薄层色谱鉴别
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2、供试样品溶液的制备方法。
课前准备wk.baidu.com
仪器：电吹风、薄层板、烧杯、磁力搅拌器、玻璃棒、天平、容量瓶、分液漏斗、刻度试管、具塞三角瓶、研钵、层析缸、量筒、毛细管、烘箱、移液管等。
试剂：丹参粉末
材料：硅胶G、CMC-Na、蒸馏水、乙醚、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚（30-60℃）等
对照品：丹参对照药材、丹参酮IIA。
教学过程
一、复习提问
1、薄层色谱法原理？
2、薄层色谱法的操作步骤。
二、引入课题
波曾色谱法快速、简便、灵敏，是目前中药化学（真实性）定性鉴别中使用最多的色谱法之一。
三、新课教学
[实验目的]
1、掌握中药的薄层色谱法鉴定的实验技术。
2、掌握丹参等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
3、熟悉含有不同类别化学成分中药薄层色谱鉴别的条件及方法。
（1）化合物的定性检验。（通过与已知标准物对比的方法进行未知物的鉴定）
在条件完全一致的情况，纯碎的化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离，称比移值（Rf值），所以利用薄层色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。但影响比移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的大小，酸碱性，活性等级，外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比移值就比较困难。为此，在测定某一试样时，最好用已知样品进行对照。
[实验原理]
1、原理
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，属于固－液吸附色谱。样品在薄层板上的吸附剂（固定相）和溶剂（移动相）之间进行分离。由于各种化合物的吸附能力各不相同，在展开剂上移时，它们进行不同程度的解吸，从而达到分离的目的。
2、薄层色谱的用途：
展开剂要求新鲜配制，不要多次反复使用。
丹参鉴定展开剂为：石油醚-乙酸乙酯（4：1）
6、检测
如果化合物本身有颜色，就可直接观察它的斑点。如果本身无色，可先在紫外灯光下观察有无荧光斑点（有苯环的物质都有），用铅笔在薄层板上划出斑点的位置；对于在紫外灯光下不显色的，可放在含少量碘蒸气的容器中显色来检查色点（因为许多化合物都能和碘成黄棕色斑点），显色后，立即用铅笔标出斑点的位置。
点样用的毛细管为内径＜lmm的管口平整的毛细管。
点样前，可先用铅笔在薄层板一端距底边10mm处轻轻划一横线，作为起始线，然后用毛细管吸取样品在起始线上小心点样，如需重复点样，则应待前次点样的溶剂挥发后方可重点。若在同一块板上点几个样，样品点间距离为10mm以上。样点直径不大于3mm。
5、展开
薄层的展开在密闭的容器中进行。先将选择的展开剂放入层析缸中（小板可用广口瓶代替），使色谱器内空气饱和5－10min，再将点好试样的薄层板放入层析缸中，密闭，上行展开，薄层板浸入展开剂中的深度一般要求液面距离样点原点约5mm，也就是样点的位置必须在展开剂液面之上，展开至规定距离后（一般当展开剂上升到离前端5－10mm时），取出薄层板放平晾干，用铅笔划溶剂前沿的位置后，即可显色检测。
参酮IIA本身有颜色可直接观察斑点。
结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。
[作业]
1、在一定的操作条件下为什么可利用Rf值来鉴定化合物？
2、展开剂的高度若超过了点样线，对薄层色谱有何影响？
3、绘出丹参薄层色谱图，注明色谱条件，记录实验结果。
（2）快速分离少量物质。（几到几十微克，甚至0.01µg）
（3）跟踪反应进程。在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失，来判断反应是否完成。
（4）化合物纯度的检验（只出现一个斑点，且无拖尾现象，为纯物质。）
此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。
[实验内容]
1、薄层板的制备
制薄层板的主要原料是吸附剂和粘结剂。吸附剂：最常用于TLC的吸附剂为硅胶G、硅胶GF254、
硅胶HF254。本实验用的吸附剂为硅胶G。
粘结剂：一般用所羧甲基纤维素钠（CMC-Na），也有用淀粉的。CMC-Na为粉状固体，用时先加水，水浴上熬成糊状，配成0.2％-0.5%水溶液。
制板：
将1份硅胶G加3份0.4％CMC-Na水溶液，研磨混合均匀后（在平铺玻璃板上能晃动但不能流动），将其均匀涂布于薄层板上（10X10），厚度为0.2-0.3mm，为使其坦平，可将载玻片用手端平晃动，致坦平为止，放在干净平坦的台面上晾干，然后放入110℃烘箱活化30分钟，分干燥器备用。
制备好的薄层板要求表面平滑、均匀、无麻点、无气泡、无破损及污染。
章节题目
实验三中药薄层色谱鉴定
教学目的
和要求
掌握中药的薄层色谱法鉴定的实验技术。
掌握丹参等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
熟悉含有不同类别化学成分中药薄层色谱鉴别的条件及方法。
重点难点
重点：丹参等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
难点：含有不同类别化学成分中药薄层色谱鉴别的条件及方法
教学设计
课前预习
1、薄层色谱的基本原理和应用。
2、供试品溶液制备
取丹参粉末1g，加乙醚5ml，置具塞试管中，振摇，放置1h，滤过挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解。
3、对照药材及对照品溶液制备
（1）对照药材溶液制备
取丹参对照药材，同供试品溶液制备方法操作制备。
（2）对照品溶液制备
取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。
4、点样
课前准备wk.baidu.com
仪器：电吹风、薄层板、烧杯、磁力搅拌器、玻璃棒、天平、容量瓶、分液漏斗、刻度试管、具塞三角瓶、研钵、层析缸、量筒、毛细管、烘箱、移液管等。
试剂：丹参粉末
材料：硅胶G、CMC-Na、蒸馏水、乙醚、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、石油醚（30-60℃）等
对照品：丹参对照药材、丹参酮IIA。
教学过程
一、复习提问
1、薄层色谱法原理？
2、薄层色谱法的操作步骤。
二、引入课题
波曾色谱法快速、简便、灵敏，是目前中药化学（真实性）定性鉴别中使用最多的色谱法之一。
三、新课教学
[实验目的]
1、掌握中药的薄层色谱法鉴定的实验技术。
2、掌握丹参等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
3、熟悉含有不同类别化学成分中药薄层色谱鉴别的条件及方法。
（1）化合物的定性检验。（通过与已知标准物对比的方法进行未知物的鉴定）
在条件完全一致的情况，纯碎的化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离，称比移值（Rf值），所以利用薄层色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。但影响比移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的大小，酸碱性，活性等级，外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获得重现的比移值就比较困难。为此，在测定某一试样时，最好用已知样品进行对照。
[实验原理]
1、原理
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又称薄层层析，属于固－液吸附色谱。样品在薄层板上的吸附剂（固定相）和溶剂（移动相）之间进行分离。由于各种化合物的吸附能力各不相同，在展开剂上移时，它们进行不同程度的解吸，从而达到分离的目的。
2、薄层色谱的用途：
展开剂要求新鲜配制，不要多次反复使用。
丹参鉴定展开剂为：石油醚-乙酸乙酯（4：1）
6、检测
如果化合物本身有颜色，就可直接观察它的斑点。如果本身无色，可先在紫外灯光下观察有无荧光斑点（有苯环的物质都有），用铅笔在薄层板上划出斑点的位置；对于在紫外灯光下不显色的，可放在含少量碘蒸气的容器中显色来检查色点（因为许多化合物都能和碘成黄棕色斑点），显色后，立即用铅笔标出斑点的位置。
点样用的毛细管为内径＜lmm的管口平整的毛细管。
点样前，可先用铅笔在薄层板一端距底边10mm处轻轻划一横线，作为起始线，然后用毛细管吸取样品在起始线上小心点样，如需重复点样，则应待前次点样的溶剂挥发后方可重点。若在同一块板上点几个样，样品点间距离为10mm以上。样点直径不大于3mm。
5、展开
薄层的展开在密闭的容器中进行。先将选择的展开剂放入层析缸中（小板可用广口瓶代替），使色谱器内空气饱和5－10min，再将点好试样的薄层板放入层析缸中，密闭，上行展开，薄层板浸入展开剂中的深度一般要求液面距离样点原点约5mm，也就是样点的位置必须在展开剂液面之上，展开至规定距离后（一般当展开剂上升到离前端5－10mm时），取出薄层板放平晾干，用铅笔划溶剂前沿的位置后，即可显色检测。
参酮IIA本身有颜色可直接观察斑点。
结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点。
[作业]
1、在一定的操作条件下为什么可利用Rf值来鉴定化合物？
2、展开剂的高度若超过了点样线，对薄层色谱有何影响？
3、绘出丹参薄层色谱图，注明色谱条件，记录实验结果。
（2）快速分离少量物质。（几到几十微克，甚至0.01µg）
（3）跟踪反应进程。在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失，来判断反应是否完成。
（4）化合物纯度的检验（只出现一个斑点，且无拖尾现象，为纯物质。）
此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。
[实验内容]
1、薄层板的制备
制薄层板的主要原料是吸附剂和粘结剂。吸附剂：最常用于TLC的吸附剂为硅胶G、硅胶GF254、
硅胶HF254。本实验用的吸附剂为硅胶G。
粘结剂：一般用所羧甲基纤维素钠（CMC-Na），也有用淀粉的。CMC-Na为粉状固体，用时先加水，水浴上熬成糊状，配成0.2％-0.5%水溶液。
制板：
将1份硅胶G加3份0.4％CMC-Na水溶液，研磨混合均匀后（在平铺玻璃板上能晃动但不能流动），将其均匀涂布于薄层板上（10X10），厚度为0.2-0.3mm，为使其坦平，可将载玻片用手端平晃动，致坦平为止，放在干净平坦的台面上晾干，然后放入110℃烘箱活化30分钟，分干燥器备用。
制备好的薄层板要求表面平滑、均匀、无麻点、无气泡、无破损及污染。
章节题目
实验三中药薄层色谱鉴定
教学目的
和要求
掌握中药的薄层色谱法鉴定的实验技术。
掌握丹参等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
熟悉含有不同类别化学成分中药薄层色谱鉴别的条件及方法。
重点难点
重点：丹参等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
难点：含有不同类别化学成分中药薄层色谱鉴别的条件及方法
教学设计
课前预习
1、薄层色谱的基本原理和应用。
2、供试品溶液制备
取丹参粉末1g，加乙醚5ml，置具塞试管中，振摇，放置1h，滤过挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解。
3、对照药材及对照品溶液制备
（1）对照药材溶液制备
取丹参对照药材，同供试品溶液制备方法操作制备。
（2）对照品溶液制备
取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。
4、点样