微生物实验精选PPT演示文稿
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微生物学实验ppt课件

器材与试剂的选用原则
03
如无菌操作、适用性、经济性等
02
细菌形态与结构观察
细菌培养及形态特征
01
02
03
细菌培养方法
包括需氧培养、厌氧培养 和兼性厌氧培养等,不同 种类的细菌需要不同的培 养条件。
细菌菌落特征
观察细菌在固体培养基上 形成的菌落,了解其形状、 大小、颜色、透明度等特 征。
细菌细胞形态
05
微生物代谢活性测定
生长曲线测定方法
直接计数法
通过显微镜直接观察并计数微生物数量,适用于较大微生物如细 菌、酵母菌等。
比浊法
利用微生物生长引起培养液浊度变化来测定生长曲线,操作简便 但易受杂质干扰。
平板菌落计数法
将待测样品稀释后涂布于固体培养基表面,培养后计数形成的菌 落数,适用于可形成菌落的微生物。
原理
病毒必须寄生在活细胞内才能增 殖,通过提供适宜的细胞环境, 使病毒在细胞内复制并产生子代
病毒。
病毒检测技术及应用
免疫学方法
利用抗原抗体特异性结合的原理,通过酶联免疫吸附试验 (ELISA)、免疫荧光技术等检测病毒抗原或抗体。
分子生物学方法
基于病毒核酸的特异性,利用PCR、实时荧光定量PCR等技术扩增 并检测病毒核酸。
微生物学实验ppt课件
contents
目录
• 实验基础知识 • 细菌形态与结构观察 • 真菌形态与结构观察 • 病毒培养与检测技术 • 微生物代谢活性测定 • 微生物遗传与变异研究 • 微生物生态学及环境因子影响研究
01
实验基础知识
微生物学概述
类生活中的作用:如 生态平衡、发酵工业 等
生理生化鉴定
利用真菌的生理生化特性,如营养需 求、代谢产物等,进行进一步的分类 鉴定。
微生物的培养(共34张PPT)

㈢.是否进行了及时细致的观察与记录
培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时 观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的 变化。
代谢类型
营养类型 能源 氢的供体 基本碳源
光能无机营养( 光能自养型)
光
无机物 二氧化碳
微生物举例
蓝细菌
绿色硫细菌
藻类
光能有机营养( 光
光能异养型)
几 种 菌 落 及 其 形 态
:由核酸和蛋白质构成。
病毒的结构
吸附
注入
合成
释放
组装
病毒的增殖一般可分五个阶段,即:
吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放
:寄生
㈡.微生物需要的营养物质及功能
微生物需要的五大类营养要素物质是:
⑴.概念 :凡是能为微生物提供所需碳元素的 营养物质。
⑵.来源: ①无机碳源:CO2;NaHCO3等
平板划线法和稀释涂布平板法。 单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。
,而空气中的其他微生物不能通过。 2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种。
最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体,同时可以基本保持培养基的营养成分不被破
而平皿是由正反两平面板互扣而成,这种器具是 坏。
③高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min.
专为防止空气中微生物的污染而设计的。
二.实验操作(以培养大肠杆菌为例)
㈠.制备牛肉膏蛋白胨培养基
2.称量
4.灭菌:
将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅,在压力为 100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。 5.倒平板:
培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时 观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的 变化。
代谢类型
营养类型 能源 氢的供体 基本碳源
光能无机营养( 光能自养型)
光
无机物 二氧化碳
微生物举例
蓝细菌
绿色硫细菌
藻类
光能有机营养( 光
光能异养型)
几 种 菌 落 及 其 形 态
:由核酸和蛋白质构成。
病毒的结构
吸附
注入
合成
释放
组装
病毒的增殖一般可分五个阶段,即:
吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白质→组装→释放
:寄生
㈡.微生物需要的营养物质及功能
微生物需要的五大类营养要素物质是:
⑴.概念 :凡是能为微生物提供所需碳元素的 营养物质。
⑵.来源: ①无机碳源:CO2;NaHCO3等
平板划线法和稀释涂布平板法。 单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。
,而空气中的其他微生物不能通过。 2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种。
最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体,同时可以基本保持培养基的营养成分不被破
而平皿是由正反两平面板互扣而成,这种器具是 坏。
③高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min.
专为防止空气中微生物的污染而设计的。
二.实验操作(以培养大肠杆菌为例)
㈠.制备牛肉膏蛋白胨培养基
2.称量
4.灭菌:
将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅,在压力为 100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。 5.倒平板:
演示文稿微生物平板划线试验

第20页,共43页。
2、液体培养基接种方法
图2-2 液体培养基接种法
第21页,共43页。
3、穿刺接种法
常用于半固体琼脂培养基、醋酸铅培养基、双糖铁培养基 等的接种,前者用于测定细菌的动力,后二者则用于观察 细菌的生化反应。
第22页,共43页。
3、穿刺接种法
步骤:(1)用记号笔在待接种培养基上写明标记。 (2)如斜面培养基接种法,握持菌种管及待接种
观察生长情况。
第17页,共43页。
1、斜面培养基接种法
图2-1 斜面培养基接种法
第18页,共43页。
2、液体培养基接种方法
可用于观察细菌不同的生长状况,有的呈均匀混浊, 有的呈沉淀生长,还有的在液体表面形成菌膜;另外 还可以供测定细菌生化特性用。凡是肉汤、葡萄糖蛋 白胨水以及各种单糖发酵管等液体培养基均用此法接 种。
第24页,共43页。
4、平板划线接种法
常用于分离单个菌落,也可用于观察细菌的生长状况和观察 某些生化反应。沙门氏菌的各属在亚硫酸铋琼脂平板上呈黑
色,具有金属光泽;志贺氏菌属在HE琼脂平板、SS琼脂平
板、麦康凯琼脂平板上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。
第25页,共43页。
4、平板划线接种法——接种方法
第42页,共43页。
5、观察结果
(3)色素:有些细菌产生水溶性色素,使菌落和周围的培 养基出现绿色、金黄色、白色、橙色、柠檬色等颜色,产 生的色素有水溶性或脂溶性。 (4)气味:某些细菌在培养基中生长繁殖后可产生特殊气 味,如铜绿假单胞菌(生姜气味)、变形杆菌(巧克力烧 焦的臭味)、厌氧梭菌(腐败的恶臭味)、白色假丝酵母 菌(酵母味)和放线菌(泥土味)等。
平行划线,划满平板其余部分,此视为四区。 各区接种线间尽量互不交接,以达到细菌逐渐稀释的目
2、液体培养基接种方法
图2-2 液体培养基接种法
第21页,共43页。
3、穿刺接种法
常用于半固体琼脂培养基、醋酸铅培养基、双糖铁培养基 等的接种,前者用于测定细菌的动力,后二者则用于观察 细菌的生化反应。
第22页,共43页。
3、穿刺接种法
步骤:(1)用记号笔在待接种培养基上写明标记。 (2)如斜面培养基接种法,握持菌种管及待接种
观察生长情况。
第17页,共43页。
1、斜面培养基接种法
图2-1 斜面培养基接种法
第18页,共43页。
2、液体培养基接种方法
可用于观察细菌不同的生长状况,有的呈均匀混浊, 有的呈沉淀生长,还有的在液体表面形成菌膜;另外 还可以供测定细菌生化特性用。凡是肉汤、葡萄糖蛋 白胨水以及各种单糖发酵管等液体培养基均用此法接 种。
第24页,共43页。
4、平板划线接种法
常用于分离单个菌落,也可用于观察细菌的生长状况和观察 某些生化反应。沙门氏菌的各属在亚硫酸铋琼脂平板上呈黑
色,具有金属光泽;志贺氏菌属在HE琼脂平板、SS琼脂平
板、麦康凯琼脂平板上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。
第25页,共43页。
4、平板划线接种法——接种方法
第42页,共43页。
5、观察结果
(3)色素:有些细菌产生水溶性色素,使菌落和周围的培 养基出现绿色、金黄色、白色、橙色、柠檬色等颜色,产 生的色素有水溶性或脂溶性。 (4)气味:某些细菌在培养基中生长繁殖后可产生特殊气 味,如铜绿假单胞菌(生姜气味)、变形杆菌(巧克力烧 焦的臭味)、厌氧梭菌(腐败的恶臭味)、白色假丝酵母 菌(酵母味)和放线菌(泥土味)等。
平行划线,划满平板其余部分,此视为四区。 各区接种线间尽量互不交接,以达到细菌逐渐稀释的目
微生物的培养PPT 演示文稿

碳源——CO2为唯一或主要碳源 能源——光能 例: CO2 + H2O [CH2O] + O2 2CO2 + H2S + 2H2O 2[CH2O] +H2SO4 CO2 + 2H2S CH2O] + H2O + 2S 藻类和蓝细菌
(1)产氧光合作用 ----藻类和蓝细菌细胞内含有叶绿素,能与高 等植物一样利用光能分解水产生氧气并还原 CO2为有机碳化物,其反应通式为: CO2 + H2O ----------[CH2O]+ O2↑ 叶绿素
四、Nutrient
营养物质按照它们在机体中的生理作用不同,可 以将它们区分成六大类。
1. Source of carbon (碳源) 2. Source of Nitrogen (氮源) 3.Inorganic salt(无机盐) 4. Growth factor(生长因子) 5.Water(水分) 6. Energy source(能源)
藻类的叶绿体中含有叶绿素a和类胡萝卜素,其它光合色素 随类群而异。藻类多数水生, 只要环境中有光照、少量氮素 和无机盐就能生长
(2)不产氧光合作用
----光合细菌(紫色细菌和绿色细菌)与蓝细菌不同,细
胞内含有类似于叶绿素的菌绿素,但不能进行以H2O 为供氢体的非环式光合磷酸化作用,也不产生氧气。 光合细菌吸收光能,以还原态无机硫化物(H2S、S或 S2O3-2等)为氢或电子供体同化CO2,代表性反应为:
二、营养物质的功能
参与微生物细胞的组成 提供微生物机体进行各种生理活动所需 的能量 形成微生物代谢产物的来源
营养物质是微生物新陈代谢和一切生命 活动的物质基础,失去这个基础,生命 也就停止
三、化学成分
(1)产氧光合作用 ----藻类和蓝细菌细胞内含有叶绿素,能与高 等植物一样利用光能分解水产生氧气并还原 CO2为有机碳化物,其反应通式为: CO2 + H2O ----------[CH2O]+ O2↑ 叶绿素
四、Nutrient
营养物质按照它们在机体中的生理作用不同,可 以将它们区分成六大类。
1. Source of carbon (碳源) 2. Source of Nitrogen (氮源) 3.Inorganic salt(无机盐) 4. Growth factor(生长因子) 5.Water(水分) 6. Energy source(能源)
藻类的叶绿体中含有叶绿素a和类胡萝卜素,其它光合色素 随类群而异。藻类多数水生, 只要环境中有光照、少量氮素 和无机盐就能生长
(2)不产氧光合作用
----光合细菌(紫色细菌和绿色细菌)与蓝细菌不同,细
胞内含有类似于叶绿素的菌绿素,但不能进行以H2O 为供氢体的非环式光合磷酸化作用,也不产生氧气。 光合细菌吸收光能,以还原态无机硫化物(H2S、S或 S2O3-2等)为氢或电子供体同化CO2,代表性反应为:
二、营养物质的功能
参与微生物细胞的组成 提供微生物机体进行各种生理活动所需 的能量 形成微生物代谢产物的来源
营养物质是微生物新陈代谢和一切生命 活动的物质基础,失去这个基础,生命 也就停止
三、化学成分
生活饮用水微生物指标检验MicrosoftPowerPoint演示文稿

时间 验证试验
步骤 特殊设备
价格
多管发酵法 24h-72h 需要 较繁锁 显微镜 低
滤膜法
24h-48h
需要
较简便 显微镜 过滤设备
低
酶底物法
24h-28h
不需要 简便 可操作性强 压膜机
较高
大肠埃希氏菌三种方法比较
时间 验证试验
多管发酵法 48h 需要
滤膜法 28h 需要
酶底物法 24h-28h
2、9mL灭菌生理盐水 3、相应的灭菌培养基 4、检验前 ,无菌室用紫外线灯照射30min
菌落总数
• 定义:
•
是指水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养
48h后,所得1mL水样所含菌落的总数 。
• 培养基: • 营养琼脂
• 设备: • 放大镜/菌落计数器
菌落总数平板计数法
1mL饮 用 水 水 样
平行样 空白样
乳糖 蛋白 胨培 养液 ×5管
产酸产气
有荧 光
检 索 MPN表
水样
10倍 稀 释
1mL
1mL
乳糖 蛋白 胨培 养液
×5管
二倍 乳糖 蛋白 胨培 养液
×5管
36±1℃ 培 养 24h
阴性
报告 未检出
结果报告
初发酵 24h
大肠埃希氏菌酶底物法 检测示意图
生活饮用水非常规检测项目
• 贾第虫和隐孢子虫 检测方法: 水样过滤---洗涤离心---免疫磁珠分离---荧光
生活饮用水 微生物指标检验
***疾病预防控制中心 yxf
生活饮用水中微生物指标
项目 总大肠菌群 耐热大肠菌群 大肠埃希氏菌
菌落总数 贾第鞭毛虫
隐孢子虫
单位
实验四、环境中微生物的检测PPT课件

谢谢观看
03
实验步骤
样品采集
采集环境中的水样、 土壤样、空气样等, 确保采集的样品具有 代表性。
记录采集时间、地点、 环境条件等信息,以 便后续分析。
使用无菌容器或薄膜 采集样品,避免交叉 污染。
样品处理
将采集的样品进行稀释,使微生物分 散。
对样品进行富集培养,提高微生物的 数量。
对样品进行过滤或离心,使微生物与 杂质分离。
结果应用
环境监测
实验结果可以为环境监测提供依 据,了解环境中微生物的分布和
数量,评估环境质量。
公共卫生
实验结果可以为公共卫生领域提 供参考,了解环境中微生物的种 类和数量,评估其对人类健康的
风险。
科学研究
实验结果可以为科学研究提供数 据支持,深入探究环境中微生物
的生态学和生物学特性。
05
实验总结
实验不足与改进
实验不足
在实验过程中,我发现自己在操作显微镜时还不够熟练,有 时会出现观察不准确的情况。此外,我在实验数据处理方面 也存在一些问题,如数据记录不准确、分析不全面等。
改进方法
为了提高实验的准确性和可靠性,我计划在课后多加练习使 用显微镜,提高自己的操作技能。同时,我也要加强学习数 据处理和分析方面的知识,掌握更多的统计方法和软件应用 技巧。
实验四、环境中微生物的检测ppt 课件
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 实验总结
01
实验目的
掌握微生物检测的基本原理
01
微生物检测是利用特定的方法和 技术对环境中的微生物进行检测 和计数,以评估环境卫生状况和 潜在的健康风险。
02
基本原理包括微生物培养法、免 疫学方法、分子生物学方法等, 这些方法基于不同原理,能够对 不同类型的微生物进行检测。
高中生物选修1微生物的实验室培养ppt(共54张PPT)

稀释涂布平板法
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结 合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想, 第2步应如何进行无菌操作?
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如, 酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触 任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
3类。
(5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后
分装前,要进行的是
。 调整pH
(6)右表中各成分重量确定的原则
是 依微生物的生长需要确定 。 (7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该
增加的成分
琼脂(或凝固。剂)
一、课题目标:
了解有关微生物及培养基的基础知识,进 行无菌技术的操作,进行微生物的培养。
二、课题重点和难点:
如图是酵母菌电子显微 镜下的形态结构
青霉
生殖 孢子生殖
直立菌丝 营养菌丝
腐生生活
(二)培养基
培养基(培养液)是由人工方法配制
而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养
液。
1.培养基的类型
(1)按物理状态分:固体培养基和液体培养基、
半固体培养基。 (2)按功能分:选择培养基和鉴别培养基。
(3)按成分分:天然培养基和合成培养基。
芽孢又小又轻,可以随风飘散。
平板划线的操作方法
C是正确的,因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌;
且体内一般不含有叶绿素.
寄生菌 大部分病原菌
消毒与灭菌的概念及两者的区别
(2)若不慎将过量NaCl加入培养基中。
有的碳源同时是能源,如葡萄糖;
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,熟练、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。
微生物检验ppt课件

微生物检验ppt课件
目 录
• 微生物检验概述 • 微生物检验的基本原理与方法 • 微生物检验的样品采集与处理 • 微生物检验的常用技术与操作 • 微生物检验的质量控制与保证 • 微生物检验的挑战与发展趋势
01
微生物检验概述
微生物检验的定义与重要性
定义
微生物检验是对环境中的微生物进行定性、定量和鉴定的一种技术,通过特定 的方法和技术手段,对微生物的种类、数量、生理生化特性、遗传物质等进行 分析和研究。
。
04
微生物检验的常用技术与操作
显微镜技术
光学显微镜
01
利用可见光和光学透镜成像,可观察细菌、真菌等微生物的形
态和结构。
电子显微镜
02
利用电子束成像,能够观察更细微的结构,如病毒、细菌的超
微结构等。
相差显微镜
03
利用光的相位差原理,可观察无色透明的微生物,如支原体、
衣原体等。
培养基制备技术
01
补体结合试验
利用补体参与抗原抗体反 应,形成复合物并激活补 体系统,用于检测微生物 抗原或抗体。
微生物的分子生物学检测方法
PCR技术
应用聚合酶链式反应(PCR)技术扩 增微生物特异性基因片段,实现快速 、灵敏的微生物检测。
生物信息学分析
应用生物信息学方法对微生物基因组 数据进行挖掘和分析,揭示微生物种 类、进化关系等信息。
脱羧酶试验等。
酶活性检测
检测微生物产生的特定酶活性 ,如过氧化氢酶试验、氧化酶
试验等。
抗生素敏感性试验
检测微生物对抗生素的敏感性 ,以指导临床用药。
微生物的血清学试验
凝集试验
应用特异性抗体与微生物 抗原结合,形成可见的凝 集现象,用于鉴定微生物 种类。
目 录
• 微生物检验概述 • 微生物检验的基本原理与方法 • 微生物检验的样品采集与处理 • 微生物检验的常用技术与操作 • 微生物检验的质量控制与保证 • 微生物检验的挑战与发展趋势
01
微生物检验概述
微生物检验的定义与重要性
定义
微生物检验是对环境中的微生物进行定性、定量和鉴定的一种技术,通过特定 的方法和技术手段,对微生物的种类、数量、生理生化特性、遗传物质等进行 分析和研究。
。
04
微生物检验的常用技术与操作
显微镜技术
光学显微镜
01
利用可见光和光学透镜成像,可观察细菌、真菌等微生物的形
态和结构。
电子显微镜
02
利用电子束成像,能够观察更细微的结构,如病毒、细菌的超
微结构等。
相差显微镜
03
利用光的相位差原理,可观察无色透明的微生物,如支原体、
衣原体等。
培养基制备技术
01
补体结合试验
利用补体参与抗原抗体反 应,形成复合物并激活补 体系统,用于检测微生物 抗原或抗体。
微生物的分子生物学检测方法
PCR技术
应用聚合酶链式反应(PCR)技术扩 增微生物特异性基因片段,实现快速 、灵敏的微生物检测。
生物信息学分析
应用生物信息学方法对微生物基因组 数据进行挖掘和分析,揭示微生物种 类、进化关系等信息。
脱羧酶试验等。
酶活性检测
检测微生物产生的特定酶活性 ,如过氧化氢酶试验、氧化酶
试验等。
抗生素敏感性试验
检测微生物对抗生素的敏感性 ,以指导临床用药。
微生物的血清学试验
凝集试验
应用特异性抗体与微生物 抗原结合,形成可见的凝 集现象,用于鉴定微生物 种类。
《环境工程微生物学》PPT演示课件

生理生化试验
通过测定微生物的代谢产物、酶活性 等生理生化指标,推断其种类和代谢 特性。
培养法
通过特定的培养基和培养条件,使微 生物得以生长繁殖,进而观察其菌落 形态、生长速度等特征,进行微生物 的分离、纯化和计数。
现代微生物检测技术
分子生物学方法
利用PCR、基因芯片等技术,检测微生物特定基因序列的存在和表 达情况,实现快速、灵敏的微生物检测和鉴定。
常见环境工程微生物实验操作
微生物的分离与纯化
介绍从环境样品中分离和纯化微生物的方法和步骤,如平板划线 法、稀释涂布法等。
微生物的培养与计数
详细讲解微生物的培养条件、培养基的配制以及微生物的计数方法 ,如平板计数法、比浊法等。
微生物的生理生化实验
介绍常见的微生物生理生化实验,如糖发酵实验、蛋白质分解实验 等,用于鉴定不同种类的微生物。
微生物燃料电池在环境治理中潜力挖掘
微生物燃料电池原理
介绍微生物燃料电池的工 作原理及基本构造。
在环境治理中的应用
阐述微生物燃料电池在废 水处理、土壤修复等方面 的应用实例。
技术ห้องสมุดไป่ตู้战与解决方案
分析微生物燃料电池在实 际应用中面临的技术挑战 ,并提出相应的解决方案 。
未来发展方向
探讨微生物燃料电池在环 境治理中的未来发展方向 及潜在应用前景。
环境工程领域的微生物技术应用需要稳定的微生物群落支持,如何维持
群落稳定性是未来的研究重点。
03
环境因子对微生物技术的影响
环境因子如温度、pH值等对微生物的生长和代谢具有重要影响,如何
优化环境因子条件以提高微生物技术的处理效果需要进一步探讨。
THANKS
感谢观看
环境工程微生物学前沿研究
微生物的纯培养生长曲线及繁殖演示文稿

单个的微生物组成的群体。
微生物接种是群体接种,接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
第19页,共112页。
第二节 细菌的群体生长繁殖 一、生长曲线
生长曲线(Growth Curve):
细菌接种到定量的液体培养基中,定时取样测定细胞数量, 以培养时间为横座标,以菌数的对数为纵座标作图,得到的一条反映细菌在 整个培养期间菌数变化规律的曲线。
细菌代谢活性降低,细菌衰老并出现自溶,产生或释放出一些产物 ,如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态,有 时产生畸形,细胞大小悬殊,有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性 反应等。
该时期死亡的细菌以对数方式增加,但在衰亡期的后期,由于部分 细菌产生抗性也会使细菌死亡的速率降低,仍有部分活菌存在。
培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是 实现微生物连续培养的基本原则。
第42页,共112页。
二、连续培养
第二节 细菌的群体生长繁殖
控制连续培养的方法
恒浊连续培养
不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定
恒化连续培养
第29页,共112页。
t1 – t0
G = ——————
n
(t1 – t0 )
= ————————————
3.322(lgNt-lgN0)
第30页,共112页。
影响微生物增代时间(代时)的因素:
1)菌种,不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同;
2)营养成分,在营养丰富的培养基中生长代时短 3)营养物浓度,在一定范围内,生长速率与营养物浓度呈正比,
活菌计数:
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
第15页,共112页。
微生物接种是群体接种,接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
第19页,共112页。
第二节 细菌的群体生长繁殖 一、生长曲线
生长曲线(Growth Curve):
细菌接种到定量的液体培养基中,定时取样测定细胞数量, 以培养时间为横座标,以菌数的对数为纵座标作图,得到的一条反映细菌在 整个培养期间菌数变化规律的曲线。
细菌代谢活性降低,细菌衰老并出现自溶,产生或释放出一些产物 ,如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态,有 时产生畸形,细胞大小悬殊,有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性 反应等。
该时期死亡的细菌以对数方式增加,但在衰亡期的后期,由于部分 细菌产生抗性也会使细菌死亡的速率降低,仍有部分活菌存在。
培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是 实现微生物连续培养的基本原则。
第42页,共112页。
二、连续培养
第二节 细菌的群体生长繁殖
控制连续培养的方法
恒浊连续培养
不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定
恒化连续培养
第29页,共112页。
t1 – t0
G = ——————
n
(t1 – t0 )
= ————————————
3.322(lgNt-lgN0)
第30页,共112页。
影响微生物增代时间(代时)的因素:
1)菌种,不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同;
2)营养成分,在营养丰富的培养基中生长代时短 3)营养物浓度,在一定范围内,生长速率与营养物浓度呈正比,
活菌计数:
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
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称量 水量 煮沸 分装 (g) (ml) (次) (ml)
备注(生物技术)
1~3 营养琼脂 2.3 60 3 5 12支,中试管,斜面
4~5 营养肉汤 1.1 50 1 3 16支,小试管,液体
6~8 半固体 1.2 40 3 3 12支,小试管,高层
※公共培基,勿作标记!
17
1500W电炉●安全警告 培养基沸腾溢出→流入电炉: ①触电→危及生命! ②短路→断电,③…。
营养琼脂 11.4 300
4瓶,500ml瓶,平板
2~4 营养琼脂 3.4 90 3 5 18支,中试管,斜面
5~7 营养肉汤 1.2 55 1 3 18支,小试管,液体
8~10 半固体 1.6 55 3 ※公共培基,勿作标记!
3 18支,小试管,高层
14
培养基的制备
组号
培养基
称量 水量 煮沸 分装 (g) (ml) (次) (ml)
2
实验分组
❖ 俩俩相对4人为一组,组号编在电源插座上。 ❖ 每组按从前到后,从左到右的顺序,分别编号为
甲、乙、丙、丁。
甲 乙甲 乙甲 乙
1
2
3
丙 丁丙 丁丙 丁
讲
台
甲 乙甲 乙甲 乙
6
7
8
丙 丁丙 丁丙 丁
甲 乙甲 乙
4
5
丙 丁丙 丁
甲 乙甲 乙
9
10
丙 丁丙 丁
3
实验室器材 整齐有序
4
常用器材摆放顺序:电源插座→试管架→酒精灯→ 污物盘。 试管架上器材:按接种针、接种环、油性笔和打火 机的顺序,分别放置在试管架中间两行,靠近电源 插座一侧,使用以后必须放回原处,依次摆整齐。
医学微生物学实验
❖医学微生物学实验课是一门操作技能 很强的课程。
❖实验课教学的主要目标是使学生了解 医学微生物学主要的研究方法和手段, 掌握基本技能和基本原理,树立牢固 的无菌观念。
❖更重要的是培养学生自学能力、科学 思维能力、动手能力和表达能力。
1
微生物学实验室规则
❖ 进入实验室必须穿白大衣、戴帽子。 ❖ 书本、文具放在抽屉里。 ❖ 实验室内不准吃东西、喝饮料,不准把任何东西放入嘴中,也不
备注(40人份)
1 营养琼脂 11.4 300
4瓶,500ml瓶,平板
2~4 营养琼脂 2.7 70 3 5 14支,中试管,斜面
5~7 营养肉汤 1.1 50 1 3 14支,小试管,液体
8~10 半固体
1.5 50 3 3 14支,小试管,高层
※公共培基,勿作标记!
15
培养基的制备
组号
培养基
称量 水量 煮沸 分装 (g) (ml) (次) (ml)
10
医学微生物学实验 综合性实验一
❖ 脓汁和粪便标本中病原菌的检测(P2)
培养基的制备P2 消毒与灭菌P5 细菌的人工培养 无菌技术(录像) 摆斜面,倾注平板。
11
常见病原性球菌的检查程序P47:
直接涂片、革兰染色、镜检
脓汁、痰、咽部分泌物
观察菌落性状、溶血性、色素
血琼脂平板培养
涂片染色镜检
挑取可疑菌落
生化反应
↑
纯培养 动物实验
药敏实验
血液、穿刺液 → 肉汤增菌培养 → 培养液涂片染色境检
常见肠道致病菌的检查程序P48:
粪便 → SS琼脂、伊红美蓝平板培养 → 挑取可疑菌落
↑
↓
血清学鉴定
血、骨髓 → 增菌培养
双糖铁培养基 染色镜检
生化反应
12
❖从培养基的制备,细菌的分离、纯化、形态学 检查,到细菌的生化试验、血清学试验和药敏试 验,全都由同学们亲自动手操作和完成。
备注(50人份)
1 营养琼脂 11.4 300
4瓶,500ml瓶,平板
2~4 营养琼脂 3.4 90 3 5 18支,中试管,斜面
5~7 营养肉汤 1.2 55 1 3 18支,小试管,液体
8~10 半固体
1.6 55 3 3 18支,小试管,高层 ※公共培基,勿作标记!
16
培养基的制备
组号
培养基
18
边台柜子内器材: 架盘药物天平、砝码,细菌干 粉培养基,锥形瓶,量筒,试管 筐,灭菌平皿(第一组)。 锥形瓶用后洗净、包装。 器材放回原处,依次摆整齐。
19
边台抽屉内器材: 试管(棉塞),刻度吸管,洗耳 球,称量纸,药勺,硫酸纸、牛 皮纸、橡皮筋,尺子。 药勺、吸管用后洗净,放回原处。
20
称量纸置于左盘,游码 移至标尺左端“0”点位置 上,指针应对准中线,取得 平衡。否则将杠杆两端的调 整螺母旋动调节平衡。
❖综合性实验是一个连续的过程,一个步骤,一 个环节的失误,将直接影响到最终实验结果。
❖实验时应严格按要求操作,实验结果要及时观 察,及时记录,以便撰写实验论文(报告)。
13
培养基的制备
组号
培养基
称量 水量 煮沸 分装 (g) (ml) (次) (ml)
备注( 08药学)
1 氯化钠 1.3 150
3 50支,小试管,盐水
7
奥林巴斯 CX21型 生物显微镜 (实验柜内,每人一台)
注意:只能横放,不得竖放。
8
1500W电炉●安全警告 培养基沸腾溢出→流入电炉: ①触电→危及生命! ②短路→断电,③…。
9
蒸馏水:配制培养基。 1‰新洁而灭:怀疑病原菌污染,泡手3~5分钟。 消毒液:擦拭实验台台面。 玻片缸:浸泡用过的载玻片。
5
普通冰箱(3颗星***)
冷藏室(上柜):
温度4~8℃,保存培养基、常用菌 卫生工具:
种和抗菌素纸片等。
扫帚,拖把,撮
箕,垃圾筐,放
冷冻室(下柜):
置在冰箱和水池
温度-18℃,保存诊断血清、血浆, 之间。
长期保藏的菌种和抗菌素纸片。
6
隔水式电热恒温培养箱:35~37℃, 一般细菌培养时间为18~24小时。
秤物时“左物右码”, 物品在左盘上,砝码在右 盘,尽可能放在秤盘中心。 天平保持干燥、清洁。
21
22
培养基
培养基是用人工的方法,将多种营养物质,根据各 种微生物生长繁殖的需要而合成的一种营养制品。它的 主要成分是蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水,pH7.4~7.6。 ❖ 培养基制备的一般程序: ①调配→溶化→ 矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。 ②干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定 →保存。 ❖ 培养基的制备原则: (1)适当的营养成分,(2)合适的酸碱度,(3)配制后必须 灭菌。
要用手抚摸头脸等部位。 ❖ 凡是废弃的细菌培养物、带菌材料,应放在指定地点等待灭菌处
理,不得随便乱放或用水冲洗。 ❖ 一旦发生意外,造成污染,应立即报告老师进行处理。 ❖ 离开实验室前,必须洗手。怀疑污染应及时用1‰新洁而灭泡手。 ❖ 每次实验后,实验台用消毒液擦拭,地板先用湿的拖把拖地以后
再扫地,实验室用紫外线灯照射1小时。