凯氏氮的测定方法
凯氏定氮法
凯氏定氮法中文名称：凯氏定氮法英文名称：Kjeldahl determination定义：测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。
即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。
由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。
凯氏定氮法凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。
即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。
由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。
原理蛋白质是含氮的有机化合物。
食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，蛋白质含量。
含氮量*6.25=蛋白含量.有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4作用下，硝化生成（NH4）2SO4凯氏定氮法反应式为：2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4（其中CuSO4做催化剂）2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3，收集于H3BO3溶液中反应式为:(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O3. 用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量反应式为：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3 (NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3试剂所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
2.1 硫酸铜。
本课题组凯氏定氮(植株)的方法
凯氏定氮法测定植株全氮一．样品准备：称样开花期0.1g，成熟期0.2g，籽粒0.1g二，步骤1.称取0.1g样品于消煮管中，加入0.5-1.0g催化剂，混合后，加3-5ml浓硫酸。
过夜处理。
2.将消煮管放在消煮炉上，先低温（110℃）1小时左右，待黑色的泡沫不再上涌，升温至320-340煮3小时左右，期间可更换消毒管的位置，待呈蓝绿色再煮30分钟即可。
3.定N：①打开定N仪，同时打开冷凝水，开机后仪器自检，进入主界面，选择“分析”，进入分析界面，选择“程序1”（已设定好，也可以手动编辑，酸30ml，碱30ml, 稀释液10ml, 模式时间5S，蒸馏时间3-5m，蒸汽量100%），放好蒸馏管和接收瓶，按“开始”按钮开始蒸馏。
（注意：刚开始进行实验时，要使用空白蒸馏管连续蒸馏3-5次，以冲洗机器）②蒸馏结束后，安全门自动打开，用夹子将蒸馏管拿下（很热），放入盆中冲洗，将接收瓶取下用0.02mol L-1的硫酸滴定，至颜色刚显现浅红色即可，记下初度数和终读数。
三．公式计算2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O；(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO32NH3~ H2SO4~2H全N%=2×硫酸浓度×（滴定值-空白值）×0.001×100×14/称样的质量蛋白质＝全N%×5.7四．试剂制备1. 40％NaOH：称取400.00g NaOH（分析纯）于1L蒸馏水中。
2. 2％的硼酸：称20.00 g硼酸于1L蒸馏水中.。
3. 显色剂：称取0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红于100 ml 95％乙醇中定容至100ml。
4. 硼酸指示剂：取20 ml显色剂和1L 2％的硼酸溶液混合。
5. 催化剂：称10 g CuSO4.5H2O和30 g K2SO4充分研磨成粉，混合均匀，即为1：3催化剂。
五．标定硫酸浓度1. Na2B4O7.10H2O + H2SO4 = Na2SO4 + 4H3BO3 + 5H2O2. 0.02mol/L标准硼砂溶液：称取硼砂（Na2B4O7.10H2O）3.8137g，溶于500 ml 水中。
凯氏定氮法
凯氏定氮法凯氏定氮法（英语：Kjeldahl method，全称凯耶达尔定氮法，简称凯氮法）是分析化学中一种常用的确定有机化合物中氮含量的检测方法。
这种方法是由凯耶达尔于在1883年发明。
凯氏定氮法是分析有机化合物含氮量的常用方法。
要测定有机物含氮量，通常是设法使其转变成无机氮，再进行测定。
一、原理：凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热，经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程，最后有机氮转变为无机氮硫酸铵，这一过程称为有机物的消化。
为了加速和完全有机物质的分解，缩短消化时间，在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂，加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解，除硫酸钾外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等盐类类提高沸点，但效果不如硫酸钾。
硫酸铜起催化剂的作用。
凯氏定氮法中可用的催化剂种类很多，除硫酸铜外，还有氧化汞、汞、硒粉、钼酸钠等，但考虑到效果、价格及环境污染等多种因素，应用最广泛的是硫酸铜。
使用时常加入少量过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物氧化。
消化完成后，将消化液转入凯氏定氮仪反应室，加入过量的浓氢氧化钠，将NH4+转变成NH3，通过蒸馏把NH3驱入过量的硼酸溶液接受瓶内，硼酸接受氨后，形成四硼酸铵，然后用标准盐酸滴定，直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。
滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数，通过计算即可得出总氮量。
在滴定过程中，滴定终点采用甲基红-次甲基蓝混合指示剂颜色变化来判定。
测定出的含氮量是样品的总氮量，其中包括有机氮和无机氮。
以蛋白质为例，反应式如下：消化：蛋白质+ H2SO4→（NH4）2SO4+ SO2↑+ CO2 ↑+ H2O蒸馏：（NH4）2SO4 + 2NaOH→ Na2SO4+ 2 H2O + 2NH3 ↑2NH3 + 4H3BO3→（NH4）2B4O7+ 5H2O滴定：（NH4）2B4O7+ 2HCl + 5H2O→2NH4Cl + 4 H3BO3蛋白质是一类复杂的含氮化合物，每种蛋白质都有其恒定的含氮量[约在14％~18％，平均为16％（质量分数）]。
凯氏(Kjeldahl)定氮法
为了加速消化，可以加入CuSO4作催化剂，K2SO4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液，滴定则用强酸。
计算所得结果为样品总氮量，如欲求得 样品中蛋白含量，应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量，即用样品中蛋白氮乘以6.25即得。
凯氏定氮法适用范围广泛，测定结果准确,重现性好，但操作复杂费时,试剂消耗量大。若采用模块式消化炉代替传统的消化装置, 可同时测定几份样品，节省时间,提高了工作效率，适用于批量蛋白质的测定,具有准确、快速、简便、低耗、稳定的优点。
1. 2 特点
凯氏定氮法是目前分析有机化合物含氮量常用的方法，是测定试样中总有机氮最准确和最简单的方法之一，被国际国内作为法定的标准检验方法。凯氏定氮法样品的最佳消化条件为硫酸铜2.50 g, 硫酸钾0.10 g,浓硫酸4.00 mL；硫酸铜的用量为影响消化时间的主要因素,硫酸钾和浓硫酸用量为第二和第三主要因素；用此最佳条件做实验, 消化时间仅为12 min；与其他硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸用量方法对比,该法所需消化时间最短,试剂用量减少,可降低实验成本,也降低了对环境的污染。
一、微量凯氏（Kjeldahl）定氮法
1. 原理
凯氏定氮法测定蛋白质分为样品消化、蒸馏、吸收和滴定4 个过程。其原理是样品中含氮有机化合物与浓硫酸在催化剂作用下共热消化，含氮有机物分解产生氨,氨又与硫酸作用,变成硫酸铵。然后加碱蒸馏放出氨, 氨用过量的硼酸溶液吸收,再用盐酸标准溶液滴定求出总氮量换算为蛋白质含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：
CH2COOH
| + 3H2SO4——2CO2 + 3SO2 +4H2O +NH3 (1)
凯氏定氮法
凯氏定氮法测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。
即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。
由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。
即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。
由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。
蛋白质是含氮的有机化合物。
食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，蛋白质含量。
含氮量*6.25=蛋白含量索氏提取法原理：样品经干燥后，借助索氏提取器用溶剂反复萃取，使样品中的脂肪进入溶剂中。
回收溶剂后所得残留物——粗脂肪、醚浸出物、游离态脂肪仪器：索氏提取器(冷凝管、提取筒、烧瓶)滤纸筒、恒温水浴等。
试剂：脂肪提取剂(无水乙醚、石油醚)、无水硫酸钠、海砂等。
方法适用范围：含脂较高，与组织成分结合的脂类较少的食品。
计算：式中：m2——脂肪烧瓶和脂肪的质量，g m1——脂肪烧瓶的质量，g m ——样品的质量，g(样品应是烘干样，以干基计)利用溶剂回流和虹吸原理，使固体物质每一次都能为纯的溶剂所萃取，所以萃取效率较高。
萃取前应先将固体物质研磨细，以增加液体浸溶的面积。
然后将固体物质放在滤纸套内，放置于萃取室中。
如图安装仪器。
当溶剂加热沸腾后，蒸汽通过导气管上升，被冷凝为液体滴入提取器中。
当液面超过虹吸管最高处时，即发生虹吸现象，溶液回流入烧瓶，因此可萃取出溶于溶剂的部分物质。
就这样利用溶剂回流和虹吸作用，使固体中的可溶物富集到烧瓶内。
凯氏氮的测定方法
凯氏氮的测定方法凯氏氮测定方法是一种用来测定水样中有机氮含量的常用方法。
其原理是将有机氮转化为还原的亚硝酸盐，然后用钝化铜融熔法将亚硝酸盐转化为氨气，再用滴定法测定氨气量，从而确定有机氮的含量。
以下是凯氏氮测定方法的详细步骤：1.样品准备：首先，将需要测定的水样加入耐热石英消解坩埚中，并加入足够的高锰酸钾溶液，使水样中的有机氮完全氧化为无机氮。
2.消解：将消解坩埚置于加热器中，经过恒温消解，使样品中的有机氮完全转化为无机氮。
这个步骤可以用挥发性有机胺测定方法来验证消解的腐蚀程度。
3.过滤：将消解液冷却后，用少量去离子水冲洗坩埚，将溶液过滤到蒸馏瓶中，去除固体残渣。
4.具体步骤包括：-测定管：选择一个具有标尺的测量管，并将氮气接口插入管中，使其排放气体的位置在测量管的标尺范围之内。
-填装固体：将适量的铜粉(约6-8g)加入测定管中。
-测量管悬浴在水浴中，开始加热，直到观察到排放气体的位置在测量管标尺内。
这表示亚硝酸盐已经转化为氨气。
5.滴定：停止加热后，将气体通过细长的气体收集管引入滴定瓶中，并用稀硫酸滴定法测定氨气的含量。
6.计算：根据滴定结果，计算出水样中有机氮的含量。
若需确定氨氮含量，还需将有机氮转化为氨氮的计量系数考虑进去。
在进行凯氏氮测定方法时，需要控制一些因素以确保测量的准确性：-保持温度恒定，并适当选择加热速率。
-确保准确的滴定和测量设备，并注意操作的精确性。
-确保和标准溶液的比较和校正。
总结起来，凯氏氮测定方法是一种常用的测定水样中有机氮含量的方法。
通过将有机氮转化为亚硝酸盐，并进一步转化为氨气，然后用滴定法测定氨气的含量，可以确定水样中有机氮的含量。
该方法操作简单，灵敏度较高，广泛应用于环境监测和水质分析中。
5：凯氏氮的测定
凯氏氮的测定凯氏氮是指以凯氏（Kjeldahl）法测得的含氮量。
它包括了氨氮和在此条件下能被转化为铵盐而测定的有机氮化合物。
此类有机氮化合物主要是指蛋白质、胨、氨基酸、核酸、尿素以及大量合成的，氮为负三价态的有机氮化合物。
它不包括叠氮化合物、联氮、偶氮、腙、硝酸盐、亚硝酸盐、腈、硝基、亚硝基、肟和半卡巴腙类的含氮化合物。
由于一般水中存在的有机氮化合物多为前者，因此，在测定凯氏氮和氨氮后，其差值即称之为有机氮。
测定凯氏氮或有机氮，主要是为了了解水体受污染状况，尤其是在评价湖泊和水库的富营养化时，是一个有意义的指标。
蒸馏滴定法1.方法原理水样中加入硫酸并加热消解，使有机物中的胺基氮转变为硫酸氢铵，游离氨和铵盐也转变为硫酸氢铵。
消解时加入适量硫酸钾以提高沸腾温度，增加消解速率，并加硫酸铜（或硫酸汞）为催化剂，以缩短消解时间。
消解后液体，使成碱性蒸馏出氨，吸收于硼酸溶液中，然后以滴定法或光度法测定氨含量。
2.方法的适用范围当凯氏氮含量较低时，可取较多量的水样，并用光度法测定氨量。
含量较高时，则减少取样量，并用酸滴定法测氨。
试料体积为50ml时，使用光程长度为10mm比色皿，最低检出浓度为0.2mg/L。
3.水样的保存水样如不能及时测定时，应加入足够量的硫酸，使pH<2，并在4℃保存。
4.仪器凯氏定氮装置：500ml凯氏烧瓶、氮球、直形冷凝管和导管。
或配有100ml 凯氏定氮烧瓶的半微量水蒸气蒸馏定氮装置。
5.试剂实验用水均用无氨水。
①硫酸（ρ=1.84g/ml）。
②硫酸钾（K2SO4）。
③硫酸铜溶液：称取5g硫酸铜（CuSO4.5H2O）溶于水，稀释至100ml。
④氢氧化钠溶液：称取500g氢氧化钠溶于水，稀释至1L。
⑤硼酸溶液：称取20g硼酸溶于水，稀释至1L。
⑥硫酸溶液（1/2H2SO4）：0.01 mol/L。
6.步骤（1）常量法①取样体积的确定：按下表分取适量水样，移入500ml凯氏瓶中。
凯氏定氮法测定原理
凯氏定氮法测定原理
Kaiser法，又称为Kjeldahl定氮法，是一种常用的定氮分析方法，它是根据氨和氮的化学反应来测定氮含量。
该方法由Hermann Kaise（1842-1900）于1883年首次提出。
它可以测定含氮的有机物的氮含量，包括氨、胺、蛋白质、核酸、氨基酸等。
实验步骤为：
（1）将待测样品（植物、矿石、油、塑料、煤等）加入硫酸氢钠的溶液中，加热混合。
（2）将混合物用硝酸钠水溶液滤液，将滤液转移到烧杯中，加入氢氧化钠溶液，再通入硫氰酸钠溶液。
（3）收集产生的氨气，经洗涤后，采用酒精灯烧液中氨气，得到硝酸铵溶液。
（4）将硝酸铵溶液加入到酸性氧化液中，当氧化后有过量电子，再加入KMnO4溶液，氧化过量电子，经滤液，可以得到含有氮的酸性液体。
（5）把滤液用碱量计测定酸性液体中的氮含量。
经公式计算可得样品中氮含量。
总结
Kaiser定氮法是一种用于测定有机物中氮含量的常见定氮分析方法，它的基本原理是：使用硝酸钠水溶液滤液得到氨气，将氨气采用酒精灯烧液得到硝酸铵溶液，然后将硝酸铵溶液加入到酸性氧化液中氧化出过量电子，经滤液后，将滤液加入碱量计测定，从而得到样品中氮含量的数值。
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凯氏定氮法
凯氏定氮法凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。
即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准酸滴定，就可计算出样品中的氮量。
由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。
原理蛋白质是含氮的有机化合物。
蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，蛋白质含量。
含氮量*6.25=蛋白含量.有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4 反应式为：2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 （其中CuSO4做催化剂）2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中反应式为:(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O3. 用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量反应式为：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3试剂所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
2.1 硫酸铜。
2.2 硫酸钾。
2.3 硫酸。
2.4 2%硼酸溶液。
2.5 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。
也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
2.6 30%氢氧化钠溶液。
2.7 0.025mol/L硫酸标准溶液或0.05mol/L盐酸标准溶液。
仪器安全管导管汽水分离管样品入口塞子冷凝管吸收瓶隔热液套反应管蒸汽发生瓶操作1、样品处理：精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品（约相当氮30-40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及20毫升硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上，小火加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5小时。
凯氏氮的测定方法
凯氏氮的测定方法（1）、原理当样品与浓硫酸和硫酸钾的混合物（沸点315~370℃）在催化剂硫酸铜或硫酸汞存在时，一起加热，其中的有机氮和氨态氮转化为硫酸铵。
然后加入NaOH溶液使之成碱性，蒸镏使氨释放出来并以硼酸吸收，然后用硫酸滴定硼酸铵。
此法测得的总氮包括了有机氮和原来即以氨态存在的氮，但不包括硝酸盐或亚硝酸盐形式存在的氮，有机氮中的某些化合物如含氮的杂环化合物、吡啶、叠氮化合物、偶氮化合物、硝基和亚硝基化合物等也未包括在内。
以此法测定的总氮称之为凯氏（Kjeldagl）氮，即TKN。
测定同一水样中氨态氮含量后，总凯氏氮和氨态氮的差值即为有机氮。
（2）、药品与仪器①、浓硫酸，密度1.84g/cm3；②、50% NａOH溶液；③、10% CｕSO4溶液；④、4%硼酸溶液；⑤、无水硫酸钾或无水硫酸钠；⑥、0.020mol/L(1/2H2SO4标准溶液：吸取分析纯浓硫酸2.80ml，溶于1000ml蒸镏水中，得到约0.10mol/L(1/2H2SO4)溶液，用碳酸钠标定。
然后从中吸取200ml，用蒸镏水稀释至1000ml 备用。
⑦、混合指示剂：取0.05g甲基红和0.10g溴甲酚绿溶于100ml乙醇中；⑧、1%酚酞的乙醇溶液；⑨、4%Na2S。
9H2O溶液；⑩、蒸镏水：将普通蒸镏水酸化后加入KMnO4进行蒸镏，并重复蒸镏一次，以使其中不含有任何铵盐或氨。
本试验所用蒸镏水均应经过这样的处理；⑩、浮石：在蒸镏水中煮沸后干燥备用；⑩、600瓦可调温电炉两台；⑩、凯氏烧瓶及凯氏蒸镏装置（3）、操作步骤①消化：准确量取一定体积（以含氮0.5~10mg为宜）的废水水样置于凯氏烧瓶，加入10ml浓硫酸、5克硫酸钾或硫酸钠、1ml硫酸铜溶液，并放入几块沸石，将凯氏烧瓶以45度的角度固定于通风橱内加热煮沸，烧瓶内将产生白烟。
继续煮沸，烧瓶中颜色逐渐变黑，直至溶液完全透明无色或浅绿色。
再继续煮沸20分钟。
②蒸镏：将凯氏烧瓶冷却，以约150ml蒸镏水冲洗烧瓶壁，加入2.5ml硫化钠溶液和3~5滴酚酞，然后缓慢沿壁加入50mlNaOH溶液尽量使其不与烧瓶内液体混合。
凯式定氮法 实验方法
Байду номын сангаас
通过进气口进入反应室进行洗涤，在冷凝管下口放一个盛有硼酸指示剂混合液的锥形瓶，冷凝管下端应完全浸没于液体中，洗涤 1~2 min，观察锥形瓶中溶液是否变色，若基本不变色，证明蒸馏
实验原理：被测的天然含氮有机物与浓硫酸共热时，其中的碳、 氢元素转变成CO2和H2O，而氮元素转变成氨，并进一步与硫酸 反应生成硫酸铵，此过程称为“消化”。消化时分解反应进行得 很慢，需要加入硫酸钾以提高沸点（可由290℃提高到400℃）， 加入硫酸铜作为催化剂（其他氧化剂如H2O2也可）。
蒸馏：凯氏定氮仪
凯氏定氮法
凯氏定氮法：
仪器：硝化炉 凯氏定氮仪
试剂：浓硫酸 0.5 mol/L 盐酸 40% NaOH
2% 硼酸
粉末硫酸钾-硫酸铜混合物（K2SO4: CuSO4〃5H2O=3 : 1） 混合指示剂：由50 ml 0.1%甲基蓝酒精溶液与100 ml 0.1%
甲基红酒精溶液混合而成，酸色为紫红色，碱色为绿色
洗，水封住进样口。酒精灯加热蒸馏瓶。当第一滴氨水从冷凝管
中滴下的时候，计时5min，后将硼酸溶液稍微离开蒸馏管口，让 蒸馏管口在硼酸液面吹2min，清洗蒸馏管口。
蒸馏时，碱液一定要控制好量，硼酸里面的指示剂颜色变为蓝色
后要再蒸馏五分钟左右。
滴定：滴定管
实验步骤：用0.5 mol/L 的盐酸滴定 用HCl滴定兰色蒸馏液和硼酸液的混合物，直至蓝色褪去，稍微有 一点粉色，滴定结束。
凯氏定氮法：
硝化：硝化炉
实验步骤：取2ml样液，加入到硝化管中，加入1.5g的催化剂 （K2SO4: CuSO4〃5H2O=3 : 1），后在通风橱中进行操作。在 消化管中加入放入浓硫酸6ml消化至消化管内的液体呈现出澄清 的浅蓝色。去除消化管，将其冷却后定容到50mL容量瓶中。 在消化时，电压先调低，约100v左右，一小时后再调最大。直 到消化成绿色透明状。 硝化温度：300—400℃
凯氏定氮法
凯氏定氮法只能检测蛋白质中氮含量，不能检测氨基酸的含量。
其中蛋白质含量也只是称为粗蛋白质的含量，只是用氮的含量乘以6.25（系数）得出，不是真正的蛋白质的含量。
凯氏定氮法测氮的方法如下：1、称取0.5～1g试样（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，无损失地放入凯氏烧瓶中，加入硫酸铜0.9g，无水硫酸钾（或硫酸钠）15g，与试样混合均匀，再加硫酸25ml和2粒玻璃珠，在消煮炉士小心加热，待样品焦化，泡沫消失，再加强火力（360～410℃）直至溶液澄清后，再加热消化15min。
2、氨的蒸馏（1）常量直接茂馏法将上述的试样消煮液冷却，加蒸馏水200ml，摇匀，冷却。
沿瓶壁小心加入40％氢氧化钠溶液100ml，立即与蒸馏装置相连．蒸馏装置冷凝管的末端应浸入50ml硼酸吸收液lcm。
加混合指示剂2滴，轻摇凯氏烧瓶，使溶液混匀，加热蒸馏，直至馏出液体积约150ml。
先将吸收液取下，再停止加热。
（2）半微量水蒸汽蒸馏法上述试样的消煮液冷却，加蒸馏水20m1转入100ml 容量瓶，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。
取2％硼酸溶液20ml，加混合指示剂2滴，使半微量蕉馏装置的冷凝管末端浸入此溶液；蒸馏装置的蒸汽发生器的水中应加甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，且保持此液为橙红色，否则应补加少许硫酸。
准确移取试样分解液10～20ml注入蒸馏装置的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好入口玻璃塞，再加10ml40％氢氧化钠溶液，小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，并在入口处加水封密好，防止漏气，蒸馏4min，使冷凝管末端离开吸收液面，用蒸馏水洗冷凝管末端，洗液均流入吸收液。
3、滴定用硼酸吸收氨后，立即用0.05mol/L的HCI标准溶液滴定，仍以甲基红或混合甲基红为指示剂。
在测定样本中含氮量的同时，应做一空白对照测定，即各种试剂的用量及操作步骤完全相同，但不加样本，这样可以校正因药品不纯所发生的误差，吸收氨后的吸收液立即用0.05mol/L盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变为灰红色为终点。
TKN 凯氏氮的测定
FHZHJSZ0037 水质凯氏氮的测定F-HZ-HJ-SZ-0037水质１９８４它包括了氨氮和在此条件下能被转化为铵盐的有机氮化合物氨基酸尿素及其他合成的氮为负三价态的有机氮化合物连氮腙亚硝基亚硝酸盐肟和半巴腙类的含氮化合物湖泊1.3 测定范围凯氏氮含量较低时经消解和蒸馏含量较高时最后以酸滴定法测定氨使用光程长度为10mm比色皿 2 原理水中加入硫酸并加热消解游离氨和铵盐也转为硫酸氢铵以增加消解速率以缩短消解时间使成碱性并蒸馏出氨然后以滴定法或光度法测定氨含量因此应同时加入适量硫代硫酸钠3 试剂本方法所用试剂除另有说明外实验用水均为无氨水Array将蒸馏水通过一个强酸性阳离子交换树脂柱密塞保存于1L蒸馏水中并在全玻璃蒸馏器中重蒸馏然后集取约800mL馏出液于具磨口玻塞的玻璃瓶中3.2 硫酸 ３．３ 硫酸钾Array称取2g红色氧化汞或2.74g硫酸汞１＋５3.5 硫代硫酸钠称取500g氢氧化钠溶于水Na2S2O3溶于上述溶液中贮于聚乙稀瓶中称取20g硼酸溶于水 ３．７ 硫酸标准溶液１／２=0.02mol/L1+19ÓÃˮϡÊÍÖÁ1L称取经180°C干燥2小时的基准试剂级碳酸钠约0.5克移入500mL容量瓶内移取上述25.00mL碳酸钠溶液于150mL锥形瓶中加1滴甲基橙指示液记录用量式中硫酸标准溶液浓度 m g硫酸标准溶液滴定消耗体积 ５３1/2摩尔质量亚甲蓝混合指示液称取100mg 亚甲蓝溶于50mL95%乙醇每月配制4.1.1 500mL 凯氏瓶4.1.3 直形冷凝管(300mm) 4.1.4 导管4.2 10mL 酸式微量滴定管 5 采样和样品贮存实验室样品可贮于玻璃瓶或聚乙稀瓶中应加入足够的硫酸(3.2)并在46 操作步骤 6.1 试料分取250mL 试样蒸馏后所得馏出液可测定凯氏氮最低浓度为0.2mg/L(光度法)¾-Ïû½â¿É²â¶¨¿-ÊϵªÅ¨¶È¸ßÖÁ100mg/L(酸滴定法) 6.2 测定6.2.1 试样体积的确定: 按下表分取适量水样中凯氏氮含量(mg/L)试样体积(mL)~10 250 10~20 100 20~50 50.0 50~10025.0)1.( (250)25531000×××=V mc6.2.2 消解:加10mL硫酸(3.2) 6.0g硫酸钾(3.3)和数粒玻璃珠于凯氏瓶中置通风柜内加热煮沸调节热源使继续保持沸腾30min¼Ó250mL水6.2.3 蒸馏:将凯氏瓶斜置使成约450角氢氧化钠溶液(3.5)ѸËÙÁ¬½ÓµªÇòºÍÀäÄý¹Üµ¼¹Ü¹Ü¼âÉìÈëÎüÊÕÒºÒºÃæÏÂÔ¼ 1.5cm¼ÓÈÈÕôÁóÍ£Ö¹ÕôÁóÑǼ×À¶Ö¸Ê¾Òº(3.8)于馏出液中记录用量以与试样相同体积的水代替试样凯氏氮含量试样滴定所消耗的硫酸标准溶液体积空白试验滴定所消耗的硫酸标准溶液体积 V mL;C mol/L;14.018 对特殊情况的说明8.1 氨的测定除酸滴定法外馏出液移入250mL容量瓶中混匀后滴加1mol/L氢氧化钠溶液至pH7~9ÒÔÄÉÊÏÊÔ¼Á±ÈÉ«·¨(见GB7479)测定氨量见GB7481)测氨其余操作步骤相同含硫化汞沉淀9 参考文献GB 11891-1989。
.凯氏定氮法
凯氏定氮法是一种测定食物、饮料或饲料中蛋白质含量的经典方法。
这个实验方法需要使用浓硫酸和催化剂，将样品中的有机氮转化为氨，然后通过蒸馏将氨分离出来，最后用酸滴定液滴定，计算出氮的含量。
凯氏定氮法的步骤如下：
1. 样品处理：将样品研磨并干燥，然后加入硫酸和催化剂，进行消化反应。
这个过程需要控制温度和时间，以免样品烧焦或硫酸过度氧化。
2. 蒸馏：将消化液进行蒸馏，使氨气从溶液中分离出来。
蒸馏过程中需要控制温度和压力，以确保氨气能够完全分离。
3. 滴定：将蒸馏后的溶液用酸滴定液进行滴定，根据颜色变化判断滴定终点。
终点判断需要准确控制，否则会影响测定结果。
4. 计算：根据滴定的酸滴定液的体积和浓度，计算出氮的含量。
凯氏定氮法的优点是准确性高、可重复性好，可以用于测定各种食物、饮料和饲料中的蛋白质含量。
但是，该方法也存在一些缺点，例如需要使用浓硫酸和催化剂，操作比较危险，而且实验过程中会产生有害气体。
此外，凯氏定氮法测定的是样品中的总氮含量，而并非所有的氮都以蛋白质的形式存在。
因此，在某些情况下，可能需要采用其他方法来测定样品中的蛋白质含量。
总之，凯氏定氮法是一种经典的蛋白质测定方法，具有较高的准确性和可重复性。
但是，在操作过程中需要注意安全问题，并且需要控制好各个实验条件，以保证测定结果的准确性。
凯氏定氮法
凯氏定氮法1. 简介凯氏定氮法（Kjeldahl method）是一种用于测定有机物中氮含量的常用方法。
它是以丹麦化学家尤利乌斯·凯尔达尔（Johan Gustav Kjeldahl）的名字命名的，凯尔达尔于1883年首次提出了这种方法。
该方法适用于几乎所有的有机物样品，例如农产品、食品、肥料、土壤和水等。
凯氏定氮法的优点包括简单、准确、可靠，并且适应性强。
2. 测试步骤步骤一：样品处理将待测样品称取一定量（通常1-2g），精确称量并记录质量。
步骤二：消解将样品转移到凯氏消解管中，加入适量的浓硫酸（H2SO4）。
为使反应顺利进行，可以加入一些催化剂，如汞硫化物（HgS）。
经过消解，样品中的有机氮转为无机氮盐，主要形式为硫酸铵（NH4HSO4）。
消解期间要保持适当的温度控制，一般在沸水浴中加热1-2小时，直至反应结束。
步骤三：蒸馏将消解液转移到凯氏蒸馏装置中，加入含有氢氧化钠（NaOH）和含有酚酞指示剂的接收瓶中。
蒸馏器中的氢氧化钠用于吸收硫酸铵产生的氨气，并将其转化为氨水（NH4OH）。
使用蒸馏水蒸馏样品溶液，将氨气从样品中分离出来。
通过连续蒸馏过程，将氨气捕集在接收瓶中。
蒸馏过程中，要注意控制好蒸馏速度，并确保溶液中氨气的完全转化。
步骤四：滴定将收集到的氨水与盐酸（HCl）标准溶液进行滴定，用来确定氨气的数量。
滴定过程中，使用酚酞指示剂作为指示剂，使溶液在转变至中性时由红色变为无色。
通过滴定得到的氨氮量与消解液中样品的氮量成正比。
3. 计算氮含量根据凯氏定氮法的原理，可以通过以下公式计算样品中氮的含量：氮含量（%） = 滴定液中的NH3-N浓度（mol/L） × 滴定体积（L） ÷ 样品质量（g）4. 注意事项•操作过程中要注意安全，避免与强酸和强碱接触，戴上实验手套和护目镜。
•操作前应将仪器设备清洗干净，以免产生误差。
•消解液中加入的催化剂必须少量使用，过多会导致滴定过程中的误差。
凯氏氮的测定方法
凯氏氮的测定方法
嘿，咱今儿就来讲讲凯氏氮的测定方法！你可别小瞧了这凯氏氮，
它在好多领域那都是相当重要的呢！
凯氏氮的测定啊，就好像是一场奇妙的化学之旅。
首先呢，咱得准
备好各种家伙什儿，就像战士上战场得有称手的兵器一样。
然后就是关键步骤啦，就跟做饭似的，得掌握好火候和调料的搭配。
把样品处理得妥妥当当，让它乖乖地进入到测定的流程中。
这里面有个特别重要的环节，就像是在大海里捞针一样，得精准地
把凯氏氮给揪出来。
这可得有点真本事，不能马虎。
你想想看，要是测不准，那后面的工作不都白瞎啦？就好比你走路
走偏了方向，那可就离目的地越来越远喽。
测定凯氏氮还得注意细节，就像雕刻一件艺术品，每一刀都得恰到
好处。
稍有不慎，结果可能就差之千里。
有时候我就想啊，这凯氏氮的测定不就跟我们找宝藏一样嘛，得通
过层层关卡，解开一个个谜题，才能最终找到那个宝贝。
在这个过程中，耐心和细心那是绝对不能少的。
不能着急忙慌的，
得慢慢来，一步一个脚印。
而且啊，这测定方法还得不断地改进和完善呢，就跟我们人一样，
要不断学习进步，才能变得更厉害呀！
总之呢，凯氏氮的测定可不是一件简单的事儿，但只要咱用心去做，就一定能把它搞定！咱可不能被这点小困难给吓倒，对吧？咱得勇敢
地去挑战，去探索，去发现其中的奥秘！你说是不是呢？。
凯氏定氮法
凯氏定氮法编辑锁定凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。
即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。
由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。
中文名凯氏定氮法外文名kjeldahl method分类蛋白质类型生物化学与分子生物学目录1. 1原理2. 2试剂1. 3仪器2. 4操作1. 5计算2. 6注意凯氏定氮法原理编辑蛋白质是含氮的有机化合物。
蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，并换算成蛋白质含量。
含氮量*6.25=蛋白含量.有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4凯氏定氮法反应式为：2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 （其中CuSO4做催化剂）2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中反应式为:(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O3. 用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量反应式为：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3凯氏定氮法试剂编辑所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
2.1 硫酸铜。
2.2 硫酸钾。
2.3 硫酸。
2.4 2%硼酸溶液。
2.5 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。
也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
凯氏氮和总氮
标题：凯氏氮和总氮的概念、测定方法及应用引言：凯氏氮和总氮是在环境科学与化学领域中常用的两个重要指标，用于评估水体和土壤中氮含量的多少。
本文将详细介绍凯氏氮和总氮的概念、测定方法及其在环境保护和农业生产中的应用。
一、凯氏氮的概念和测定方法1. 凯氏氮的概念凯氏氮是指水体或土壤中存在的无机氮的一种形态，主要包括亚硝酸盐氮、硝酸盐氮和铵态氮。
凯氏氮的含量是评价水体和土壤氮素污染程度的重要指标。
2. 凯氏氮的测定方法凯氏氮的测定通常采用氨水法，具体步骤如下：（1）取样品，加入氨水使样品呈现碱性。
（2）加入硫酸钾汞溶液，使亚硝酸盐和硝酸盐转化为氨水溶液中的氨酚汞盐。
（3）加入碘化钾溶液，使铵态氮转化为氨酚汞盐。
（4）加入硫代硫酸钠溶液，去除多余的碘。
（5）用硝酸铋溶液滴定，测定凯氏氮的含量。
二、总氮的概念和测定方法1. 总氮的概念总氮是指水体或土壤中存在的所有形态的氮的总量，包括有机氮和无机氮。
总氮是评估水体和土壤氮素循环及生物可利用性的重要参数。
2. 总氮的测定方法总氮的测定方法有多种，常用的包括氧化-还原法、传统湿法和仪器分析法。
其中，氧化-还原法是常用的测定总氮的方法，具体步骤如下：（1）取样品，加入适量的氧化剂，在酸性条件下将有机氮氧化为无机氮。
（2）加入还原剂，将无机氮还原为氨。
（3）用滴定法或仪器测定氨的含量，从而计算得到总氮的含量。
三、凯氏氮和总氮的应用1. 凯氏氮的应用（1）环境保护：凯氏氮可用于评估水体中氮污染的程度，指导水质治理和保护工作。
（2）农业生产：凯氏氮测定可用于土壤肥力评价和农田施肥的合理性判断。
2. 总氮的应用（1）环境监测：总氮是评估水体和土壤中氮素循环和污染程度的重要指标。
（2）农业管理：总氮测定可用于土壤肥力评估、农田施肥计划制定和作物生长调控。
结论：凯氏氮和总氮是评估水体和土壤中氮素含量的重要指标。
通过凯氏氮和总氮的测定，可以为环境保护和农业生产提供科学依据和指导。
凯氏定氮操作方法
凯氏定氮操作方法
凯氏定氮操作方法是通过氧化剂硫酸铜与待测物中的氨氮反应，生成定氮产物，然后用滴定法测定生成产物的用量，从而确定待测物中的氨氮含量。
具体的操作步骤如下：
1. 将待测物称取一定量（通常为0.5-1.0g），转移到烧杯中，加入适量蒸馏水溶解。
2. 将溶解后的待测物溶液转移至凯氏定氮装置的凯氏胆中。
3. 在凯氏胆中加入2ml浓硫酸，并用玻璃棒搅拌均匀。
4. 然后向凯氏胆中加入硫酸铜溶液，使其溶液稍微浸泡浸过待测物溶液的表面。
5. 在凯氏胆上部加入少量滴定液（0.1mol/L盐酸溶液），滴定液要接触待测物溶液，并保证凯氏胆中没有气泡。
6. 将凯氏胆置于加热台上，进行加热。
7. 加热过程中，待测物溶液中的氨被氧化为氮气，并转移到滴定液中。
溶液中的氮气通过颜色变化反应逐渐转变为蓝色，直到滴定液完全被氨氮氧化。
8. 当滴定液由无色变为蓝色时，立即关闭加热台。
9. 记录滴定液的用量（滴定液的初始体积减去滴定液的最终体积），并根据滴定液的浓度计算出待测物中的氨氮含量。
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凯氏氮的测定方法
（1）、原理
当样品与浓硫酸和硫酸钾的混合物（沸点315~370℃）在催化剂硫酸铜或硫酸汞存在时，一起加热，其中的有机氮和氨态氮转化为硫酸铵。
然后加入NaOH溶液使之成碱性，蒸镏使氨释放出来并以硼酸吸收，然后用硫酸滴定硼酸铵。
此法测得的总氮包括了有机氮和原来即以氨态存在的氮，但不包括硝酸盐或亚硝酸盐形式存在的氮，有机氮中的某些化合物如含氮的杂环化合物、吡啶、叠氮化合物、偶氮化合物、硝基和亚硝基化合物等也未包括在内。
以此法测定的总氮称之为凯氏（Kjeldagl）氮，即TKN。
测定同一水样中氨态氮含量后，总凯氏氮和氨态氮的差值即为有机氮。
（2）、药品与仪器
①、浓硫酸，密度1.84g/cm3；②、50% NａOH溶液；③、10% CｕSO4溶液；④、4%硼酸溶液；
⑤、无水硫酸钾或无水硫酸钠；
⑥、0.020mol/L(1/2H2SO4标准溶液：吸取分析纯浓硫酸2.80ml，溶于1000ml蒸镏水中，得到约0.10mol/L(1/2H2SO4)溶液，用碳酸钠标定。
然后从中吸取200ml，用蒸镏水稀释至1000ml 备用。
⑦、混合指示剂：取0.05g甲基红和0.10g溴甲酚绿溶于100ml乙醇中；
⑧、1%酚酞的乙醇溶液；⑨、4%Na2S。
9H2O溶液；
⑩、蒸镏水：将普通蒸镏水酸化后加入KMnO4进行蒸镏，并重复蒸镏一次，以使其中不含有任何铵盐或氨。
本试验所用蒸镏水均应经过这样的处理；
⑩、浮石：在蒸镏水中煮沸后干燥备用；⑩、600瓦可调温电炉两台；⑩、凯氏烧瓶及凯氏蒸镏装置
（3）、操作步骤
①消化：
准确量取一定体积（以含氮0.5~10mg为宜）的废水水样置于凯氏烧瓶，加入10ml浓硫酸、5克硫酸钾或硫酸钠、1ml硫酸铜溶液，并放入几块沸石，将凯氏烧瓶以45度的角度固定于通风橱内加热煮沸，烧瓶内将产生白烟。
继续煮沸，烧瓶中颜色逐渐变黑，直至溶液完全透明无色或浅绿色。
再继续煮沸20分钟。
②蒸镏：
将凯氏烧瓶冷却，以约150ml蒸镏水冲洗烧瓶壁，加入2.5ml硫化钠溶液和3~5滴酚酞，然后缓慢沿壁加入50mlNaOH溶液尽量使其不与烧瓶内液体混合。
立刻将烧瓶按图所示安装到蒸镏装置上去（事先安装好含50ml硼酸的吸收瓶），小心转动烧瓶使烧瓶内的两层液体混合并开始加热。
煮沸20~30分钟或在不使用蒸气发生器时蒸发至烧瓶内液体体积减少至原体积约约1/3时，停止蒸镏。
③滴定：
卸下吸收瓶，加入几滴混合指示剂，以0.02mol/L（1/2H2SO4）滴定至溶液变为紫色。
④空白试验：
用同样体积蒸镏水代替废水水样，按上述步骤作空白试验。
（4）、计算
总氮＝（V1－V0）* C *14000 / V (mmol/L)
V1 ￣￣滴定样品消耗的标准硫酸溶液的体积，ml；
V0 ￣￣滴定空白试验消耗的标准硫酸溶液的体积，ml；
C ￣￣硫酸标准溶液的准确浓度，mol/L；
14000￣￣每摩尔氮的质量（毫克）数；
V ￣￣样品水样的取样体积，ml。