难以用于较大规模的生产.5、 2.4 酶法提取酶解法适用于被细胞壁包围的黄酮类物质，利用酶反应的高度专一性，破坏细胞壁,使其中的黄酮类化合物释放出来。
总黄酮的提取方法
总黄酮的提取方法
总黄酮是一种天然活性物质，广泛存在于植物中，常用于药物和保健品的制备。
目前常见的总黄酮提取方法包括以下几种：
1. 溶剂提取法：将原料粉碎后，使用有机溶剂（如乙醇、丙酮、乙酸乙酯等）进行浸提，振荡或浸泡一段时间，然后过滤、蒸发溶剂，得到纯化的总黄酮。
2. 超声波提取法：将原料与溶剂混合，通过超声波振荡破碎细胞壁，促进活性成分的释放，并加速提取过程。
该方法具有提取效率高、时间短等优点。
3. 超临界流体提取法：使用超临界流体（如二氧化碳）作为溶剂进行提取，利用其高渗透性和脱溶性能，能够高效提取总黄酮，并且溶剂易回收。
4. 水煎膏提取法：将原料与适量的水一起煎煮一段时间，提取活性物质。
该方法适用于一些水溶性总黄酮的提取。
5. 微波辅助提取法：将原料与溶剂混合，置于微波辐射区域，利用微波加热和共振效应，提高提取速度和效率。
6. 酶法提取：使用适当的酶（如纤维素酶、葡萄糖苷酶等）对原料进行酶解处理，使得总黄酮释放。
该方法能够提高总黄酮的提取率和纯度。
需要根据具体的实际情况选择合适的提取方法，因为不同的原料和需求可能对提取方法有不同的要求。
同时，提取方法的参数（如温度、时间、溶剂比例等）也需要进行优化，以提高提取效果。
超声波辅助提取桂花总黄酮及其抗氧化活性
超声波辅助提取桂花总黄酮及其抗氧化活性摘要：以桂花（Osmanthus fragrans Lour.）为原料，利用超声波辅助提取桂花中的总黄酮类成分。
重点考察了乙醇体积分数、超声波功率、超声波提取温度、超声波提取时间和液料比等因素对总黄酮提取率的影响。
结果表明，桂花总黄酮的最佳提取工艺为乙醇体积分数60%，超声波功率120 W，超声波提取温度50 ℃，液料比30∶1，超声波提取时间35 min，采用该最佳提取工艺，总黄酮的提取率可达12.75%。
桂花黄酮抗油脂过氧化能力强，在相同条件下抗油脂氧化的效果优于VC。
关键词：桂花（Osmanthus fragrans Lour.）；超声波辅助提取；总黄酮；抗氧化活性Microwave-assisted Extraction and Anti-lipid Peroxidation Activity of Total Flavonoids from Osmanthus Fragrans Lour.Abstract：The extraction of flavonoids from sweet-scented osmanthu’s flavor with ultrasonic wave was studied. The influence of several parameters including ethanol concentration，ultrasonic power，ultrasonic extracted temperature，ultrasonic extracted time，and extraction/material solution ratio etc on the extraction rate of total flavonoids were investigated. The optimal extraction conditions were as follows：ethanol concentration 60%，ultrasonic power 120 W，ultrasonic extracted temperature 60 ℃，extraction/material solution ratio 30∶1 and ultrasonic extracted time 35 min. Under the optimal conditions，the total flavonoids yielded was 12.75%. Osmanthus flavonoids increase antioxidative ability and its antioxidative effect is stronger than that of VC under the same conditions.Key words：Osmanthus fragrans Lour.；ultrasonicwave assisted extraction；total flavonoids桂花（Osmanthus fragrans Lour.）为木樨科木樨属植物，别名木犀、九里香等，是我国特产珍贵芳香花卉[1]。
艾蒿总黄酮的超声波提取工艺研究
关键词 ： 艾蒿； 黄酮 ； 超声波提取 工艺
Ｓ ｕｄ ｎ ｔ ｔ ａ ｏ ｃ Ｅｘ ｒ ｃ ｉ ｎ Ｔｅ ｈ ｑ ｆ ｈ ｔ ｌＦｌｖ ｎｅ ｒ ｍ ｔｍｉｉ Ａｒ ｙｉ ｔ ｙ ｏ ｈｅ Ｕｌｒ ｓ ｎｉ ｔ ａ ｔｏ ｃ ｎｉ ｕｅｏ ｔ ｅ Ｔｏａ ａ ｏ ｓｆ ｏ Ａｒｅ ｓａ ｇ
ｏ ｅｆａ ｏ ｅ ， ｅｅ ｔａ ｔ ｎ ｅｆｃｅ ｃ ｆｄｆｅｅ ｔ ｏｖ ｎ ｒｆａ ｏ ｅ ｔｍｉｉ ｒ ｙ ｓｃ ｍｐａｅ ｄｔ ｅ ｆｔ ｖ ｎ ｓ ｔ ｘｒ ｃｉ ｆ ｉｎ ｙｏ ｉ ｒ ｎ ｌｅ ｔ ｖ ｎ ｓｉ Ａｒｅ ｓａａｇ ｉ ｈ ｌ ｈ ｏ ｉ ｓ ｏ ｆ ｌ ｎ ｗａ ｏ ｒ ｄａ ｈ ｎ ｉｆｕ ｎ ｅ ｏ ａ ｈ ｐ ｒ ｍｅｅ ｓ ｓ ｃ ｓ ｓ ｌｅ ｔｃ ｎ ｅ ｔａｉ ｎ ｘ ａ ｔｏ ｉ ｒｔ ｅ ｒ ｔ ｆＡ ｅ ｓａ ａｇ ｉｔ ｎ ｅ ｃ ｆｅ ｃ ａ ａ ｔｒ ｕ ｈ ａ ｏｖ ｎ ｏ ｃ ｎｒ ｔ ，ｅ ｔ ｃ ｎ ｔ ｌ ｏ ｒ ｉ ｍｅ ｏ ｈ ａ ｏ ｏ ｒ ｍｉｉ ｒ ｙ ｏ ｉ ｔ ｓ ｌｅ ｔｏ ｘｒ ｃ ｏ ｆ ｃｅ ｃ ｙ ｕｓ ｆｏｔ ｏ ｏ ａ ｘ ｅ ｉ ｎ ｓｓｕ ｉｄ ｔｋ ｎ ｉｌ ｆｆ ｖ ｎ ｓ ａ ｔ ｄ ｏ ｖ ｎ ｎ ｅ ｔａ ｔ ｎ ｅ ｉｎ ｙ ｂ ｅ ｏ ｒｈ ｇ ｎ ｅ ｐ ｒｍｅ ｔｗａ ｔ ｄｅ ａ ｉ ｇ ｙｅｄ ｏ ａ ｏ ｅ ｓ ｓｕ ｙ ｉ ｉ ｌ ｌ ｉｄ ｘ Ｔｈ ｐ ｍｉｅ ｘｒ ｃｉｎ ｐ ｒ ｅｅ ｒｌａ ｅ ｒ ｓｆｌｏ ： ｔａ ｏ ｏ ｃ ｎ ａｉｎｗａ ０％． ｈ ａｉ ｎ ｅ ． ｅｏ ｔ ｚ ｄ ｅ ｔａ ｔ ａ ａ ｔｒ ｆ ｖ ｓｗｅ ｅａ ｏｌｗｓ Ｍｅｈ ｌ ｎ ｅ ｔ ｔ ｓ６ ｉ ｏ ｍ ｓｏ ｅ ｎ ｃ ｒ ｏ ｔ ｅｒｔｏ
一种超声波辅助提取银杏叶中总黄酮的方法
一种超声波辅助提取银杏叶中总黄酮的方法
超声波辅助提取银杏叶中总黄酮的方法是一种利用超声波引起的
物理和化学效应来增强提取过程的方法。
具体步骤如下：
1. 准备银杏叶样品：将银杏叶研磨成粉末状样品，确保样品颗
粒度均匀。
2. 制备提取溶剂：选择适合提取黄酮类化合物的溶剂，常用的
有乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。
根据需要还可以加入一些助溶剂，如水、酸或碱溶液。
3. 超声波提取：将银杏叶粉末样品与提取溶剂放入超声波提取
装置中，设定适当的超声波功率和提取时间。
超声波的高频振动会引
起样品中的微小气泡破裂和液流剧烈换向，从而增加溶剂与样品的接
触面积和质量传递速率。
4. 过滤和浓缩：用滤纸或滤芯将提取液中的固体微粒进行过滤，得到无固体颗粒的提取液。
然后使用浓缩设备，如旋转蒸发器或减压
浓缩仪，将提取液浓缩至一定体积。
5. 分离和纯化：可以通过液液抽提、源于固相萃取或使用柱层
析等方法对提取液进行进一步的分离和纯化，以得到含有较高浓度总
黄酮的样品。
使用超声波辅助提取方法可以大大缩短提取时间，提高提取效率，并且可以减少溶剂用量。
超声波还能够改变细胞壁结构，促进黄酮的
释放和溶解，从而增强提取效果。
改后超声波提取山绿茶中的黄酮
超声波提取山绿茶中的黄酮摘要：目的用超声波提取技术提取山绿茶中的主要有效成份黄酮。
方法以山绿茶为原料，乙醇浓度为95％、提取温度为45℃、提取时间为30 min提取、用大孔树脂的吸附进行进一步分离提纯。
结论此工艺简单可行，且超声波对总黄酮成分无影响，适用于工业化生产，及黄酮药用性高。
关键词：山绿茶黄酮超声波提取1 前言山绿茶为冬青科植物海南冬青的叶片，该植物主要含有黄酮、三萜苷类、三萜酸类、皂素及香豆素类等化学成分，还含有一定的微量元素，具有清热消毒、活血通脉、抗氧化等多方面生物活性，有增加免疫功能，促进人体发育，延缓衰老等多种功效。
目前，山茶主要用于降血压、降血脂、降胆固醇以及冠心病、脑血管疾病等病症。
临床上有用于生产降压片，降压的药学效果比较显著。
还用于袋泡剂的研制。
黄酮类化合物是山绿茶植物中的主要有效成份，具有较强的生理活性。
其中的类黄酮能增强维他命C的抗氧化功效，这种类黄酮也是珍贵营养品，所以它对维持皮肤美白，可谓是有珍品级的效果。
黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。
目前有关天然产物中提取黄酮类化合物的方法主要有有机溶剂提取法、微波萃取法、酶辅助提取法、CO2超临界流体萃取法等．普通的有机溶剂提取法通常比较耗时，有时还须使用有毒有害溶剂，污染产品．微波萃取法通常可以加速提取过程，但提取过程往往温度较高，可能对有效成分造成破坏；另外，微波的泄漏也会对操作者带来危害．酶辅助提取法可以加速提取过程，提高提取效率，但提取过程各种条件控制不当容易导致酶的失活．CO2超临界流体萃取法可以提高提取效率，但提取压力较高，需要特殊装置，并且有些提取过程也并不省时．超声波提取法常常由于设备容易得到、操作简单、提取过程温和、省时、提取效率高而得到广泛应用。
可以通过建立大鼠前列腺增生模型, 观察并分析从山绿茶中提取获得的总黄酮对大鼠BPH模型前列腺细胞凋亡及腺体组织细胞超微结构的影响, 以此研究山绿茶总黄酮抑制前列腺增生的作用机制, 为开发山绿茶的新用途提供理论依据。
油菜蜂花粉中总黄酮的提取及对自由基清除作用
油菜蜂花粉中总黄酮的提取及对自由基清除作用油菜蜂花粉是一种常见的天然保健食品，其中含有丰富的总黄酮类化合物。
总黄酮是一类具有多种生物活性的天然化合物，具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种保健作用。
因此，提取油菜蜂花粉中的总黄酮并研究其对自由基的清除作用具有重要的意义。
一、油菜蜂花粉中总黄酮的提取方法1.超声波提取法超声波提取法是一种常用的总黄酮提取方法，其原理是利用超声波的机械振动作用使样品中的总黄酮分子从细胞壁中释放出来。
具体操作步骤如下：（1）将油菜蜂花粉粉末加入适量的乙醇中，使其浸泡30分钟。
（2）将浸泡后的样品放入超声波提取仪中，进行超声波提取。
（3）将提取液过滤，去除杂质。
（4）将过滤后的提取液进行浓缩，得到总黄酮提取物。
2.微波辅助提取法微波辅助提取法是一种快速、高效的总黄酮提取方法，其原理是利用微波的电磁波作用使样品中的总黄酮分子快速释放出来。
具体操作步骤如下：（1）将油菜蜂花粉粉末加入适量的乙醇中，使其浸泡30分钟。
（2）将浸泡后的样品放入微波辅助提取仪中，进行微波辅助提取。
（3）将提取液过滤，去除杂质。
（4）将过滤后的提取液进行浓缩，得到总黄酮提取物。
二、油菜蜂花粉中总黄酮的自由基清除作用自由基是一类具有高度活性的分子，它们会与细胞内的蛋白质、核酸、脂质等分子结合，导致细胞损伤和死亡。
而总黄酮具有良好的抗氧化作用，可以清除自由基，保护细胞免受损伤。
因此，研究油菜蜂花粉中总黄酮的自由基清除作用具有重要的意义。
研究表明，油菜蜂花粉中的总黄酮具有良好的自由基清除作用。
在体外实验中，将油菜蜂花粉提取物加入到自由基产生体系中，可以明显降低自由基的产生量。
此外，油菜蜂花粉中的总黄酮还可以促进细胞内抗氧化酶的活性，增强细胞的抗氧化能力。
三、总结油菜蜂花粉中的总黄酮是一种具有多种生物活性的天然化合物，具有良好的抗氧化、抗炎、抗癌等多种保健作用。
超声波提取法和微波辅助提取法是两种常用的总黄酮提取方法，可以有效地提取油菜蜂花粉中的总黄酮。
超声提取野菊花总黄酮及其抑菌活性的研究
脂， 萃取 ２次 后 置 于 １ ０ｍｌ容 量 瓶 中 ， ０ 加水 定 容 ， 摇
匀， 即得供 试品溶液 （ 浓度 为 １ ０ｍｇ・ ） ０ ｍＩ 。 １ ２ ３ 总 黄酮测定 ．． １ ２ ３ １ 对照 品溶 液配制 ． ．． 精密 称 取经 １ ０℃ 干燥 至恒 重 的芦 丁对 照 品 ２ ２ ５ ｍｇ 置于 ５ 量瓶 中 ， 乙醇 适量 ， 充 分溶 解 ， ， ０ｍＩ容 加 使
ｍＬ， 匀 ， 置 ６ｍｉ ； 加 ５ 硝 酸 铝 溶 液 ２ ０ｍＩ 混 放 ｎ再 ． ，
芦丁 对照 品（ 号 ：０ ０ ９ ０ ） 购 自中 国药 品生 批 ０８ ２ ７５ ， 物制 品检 定所 ； 菊花 ， 野 购于青 岛众 生大药 房 。 所用试 剂均为 分析纯 。
１ ２ ３ ２ 标 准 曲 线 的绘 制 ． ．． 精 密 吸 取 芦 丁 对 照 品 溶 液 ０ ５ｍＩ １０ｍＩ ２ ０ ． … ． 、
１ 实 验
１ １ 材 料 、 剂 与 仪 器 ． 试 ’
ｍＬ ３ ０ｍＩ ． 、 ． …６ ０ｍＩ， 别 置 于 ２ 、 ． ４ ０ｍＬ ５ ０ ｍＩ 分 ５ ｍＩ容量瓶 中， 水至 ６ｍＩ， 加 再加 ５／ 硝 酸钠 溶液 １ 亚 ９ ６
摘
要 ： 野 菊 花 中 总黄 酮含 量 作 为考 察 指 标 ， 以 用正 交 实验 法优 化 野 菊 花 总 黄 酮 超 声提 取 工 艺 ， 考察 超 声 波 法 对 并
总 黄 酮 抑 菌 活性 的影 响 。 结 果表 明 ， 菊花 总 黄 酮 的 最 佳提 取 工 艺为 ： 超 声 功 率 ２ ０ Ｗ 条 件 下 ， ｌ 野 在 ０ 用 ２倍 量 ４ 的 乙 ５
超声波提取杜仲皮总黄酮工艺
乙醇浓度对杜仲皮黄酮得率的影响 分别采用体积分数３０％、４０％、６０％、７０％、８０％、
９５％不同浓度的乙醇，在３０ ｒａｉｎ内１００ Ｗ超声波功率， 料液比１：２０（ｇ：ｍＬ）的实验条件下进行提取杜仲总 黄酮，结果见图１。
８
７ ６
４
ｌ＼瓣畦
３ ２
５ １ ４
窖＼姗露
Ｏ ３ ２ １ Ｏ ６０ ７０
总黄酮含量的测定［７‘８】
（１）对照品溶液的制备：准确称取干燥至恒定质 量的芦丁对照品４．８ ｍｇ，置２５ ｍＬ的容量瓶中，加 ６０％乙醇适量，水浴加热使其溶解后冷却，用６０％乙 醇稀释到刻度，摇匀，即得０．１９２ ｍｇ／ｍＬ的标准溶液。 （２）标准曲线的绘制：精确吸取标准液０．５、１．Ｏ、 ２．０、３．０、４．０、５．０和０ ｍＬ（空白），分别置１０ ｍＬ的容
超卢波功翠／Ｗ
图３不同超声波功率的提取效果
２．４料液比对杜仲皮黄酮得率的影响 分别按料液比ｌ：１０、１：２０、１：３０、１：４０（ｇ：ｍ１）提
乙醇浓度／％
图１
不同乙醇浓度的提取效果
取黄酮，结果见图４。由图４可知，料液比增大黄酮 得率也随之提升，当料液比为１：３０时得率最大，但如 果再继续增加料液比，得率反而下降。因此料液比不 宜过大，本试验取１：３０（ｇ：ｍＬ）。
３０
０．０１３，其中ｒ＝０．９９９ ８（ｎ＝６），表明芦丁浓度在
０．０９６—０．９６
ｍｉｎ后黄酮得率将有所下降。因此，确定提取时间
ｍｉｎ。
８ ７ ６
ｍｇ／ｍＬ范围内线形关系良好。
为３０
（３）恻定方法：分别精确吸取样品液１．０ ｍＬ，按
照标准曲线中溶液配制方法配制，以不加样品液的溶 液为空白，在５１０ ｎｎｌ处测吸光度Ａ值，通过标准曲线 计算，求得总黄酮得率。计算公式同上。 １．２．２超声波提取试验 将杜仲皮粉碎，过１４０目筛，称取一定量的杜仲 皮粉末，加入乙醇，在室温下用超声波提取一段时间， 过滤，定容，得到杜仲皮内的黄酮粗提物。杜仲皮黄 酮得率＝（粗提物中黄酮总量／杜仲皮质量）× １００％，杜仲皮粗提物中黄酮含量＝（粗提物中黄酮 总量／粗提物质量）×１００％。分别考察乙醇浓度、超 声波功率、料液比、提取时间对杜仲皮黄酮得率的影 响。在单因素试验的基础上，选择主要影响超声波提 取杜仲皮总黄酮的水平进行正交试验，以确定最佳提 取条件。 ２结果与分析
超声波辅助乙醇法提取花粉中黄酮
食物中的脂类
胆汁酸盐
乳化 胰脂酶 辅脂酶
微团 (micelles)
相应消化酶
产物
甘油三酯 磷 脂
2-甘油一酯 + 2 FFA 甘油一酯 溶血磷脂 + FFA 胆固醇 + FFA
磷脂酶A 磷脂酶 2 胆固醇酯酶
胆固醇酯
胆汁酸盐的作用
超声波辅助乙醇法提取松花粉 中总黄酮
实验仪器 • 超声波清洗仪、电子天平、离心机、烘箱、 旋转蒸发仪、 • 锥形瓶9个、量筒50ml、100ml各一个、玻 璃棒1根、容量瓶100ml、250ml 各两个
在根据正交试验所得出的结果确定最佳试验 条件
实验试剂
• 乙醇、破壁松花粉
试验方法
1. 标准实验 称取破壁松花粉2.000g→加入75%的乙醇按1：20 的料液比配制溶液→浸泡12h→超声提取30min→ 离心机离心（3500r/min 20min) →取上清液→用 旋转蒸发仪浓缩→真空冷冻干燥 2. 对照实验 称取破壁松花粉2.000g→加入75%的乙醇按1：20 料液比配制溶液→浸泡12h→静置30min→离心机 离心（3500r/min 20min) →取上清液→旋转蒸发 仪浓缩→真空冷冻干燥
3）料液比对黄铜提取的影响 称取松花粉2.000g乙醇浓度用75%，按料 液比1：5；1：10；1：15；1：20；1：25 浸泡12h，超声30min，重复1）操作确定最 佳提取料液比
正交试验
• 根据不同的乙醇浓度，料液比，提取时间 来设计正交试验 乙醇浓度（%） 65 料液比 1：15 提取时间（min）15 75 1:20 20 85 1:25 25
单一因数影响
1）乙醇浓度对黄酮提取的影响 称取松花粉2.000g按料液比1：10用55%； 65%；75%；85%；95%乙醇分别为提取 剂浸泡12h，在超声提取30min，3500r/min 离心20min取上清液。测量黄酮量，确定最 佳提取浓度
超声提取黄酮实验报告
一、实验目的本研究旨在通过超声波提取技术，从植物材料中提取总黄酮，并与传统提取方法进行比较，以探讨超声波提取法在黄酮提取中的应用效果。
二、实验原理黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然化合物，具有多种生物活性。
超声波提取法利用超声波的高频振动、空化效应等特性，可以有效地提高植物材料中黄酮类化合物的提取率。
实验采用超声波提取法，以乙醇为溶剂，对植物材料进行提取，并通过分光光度法测定提取液中黄酮的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：干燥植物材料（如银杏叶、杜仲叶、柿叶等）、芦丁标准品、95%乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等。
2. 实验仪器：超声波清洗器、紫外可见分光光度计、电子天平、旋转蒸发仪、电热恒温水浴锅、粉碎机等。
四、实验方法1. 标准曲线绘制（1）称取一定量的芦丁标准品，用蒸馏水溶解并定容至100 mL，配制成浓度为0.1 mg/mL的标准溶液。
（2）分别取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL标准溶液于10 mL容量瓶中，加入2.5 mL 5%硝酸铝溶液，混匀。
（3）静置6 min后，加入1.0 mL 10%氢氧化钠溶液，混匀。
（4）在波长510 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，芦丁浓度（mg/mL）为横坐标，绘制标准曲线。
2. 超声波提取（1）将植物材料粉碎，准确称取一定量（如2.0 g）于50 mL具塞锥形瓶中。
（2）加入10 mL 95%乙醇，超声提取30 min。
（3）过滤，收集滤液。
（4）重复步骤（2）和（3）一次。
（5）合并两次滤液，减压回收乙醇至5 mL，用蒸馏水定容至50 mL。
3. 测定黄酮含量（1）取0.5 mL提取液，按照标准曲线绘制步骤进行显色反应。
（2）在波长510 nm处测定吸光度。
（3）根据标准曲线计算提取液中黄酮含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制绘制标准曲线，得到线性方程为：y = 0.0147x - 0.0033，相关系数R² = 0.9989。
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实验一植物材料中总黄酮分离提取
--超声波提取植物总黄酮
一、实验目的
为充分利用天然植物资源，避免资源的浪费，探讨植物总黄酮的提取及鉴别方法。
二、实验原理
采用超声波乙醇浸提法从植物材料（黄芩、银杏叶、枇杷叶）中提取黄酮类物质，并用分光光度法测定含量。
利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响。
三、实验材料
原料：黄芩、银杏叶、枇杷叶
试剂：95%乙醇AR；无水乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；
芦丁标准品、蒸馏水
其它：滤纸、吸管、容量瓶、漏斗、试管
四、实验仪器
超声波清洗器（超声工作频率40kHz）；
紫外可见分光光度计；
抽滤机
电炉子
水浴锅
五、实验步骤
（一）试剂配制
a.硝酸铝（10%）：称取20 g硝酸铝溶于蒸馏水中，定容至200 mL，混匀，
贴标签备用。
b.亚硝酸钠（5%）：称取10 g亚硝酸钠溶于蒸馏水中，定容至200 mL，混匀，
贴标签备用。
c.芦丁标准溶液（2 mg/ml）：称取芦丁2 g于1000 mL容量瓶中，加蒸馏
水溶解并定容至刻度，混匀，贴标签备用。
d.乙醇溶液（60%）：600ml无水乙醇，溶于蒸馏水，定容至1000 ml容量瓶
中，混匀，贴标签备用。
e.氢氧化钠溶液（4%）：40 g氢氧化钠溶于水，定容至1000 ml容量瓶中，混
匀，贴标签备用。
（二）总黄酮成分提取
取干燥植物材料（黄芩、银杏叶、香樟叶），粉碎。
称取约5 g，加80 ml 95%乙醇，浸泡20min，超声波提取30 min，抽滤。
滤渣再加80 ml 95 %乙醇，浸泡20min，再次超声波提取30 min，抽滤，合并两次滤液，减压回收（水浴加热）乙醇至滤液仅剩5～7 ml为止，放置100 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，
得样品液。
（三）定量实验-总黄酮的含量测定
1. 波长的选择
取样品液适量，在0.30 ml 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420～700 nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510 nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。
2.标准曲线的绘制
分别精密吸取芦丁对照液（2 mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 ml于10 ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.40 ml，摇匀，静置6 min；再加10%硝酸铝溶液0.40 ml，摇匀，静置6 min；再加4%氢氧化钠溶液4.00 ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置15 min，以试剂作空白参比液，于510 nm 处测定吸光度。
管号 1 2 3 4 5 6 7
芦丁0.00 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00
亚硝酸钠0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
硝酸铝0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
氢氧化钠 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00
60%乙醇 5.20 4.70 4.20 3.20 2.20 1.20 0.20
浓度0.00 0.10 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00
3.提取物含量的测定
精密吸取样品液1 ml，置10 ml容量瓶，按标准曲线的制备方法，测定其吸光度A，用标准曲线法计算样品中总黄酮的含量（mg/ml）。
管号 1 黄芩1 黄芩2 银杏1 银杏2 香樟1 香樟2
样品液0.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00
亚硝酸钠0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
硝酸铝0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
氢氧化钠 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00
60%乙醇 5.20 4.20 4.20 4.20 4.20 4.20 4.20
六、实验讨论
利用本文所提供的超声波提取、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯度较高。
超声波可以强化乙醇浸提法，达到省时、高效、节能的目的。
此过程是一个物理过程，浸提过程中无化学反应，被浸提的生物活性物质在一定时间内保持不变。
七、思考题
1、黄酮类化合物的生理作用？
2、在本实验中，哪些因素会影响测定结果？。