微生物实验精选PPT演示文稿

营养琼脂 11.4 300
4瓶，500ml瓶，平板
2～4 营养琼脂 3.4 90 3 5 18支，中试管，斜面
5～7 营养肉汤 1.2 55 1 3 18支，小试管，液体
8～10 半固体 1.6 55 3 ※公共培基，勿作标记！
3 18支，小试管，高层
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培养基的制备
组号
培养基
称量 水量 煮沸 分装 (g) (ml) (次) (ml)
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医学微生物学实验 综合性实验一
❖ 脓汁和粪便标本中病原菌的检测（P2）
培养基的制备P2 消毒与灭菌P5 细菌的人工培养 无菌技术（录像） 摆斜面，倾注平板。
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常见病原性球菌的检查程序P47：
直接涂片、革兰染色、镜检
脓汁、痰、咽部分泌物
观察菌落性状、溶血性、色素
血琼脂平板培养
涂片染色镜检
挑取可疑菌落
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实验分组
❖ 俩俩相对4人为一组,组号编在电源插座上。 ❖ 每组按从前到后,从左到右的顺序，分别编号为
甲、乙、丙、丁。
甲 乙甲 乙甲 乙
1
2
3
丙 丁丙 丁丙 丁
讲
台
甲 乙甲 乙甲 乙
6
7
8
丙 丁丙 丁丙 丁
甲 乙甲 乙
4
5
丙 丁丙 丁
甲 乙甲 乙
9
10
丙 丁丙 丁
3
实验室器材 整齐有序
4
常用器材摆放顺序：电源插座→试管架→酒精灯→ 污物盘。 试管架上器材：按接种针、接种环、油性笔和打火 机的顺序，分别放置在试管架中间两行，靠近电源 插座一侧，使用以后必须放回原处，依次摆整齐。
秤物时“左物右码”， 物品在左盘上，砝码在右 盘，尽可能放在秤盘中心。 天平保持干燥、清洁。
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培养基
培养基是用人工的方法，将多种营养物质，根据各 种微生物生长繁殖的需要而合成的一种营养制品。它的 主要成分是蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水，pH7.4～7.6。 ❖ 培养基制备的一般程序： ①调配→溶化→ 矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。 ②干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定 →保存。 ❖ 培养基的制备原则： (1)适当的营养成分,(2)合适的酸碱度,(3)配制后必须 灭菌。
要用手抚摸头脸等部位。 ❖ 凡是废弃的细菌培养物、带菌材料，应放在指定地点等待灭菌处
理，不得随便乱放或用水冲洗。 ❖ 一旦发生意外，造成污染，应立即报告老师进行处理。 ❖ 离开实验室前，必须洗手。怀疑污染应及时用1‰新洁而灭泡手。 ❖ 每次实验后，实验台用消毒液擦拭，地板先用湿的拖把拖地以后
再扫地，实验室用紫外线灯照射1小时。
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普通冰箱(3颗星***)
冷藏室(上柜）：
温度4～8℃，保存培养基、常用菌 卫生工具：
种和抗菌素纸片等。
扫帚，拖把，撮
箕，垃圾筐，放
冷冻室（下柜）：
置在冰箱和水池
温度－18℃，保存诊断血清、血浆， 之间。
长期保藏的菌种和抗菌素纸片。
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隔水式电热恒温培养箱：35～37℃， 一般细菌培养时间为18～24小时。
❖综合性实验是一个连续的过程，一个步骤，一 个环节的失误，将直接影响到最终实验结果。
❖实验时应严格按要求操作，实验结果要及时观 察，及时记录，以便撰写实验论文（报告）。
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培养基的制备
组号
培养基
称量 水量 煮沸 分装 (g) (ml) (次) (ml)
备注（ 08药学）
1 氯化钠 1.3 150
3 50支，小试管，盐水
称量 水量 煮沸 分装 (g) (ml) (次) (ml)
备注（生物技术）
1～3 营养琼脂 2.3 60 3 5 12支，中试管，斜面
4～5 营养肉汤 1.1 50 1 3 16支，小试管，液体
6～8 半固体 1.2 40 3 3 12支，小试管，高层
※公共培基，勿作标记！
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1500W电炉●安全警告 培养基沸腾溢出→流入电炉： ①触电→危及生命！ ②短路→断电，③…。
备注（40人份）
1 营养琼脂 11.4 300
4瓶，500ml瓶，平板
2～4 营养琼脂 2.7 70 3 5 14支，中试管，斜面
5～7 营养肉汤 1.1 50 1 3 14支，小试管，液体
8～10 半固体
1.5 50 3 3 14支，小试管，高层
※公共培基，勿作标记！
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培养基的制备
组号
培养基
称量 水量 煮沸 分装 (g) (ml) (次) (ml)
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奥林巴斯 CX21型 生物显微镜 （实验柜内，每人一台）
注意：只能横放，不得竖放。
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1500W电炉●安全警告 培养基沸腾溢出→流入电炉： ①触电→危及生命！ ②短路→断电，③…。
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蒸馏水：配制培养基。 1‰新洁而灭：怀疑病原菌污染，泡手3～5分钟。 消毒液：擦拭实验台台面。 玻片缸：浸泡用过的载玻片。
备注（50人份）
1 营养琼脂 11.4 300
4瓶，500ml瓶，平板
2～4 营养琼脂 3.4 90 3 5 18支，中试管，斜面
5～7 营养肉汤 1.2 55 1 3 18支，小试管，液体
8～10 半固体
1.6 55 3 3 18支，小试管，高层 ※公共培基，勿作标记！
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培养基的制备
组号
培养基
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边台柜子内器材: 架盘药物天平、砝码,细菌干 粉培养基,锥形瓶，量筒,试管 筐，灭菌平皿（第一组）。 锥形瓶用后洗净、包装。 器材放回原处，依次摆整齐。
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边台抽屉内器材： 试管（棉塞），刻度吸管，洗耳 球，称量纸，药勺，硫酸纸、牛 皮纸、橡皮筋,尺子。 药勺、吸管用后洗净，放回原处。
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称量纸置于左盘，游码 移至标尺左端“0”点位置 上，指针应对准中线，取得 平衡。否则将杠杆两端的调 整螺母旋动调节平衡。
医学微生物学实验
❖医学微生物学实验课是一门操作技能 很强的课程。
❖实验课教学的主要目标是使学生了解 医学微生物学主要的研究方法和手段， 掌握基本技能和基本原理，树立牢固 的无菌观念。
❖更重要的是培养学生自学能力、科学 思维能力、动手能力和表达能力。
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微生物学实验室规则
❖ 进入实验室必须穿白大衣、戴帽子。 ❖ 书本、文具放在抽屉里。 ❖ 实验室内不准吃东西、喝饮料，不准把任何东西放入嘴中，也不
生化反应
↑
纯培养 动物实验
Leabharlann Baidu
药敏实验
血液、穿刺液 → 肉汤增菌培养 → 培养液涂片染色境检
常见肠道致病菌的检查程序P48：
粪便 → SS琼脂、伊红美蓝平板培养 → 挑取可疑菌落
↑
↓
血清学鉴定
血、骨髓 → 增菌培养
双糖铁培养基 染色镜检
生化反应
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❖从培养基的制备，细菌的分离、纯化、形态学 检查，到细菌的生化试验、血清学试验和药敏试 验，全都由同学们亲自动手操作和完成。