志贺菌属
志贺菌属简介
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志贺菌属简介志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌,通称痢疾杆菌。
根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。
CDC分类系统(1989)将生化性状相近的A、B、C群归为一群,统称为A、B、C血清群,将鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。
我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢-最为常见。
(一)生物学特性1.形态与染色:革兰阴性短小杆菌,(2~3)μm×(0.5~0.7)μm,无荚膜,无芽胞,无鞭毛,有菌毛。
2.培养特性:需氧或兼性厌氧,液体培养基中呈浑浊生长,在普通琼脂平板和SS培养基上形成中等大小、半透明的光滑型菌落,宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落医学|教育网搜集整理。
3.生化反应:志贺菌属的细菌KIA:K/A、产气-/+、H2S-,MIU:动力-、吲哚+/-、尿酶-,氧化酶-,不产生赖氨酸脱羧酶,氧化酶试验阴性。
4.抗原结构:志贺菌属只有O抗原而无鞭毛抗原,个别菌型及新分离菌株有K抗原。
(二)致病性致病物质:侵袭力:菌毛粘附于肠粘膜上皮细胞,诱导细胞内吞。
内毒素:破坏肠粘膜;肠壁通透性;肠壁植物神经——腹痛,腹泻,里急后重,粘液脓血便。
外毒素(志贺毒素,ST):肠毒素活性;细胞毒活性;神经毒活性。
所致疾病:细菌性痢疾,简称菌痢医学|教育网搜集整理。
1.急性菌痢。
2.中毒性菌痢。
3.慢性菌痢。
传染源为病人和带菌者,经粪口传播。
(三)微生物学检验1.标本采集尽可能在发病早期及治疗前采集新鲜粪便,选择脓血便或粘液便,必要时可用肛拭子采集。
2.检验办法及鉴定(1)分离培养:取粪便(粘液或脓血部分)或肛拭标本接种GN肉汤增菌及再开展分离培养。
一般同时接种强弱选择性不一样的两个平板。
强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基(SS);弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。
培养18~24h后选取可疑菌落开展下列鉴定。
(2)鉴定1)初步鉴定:挑选可疑菌落3~4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。
最新整理沙门菌属和志贺菌属检验教学文案
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以呈现2+凝集现象的血清最高稀释倍数作为该血清的凝集效价。
一般认为,伤寒沙门菌O抗体凝集价在1:80以上,H抗体在1:160以上,甲、乙、丙型副伤寒沙门菌凝集价在1:80以上才有诊断意义。
注意事项
1.加入诊断菌液时,由对照管开始往前,每管各加O.5ml。
2. 结果观察时不要振荡试管,先观察,必要时再轻摇试管使凝块从管底升起,最后按液体的清浊,凝块的大小进行记录,对照管(不凝集)与试验管同时对着光线往暗处看液体透明度和凝集块。
3.“H”凝集呈絮状,以疏松之大团铺于管底,轻摇试管即能荡起,而且极易散开。
4.“O”凝集呈颗粒状,以坚实凝片沉于管底,轻摇试管不易荡起,且不易散开。
志贺菌属
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志贺菌属(痢疾杆菌)
志贺菌属是人类及灵长类动物细菌性痢疾最常见的病原菌,又称痢疾杆菌。
形态与染色:革兰阴性杆菌,无芽孢,无鞭毛,无荚膜,有菌毛。
培养特性:因不发酵乳糖而在肠道选择培养基上为无色透明或者半透明菌落。
抗原构造:菌体(0)抗原,无鞭毛(H)抗原,部分菌株有K抗原,
分类:根据生化反应特征,将志贺菌属分为4群:痢疾志贺菌群(A群),福氏志贺菌群(B群),鲍氏志贺菌群(C群),宋内志贺菌群(D群)。
鉴定:一般标本为粪便和肛拭子。
镜检:革兰阴性杆菌。
分离培养:将标本接与SS平板,麦康凯或伊红亚甲蓝平板,如肠道选择性平板有不发酵乳糖的无色透明或不透明菌落生长,则需要进一步鉴定。
生化鉴定:氧化酶阴性,硝酸盐还原阳性,在克氏双糖(KIA)斜面产碱,底层产酸,不产气,硫化氢为阴性,IMViC结果为-+--,MIU 为--/+-,赖氨酸脱羧酶阴性。
鉴别要点:志贺军属与肠侵袭性大肠埃希菌鉴别:在血清学上有交叉反应,生化特性相近,志贺菌分解葡萄糖产酸不产气,动力试验、赖氨酸脱羧酶、醋酸钠及黏液酸盐试验菌阴性,可与肠侵袭性大肠埃希菌鉴别。
志贺菌属与类志贺邻单胞菌鉴别:可用氧化酶、动力试验鉴别、志贺菌为阴性,后者阳性。
志贺菌属与伤寒沙门菌鉴别:可用动力试验、硫化氢和因子血清09鉴别,志贺为阴性,而沙门阳性。
检验微生物学 志贺菌属
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致病性与免疫性
二、所致疾病: 细菌性痢疾(简称痢疾)。经粪-口传播。 宋内志贺菌引起轻型感染,痢疾志贺菌 引起重型感染,福氏志贺菌感染易变为 慢性,病程迁延。
致病性与免疫性
常见临床感染类型: 1.急性菌痢:发热、腹痛、腹泻、里急后重。粪
便为脓血粘液便。 2.中毒性菌痢:出现神经系统症状,多见于少儿。
多无消化道症状。 3.慢性菌痢:病情迁延,常反复发作,病程在二
个月以上。 隐匿型菌痢:无症状,但结肠镜检或粪便培养 细菌为阳性。 4.带菌者:分为恢复期、慢性和健康带菌者
致病性与免疫性
三、耐药性 出现多重耐药菌,其原因是质粒传递产 生耐药
志贺菌属
志贺菌属是细菌性痢疾的最常见病原菌 痢疾志贺氏菌,福氏志贺氏菌、鲍氏志
贺氏菌和宋内志贺氏菌。
生物学性状
一、形态染色: G-短杆菌、无芽胞、有菌毛、无荚膜、
无鞭毛(无动力)
生物学性状
二、培养特性 在SS平板上形成乳糖不发酵、中等大
小、无色半透明菌落
生物学性状
生物学性状
三、生化反应: 动力阴性,分解葡萄糖产酸不产气、不发酵乳
①与EIEC鉴别:醋酸钠,葡萄糖铵利用,黏质酸 盐产酸试验
②与类志贺邻单胞菌鉴别
志贺菌 类志贺邻单胞菌
氧化酶
-
+
动力试验 -
+
③与沙门菌鉴别(培养24h动力不明显、H2S阴性)
微生物学检验
④快速诊断 a.直接凝集 b.免疫荧光菌球法 c.协同凝集试验 d.乳胶凝集试验 e.分子生物学方法
致病性与免疫性
糖(某些迟缓发酵乳糖)、发酵甘露/+IMViC:-+--
志贺菌属
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所致疾病
细菌性痢疾
• 临床表现:急性、慢性、中毒性、带菌者 • 夏秋季节肠道传染病
传染源:病人、带菌者(尤为重要!) 传播途径:粪—口途径 易感者:人类普遍易感,且敏感性较高
微生物学特性与检验
志贺菌属
粪便、肛拭子 分离培养
SS、MAC XLD
增菌培养 GN肉汤
挑选可疑菌落 初步鉴定 触酶、氧化酶、硝酸盐还原 KIA、MIU、IMViC
最终鉴定
全面生化 毒力试验
血清学鉴定 Βιβλιοθήκη 、群、型生物学性状 形态染色:短小G-杆菌,无鞭毛 培养特性:营养要求不高
SS、MAC:呈乳糖不发酵、中等大小 无色半透明的S型菌落 XLD:红色
生化反应
属生化反应
KIA:K/A -/+ MIU:- +/- IMViC:– + – – 群内区别 A群不发酵甘露醇 D群ONPG及鸟氨酸脱羧酶阳性
志贺菌属
鉴定
•血清学鉴定
•与EIEC的鉴别
无动力、赖氨酸脱羧酶(-) 发酵糖产酸不产气分解粘多糖 在醋酸盐琼脂上产碱 •与类志贺邻单胞菌鉴别 邻单胞菌氧化酶、动力均(+) •与伤寒沙门菌 伤寒沙门菌H2S和动力(+) A-F(O多价)、Vi、O9凝集 •生化反应为志贺菌但与志贺菌抗血清不凝集 ①K抗原 ②EIEC
临床意义
致病物质
菌毛、内毒素,少数菌株产生外毒素
1、侵袭力--菌毛 粘附并穿入回肠未端、 结肠粘膜上皮细胞
菌毛粘附及穿入 是致病的首要 粘膜固有层上皮细胞增殖、炎症 因素!
2、内毒素
内毒素
破坏局部粘膜,加重坏死及溃疡形成 刺激植物神经-肠功能紊乱 典型痢疾症状 脓血粘液便、腹痛、 里急后重等 肠粘膜通透性增加 大量内毒素吸收
沙门菌属和志贺菌属检验
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试验管(每管0.5ml稀释血清)
对照管
1:20
1:40
1:80
1:160
1:320
1:640
生理盐水
O抗原
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
H抗原
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
PA抗原
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
PB抗原
0.5
0.5
5.肥达试验
(1)原理:用已知的伤寒沙门菌O、H抗原,甲、乙型副伤寒沙门菌的H抗原(PA、PB)与肠热症患者血清做定量试管凝集试验,以出现“2+”凝集的最高血清稀释度为效价,测定相应抗体含量,用以辅助诊断肠热症。
(2)试验方法:为单管稀释法。准备4排小试管,每排7支并标记,另取中号试管1支,加生理盐水3.8ml及被检血清O.2ml,混匀,即为1:20稀释,总量为4ml。然后取出2ml按每管0.5m1分别放人各排小试管中的第1支试管中。再于上述中号试管内加生理盐水2ml混匀,此种血清即为1:40稀释,吸取此稀释度血清2ml,按每管0.5m1分别加到各排小试管中的第2支试管中。以此类推连续稀释到各排小试管第6支试管为止,第7支小试管只加入0.5ml生理盐水做阴性对照。然后按表2-5操作。
结果判断、解释和报告:
①分离培养未见可疑菌落或经鉴定不符合志贺菌属鉴定依据者可报告“未分离到志贺菌属细菌”。
②经分离鉴定后符合鉴定依据者,可报告“分离出××志贺菌”,若进一步做多种生化反应及因子血清分型后,可报告:“分离出××志贺菌×型”。
(完整word版)志贺氏菌属的生物危害评估报告
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志贺氏菌属的生物危害评估报告一、细菌的传播与致病志贺菌属是主要的肠道病原菌之一,也是引起人类细菌性痢疾的病原体。
本属细菌分布于全世界,是炎症性痢疾的典型病原菌,很多地区5%~10%的腹泻性疾病是由该菌属所致。
弗氏志贺菌和宋内志贺菌比鲍氏志贺菌和毒力特别强的痢疾志贺菌分布更广。
美国犹他州所有临床实验室工作者志贺菌病的年发病率为0.7/1 000,而临床微生物学工作者的年发病率为 5.4/1 000。
在英国临床实验室,沙门菌病和志贺菌病的年发病率分别为0.137/1 000和0.322/1 000,大多数感染者为微生物学工作者。
感染者和恢复期带菌者的排泄物是传染源,经粪-口途径直接传播,经污染的食物或物体可间接传播。
苍蝇可作为机械性媒介,水源性传播不常见。
卫生条件差的拥挤人群中最易发生流行,流行区的幼儿志贺菌病特别常见,而成人得病较轻。
恢复期和亚临床带菌者是重要传染源,但真正的长期带菌者罕见。
感染很少或不诱导产生免疫性,因此同一菌种的再感染是可能的。
志贺菌可穿入低位肠段的粘膜,引起粘液分泌,充血,白细胞浸润,水肿,并常有表浅粘膜溃疡。
志贺菌感染相关的水泻由内毒素介导所致,因这种内毒素可引起肠道分泌增多。
由志贺菌感染所导致的症状包括:(1)急性细菌性痢疾经潜伏期1~4日,幼儿的起病突然,表现为发热,烦躁不安,嗜睡,厌食,恶心或呕吐,腹泻,腹痛和腹胀以及里急后重。
3日内大便中出现血液,脓液和粘液.大便次数可增加到≥20次/d,体重下降和失水严重。
若不治疗,患儿可在12日内死亡;若患儿存活,则在第2周急性症状消退.成人可表现为无发热的非血性,非粘液性腹泻,很少有或完全没有里急后重.但其最初的症状可为发作性腹绞痛,急于排便,起初排出成形大便并在排便后可缓解腹痛.以后反复发作,并且日趋严重和频繁.腹泻变得明显,系软便或含有粘液,脓及常有血液的水泻。
严重的里急后重可造成直肠脱垂和大便失禁。
成人患病常可自愈:轻者4~8日,重者3~6周。
第十三章志贺菌属(Shigella)
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根据生化反应和O抗原结构的差异,将志贺菌属分为4个群。
抵抗力 本属细菌对理化因素抵抗力较弱,对酸性环境也较敏感。 对多种抗生素易形成耐药性(主要由R质粒决定),在菌间传递。
抗原与分类
根据O抗原分类
菌 种 痢疾志贺菌 福氏志贺菌 鲍氏志贺菌 宋内志贺菌 群 A B C D 型 1~10 1~6,X,Y变种 1~18 1 亚型 2a
免疫性
免疫期短,也不稳固。
抗感染免疫主要依赖肠道局部免疫,包括肠道粘膜
细胞吞噬功能及slgA等。
微生物学检查
新鲜脓血便/肛拭
及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存
快速诊断
分离培养
SS平板(无色透明小菌落)
荧光菌球试验 协同凝集试验 双糖培养基(生化反应) 血清学反应(玻片凝集) 最后诊断
防治原则
福氏志贺菌 (S. flexneri)
鲍氏志贺菌 (S. boydii)
宋内志贺菌 (S. sonnei) 在我国菌痢以福氏和宋内志贺菌引起感染较为多见。
生物学性状
形态、染色、培养及生化反应 G-杆菌、无鞭毛、有些菌体周围有菌毛。 在S-S培养基上形成无色半透明光滑型菌落。 分解葡萄糖产酸不产气,大多数志贺菌不发酵乳糖。 抗原构造与分类 志贺菌属缺少H抗原,主要由O抗原和K抗原组成。
微生物学检查及时送检暂用30甘油缓冲盐水保存ss平板无色透明小菌落血清学反应玻片凝集最后诊断分离培养新鲜脓血便肛拭双糖培养基生化反应快速诊断荧光菌球试验协同凝集试验磺胺氯霉素氨苄青霉素痢特灵等均有疗效
第13章
志贺菌属 (Shigella)
志贺菌属是人类细菌性痢疾的病原菌。 本属细菌包括:
痢疾志贺菌 (S. dysenteriae ) 模式种
志贺菌
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(三) 免疫性
感染后可获得一定程度的免疫力,但免疫期 短,也不稳固。这可能与菌型多以及型别间缺乏 交叉免疫有关
志贺菌属的感染主要限于肠道,细菌很少入 血。所以其抗感染免疫主要依赖肠道粘膜局部 sIgA 形成等。 sIgA 能阻止志贺菌吸附,于病后 3d左右出现,但维持时间短
三、微生物学检查法
(一) 病原菌的分离和鉴定 1.标本 存活期短,应迅速送检培养。如不能立即 培养,可放于30%甘油缓冲盐水保存液中
2.毒素 (1) 内毒素 各群志贺菌都能形成强烈的内 毒素 内毒素作用机制: * 破坏肠粘膜上皮,造成粘膜下层炎症,并 有毛细血管血栓形成,以致坏死、脱落,形成 溃疡,出现粘液脓血便 * 使肠壁通透性增高,促进毒素吸收,引起 一系列毒血症的症状,如发热、神志障碍,甚 至中毒性休克 * 作用于肠壁植物神经,使肠蠕动失调并痉 挛,尤以直肠括约肌受累明显,因而发生腹痛 、腹泻、里急后重等症状
2.分离培养与鉴定 标本接种于肠道杆菌选择培养基或鉴别 培养基上,常用S-S培养基。 37℃培养 18-24h ,取可疑菌落进行生化反应和血清鉴定,以确 定菌群和菌型
(二) 快速诊断法 1.免疫染色法 将粪便与志贺菌抗血清混匀,在显微镜观 察有无凝集现象 2.免疫荧光菌球检查法 在含有荧光素标记的志贺菌属免疫血清的 液体培养基中接种标本,培育 4-8h 后发现带有 荧光的菌球为阳性
重组活菌苗由多个型别 (或种型) 的免疫原 组成,具有广谱保护作用 ,已SPA的葡萄球菌标记志贺菌属抗体 ,测定病人粪便中或增菌培养液中细菌及其可 溶性抗原
另外,还有乳胶颗粒凝集试验和PCR检测技 术等
四、防治原则 1 早期发现、早期隔离和早期彻底治疗病人 外,查出带菌者 2 切断传染途径,包括加强粪便管理、水源 管理及食品卫生监督等
志贺菌属-PPT课件
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生化反应
氧化酶试验(-) 分解葡萄糖、不分解乳糖,(个别菌株 迟分解乳糖或不分解乳糖) KIA:KA-- MIU:- +/- - IMViC:-/+ + - - 除A群外,均能发酵甘露醇
抗原结构
只有O、K抗原,无H抗原 K抗原可阻断O抗原与相应抗体的凝集 根据O抗原分4群和44型
志贺菌抗原分类
与EIEC的鉴别
生化反应鉴别试验 粘质酸盐产酸 醋酸盐利用 赖氨酸脱羧 EIEC + + + 志贺菌 - - -
与类志贺邻单胞菌的鉴别
鉴别试验 氧化酶 动力 半乳糖苷渗透酶 (ONPG) 类志贺菌 + + + 志贺菌 - - -
与动力不明显、H2S阴性沙门菌的鉴别
鉴别试验 沙门菌诊断血 清玻片凝集试 验
志贺菌鉴定
初步鉴定 ●挑取可疑菌落接种KIA、MIU培养基 ●若符合KIA:KA--;MIU:- +/- -, 再作志贺菌多价诊断血清玻片凝集试验 最后鉴定:全面生化反应和单价血清玻片凝集 试验 若出现生化反应符合,血清学不凝集现象,应 考虑K抗原的阻断作用,可将菌液加热 100℃15~30min后,重复凝集试验,仍不凝集 可考虑EIEC,需进行鉴别。
肠道杆菌
志贺菌属
志贺菌属
是引起人类细菌性痢疾的病原菌 包括四群 ,共44个血清型 A群--痢疾志贺菌 B群--福氏志贺菌 C群--鲍氏志贺菌 D群--宋内志贺菌
形态染色
革兰阴性杆菌,无芽孢、无荚膜、无鞭 毛,多数菌株有菌毛
志贺菌
培养特性
兼性厌氧、营养要求不高 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌 落菌落 SS平板--无色菌落 Mac平板--无色菌落 EMB平板--无色菌落 宋内志贺菌多呈扁平、R型菌落,个别菌 株可迟分解乳糖
菌种
志贺菌属微生物学检验
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志贺菌属微生物学检验1.1形态与染色:志贺菌为革兰阴性杆菌,有菌毛,无芽胞,无荚膜,无鞭毛。
1.2培养特性:志贺菌除宋内志贺菌个别菌株外,均不分解乳糖,故在肠道选择性培养基上形成乳糖不发酵、中等大小、无色半透明的光滑型菌落。
1.3生化反应:志贺菌发酵葡萄糖产酸不产气;除宋内志贺菌个别菌株可迟缓发酵乳糖外,其余均不发酵乳糖;志贺菌不分解尿素、不产H2S;IMViC试验结果为-/++--。
1.4抗原构造:志贺菌有O抗原,耐热,部分菌株有K抗原,能阻止O凝集,无H抗原。
O抗原分为型特异性(特异性较高)和群特异性(特异性较低)两类。
根据生化反应及O抗原的不同,可将志贺菌分为四个血清群;进一步按型特异性和群特异性O抗原,可将各群志贺菌分为40余种血清型及亚型。
我国以B群志贺菌感染最为常见,其次为D群。
表志贺菌的分类1.5抵抗力:志贺菌抵抗力较弱,加热至60℃保持10 min可杀死。
对酸和一般消毒剂敏感。
在粪便中,由于其他肠道菌产酸可使志贺菌在数小时内死亡,故在运送标本时应使用含有缓冲液的培养基。
1.6变异性:宋内志贺菌最易发生S-R变异,同时伴有生化特征、抗原构造及致病性的变异,而出现非典型菌株。
在菌痢恢复期或慢性菌痢患者中常可分离得到非典型菌株。
志贺菌属细菌对磺胺类药物、四环素、氨苄西林均表现出耐药性变异。
志贺菌的多重耐药已成为一个严重的医学问题。
2临床意义2.1致病物质侵袭力:志贺菌借助菌毛黏附于回肠末端和结肠黏膜上皮细胞,继而穿入上皮细胞内生长繁殖,引起炎症反应。
内毒素:志贺菌可产生毒性较强的内毒素,除引起内毒素血症外,还可破坏肠黏膜,形成炎症、溃疡、出血,临床表现为典型的脓血黏液便。
内毒素还可作用于肠壁自主神经系统,导致肠功能紊乱、肠蠕动失调、肠道平滑肌痉挛,尤以直肠括约肌最为明显,常出现腹痛、里急后重等症状。
外毒素:A群志贺菌能产生志贺毒素,又称Vero毒素。
具有神经毒性、细胞毒性、肠毒性,可引起中枢神经系统麻痹、上皮细胞损伤和水样腹泻。
志贺菌属双糖铁实验的原理
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志贺菌属双糖铁实验的原理
志贺菌属双糖铁实验是一种常用的微生物鉴定方法,用于检测志贺菌属细菌是否能够利用双糖(如蔗糖或乳糖)作为碳源,并产生硫化氢气体。
该实验基于以下原理:
1. 双糖的代谢:志贺菌属细菌具有双糖酶,能够分解双糖为单糖。
分解乳糖时,产生乳酸和酸性,导致胶质从紫色转变为黄色。
分解蔗糖时,产生酸性,导致胶质从紫色转变为橙红色。
2. 铁离子的反应:当菌株代谢双糖产生酸性时,胶质中的酸将铁盐(如硫酸亚铁)与硫化氢反应生成黑色铁硫化物沉淀。
没有菌株代谢双糖时,胶质中没有产生酸性,无法与铁离子反应,胶质保持紫色。
实验步骤如下:
1. 在含有硫酸亚铁钠和某种双糖的培养基上接种志贺菌属细菌。
2. 培养一段时间后,观察胶质颜色的变化。
如果胶质由紫色转变为黄色或橙红色,说明菌株能够分解双糖。
3. 在胶质上观察是否有黑色沉淀的形成。
如果有黑色沉淀形成,说明菌株代谢双糖产生了酸性和硫化氢。
根据菌株在双糖分解和铁反应两个方面的表现,可以初步鉴定志贺菌属细菌的种类。
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志贺菌属细菌是引起人类细菌性痢疾的主要肠道病原菌之一。
一、分类
志贺菌属可用特异性抗血清将其分为4个血清群(种):A群为痢疾志贺菌,B群为福氏志贺菌,C群为鲍特志贺菌,D群为宋内志贺菌。
1989年CDC分类系统将生化反应特性相近的A、B,C群归为一群,统称为志贺菌A、B、C血清群;而将生化反应特征与之相异,鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。
DNA G+C含量为49~53mol%。
二、临床意义
志贺菌属细菌的致病主要与细菌的侵袭力、内毒素和外毒素有关,志贺菌属细菌因菌毛的作用,细菌黏附于肠黏膜的表面,并侵入上皮细胞内生长繁殖,形成感染病灶,引起炎症反应。
本菌属各菌株均有强烈的内毒素,由于内毒素的释放可造成上皮细胞死亡及黏膜下发炎,并形成毛细血管血栓,导致坏死、脱落和溃疡,患者出现典型的脓血便;另一方面可引起全身中毒症状(内毒素血症),导致发热、意识障碍,甚至中毒性休克。
A群志贺菌1型和2型产生的志贺毒素,ST对Vero细胞有毒性作用也称为Vero毒素VT对小鼠有强烈的致死毒性,有VT1和VT2两种。
ST属VT1型。
志贺菌属细菌主要引起人类细菌性痢疾,简称菌痢,一年四季均可发病,以夏秋季节发病率最高,典型的急性菌痢表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便、里急后重,发热等症状。
小儿常可引起中毒性菌痢,患儿常无明显的消化道症状而表现为全身中毒症状,若抢救不及时,往往造成死亡。
四种志贺菌中,痢疾志贺菌引起的菌痢较为严重,其他志贺菌引起的感染则相对较轻,具有自限性且很少致死。
我国以福氏志贺菌和宋内志贺菌引起的菌痢最为多见。
多数菌痢为散发病例,可引起人与人之间的传播。
偶可因食用了被污染的水和食物而引起暴发流行。
三、生物学特性
为革兰阴性短小杆菌,菌体大小(1~3μm×(0.7~1.0)μm,无芽胞,无荚膜,无鞭毛,有菌毛。
培养特性为兼性厌氧,最适生长温度为35℃,最适pH为7.2~7.4。
营养要求不高,能在普通琼脂培养基上生长,且生长良好。
在肠道选择培养基上可形成乳糖不发酵、中等大小、无色透明或半透明菌落,宋内志贺菌常形成粗糙型菌落。
志贺茵属菌种有O抗原,无H抗原,部分菌种有K抗原。
O抗原是分类的依据,有群特异性和型特异性两种抗原,根据生化反应和O抗原的不同,将志贺菌属分为4个血清群(A、B、C、D)和40余个血清型。
O抗原耐热,加热100℃ 60分钟不被破坏。
K抗原存在时能干扰O抗原与相应抗血清的凝集作用。
加热100℃ 60分钟可消除K抗原对O抗原的干扰作用。
本属细菌对理化因素的抵抗力较其他肠杆菌科细菌为低。
在1%苯酚中15~30分钟或加热60℃ 10分钟即被杀死,对酸较敏感,在运送培养时须使用pH 7.0的磷酸盐甘油或转运培养基,确保检出率的提高。
四、微生物学检验
(一)检验程序
志贺菌属细菌检验程序同图9-1。
(二)标本采集
主要检验标本为粪便、肛拭等,志贺菌在有大肠埃希菌及其他细菌繁殖并且产酸的粪便标本中,往往数小时即死亡,所有标本应及时接种或采集黏液脓血便作床边接种,如不能及时接种,可置甘油保存液或卡.布运送培养基内送检。
健康体检者可用肛拭取样。
(三)分离培养和鉴定
1.分离培养
分离培养基可选用MAc和SS,亦可用对志贺菌分离效果较好的木糖-赖氨酸.去氧胆酸盐(XLD)培养基。
2.鉴定
(1)初步鉴定:取可疑菌落(MAC上无色不透明;SS上不透明或透明:EMB上无色或不透明的琥珀色;xLD上呈红色的菌落),经生化反应、血清学试验等进一步鉴定到属和种。
志贺菌的基本生化反应特征为:TSIA产酸,枸橼酸盐阴性,脲酶阴性,动力阴性,V-P试验阴性。
(2)最终鉴定:须作全面生化反应和血清学试验,各菌群(种)间的鉴定依据为痢疾志贺菌甘露醇阴性,宋内志贺菌ONPG和鸟氨酸脱羧酶均阳性。
偶尔出现生化鉴定为志贺菌但与抗志贺菌血清不凝集的现象,可制成菌悬液置100℃水浴加热15~30分钟并重复凝集试验,此种菌株有可能是(EIEC),需注意进行鉴别,各菌群的生化鉴别见表9-10。
志贺菌属与大肠埃希菌的鉴别:志贺菌属无动力,赖氢酸脱羧酶阴性,发酵糖产酸、一般不产气,分解黏多糖,在醋酸盐和枸橼酸盐琼脂上产碱,见表9-11。
志贺菌属与伤寒沙门菌鉴别:伤寒沙门菌在KIA上的特性与志贺菌相似,鉴别特点是伤寒沙门菌硫化氢和动力阳性,能与沙门菌因子血清凝集而不与志贺菌属因子血清凝集。
志贺菌属与类志贺邻单胞菌鉴别:可用动力和氧化酶试验加以鉴别,志贺菌属均为阴性,而类志贺邻单胞菌为阳性。
凡生化反应符合志贺菌属者均需作血清学鉴定,可先用志贺菌属4种多价血清(A 群1,2型、B群1~6型、C群1~6型及D群)做玻片凝集试验,凝集后进一步作定型鉴定。
①A群:痢疾志贺菌,甘露醇阴性,共有10个血清型(1~10),其0抗原从1~X共10种,均为独立的血清型,各型之间无共同抗原关系。
A群各菌型均有K 抗原(A1~A10)。
②B群:福氏志贺菌,有6个血清型和x、Y 2个变型。
每个菌型均有两种抗原,即型抗原与群抗原。
型抗原只存在于同型的菌株中。
除2a及6型外,均不具有K抗原。
6型菌株缺少共同的群抗原,故福氏多价血清中应包含6型因子血清,否则将会造成漏检。
③C群:鲍特志贺菌,共有15个血清群,均有型抗原(OI~XV),尚未发现亚型。
均含有K抗原(C1~C15)。
④D群:宋内志贺菌,仅有一个血清型,但有光滑型(S)和粗糙型(R)两种菌落。
R型菌落不能被S型血清所凝集,因此宋内志贺菌的诊断血清应同时含有S及R两种因子血清(I相和Ⅱ相)。
五、药敏试验的药物选择
CLSI M100-S24推荐,对于从粪便中分离的志贺菌,仅需常规测试和报告氨苄西林、一种氟喹诺酮类和磺胺甲嚼唑/甲氧苄啶,必要时可增加头孢曲松、头孢噻肟及头孢克肟常规试验并报告。
志贺菌对第一代和第二代头孢菌素、头霉素和氨基糖苷类抗菌药物体外可能有活性,但临床治疗无效,所以对该菌属细菌的药敏结果,第一代和第二代头孢菌属、头霉素和氨基糖苷类抗菌药物不需做药敏试验,或者不管体外药敏试验结果如何,均报告为耐药,参见表9-5。