102.梅毒血清学检验
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梅毒的血清学试验
参考范围:
性病研究实验室试验(VDRL)阴性
不加热血清反应素试验(USR)阴性
快速血浆反应素试验(RPR)阴性
荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)阴性
梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)1:25以下为阴性
梅毒螺旋体制动试验试验标本活动螺旋体数为对
照标本的40%为阴性
梅毒螺旋体抗体试验(TP-Ab)阴性
临床评价:
1.梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体,是性传播疾病梅毒的病原体。机体对梅毒螺旋体感染可产生体液和细胞免疫反应,梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的依据之一。血清学试验主要有两个类型,一类是VDR L,USR和RPR.属非螺旋体抗原试验,是用正常牛心类脂质作为抗原,测定血清中的反应素,为筛查试验。另一类是FTA-ABS,TPHA和TPl,属螺旋体抗原试验,是用梅毒螺旋体作为抗原,检测血清中的特异性抗体,为确证试验。
2.非螺旋体抗原试验(VDRL,USR,RPR)敏感性高,其反应素效价与病变活动性有关。第一期梅毒病灶出现后1~2周即可测出反应素,第二期梅毒病人血清中反应素效价最高,阳性率可达99%,经药物治疗后可转阴。先天性梅毒80%~100%阳性。但此类试验特异性不高,常有假阳性反应,在分析结果时应注意结合病史、临床症状及特异性试验作出正确判断。
FTA-ABS的敏感性和特异性均高,在早期梅毒首先出现阳性,病人经药物治疗后反应仍不转阴,故不能用作疗效的评价,常用于梅毒的确定诊断。
TPI是一种经典的特异性较高的梅毒血清学反应,假阳性不到1%,主要用于晚期梅毒及疑难病人的诊断。
TPHA具有敏感、快速、简便等特点,但特异性不及FTA-ABS和TPI。
采取脑脊液标本进行特异性抗体检测,对中枢神经系统的梅毒具有诊断价值。
3.暗视野检查法对梅毒的诊断有重要意义。此法系采取病灶组织渗出液、淋巴穿刺液或组织悬液制成涂片,在暗视野显微镜下直接检查梅毒螺旋体,主要适用于初期梅毒的检查,有一定局限性。暗视野检查法一次阴性结果不能否定梅毒的存在,一般连续检查3天阴性才能予以排除。
4.影响本试验结果的因素
(1)非螺旋体抗原试验中可出现假阳性反应,常见于麻风,结核,传染性单核细胞增多症,红斑狼疮,类风湿性关节炎,雅司,回归热,病毒性疾病,支原体感染,疟疾,一些发热性疾病及免疫接种后,但效价一般不大于1:8。妊娠,老年人和吸毒者亦可有这种假阳性反应。
(2)初期或晚期梅毒病人血清中反应素量不足时,可出现假阴性反应。
(3)非螺旋体抗原试验反应时间过长,易出现假阳性或反应性增强现象。
钩端螺旋体病的血清学试验
参考范围:
显微镜凝集试验(MA T) <1:400
酶联免疫吸附试验(ELISA) 阴性
胶乳凝集试验(LA) 阴性
间接免疫荧光试验(IFA) <1:100
间接血凝试验(PHA) <1:160
临床评价:
1.钩端螺旋体病(简称钩体病)是由不同血清群和血清型的钩端螺旋体所引起的不同临床类型的急性传染病。致病性钩端螺旋体有两种主要抗原成份,一为表面抗原,是多糖蛋白复合物,具有型特异性,可决定菌型;另一为菌体抗原,是类脂多糖复合物,为钩体共有,具有属特异性,可决定菌属,借此应用血清学试验对致病性钩体分群。致病性钩体侵人人体后,可刺激机体产生特异性抗体,用血清学试验检测抗体是诊断钩体病的主要手段之一,并可进行流行病学调查。
2.典型的钩体病分菌血症期和“免疫”期,血清学试验适用于第二期,在病程的第6~l 2天机体出现特:异性抗体,1gM首先出现,继之IgG,于病程1个月左右其效价可达高峰。抗体出现后钩体血症逐渐消失。血清学试验的诊断标准是,单份血清抗体效价较正常参考值升高,或恢复期(发病3~4周)较急性期(发病3~4d)抗体效价有4倍或以上增长者判为阳性。上述五种血清学试验方法中,除MAT对钩体病诊断具有型特异性外,其余四种(ELISA、LA、PHA和IFA)均具有属特异性。
(1)MA T过去称为凝集溶解试验,抗体效价低时只发生凝集,效价高时钩体则先凝集而后溶解。凝集素一般在病后7~8日出现,逐渐升高,可持续数月至数年。该试验有较高的敏感性和特异性,是目前应用最广的钩体血清学试验方法。应用不同型别的活菌操作,可对不同血清型的钩体病作出诊断。有脑膜刺激症状的病人,也可测脑脊液抗体。
(2)ELISA较MA T阳性出现时间更早、更灵敏,两种方法总符合率达86.2%。ELISA检测钩体IgM抗体,有高度特异性,可在钩体病流行地区用作早期诊断。
(3)IFA所测抗体出现较早,消失也快,恢复期后1~2个月常转阴,与正常人血清无交叉反应,其敏感性与特异性均较高,并具有早期诊断意义。
(4)LA和PHA这类方法的特异性虽不及MA T、ELISA和IFA,但操作简便、快速,不需特殊设备,适合基层推广应用,可作为钩体病的筛选试验。
3.暗视野显微镜检查法是直接检查患者血液、脑脊液、尿液等标本中钩体的方法,对早期快速诊断有一定价值,但检出率较低。
病原体的分离培养法不仅可为临床病人提供确切诊断,而且还可进行菌群和菌型的鉴定,获得流行病学资料。发病的10天内可从血液及脑脊液中分离出钩体,第2周至恢复期后一段时间可从尿液中分离出钩体。肾脏中的钩体不受血液中特异性抗体的影响,且不为抗生素治疗所遏止,尿液中持续排钩体可达11个月之久。
4.影响本试验结果的因素MA T中所用抗原应选用国内钩端螺旋体标准菌株或当地常见菌型,而且要求钩体运动活泼、无自凝现象。用死螺旋体作试验多无溶解现象,只表现为凝集。