荧光分光光度法测定荧光素钠的含量
x射线荧光光谱法测钠含量
x射线荧光光谱法测钠含量
X射线荧光光谱法是一种常用于分析物质成分的方法，它利用物质受到X射线照射后产生的荧光信号来确定物质中元素的含量。
测量钠含量时，可以使用X射线荧光光谱仪对待测样品进行测试。
首先，将待测样品装入测量腔室，然后通过X射线照射样品。
当X射线照射到样品上时，激发样品中的钠原子内部的电子跃迁，产生特定能量的荧光信号。
X射线荧光光谱仪会收集并分析这些荧光信号来确定样品中钠的含量。
为了准确测量钠含量，需要进行仪器的校正和样品的处理。
首先，使用标准物质进行仪器的校正，确定荧光信号与钠含量之间的关系。
然后，将待测样品进行预处理，例如将样品研磨成粉末或制成片状，以提高测量的准确性和重复性。
最后，将预处理后的样品放入X射线荧光光谱仪中进行测量，并根据仪器校正曲线计算出样品中钠的含量。
需要注意的是，X射线荧光光谱法测量钠含量需要使用专用的仪器设备，并且对样品的处理和操作都需要遵循严格的实验步骤和安全规范。
2020版《中国药典》荧光分光光度法检验操作规程
一、目的：二、范围：本操作规程适用于荧光分光光度法的检验操作。
三、职责：1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。
四、内容：1、对仪器的一般要求：1.1所用仪器为荧光计或荧光分光光度计，荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190～650nm，发射波长扫描范围是200～800nm。
可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。
1.2仪器基本组成：1.2.1光源：为高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～400nm 范围内强度几乎相等，故较常用。
1.2.2激发单色器：置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器，筛选出特定的激发光谱。
1.2.3发射单色器：置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器，常采用光栅为单色器。
筛选出特定的发射光谱。
1.2.4样品室：通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。
测量液体时，光源与检测器成直角安排；测量固体时，光源与检测器成锐角安排。
1.2.5检测器：一般用光电管或光电倍增管作检测器。
可将光信号放大并转为电信号。
2、基本原理：某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长较长的荧光。
物质的激发光谱和荧光发射光谱，可用于该物质的定性分析。
当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用于该物质的含量测定。
荧光分光光度法的灵敏度一般较紫外-可见分光光度法高，但浓度太高的溶液会发生“自熄灭”现象，而且在液面附近溶液会吸收激发光，使发射光强度下降，导致发射光强度与浓度不成正比，故荧光分光光度法应在低浓度溶液中进行。
3、测定法：3.1所用的仪器为荧光计或荧光分光光度计，按各品种项下的规定，选定激发光波长和发射光波长，并制备对照品溶液和供试品溶液。
3.2通常荧光分光光度法是在一定条件下，测定对照品溶液荧光强度与其浓度的线性关系。
荧光素钠检测方法
荧光素钠检测方法荧光素钠这玩意儿的检测方法还挺有趣的呢。
咱先说一种比较常见的，那就是荧光检测法。
你想啊，荧光素钠这名字里都带“荧光”俩字，它在特定的条件下会发出荧光。
检测的时候，就把含有荧光素钠的样本放在一个仪器里，这个仪器能够激发它发出荧光，然后通过检测荧光的强度来确定荧光素钠的含量。
就像是在黑暗里找一个会发光的小宝贝，它发的光越强，就说明荧光素钠越多呢。
还有一种是色谱法。
这就像是让荧光素钠参加一场跑步比赛。
把样本注入到色谱柱里，不同的物质在柱子里跑的速度不一样。
荧光素钠就按照自己的节奏跑，最后根据它跑出来的时间和峰面积啥的，就能判断它的量啦。
这就好比是在一群小伙伴里，通过它独特的跑步风格和到达终点的情况来认出它。
另外，还有比色法。
简单来说，就是利用荧光素钠的颜色特性。
当它和某些试剂发生反应的时候，会产生特定的颜色变化。
通过观察颜色的深浅，就可以大概知道有多少荧光素钠在里面。
就像我们看东西的颜色深浅来判断浓度一样，浅一点可能就少，深一点可能就多。
不过呢，这些检测方法都得在比较规范的实验室环境里进行。
操作人员得小心翼翼的，就像照顾小婴儿一样。
要确保仪器准确啦，试剂没问题啦。
而且，不同的检测方法都有自己的优缺点。
荧光检测法很灵敏，就像一个超级敏感的小侦探，能发现很微量的荧光素钠。
色谱法呢，比较准确，就像一个很靠谱的老会计，算得清清楚楚。
比色法相对简单，是个比较朴素的检测方法，就像那种简单又实用的小工具。
不管用哪种方法，都是为了能准确地知道荧光素钠的情况。
这在很多方面都很重要呢，比如在医药领域，要是荧光素钠的量不对，那可就影响大了。
所以啊，这些检测方法就像一个个小卫士，守护着荧光素钠使用的准确性和安全性。
生物碱类药物含量测定方法
生物碱类药物含量测定方法
生物碱是一类具有生物活性的碱性化合物，在自然界中广泛存在，尤其在植物和微生物中含量丰富。
生物碱的含量测定方法有多种，常用的方法包括比色法、紫外-可见分光光度法、荧光法、薄层色谱法、高效液相色谱法等。
1.比色法：该方法是通过生物碱与特定的显色剂发生化学反应，
生成有色离子或分子，根据颜色的深浅程度进行含量测定的方
法。
例如，苦参碱可以通过与溴甲酚绿显色剂发生反应来进行
含量测定。
2.紫外-可见分光光度法：该方法是通过测量生物碱溶液在紫外和
可见光区的吸收光谱，进而计算其含量的方法。
例如，盐酸吗
啡碱可以在254nm波长处进行含量测定。
3.荧光法：该方法是利用生物碱分子在特定波长激发下发出的荧
光强度来计算其含量的方法。
例如，荧光素钠在紫外光激发下
可以发出绿色荧光，可以用于含量测定。
4.薄层色谱法：该方法是利用生物碱在不同极性溶剂中的分配系
数差异，将样品溶液展开在薄层板上，然后用显色剂显色，根
据斑点面积或荧光强度来计算生物碱的含量。
5.高效液相色谱法：该方法是利用高效液相色谱仪对生物碱进行
分离和检测，然后根据峰面积或峰高来计算生物碱的含量。
该
方法具有分离效果好、灵敏度高、重现性好等优点，是生物碱
含量测定的常用方法之一。
分子荧光标准曲线法测定荧光素钠
实验四分子荧光标准曲线法测定荧光素钠
一.目的
1. 掌握荧光物质标准曲线法定量测定的原理和方法。
2. 熟悉970CRT荧光光度计的使用方法。
二. 原理
碱性条件下，荧光素钠有强荧光，可以进行定性及定量分析，在低浓度范围内，发射的荧光强度与其浓度或含量成正比。
三. 步骤
1.定性分析
参数：E X = 495 nm，E M = 515 nm，E X范围430～510 nm, E M范围400～570 nm。
灵敏度、扫描速度、缝宽：3、高、5、5 nm。
取0.8 mL 荧光素钠标准溶液于试管，加入1 mL NaOH, 用去离子水冲稀至10 mL（20 mL）,摇匀。
扫描激发与发射光谱，确定最大激发与发射波长。
2.定量分析
取6支试管，按下表加入试剂
4
用去离子水冲稀至10 mL（20 mL），摇匀，用1号溶液测本底，2~5号溶液测INT，绘制标准曲线，6号溶液测定样品浓度X。
结果计算：被测液(μg/mL) = X/200/0.30
3. 酸度的影响
取3支试管，各加入0.8 mL 荧光素钠标准溶液，前二支分别加入1 mL的NaOH、HAc,用去离子水冲稀至10 mL（20 mL）,摇匀,在绘制标准曲线下测INT，比较其大小。
四、实验数据处理
1、绘制标准曲线
2、根据待测液的荧光强度，从标准工作曲线上求得其浓度，计算出试样中荧光素钠含量。
荧光素钠注射液的设备冲洗液的检测方法研究
【 关键词】 紫外一 可见分光光度 法 荧光素钠 冲洗液 残 留量
中 图分 类 号 ：Ｒ ２ ． ９ ７１ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ： １０ — ６ ３ （０ ８ ０ — ０ ７ ０ ０６２ ５ ２０） ２０５—２
Ｓｔ ｄｉｓ ｏ ｎ ｌｔ ａ ｅ ｈ ｄ ｏ ｉｓ ｔ ｒ ｏ ｅ ｕｐ ｅ ｔ ｓ ｄ ｆ ｒＦ ｕ ｒ ｓ ｅ ｎ ｕ ｅ ｎ ａ ａ ｙ ｉ ｌ ｔ ｏ ｆ ｎ ｅ ｗａ ｅ ｑ ｉ ｍ ｎ ｅ ｌｏ ｅ ｃ ｉ ｃ ｍ ｒ ｔ ｕ ｏ
ｌ ｔｏ ｕ ｎ ｉ ｔ ｎ ｉ ０ １ ｐ ｔ ｅ ａ ｅ ａ ｅ ｒ ｃ ｖ ｒ ａ ｅ ｉ ９ ．％ ． ｏ ｃｕ ｉｎ Ｔｈ ｔ ｏ ｓ ｓ ｌ ． ａ ｉ ｎ ｃ ｕ ａｅ ． ｕ ｔｂ ｅ ｉ ｆ ａ ｔ ａｉ ． ｐ ｍ． ｈ ｖ ｒ ｇ ｅ ｏ ｅ ｙ ｒ ｔ ｓ ９９ ｍｉ ｑ ｔ ｏ ｓ Ｃ ｎ ｌ ｓｏ ： ｅ ｍｅ ｈ ｄ ｉ ｉ ｅ ｒｐ ｄ ａ ｄ ａ ｃ ｒ ｔ ． ｔ ｓ ｓ ｉ ｌ ｍｐ Ｉｉ ａ ｏ ｏ ｔｏｉ ｅ ｉ ａ ｍｏ ｎ ｓ ｆ ｏ ｅ ｃ ｉ ｎ ｒ ｓ ｔｒ ｆｒｃ ｎ ｒ ｌ ｇ ｔ ｅ ｒ ｓ ｕ ｌａ ｕ ｔ ｏ ｕ ｒ ｓ ｅ ｎ ｉ ｎ ｅ ｗａｅ ． ｎ ｈ ｄ ｆ ｌ ｉ Ｋｅ ｒ ｓ Ｖ ｐ ｃ ｒｐ ｔ ｍｅｒ ； ｕ ｒ ｓ ｅ ｎ ｒｎ ｅ ｗａｅ ； ｅ ｉ ｕ ｌ ｍｏ ｎ ｓ ｙｗｏ ｄ Ｕ Ｓ ｅ ｔ ｈ ｏ ｔ ｆ ｏ ｅ ｃ ｉ ； ｓ ｔｒ ｒ ｓｄ ａ ｏ ｙｌ ｉ ａ ｕｔ
ｌ ｅ ｒ ｙｉ ｇ ｏ ｒｆ ｏｅｃ ｉ ｔｉ ｈ ａ ｇ ｆ ．５ － ４５ ５ ‘ （ｏ ｆｃｅ ｔ ＝ ．９ ９ ）， ｉ ｔ ｆｄ ｔｃｉｎ ｉ ００ ５ ｐ ｉ ａ ｔ ｓ ｏ ｄｆ ｕ ｒｓｅｎｗｉ ｎ ｔｅ ｒｎ ｅｏ ９ ５ ５ ．０ ￣ｇ ｍＬ ｃ ｅ ｉｎ － ９ ９ ７ ｌ ｅｅ ｔ ｓ ．３ ２ ｐ ｍ， ｎ ｉ ｏ ｌ ｈ ４ ｉ ｒＯ ｍｉｏ ｏ １
荧光试剂配制实验报告
一、实验目的1. 掌握荧光试剂的基本配制方法。
2. 熟悉荧光试剂的稳定性及保存条件。
3. 了解荧光试剂在实验中的应用。
二、实验原理荧光试剂是指能够在紫外光或可见光照射下，发出荧光的物质。
荧光试剂广泛应用于生物学、化学、医学等领域。
本实验主要研究荧光试剂的配制方法、稳定性及保存条件。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 荧光素钠- 磷酸盐缓冲溶液（pH 7.4）- 乙醇- 水合氯醛- 丙酮- 二甲基亚砜（DMSO）- 试剂瓶- 移液器- 荧光分光光度计2. 实验仪器：- 超净工作台- 研钵- 玻璃棒- 烧杯- 电子天平- 紫外可见分光光度计四、实验步骤1. 荧光素钠溶液的配制：- 称取0.1g荧光素钠，置于研钵中。
- 加入少量磷酸盐缓冲溶液（pH 7.4），用玻璃棒搅拌至溶解。
- 将溶解后的溶液转移至10ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲溶液定容至刻度。
- 摇匀，备用。
2. 水合氯醛溶液的配制：- 称取0.1g水合氯醛，置于研钵中。
- 加入少量乙醇，用玻璃棒搅拌至溶解。
- 将溶解后的溶液转移至10ml容量瓶中，用乙醇定容至刻度。
- 摇匀，备用。
3. 丙酮溶液的配制：- 称取0.1g丙酮，置于研钵中。
- 加入少量二甲基亚砜（DMSO），用玻璃棒搅拌至溶解。
- 将溶解后的溶液转移至10ml容量瓶中，用二甲基亚砜定容至刻度。
- 摇匀，备用。
4. 荧光试剂稳定性测试：- 分别取荧光素钠溶液、水合氯醛溶液、丙酮溶液各2ml，置于比色皿中。
- 使用荧光分光光度计，分别测定各溶液在激发波长和发射波长下的荧光强度。
- 每隔一定时间，重复测定一次，记录数据。
5. 荧光试剂保存条件测试：- 将配制好的荧光试剂分别置于不同温度（室温、4℃、-20℃）下保存。
- 在保存一定时间后，取出试剂，重复步骤4，测定荧光强度。
五、实验结果与讨论1. 荧光素钠溶液、水合氯醛溶液、丙酮溶液均能成功配制，且在紫外光或可见光照射下，发出明显的荧光。
第三章 荧光分光光度法
螯合物中金属离子的发光机理，通常是 螯合物首先通过配位体的*跃迁而被激 发，接着配位体把能量转移给金属离子，导 致d d*跃迁或f f*跃迁，最终发射的是 d*d跃迁或f*f跃迁光谱。
3.3 荧光分析的方法及影响因素 1. 荧光参数 （1）激发光谱和发射光谱 荧光的激发光谱和发射光谱是用荧光 法进行物质的定性、定量分析的基本参数 和依据。
b. 工作曲线法 先配制一系列不同浓度的标准溶液，分 别测定其荧光值，然后将减去试剂空白荧光 值的标准溶液荧光值与其相应浓度作图，即 得其工作曲线。 根据试液及试液空白荧光值，在此曲线 上即可找到试液的浓度。同时根据工作曲线 的线性情况，可以确定试液测定的最高浓度。
b. 分子的几何排布 物质的分子为平面型，且具有一定的刚 性结构，这样的分子荧光强烈。
对于顺反异构体，顺式分子的两个基团 在同一侧，由于位阻原因不能共平面，而没 有荧光。
c. 芳环上取代基的类型和位置 类型 • 有些取代基可增强荧光。如：-OH、-OR、 -NH2、-NHR、-NR2等；
•
有些取代基可减弱荧光。如：-COOH、 -C=O、-NO2、-Cl、-Br、-I等； 有些取代基影响不明显。如：-F、-SH、 -SO3H等。
不少有机化合物虽然具有共轭双键，但 由于不是刚性结构，分子处于非同一平面， 因而不发生荧光。
若这些有机化合物和金属离子形成螯合 物后，伴随着分子的刚性增强，平面结构增 大，常会发出荧光。
例如：8-羟基喹啉本身有很弱的荧光， 但其金属螯合物具有很强的荧光。这是由于 刚性和其平面性增加所致。
一般来说，能产生这类荧光的金属离子 具有硬酸型结构，如：Be2+、Mg2+、Al3+等。
•
位置 • 邻、对位取代，荧光增强；
荧光分光光度法测定水中示踪剂荧光素钠示踪剂
荧光分光光度法测定水中示踪剂荧光素钠示踪剂王志龙; 樊萍; 徐静; 李博文【期刊名称】《《世界核地质科学》》【年(卷),期】2019(036)004【总页数】6页(P232-237)【关键词】示踪剂; 荧光素钠; 荧光分光光度法; 水【作者】王志龙; 樊萍; 徐静; 李博文【作者单位】核工业北京地质研究院北京100029【正文语种】中文【中图分类】P734.4人工示踪技术在水文地质学中的应用已有相当长的历史, 1869 年人类就首次使用了化学示踪剂来找出岩溶区落水洞和泉水之间的水力联系[1]。
在岩溶水文地质研究中, 野外示踪试验是水资源管理、地下水脆弱性编图和获取水文模型物理参数的一个重要工具,是划分岩溶地下分水岭、研究岩溶水库渗漏、分析地下管道网络分布和地下水溶质运移特征的一种重要手段[2]。
示踪剂选择原则上要满足以下要求: 极易溶于水, 在水中含量极低；物理及化学性质稳定, 不与其他环境物质发生物理和化学反应；易被仪器检测, 不易被水中其他物质干扰, 灵敏度高, 且成本相对较低[3]。
以桂林寨底地下河为例, 分析得出荧光素钠和罗丹明B 在应用中吸附性的差异, 得出荧光素钠是更为理想的示踪剂[4]。
荧光素钠作为示踪剂可以用来研究铀矿地浸溶液的流速[5]。
可以采用分光光度法来测定钻井液中的示踪剂荧光素钠, 其方法检出限为0.005 mg·L-1[6]。
荧光素钠作为示踪剂使用时, 要尽量减少使用的量。
为降低荧光素钠的初始使用浓度, 需要一种检出限更低的方法对荧光素钠进行测定。
而荧光分光光度法具有灵敏度高,选择性好等特点, 因此选择采用荧光分光光度法对水中示踪剂荧光素钠进行定量测定。
1 实验部分1.1 仪器与试剂F97XP 荧光分光光度计（上海棱光技术有限公司）；乙酸钠（AR, 上海阿拉丁试剂有限公司）；碳酸钠（AR, 上海阿拉丁试剂有限公司）；邻苯二甲酸氢钾pH标准试剂（中国计量科学研究院）；混合磷酸盐pH 标准试剂（中国计量科学研究院）；硼砂pH 标准溶液试剂（中国计量科学研究院）；纯水为实验室自制去离子水, 符合GB/T 6682-2008 的要求。
荧光素钠水溶液浓度荧光光度法研究
荧光素钠水溶液浓度荧光光度法研究本文探讨了荧光素钠水溶液浓度的荧光光度法分析，根据不同浓度的荧光素钠水溶液荧光强度的差别绘制浓度标准曲线，用以未知浓度样品的分析，该方法操作简单，测试结果准确。
标签：荧光素钠水溶液；荧光强度；含量曲线前言荧光素钠是一种红棕色的荧光染料，英文名为Fluorescein sodium，中文别名水合荧光胺二钠盐，CAS号我518-47-8，分子式为C20H12Na2O5，易溶于水及乙醇，带有强的黄绿色荧光。
分子结构：由于具有易溶于水的黄绿色荧光，所以常被配成注射液用于医学诊断性眼底和虹膜血管的血管造影检查和引导肿瘤切除，也可做成示踪剂用于地质钻井液研究等。
荧光素钠水溶液使用过程中，如何快速准确地检测其浓度就是一个迫切需要解决的问题。
由于荧光分光光度法具有相对较高的灵敏性和检测下限，故本文探讨了荧光光度法分析荧光素钠水溶液浓度的方法。
1 实验部分1.1 实验目的检测未知的荧光素钠水溶液浓度实验原理荧光素钠水溶液在紫外光激发下发射出黄绿色荧光，荧光强度随水溶液的浓度变化而变化，故可以通过荧光光度计检测未知样品的荧光强度，根据荧光强度推算未知样品中荧光素钠的浓度。
1.3主要仪器与试剂主要仪器：Hitachi F-7000 荧光光度计，万分之一分析天平，250ml容量瓶10个，药匙，移液管等主要试剂：纯净水，荧光素钠标准品，未知样品1.4 实验步骤1.配制样品称取荧光素钠标准品0.20g准确至0.001g，放入100ml容量瓶中，用纯净水定容至刻度。
摇匀溶解，得试样A。
用移液管吸取试样A 1ml，于100ml容量瓶，用纯净水稀释至刻度，摇匀，得试样B。
分别用移液管吸取试样B 1ml、2ml、4ml、8ml、12ml、16ml和20ml至100ml 容量瓶中，用纯净水释至刻度，摇匀，得试样，浓度分别为20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml、320μg/ml、400μg/ml。
分子荧光标准曲线法定量测量荧光素钠的含量
分子荧光标准曲线法定量测量荧光素钠的含量实验目的：1.了解分子荧光光谱分析法的基本原理和特性；2.熟悉荧光分光光度仪的基本构造及其测量软件，掌握荧光分光光度仪的基本操作；3.掌握分子荧光光谱分析的定量测量方法。
实验原理：利用某些物质被紫外光照射后所产生的、能够反映出该物质特性的荧光以进行该物质的定性分析和定量分析，称为荧光分析，它属于光致发光。
产生荧光的必要条件是该物质分子必须具有与所照射的光线相同的频率（这与分子的结构密切有关）；且吸收了与其本身特征频率相同的能量之后的分子，必须具有高的荧光效率。
荧光分析是由试样溶液所发生的荧光的强度来测定试样溶液中荧光物质的含量。
一般多采用工作曲线法进行定量分析，然后测定试样溶液的荧光强度由试样溶液的荧光强度和工作曲线求出试样中荧光物质的含量。
在一定频率和一定强度的激发光照射下，当溶液的浓度很小同时光被吸收的分数也不太大时，稀溶液体系符合朗伯－比尔定律，即有：F = 2. 3Φf abCI0式中： F——荧光强度；Φf——荧光过程的量子化效率；a——荧光分子的吸光系数；b——吸收池的光程长度；C——荧光物质浓度；I0——入射光强度。
当入射光强度I0和吸收池的光程长度b不变时，上式可简化为：F = KC（K为常数）二氯荧光素在酸性体系中具有强的荧光特性，且在稀溶液体系中，其荧光强度和物质浓度成正比，据此可以对二氯荧光素溶液进行定量分析。
实验仪器和试剂：岛津RF-5301PC分子荧光仪及专用分析软件、四面通石英比色皿一个、10ml 刻度比色管5支；移液管（1ml及10ml）、洗耳球、洗瓶；二氯荧光素（标液）、荧光素钠（未知样）、蒸馏水。
实验步骤：(1) 样品处理，配制标液及未知样溶液：用移液管分别移取相应二氯荧光素的标液于10ml的比色管中,然后用蒸馏水分别将其稀释至10ml的刻度线,配制成不同浓度的溶液，如下表所示：10ml容量瓶瓶号编号需取的储备标液量（ml）配制的溶液浓度（µg/ml）1 0.0 0.002 0.2 0.013 0.4 0.024 0.6 0.035 0.8 0.046 1.0 0.05注：标准试样：二氯荧光素标液（C＝0.5µg/ml）；未知样：二氯荧光素待测样（2）(1)荧光光度计操作开启220V稳压电源至220V；打开主机电源开关，检查氙灯电是否开启。
荧光分光光度法测定水中示踪剂荧光素钠示踪剂
Determination of fluoresce in sodium tracer in water by fluorophotometry
渊核工业北京地质研究院袁 北京 100029冤
咱摘要暂 采用荧光分光光度法对水中示踪剂荧光素钠进行检测遥 在激发波长为 492 nm袁 发射波长 为 513 nm 时袁 荧光素钠溶液的荧光值最大遥 溶液 pH 值对水中荧光素钠的荧光值测定影响较大袁 且 用硼砂 pH 标准溶液调节水样的 pH 效果最佳遥 在 0～1.6 mg窑L-1 的浓度范围内袁 荧光素钠含量与荧光 值呈良好的线性关系遥 荧光分光光度法对水中示踪剂荧光素钠的检测具有良好的准确度和精密度袁 其 检出限为 0.000 15 mg窑L-1遥 该方法适用于海水尧 自来水尧 地下水与地热水等水中示踪剂荧光素钠含量 的测定遥
示踪剂选择原则上要满足以下要求院 极 易溶于水袁 在水中含量极低曰 物理及化学性 质稳定袁 不与其他环境物质发生物理和化学 反应曰 易被仪器检测袁 不易被水中其他物质 干扰袁 灵敏度高袁 且成本相对较低咱3暂遥 以桂林 寨底地下河为例袁 分析得出荧光素钠和罗丹 明 B 在应用中吸附性的差异袁 得出荧光素钠 是更为理想的示踪剂咱4暂遥 荧光素钠作为示踪剂 可以用来研究铀矿地浸溶液的流速咱5暂遥 可以采 用分光光度法来测定钻井液中的示踪剂荧光 素钠袁 其方法检出限为 0.005 mg窑L-1咱6暂遥
WANG Zhilong袁 FAN Ping袁 XU Jing袁 LI Bowen
渊Beijing Research Institute of Uranium Geology袁 Beijing 100029袁 China冤
荧光素钠
荧光素钠YingguangsunaFluorescein Sodium书页号：2005年版二部－377[修订]按无水物计算，含C20H10Na2O5应为98.0％～102.0％。
【性状】本品为橙红色粉末或略带金属光泽的块状物，研细后为橙红色粉末；无臭，几乎无味；极具引湿性。
本品在水中易溶，在乙醇中略溶。
【鉴别】 (3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集273图）一致。
如不一致时，可取本品0.1g，加水0.1ml，用玻棒搅拌使完全溶解，105℃干燥4小时后测定。
【检查】氯化物取本品0.10g，加水50m l使溶解，加稀硝酸1ml，摇匀，静置10分钟，使荧光素钠沉淀完全，滤过至澄清。
分取滤液二份，每份10ml，分置50ml纳氏比色管中，其中一份加水使成40ml，加硝酸银试液1.0ml，摇匀，在暗处放置10分钟，如显浑浊，滤过至澄清，取滤液加入标准氯化钠溶液7.0ml，加水至50ml，摇匀，作为对照溶液。
另一份加水使成40ml，加硝酸银试液1.0ml，加水至50ml，摇匀，作为供试品溶液。
取对照溶液和供试品溶液，在暗处放置5分钟，依法检查（附录ⅧA），供试品溶液与对照液比较，不得更浓(0.35％)。
硫酸盐取本品0.20g，加水100ml使溶解，加7.0ml稀盐酸，使荧光素钠沉淀完全，滤过至澄清。
分取滤液二份，每份25ml，分置50ml纳氏比色管中，其中一份加水使成40ml，加25%氯化钡溶液5ml，摇匀，在暗处放置10分钟，如显浑浊，滤过至澄清，取滤液加入标准硫酸钾溶液2.5ml，加水至50ml，摇匀，作为对照溶液。
另一份加水使成40ml，加25%氯化钡溶液5ml，加水至50ml，摇匀，作为供试品溶液。
取对照溶液和供试品溶液，在暗处放置10分钟，依法检查（附录ⅧB）。
供试品溶液与对照液比较，不得更浓(0.50％)。
【含量测定】照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸溶液（30∶70）为流动相；检测波长为232nm。
荧光分光光度计(分子荧光)
荧光分光光度计（分子荧光）Fluores_cence •1楼1、基本原理在室温下分子大都处在基态的最低振动能级，当受到光的照射时，便吸收与它的特征频率相一致的光线，其中某些电子由原来的基态能级跃迁到第一电子激发态或更高电子激发态中的各个不同振动能级，这就是在分光光度法中所述的吸光现象。
跃迁到较高能级的分子，很快通过振动弛豫、内转换等方式释放能量后下降到第一电子激发态的最低振动能级，能量的这种转移形式，称为无辐射跃迁。
再由第一电子激发态的最低振动能级下降到基态的任何振动能级，并以光的形式放出它们所吸收的能量，这种光便称为荧光。
荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、需样量少和方法简便等优点，它的测定下限通常比分光光度法低2~4个数量级，在生化分析中的应用较广泛。
荧光分析法是测定物质吸收了一定频率的光以后，物质本身所发射的光的强度。
物质吸收的光，称为激发光；物质受激后所发射的光，称为发射光或荧光。
如果将激发光用单色器分光后，连续测定相应的荧光的强度所得到的曲线，称为该荧光物质的激发光谱（ex citation spectrum）。
实际上荧光物质的激发光谱就是它的吸收光谱。
在激发光谱中最大吸收处的波长处，固定波长和强度，检测物质所发射的荧光的波长和强度，所得到的曲线称为该物质的荧光发射光谱，简称荧光光谱（fluorescence spectrum）。
在建立荧光分析法时，需根据荧光光谱来选择适当的测定波长。
激发光谱和荧光光谱是荧光物质定性的依据。
某些物质的分子能吸收能量而发射出荧光，根据荧光的光谱和荧光强度，对物质进行定性或定量的方法，称为荧光分析法（fluoresc ence analysis）。
对于某一荧光物质的稀溶液，在一定波长和一定强度的入射光照射下，当液层的厚度不变时，所发生的荧光强度和该溶液的浓度成正比，这是荧光定量分析的基础。
2、检测荧光的仪器测定荧光可用荧光计和荧光分光光度计，其二者的结构复杂程度不同，但其基本结构是相似的。
Nanodrop应用-分光光度法对工业染色剂的定量分析
NanoDrop 2000/2000c应用分光光度法对工业染色剂的定量分析Richard W. Beringer and Andrew F. Page Thermo Fisher Scientific, Wilmington, DEIntroduction 介绍Quality control of industrial dye additives is imperative to ensure the reproducibility of dye color and appearance in the colorant’s final application. The Thermo Scientific NanoDrop 2000 UV-Vis Spectrophotometer offers a rapid, fully customizable method for checking batch quality for proper pigment concentration prior to distribution to the product’s end user. The concentrations of most aqueous dyes and pigments can be assessed using the full ultraviolet and visible spectrum capabilities of the NanoDrop TM2000.为了确认染色的重复性和着色剂在最终应用中的表现，工业染料添加剂的质量控制非常必要。
赛默飞世尔的NanoDrop 2000紫外可见分光光度计提供一个快速、顾客自定义的方法，在产品出售给最终用户之前，预先成批检测的染料在一个合理的浓度范围。
大多数水溶性染料和天然色素的浓度可以用覆盖紫外和可见区域的NanoDrop 2000紫外分光光度计进行测试。
荧光分光光度计(分子荧光)
荧光分光光度计（分子荧光）Fluores_cence •1楼1、基本原理在室温下分子大都处在基态的最低振动能级，当受到光的照射时，便吸收与它的特征频率相一致的光线，其中某些电子由原来的基态能级跃迁到第一电子激发态或更高电子激发态中的各个不同振动能级，这就是在分光光度法中所述的吸光现象。
跃迁到较高能级的分子，很快通过振动弛豫、内转换等方式释放能量后下降到第一电子激发态的最低振动能级，能量的这种转移形式，称为无辐射跃迁。
再由第一电子激发态的最低振动能级下降到基态的任何振动能级，并以光的形式放出它们所吸收的能量，这种光便称为荧光。
荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、需样量少和方法简便等优点，它的测定下限通常比分光光度法低2~4个数量级，在生化分析中的应用较广泛。
荧光分析法是测定物质吸收了一定频率的光以后，物质本身所发射的光的强度。
物质吸收的光，称为激发光；物质受激后所发射的光，称为发射光或荧光。
如果将激发光用单色器分光后，连续测定相应的荧光的强度所得到的曲线，称为该荧光物质的激发光谱（ex citation spectrum）。
实际上荧光物质的激发光谱就是它的吸收光谱。
在激发光谱中最大吸收处的波长处，固定波长和强度，检测物质所发射的荧光的波长和强度，所得到的曲线称为该物质的荧光发射光谱，简称荧光光谱（fluorescence spectrum）。
在建立荧光分析法时，需根据荧光光谱来选择适当的测定波长。
激发光谱和荧光光谱是荧光物质定性的依据。
某些物质的分子能吸收能量而发射出荧光，根据荧光的光谱和荧光强度，对物质进行定性或定量的方法，称为荧光分析法（fluoresc ence analysis）。
对于某一荧光物质的稀溶液，在一定波长和一定强度的入射光照射下，当液层的厚度不变时，所发生的荧光强度和该溶液的浓度成正比，这是荧光定量分析的基础。
2、检测荧光的仪器测定荧光可用荧光计和荧光分光光度计，其二者的结构复杂程度不同，但其基本结构是相似的。
示踪实验报告
1、前言排泥库位于九区采选场地的西部，与九区采选场地一山之隔，与板下屯之间以板兄1号洼地相隔，整个库区大致呈“u”型，库址为已开采结束的平果铝土矿九区41号矿体所在洼地，有采矿时修建的简易道路直通9、10号采矿场，西北侧有简易公路通向果化镇那荣村。
该库区底部地势较平坦，四周为岩溶山峰，并由岩溶山峰隔成的狭口天然将该库分为三个岩溶洼地。
库区汇水面积3.08 km2，总库容8010万m3，有效库容6969万m3，库底洼地最底标高320m，最终堆积标高为420m，其矿泥最大堆深为100m，库等级为二级库。
区域岩溶发育，水文地质条件复杂。
为查明场区内外地下水的水力联系特征，按技术要求，勘察设计研究院试验室在已完成区域水文地质调查及库区综合工程地质测绘工作后，于2008年8月28日至9月7日进行了排泥库地下水示踪试验工作。
试验中，共采取1557件样品计4671别点次分别进行了钼、锌、萤光素钠的测定，绘制时间浓度曲线63幅，提交分析报告表63份。
本次试验钼、萤光素钠在现场检测完成；因野外条件所限，另取样分别以硝酸固定后，运回长沙做锌的测定。
2、多元示踪试验综述2.1 试验目的1）查明场内、外的地下水水力联系情况；2）估算地下水流速，确定地下水流向的主导方向；3）估测库区渗漏污染的影响范围。
2.2 示踪剂的选择与确定示踪剂选择的原则为无毒，自然本底低，不受围岩干扰，化学性能稳定，不改变地下水的运移方向，易检测，灵敏度高及成本相对低。
根据区域水文地质调查情况，结合以往的示踪试验经验，并按上述原则，本次试验决定采用钼酸铵、萤光素钠和氯化锌三种试剂。
试验前，对三种示踪剂在测区内的接收点分别进行了本底调查，证明采用此三种试剂是较理想的。
2.3 示踪剂投放量的确定示踪剂投放量按下列因素考虑：1）示踪剂投放后，经扩散、运移到达饮用水源点时，其示踪剂浓度不超过我国饮用水标准的有关规定；2）易于被所选用的检测方法检测含量不低于仪器的检测灵敏度。
荧光素钠的含量测定实验报告
荧光素钠的含量测定实验报告
一、实验目的
本实验旨在通过紫外光谱法测定荧光素钠的含量，掌握紫外分光光度计的操作方法和测量原理。
二、实验原理
荧光素钠是一种荧光染料，其分子中含有苯环和吡咯环结构，能够吸收紫外线并发生荧光现象。
根据比尔-朗伯定律，物质的吸收与其浓度成正比，因此可以通过测量荧光素钠溶液在一定波长下的吸光度来确定其浓度。
三、实验步骤
1. 预处理：将0.01mol/L NaOH溶液与0.01mol/L HCl溶液混合调节pH值为7.0±0.2。
2. 取约1g荧光素钠加入50mL pH=7.0±0.2的缓冲液中，振荡均匀后过滤。
3. 取适量稀释后的荧光素钠溶液（λmax=330nm）置于紫外分光光度计中进行扫描，记录吸收曲线。
4. 以330nm处吸收峰为基准波长，在该波长下测定不同浓度荧光素钠溶液的吸光度，制作标准曲线。
5. 用未知浓度荧光素钠溶液在330nm处测定吸光度，并根据标准曲
线计算出其浓度。
四、实验结果
1. 吸收曲线
2. 标准曲线
3. 未知样品的含量计算
五、误差分析
1. 实验中可能存在的误差包括仪器误差、人为操作误差和荧光素钠样品的纯度问题等。
2. 在实验过程中，应注意操作规范，避免出现不必要的误差。
六、结论
通过本次实验，我们成功地利用紫外分光光度计对荧光素钠进行了含量测定，并得到了较为准确的结果。
同时也加深了我们对紫外分光光度计原理和操作方法的理解。
荧光分光光度法测定荧光素钠的含量
荧光分光光度法测定荧光素钠的含量一、实验目的1.学习荧光分光光度法测定荧光素钠的分析原理。
2.掌握荧光分光光度计的操作技术和测定荧光素钠的方法。
二、实验原理荧光分析法,是以溶液中物质分子对光的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。
常温下,处于基态的分子吸收一定的紫外可见光的辐射能成为激发态分子,激发态分子通过无辐射跃迁至第一激发态的最低振动能级,再以辐射跃迁的形式回到基态,发出比吸收光波长长的光而产生荧光。
在稀溶液中,荧光强度I F 与物质的浓度c 有以下的关系:当实验条件一定时,荧光强度与荧光物质的浓度成线性关系:这是荧光光谱法定量分析的理论依据。
三、仪器及试剂1.仪器960荧光分光光度计;LC-UV 紫外检测器;微量进样器2.试剂①二氯荧光素(分析纯;②荧光素钠四、操作步骤1.标准溶液配制准确称取0.05g 二氯荧光素标样,配制成2500ml 溶液,则此溶液浓度为0.05μm/mL ,分别移取此溶液2.0ml 、4.0ml 、6.0ml 、8.0ml ,于25ml 容量瓶中,bcI I F εφ0303.2=Kc I F =并用蒸馏水稀释至刻度,摇匀后,待测定各标准溶液的荧光强度。
2.荧光强度测定(1荧光光度计操作开启220V稳压电源至220V;打开主机电源开关。
检查氙灯电是否开启。
(2二氯荧光素发光谱的绘制,参数设置如下:①设定纵坐标②设定灵敏度;③设定扫描速度;④发射波长EMISSION Wavelength 250.0 nm;⑤激发波长范围200-350 nm;⑥将某一浓度的二氯荧光素标液置于试样池中;⑦扫描得到激发光谱。
(3标准溶液及样品的测定,参数设置如下:①设定纵坐标②设定灵敏度;③设定扫描速度;④设定激发波长EXCITION Wavelength 496.0nm(从激发光谱曲线中得到;⑤发射波长范围EMISSION Wavelength 518nm;⑥将1号标准溶液放入试样池中;⑦扫描得到荧光光谱。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
荧光分光光度法测定荧光素钠的含量
一、实验目的
1.学习荧光分光光度法测定荧光素钠的分析原理。
2.掌握荧光分光光度计的操作技术和测定荧光素钠的方法。
二、实验原理
荧光分析法，是以溶液中物质分子对光的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。
常温下，处于基态的分子吸收一定的紫外可见光的辐射能成为激发态分子，激发态分子通过无辐射跃迁至第一激发态的最低振动能级，再以辐射跃迁的形式回到基态，发出比吸收光波长长的光而产生荧光。
在稀溶液中，荧光强度I F 与物质的浓度c 有以下的关系：
当实验条件一定时，荧光强度与荧光物质的浓度成线性关系：
这是荧光光谱法定量分析的理论依据。
三、仪器及试剂
1．仪器
960荧光分光光度计；
LC-UV 紫外检测器；
微量进样器
2．试剂
bc
I I F εφ0303.2=Kc
I F =
①二氯荧光素（分析纯）；
②荧光素钠
四、操作步骤
1.标准溶液配制
准确称取0.05g二氯荧光素标样，配制成2500ml溶液，则此溶液浓度为
0.05μm/mL，分别移取此溶液2.0ml、4.0ml、6.0ml、8.0ml，于25ml容量
瓶中，并用蒸馏水稀释至刻度，摇匀后，待测定各标准溶液的荧光强度。
2.荧光强度测定
(1)荧光光度计操作
开启220V稳压电源至220V；
打开主机电源开关。
检查氙灯电是否开启。
(2)二氯荧光素发光谱的绘制，参数设置如下：
①设定纵坐标
②设定灵敏度；
③设定扫描速度；
④发射波长EMISSION Wavelength 250.0 nm；
⑤激发波长范围200-350 nm；
⑥将某一浓度的二氯荧光素标液置于试样池中；
⑦扫描得到激发光谱。
(3)标准溶液及样品的测定，参数设置如下：
①设定纵坐标
②设定灵敏度；
③设定扫描速度；
④设定激发波长EXCITION Wavelength 496.0nm(从激发光谱曲线中)得
到；
⑤发射波长范围EMISSION Wavelength 518nm；
⑥将1号标准溶液放入试样池中；
⑦扫描得到荧光光谱。
仪器开始扫描，得到1号标准溶液的荧光强度。
其余4各标准溶液和样品液只要重复上述⑥⑦操作，就可以分别得到它们的荧光光谱。
按各标液的荧光强度做出I-C工作曲线。
五、数据记录及计算
1.列表
2.工作曲线的绘制。