石蜡切片方法

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石蜡切片制作流程

石蜡切片制作流程

石蜡切片制作流程以石蜡切片制作流程为标题,写一篇文章。

石蜡切片制作是一项常见的实验技术,在生物学、医学和材料科学等领域广泛应用。

石蜡切片可以用于显微镜下的观察和分析,能够提供关于细胞和组织结构的详细信息。

下面将介绍一下石蜡切片的制作流程。

1. 组织固定:首先,需要从感兴趣的样本中取得组织样本,并将其进行固定。

固定是为了保持组织的形态结构和化学成分,常用的固定剂有福尔马林、乙醛等。

固定过程中,需要确保样本完全浸泡在固定液中,通常需要数小时至数天的时间,以确保组织被充分固定。

2. 脱水:固定后的组织样本需要进行脱水处理,以去除其中的水分。

脱水是将样本中的水分逐渐替代为有机溶剂,常用的有乙醇、丙酮等。

通常采用递增浓度的有机溶剂,从低浓度逐渐提高到高浓度。

每个浓度的脱水液中,样本需要浸泡一定的时间,以确保脱水彻底。

3. 渗透:脱水后的组织样本需要进行渗透处理,以使其与石蜡更好地结合。

渗透剂通常为石蜡溶液,可以将样本浸泡在石蜡溶液中,以使其逐渐渗透进入组织内部。

渗透过程中,需要注意控制温度和时间,以确保渗透均匀。

4. 包埋:渗透后的组织样本需要进行包埋处理,即将其嵌入到石蜡中。

首先,将组织样本放置在石蜡模具中,并加入适量的石蜡。

然后,将模具放入石蜡包埋机中,利用加热和真空等处理,使石蜡与组织样本充分结合。

包埋过程中需要严格控制温度和时间,以确保石蜡固化完全。

5. 切片:包埋后的组织样本需要进行切片处理,以获取薄片供观察。

首先,使用切片机将石蜡块切割成薄片。

然后,将薄片置于载玻片上,并加热使其与载玻片结合。

最后,使用刮片等工具将石蜡薄片修整成所需的形状和大小。

6. 然后,对切片进行染色处理,以增强对组织结构的观察。

常用的染色方法有血液学染色、免疫组化染色等。

染色后,可以使用显微镜观察和分析切片中的细胞和组织结构。

总结起来,石蜡切片制作流程包括组织固定、脱水、渗透、包埋、切片和染色等步骤。

每个步骤都需要严格控制条件和时间,以确保制作出高质量的石蜡切片。

石蜡切片的主要步骤

石蜡切片的主要步骤

石蜡切片的主要步骤石蜡切片是一种常用的制备薄片的技术,广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域。

本文将介绍石蜡切片的主要步骤,并详细说明每个步骤的操作方法和注意事项。

1. 样品固定和处理在进行石蜡切片之前,首先需要对待切样品进行固定和处理。

固定样品的方法可以根据实验的需要选择,常用的有乙醛固定、冰醋酸固定和福尔马林固定等。

处理样品的方法也根据实验目的而定,可以包括染色、脱水、透明化等步骤,以便更好地观察和研究样品。

2. 包埋将处理好的样品包埋在石蜡中,以便进行切片。

首先,将样品放入石蜡溶液中,使其充分浸泡。

然后,将石蜡溶液转移到恒温水浴中,使其逐渐固化。

在固化过程中,要确保样品均匀分布在石蜡中,避免出现气泡和空洞。

3. 切片切片是石蜡切片过程中最关键的一步。

首先,将固化的石蜡块从模具中取出,并放置在切片机的夹持装置上。

然后,调整切片机的切片厚度和速度,根据需要选择合适的参数。

接下来,使用切片刀将石蜡块切割成薄片。

在切割过程中,要保持手稳定,避免切片厚度不均匀或出现断层。

4. 切片取片切片切割完成后,需要将切片从切片刀上取下。

首先,使用镊子将切片从切片刀上小心取下,避免损坏或弯曲切片。

然后,将切片放置在预先准备好的载玻片上。

在放置切片时,要注意避免气泡的产生,可以使用专门的工具如细管吸气来帮助排除气泡。

5. 去除石蜡和染色切片取片后,需要将切片上的石蜡去除,并进行染色处理。

首先,将切片放入去石蜡剂中,使其充分浸泡。

然后,将切片转移到浸泡染色剂中,进行染色处理。

在去石蜡和染色过程中,要注意时间控制和温度控制,以确保染色效果和切片质量。

6. 封片和封边染色完成后,需要将切片做成封片,以保护切片并便于保存。

首先,将切片用透明胶片或玻璃片覆盖。

然后,使用封片胶或封片胶带将切片和覆盖物固定在一起。

接下来,将切片的边缘进行封边处理,以避免切片脱落或污染。

7. 干燥和贴标封片完成后,需要将切片进行干燥处理,并进行贴标。

石蜡切片详细步骤

石蜡切片详细步骤

石蜡切片1.仪器石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。

2. 试剂FAA固定液(70%酒精90ml、冰醋酸5ml、福尔马林5ml)、10%番红水溶液、0.5%固绿(用95%的酒精配制)、酒精(100%、95%、80%、70%、50%)、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。

3.取材幼嫩的油菜植株叶片和茎4.方法与步骤(参照)1.固定:FAA固定液固定48小时以上。

2.脱水:50%酒精→70%酒精→83%酒精→95%酒精→100%酒精→100%酒精。

每级2h。

100%酒精中1.5h。

其中70%酒精处可长期保存。

3.透明:1/2二甲苯+1/2无水乙醇 (2h) →纯二甲苯(1.5h) →纯二甲苯(1.5h)4.浸蜡:将处理的材料置于1/2石蜡(固体粉末状)+1/2二甲苯中,40℃烘箱敞口过夜。

5.包埋:先提升恒温箱的温度至60℃,换纯蜡3次,每次1-2h,用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒,置于45-60℃的烫板上,倒入材料,摆放好材料,把标签(正面向外置于底部),补足石蜡,倒好后轻轻的置于冷水盆中,注意底面要接触盆中凉水,待石蜡全部凝固后可取出晾干,也可在凉水盆中放置过夜。

6.切片对包埋的材料进行修块、粘块、整修后,保证材料四周都有石蜡包围。

但不可太多。

切面的上、下边平行。

用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑,并迅速将石蜡块四周的碎屑烫平,使石蜡块牢固地粘在台木上。

检查切片机,安装切片刀、调整好刀的角度,调整石蜡块与刀口之间的角度与位置后开始切片。

7.粘片将粘贴剂置簿玻片上,再取切片浮置粘片剂上,然后置烘片台上,使切片展开烫平,材料不现皱纹为度。

最后将切片依次排好,用滤纸吸去多余水分,同时以记号笔在玻片上编号,放入温箱中烘干,温度30~40℃中过夜。

8.脱蜡脱蜡用二甲苯,把烤好的载玻片放于盛二甲苯的染缸中:纯二甲苯(10-20min)→纯二甲苯(5-10min)9.染色将纯二甲苯脱蜡完全的材料,1/2 二甲苯十1/2纯酒精→100%酒精→95%酒精→85%酒精→70%酒精→50%酒精→1%番红染色(4h以上) →50%酒精→70%酒精→85%酒精→95%酒精→0.5%固绿(1min)→95%酒精→100%酒精→100%酒精(未注明时间各级均为3min)10.胶封滴加加拿大树胶封藏。

石蜡切片的主要制备程序

石蜡切片的主要制备程序

石蜡切片的主要制备程序
石蜡切片的主要制备程序可以概括为以下几个步骤:
1. 准备样品:选择需要切片的样品,如组织样本、细胞样品等,并采取相应的固定、处理和染色等预处理步骤,以保证样品的稳定性、可观察性和对比度。

2. 材料准备:准备好所需的石蜡、切片盒、切片刀、载玻片等材料,并进行清洁和消毒处理,以避免污染和交叉感染。

3. 石蜡浸透:将处理好的样品转移到石蜡中进行浸透。

首先将样品置于温度逐渐升高的浸透剂(如正己烷)中,以去除组织内水分和其他溶质,然后置于石蜡中进行浸透。

4. 切片制备:将石蜡浸透的样品固定于切片盒中,将石蜡块剪碎成适当大小,并放置在切片刀的刀脊上。

调整切片机参数(如温度、角度、速度等),并逐个切割出薄片。

5. 切片贴片:将切好的薄片浮于温水中或使用其他方法,如电离子器、热平台等,以使切片展平并附着于载玻片上。

6. 干燥固定:将切片连同载玻片一起进行干燥固定处理,以去除水分并保持切片的形态稳定。

7. 切片染色:根据实验需求,对切片进行适当的染色处理(如组织学染色、免疫组化染色等),以增强样品的可视化效果和区分感兴趣的结构。

8. 封片封装:将切片封装至封片盖玻片上,使用透明化导电胶或其他封片剂固定切片,并尽量排除气泡、保证封片质量。

9. 切片质控:对制备好的切片进行质量控制,使用显微镜观察和评估切片的清晰度、结构完整性、染色效果等。

最后,制备完成的石蜡切片可以用于显微镜观察、组织形态分析、病理学研究等应用。

需要注意的是,在整个制备过程中,应遵循标准实验操作规程、注意安全,以及依据实验要求进行相应的优化和调整。

石蜡切片步骤

石蜡切片步骤

石蜡切片基本步骤(一)取材和固定根据实验目的选择材料。

将整个虫体或虫体的内部器官(如肠道、马氏管、唾液腺等)取出后,立即投入固定液。

取材大小:0.5cm×0.5 cm×0.2或者1.0 cm×1.0 cm×0.2,厚度不宜超过3mm。

固定液:2.5%的戊二醛固定液,Bouin氏液,10%甲醛等。

固定时间:4ºC固定24小时。

注意事项:取材:1.勿使组织块受挤压切取组织块所用刀、剪要锋利,切割时不可来回切割。

夹取组织时,镊子要轻,切勿挤压,以免损伤组织。

取材时,组织块可稍大一点,以便在固定后,将组织块的不平整部分修去。

2.选好组织块的切面应熟悉器官组织的组成,并根据观察目的来确定纵切或横切。

3.保持材料的清洁组织块上如有血液、污物、粘液、食物等,先用生理盐水冲洗干净,再入固定液。

4.切除(清除)不需要的部分特别是组织周围的脂肪等,应尽可能清除掉,以免影响以后的程序和观察。

固定:1.材料新鲜取出组织后须立即固定。

否则时间相隔过久,体积就要收缩变形或发生自溶现象。

2.抽气生物组织常有气体的存在,使材料不能沉入固定液中,抽气使得固定液有效渗入。

真空泵抽气或者用空针管抽气。

昆虫整体固定,固定前用解剖针刺数个小孔,以利用固定液渗透。

3.固定剂用量一般为组织体积的10~20倍。

勿使组织贴于瓶底或瓶壁,以免影响固定剂的渗入。

4.避免阳光尽可能避免接触阳光以免失去固定作用。

5.加速固定轻轻摇动盛器使组织移动有利于固定液渗入,对长期固定的标本可经常更换固定液。

(二)洗涤2.5%戊二醛固定液固定的组织:0.2M, pH7.2磷酸缓冲液漂洗三次,每次10minBouin氏固定液固定的组织:直接入70%酒精更换数次即可脱水,注意苦味酸。

甲醛固定的组织:直接投入50%或70%酒精脱水,不经水洗。

但如果在甲醛中时间过长,则仍应当用流水冲洗。

陈旧性标本和混合性固定液应及时洗涤,有利于脱水、切片和染色。

石蜡切片法

石蜡切片法

包埋过程中易出现的问题及解决办法
问题:包埋后的石蜡块应为均匀半透明状,有时出现白色浑浊 结晶(像雪花一样)部分,这样在切片时就有妨碍,不易切出 薄的切片。 原因:①组织内部或石蜡中混有透明剂;②脱水不干净;③石 蜡本身品质不良;④组织块移入纸盒时动作太慢,周围的石蜡 已成凝固状态;⑤冷却用水温度不够低,石蜡凝固太慢。 解决办法:属于前三个原因者应在包埋之前就须注意;属于后 二个原因者,可将包埋块再投入Ⅲ蜡中熔化后重新包埋,但必 须注意熔化包埋过的石蜡块的时间不宜过久。
脱水(常用脱水剂:乙醇;脱水原则:低浓度到高浓度)(目的?) 脱水时间:视材料的性质、大小而定 小鼠肝脏:在各级AL中停留0.5-1h; 植物叶片:在各级AL中停留2-4h; 注意:脱水应彻底,否则与二甲苯混合后混浊,必须倒回重脱水;如需过夜, 则停留在70%酒精中。
二、实验步骤(2)
透明(置换) 常用透明剂:二甲苯; 透明原则:低浓度到高浓度 (½ 二甲苯+ ½ 100%酒精 二甲苯 二甲苯) 透明时间:小鼠肝脏每级停留0.5-1h;植物叶片每级停留1-3h。
染色原理--化学作用
化学作用的主要理论根据是染色剂的性质可分为酸性、碱性和 中性染色剂,而动、植物的细胞内—般也可区分为酸性(阴离子) 和碱性(阳离子)部分。当碱性染色剂溶液中的有色部分成为阳 离子时,就能与细胞的阴离子(酸件部分)较牢固地结合,当酸 性染色剂溶液中的有色部分成为阴离子时,就能与细胞内的阳 离子(碱性部分)较牢固地结合。 例如,细胞核,尤其是核内的染色质,主要由核酸组成,是酸 性的组成成分.故和碱性染色剂(苏木精)的亲和力很强,易于 着色。细胞质含碱性物质,故和酸性染色剂(伊红、曙红)的亲 和力很大,易于着色。
甲醛-醋酸-酒精液(FAA) 50%或70%酒精 90ml 冰醋酸 5ml 甲醛 5ml 特点:过去称”标准固定液“或”万能固定液“;是 组织形态中常用的固定液;同时兼作保存液。是植物 制片技术中较为良好的固定液和保存液。除单细胞和 丝状藻类外,均可用此液固定.也通用于昆虫和甲壳 类的固定。

一种叶片石蜡切片方法

一种叶片石蜡切片方法

一种叶片石蜡切片方法一种常用的叶片石蜡切片方法是冷冻切片法。

首先,将待切割的叶片固定在切片模具中。

可以使用细胞胶或石蜡胶等物质将叶片粘贴在模具上,确保叶片在切割过程中保持平整。

接下来,将模具放入冷冻盒中,使用液氮快速冷冻。

冷冻的目的是将叶片迅速冻结,增加叶片的硬度和脆性,方便后续的切割操作。

冷冻后,取出切片模具,使用切片机进行切割操作。

切片机的切片刀片应当具有较高的锐度和强度,以保证切割的顺利进行。

在切割过程中,可以通过调整切片机的刀盘速度和模具进给速度来优化切割效果。

切割完成后,将切割好的叶片切片放置在甲醇或IPA等溶剂中进行脱蜡处理。

脱蜡的目的是去除石蜡胶固定剂,并使组织切片充分暴露。

脱蜡完成后,将切片转移到水中进行洗涤,去除残留的脱蜡剂和杂质。

此外,可使用0.1%的硼水洗涤切片,以去除残留的石蜡和终点固定切片。

完成洗涤后,将切片通过脱水剂梯度(如70%、85%、95%、100%的酒精)浸泡脱水。

脱水的目的是逐步将水分从切片中除去,使切片适应后续的透明和包埋操作。

脱水完成后,将切片通过透明剂梯度(如xylene或苯鼎处理切片,以润湿切片,并使切片具有透明效果。

最后,在包埋模具中倒入熔点与切片温度相适应的石蜡,将切片转移到模具中,至少浸泡2次,以确保切片完全被包埋。

完成包埋后,将石蜡固化,切片模具从温度逐渐升高的热架上取出,冷却至室温。

在清洗模具并去除冷凝的石蜡后,用石蜡刀切割石蜡块,由此获得所需的叶片石蜡切片。

总结起来,叶片石蜡切片方法主要包括固定叶片、冷冻固化、切割、脱蜡、洗涤、脱水、透明和包埋等步骤。

这些步骤的顺序和细节关系到切片质量和实验结果的准确性,因此,在进行叶片石蜡切片操作时需要严格按照步骤进行,以获得满意的切片结果。

石蜡切片的基本操作流程

石蜡切片的基本操作流程

石蜡切片的基本操作流程石蜡切片是一种常用的组织学技术,用于制备组织切片,以便进行显微镜观察和研究。

以下是石蜡切片的基本操作流程:1. 组织固定:首先,将待切片的组织标本进行固定,以保持组织结构的完整性和稳定性。

常用的固定剂包括福尔马林、酒精和乙醛等。

固定时间的长短取决于组织的大小和类型,一般为数小时至数天。

2. 组织去水化:固定后的组织需要去除固定剂并脱水,以防止切片过程中的破损和变形。

通常采用逐渐增加乙醇浓度的脱水步骤,常见的乙醇浓度为70%、80%、90%和100%。

3. 组织浸渍:脱水后,组织需要进一步浸渍到石蜡中,以增加组织的硬度和支持性。

首先将组织放入浸渍剂中,如甲醛或乙醇中的苯麻油,然后逐渐增加石蜡浓度,常见的石蜡浓度为50%、70%和100%。

4. 组织包埋:在组织浸渍后,将组织放入包埋模具中,然后倒入熔化的石蜡,使其完全包裹住组织。

包埋完成后,将模具放入冷却台或冷冻器中,使石蜡迅速固化。

5. 石蜡切片:将冷却固化的石蜡块从模具中取出,使用切片机将其切割成薄片。

切片机通常配有刀片、切片夹和切片盒等工具,切片时需要注意切片的方向和角度,以获取最佳的切片效果。

6. 切片染色:切片完成后,可以对切片进行染色,以便更好地观察和分析组织结构和细胞形态。

常用的染色方法包括血液染色、组织染色和免疫组化染色等。

7. 切片封片:染色后,将切片放置在载玻片上,并使用透明的封片剂将其覆盖。

封片剂可以保护切片,防止切片脱落和变形,并提高显微镜观察的清晰度。

8. 切片观察:最后,将封片的切片放置在显微镜下进行观察和分析。

可以使用不同的显微镜镜头和放大倍数来观察组织细节和细胞结构,同时可以使用图像分析软件对切片图像进行处理和测量。

总体而言,石蜡切片的基本操作流程包括组织固定、去水化、浸渍、包埋、切片、染色、封片和观察等步骤。

每个步骤都需要严格控制条件和操作技巧,以确保获得高质量的组织切片用于研究和诊断。

一种叶片石蜡切片方法

一种叶片石蜡切片方法

一种叶片石蜡切片方法叶片石蜡切片是一种常用的组织学技术,用于制备植物叶片的组织切片,以便进一步观察和研究植物组织的细胞结构和生理特性。

下面我们将介绍一种常用的叶片石蜡切片方法。

首先,需要准备的材料和试剂包括植物叶片样品、石蜡、甲苯、乙醇,还有显微镜玻片和载玻片等。

1. 取一片健康的植物叶片,将叶片剪下并迅速放入甲醇中,以停止其代谢过程并保持组织形态。

2. 用甲苯进行脱水。

将样品在室温下脱水处理,首先使用70%乙醇浸泡5-10分钟,然后使用95%乙醇浸泡10-15分钟,最后使用100%乙醇浸泡2-3次,每次浸泡15分钟。

3. 渗透处理。

将脱水后的样品放入50%石蜡和50%甲苯的混合液中,放置于室温下,持续时间视样品大小而定,一般是数小时至一晚。

4. 嵌入处理。

将样品迅速移入100%石蜡中,然后放入预先加热的熔化石蜡中,保持温度在60-70摄氏度之间。

尽量避免石蜡中出现气泡。

5. 切片。

将嵌入好的组织块放入切片机中,用刀片切割组织块,厚度一般在5-15微米之间。

6. 切片浸泡。

用甲苯将切片从切片刀上漂移到预先加热的水浴中,水温一般为40-50摄氏度。

使切片完全展平。

7. 取片和上片。

使用显微镊子将切片从水浴中取出,放在显微镜玻片上,然后将载玻片轻轻覆盖在切片上。

用手轻轻压实,以确保切片紧密粘附在玻片上。

8. 干燥和嵌片。

将上片的载玻片放入150摄氏度的烘箱中干燥,直至石蜡完全固化。

使用橄榄油将玻片嵌入到显微镜玻片中,然后用适当的胶水封口。

以上就是一种常用的叶片石蜡切片方法。

通过这个方法制备的叶片切片可以用于各种显微技术,如细胞染色、原位杂交、免疫组化等,以进一步研究植物组织的细胞结构和生理特性。

免疫组化染色(石蜡切片)操作步骤及结果分析方法(精髓版)

免疫组化染色(石蜡切片)操作步骤及结果分析方法(精髓版)

免疫组化染色(石蜡切片)操作步骤及结果分析方法(精髓版)免疫组化染色(石蜡切片)操作步骤及结果分析方法一、原理及应用免疫组化,简单说是用标记的抗体对组织中相应抗原进行定位、定性和部分定量的分析。

二、操作步骤:(1)将石蜡组织切片置于65°C恒温箱,烤片1h左右。

(2)脱蜡:二甲苯I 10min→二甲苯II 10min →梯度酒精(由高到低)各5min。

(3)1×PBS 洗涤3次,每次 5min。

(4)0.5% Triton X-100通透(PBS配制),目的是使抗体能够充分地进入胞内进行结合反应。

Triton X-100 可以溶解细胞膜、细胞核膜、细胞器膜上的脂质而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆和胞核内,这样抗体就能顺利进入胞内与相应抗原结合。

当然了,如果检测的是膜抗原无需通透,忽略该步骤。

(4)抗原修复:使用柠檬酸盐缓冲液进行抗原修复,微波炉微波高火 3min,之后转成低火 15-30min。

注:福尔马林或多聚甲醛固定,会导致蛋白交联,而解交联的过程称为抗原修复。

所以冰冻切片不需要抗原修复!!抗原修复方法有多种,一般包括两大类:酶抗原修复(胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K) 热抗原修复(高压蒸汽法、微波法、水浴加热法)。

微波法最为常用。

(5)1×PBS 洗涤3次,每次5min。

(6)3% H2O2,室温孵育30min,目的是灭活内源性过氧化物酶。

(7)1×PBS 洗涤3次,每次5min。

(8)使用1% BSA 进行室温封闭30min,用于封闭非特异性抗原表位。

(9)根据抗体说明书使用合适浓度的特异性一抗,4°C 湿盒中静置过夜孵育。

(10)次日取出切片,室温下复温30min。

(11)1×PBS 洗涤3次,每次5min。

(12)按照免疫组化二抗试剂盒说明书操作。

(13)DAB 显色:DAB 显色液按说明书配制,使用时滴加到血管组织上,显微镜下观察并计时,待目的蛋白显色呈棕黄色时结束显色。

实验八石蜡切片法一

实验八石蜡切片法一

• 包埋——修块——切片——贴片
.
6
脱蜡与复水
• 二甲苯——二甲苯——二甲苯/无水乙醇 (1/1)——无水乙醇 ——无水乙醇——95% 乙醇——80%乙醇——70%乙醇——50% 乙醇——蒸馏水。
• 以上处理各2-3min。
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7
染色与观察
• 1%苏木色精(5min)——水洗——0.5%盐 酸分色(数秒)——水洗——0.4%氨水蓝 化——水洗( 5min )——70%酒精—— 80%酒精——1%伊红(95%酒精溶解)— —95%酒精——95%酒精——100%酒精— —100%酒精——酒精/二甲苯——二甲苯— —二甲苯——中性树胶封片。
镊子、烘箱、离心管或青霉素瓶子。 • 2、试剂 • 苏木色精、伊红、二甲苯、中性树胶、酒精、石蜡、氨水、
盐酸、蛋清、甘油。 • 3、材料 • 各类你感兴趣的固定标本。
.
4
四、实验步骤
• 1、取材 • 2、固定 • 3、漂洗 • 4、脱水 • 5、透明 • 6、透蜡 • 7、包埋 • 8、修块 • 9、切片 • 10、染色
.
5
取材到切片
• 取材——固定(Cannoy’s),材料厚度 2mm。
• 100%酒精——100%酒精——二甲苯:酒精 (1:1)——二甲苯——二甲苯——二甲苯: 石蜡(65℃ 1:1)——石蜡(65℃)——石 蜡(65℃),以上处理各10-30min,视材 料大小而定,最后一步石蜡20min 。
• 未注明时间的一律处理2-3min。
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五、作业
• 简述石蜡切片过程,绘制你所观察到的细 胞形态。
• 提交一张你认为制作较好的玻片。
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9
实验八 石蜡切片法
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石蜡切片流程

石蜡切片流程

石蜡切片流程一、引言石蜡切片是生物学、医学和材料科学等领域中常用的一种实验技术,用于制备样品的薄片,以便进行显微观察和分析。

本文将介绍石蜡切片的流程及其关键步骤。

二、材料准备1. 石蜡:选择适合的石蜡材料,常见的有硬质石蜡和软质石蜡。

2. 样品:根据需要选择合适的样品,可以是生物组织、细胞、材料等。

3. 切片刀:选择切割尖锐且锋利的切片刀,常见的有玻璃刀片和钢刀片。

4. 切片机:使用专业的切片机设备,保证切片的精准度。

三、石蜡切片流程1. 固定样品:将样品进行固定处理,常用的方法有福尔马林固定、乙醛固定、冷冻固定等。

固定的目的是保持样品的形态结构和生物活性。

2. 除去水分:将固定后的样品通过醇溶液逐渐去除水分,一般采用浓度逐渐降低的醇溶液,如75%乙醇、50%乙醇、30%乙醇等。

3. 渗透石蜡:将去水后的样品用石蜡进行渗透处理。

首先将样品置于较低融点的石蜡中,然后逐渐转移到较高融点的石蜡中,这样可以保证样品逐渐与石蜡融合。

4. 包埋:将渗透后的样品放入石蜡模具中,待石蜡凝固后,取出石蜡块。

5. 切片:使用切片机将石蜡块切割成薄片,切片的厚度根据需要进行调整,一般为4-10微米。

6. 切片处理:将切好的薄片浸泡在温水中,使其展平,并将薄片转移到载玻片上。

7. 固定薄片:将载玻片放入烘箱中,以适当的温度和时间使薄片与载玻片充分固定。

四、注意事项1. 操作环境:保持实验室的清洁和安静,避免灰尘和噪音对实验结果的影响。

2. 刀片处理:在使用切片刀前,先将其清洗干净并消毒,以防止样品污染。

3. 温度控制:石蜡切片的各个步骤中,温度的控制非常重要,可以根据不同的样品选择适当的温度。

4. 切片厚度:不同的样品需要不同的切片厚度,要根据实验需要进行调整。

5. 质量控制:在每个步骤结束后,要对样品的质量进行严格检查,确保切片的质量。

6. 保存条件:切好的石蜡切片应妥善保存,防止受潮或受到外界环境的污染。

五、总结石蜡切片是一种常用的实验技术,通过固定、去水、渗透石蜡、切片等步骤,可以制备出精细的样品薄片,用于显微观察和分析。

脂肪组织石蜡切片技巧

脂肪组织石蜡切片技巧

脂肪组织石蜡切片技巧
脂肪组织石蜡切片是生物学和医学研究中常用的一种技术,主要用于观察脂肪组织的结构和形态。

在进行石蜡切片过程中,掌握一些技巧和方法能够提高切片的质量和效率。

本文将详细介绍脂肪组织石蜡切片的技巧。

一、准备工作
1.选取合适的脂肪组织样本,将其固定在10%的中性缓冲福尔马林溶液中。

2.将固定好的脂肪组织样本进行梯度脱水,即依次放入70%、80%、95%和100%的乙醇中各1小时。

3.将脱水后的脂肪组织样本放入二甲苯中透明化处理,时间为2小时。

4.将透明化处理后的脂肪组织样本浸入石蜡中,进行渗透和包埋。

二、切片技巧
1.选择合适的切片刀和切片厚度。

脂肪组织较软,建议使用锐利的切片刀,切片厚度以4-6微米为宜。

2.在切片前,将石蜡样本放在冰水混合物中冷却,使脂肪组织变得更加硬实,有利于切片。

3.切片时,保持切片刀与石蜡样本垂直,均匀用力,避免切片刀在样本上滑动。

4.切片速度不宜过快,以免造成切片厚薄不均或撕裂。

5.切片过程中,用刀片轻轻刮去切片刀上的石蜡残渣,以保证切片质量。

6.切片完成后,将切片用刀片轻轻挑起,放入37℃温水中展平。

三、染色和观察
1.将展平的切片放入染色盒中,进行常规的苏木精-伊红(HE)染色。

2.染色完成后,用显微镜观察脂肪组织的结构和形态。

3.如有必要,可进行免疫组化染色或其他特殊染色,以进一步研究脂肪组织的功能。

总结:脂肪组织石蜡切片的技巧主要包括准备工作、切片技巧和染色观察。

掌握这些技巧,有助于提高切片质量和研究效果。

石蜡切片方法步骤

石蜡切片方法步骤

石蜡切片方法步骤每次操作切片刀和标本,或更换标本前一定要锁定手轮,并用护刀罩将刀刃遮住!1. 锁定手轮,夹紧标本再装刀片.(10分)2. 将蜡块装在标本夹上,小心误切!3. 转动粗转轮,将标本退到后面的极限位置,将护刀罩移向刀架中间(盖上护刀罩)4. 调节切削角度5. 将基体上的刀架尽可能靠近蜡块标本6. 调整标本表面位置,使之与刀刃平行.7. 松开手轮,匀速转动,修片8. 修平蜡块表面到达标本层时停止修片,调整切片厚度.9. 一切调整好后可以开始切片。

此时右手摇动转轮,让蜡块切成蜡带,左手持毛笔将蜡带提起,摇转速度不可太急,通常以40-50r/min。

10. 切成的蜡带到20-30cm长时,右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起,以免卷曲,并牵引成带,平放在蜡带盒上准备漂片和捞片.11. 切片结束后锁定手轮, 盖上护刀罩.12. 把蜡块从标本夹上取下.13. 将切片机上的废片清理干净.1. Locking hand wheel, put wax blocks on sample folder.2. Turn rough runner, return the wax block back to the limit position, covered with knife protection cover.3. Adjust cutting angle4. Push the base knife holder to block as close as possible5. Adjust the specimen surface position, so that in parallel with the blade.6. Loosen the hand wheel, cutting paraffin block with uniform rotation, rim excessive paraffin7. Stop trimming, adjust the section thickness.8. Cutting sections in a regular rhythm9. The sections are gently lifted off the knife with bushes and floated out on a water bath.10. Stop cutting, after slicing lock the hand wheel, cover knife cover nursing11. Remove the block from the samples folder, clean the microtome.评分标准。

石蜡切片方法

石蜡切片方法

石蜡切片方法1 实验用品1.1 器材切片机,刀片,恒温箱,镊子,单面刀片,小台木,酒精灯,包埋纸盒,染色缸,蜡杯。

1.2 试剂中性甲醛固定液,Harri’s苏木精,1%伊红酒精溶液,1%盐酸乙醇分化液,各级酒精(50%、70%、85%、95%、100%),二甲苯,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。

Ⅰ中性甲醛固定液:40%甲醛120 ml,蒸馏水880 ml,磷酸二氢钠4 g,磷酸氢二钠13 gⅡ Harri’s苏木精:苏木精1 g,无水乙醇,10 ml,硫酸铝钾,20 g,蒸馏水,200 ml,氧化汞,0.5 g,冰醋酸,8 ml分别用无水乙醇溶解苏木精,蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,然后两液混合并煮沸,加入氧化汞,继续加热和搅拌至溶液为深紫色,立即用冰水冷却,恢复至室温后过滤备用。

至少存放2星期才能使用。

Ⅲ 1%伊红酒精溶液:伊红1g溶于100 ml95%酒精溶液。

Ⅳ 1%盐酸乙醇分化液:盐酸 1份,70%酒精 100份Ⅴ甘油蛋白贴片剂:蛋白 50 ml ,甘油 50 ml ,水杨酸钠或麝香草酚(防腐剂) 1g配制时将鸡蛋一个打破入碗或杯中,去蛋黄留下蛋白,用玻棒调打成雪花状泡沫,然后用粗纸或双层纱布过滤到量筒中,经数小时或一夜,即可滤出透明蛋白液。

此时在其中再加等量的甘油,稍稍振摇使两者混合。

最后加入防腐剂(水杨酸钠或麝香草酚)作防腐用。

4℃可保存几个月。

2 实验步骤2.1 取材Ⅰ在满足试验前提下,所取组织块大小应不大于1.5×1.5 cm,厚度不超过0.5 cm。

力求小而薄。

Ⅱ力求组织材料新鲜,避免组织细胞自溶。

2.2 固定 24小时固定材料时,固定液必须充足,一般为材料块的20-30倍,有些水分多的材料,中间应更换1-2次新液。

2.3 流水洗涤过夜2.4 脱水50%酒精1 h,70%酒精50 min,85%酒精40 min,95%酒精30 min,无水酒精30 min,无水酒精20 min。

石蜡切片操作步骤

石蜡切片操作步骤

植物组织石蜡切片的制作方法:(1)固定:用50%或70% FAA固定液(50%或70%酒精:甲醛:冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA;老的材料用70%的FAA),置于4℃固定24 h。

(2)脱水:将固定液倒去,加入50%乙醇,室温静置30 min ;重复一次,室温静置20 min。

换成1%番红溶液(用70%酒精配制),室温脱水染色过夜。

次日继续脱水,酒精浓度梯度和时间依次为:80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min(2次)。

(3)透明:1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h,纯二甲苯1h、40 min(2次)。

最后加入少量二甲苯(浸没材料即可)和碎蜡,放入38℃温箱中过夜。

(4)浸蜡:将温箱温度调至56℃,计时1h;换成二级蜡1h;三级蜡(3次)各1h、1h、40min(从温度上升到56℃开始计时)。

(5)包埋:将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中,迅速放入冰水中使蜡凝固,防止气泡产生,以及凝蜡不匀。

(6)切片:修整蜡块,用Lica RM2126切片机切片,厚度5-10 μm。

(7)贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂,将切好的蜡带放入温水中,捞至载玻片上,最后置于37℃恒温箱过夜烤片。

(8)脱蜡及染色:①番红-固绿对染ⅰ脱蜡:二甲苯60min,二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。

ⅱ染色:80%乙醇5 min,1%固绿(用95%酒精配制)迅速蘸一下,大约10s,直接放到95%乙醇5min 、无水乙醇5min、无水乙醇5min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min(2次)。

②甲苯胺蓝染色ⅰ脱蜡:二甲苯60 min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。

石蜡切片方法

石蜡切片方法

石蜡切片方法采样切成直径5mm以内,长5-10mm的长段杀生、固定FAA固定液中固定24小时[根尖用卡诺固定液固定,(95%酒精:冰醋酸3:1),15-30M,不超过24小时,用95%、85%酒精浸洗,每级20M,然后转入70%酒精保存]配方:福尔马林(38%甲醛)5ml 冰醋酸5ml 70%酒精90ml 可保存整染以70%、50%酒精各2~4小时,转入爱氏苏木精稀释液(爱氏苏木清原液1份,加入50%酒精及冰醋酸各半的混合液1份)中整染2-3天爱氏苏木精配制:将苏木精溶于少量酒精中,加冰醋酸后搅拌,加速其溶解加入甘油及其余酒精研碎钾矾,溶于水中并加温将加温的钾矾溶液一滴滴地加入染色剂中,并不断挥动瓶口用双层纱布包扎,放于通风处,并经常摇动,直到颜色变为紫红进即可使用,成熟时间约需2~4周以致数月之久,若加0.2g碘酸钠即可立即成熟,成熟的原液,须用瓶塞密封,置低温暗处长期保存。

[苏木精2g 冰醋酸10ml 甘油100ml 95%酒精100 ml 蒸馏水100ml 硫酸铝钾5g]水洗、返蓝蒸馏水浸洗,勤换水至无浮色渗出,再转入自来水中,换1-2次水,至样品由紫色变为深蓝色为止,共需时约1天{镜检及分色取一小块用刀片切碎后,滴一滴水,覆以盖玻片,进行镜检,要求染色体、核仁清晰,如发现染色过度,细胞核为一团深蓝色,则需以1%盐酸或45%醋酸分色至适度,再用水洗净。

脱水经15%、30%、50%、70%、85%、95%、无水、无水各级酒精,每级2-4小时,70%酒精中过夜,此为整染的步骤,复染直接进行下一步}{脱水及复染经30%、50%、70%、85%各级酒精,每级3-4小时。

含0。

5-1%伊红的95%酒精中4-6小时(可以过夜),无水酒精两次,每次2小时此为伊红复染的步骤}透明5级氯仿透明,每级2-4小时,最后一级纯氯仿两次,每次2小时,隔纸片加蜡,置36℃温箱中一天(将瓶划成五格,吸去一格液体加入一格氯仿,当5级换入后,换纯氯仿二次)浸蜡:分2-3次加入石蜡粉末,宜先少后多,每加完一次放回温箱(38-40℃)渗透、包埋经50%、75%蜡各3小时,再经A、B、C三杯纯蜡各小时,包埋(75%石蜡指75%石蜡+25%二甲苯石蜡应用3-4层桑皮纸过滤后使用)温度处理时间50%石蜡40-42℃0.5-3 H75%石蜡48-50 0.5-3H纯蜡A 56-58 20M-1H纯蜡B 56-58 20M-1H纯蜡C 56-58 20M-1H用玻璃铅笔在盒底作记号包埋纸盒先用水润湿放于玻璃片上材料倒入后用镊子拨动调整位置,表面呈薄膜凝固时可放入水中修蜡块、切片厚8μm展片、粘片、烘片镜检选取合适的材料进行粘片,展开后,置于36℃温箱中烘干粘片剂:将鸡蛋一端打开一个小口,只让蛋白慢慢流入烧杯内,用玻璃棒充分搅拌成泡沫状,然后用粗滤纸或双层纱布过滤至量筒中,经一昼夜能滤出透明的蛋白液。

石蜡切片的具体步骤与做法

石蜡切片的具体步骤与做法

石蜡切片的具体步骤与做法?石蜡切片法即用石蜡作为支持剂进行切片的方法。

石蜡切片法是一般组织学、病理学等常规制片方法,因此用得最多,它有很多优点:比较省时间,容易操作,可切成极薄的切片(4um以下),能制作连续切片,组织块可包埋在石蜡中永久保存。

缺点是只能用于较小的组织块,较大的组织块不易切好,容易破碎,组织在脱水透明过程中产生收缩并易变脆。

制片时间太长。

石蜡切片的制作过程(一)材料与用具1.材料:鱼皮肤、性腺、肠、肝胰脏等。

2.用具:溶蜡箱、蜡杯、不同熔点的石蜡、酒精灯等。

(二)实验内容与步骤1.取材及固定取动物体上的小块组织成为组织块。

组织块的大小以不超过0.5立方厘米为宜。

切去组织块时动作要轻,切忌用力牵引或挟持,以免组织内部发生变化。

组织块取下后,先用先用0.85%的生理盐水漂洗以戏曲血液与污渍,如果是管状组织则必须把管腔中污物洗净,可用注射器自一端向管腔中注射生理盐水数次,使其管腔冲洗干净,切忌不可用刀或其他器具刮之。

由动物身上切取的组织必须是新鲜的,材料越新鲜越好,一般不应超过死后24小时。

如果是管状器官或是其中有分泌之消化液,则死后应迅速采取,以免组织自溶或上皮剥落。

材料由动物体取下后应当迅速固定,固定的目的是尽快使固定液渗入组织内部,将组织固定,以保持其原有的结构。

不同的组织应选用适当的固定液。

固定液的用量与组织块体积之比一般在20:1。

不应使组织块贴于容器壁上,应记录固定液的名称,材料的种类,动物品种及开始固定的时间。

2.冲洗固定后的组织块在进行脱水前必须用流水洗去固定液。

组织块应用纱布包好,注名,放金属水洗网中用流水冲洗,甲醛固定液固定的组织一般水洗24小时,Bouins固定液固定的组织水洗24小时。

AFA固定液则不需要水洗。

3.脱水和硬化经过固定后的组织在水洗后要进行脱水,脱水的目的将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来,使组织逐渐变硬,便于油类或其他透明及浸入,为熔化的石蜡浸渗到组织中创造条件。

石蜡切片的操作方法

石蜡切片的操作方法

石蜡切片的操作方法石蜡切片是一种常用的组织切片制备方法,用于细胞学和组织学的研究。

下面是石蜡切片的操作方法:1. 收集样本:选择要制备切片的组织样本或细胞样本。

样本可以是动物组织、植物组织或细胞培养物。

2. 选择合适的浸渍剂:石蜡切片需要将样本浸渍在石蜡之中,以固定和保护样本。

常用的浸渍剂包括甲醇、乙醇和二甲苯。

3. 固定样本:将样本固定在固定剂(如甲醛)中,以保持其形态结构。

固定时间根据样本的类型和大小而定,一般在4C下静置数小时或过夜。

4. 脱水:在一系列浓度逐渐增加的乙醇溶液中,将固定的样本从水中脱水,使其逐渐转移到纯度较高的乙醇中。

5. 渗透:将脱水的样本浸渍在二甲苯或其他有机溶剂中,使其渗透并置换乙醇。

浸渍时间根据样本的大小和组织特性而定,一般在一到数小时之间。

6. 包埋:将渗透后的样本置于石蜡中,使其完全浸润。

石蜡块可以预先加热至液态,然后将样本放入其中,或者将样本以及适量的石蜡放入模具中,然后通过加热使其固化。

7. 切片:将制备好的石蜡块放入石蜡切片机中,使用旋转切片刀将其切成薄片。

切片厚度一般为4-10微米。

8. 取片:用切片刀或镊子将切好的石蜡切片取出,并放置在清洁的显微镜载玻片或切片架上。

9. 脱脂:将石蜡切片置于加热的二甲苯或其他脱蜡剂中,使其脱去石蜡。

10. 染色:根据需要,可对石蜡切片进行染色,例如常用的血液和组织标本染色方法如伊红染色(H&E染色)。

11. 干燥:将染色的切片在室温下晾干或在加热台上加热至干燥。

最后,将切片用显微镜载玻片覆盖,并封口保存。

以上就是石蜡切片的一般操作方法,每个实验室可能会根据具体需求进行微调。

在操作过程中要注意安全,避免接触有毒溶剂和使用锋利的刀片时的切割操作。

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FAA固定液固定的材料,可以在FAA内保存很 长的时间,再进行下一步的操作,同时FAA固定材 料需要的时间也相对较长,一般要18-24小时才能 达到较好的固定效果,如果时间要求不是很急,一 般建议用FAA固定材料。
卡诺氏固定液固定的材料,固定时间不要超过 6个小时。然后就必须进行下一步的脱水操作。如 果时间要求较急,卡诺氏固定液在短时间内可以达 到较好的固定效果。
纯石蜡---- 1天 ↓
纯石蜡---- 1天(到更长)
70%酒精----过夜 ↓
80%酒精---- 过夜 ↓
85%酒精----2小时 ↓
85%酒精----2小时 ↓
95%酒精----2小时 ↓
95%酒精----2小时 ↓
100%酒精----1小时 ↓
100%酒精+少量龙胆紫(GUS材料不加)-1小时 透明:时间延长至2到3倍 浸蜡:
纯石蜡----1天 ↓
最好是0.5-1cm的方体,然后将其粘到小木块上, 以备切片。
粘好后,确保切面是正四方形,如不是继续修 块。 八、切片
将粘上材料蜡块的小木块固定到切片机上,尽 量使切面与水平面垂直。切面上的两条与水平线平 行的边也与刀刃线平行。
切片时应该保证刀刃的锋利,切出来的蜡带应 该平整且连续。
九、粘片及烘片 取干净的载玻片,在其上均匀的涂上一层粘片
液,取合适长度的蜡带,让其粘浮在粘片液上,注 意不要有气泡。
然后将其放到烘片台上,保持烘片台温度三、 四十度,让粘片液上的蜡带充分伸展,直到整个蜡 带表面均一平整,吸去多余粘片液,把其从烘片台 取下,放入37度恒温箱。待粘片液干完之后,继 续下一步处理。 十、脱蜡
把处理好的载有蜡带的玻片从恒温箱取出,将 其泡入纯二甲苯中:
叶 取材:取较为成熟的叶,幼小的嫩叶不适合于做石 蜡切片。 脱水:
70%酒精----30分钟 ↓
70%酒精----30分钟 ↓
80%酒精----30分钟 ↓
80%酒精----30分钟
85%酒精----15分钟 ↓
85%酒精----15分钟 ↓
95%酒精----15分钟 ↓
95%酒精----15分钟 ↓
到37度→到42度→到47度→到50度→到52度 →到54度→到56度→到58度→到60度→到61度→
到62度→到63度(不要超过63度) 各个温度等级最好稍做停留,如果有事的话可
以适当延长停留时间,但高温时不宜停留超过标准 操作太久的时间。
升到63度后,保持20-30分钟,继续下步操作, 将材料从试管中夹出(所用纯石蜡与渗蜡时所用蜡 块石蜡同):
FAA固定液 70%酒精↓80%酒精 85%酒精95%酒精100%酒精
拟南芥石蜡切片方法总结
花 一、取材
横切:建议取完整的花簇进行处理,包埋及切片 时都保持完整的花簇形态,不要让单个的花朵掉离 花簇。可较好的保持花簇上每朵花的完整性,可以 看到连续的花期。
纵切:前期都取完整花簇进行处理,浸蜡、包 埋、切片时则分离成单朵处理,最小的几朵花可成
簇处理。 二、固定
首先,将材料从植株上剪下,泡入FAA或者卡 诺氏固定液中。取一针筒注射器,在针筒中加入34ml固定液(与泡材料的固定液同),将材料夹 入,然后用针筒注射器进行真空抽气操作(左手握 住针筒,右手推动推进器,推动液体排出针筒内空 气,左手大拇指堵住针筒上插注射器针头的插口, 右手向外拉推进器,如此反复),尽量抽尽材料内 空气,然后将材料放入同一固定液保存。
纯二甲苯----30分钟 ↓
纯二甲苯----30分钟 ↓
纯二甲苯----30分钟 取出等二甲苯挥发干净,即可进行下一步操作. 注意在整个过程中要保持玻片有材料的一面不碰到 东西,以防材料脱落。
十一、封片 在脱完蜡的玻片有材料的一面上,点上适量的
加拿大树脂,然后将干净的盖玻片盖上,注意尽量 不要产生气泡,待树脂氧化干燥后,即可观察。
GUS的材料已经过显色处理,可直接进行脱 水过程。
三、脱水
70%酒精----30ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ钟 ↓
80%酒精----30分钟 ↓
85%酒精----20分钟 ↓
95%酒精----20分钟 ↓
100%酒精----5分钟
100%酒精+少量龙胆紫固体(GUS材料不加)-5分钟 四、透明及渗蜡(脱酒精,紧接着上部过程)
85%酒精----1小时 ↓
95%酒精----1小时 ↓
95%酒精----1小时 ↓
100%酒精----30分钟 ↓
100%酒精+少量龙胆紫(GUS材料不加)-30分钟 透明:时间延长至2到3倍 浸蜡:
纯石蜡----1天 ↓
纯石蜡---- 1天 ↓
纯石蜡---- 1天
根 取材:建议取完整的根系进行处理,包埋及切片 时都保持完整的根系形态。完整的根系在切片时将 得到横切,纵切以及各个角度的切片结果。 脱水:
加入1/3体积的纯二甲苯混匀-5分钟 ↓
加入1/3体积的纯二甲苯混匀-5分钟 ↓
加入1/3体积的纯二甲苯混匀-5分钟 ↓
纯二甲苯20分钟 ↓
纯二甲苯25分钟 ↓
换新的纯二甲苯,削蜡块放入其中,室温下过夜 (蜡块最好不要压到材料)
五、升温浸蜡 将装着二甲苯、蜡块和材料的试管放到恒温箱
中,将温度调到37度,等温度升到37度后继续上 调升温。
100%酒精----10分钟 ↓
100%酒精+少量龙胆紫(GUS材料不加)-10分钟 浸蜡:
纯石蜡----2小时 ↓
纯石蜡----2小时 ↓
纯石蜡----2小时
茎 脱水:
70%酒精----2小时 ↓
70%酒精---- 2小时 ↓
80%酒精---- 2小时 ↓
80%酒精---- 2小时 ↓
85%酒精----1小时 ↓
纯石蜡----1小时 ↓
纯石蜡----1小时 ↓
纯石蜡----1小时 六、包埋
浸完纯石蜡最后一个小时后,进行包埋。 折一个方型纸盒,倒入干净纯石蜡(所用纯石 蜡与渗蜡时所用蜡块石蜡同) ,用镊子迅速将材 料夹到其中,按一定的间隔和方向放好,待石蜡凝 固(石蜡稍微凝固,即可将纸盒放入冰箱快速冷 却,防止石蜡结晶不好切),包埋即完成。 七、修块 将包埋好后含有材料的石蜡块修成切面长、宽
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