分光光度法测食品中亚硝酸盐含量中标准曲线的制作及影响因素

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食品中亚硝酸盐检测关键影响因素探究

食品中亚硝酸盐检测关键影响因素探究王强立（厦门市食品药品质量检验研究院，福建厦门 361013）摘　要：目的：运用《食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》（GB 5009.33—2016）第二法分光光度法对食品中亚硝酸盐进行检测，分析影响检测结果的关键因素。

方法：将标准溶液和待测溶液在同等条件下进行测定，扩展标准曲线线性范围，将检测过程分为4个步骤，分别进行加标回收试验，结合氧化还原反应标准电极电势分析影响检测结果的关键因素。

结果：亚铁氰化钾溶液久置后可能分解产生Fe3+，Fe3+可氧化亚硝酸根导致检测结果偏低，其他溶液相对稳定。

结论：GB 5009.33—2016中分光光度法稳定可靠，亚铁氰化钾溶液的稳定性是影响检测结果的关键因素。

关键词：食品；亚硝酸盐；亚铁氰化钾；分光光度法Research on Key Influencing Factors of Determination ofNitrite in FoodsWANG Qiangli(Xiamen Institute for Food and Drug Quality Control, Xiamen 361013, China) Abstract: Objective: To detect nitrite in food by GB 5009.33—2016 second method spectrophotometry, and analyze the key factors affecting the test results. Method: The standard solution and the solution to be tested were measured under the same conditions, and the linear range of the standard curve was expanded. The detection process was divided into four steps, and the standard recovery test was carried out respectively. Combined with the standard electrode potential of the redox reaction, the key factors affecting the detection results were analyzed. Result: The potassium ferrocyanide solution may decompose to produce Fe3+ after a long time. Fe3+ can oxidize nitrite, resulting in low detection results, and other solutions are relatively stable. Conclusion: The spectrophotometric method in GB 5009.33—2016 is stable and reliable, and the stability of potassium ferrocyanide solution is the key factor affecting the test results.Keywords: food; nitrite; potassium ferrocyanide; spectrophotometry亚硝酸盐主要以钠盐和钾盐的形式存在于食品中，食品中的亚硝酸盐主要来源于人工添加和食品本身。

食品分析与检验重要实验讲解

实验一：食品中亚硝酸盐的测定一、实验目的1. 掌握盐酸萘乙二胺比色法测定亚硝酸盐的原理2. 掌握分光光度计的使用、标准曲线的绘制及计算方法3. 了解分光光度计的构造二、实验原理样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，其最大吸收波长为538 nm，可测定吸光度并与标准比较定量。

三、仪器与试剂1. 仪器（1）分光光度计（2）小型胶肉机（3）恒温水浴锅2．试剂（1）亚铁氰化钾溶液(106g/L)：称取106.0g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至1000 mL。

（2）乙酸锌溶液(220g/L)：称取220.0 g乙酸锌，先加30mL冰醋酸溶解，用水稀释至1000 mL。

（3）饱和硼砂溶液(50g/L)：称取5.0g硼酸钠，溶于100mL热水中，冷却后备用。

（4）对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：称取0.4ｇ对氨基苯磺酸，溶于100mL20 %（V/V）盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。

（5）盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100mL水中, 混匀后，置棕色瓶中，避光保存。

（6）亚硝酸钠标准溶液（200μg/mL）：准确称取0.1000ｇ于110℃～120℃干燥恒重的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。

（7）亚硝酸钠标准使用液（5.0 μg/mL）：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度。

四、实验步骤1. 提取称取2.50g经绞碎混匀的样品，于50mL烧杯中，加硼砂饱和溶液12.5mL饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300 mL 将试样洗入500mL容量瓶中，于沸水浴中加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。

2. 提取液净化在振荡上述提取液时加入5 mL 亚铁氰化钾溶液, 摇匀, 再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。

加水至刻度, 摇匀, 放置30min, 除去上层脂肪, 上清液用滤纸过滤, 弃去初滤液30mL，滤液备用。

亚硝酸盐标准曲线

亚硝酸盐标准曲线亚硝酸盐是一种重要的化学物质，在环境监测和食品安全检测中具有重要的意义。

建立亚硝酸盐的标准曲线是进行亚硝酸盐含量测定的重要步骤，下面将介绍亚硝酸盐标准曲线的建立方法及其意义。

首先，准备一定浓度的亚硝酸盐标准溶液，可以通过称取一定质量的亚硝酸钠固体，溶解于一定体积的水中来制备。

然后，分别取一系列不同浓度的亚硝酸盐标准溶液，用分光光度计或其他适用的仪器进行测定，得到吸光度与浓度的对应关系。

接着，利用所得数据绘制标准曲线，通常采用线性回归分析得到吸光度与浓度的线性关系方程，从而建立亚硝酸盐的标准曲线。

亚硝酸盐标准曲线的建立具有重要的意义。

一方面，它可以用于实际样品中亚硝酸盐含量的测定。

在实际分析中，将待测样品的吸光度测定值代入标准曲线方程中，通过测定值与标准曲线的对应关系，计算出样品中亚硝酸盐的含量。

另一方面，标准曲线还可以用于评价分析方法的准确性和灵敏度。

通过比较实际样品的测定值与标准曲线的预测值，可以评价分析方法的准确性和灵敏度，为分析结果的可靠性提供保障。

在建立亚硝酸盐标准曲线时，需要注意一些关键问题。

首先，选择合适的浓度范围。

标准曲线的浓度范围应覆盖实际样品中亚硝酸盐含量的预期范围，以确保测定结果的准确性。

其次，应重复测定每个浓度点，以确定吸光度与浓度的准确对应关系。

最后，应选择合适的拟合方法，通常采用线性拟合，但在一些情况下可能需要采用非线性拟合或其他拟合方法。

总之，亚硝酸盐标准曲线的建立是进行亚硝酸盐含量测定的关键步骤，具有重要的意义。

建立合适的标准曲线，不仅可以用于实际样品中亚硝酸盐含量的测定，还可以评价分析方法的准确性和灵敏度，为环境监测和食品安全检测提供可靠的数据支持。

因此，在进行亚硝酸盐含量测定时，务必严格按照标准曲线的建立方法进行操作，以确保分析结果的准确性和可靠性。

7493-1987亚硝酸盐氮标准曲线

7493-1987亚硝酸盐氮标准曲线关于7493-1987亚硝酸盐氮标准曲线，这是我国1987年发布的一项关于亚硝酸盐氮含量测定的国家标准。

该标准主要用于食品、水质等中亚硝酸盐氮含量的测定。

根据该标准，亚硝酸盐氮的标准曲线是通过分光光度法建立的。

分光光度法是通过测定样品在特定波长下的吸光度，来间接计算样品中亚硝酸盐氮含量的方法。

在7493-1987标准中，亚硝酸盐氮标准曲线是通过一系列不同浓度亚硝酸盐氮溶液的吸光度数据绘制而成的。

这些数据点形成的曲线可以用来查找未知浓度亚硝酸盐氮溶液的吸光度，从而计算出其浓度。

在7493-1987标准中，亚硝酸盐氮标准曲线的建立需要考虑以下几个因素：1. 亚硝酸盐氮标准溶液的制备：按照标准要求，需要制备一系列不同浓度的亚硝酸盐氮标准溶液。

通常采用重量法或容量法进行制备，确保溶液的准确度和稳定性。

2. 分光光度计的校准：在进行亚硝酸盐氮的吸光度测定前，需要先对分光光度计进行校准。

校准过程中，需要使用标准物质对分光光度计的吸光度测量范围进行标定，以保证测量结果的准确性。

3. 吸光度的测定：将制备好的亚硝酸盐氮标准溶液放入分光光度计中，设定合适的波长和狭缝宽度，测定其吸光度。

通常需要测定多个浓度点的吸光度，以建立标准曲线。

4. 标准曲线的绘制：将不同浓度亚硝酸盐氮溶液的吸光度数据进行线性回归分析，绘制出亚硝酸盐氮标准曲线。

该曲线可以用来查找未知浓度亚硝酸盐氮溶液的吸光度，从而计算出其浓度。

在7493-1987标准中，亚硝酸盐氮标准曲线的线性范围一般为0至10mg/L。

在实际应用中，可以根据需要对该范围进行适当的扩展。

此外，标准曲线的绘制过程中，需要注意数据的准确性和可靠性，以确保亚硝酸盐氮含量的准确测定。

总之，7493-1987亚硝酸盐氮标准曲线是我国关于亚硝酸盐氮含量测定的一项重要标准。

通过分光光度法建立的标准曲线，可以准确、快速地测定食品、水质等中亚硝酸盐氮含量，为食品安全和环境保护提供有力保障。

盐酸萘乙二胺分光光度法测定食品中的亚硝酸盐

盐酸萘乙二胺分光光度法测定食品中的亚硝酸盐摘要：本文综合分析了亚硝酸盐的中毒机理；亚硝酸盐中毒的症状；亚硝酸盐中毒应采取的救治措施和如何预防亚硝酸盐中毒。

用盐酸萘乙二胺分光光度法测定亚硝酸盐的含量。

该方法具有应用广泛、灵敏度高、选择性好、准确度高、分析成本低、操作简便、快速的特点。

关键词：亚硝酸盐；中毒机理；中毒原因；盐酸萘乙二胺；分光光度法Abstract: This paper analyzes the mechanism of nitrite poisoning; nitrite poisoning symptoms; nitrite poisoning treatment measures to be taken and how to prevent nitrite poisoning. Naphthyl-ethylenediamine hydrochloride Determination of nitrite levels.This method has a wide range of applications, high sensitivity, good selectivity and high accuracy analysis of low-cost, simple operation, rapid.Keywords:nitrite ; poisoning mechanidm ; cause of poisoning ; hydrochloride naphthylethylenediamine ; spectrophotometry.亚硝酸盐俗称“硝盐”，是含氮化合物的一类。

常见的亚硝酸盐有亚硝酸钾和亚硝酸钠，为白色或淡黄色结晶或颗粒状粉末，味微咸，易溶于水，多成白色晶体，密度大于水，硬度较大，十分易碎，外观极似食盐。

并广泛存在于自然环境中尤其是在气态水、地表水和地下水中以及动植物体与食品内。

食品中亚硝酸盐的测定

三、仪器 1. 722 分光‎光度计 2. 组织绞碎机‎，菜刀，砧板 3. 50mL 烧‎杯
500mL‎烧杯 3L 大烧杯‎ 4. 电炉 5. 托盘天平 6. 200mL‎容量瓶 500mL‎容量瓶 7. 恒温水浴锅‎ 8. 25mL 具‎塞比色管 9. 滴管，漏斗，滤纸，吸小球， 10. 玻璃棒，温度计，标记笔，标签纸
若干，提前 20m‎in 打开预‎热 1-2 套 2 个/组 1 个/组 2个 2个 1 个/组 1个 1 个/组 1-2 个 10 个/组 1 个/组若干
四、试剂（所用试剂，除另有规定‎外，均为分析纯‎ 试剂。）
1. 亚铁氰化钾‎溶液：称取 106‎.0g 亚铁氰‎化钾分装，1 瓶/大
结果保留小‎数点后 2 位‎有效数字。
溶于 100‎mL 热水中‎，冷却后备用‎。
组
4、对氨基苯磺‎酸溶液(4g/L)：称取 0.4 g 对氨基苯‎磺酸，分装，1 瓶/大溶于 100‎mL 20％的盐酸中，置棕色瓶中‎混匀，避光保组
存。
5、盐酸萘乙二‎胺溶液（2g/L）：称取 0.2 克盐酸萘‎乙二分装，1 瓶/大
胺，溶于 100‎毫升水中，避光保存。有致癌作用‎
按下式计算‎： A
X = ——————— ×1000
v1
m ×—— ×1000 V2
式中:
X — 试样中亚硝‎酸盐的含量‎， mg/kg； V1— 测定时所取‎溶液体积，mL； V2 — 试样处理液‎总体积，mL；
m — 试样质量，g； A—试样测定液‎中亚硝酸盐‎的质量，µg；
部分食品中‎亚硝酸盐的‎限量标准（以 NaNO‎2 计）
组
6、亚硝酸钠标‎准溶液（0.2g/L）：精密称取 0‎.1000g‎于

分光光度法测食品中亚硝酸盐含量中标准曲线的制作及影响因素

分光光度法测食品中亚硝酸盐含量中标准曲线的制作及影响因素摘要：标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线，是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。

在分光光度法测食品中亚硝酸盐含量分析中，被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系，试样测定的结果可以从标准曲线上查出。

因此标准曲线制作的好坏，将会影响测定结果的准确度。

关键词：分光光度法食品亚硝酸盐制作标准曲线影响因素标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线，是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。

在用分光光度法分析食品中亚硝酸盐含量时，被测物质的浓度在仪器上的响应信号值在一定范围内呈直线关系，试样测定的结果可以从标准曲线上查出。

因此标准曲线制作的好坏，将会影响测定结果的准确度。

1、标准曲线的表达式标准曲线应是一条通过原点的直线，如果坐标上各浓度点基本在一条直线上可不进行回归处理，但在实验中不可避免地存在测定误差，往往会有一、二点偏离直线，此时可用最小二乘法进行回归分析，然后绘制曲线，通常称为回归直线，而代表回归直线方程叫回归方程，表达式为：y=bx+a(式中：b为直线斜率，a为Y轴上的截距，x为被测溶液的浓度，y为吸光度，是多次测定结果的平均值)。

在实际工作中，制作亚硝酸盐标准曲线的目的，是要借助它来查出试样中亚硝酸盐的浓度，而不是由x值通过回归方程去求得最可靠的y值，为了便于将观察到仪器响应信号值代人回归方程中直接计算试样的浓度或含量，勿需去绘制标准曲线再从曲线上查出被测物的浓度，改用下式计算：x=by+a(式中：a为X轴线上的截距，其它解释同前)。

2、标准曲线的参数标准曲线有3个参数，即相关系数r，斜率b和截距a。

(1)相关系数(r)：相关系数是表示变量x与y之间的线性关系的密切程度。

如果r=1则所有点都落在一条直线上。

y与x完全呈现线性关系，但在分析中总存在随机误差，所以，一般r≥0．999即可。

亚硝酸盐的紫外分光光度法测定

亚硝酸盐的紫外分光光度法测定亚硝酸盐是一种常见的水质指标参数，其测定方法有很多种，其中紫外分光光度法是一种常用且准确的测定方法。

本文将介绍亚硝酸盐的紫外分光光度法测定原理、操作步骤和注意事项。

一、原理亚硝酸盐的紫外分光光度法是基于亚硝酸盐在紫外光照射下能够吸收特定波长的光的原理进行测定的。

亚硝酸盐在紫外光的照射下会产生吸收，吸收的强度与亚硝酸盐的浓度成正比关系。

通过测定吸光度，可以得到亚硝酸盐的浓度。

二、操作步骤1. 样品准备：将待测样品收集到干净的容器中，用天然水充分稀释，使亚硝酸盐的浓度在测定范围内。

2. 仪器准备：将紫外分光光度计调整至所需波长，常用的波长为220nm或540nm。

3. 标准曲线绘制：取一系列不同浓度的亚硝酸盐标准溶液，分别进行测定，得到吸光度与浓度之间的关系。

绘制标准曲线，可以通过线性回归法计算出亚硝酸盐浓度与吸光度之间的线性关系。

4. 测定样品吸光度：将稀释后的样品分别置于紫外分光光度计测量池中，通过测量吸光度值，利用标准曲线计算出亚硝酸盐的浓度。

三、注意事项1. 样品的准备要避免与空气中的亚硝酸盐接触，以免影响测定的准确性。

2. 在进行标准曲线绘制和样品测定时，要注意避免污染和交叉污染，以免影响测定结果的准确性。

3. 在测定过程中，要保持光度计的光程恒定，避免因光程变化而引起的测定误差。

4. 样品测定时，要确保样品的吸光度值在光度计的线性测定范围内，否则需要适当稀释或者稀释后再进行测定。

5. 在进行测定时，应根据实际情况选择合适的测定波长，以获得较高的测定灵敏度和准确性。

总结：亚硝酸盐的紫外分光光度法是一种常用的测定方法，其原理简单且准确性较高。

通过绘制标准曲线和测定样品的吸光度值，可以得到亚硝酸盐的浓度。

在进行测定时，要注意样品的准备和处理、光度计的光程恒定、测定波长的选择等因素，以确保测定结果的准确性。

此外，为了提高测定的灵敏度和准确性，可以选择适当的测定波长。

通过紫外分光光度法测定亚硝酸盐的浓度，可以有效监测水质的污染程度，保障人们的健康和生活质量。

亚硝酸盐的测定分光光度法

亚硝酸盐的测定分光光度法1. 引言哎呀，提到亚硝酸盐，咱们可得认真对待。

你说这玩意儿是个啥？简单来说，亚硝酸盐是一种化学物质，通常用于食品保鲜、调味，但如果摄入过多，那可就不妙了，健康可要受损的！所以，今天咱们就来聊聊如何用分光光度法来测定亚硝酸盐的含量，确保我们的饮食安全。

你可得好好听，毕竟这可不是小事一桩。

2. 分光光度法基础2.1 什么是分光光度法？先来个大概念，分光光度法其实就是用光来“看”东西。

简单点说，就是把光照射到样品上，看它吸收了多少光，这样咱们就能知道里面的某种成分含量。

想象一下，像是在酒吧里，灯光闪烁，调酒师正忙着调制鸡尾酒，你想知道酒里加了多少种酒精，就可以通过观察颜色来判断。

这个原理在化学实验里也是如此，分光光度法就是个“色彩侦探”。

2.2 亚硝酸盐的特性那么，亚硝酸盐又是什么样的“色彩”呢？它在特定条件下会产生一种紫红色的溶液，这就是它的“标志性风格”。

用分光光度法时，咱们可以通过测量这种紫红色的强度来判断亚硝酸盐的浓度。

颜色越深，浓度越高，就像过年时，红红火火的热闹气氛，浓得化不开。

3. 测定步骤3.1 样品准备好，接下来就是实际操作的步骤。

首先，得准备样品。

无论是蔬菜、水果，还是肉类，都可能含有亚硝酸盐。

你得把它们搞成均匀的样品，像搅拌咖啡一样，确保每一口都是“标准味”。

接着，使用适当的溶剂（比如水）稀释样品，让亚硝酸盐“溶入”其中，形成一杯“亚硝酸盐鸡尾酒”。

3.2 进行测定然后，把样品倒入分光光度计，调节好波长，一般是在540纳米左右。

此时，你得屏住呼吸，仿佛在等待着揭晓的那一刻。

光穿过样品，设备会记录下光的吸收程度，哇，这时你就能看到那个紫红色在闪烁，简直像是电影里的特效场景。

最后，根据吸光度和标准曲线，就能计算出样品中亚硝酸盐的浓度啦，感觉像是做了一场“化学魔法”。

4. 注意事项4.1 操作细节不过，做实验可不是儿戏，咱们得小心翼翼，尤其是在操作细节上。

光线、温度、样品的处理，都可能影响最终结果，稍微马虎，就会前功尽弃。

亚硝酸盐标准曲线

亚硝酸盐标准曲线亚硝酸盐是一种常见的无机化合物，广泛应用于食品工业、环境监测和医药领域。

在实验室中，我们常常需要测定样品中亚硝酸盐的含量，而建立亚硝酸盐的标准曲线是进行定量分析的关键步骤之一。

本文将介绍亚硝酸盐标准曲线的建立方法及其在实验中的应用。

首先，我们需要准备一定浓度的亚硝酸盐标准溶液。

通常情况下，我们可以通过称取一定质量的亚硝酸钠固体，溶解于已知体积的去离子水中来制备标准溶液。

在制备过程中，需要注意溶液的稀释和混匀，确保标准溶液的浓度准确可靠。

接下来，我们可以利用分光光度计或比色皿进行测定。

将一系列不同浓度的亚硝酸盐标准溶液分别置于比色皿中，然后利用分光光度计测定其吸光度。

在测定过程中，需要选择合适的波长，并进行基准校正，确保测定结果的准确性。

得到各个标准溶液的吸光度数据后，我们可以绘制亚硝酸盐标准曲线。

通常情况下，我们将标准溶液的浓度作为自变量，吸光度作为因变量，利用适当的拟合方法（如线性拟合、二次拟合等）得到标准曲线的方程。

标准曲线的斜率和截距分别代表了亚硝酸盐浓度和吸光度之间的线性关系，可以用于后续样品的浓度测定。

在实际应用中，我们可以利用建立好的亚硝酸盐标准曲线对未知样品进行浓度测定。

将待测样品的吸光度值代入标准曲线方程中，即可得到样品中亚硝酸盐的浓度。

需要注意的是，样品的处理和测定条件应与建立标准曲线时保持一致，以确保测定结果的准确性和可靠性。

总的来说，建立亚硝酸盐标准曲线是进行定量分析的重要步骤之一。

通过合理的实验设计和严谨的操作，我们可以得到准确可靠的标准曲线，为后续样品的浓度测定提供有力支持。

在实际操作中，我们应该严格遵循操作规程，确保实验数据的准确性和可重复性，为科研工作和生产实践提供可靠的数据支持。

分光光度法测亚硝酸盐的实验报告

分光光度法测亚硝酸盐的实验报告一、实验目的亚硝酸盐是一类无机化合物的总称，常见的有亚硝酸钠和亚硝酸钾。

在食品加工和储存过程中，亚硝酸盐常被用作防腐剂和发色剂。

然而，过量摄入亚硝酸盐对人体健康有潜在危害，可能导致中毒甚至致癌。

因此，准确测定食品、水样等中的亚硝酸盐含量具有重要意义。

本次实验旨在掌握分光光度法测定亚硝酸盐的原理和操作方法，并能够对实验结果进行准确分析。

二、实验原理分光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法。

在本实验中，亚硝酸盐在盐酸酸化的条件下与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，然后再与 N(1-萘基)乙二胺盐酸盐偶合生成紫红色的偶氮染料。

该偶氮染料在 538nm 波长处有最大吸收峰，其吸光度与亚硝酸盐的浓度成正比，通过测定吸光度即可计算出亚硝酸盐的含量。

三、实验仪器与试剂1、仪器可见分光光度计电子天平容量瓶（50mL、100mL、500mL）移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）比色管（50mL）玻璃棒烧杯（50mL、100mL、500mL）2、试剂亚硝酸钠标准储备液（500μg/mL）：准确称取 01232g 于硅胶干燥器中干燥 24h 的亚硝酸钠，用水溶解并定容至 500mL。

亚硝酸钠标准使用液（50μg/mL）：吸取 500mL 亚硝酸钠标准储备液于 500mL 容量瓶中，用水稀释至刻度。

对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：称取 04g 对氨基苯磺酸，溶于 100mL 20%盐酸中，避光保存。

N(1-萘基)乙二胺盐酸盐溶液（2g/L）：称取 02g N(1-萘基)乙二胺盐酸盐，溶于 100mL 水中，避光保存。

盐酸溶液（20%）：量取 20mL 浓盐酸，用水稀释至 100mL。

四、实验步骤1、标准曲线的绘制分别吸取 000、020、040、060、080、100、150、200mL 亚硝酸钠标准使用液于 50mL 比色管中，各加水至 25mL。

分别加入 2mL 对氨基苯磺酸溶液，摇匀，静置 3-5min。

分光光度法测定火腿肠中亚硝酸盐含量的研究

分光光度法测定火腿肠中亚硝酸盐含量的研究作者：陈霞李存英范雯婷宋文爽魏法山来源：《现代食品·上》2017年第09期摘要：本文对GB 5009.33-2010第二法分光光度法火腿肠中亚硝酸盐含量的测定进行研究，具体研究了对氨基苯磺酸添加量及盐酸萘乙二胺添加量等对亚硝酸盐的影响。

在单因素实验的基础上，利用正交试验确定检测亚硝酸盐的最佳条件。

结果表明：显色剂反应时间和对氨基苯磺酸添加量对亚硝酸盐的检出量均具有显著影响（P显色剂反应时间>盐酸萘乙二胺添加量。

关键词：分光光度法；火腿肠；亚硝酸盐Abstract：In this study， GB 5009.33 – 2010 second spectrophotometric method improved ham nitrite. The factors including of added amount of amino benzene sulfonic acid， and add the amount of hydrochloric acid and ethylenediamine addition on nitrite were studied. The optimum conditions were obtained by orthogonal experiment design based on factor experiment. The results showed that the reaction time of the color reagent and the added amount of amino benzene sulfonic acid have significant influence on the detection rate of nitrite （P reaction time of color reagent > add the amount of hydrochloric acid ethylenediamine dihydrochloride.Key words：Spectrophotometric method； Ham sausage； Nitrite中图分类号：O657.31火腿肠是以切碎或斩碎的猪肉和鸡肉为主原料，淀粉和植物蛋白等填充剂为辅料的一种肉制品。

分光光度法测定火腿肠中亚硝酸盐的含量1

分光光度法测定火腿肠中亚硝酸盐的含量引言：亚硝酸盐作为一种食品添加剂，能够保持眼肉制品等的色香味，并具有一定的防腐性。

但同时也具有较强的致癌作用，过量食用会对人体产生危害。

因此，食品加工中需严格控制亚硝酸盐的加入量。

实验原理：样品经沉淀蛋白质，除脂肪后，在弱酸性溶液中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应，生成的重氮化合物与盐酸萘乙二胺偶联成紫色的偶氮染料，可用分光光度法测定，仪器：小型多用食品粉碎机，分析天平，烧杯，玻璃棒，250mL 容量瓶，50mL容量瓶（7只），漏斗，滤纸，滴管， 2.00mL移液管试剂：饱和硼砂溶液，，，150 亚铁氰化钾水溶液，，蒸馏水材料：火腿肠样品（双汇王中王骨香风味）实验步骤试样预处理1）取样，在分析天平上称取一定量火腿肠样品，样品质量为5.0984g，将称得的样品放入粉碎机中，加入一定量水后将样品绞碎。

2）将绞碎后的试样倒入烧杯中，加入12.5mL 硼砂饱和溶液搅拌均匀。

3) 将烧杯中的试样用玻璃棒全部转移到250mL 容量瓶中，并用少量水洗涤玻璃棒和烧杯1~2 次，并将容量瓶放在沸水浴中加热15min.4) 取出容量瓶，在轻轻摇动下慢慢滴加 2.5mLZnSO4 溶液沉淀出蛋白质，冷却至室温后，用蒸馏水稀释至刻度，定容，摇匀。

5 放置10min 中左右，撇去上层油脂，将清液在小漏斗上过滤，需去除最初的10mL 滤液，剩下的留测定用。

标准曲线的绘制1) 准确移取NaNO2溶液0，0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2.0mL分别置于50mL 的容量瓶中，再各加入30mL 水，然后分别加入2mL 对氨基苯磺酸溶液，摇匀，静置3min.2) 分别加入1mL 盐酸萘乙二胺溶液，加水稀释至刻度，摇匀。

3) 放置15min 分钟后用1cm 吸收池，以试剂空白为参比，于波长540nm 处测定各试液的吸光度。

4) 以NaNO2 溶液的加入量为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

亚硝酸盐标准曲线

亚硝酸盐标准曲线亚硝酸盐是一种常见的化学物质，它在环境监测和食品安全检测中起着重要作用。

为了准确测定样品中的亚硝酸盐含量，我们需要建立一个标准曲线，以便通过测定吸光度来计算出样品中亚硝酸盐的浓度。

本文将介绍如何建立亚硝酸盐的标准曲线，并对标准曲线的应用进行讨论。

首先，我们需要准备一系列不同浓度的亚硝酸盐标准溶液。

可以通过逐步稀释已知浓度的亚硝酸盐溶液来制备这些标准溶液。

然后，我们使用分光光度计来测定每种标准溶液的吸光度。

在进行吸光度测定时，要确保选择合适的波长，并使用纯水作为空白对照。

得到各个标准溶液的吸光度数据后，我们将吸光度作为纵坐标，标准溶液的浓度作为横坐标，绘制出标准曲线。

建立好标准曲线后，我们就可以用它来测定未知样品中亚硝酸盐的含量了。

首先，我们需要将样品制成适当的溶液，然后用分光光度计测定其吸光度。

接下来，我们可以根据标准曲线，通过样品的吸光度值来推算出样品中亚硝酸盐的浓度。

需要注意的是，为了确保测定结果的准确性，我们通常会对样品进行多次重复测定，然后取平均值作为最终结果。

标准曲线的建立和应用对于亚硝酸盐的测定非常重要。

它不仅可以帮助我们准确地测定样品中亚硝酸盐的含量，还可以评估分析方法的灵敏度和准确度。

此外，标准曲线还可以用来验证分光光度计的性能是否稳定，以及在日常实验中是否存在系统误差。

总之，亚硝酸盐标准曲线的建立和应用是化学分析中的重要内容。

通过本文的介绍，相信读者对于如何建立亚硝酸盐标准曲线以及如何应用标准曲线进行样品测定有了更清晰的认识。

希望本文能对相关领域的研究和实践工作提供一定的帮助。

在实际操作中，我们还需要注意标准曲线的保存和更新，以及分析条件的控制和标定。

只有做好这些工作，才能确保标准曲线的准确性和可靠性，从而保证样品测定结果的准确性和可比性。

亚硝酸盐标准曲线的建立和应用需要科学严谨的态度和细致的操作，但它将为我们的工作带来更多的便利和可靠性。

紫外分光光度计测定食品中亚硝酸盐的不确定度评定

分析检测2.2.3 加工方式对半成品原料品质的影响将半成品原料通过水煮和油炸两种方式加工3 min，在20 ℃下放置4 h，其品质指标见表4。

由表4可知，同一种类半成品经水煮加工后的菌落总数大于油炸加工后的菌落总数，经水煮加工后的挥发性盐基氮含量大于油炸加工后的挥发性盐基氮含量，常温放置4 h后所有半成品中菌落总数和挥发性盐基氮含量均未超出限量值，在可接受的范围内。

营养方面，同一种类半成品经水煮加工后的干物质含量大于油炸加工后的干物质含量，经油炸加工后的蛋白质含量大于水煮加工后的蛋白质含量。

证明水煮有利于食物总体营养物质的保留，油炸有利于蛋白质的保留。

3 结论本文对食品半成品在加工储存过程中影响产品品质的因素进行了分析，结果表明，半成品的挥发表3 不同加工时长对半成品原料品质的影响名称加工时间/min咀嚼性/g剪切力/N菌落总数/（lgCFU·g-1）鸡肉111.60±0.9613.88±1.16 4.34 317.15±3.6116.93±1.04 4.20 522.25±0.4917.90±2.08 3.63鸭肉110.77±1.2513.26±0.34 4.43 321.20±3.3910.71±1.70 4.23 530.55±2.1921.05±1.57 3.36猪肉114.20±0.7111.09±1.18 4.43 315.23±1.5012.61±1.64 4.23 517.83±3.9913.28±1.59 3.41豆腐1 1.40±0.40 1.22±0.19 4.32 3 5.40±0.62 2.15±0.42 4.26 57.97±2.748.74±0.19 4.11茄子1 2.25±0.358.54±0.08 2.97 30.53±0.1210.79±0.95 2.32 50.83±0.6711.06±1.39 1.81土豆1 1.00±0.79 2.55±0.64 4.00 310.80±2.129.56±0.65 3.18 531.35±4.1711.63±1.32 2.28罗非鱼10.73±0.67 1.01±0.06 5.38 3 6.85±1.48 3.92±0.54 4.11 510.97±0.579.96±0.34 2.98鲢鱼腩1 5.50±1.13 4.35±0.84 3.20 3 4.40±0.719.95±1.63 2.32 515.93±5.3711.61±1.620.00虾111.45±0.3510.41±1.67 3.15 313.60±0.1413.10±1.25 2.46 537.05±2.4714.30±0.99 1.81限量值———＜5.00表4 加工方式对半成品原料品质的影响项目加工方式鸡肉鸭肉虾土豆限量值菌落总数/（lgCFU·g-1）水煮 4.20 4.43 4.15 3.88＜5.00油炸 3.20 4.23 2.46 3.18挥发性盐基氮含量/（mg/100 g）水煮21.6418.9714.267.27＜30.00油炸16.1216.3014.17 6.06干物质/g 水煮34.2232.1735.6027.70—油炸29.5026.9024.8020.20蛋白质/（g/100 g）水煮21.6418.9715.95 1.90—油炸25.9720.4422.38 1.95（下转第106页）分析检测紫外分光光度计测定食品中亚硝酸盐的不确定度评定刘劲1，钱思宏2（1.江苏省海安市综合检验检测中心，江苏海安 226602；2.海安市疾病预防控制中心，江苏海安 226699）摘要：本文采用紫外分光光度计法来分析食品中亚硝酸钠含量测定的全过程，并对该方法进行不确定度评定。

亚硝酸盐测定分光光度法

亚硝酸盐测定分光光度法引言：亚硝酸盐是一种常见的无机化合物，广泛应用于食品加工、水处理和医药等领域。

准确测定亚硝酸盐的含量对于确保产品质量和保护环境具有重要意义。

分光光度法是一种常用的测定亚硝酸盐含量的方法，本文将介绍亚硝酸盐测定分光光度法的原理、操作步骤以及应用范围。

一、原理：亚硝酸盐在紫外光下可以与苯酚类化合物（如萘酚）发生偶联反应生成偶氮化合物，其最大吸收波长位于430-540nm的黄色区域。

根据比尔-朗伯定律，偶氮化合物的吸光度与其浓度成正比关系。

因此，通过测定偶氮化合物的吸光度，可以间接测定亚硝酸盐的含量。

二、操作步骤：1. 样品制备：将待测样品中的亚硝酸盐与酸性条件下的苯酚类化合物进行偶联反应，生成偶氮化合物。

根据样品的特性，选择合适的萘酚类化合物和酸性条件，并进行样品的预处理。

确保样品中没有干扰物质的存在。

2. 建立标准曲线：根据所选用的萘酚类化合物，在一定浓度范围内制备一系列标准溶液。

使用分光光度计测定每个标准溶液的吸光度，并绘制标准曲线。

标准曲线应包括至少5个点，覆盖待测样品的浓3. 测定样品吸光度：根据样品的特性，选择合适的测定波长。

将样品溶液置于分光光度计的测量池中，读取吸光度值。

4. 计算亚硝酸盐含量：根据标准曲线，将测得的样品吸光度值转化为亚硝酸盐的浓度值。

根据样品的稀释倍数和酸性条件，进行相应的浓度修正。

三、应用范围：亚硝酸盐测定分光光度法广泛应用于食品、环境和医药等领域。

以下列举几个常见的应用案例：1. 食品安全检测：亚硝酸盐是一种潜在的致癌物质，在食品中的含量受到严格限制。

通过分光光度法测定食品中亚硝酸盐的含量，可以确保食品的安全性。

2. 水质监测：亚硝酸盐是水体中常见的污染物之一，其含量的高低直接影响水质的安全性。

利用分光光度法对水样中的亚硝酸盐含量进行测定，可以及时监测水质的变化。

3. 药物分析：亚硝酸盐在某些药物中作为反应中间体存在，其含量的测定对于药物的质量控制至关重要。

分光光度法测定食品中亚硝酸盐含量标准曲线线性范围的研究

分光光度法测定食品中亚硝酸盐含量标准曲线线性范围的研究作者：***来源：《食品安全导刊》2021年第10期摘要：采用《食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》（GB 5009.33—2016）中第二法可見分光光度法测定食品中亚硝酸盐的过程中，经常出现所测定的食品中亚硝酸盐含量超过标准曲线的检测范围、标准曲线主体部分的吸光度值不在分光光度法最佳范围0.2～0.8的问题。

表明国家标准建议使用的亚硝酸钠标准溶液的浓度梯度范围有限，标准曲线线性范围较窄，只能用于测定亚硝酸盐含量较低的食品，而对于含量超过标准曲线最高点的食品，则还需要进一步稀释后才能测定，增加了检测人员的工作量。

经过多次实践，对标准曲线的范围进行了适当扩展，使标准曲线能直接适用于高含量亚硝酸盐食品的检测，以达到提高食品检测的检测效率和稳定性的目的。

关键词：食品;可见分光光度法;亚硝酸盐;标准曲线亚硝酸盐是一种广泛使用的食品添加剂，是我国允许使用的食品添加剂之一。

常用于乳制品、肉类、腌渍蔬菜等食品加工行业，剩菜剩饭、久置的蔬菜和白开水中也会产生亚硝酸盐。

亚硝酸盐具有良好的防腐抗氧化、发色及抑菌等作用，能延长食品的保质期，使食物颜色更鲜艳、味道更鲜美，但亚硝酸盐存在一定的毒性，若过量使用会严重影响人们的身体健康。

亚硝酸盐进入人体血液后，会使血红蛋白变性，血液的携氧能力降低，造成人体缺氧症状，影响人的生命健康[1]。

亚硝酸盐在人体内很容易与蛋白质分解产物在酸性条件下反应转换成亚硝胺，而亚硝胺是一种强致癌物质，大量或长时间摄入能够诱发肿瘤的产生，所以必须对食品中的亚硝酸盐含量进行控制和定量检测[2]。

1 分光光度法测定亚硝酸盐标准曲线制作存在的问题目前，我国检测食品中亚硝酸盐的方法依据《食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》（GB 5009.33—2016），检测方法有离子色谱法和分光光度法[3]。

分光光度法具有简单、快速、灵明度高、经济等优点，被各检测实验室广泛使用，但在实际的检测工作发现分光光度法在标准曲线存在以下两个方面的问题。

分光光度法快速测定食品中亚硝酸盐的含量

分光光度法快速测定食品中亚硝酸盐的含量孔祥威;汤明河;庄春蕉【摘要】The method of spectrophotometric determination of nitrite in food was improved in 2 respects:①ultrasonic extraction of sample was adopted,thus requiring less time for operation;② analytical operation was carried out under conditions with small volumes,thus making the method to meet the requirements of rapid analysis.It was shown that the accuracy and precision of the present method were in consistency with those of the method given in GB standard.%对分光光度法测定食品中亚硝酸盐含量的方法做了两点改进：其一，采用超声提取法，提取时间较短；其二，采用小体积条件下操作，使整个分析过程快速化，适用现场执法快速检测。

本方法的准确性和精密度与国家标准方法的要求相符。

【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】3页(P872-874)【关键词】亚硝酸盐;分光光度法;食品【作者】孔祥威;汤明河;庄春蕉【作者单位】温州市标准化研究院，温州 325001;苍南县质量技术监督检测院，温州 325800;福建华南女子职业技术学院，福州 350000【正文语种】中文【中图分类】O657.3亚硝酸盐作为增光剂和防腐剂广泛地应用于食品行业中，过量食用含有亚硝酸盐的食品，容易引起食物中毒，长期食用会导致食道癌和胃癌[1]。

实验十一分光光度法测定火腿肠中亚硝酸盐的含量（精）

实验⼗⼀分光光度法测定⽕腿肠中亚硝酸盐的含量（精）实验⼗⼀分光光度法测定⽕腿肠中亚硝酸盐的含量⼀、实验原理样品经沉淀蛋⽩质，除脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化，再与盐酸萘⼄⼆胺偶合形成红⾊染料，通过测定吸光度可与标准进⾏⽐较定量。

⼆、试剂与仪器（1）试剂亚铁氰化钾溶液：称取10.6gK4Fe(CN)6 .3H2O溶于⽔定容100mL.⼄酸锌溶液：称取11g Zn(CHCOO)2 .2H2O加1.5mL冰⼄酸，溶于⽔定容50mL。

饱和硼砂溶液：称取5g NaB4O7 . 10H2O溶于100mL热⽔中，冷却备⽤。

20%盐酸：取54mL浓盐酸加⽔45mL。

0.4%对氨基苯磺酸：称取0.4g对氨基苯磺酸溶于100mL20%盐酸中。

200ug/mL亚硝酸钠标准液：精密称取0.1000g经硅胶⼲燥24⼩时的亚硝酸钠（GR），加⽔溶解后，定容500mL。

5.0ug/mL亚硝酸钠标准使⽤液：吸取亚硝酸钠标准液5.0mL于500mL容量瓶中⽤重蒸馏⽔定容。

（2）仪器电炉电热恒温⽔浴锅玻棒漏⽃铁架台烧杯（50mL、200mL、500mL 各2个）；容量瓶（250ml1个）；吸管（2mL,5mL,10mL,50mL各1⽀）；⽐⾊管（50mL10⽀）三、实验操作（1）样品处理称取3g左右⽕腿肠于50mL烧杯中，加⼊饱和硼砂溶液6.3mL，以玻棒搅匀，⽤70℃左右的重蒸馏⽔约100mL将其洗⼊250mL 的容量瓶中，置于沸⽔浴中加热15分钟，取出，⼀边转动⼀边加⼊5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加⼊5mL⼄酸锌溶液以沉淀蛋⽩质。

定容，混匀，静置半⼩时，除去上层脂肪，过滤，弃去初滤液30mL，收集滤液备⽤。

（2）绘制标准曲线吸取0.00,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.20mL 亚硝酸钠标准使⽤液，分别置⼊7⽀50mL ⽐⾊管中，各加⼊0.4%对氨基苯磺酸2mL,混匀，静置3-5分钟后各加⼊1.00mL 0.2%盐酸萘⼄⼆胺溶液，加⽔⾄刻度，混匀，静置15分钟，⽤2cm ⽐⾊⽫，以零管调零，于538nm 处测量吸光度，以亚硝酸钠含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。