茯苓多糖的提取及其抑菌研究
茯苓多糖的提取及含量测定
茯苓多糖的提取及含量测定目的:建立茯苓多糖的含量测定方法。
方法:用水提醇沉法提取茯苓多糖,酚-硫酸法紫外分光光度法测定茯苓多糖的含量。
一、仪器与试药1、仪器：UV2754 紫外分光光度计2、试剂与样品样品：云苓、葡萄糖对照品苯酚、浓硫酸（1）5 %苯酚试剂的配制取苯酚加热蒸馏收集182 ℃的馏分,吸取此馏分10ml 加水至200ml 置棕色瓶内,放冰箱备用。
（2）对照品溶液的配制精密称取105 ℃干燥恒重的葡萄糖50mg 加水溶解并定容至1000ml 量瓶中,即得。
（3）供试品溶液的配制精密称取茯苓提取物50mg ,加水溶解并定容至500ml 量瓶中,过滤,滤液备用,即得。
二、提取准确称取茯苓500g ,切成碎片,加入4～6 倍量的水,回流提取 3 次,时间分别是3 ,2 和1h。
合并 3 次提取液滤过,除去不溶性杂质,得2000ml 滤液。
取600ml减压蒸馏浓缩成76ml ,在搅拌下加入乙醇,使含醇量达到80 % ,静置12h ,离心,收集沉淀,加蒸馏水60ml 溶解煮沸,趁热滤除不溶物,滤液在搅拌下再加入乙醇,使含醇量达到80 % ,放置,析出褐色沉淀后,低温干燥,即得茯苓多糖粗品。
3、吸收波长的选择精密吸取对照品溶液1. 0ml ,和供试品溶液1. 0ml ,分别置于20ml 的试管中,各精密加入5 %的苯酚液1. 0ml ,然后缓慢精密加入 5. 0ml 浓硫酸,摇匀,放置30min后,在分光光度仪上测定波长从400～524nm之间的吸收度,两者均在490nm处有最大吸收,故选择490nm波长测定。
4、重现性实验分别吸取对照品溶液0. 5ml 5 份置试管中,同前操作,吸光度为:0. 614 ,0. 612 ,0. 614 ,0. 613 和0. 615 ,结果RSD = 0. 199 %( n = 5) 。
5 、样品含量测得吸取供试品溶液 1. 0ml 3 份,分别置于20ml 试管中,加入5 %苯酚溶液2. 0ml ,混合后加入浓硫酸6. 0ml ,放置30min ,在490nm处分别测得其吸收度 A 值:A1 =0. 871 ,A2 = 0. 872 ,A3 = 0. 876 ,根据回归方程求出百分含量为74. 16 % , 74.27 %和74. 62 % , 平均含量74. 35 %。
茯苓多糖的提取实验报告
一、实验目的1. 掌握茯苓多糖的提取方法；2. 熟悉茯苓多糖的理化性质；3. 了解茯苓多糖的提取工艺及其影响因素。
二、实验原理茯苓多糖是一种天然高分子化合物，具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗病毒、调节免疫等。
本实验采用水提法提取茯苓多糖，通过调节提取温度、时间、pH值等条件，提高茯苓多糖的提取率。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：茯苓菌核、蒸馏水、95%乙醇、无水硫酸钠、盐酸、氢氧化钠等；2. 实验仪器：电子天平、电热恒温水浴锅、旋转蒸发仪、真空干燥箱、磁力搅拌器、离心机、pH计、分光光度计等。
四、实验步骤1. 茯苓菌核预处理：将茯苓菌核粉碎，过100目筛，备用；2. 水提法提取茯苓多糖：（1）称取一定量的茯苓菌核粉末，加入适量蒸馏水，搅拌均匀；（2）调节pH值至6.0；（3）在恒温水浴锅中加热提取，温度为80℃，时间为2小时；（4）提取液过滤，取滤液；（5）将滤液加入95%乙醇，静置过夜；（6）沉淀物用蒸馏水洗涤，再用无水硫酸钠干燥；（7）干燥后的沉淀物称重，计算茯苓多糖提取率；3. 茯苓多糖纯化：（1）将干燥后的沉淀物溶解于蒸馏水中；（2）通过离心分离，去除杂质；（3）使用透析袋去除小分子物质；（4）将透析后的溶液冷冻干燥，得到纯化的茯苓多糖；4. 茯苓多糖理化性质测定：（1）测定茯苓多糖的分子量；（2）测定茯苓多糖的紫外吸收光谱；（3）测定茯苓多糖的溶解度；（4）测定茯苓多糖的抗氧化活性。
五、实验结果与分析1. 茯苓多糖提取率：根据实验结果，在提取温度80℃，时间2小时，pH值6.0的条件下，茯苓多糖的提取率为1.23%；2. 茯苓多糖纯化：经过纯化处理后，茯苓多糖的纯度达到90%以上；3. 茯苓多糖理化性质：（1）分子量：茯苓多糖的分子量为5.2×10^5；（2）紫外吸收光谱：茯苓多糖在200-400nm范围内具有较强紫外吸收；（3）溶解度：茯苓多糖在水中的溶解度为1.5mg/mL；（4）抗氧化活性：茯苓多糖的抗氧化活性较强，IC50值为25.8μmol/L。
茯苓多糖抗糖尿病作用的实验研究_郑彩云
12基础研究中国医疗前沿 2010年7月 第5卷 第14期National Medical Frontiers of China, Jul 2010, Vol.5 No.14茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf 为常用中药，为多孔菌科卧孔菌属真菌茯苓的干燥菌核，多依附松树根生长。
傍松根而生的为茯苓(别名：玉灵、茯灵、万灵桂、茯菟)，始载于《本草经》，列为上品，它的菌核为球形、长圆形、卵圆形或不规则团块，茯苓主要分布在我国云南、贵州、湖北、安徽、福建、广东、广西等地[1]。
我国食用茯苓的历史已有两千多年。
《神农本草经》称其“久服安魂养神，不饥延年”。
茯苓性甘、淡、平，入心、脾、肾经。
药理实验表明茯苓具有渗湿利尿、合胃健脾、宁心安神、抑菌、增强机体抗病能力的功效[2,3]。
茯苓多糖(pachyman)是近年来研究较多的一种真菌多糖，约占整个茯苓菌核干重的70%～90%[4]，具有抗肿瘤、提高免疫力的功能，可以提高人体抗病能力，起到防病、延缓衰老的作用，还可以促进细胞分裂，抗诱变、抗肿瘤，对肝炎、鼻咽癌和胃癌患者有一定的疗效[5]。
但茯苓多糖防治糖尿病的相关研究尚未见报道。
因此，本实验对茯苓多糖的降血糖作用进行了研究，为将茯苓多糖开发成糖尿病易感人群或患者的日常保健食品的可行性，提供初步的理论依据。
1 材料与仪器1.1 药品制备 茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf 于2007年9月购于河南省医药公司。
按药典(1990年版)方法，粉碎后于60℃～80℃热水4h，收集提取液，减压浓缩至适当体积，按Sevag 法去除蛋白，再用乙醇沉淀为粗品多糖。
粗品多糖经SephadexG-100柱层析分离。
蒸馏水洗脱，收集峰部位的多糖液，流水透析，适当浓缩，乙醇沉淀，干燥后得纯化的多糖精品(简称RP)，总糖含量92.6%。
采用聚丙酰胺电泳法，结果为RP 为单一区带；凝胶过滤法，结果为RP 为单一洗脱峰。
茯苓多糖提取分离的方法
3.1水提醇沉法 称取一定量茯苓粉末→热水浸提→ 抽滤→滤液减压浓缩(浸提液∶浓缩 液=10∶1) →95%乙醇沉淀（含醇 量达80%）→于冰箱中静置过夜→ 离心→沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙 醚洗涤→真空干燥得茯苓多糖粗品。 该法采用水作为溶剂，具有价廉、无 毒、操作安全等优点，其缺点是浸提 时间长且提取率较低。
1 概述 2 茯苓多糖结构及理化性质
3 茯苓多糖的提取
4 茯苓多糖纯化方法
1 概述
多糖是来自高等植物、动物细胞膜、微生物细胞中癿天 然大分子物质，一般常由100个以上甚至几千个单糖通过糖 苷键连接而成，分子量在数万至数百万之间…。多糖类包括 植物多糖、动物多糖及微生物多糖，在某种程度上均具有免 疫促迚作用，而植物多糖尤为重要。多糖作为生物效应调节 剂，主要影响网状内皮系统、巨噬细胞、淋巴细胞、白细胞， 以及RNA、DNA和蛋白质癿合成，CAMP不cGMP癿含量、 抗体或补体癿形成以及干扰素癿诱生旧1。多糖具有多方面 癿生物活性，能够调节机体免疫机能，具有抗病毒、抗菌、 抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老等功能，因而越来越受 重视，尤其是对其抗肿瘤作用癿研究已达到分子受体水平。 多糖癿抗肿瘤途径主要为直接抑制肿瘤细胞的生长、抗氧化、 清除自由基，改变肿瘤细胞膜的生长特性、诱导肿瘤细胞凋 亡及影响癌基因的表达等一-
常用癿去除多糖中蛋白质癿方法有：Sevag法、三氟三氯乙 烷法、三氯醋酸法，这些方法癿原理是使多糖丌沉淀而使蛋 白质沉淀，其中Sevag方法脱蛋白效果较好，它是用氯仿： 戊醇或丁醇，以4：1比例混合，加到样品中振摇，使样品中 癿蛋白质变性成丌溶状态，用离心法除去。 Sevage 法：利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性癿特 点，将提取液不 Sevage试剂[氯仿：正丁醇=5：1 （V/V）]5：1 混合，振荡，离心，变性后癿蛋白质介于提 取液不 Sevage 试剂交界处。此法癿优点是条件温和，丌 会引起多糖癿变性。
茯苓多糖的酶解工艺及抑菌性研究
经验交流中国酿造2018年第37卷第5期总第315期•177*茯苓多糖的酶解工艺及抑菌性研究李世杰，李勇，曾海英*(贵州大学酿酒与食品工程学院，贵州贵阳550025)摘要:采用屮葡聚糖酶酶解茯苓多糖获得水溶性茯苓多糖，优化水溶性茯苓多糖的最佳酶解提取工艺，测定酶解产物抑菌效果。
通 过苯酚-硫酸法测定其含量，以水溶性茯苓多糖含量为评价指标，采用L9(34)正交试验设计，优化酶解工艺条件为酶解反应温度55 T；，pH值5.5,时间150m in，酶用量9 000U。
在此条件下获得水溶性多糖含量达到9.20%。
牛津杯法测定其抑菌活性，结果表明，酶解产物 对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌产生较好的抑菌作用，抑菌圈直径分别为14.67 m m、8.89 m m，对枯草芽孢杆菌未见产生明显抑菌圈，为茯苓水溶性多糖深度开发提供前期研究数据。
关键词:茯苓;多糖;酶解;抑菌性中图分类号：S567.3+2 文章编号：0254-5071 (2018)05-0177-04 doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2018.05.034Hydrolysis technology and bacteriostatic activity o f p olysaccharide from Poria cocosLI Shijie, LI Y ong, ZEN G Haiying*(C ollege o f L iq u o r an d F ood E ngineering，G uizhou U niversity，G uiyang 550025, C hina)A bstract: The soluble polysaccharide i^om Poria cocos was extracted with P-glucan enzymolysis. The optimal enzymatic hydrolysis extraction process o f water-soluble polysaccharides was optimized and the antibacterial effect of the enzymolysis products was determined. Using water soluble polysaccharide yield as evaluation index, the optimal process conditions were determined by Lp(34) orthogonal experiments as follows: enzymolysis temperature 55^, pH 5.5, time 150 m in and enzyme addition 9 000 U. At the conditions, the water-soluble polysaccharide content reached 9.20%. The antimicrobial activity o f soluble polysaccharide was study with oxford cup method. It was found that soluble polysaccharide could inhibit Staphylococcus aureus and Escherichia coli,and the antibacterial circle diameters were 14.67 mm and 8.89 mm, respectively. It showed no obvious inhibitory effect on Bacillus subtilis, the results provided preliminary research data for the in-depth development o f water-soluble polysaccharides of P. cocos.Key w ords：Poria cocos; polysaccharide; enzymatic hydrolysis; bacteriostatic activity茯苓(Poria cocos)又名茯菟、万灵桂、茯灵等[1]，是一 种寄生于松科植物马尾松或赤松等树根上，担子菌纲(Ba-sidiomycetes)非褶菌(Aphyllophorales)多孑L菌科(Polypo-raceae)的真菌干燥菌核[2]，在我国分布广泛，主要分布在云南、广西、广东、福建、安徽、湖北、贵州等地，以云南产的 最好[34]。
茯苓多糖的提取
茯苓多糖的提取技术作者：周琳班级：食品0931班【摘要】茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用，可用于医疗、保健等领域，具有广阔的开发应用前景。
为进一步优化茯苓多糖的提取工艺，促进其开发应用，文章参考大量国内外文献，对近几年茯苓多糖的提取及其应用作一综述。
【关键词】茯苓多糖，提取，超声波法1.引言自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖(zymosan)具有免疫增强以及抗肿瘤作用以来，人们对多糖的研究产生了极大的兴趣，尤其是其生物活性方面的研究。
茯苓多糖到底是什么呢？它有什么作用呢？茯苓多糖是近年来研究较多的一种真菌多糖，来源于多孔菌科真菌茯苓的菌核，约占整个茯苓菌核干重的70%～90%［1］，其化学组成为（1→3）-β-D- 葡聚糖［2］。
茯Poria cocos (Schw.) Wolf又称茯菟、茯灵、松薯等, 为多孔菌科(Polyporaceae) 真菌茯苓的干燥菌核，在我国资源丰富，全国各地均自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖具有免疫增强以及抗肿瘤作用以有栽培，主产于云南、安徽、湖南等省。
茯苓是一味使用历史悠久的中药，在《神农本草经》中被列为上品，谓其“主胸胁逆气，利小便，久服安魂宁神，不饥延年。
”《本草纲目》也记载：茯苓“治头风虚眩，暖腰膝，主五劳七伤。
”历代医家均肯定茯苓既有滋补强身作用，又有渗湿利水、益脾和胃、宁心安神之功。
茯苓药性缓和，补而不峻，利而不猛，既能扶正，又可祛邪，能治疗脾胃虚弱、遗精早泄、心悸失眠、健忘多梦、小便不利、呕吐腹泻等症。
其主要有效成分茯苓多糖是一种非特异性免疫促进剂，其不仅能够提高机体的抗病能力，还有较强的抗癌作用。
其性味甘、淡、平，归脾胃肺肾经，有利水渗湿、益脾宁心之功效。
主治气虚劳伤、水肿、痰饮、呕吐、腹泻、热淋、遗精、惊悸、健忘等证。
茯苓多糖是茯苓的有效部位之一，为灰白色粉末，味微咸，无臭，略有吸湿性。
茯苓多糖的含量测定分析
乙型链球菌
(1) - + + + + + (2) - - + + + + -
白喉杆菌
(1) - - - - - + (2) - - - - + + -
福氏痢疾杆菌
(1) (2) -
+
+ +
+ +
+ ++ +-
3 讨论 血竭在云南省几家药厂生产 。广西也有一二家
药厂生产 , 他们的原料取自云南或云南境外 。国产 血竭供应全国 , 在云南临床应用 20 多年 , 疗效确 切 。已证实该中药具有止血 、活血 、化瘀 、收敛 、 止痛 、生肌等功能 。通过动物等试验证实具有抗炎 作用 ; 对血小板聚集 , 血栓形成具有抑制作用 ; 有 止血和抑菌作用 。此外血竭毒性极小 , 按卫生部规 定 , 测定最大耐受量〔6〕, 小鼠 1d 内以最大溶量 ig3 次 , 日剂量 24g/ kg 体重 , 无任何毒性反应 。长期 毒性 3 个月没有任何毒性反应 。
1999 年第 20 卷第 1 期 云 南 中 医 中 药 杂 志
·33 ·
(100mg/ ml) 受试液 , 混匀后取出 2ml , 放入第 2 管
中 , 依次类推 , 直到第 5 管 , 取出 210ml 弃去 , 使
成 1∶2 , 1∶4 , 1∶8 , 1∶16 等各种浓度 , 第 6 管不加
致谢 : 熊郁良 、王琬瑜 、高菊珍 、薛音欢参与小部 分工作 。
参考文献 1 徐叔云 、卞如濂 、陈修主编 1 药理实验方法学 1 北京 :
人民卫生出版社 , 第 2 版 , 19911723～724 2 李仪奎 、王钦茂 1 中药药理实验方法学 1 上海 : 上海
茯苓多糖的提取方法优选
茯苓多糖的提取方法优选茯苓是一种重要的中药材，其所含的多糖具有很高的药用价值。
茯苓多糖具有调节免疫功能、抗肿瘤、保护心血管系统等多种作用。
因此，如何高效、纯净地提取茯苓多糖成为了研究人员关注的重点。
本文将介绍几种茯苓多糖的提取方法，并对它们进行综合评价，从而得出最优化的提取方案。
1. 酸水提法酸水提法是较为传统的提取方法。
其基本步骤是将茯苓粉末放入酸性水中煮沸，再用乙醇沉淀及洗涤。
该方法操作简单，成本较低，但提取效率和糖含量不够理想。
2. 红外辐射提取法红外辐射提取法是近年来发展起来的一种快速、高效的提取方法。
该方法是通过在茯苓多糖晶体内部的红外线作用下进行振荡，并趁机将茯苓多糖提取出来。
该方法提取速度快，不需要反应条件，也不需要施加压力。
但目前针对茯苓多糖的红外辐射提取效果并不理想，有待进一步研究。
3. 超声波提取法超声波提取法是一种非常常见的物理提取方法，应用于茯苓多糖的提取也十分有效。
该方法是通过超声波机将高频声波发送至茯苓样品，产生的声波震动会使茯苓多糖分子振动并脱离固体基质，从而获得茯苓多糖。
该方法具有操作简便、提取效率高、环境友好等优点，但高能量超声波可能会使多糖分子断裂，降低提取效率。
4. 预处理与微波提取法利用微波辅助提取天然产物，可以提取出相对高含量的有效成分。
预处理与微波提取法是一种改进的物理化学提取方法。
在该方法中，茯苓多糖的样品首先进行钝化处理，然后与溶剂混合，利用微波辅助提取并沉淀茯苓多糖，最后采用离子交换树脂富集。
该方法获得了较为显著的提取效果，但实验操作较为繁琐，并且设备成本较高。
5. 纳滤膜提取法纳滤膜技术是一种新兴的现代分离技术。
在该方法中，利用纳滤膜的差异分离特性，可以筛选出茯苓多糖含量相对较高的成分。
该方法不需要加热或加压，提取物中的纯度较高，但需要较长的提取时间。
6. 综合评价与优选通过上述几种提取方法的介绍，我们可以看到每种方法都有其优点和局限性。
为了得到优化的提取方法，我们需要根据需要进行综合评价。
茯苓多糖的提取、结构及药理作用研究进展
茯苓多糖的提取、结构及药理作用研究进展一、本文概述茯苓，作为一种具有悠久药用历史的中药材，其在中医药领域的应用广泛而深入。
茯苓多糖作为茯苓的主要活性成分之一，近年来受到了越来越多的关注。
本文旨在全面综述茯苓多糖的提取方法、化学结构以及药理作用的研究进展，以期为茯苓多糖的进一步开发利用提供理论支持和实验依据。
本文将概述茯苓多糖的提取方法，包括传统的水提法、醇提法以及现代的微波辅助提取、酶解法等，并分析各种方法的优缺点。
本文将详细介绍茯苓多糖的化学结构特征，包括其分子量、单糖组成、糖苷键类型等，以及近年来在结构解析方面取得的新进展。
本文将重点综述茯苓多糖的药理作用，如免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖等，并探讨其可能的作用机制。
通过本文的综述，期望能够为茯苓多糖的深入研究和应用提供有益的参考和启示。
二、茯苓多糖的提取方法茯苓多糖的提取方法对于其后续的结构研究和药理作用分析具有重要影响。
近年来，随着科学技术的发展，茯苓多糖的提取方法也在不断地优化和创新。
传统的提取方法主要包括水提法、醇提法等。
水提法是以水为溶剂，通过加热煮沸使茯苓中的多糖成分溶解于水中，然后通过浓缩、干燥等步骤得到多糖提取物。
这种方法操作简单，成本低廉，但提取效率较低，且易受到其他水溶性杂质的干扰。
醇提法则是利用醇类溶剂对多糖的溶解性进行提取，常用的溶剂有乙醇、甲醇等。
醇提法相对于水提法，提取效率较高，但成本也相应增加，且需要注意溶剂残留的问题。
随着现代提取技术的发展，出现了许多新型的提取方法，如超声波提取法、微波提取法、超临界流体提取法等。
超声波提取法利用超声波的空化作用、机械振动和热效应等，使茯苓细胞壁破裂，多糖成分更易溶出。
这种方法提取时间短，效率高，但设备成本较高。
微波提取法则是利用微波对物质分子的热效应和非热效应，使茯苓中的多糖成分快速溶出。
微波提取法具有提取速度快、提取效率高、节能环保等优点，但需要注意微波功率和时间的控制。
茯苓的研究进展
参考内容
基本内容
基本内容
茯苓酸作为一种具有显著生物活性的化合物，在近年来的研究中受到了广泛 的。本次演示将概述茯苓酸的研究进展，包括其提取方法、结构、生理功能及其 应用领域等方面，旨在为相关研究提供参考和启示。
一、茯苓及茯苓酸的基本特征茯 苓是一种传统的中药材，具有利 水渗湿、健脾宁心等功能
二、茯苓酸的提取方法及其影响 茯苓酸的提取方法主要有溶剂萃 取法、水提法、超声波辅助提
三、茯苓酸的结构和性质茯苓酸 具有明显的抗炎、抗氧化、抗肿 瘤等作用
四、茯苓酸的应用研究随着对茯 苓酸研究的深入，其应用领域也 在不断拓展
五、结论与展望通过对茯苓酸的 研究进展进行综述
五、结论与展望通过对茯苓酸的研究进展进行综述
结论
深入探讨茯苓多糖的作用机制、优化提取和检测方法、研究其在临床上的应 用效果等。随着科学技术的发展和研究的深入，相信茯苓多糖在未来的医疗和保 健领域中将有更为广泛的应用前景。
谢谢观看
茯苓的研究进展
基本内容
基本内容
茯苓是一种具有多种药用价值的真菌，自古以来就广泛应用于中医临床。近 年来，随着科学技术的不断发展，茯苓的研究也在深入进行。本次演示将介绍茯 苓的研究现状、研究方向以及未来可能的研究前景。
基本内容
茯苓是一种多孔菌科真菌，具有利水渗湿、健脾止泻、宁心安神等多种药用 价值。其生长环境广泛，可在松树、冷杉、云杉等针叶树林中生长，也可在阔叶 树林中生长。在我国大部分地区都有分布，是一种非常常见的中药材。
基本内容
3、茯苓酸的研究：茯苓酸是茯苓中的一种重要有机酸，具有抗肿瘤、抗炎、 抗菌等作用。对茯苓酸进行深入研究，有助于阐明其药理作用和作用机制。
基本内容
4、茯苓在医药和保健方面的应用研究：茯苓在中医临床上有广泛应用，如用 于治疗慢性腹泻、胃溃疡、糖尿病等。同时，茯苓也被用于制作保健品和食品添 加剂，如茯苓饼、茯苓粉等。对这些应用进行深入研究，有助于提高茯苓的疗效 和开发新的用途。
树舌_茯苓多糖的提取分离及组成
Ξ 收稿日期 :2003 - 10 - 11 基金项目 :教育部西部地区高等学校高级访问学者计划项目 作者简介 :连宾 (1964 - ) ,男 ,安徽凤阳县人 ,贵州工业大学教授 ,博士 ,主要从事土壤和食品微生物方面的研究 。
© 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
分。
1. 2. 3 单糖组分分析
按文献[ 11 ]方法进行 :称取少许的多糖 (0. 1 克)
于 2. 0 mL 离心管中 ,加入 1 M 的硫酸 1 mL ,沸水浴水
解 2 h ,然后加氢氧化钡中和至中性 ,过滤除去硫酸钡
沉淀 ,得多糖水解澄清液 ,以此进行点样 ;薄层层析法
一般只展开 1 次 ,为达到较好分离效果 ,实验选用二次
(1. 贵州工业大学 化学与生物工程学院 , 贵阳 550003 ;2. 重庆大学 西南资源开发及环境灾害控制工程教育部 重点实验室 ,重庆 400030 ; 3. 贵州大学 生化营养研究所 ,贵州贵阳 550025)
摘 要 :对树舌 ( Ganoderma apparatus) 、茯苓 (poria cocos) 多糖的提取 、纯化和单糖的组成成分进行了
95 %的乙醇 ,使过柱液中乙醇终浓度分别达 55 %、70
%、85 % ,多糖沉淀 ,离心 、沉淀烘干即为分级后的多
糖 ,树舌和茯苓多糖组分分级情况见表 2 。
表 2 树舌 、茯苓多糖分级情况
%
乙醇 样品 过柱液多 洗柱液多
各级
浓度
糖含量 糖含量 总含量
总含量
树舌 0. 098 26 55 % 茯苓 0. 076 02
茯苓提取物安全性研究论文
茯苓提取物的安全性研究【摘要】目的采用大鼠一个月灌胃给药方法，对茯苓提取物进行安全性评价。
方法60只sd大鼠，雌雄各半，大鼠随机分成空白对照组、茯苓低剂量组（3.33g生药/kg）、茯苓高剂量组（6.67 g生药/kg）。
大鼠自由摄食，连续灌胃30天后观察，在第30天测定脏器系数、血常规、血生化等指标以及病理学组织的检查。
结果茯苓提取物各剂量组喂养大鼠30天后，大鼠的体重、脏器系数、血常规、血生化指标及病理组织学与对照组比较均无显著差异（p>0.05）。
结论该茯苓提取物在实验设定剂量下对大鼠无潜在的毒副作用。
【关键词】茯苓提取物；血常规；生化；病理组织学茯苓作为传统的中药材，具有健脾补中，宁心安神，利水渗湿等功效，为药食同源的药材。
现代药理研究证明，茯苓具有镇静[1]、抑菌[2]、利尿作用[3]，能增强心肌收缩力，抑制毛细血管通透性降低、胃液分泌及游离酸含量[4]；能增强免疫力，抑制肿瘤生长，清除自由基[1，5-7]；此外还具有保肝、抗感染[8]、抗衰老[9]、抗排斥反应[10]、抗病原体等作用。
但有文献报道茯苓有肝毒性的不良反应，本实验拟通过动物大剂量灌胃，对茯苓的食用安全性进行评价。
1材料与方法1.1实验药物茯苓提取物，天津天士力药物研究院食品所提供。
1.2实验动物sd大鼠清洁级北京维通利华实验动物技术有限公司，体重60±5g；许可证号：scxk（京）2007-0001。
1.3实验方法选购sd 大鼠60只，雌雄各半，体重60±5g。
观察5d后，按体重随机分成3组：正常对照组，茯苓低剂量组，茯苓高剂量组，每组各20只，雌雄各半，根据出粉率折算相当于每日服用茯苓3.33g生药/kg（低剂量组），6.67g生药/kg（高剂量组）。
试验期间动物单笼喂养，自由进食饮水，每天观察动物一般表现，每周记录1次体重。
喂养30d后，禁食16h，采血检测血常规和生化指标，处死大鼠，取心、肝、肾、脾脏称重并计算脏器系数，对肝、肾作病理学检查。
茯苓对皮肤疾病的治疗作用研究
茯苓对皮肤疾病的治疗作用研究茯苓是一种常见的中药材，被广泛应用于中医领域。
不仅具有滋补养生的功效，茯苓还被研究发现具有一定的治疗皮肤疾病的作用。
本文将对茯苓对皮肤疾病的治疗作用进行研究，探讨其可能的机制和应用前景。
茯苓是一种真菌，主要生长在湿润的林地和河滨地区。
它富含多种活性成分，如多糖、三萜类化合物和赖氨酸等。
这些成分赋予了茯苓抗炎、抗氧化、解毒和免疫调节的作用，从而可能对皮肤疾病发挥治疗作用。
在皮肤炎症方面，茯苓具有显著的抗炎作用。
研究表明，茯苓能够抑制炎症介质的释放，如肿瘤坏死因子-α、白介素-6和白介素-8等。
这些炎症介质在许多皮肤疾病的发生和发展中起着重要的作用。
茯苓通过抑制炎症介质的释放，减轻皮肤的炎症反应，从而改善皮肤疾病的症状。
茯苓还具有抗过敏作用。
过敏反应是许多皮肤疾病的共同特点，如湿疹、荨麻疹等。
研究发现，茯苓能够抑制组胺的释放和过敏原的引起，从而减轻过敏反应导致的皮肤症状。
此外，茯苓还可以增强皮肤屏障功能，减少敏感源的侵入，进一步降低过敏反应的发生。
茯苓还被研究发现对一些常见皮肤感染有一定的抑菌作用。
皮肤感染常见于湿疹、皮炎等皮肤疾病中。
茯苓中的活性物质能够破坏细菌的细胞膜，抑制其生长和繁殖，从而达到治疗感染的效果。
此外，茯苓还能够调节皮肤微生态平衡，抑制有害细菌的过度生长，促进有益菌的繁殖，维护皮肤的健康。
茯苓也常被用于治疗痤疮等皮肤疾病。
痤疮是一种常见的青少年皮肤病，茯苓的应用可以通过抑制皮脂过度分泌和抗炎作用来减少痤疮的发生。
茯苓中的活性物质还能够调节雄激素水平，改善雄激素引起的痤疮症状，进而对痤疮的治疗起到一定的作用。
虽然茯苓对皮肤疾病的治疗作用已经得到了一定的研究支持，但仍然有一些问题需要进一步解决。
首先，茯苓具体的治疗机制还需要深入探讨，了解其对皮肤疾病发生发展的影响。
其次，茯苓的应用方法和剂量还需要进一步明确，以确定最佳的治疗方案。
另外，茯苓与其他药物的相互作用以及长期使用的安全性也需要进一步研究。
硫酸化茯苓多糖的研究进展
硫酸化茯苓多糖的研究进展摘要:硫酸化多糖是多糖的衍生物,由多糖链单糖分子上的某些羟基被硫酸根取代而形成。
茯苓多糖是一类天然硫酸化多糖,具有抗肿瘤、抗病毒、抗凝血、抗氧化等多种生物活性。
关键词:茯苓多糖分离纯化组分硫酸化多糖生理活性研究进展茯苓(Poria cocos)是我国传统的名贵中药材,主产云南(云苓)、安徽(安苓)、贵州、广西、湖北、福建(闽苓)等地,为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核,属担子菌纲真菌,具有渗湿、健脾、利尿等功能。
茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分,可用于医疗、保健等领域,具有广阔的开发应用前景。
为进一步优化茯苓多糖的提取工艺,促进其开发应用,文章参考大量国内外文献,对近几年茯苓多糖的提取、纯化及其应用作一综述。
1 茯苓多糖的化学组分众多文献报导β-D-(1-3,1-6)葡聚糖有显著的调理或增强人体免疫功能,但由于高分子量和复杂的高级分子结构,一些多糖的水溶性很差,只有对这些多糖进行结构修饰和改造才可以更好地利用它们。
Chihara等[1]通过Smith降解除去β-1,6分支,将β-茯苓聚糖转化成β-茯苓多糖(Pachymaran),对实体瘤S180的抑瘤率从0提高到88％。
Hamuro等[2]采用液固相振荡半合成工艺,制取了羧甲基茯苓多糖(Carboxymethylpachymaran,CMP),水溶性得到很大改善,动物试验的结果表明,CMP抗肿瘤作用较强。
将天然多糖进行硫酸酯化修饰也是多糖结构改造的一个研究热点,多糖硫酸化后可以增强原有的生物活性或产生新的功能。
2 茯苓多糖的提取及纯化茯苓多糖主要存在于茯苓细胞壁中,按照溶解度的不同又分为水溶性茯苓多糖和碱溶性茯苓多糖。
通常采用水提醇沉法、碱提醇沉法提取。
2.1 水提醇沉法称取20g茯苓粉末→10～20倍热水(95℃)浸提→抽滤→滤液减压浓缩(浸提液∶浓缩液=10∶1)→4倍体积的95%乙醇沉淀(含醇量达80%)→于冰箱中静置过夜→离心→沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤→真空干燥得茯苓多糖粗品。
茯苓多糖提取课程设计.
第一章绪论1.1 茯苓简介1.1.1 茯苓概述茯苓，俗称云苓、松苓、茯灵，为寄生在松树根上的菌类植物，形状像甘薯，外皮黑褐色，里面白色或粉红色。
其原生物为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核，多寄生于马尾松或赤松的根部。
产于云南、安徽、湖北、河南、四川等地。
古人称茯苓为“四时神药”，因为它功效非常广泛，不分四季，将它与各种药物配伍，不管寒、温、风、湿诸疾，都能发挥其独特功效。
茯苓味甘、淡、性平，入药具有利水渗湿、益脾和胃、宁心安神之功用，是常用的传统中药。
茯苓多糖具有抑制肿瘤生长、调节机体免疫等功能。
现代医学研究表明：茯苓能增强机体免疫功能，茯苓多糖有明显的抗肿瘤及保肝脏作用。
1.1.2 药理作用利尿作用将茯苓生药用70%酒精冷浸，使用时将浸得液的酒精蒸发，加蒸馏水稀释，至一定浓度，然后选择健康兔按体重注射给药，慢性实验结果表明，用药后尿量有明显增加。
给犬静脉注射茯苓煎剂(0.048g/kg)，结果尿量并未增加，对大白鼠亦无效或功效很弱；以尿排量和氯排泄量为观察指标，用茯苓煎剂给大白鼠(禁食12小时)灌胃，结果在此实验条件下，茯苓也不能表现其利尿排氯作用。
茯苓抗菌作用茯苓的100%煎剂用平板打洞法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌等均有抑制作用。
茯苓对用试管法的抑菌试验结果是无抑菌作用。
茯苓的乙醇提取物在体外能杀死钩端螺旋体，但水煎液无效。
对消化系统的影响茯苓对家兔离体肠管有直接松弛作用，对大鼠幽门结扎所形成的溃疡有预防效果，并能降胃酸。
另对四氯化碳所致大鼠肝损伤有明显的保护作用，使谷丙转氨酶活性明显降低，防止肝细胞坏死。
抗肿瘤作用茯苓中的主要成分为茯苓聚糖，含量很高。
茯苓聚糖本身无抗肿瘤活性，若切断其所含的β-(1→6)吡喃葡萄糖支链，成为单纯的β-(1→3)葡萄糖聚糖，则对小鼠肉瘤S180的抑制率可达96.88%。
此外茯苓多糖体对免疫功能也有一定的影响，如：增加巨噬细胞的细胞毒性作用、增加酸性非特异酯酶阳性淋巴细胞数等。
茯苓多糖的体外抑菌试验
茯苓多糖的体外抑菌试验
安玉山;赫英顺;姜鹤;郭丹;赵立香
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2016(028)004
【摘要】本文对不同浓度的茯苓多糖进行了常见菌的体外抑菌试验,结果表明茯苓多糖对革兰氏阴性菌作用好于阳性菌.
【总页数】1页(P55)
【作者】安玉山;赫英顺;姜鹤;郭丹;赵立香
【作者单位】吉林农业科技学院制药工程学院吉林132101;吉林农业科技学院制药工程学院吉林132101;吉林农业科技学院制药工程学院吉林132101;吉林农业科技学院制药工程学院吉林132101;吉林农业科技学院制药工程学院吉林132101
【正文语种】中文
【中图分类】R965
【相关文献】
1.茯苓多糖与羧甲基茯苓多糖的结构表征 [J], 蒋先明;石清东
2.茯苓多糖改善HDL功能并通过PPARγ/LXRα/ABCA1抗AS机制研究 [J], 于宁;宋囡;王莹;杨关林;贾连群
3.茯苓多糖及其免疫调节功能研究进展 [J], 蒋逸凡;金梦圆;周选围
4.茯苓多糖对睡眠剥夺大鼠机体贫血与炎性反应的修复作用 [J], 许瑞婕;莫有桦;周航友;曾姝;朱乐玫;刘娟
5.茯苓多糖的提取、结构、活性和作用机理研究进展 [J], 刘星汶;徐晓飞;刘玮;赵云鹏;张尚微;沈艺楠;杨继国
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茯苓多糖的提取及其抑菌研究胡朝暾, 肖 毅, 周鹏飞, 付 明, 胡 兴(怀化学院11生命科学系; 21民族药用植物研究与利用湖南省重点实验室,湖南怀化 418008)摘 要:对茯苓多糖的提取方法和抑菌试验进行了初步的探索1设计了两种不同提取茯苓多糖的方法,分别为:稀碱浸提法和水提醇沉法1通过比较上述两种不同方法的多糖提取率,发现稀碱浸提法的提取率较高,是一种较好的茯苓多糖的提取方法1另外采用纸片扩散法(K-B 法)对两种方法所提茯苓多糖进行抑菌试验,实验结果表明:茯苓多糖对革兰氏阳性菌和阴性菌都有一定的抑制效果,特别对大肠杆菌和苏云金芽孢杆菌效果明显1关键词:茯苓; 茯苓多糖; 多糖提取; 抑菌试验中图分类号:Q949195 文献标识码:A 文章编号:1671-9743(2012)08-0015-04收稿日期:2012-07-28基金项目:湖南教育厅一般项目(09C756);怀化学院青年基金项目(HHUQ2009-12);民族药用植物研究与利用湖南省重点实验室委托项目(HHUW2011-53)1作者简介:胡朝暾(1977-),男,湖南安化人,怀化学院讲师,博士生,主要研究蜘蛛生理学、生态学和蜘蛛毒素1茯苓(poria cocos (Schw 1)Wolf)为多孔菌科卧孔菌属真菌茯苓的干燥菌核,多依附松树根生长1茯苓主要分布在我国的云南、贵州、湖北和湖南等地[1]1是我国传统的中药材和历史悠久的食品,也是湖南靖州重要的生物资源1在中国传统医学中,茯苓的药用已有二千多年的历史了15神农本草经6中,把茯苓列为上品,有/久服安魂养神,不饥延年0的作用1此外,茯苓也是我国一种历史悠久的食品1早在唐朝集市食摊上就有用茯苓、糯米、白术磨粉制成的茯苓糕,后来先后又出现了茯苓包子、茯苓粥1因此,茯苓也是国家卫生部、国家中药管理局颁布的/既是食品又是药品的品种名单0的一种1药理实验表明茯苓具有渗湿利尿、合胃健脾、宁心安神、抑菌、增强机体抗病能力及降低血糖的功效[2-5]1其中主要功能体现者为茯苓多糖1茯苓多糖(pachy man)是近年来研究较多的一种真菌多糖,约占整个茯苓菌核干重的70%-90%[6]1茯苓多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、增强机体免疫力、保肝、催眠、抗炎等作用[7],可广泛应用于医疗保健、食品等领域1茯苓多糖可用于抗肿瘤药物的研发,从而为肿瘤、癌症的治疗提供新的方法,还可作为免疫增强剂,用于保健品的开发与研制1因此,茯苓多糖的提取及开发意义重大1故对茯苓多糖的提取进行探索,并对其抑菌效果进行初步的检测12 材料与方法211 材料茯苓:购自湖南怀化市靖县茯苓大市场1带回实验室后切成小块后用粉碎机粉成粉末,放入30e 的烘箱中干燥后备用1枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、苏云金芽孢杆菌、大肠杆菌、普通变形杆菌来自怀化学院生命科学系微生物学实验室1212 试剂与溶液的配置21211 基本培养基:牛肉膏3克,蛋白胨10克,NaCl 5克,琼脂5克,水1000ml 、pH 710~712、121e 灭菌20min 121212 5%苯酚试剂的配制:称取苯酚5g,加水100ml 使溶解,至棕色瓶中,得浓度为5%苯酚试液121213 标准葡萄糖溶液的配制:精密称取105e 干燥恒重的葡萄糖50mg,加水溶解并定容至1000ml 容量瓶中121214 茯苓多糖溶液的配制:精密称取茯苓多糖50mg,加水溶解并定容至500ml 容量瓶中,过滤,滤液备用121215 015麦氏比浊管的配制01048mol P L 的Bacl 2015ml 和0118mol P L 的H 2SO 4第31卷第8期怀化学院学报 Vol 1311No 182012年8月JOURN AL OF HUAIHUA U NIVERSITYAug 1,20129915ml充分混匀121216其他的试剂:乙醇,丙酮、乙醚、氢氧化钠、稀醋酸、二甲基亚砜、鞣酸、活性炭等试剂为国产分析纯1213实验仪器德国进口SI GMA3-18K高速冷冻离心机;美国进口的D U-800紫外可见分光光度计;上海大普仪器有限公司P HS-3C高精度酸度计;余姚市东方电工仪器厂202-3A电热恒温干燥机;上海之信仪器有限公司JY99-IID超声波细胞粉碎机;佛山顺德格兰仕微波炉电器有限公司WP800TL微波炉214茯苓多糖的提取方法21411稀碱浸提法准确称取茯苓粉末10g溶于4e0115mol P L NaO H 2000ml液中,搅拌至粉末溶解,此时溶液呈粘稠状态;4e以下冷藏,过夜,抽渣弃去,滤液以10%的醋酸液中和至pH610,再加入等体积95%乙醇,于4e 放置过夜;8000r P min离心取沉淀,流水透析两天1再依次用蒸馏水、无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤后,减压抽干,冷冻干燥,即得茯苓多糖粗品,呈淡黄色细颗状结晶1准确称取茯苓多糖粗品5g,溶于500ml二甲基亚砜中,在室温下用磁力搅拌器搅拌15h后,加入500 ml蒸馏水,继续搅拌20min,放置2h,8000r P min离心得沉淀1沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤,冷冻干燥,即可得茯苓多糖纯品121412水提醇沉法准确称取茯苓2g,切成碎片,加入200ml的水,重复提取3次,每隔2h提取一次1合并3次提取液过滤,除去不溶性杂质,得滤液1取上述所得滤液,减压蒸馏浓缩,在搅拌下加入乙醇,使含醇量达到80%,静置12h,8000r P min离心得沉淀,收集沉淀1溶解煮沸加蒸馏水60ml,趁热滤除不溶物,滤液在搅拌下再加入乙醇,使含醇量达到80%,放置,析出褐色沉淀后,冷冻干燥,即得茯苓多糖粗品1将粗品溶于150ml蒸馏水中,煮沸,在搅拌下加入1%鞣酸溶液,煮沸,8000r P min离心1取上清液加入鞣酸溶液不混浊为止1加入2%的活性炭,搅拌10 min,趁热用布氏漏斗滤过,滤液放冷,加入乙醇使含醇量达到70%,静置24h,滤取析出物1用70%乙醇100ml,反复洗涤沉淀,检查不含鞣酸为止(也就是当上清液中不出现混浊为止)1将湿品溶于一定量的20%热乙醇中,置于布氏漏斗中过滤,减压后,再加入60e热蒸馏水连续洗脱,流出液减压浓缩,加入乙醇使含醇量达到70%,放置,滤取沉淀冷冻干燥,即得茯苓多糖纯品1215多糖含量的测定茯苓多糖的测定主要采用Dubois等提出的苯酚-硫酸比色法[8]1该方法的原理为[9]:糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并迅速脱水生成糠醛衍生物,然后与苯酚缩合成橙黄色化合物,且颜色稳定,在波长490nm处和一定的浓度范围内,其吸光度与多糖含量呈线性关系正比,从而可以利用分光度计测定其吸光度,并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量,本方法可用于多糖、单糖含量的测定1216茯苓多糖抑菌实验抑菌试验采用K)B纸片扩散法进行,具体过程如下:先用普通培养基对枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、苏云金芽孢杆菌、大肠杆菌、普通变形杆菌进行活化1活化好之后,将枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、苏云金芽孢杆菌、大肠杆菌、普通变形杆菌,以浓度约为5@107 cfu P ml的菌量分别接种到普通营养培养基表面1将两种方法所提茯苓多糖配置为1mg P ml的溶液,以无菌操作将在两种茯苓多糖溶液中和无菌水中浸泡1h的直径为014c m的滤纸片分别贴到培养基上,37e培养24h1每个试验做3个平板重复1最后观察抑菌效果13结果与分析311茯苓中多糖的含量31111标准曲线的制作按照标准曲线的制作方法配制溶液,充分混匀,静置20min于490nm处比色,记录A490值,记录在表1中1表1标准葡萄糖溶液的A490值管号123456789 A49000104601109011370119701242012890134201405用标准葡萄糖含量(mg)为横坐标,用吸光度值A490为纵坐标,用标准曲线计算程序软件作图,即得到一条标准曲线,见图11#16#怀化学院学报2012年8月图1葡萄糖标准曲线图31112水提醇沉法的多糖含量取1、2、3三支试管分别加入2ml的已定容100ml 的茯苓多糖提取液,再加入2ml苯酚、6ml浓硫酸充分混匀,静置20min于490nm处比色,记录A490值,记录在表2中1表2水提醇沉法的多糖溶液的A490值管号123A490012820125801261由表2可知水提醇沉法的多糖的A490的平均值为012671则把01267代入上述方程得样品浓度为010434 mg1由公式样品含量w=(C@V总@D)P(W@V测@ 106)@100%1其中:C)))在标准曲线上查出的糖含量(毫克); V总)))提取液总体积(毫升)V测)))测定时取用体积(毫升);D)))稀释倍数;W)))样品重量可知w=(010434@103@200@100)P(2@2@106) @100%=2117%1所以水提醇沉法提的多糖的含量为:2117%1 31113稀碱浸提法的多糖含量称茯苓10g用稀碱浸提法所得茯苓粗多糖为7160 g1称5g茯苓粗多糖精制后得茯苓纯多糖4178g1由上可知稀碱浸提法的多糖含量为:w%=716P10 @4178P5@100%=721656%综上可知,两种方法即稀碱浸提法和水提醇沉法所提多糖的含量以稀碱浸提法的得率较高为721656%1 312茯苓多糖的抑菌实验为了探讨茯苓多糖的抑菌效果,使用枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、苏云金芽孢图2茯苓多糖对大肠杆菌(Escherichia coli)抑菌圈图A:碱性多糖B:水性多糖C:无菌水图3茯苓多糖对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)抑菌圈图A:水性多糖B:碱性多糖C:无菌水#17#第31卷第8期胡朝暾,等:茯苓多糖的提取及其抑菌研究杆菌、大肠杆菌、普通变形杆菌进行试验1将细菌接种于平板培养基上,于37e 培养24h 后从培养箱中取出,观测抑菌效果,并拍照1结果发现茯苓多糖对大肠杆菌和苏云金芽孢杆菌抑制较效果较明显1结果如下:以上结果表明:碱溶性多糖和水溶性多糖对大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌都有一定的抑菌作用,但是碱溶性多糖的抑菌效果比水溶性多糖抑菌效果要好1苏云金芽孢杆菌为革兰氏阳性菌,大肠杆菌为革兰氏阴性菌1因此茯苓多糖对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有一定的抑菌效果14 讨论作者通过查阅文献资料,搜索到在真菌多糖的提取过程中常应用的两种不同的提取方法,通过相关提取实验后进行含量测定1多糖含量的测定是利用当前普遍应用的苯酚-硫酸法,但是标准曲线有轻微的非线性,而且随着时间的延长,非线性越明显,所以多糖测定时间控制在10min-30min 内最好1通过多糖含量测定可知两种提取方法所提取的多糖总量有比较明显的差别1稀碱浸提法所提多糖含量高于水提醇沉法1并且水提醇沉法含有水溶性的杂蛋白等物质1用浓碱浸提,虽然收率比水提醇沉法高,但因其溶液稠度较大,难以过滤,操作周期较长1二甲基亚砜可使蛋白质裂解为小分子的易溶于水的肽类物质,因此可用它来除去杂蛋白1综上所述,采用稀碱提取方法,用二甲基亚砜进行精制法较为合理,操作周期短,工艺简单易行1在做细菌的抑菌试验中发现茯苓多糖无论是对革兰氏阳性还是阴性都有较好的抑菌效果,然而在临床上用的抑菌药抗生素对自身都有很大的副作用,茯苓多糖的抑菌作用的发现可能对临床上抑菌用药方面起到一定的指导作用1并且在对大肠杆菌和苏云金芽孢杆菌抑菌性实验中,发现碱溶性多糖的抑菌效果比水溶性多糖好,原因可能是碱溶性多糖的结构与水溶性多糖的结构不同所导致的1参考文献:[1]中国药科大学.中药辞海[M].北京:中国医药科技出版社,1996:1272-1278.[2]沈映君.中药药理学[M ].上海:上海科学技术出版社,1995:87-89.[3]徐锦堂.中国药用真菌学[M ].北京:北京医科大学P中国协和医科大学联合出版社,1997:547-573.[4]应建浙,卯晓岚,马启明,等.中国药用真菌图鉴[M].北京:科学出版社,1987:202-203.[5]杨冉,李建军,屈凌波,等.茯苓萜类的高效液相色谱指纹图谱研究[J].中草药,2004,35(3):273-275.[6]张敏,高晓红,孙晓萌,等.茯苓的药理作用及研究进展[J].北华大学学报(自然科学版),2008,9(1):63-68.[7]刘林,霍志斐,史树堂,等.茯苓多糖的药理作用概述[J].河北中医,2010,32(9):1427-1428.[8]Dubois M,Gil les KA,Hamilton JK,et al.A colorimetricmethod for the determination of sugars [J].Nature,1951,168(4265):167.[9]Saha SK,Brewer EF.Determination of the concentrations ofoligosaccharides,complex type carbohydrates and glycoproteins using the phenol -sulfuric acid method [J ].Carbohydr.Res.,1994,254B 157-167.The Studies of Pachymaran Extraction and Antibacterial TestHU Zhao-tun, XIAO Yi, Z HOU Peng-fei, FU Ming, HU Xing(11Department o f Li fe Science ; 21Key Laboratory of Research an d Utilization o f Ethnome dicina l Plant Resources of H unan Province ,Huaihua University ,H uaihua,Hunan 418008)Abstract :In this research,Preliminary e xploration of the Pac hymaran extraction method and antibacterial test had been done.It had designed two diffe rent e xtrac tion me thods of Polysaccharides,which were dilute alkali extrac tion,Water e xtraction and alc ohol precipita t ion.By comparing the two different methods of e xtrac tion rate of polysaccharides,it is found that the e xtrac tion rate of the dilute alkali extraction method is the higher,which is a better method of e xtrac ting Pachymaran.In addion the extraction Pachymaran antibacterial experiments we re designed by using the disk diffusion method (KB method).Experimental results sho w that Pachymaran has some effect on Gra m-posit ive and Gra m-ne gative bac teria,especially effec ts of E.coli and Bacillus thuringiensis.Key words :poria cocos ; pachymaran; polysaccharide extraction; antibacte rial test#18#怀化学院学报 2012年8月。