斑马鱼胚胎培养pdf

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斑马鱼胚胎培养

胚胎培养

收集卵细胞放置于一个浅盘,解剖显微镜下观察。用吸管转移看似健康卵细胞(见健康卵细胞)至装有新鲜体系水的250 ml烧杯。吸取胚胎细胞时尽量避免吸入任何残渣减少污染机会。

每一个烧杯200ml水中胚胎系统不应超过25个。烧杯中的水需每天更换。

第四天开始喂养胚胎细胞。喂养培养的活草履虫饵料(见饲养草履虫)或喂它们Liquifry

饲料,可以在任何热带鱼商店购买。5ml活草履虫或容器中说明的Liquifry饲料量。每日喂养两次。

9天,转移鱼苗至1/2加仑的容器,继续喂养Liquifry饲料,或混有幼鱼鱼食的草履虫或者活的丰年虾幼虫。(可在任何热带鱼商店购买到丰年虾卵。)

14天,停止使用Liquifry饲料或草履虫喂养,只用幼鱼鱼食或丰年虾幼虫喂养。

21天,幼鱼转移至常规鱼缸。不要忘记,此阶段大鱼吃小鱼,应隔离饲养。

健康卵细胞

1.健康卵细胞是透明的,可以每隔20-40min观察到分裂状况,或者置于解剖显微镜下观察。

2.不良卵细胞看起来不透明,发白,或者是顶部凝固态的永久单细胞卵。

注意:第二种状态有时很难分辨,需要实践,没有细胞分裂,可以将其分离。

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