[暨南大学课件][分析化学][教案PPT][精品课程]第十章-第三节-定性和定量分析-1

C样
5.000 106
2020/6/17
注：稀释因子
1 5 200 50
例：精密称取0.0500 g样品，置于250 ml容量瓶中，加入 0.02mol/L HCl溶解，稀释至刻度。准确吸取2ml，稀至 100ml。以0.02mol/l HCL为空白,在263 nm处用1 cm吸收池 测定透光率为41.7%，其摩尔吸光系数为12000，被测物分
第十章 紫外-可见分光
光度法
第三节 定性和定量分析
一、定性分析 二、定量分析
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第五节 定性和定量分析
一、定性分析
定性鉴别 纯度检查和杂质限量测定
二、定量分析
单组分的定量方法 多组分的定量方法
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一、定性分析 （一）定性鉴别 (P199)
定性鉴别的依据→吸收光谱的特征 吸收光谱的形状 吸收峰的数目 吸收峰的位置（波长） 吸收峰的强度 相应的吸光系数
过程：配制标准系列固定条件 分别测定A C ~ A曲线 样品 同上条件 测定A样 查得C样
C样 A样 C标 A标
C样
C标 A样 A标
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例：芦丁含量测定 分别移取0.200mg / mL标样0 ~ 5mL 25mL
样品3.0mg 25mL
0.710mg/25mL
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3．系数倍率法
✓ 前提：干扰组分b不成峰形 无等吸收点
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✓ 步骤：b曲线上任找一点→λ1
另一点→λ2
令
A1b A2b
K
倍率因子
b
a Aab KA2ab A1ab
A1b
K ( A2b A2a ) ( A1b A1a )
A2b
(KA2b A1b ) (KA2a A1a )
Cb
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A2ab
E2a E2b
Ca
3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 (1) 解线性方程组法 (2) 等吸收双波长消去法 (3) 系数倍率法
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1．解线性方程组法
▪ 步骤： 1 测定E1a和E1b ；A1ab
2
测定E2a
和E
b 2
；A2ab
A1ab A1a A1b E1a Ca E1b Cb
➢ 消去b的影响测a
选 b 的等吸收点1'和2' A1b' A2b'
Aab ' A1a' A2a' (E1a E2a ) Ca
Ea Ca
Ca
Aab ' E1a' E2a'
Aab ' E a
✓ 注：须满足两个基本条件 • 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 2020•/6/17选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大
2
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二、定量分析
（一）单组分的定量方法 定量依据：A EC l
1．吸光系数法 2．标准曲线法 3．对照法：外标一点法
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1．吸光系数法 (P201)
前提：要求单色光
过程：W (g)样/ 含i 稀释C(g / mL) E已知求A Ci
Ci
[g /100mL]
A El
子量为100.0，试计算263 nm处 E11c%m 和样品的百分含量。
解：
E11c%m
10 M
10 12000 100.0
1200
Ci
A El
lg T El
lg 0.417 1200 1
3.166 104 g /100mL 3.165 106 g / mL
C样
0.0500 250
2 100
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由A2b
E2b
Cb
Cb
A2b E2b
2．两组分吸收光谱部分重叠
λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Ca
过程：1 测定E1a ；A1a 2 测定E2a和E2b ；A2ab
由A1a
E1a
Ca
Ca
A1a E1a
由A2ab A2a A2b E2a Ca E2b Cb
解：
(1) 对照法
Ci
2.5 10
25.00 1000 1000
0.508 0.518
Ci
98.1g
/ mL
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B12标示量%
Ci 标示量
100%
98.1%
(2) 吸光系数法
Ci
A El
Ci
2.50 10
0.508 207 1
Ci 98.1g ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ mL
B12标示量%
Ci 标示量
A2ab
A2a
A2b
E2a
Ca
E
b 2
Cb
Ca
A1ab E1a
E2b E2b
A2ab E1b E2a E1b
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Cb
A2ab E1a
E1a E2b
A1ab
E
a 2
E2a E1b
2．等吸收双波长法
▪ 步骤：
A1ab A1a A1b A2ab A2a A2b
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例：精密称取B12样品25.0 mg，用水溶液配成100 ml。精密吸取10.00 ml，又置100 ml容量瓶中，
加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于
361 nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量 (B12的百分吸光系数为207)
解：
Ci
0.507 207 1
2.45 103 g
A361 1.70 ~ 1.88 ，A361 3.15 ~ 3.45
A278
A550
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（二）纯度检查和杂质限量测定
1．纯度检查（杂质检查）(P200)
(1) 峰位不重叠：
找λ→使主成分无吸收，杂质有吸收→直接考察杂质含量
(2)峰位重叠：
主成分强吸收，杂质无吸收 / 弱吸收→与纯品比较，E↓ 杂质强吸收 >> 主成分吸收→与纯品比较，E↑，光谱变形
光度为0.463，已知该波长处的 E11c%m 927.，9 求咖啡酸百分
含量
解：Ci
0.463 927.9 1
4.900
104
g
/100mL
4.900
106
g
/ mL
C样
10.00 10 3 200
5 50
5.000 10 6
g
/ mL
咖啡酸% Ci 100% 4.900 106 100% 98.0%
Aab A1ab A2ab ( A1a A2a ) ( A1b A2b ) Aa Ab ➢ 消除a的影响测b
选 a 的等吸收点1和2 A1a A2a
Aab A1b A2b (E1b E2b ) Cb
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Eb Cb
Cb
Aab E1b E2b
Aab E b
Aab KA2a A1a (KE2a E1a ) Ca
λ1 λ2
Aab Ca 消除了b的干扰
✓ 优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号K倍，
2020/6/17 提高了待测组分测定灵敏度
例：取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00 mg，加少量 乙醇溶解，转移至200 ml容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液5.00ml，置于50 ml容量瓶中，加6 mol/l的HCl 4ml，加 水至刻度线。取此溶液于1 cm比色池中，在323 nm处测定吸
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1．对比吸收光谱的一致性
同一测定条件下， 与标准对照物谱图或标准谱图 进行对照比较
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2．对比吸收光谱的特征值
max ， max ，E11c%m sh ，min
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3．对比吸光度或吸光系数的比值：
✓ 例： 药典规定VB12定性鉴别：
278 ，361 ，550三处最大吸收
100%
98.1%
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（二）多组分的定量方法 (P203)
定量依据：A总 Aa Ab Ac ➢ 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰）
两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量
过程：1 测定E1a ；A1a
2 测定E2b ；A2b
由A1a
E1a
Ca
Ca
A1a E1a
3．对照法：外标一点法 (P202）
C Cs Ci
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对照法只需要 配制标准溶液
和试样溶液
前提：固定仪器和测定条件；
截距为0 ；
标样与样品浓度相近
过程：一定 分别测定A样和A标
Ci
CS
Ai AS
✓ 注：当样品溶液与标准品溶液的
稀释倍数相同时
mi i%
mS mi
Ai AS
100%
或Ci
[mol / L] A
l
i% Ci 100% C样
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例光：维系生数素为B21027
的水溶液在361 nm处的百分吸 ， 用 1cm 比 色 池 测 得 某 维 生 素
B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度
解：
C A 0.414 E l 2071
0.00200g /100m L 20.0g / m L
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2．杂质限量的测定：
✓ 例：肾上腺素中微量杂质——肾上腺酮含量计算 2mg/mL -0.05mol/L的HCl溶液，λ 310nm下测定 规定 A310≤0.05 即符合要求的杂质限量≤0.06%
A 0.05 C E11c%m l 435 1
1.1104 g /100ml 1.1103 mg / ml 肾上腺酮% 1.1103 100 0.06%
m
例： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50ml，加水稀释至10.00ml； 另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀 释至1000ml。在361nm处，用1cm吸收池，分别 测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液 的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标 示量为100μg / mL）
/100mL
2.45 105
g
/
mL
C样
2.50 102 100
10 100
2.50 105 g
/ mL
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B12 %
Ci C样
100%
2.45 105 2.50 105
100% 98.0%
例： 20.00mg样品 HCL5mL 吡啶25ml稀至250mL
移取10mL 稀至100mL 367测A 0.591 (已知E 764.0) 求i%
解：
Ci
A El
0.591 764
7.92 104
g
/100mL
7.92 106
g
/
mL
i%
Ci C样
100%
7.92 106 2.0 102 10
100% 99.0%
100 250
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2．标准曲线法 (P202)
前提：固定仪器和测定条件 AK C AC
标准曲线法需要配 制一系列标准溶液
4.000
10 6
g
/
mL
2020/6/17
样品%
Ci C样
´ 100%
3.165 ´ 106 4.000 ´ 106
´ 100%
79.15%